本實(shí)用新型涉及船舶壓載水檢測(cè)領(lǐng)域,具體說是涉及一種船舶壓載水實(shí)時(shí)檢測(cè)及排放監(jiān)控裝置。
背景技術(shù):
為了保證船舶安全航行,通常使用海水作為壓載物,稱為壓載水。壓載水中包含大量的藻類等可生存生物和大腸桿菌、腸球菌等微生物。在運(yùn)到目的港口后,需把壓載水排放后裝貨。這樣就會(huì)將其他海域的生物隨著壓載水排放進(jìn)入新的海域,造成生物入侵。船舶壓載水已經(jīng)被全球環(huán)境基金組織確定為世界海洋的四大威脅之一。為應(yīng)對(duì)由壓載水排放所引起的外來(lái)生物入侵性問題,在2004年2月9日~13日外交大會(huì)上,國(guó)際海事組織通過了《船舶壓載水及沉積物控制和管理國(guó)際公約》,以下簡(jiǎn)稱《壓載水公約》)。其中規(guī)定"通過控制、管理船舶壓載水及沉積物達(dá)到防止、減少并最終消除有害水生生物及病原體的傳播"
目前處理壓載水的常用方法主要有置換法、機(jī)械法、物理法、化學(xué)法、生物法、復(fù)合法,各個(gè)國(guó)家都希望能夠盡早的找到處理壓載水的有效方法。壓載水置換方法在可排海域中用大量新鮮海水稀釋或替換艙內(nèi)的貯存壓載水,以長(zhǎng)時(shí)間循環(huán)實(shí)現(xiàn)壓載水的稀釋置換;但是此方法無(wú)法徹底更換壓載水,置換海水用量很大;機(jī)械法主要利用壓載水和海生物兩者物理特性的差異進(jìn)行有效的分離,存在的缺點(diǎn)是對(duì)個(gè)體較小的微生物和病毒等生物體處理效果不顯著;物理法主要有紫外光照、超聲處理等,紫外線處理裝置對(duì)微小的海洋細(xì)菌、微生物殺滅效果非常有效,但是對(duì)于滅活較大尺寸的有害浮游動(dòng)植物效果并不理想,并且海洋浮游植物存在光修復(fù)的能力,容易重新繁殖;化學(xué)方法主要是利用化學(xué)殺菌劑、消毒劑及強(qiáng)氧化性物質(zhì)滅活壓載水中的水生生物。主要方法是電解法和臭氧法。同時(shí),電解法和臭氧法也存在一定的缺點(diǎn),氯氣產(chǎn)生的有機(jī)面素化合物具有致癌性,二氧化氯和臭氧又易分解,并且電解海水產(chǎn)生的化學(xué)物質(zhì)容易腐蝕船艙和設(shè)備;生物方法處理壓載水,主要的原理是利用生物間的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,即通過引入與原有壓載水?dāng)y帶的浮游生物具有競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系的新生物物種,或是利用現(xiàn)代科學(xué)的生物技術(shù)來(lái)改變生物體的基因,達(dá)到抑制外來(lái)生物入侵。但加入新物種,及基因技術(shù)的應(yīng)用能否帶來(lái)不利的影響因素,尚不清楚;復(fù)合法是指消除各種技術(shù)的局限性并利用不同方法優(yōu)勢(shì)的協(xié)同作用處理壓載水。
壓載水處理結(jié)果是否符合公約要求,需要通過檢測(cè)生物存活量來(lái)衡量。傳統(tǒng)的生物檢測(cè)方法是培養(yǎng)計(jì)數(shù)法,該方法廣泛應(yīng)用在水生生物數(shù)量、種群研究等方面,但是需要通過肉眼判斷海洋生物的存活狀態(tài),耗時(shí)較長(zhǎng)。隨著各種生物檢測(cè)技術(shù)不斷地發(fā)展,出現(xiàn)了一些新型的檢測(cè)方法。