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化學(xué)品毒性藻紅外測(cè)試的三指標(biāo)評(píng)價(jià)方法與流程

文檔序號(hào):12657210閱讀:346來源:國(guó)知局

本發(fā)明屬于化學(xué)品急性毒性檢測(cè)領(lǐng)域,尤其涉及一種化學(xué)品毒性藻紅外測(cè)試的三指標(biāo)評(píng)價(jià)方法。



背景技術(shù):

藻類細(xì)胞具有光合磷酸化和氧化磷酸化的兩套能量代謝系統(tǒng),毒物作用前后藻代謝能量會(huì)產(chǎn)生微量變化,這種微能量變化可被紅外測(cè)溫儀測(cè)試,對(duì)測(cè)試藻溫進(jìn)行處理便能分析藻對(duì)毒物的響應(yīng)。該技術(shù)具有快速、簡(jiǎn)便、價(jià)廉、可現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試等特點(diǎn),然而,該技術(shù)一直存在4個(gè)問題:一是未考慮紅外測(cè)溫儀測(cè)試的末位藻溫波動(dòng)性,每次每個(gè)測(cè)試杯只測(cè)1個(gè)藻溫,與波動(dòng)藻溫平均值的偏差較大;二是未考慮到兩個(gè)測(cè)試杯的藻溫之差伴隨整個(gè)測(cè)溫過程,在毒性測(cè)試藻響應(yīng)溫差時(shí)未減去;三是用加藥組和對(duì)照組只能得到1種藻溫差,不能藻溫差比較分析;四是只用了藻響應(yīng)溫差這一個(gè)指標(biāo)分析藻對(duì)毒物的響應(yīng),效果較差。這4個(gè)問題的存在,使藻紅外測(cè)試技術(shù)測(cè)試毒物毒性的性能較低。

目前,國(guó)內(nèi)外關(guān)于急性毒性的單細(xì)胞微生物測(cè)試法改進(jìn)的研究報(bào)道主要有發(fā)光細(xì)菌生物毒性測(cè)試方法的改進(jìn)、發(fā)光細(xì)菌毒性測(cè)試條件的優(yōu)化、發(fā)光細(xì)菌急性毒性測(cè)試方法的優(yōu)化、水質(zhì)急性毒性發(fā)光細(xì)菌測(cè)試法的改進(jìn)、對(duì)測(cè)試水質(zhì)發(fā)光細(xì)菌的菌種進(jìn)行改進(jìn)、Menz J等對(duì)發(fā)光細(xì)菌法進(jìn)行改進(jìn)。關(guān)于藻紅外測(cè)試研究有敏感藻的確定方法、重金屬急性毒性藻紅外測(cè)試、農(nóng)藥急性毒性藻紅外測(cè)試、有機(jī)毒害物急性毒性藻紅外測(cè)試、急性毒性藻紅外測(cè)試中聯(lián)合作用的評(píng)價(jià)方法、藻紅外測(cè)試多元有機(jī)毒物急性毒性的初步分析、急性毒性藻紅外測(cè)試中聯(lián)合作用評(píng)價(jià)法的重現(xiàn)性,有關(guān)化學(xué)品急性毒性藻紅外測(cè)試技術(shù)改進(jìn)方法的研究尚未見報(bào)道。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有藻紅外測(cè)試方法測(cè)試毒物毒性性能較低的問題,提供一種化學(xué)品毒性藻紅外測(cè)試的三指標(biāo)評(píng)價(jià)方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:

一種化學(xué)品毒性藻紅外測(cè)試的三指標(biāo)評(píng)價(jià)方法,包括以下步驟:

(1)藻響應(yīng)測(cè)試

選擇滇池銅綠微囊藻為供試藻,其藻密度≥3.16×109個(gè)/L;

藻溫測(cè)試過程:空白組3重復(fù),對(duì)照組3重復(fù),加藥組3重復(fù),在每個(gè)測(cè)試杯中分別加入5mL藻液,加完后測(cè)試每個(gè)測(cè)試杯的藻溫;