流式細(xì)胞術(shù)法可以完成對(duì)單細(xì)胞或生物粒子在功能水平上的定量分析及分選的檢測(cè),它可以高速分析上萬(wàn)個(gè)細(xì)胞,但是所需要的檢測(cè)劑量很少、價(jià)格昂貴、且設(shè)備龐大,并不適合壓載水的實(shí)際檢測(cè);三磷酸腺苷生物發(fā)光技術(shù)原理是,在三磷酸腺苷作用下,熒光霉素氧化生成的D-熒光素,通過測(cè)定熒光強(qiáng)度推算出樣品中活體數(shù),但是海水中成分較復(fù)雜,對(duì)發(fā)光檢測(cè)會(huì)造成一定的影響,且檢測(cè)時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng);溶液電阻法是使微生物通過電檢測(cè)微孔道,造成檢測(cè)孔道中電阻變化,檢測(cè)電阻抗的變化脈沖即可達(dá)到生物技術(shù)目的;葉綠素?zé)晒夥ㄊ峭ㄟ^測(cè)定光激發(fā)的葉綠素所產(chǎn)生的熒光判斷細(xì)胞活性,可作為探針研究光合作用的機(jī)理。近年來(lái)隨著葉綠素?zé)晒饫碚摵蜏y(cè)定技術(shù)的完善和進(jìn)步,也推動(dòng)了通過葉綠素?zé)晒夥▽?duì)藻細(xì)胞的研究。但是目前的藻類、菌類檢測(cè)技術(shù)還沒有應(yīng)用到壓載水檢測(cè)和排放控制中。
隨著芬蘭于2016年9月8日簽約加入壓載水公約,使該公約的簽約國(guó)增加至52個(gè)國(guó)家,商船總噸位已達(dá)到世界商船總噸位的35.1441%,壓載水公約生效條件已經(jīng)滿足,所以壓載水公約將于2017年9月8日生效。截至2016年9月,中國(guó)政府尚未加入《壓載水公約》。我國(guó)既是港口大國(guó),又是船旗大國(guó),隨著壓載水生效日期的確定,開發(fā)出壓載水準(zhǔn)確檢測(cè)和排放控制的裝置迫在眉睫。目前國(guó)內(nèi)外還沒有出現(xiàn)基于微流控技術(shù)的壓載水監(jiān)控裝置,本實(shí)驗(yàn)室基于微流控平臺(tái),在壓載水檢測(cè)領(lǐng)域進(jìn)行了多年的探索。
微流控技術(shù)可以通過一張芯片實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速自動(dòng)檢測(cè)壓載水中的藻類,使其在壓載水檢測(cè)領(lǐng)域成為熱點(diǎn)。微流控芯片技術(shù)可以把成千上萬(wàn)甚至幾十萬(wàn)個(gè)生命信息集成到一個(gè)很小的芯片上,在微米級(jí)的結(jié)構(gòu)通道中完成生物化學(xué)處理和結(jié)合,該技術(shù)可以認(rèn)為是集成于一張芯片上的小型生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
鑒于已有技術(shù)存在的缺陷,本實(shí)用新型的目的是要提供一種壓載水實(shí)時(shí)排放監(jiān)控裝置,該裝置基于熒光法和感應(yīng)法檢測(cè)所得壓載水中藻類、菌類濃度信息,并能夠基于所獲得的檢測(cè)信息控制壓載水的排放。
為實(shí)現(xiàn)上述目的,本實(shí)用新型的技術(shù)方案是:
一種壓載水實(shí)時(shí)排放監(jiān)控裝置,其特征在于,該裝置包括:
與壓載水排出管路相連通的取樣單元,該取樣單元能夠自壓載水排出管路中提取適量樣品并輸送至檢測(cè)單元;
與所述取樣單元相連接的檢測(cè)單元,該檢測(cè)單元能夠?qū)悠愤M(jìn)行取樣檢測(cè)并輸出對(duì)應(yīng)的檢測(cè)信號(hào),且所述檢測(cè)單元包括用于藻類檢測(cè)的熒光檢測(cè)傳感器和用于菌類檢測(cè)的感應(yīng)式傳感器;
與所述檢測(cè)單元相連接的分析單元,該分析單元能夠?qū)邮盏降臋z測(cè)信號(hào)進(jìn)行信號(hào)處理并輸出相應(yīng)的控制命令;