然后進(jìn)行以下加藥測(cè)試:①蒸餾水毒性測(cè)試時(shí),用滴液管分別滴加蒸餾水0.05mL于加藥組和對(duì)照組的測(cè)試杯中,待藻溫穩(wěn)定時(shí)測(cè)試每個(gè)測(cè)試杯的藻溫;②待測(cè)藥品的毒性測(cè)試時(shí),用滴液管滴加0.05mL待測(cè)藥液于加藥組的測(cè)試杯中,用滴液管滴加蒸餾水0.05mL于對(duì)照組的測(cè)試杯中,滴加完后測(cè)試每個(gè)測(cè)試杯的藻溫;

(2)數(shù)據(jù)分析

藻響應(yīng)溫差計(jì)算方法為:ΔT=∣ΔTj∣―∣ΔTd∣,ΔT>0

加藥組藻溫差計(jì)算方法為:ΔTj=(Tj-ti-Tj-t0)-(Tk-ti-Tk-t0)

對(duì)照組藻溫差計(jì)算方法為:ΔTd=(Td-ti-Td-t0)-(Tk-ti-Tk-t0)

式中:Tj-ti—加藥后加藥組的藻溫;Tj-t0—加藥前加藥組的藻溫;Tk-ti—加藥后空白組的藻溫;Tk-t0—加藥前空白組的藻溫;Td-ti—加水后對(duì)照組的藻溫;Td-t0—加水前對(duì)照組的藻溫;j—加藥組,滴加藥液;d—對(duì)照組,滴加蒸餾水;k—空白組,不滴加藥液或蒸餾水;ti—測(cè)溫遍數(shù),i=0,為加藥前的測(cè)溫;i=1,2…n,為加藥后第1,2…n遍測(cè)溫;

(3)三指標(biāo)法評(píng)價(jià)藻對(duì)藥液的響應(yīng)

當(dāng)藻溫差數(shù)據(jù)同時(shí)滿足下面三個(gè)指標(biāo)時(shí),表示藻對(duì)藥液有響應(yīng):

指標(biāo)①—最大藻溫差比較值,︱ΔTj-max︱>︱ΔTd-max︱;

指標(biāo)②—平均藻溫差比較值,∣Δ〒j∣>∣Δ〒d∣;

指標(biāo)③—藻響應(yīng)率(ψ),∣ΔTj∣>∣ΔTd∣的出現(xiàn)次數(shù)≥6;

其中:ΔTj-max—加藥組的最大藻溫差,ΔTd-max—對(duì)照組的最大藻溫差,Δ〒j—加藥組的平均藻溫差,Δ〒d—對(duì)照組的平均藻溫差。

作為優(yōu)選,步驟(1)中測(cè)藻溫時(shí),每次每個(gè)測(cè)試杯連測(cè)3個(gè)藻溫,3個(gè)藻溫的平均值即為測(cè)試杯的藻溫。

作為優(yōu)選,步驟(1)中加藥前測(cè)溫1遍,加藥后測(cè)溫10遍,其中,三個(gè)重復(fù)測(cè)溫完成即為測(cè)溫1遍,前一遍測(cè)溫完成后,按相同的測(cè)溫順序進(jìn)行下一遍測(cè)溫。

作為優(yōu)選,三指標(biāo)法評(píng)價(jià)藻響應(yīng)重金屬的靈敏度為0.001~0.1mg/L。

作為優(yōu)選,所述待測(cè)藥品為重金屬、農(nóng)藥、有機(jī)藥品、抗生素。

相比現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明具有如下有益效果:

1、本發(fā)明采用三指標(biāo)法(即最大藻溫差比較值、平均藻溫差比較值、藻響應(yīng)率的分析法)分析藻對(duì)毒物的響應(yīng),降低了分析結(jié)果的偶然性,能夠控制假結(jié)果出現(xiàn)率為20%,由其評(píng)價(jià)藻響應(yīng)重金屬的靈敏度為0.001~0.1mg/L,由其得到的測(cè)試結(jié)果的平均重現(xiàn)率為86.8~100%、重現(xiàn)性出現(xiàn)率為100%,具有準(zhǔn)確性高,重復(fù)性好,靈敏度高的特點(diǎn);

2、本發(fā)明每次每個(gè)測(cè)試杯連測(cè)3個(gè)藻溫,用其平均值避免了儀器測(cè)試藻溫的波動(dòng)性造成的偏差,用空白組、對(duì)照組、加藥組三個(gè)測(cè)試組,得到兩種藻溫差,避免了現(xiàn)有測(cè)試技術(shù)只能得到一種藻溫差,不能進(jìn)行藻溫差比較分析的問題。

附圖說明

圖1為實(shí)施例1測(cè)試杯的布局圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式,對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步說明。

本發(fā)明所采用的原料和設(shè)備若非特指,均可從市場(chǎng)購(gòu)得或是本領(lǐng)域常用的,實(shí)施例中的方法,如無特別說明,均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。

實(shí)施例1

本實(shí)施例以重金屬為例對(duì)藻紅外測(cè)試的三指標(biāo)評(píng)價(jià)方法進(jìn)行詳細(xì)說明。

1、試驗(yàn)材料

藻種:滇池銅綠微囊藻(Microcystis aeruginosa in Dianchi Lake in china)及其培養(yǎng)基配方由中國(guó)科學(xué)院武漢水生生物研究所提供。該藻具有春化作用,為滇池水華藻種,生長(zhǎng)快、飽和密度高,可保證實(shí)驗(yàn)所需的藻密度和藻用量。

藥品:ZnCl2,Pb(NO3)3,CuSO4,F(xiàn)eCl3·6H2O,MnSO4.H2O,CrCl3·6H2O,HgSO4,AlCl3·6H2O,Cd(NO3)3·4H2O。

上述藥液的配制要求為:取1滴藥液(約0.05mL)加入5mL藻液中,使得加入藻液中的重金屬濃度等于《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB5749-2006對(duì)應(yīng)毒理指標(biāo)重金屬濃度(見各重金屬毒性分析表)。

其中,藻液中重金屬濃度計(jì)算方法為:

N=M÷(1000×D)×(重金屬原子量÷藥品分子量)×1000ml÷V

式中:N—藻液中藥品濃度,M—藥液濃度,D—移液管滴定1ml藥液的滴數(shù),V—測(cè)試杯中藻液毫升數(shù)。

儀器:紅外測(cè)溫儀,型號(hào)ST60,靈敏度0.1℃。

測(cè)試杯:直徑4cm、高3cm、厚0.1~0.2cm的透明塑料容器。

2、試驗(yàn)方法

2.1、藻溫測(cè)試方法

藻溫測(cè)試在室內(nèi)條件下進(jìn)行,采用散射日光或燈光采光。實(shí)驗(yàn)的藻液用量為5ml/杯,藻密度≥3.16×109個(gè)/L;測(cè)試杯加藻液前,藻液充分搖均;當(dāng)培養(yǎng)時(shí)藻增長(zhǎng)率≤0時(shí),藻液不再用于實(shí)驗(yàn);滴加藥液前,藥液充分搖勻。

本實(shí)施例測(cè)試杯布局如圖1所示,在每個(gè)測(cè)試杯中加入5mL藻液,加完后進(jìn)行加藥前測(cè)溫記錄,每次每杯連測(cè)3個(gè)藻溫。然后,滴加藥液,蒸餾水毒性測(cè)試時(shí),用滴液管分別滴加蒸餾水1滴(約0.05ml)于加藥組、對(duì)照組的測(cè)試杯中,重金屬毒性測(cè)試時(shí),用滴液管滴加藥液1滴與加藥組的測(cè)試杯中,用滴液管滴加蒸餾水1滴于對(duì)照組的測(cè)試杯中,立即進(jìn)行加藥后的測(cè)溫記錄,每次每杯連測(cè)3個(gè)藻溫。測(cè)溫時(shí),紅外測(cè)溫儀頭部距離藻液正上方10~15cm,指示紅色光點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)藻液面中心時(shí)測(cè)溫。每杯每次連測(cè)3個(gè)藻溫,用于計(jì)算平均值。測(cè)溫順序:按如圖1所示的布局從上到下,從左到右。測(cè)溫遍數(shù):三個(gè)重復(fù)測(cè)溫完時(shí)即為測(cè)溫1遍。藥液滴入藻液后到藻產(chǎn)生響應(yīng)有一個(gè)過程,藻對(duì)不同藥液的響應(yīng)過程不同,加藥前測(cè)溫1遍,加藥后測(cè)溫10遍。前一遍測(cè)溫完后接著下一遍測(cè)溫。

本實(shí)施例中藻溫的計(jì)算公式為:

T=(Tn1+Tn2+Tn3)÷3 (1)

Tni=(Tb1+Tb2+Tb3)÷3 (2)

Tbi=(T1+T2+T3)÷3 (3)

(1)、(2)、(3)中:T—每遍測(cè)溫的處理藻溫;Tn1、Tn2、Tn3—分別為重復(fù)一、二、三的平均藻溫;Tni—重復(fù)組的平均藻溫,i=1,2,3;Tbi—每個(gè)測(cè)試杯的平均藻溫,i=1,2,3;Tb1、Tb2、Tb3—分別為空白、對(duì)照、加藥的測(cè)試杯的平均藻溫;Ti—每個(gè)測(cè)試杯連續(xù)測(cè)試的藻溫(3個(gè)藻溫),i=1,2,3。

2.2、藻溫差計(jì)算方法

藻響應(yīng)溫差計(jì)算:藻響應(yīng)溫差是指加藥組藻溫差的絕對(duì)值與對(duì)照組藻溫差的絕對(duì)值的差值,該差值大于零,其計(jì)算方法為:

ΔT=∣ΔTj∣―∣ΔTd∣,ΔT>0

加藥組藻溫差計(jì)算:ΔTj=(Tj-ti-Tj-t0)-(Tk-ti-Tk-t0)

對(duì)照組藻溫差計(jì)算:ΔTd=(Td-ti-Td-t0)-(Tk-ti-Tk-t0)

式中:Tj-ti—加藥后加藥組的藻溫;Tj-t0—加藥前加藥組的藻溫;Tk-ti—加藥后空白組的藻溫;Tk-t0—加藥前空白組的藻溫;Td-ti—加水后對(duì)照組的藻溫;Td-t0—加水前對(duì)照組的藻溫;j—加藥組,滴加藥液;d—對(duì)照組,滴加蒸餾水;k—空白組,不滴加藥液或蒸餾水;ti—測(cè)溫遍數(shù),i=0,為加藥前的測(cè)溫;i=1,2…n,為加藥后第1,2…n遍測(cè)溫。

3、藻對(duì)藥液響應(yīng)的三指標(biāo)評(píng)價(jià)法

當(dāng)藻溫差數(shù)據(jù)同時(shí)滿足下面三個(gè)指標(biāo)時(shí),表示藻對(duì)藥液有響應(yīng):

指標(biāo)①—最大藻溫差比較值,︱ΔTj-max︱>︱ΔTd-max︱;

指標(biāo)②—平均藻溫差比較值,∣Δ〒j∣>∣Δ〒d∣;

指標(biāo)③—藻響應(yīng)率(ψ),∣ΔTj∣>∣ΔTd∣的出現(xiàn)次數(shù)≥6;

其中:ΔTj-max—加藥組的最大藻溫差,ΔTd-max—對(duì)照組的最大藻溫差,Δ〒j—加藥組的平均藻溫差,Δ〒d—對(duì)照組的平均藻溫差。

4、結(jié)果與討論

分析三指標(biāo)法的評(píng)價(jià)效果是利用水平比較法和垂直比較分析法,水平比較分析法是指不同指標(biāo)法評(píng)價(jià)同一種藥液濃度的藻溫差的比較方法,用來分析控制假結(jié)果出現(xiàn)率,如蒸餾水毒性測(cè)試實(shí)驗(yàn)。垂直比較分析法是指不同指標(biāo)法評(píng)價(jià)不同濃度藥液的藻溫差的比較方法,用來分析不同評(píng)價(jià)法對(duì)藻響應(yīng)藥液的靈敏度,如重金屬毒性測(cè)試實(shí)驗(yàn)。

評(píng)價(jià)法的控制假結(jié)果出現(xiàn)率與靈敏度的關(guān)系是正相關(guān)關(guān)系,即控制假結(jié)果出現(xiàn)率的效果好,則評(píng)價(jià)的靈敏度就高(見4.2.1c)。這是控制假結(jié)果出現(xiàn)率是檢驗(yàn)技術(shù)可行性的唯一標(biāo)準(zhǔn)的原因,也是控制測(cè)試結(jié)果質(zhì)量的原因。

4.1、蒸餾水毒性測(cè)試試驗(yàn)

檢驗(yàn)的理論:在10次蒸餾水毒性測(cè)試中,10個(gè)測(cè)試結(jié)果為藻無響應(yīng),可能三指標(biāo)法門檻過高,實(shí)測(cè)時(shí)一些有毒藥液毒性可能不能被測(cè)出;藻有響應(yīng)的測(cè)試結(jié)果占多數(shù),可能三指標(biāo)法門檻過低,實(shí)測(cè)時(shí)一些無毒藥液可能被測(cè)出有毒性;藻無響應(yīng)的測(cè)試結(jié)果占大多數(shù),表明藻有響應(yīng)(假結(jié)果)出現(xiàn)率得到控制,這樣的三指標(biāo)法才能評(píng)價(jià)藻溫差。因此,能否控制假結(jié)果出現(xiàn)率,是檢驗(yàn)三指標(biāo)法的唯一標(biāo)準(zhǔn)。

4.1.1、不同藻響應(yīng)率對(duì)三指標(biāo)法影響的分析結(jié)果

由表1可知,連測(cè)3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法的藻響應(yīng)率為60%、50%、70%、80%時(shí),藻無響應(yīng)結(jié)果(真結(jié)果)出現(xiàn)率分別是80%、60%、80%、100%,當(dāng)藻響應(yīng)率達(dá)到60%時(shí),藻無響應(yīng)結(jié)果(真結(jié)果)的出現(xiàn)率達(dá)到80%,藻無響應(yīng)結(jié)果(真結(jié)果)的出現(xiàn)率已足夠高,因此三指標(biāo)法中設(shè)計(jì)的藻響應(yīng)率60%是合理的。

表1三指標(biāo)法中藻響應(yīng)率與測(cè)試分析結(jié)果

4.1.2、蒸餾水毒性的不同指標(biāo)分析結(jié)果

由表2可知,連測(cè)3個(gè)藻溫的不同指標(biāo)法評(píng)價(jià)的真結(jié)果重現(xiàn)率:三指標(biāo)法為80%、①指標(biāo)法為30%、②指標(biāo)法為20%、①②指標(biāo)法為50%,表明三指標(biāo)法中真結(jié)果的出現(xiàn)率為80%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于單指標(biāo)法,可把假結(jié)果出現(xiàn)率控制在20%,能夠有效的控制假結(jié)果出現(xiàn)率。

表2不同指標(biāo)法的評(píng)價(jià)結(jié)果

4.1.3、蒸餾水毒性的不同藻溫?cái)?shù)的三指標(biāo)法分析結(jié)果

由表3可知,連測(cè)3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法評(píng)價(jià)的真結(jié)果出現(xiàn)率為80%,即假結(jié)果出現(xiàn)率為20%,測(cè)試1個(gè)藻溫的三指標(biāo)法評(píng)價(jià)的真結(jié)果出現(xiàn)率為50%,即假結(jié)果出現(xiàn)率為50%,表明連測(cè)3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法真結(jié)果出現(xiàn)率較高,相對(duì)于測(cè)試1次藻溫的三指標(biāo)法,能夠有效控制假結(jié)果出現(xiàn)率。

表3 兩種藻溫?cái)?shù)的三指標(biāo)法評(píng)價(jià)結(jié)果

由上述蒸餾水毒性測(cè)試試驗(yàn),分析表1、2和3可知,每次每杯測(cè)試3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法藻無響應(yīng)結(jié)果(真結(jié)果)的出現(xiàn)率可達(dá)到80%,可有效控制“假結(jié)果”的出現(xiàn)率。

4.2、重金屬毒性測(cè)試試驗(yàn)

4.2.1、不同指標(biāo)法評(píng)價(jià)的分析結(jié)果

a、毒物的生物毒性與總濃度:由表4可知,毒理指標(biāo)濃度的5種重金屬單獨(dú)存在時(shí),藻對(duì)其無響應(yīng),而它們以4種不同形式共存時(shí),藻對(duì)其產(chǎn)生響應(yīng),這主要是共存的濃度高于非共存的濃度,這符合混合毒物的生物毒性與總濃度正相關(guān)的情況。

b、三指標(biāo)法評(píng)價(jià)共存重金屬毒性:由表4可知,不同指標(biāo)法的評(píng)價(jià)效果用平均重現(xiàn)率(%)/重現(xiàn)性出現(xiàn)率(%)分析的結(jié)果是,測(cè)試3個(gè)藻溫的所有評(píng)價(jià)法都為100/100,而測(cè)試1個(gè)藻溫的三指標(biāo)法為67/100,表明在共存重金屬濃度(實(shí)驗(yàn)的高濃度0.066~0.156mg/L)時(shí),所有評(píng)價(jià)方法都可藻對(duì)藥液評(píng)價(jià)的響應(yīng),但測(cè)試3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法優(yōu)于測(cè)試1個(gè)藻溫的三指標(biāo)法。

c、不同指標(biāo)法評(píng)價(jià)共存重金屬毒性:由表4可知,不同指標(biāo)法的評(píng)價(jià)效果用平均重現(xiàn)率(%)/重現(xiàn)性出現(xiàn)率(%)分析的結(jié)果是,測(cè)試3個(gè)藻溫中的三指標(biāo)法為100/100、雙指標(biāo)法為0/13.4、單指標(biāo)法為0/0和0/13.4,從中可以看出,雙指標(biāo)法和單指標(biāo)法評(píng)價(jià)得到的無響應(yīng)結(jié)果沒有重現(xiàn)性,因?yàn)樗鼈儾荒芸刂萍俳Y(jié)果出現(xiàn)率(見4.1.2),假結(jié)果大量出現(xiàn);相反,三指標(biāo)法能夠控制假結(jié)果出現(xiàn)率;分析說明,控制假結(jié)果出現(xiàn)率對(duì)技術(shù)非常重要。平均重現(xiàn)率(%)/重現(xiàn)性出現(xiàn)率(%)比較是:測(cè)試3個(gè)藻溫中的三指標(biāo)法為100/100,測(cè)試1個(gè)藻溫的三指標(biāo)法為81.2/100,說明后者評(píng)價(jià)結(jié)果的重現(xiàn)性較低,是因?yàn)楹笳呖刂萍俳Y(jié)果重現(xiàn)率低于前者(見4.1.3),導(dǎo)致評(píng)價(jià)效果不如前者。分析可知,在單一重金屬濃度低濃度(實(shí)驗(yàn)的低濃度0.001~0.1mg/L)時(shí),測(cè)試3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法評(píng)價(jià)效果最好。

由上述分析可知,測(cè)試3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法能夠評(píng)價(jià)藻對(duì)實(shí)驗(yàn)的高低濃度藥液的響應(yīng),即能夠評(píng)價(jià)的藥液濃度范圍更大,評(píng)價(jià)的靈敏度高,可達(dá)0.001~0.1mg/L。

表4單一、共存重金屬毒性的不同指標(biāo)法評(píng)價(jià)結(jié)果

注:重現(xiàn)率=相同結(jié)果數(shù)÷總結(jié)果數(shù)×100%,重現(xiàn)性出現(xiàn)率=重復(fù)性結(jié)果數(shù)÷總結(jié)果數(shù)×100%。

4.2.2、共存重金屬毒性三指標(biāo)法評(píng)價(jià)的分析結(jié)果

a、評(píng)價(jià)指標(biāo)的分析:從測(cè)試的3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法評(píng)價(jià)中評(píng)價(jià)結(jié)果與各指標(biāo)的關(guān)系(表5-1)可知,測(cè)試數(shù)據(jù)在指標(biāo)①、指標(biāo)②的分析值大于0,而指標(biāo)③的分析值大于或等于60%,表明藻對(duì)共存重金屬的響應(yīng)通過了三指標(biāo)的評(píng)價(jià),但測(cè)試結(jié)果有待重現(xiàn)性分析。

表5-1 共存重金屬毒性三指標(biāo)法的評(píng)價(jià)結(jié)果

b、評(píng)價(jià)結(jié)果的重現(xiàn)性分析:由表5-2可知,藻對(duì)5種不同共存重金屬的有響應(yīng)結(jié)果“+”都有重復(fù)性,表明有重現(xiàn)性的測(cè)試結(jié)果可靠。由表5-2還可知,共存重金屬數(shù)(元數(shù))的測(cè)試結(jié)果重現(xiàn)率是:2元、3元共存的為67%,低于兩個(gè)4元共存、一個(gè)5元共存的100%,平均為86.8%,表明測(cè)試3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法的靈敏度好。

表5-2 三指標(biāo)法評(píng)價(jià)結(jié)果的重現(xiàn)性分析

4.3、重現(xiàn)性試驗(yàn)分析

測(cè)試結(jié)果的可靠性需要重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)分析,當(dāng)3次實(shí)驗(yàn)有2次測(cè)試結(jié)果相同,測(cè)試結(jié)果具有重現(xiàn)性,有重現(xiàn)性的測(cè)試結(jié)果才是可靠的測(cè)試結(jié)果。在重金屬毒性測(cè)試實(shí)驗(yàn)結(jié)果中,測(cè)試3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法評(píng)價(jià)不同藻溫差的測(cè)試結(jié)果都有重現(xiàn)性,其平均重現(xiàn)率為86.8%(表5-2)、100%(表4),重現(xiàn)性出現(xiàn)率為100%(表4,表5-2),表明改進(jìn)后的技術(shù)具有很好的穩(wěn)定性、具有重現(xiàn)性的測(cè)試結(jié)果可靠。在測(cè)試急性毒性時(shí),重現(xiàn)性分析不可或缺。

4.4、總結(jié)

測(cè)試3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法能夠很好地控制假結(jié)果出現(xiàn)率,表明該三指標(biāo)法能夠控制測(cè)試結(jié)果的質(zhì)量。為使測(cè)試結(jié)果可靠,重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)也是測(cè)試結(jié)果的重要質(zhì)量保證。測(cè)試3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法能夠控制假結(jié)果出現(xiàn)率為20%,由其評(píng)價(jià)藻響應(yīng)重金屬的靈敏度為0.001~0.1mg/L,由其得到的測(cè)試結(jié)果的平均重現(xiàn)率為86.8~100%、重現(xiàn)性出現(xiàn)率為100%。由此可知,測(cè)試3個(gè)藻溫的三指標(biāo)法具有準(zhǔn)確性高,重復(fù)性好,靈敏度高的特點(diǎn)。

最后說明的是,以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制,盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說明,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解,可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換,而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍,其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。

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