受控于所述分析單元的執(zhí)行機(jī)構(gòu),該執(zhí)行機(jī)構(gòu)依據(jù)接收到的控制命令進(jìn)行動(dòng)作,以控制壓載水排出管路中壓載水的流向;
與所述分析單元相連接的存儲(chǔ)顯示單元,該存儲(chǔ)顯示單元能夠存儲(chǔ)樣品檢測(cè)數(shù)據(jù)并進(jìn)行顯示。
進(jìn)一步的,作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案
所述取樣單元包括:與壓載水排出管路相連通的旁通管路,且所述旁通管路上設(shè)置有能夠?qū)α魅氲臉悠愤M(jìn)行過濾的濾器;
以及與所述旁通管路相連通的微泵,該微泵能夠?qū)⑦^濾后的樣品輸送至檢測(cè)單元。
進(jìn)一步的,作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案
所述濾器的濾孔孔徑小于所述檢測(cè)單元第一樣品流道及第二樣品流道的橫向尺寸中的最小尺寸值,且內(nèi)部安裝有壓差傳感器
進(jìn)一步的,作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案
所述熒光檢測(cè)傳感器包括暗室,所述暗室內(nèi)自上至下依次設(shè)置熒光檢測(cè)光源、第一小孔光闌、第一濾光片、熒光檢測(cè)微流控芯片、第二濾光片、第二小孔光闌以及光電接收器且所述熒光檢測(cè)微流控芯片上凹刻有供樣品流通的第一樣品流道。
進(jìn)一步的,作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案
所述菌類檢測(cè)感應(yīng)式傳感器包括微流控芯片,且所述微流控芯片具有:
底片、被設(shè)置于所述底片上的微流控基片以及被設(shè)置于所述底片與微流控基片之間的檢測(cè)電極;
所述微流控基片包括凹刻有第二樣品流道的PDMS芯片層、被設(shè)置于檢測(cè)電極上方的PDMS涂層以及被設(shè)置于所述檢測(cè)電極與樣品通道重疊區(qū)域所對(duì)應(yīng)的PDMS涂層上、用于捕獲樣品中的菌類抗原的抗體吸附層。
進(jìn)一步的,作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案
所述抗體吸附層為與待檢測(cè)抗原類型相對(duì)應(yīng)的抗體溶液在PDMS涂層表面經(jīng)自然風(fēng)干所形成的吸附層。
進(jìn)一步的,作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案
所述檢測(cè)電極為檢測(cè)銅電極。
進(jìn)一步的,作為本實(shí)用新型的優(yōu)選方案
所述執(zhí)行機(jī)構(gòu)包括設(shè)置于壓載水排出管路上的三通閥。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本實(shí)用新型的有益效果:
1.本實(shí)用新型能夠?qū)崿F(xiàn)船舶壓載水藻類和菌類濃度的實(shí)時(shí)、快速、準(zhǔn)確檢測(cè);
2.本實(shí)用新型通過檢測(cè)壓載水中藻類和菌類濃度信息,進(jìn)而控制壓載水流向,使壓載水的檢測(cè)和排放控制有效結(jié)合起來(lái),可改變現(xiàn)有技術(shù)中船舶壓載水檢測(cè)和排放控制分離的現(xiàn)狀;
3.本實(shí)用新型為船舶管理人員提供了詳細(xì)的壓載水實(shí)時(shí)檢測(cè)信息,有利于更好地實(shí)現(xiàn)壓載水的排放管理。
附圖說明
圖1為本實(shí)用新型所述壓載水實(shí)時(shí)排放監(jiān)控系統(tǒng)圖;
圖2為取樣單元結(jié)構(gòu)原理圖;
圖3為熒光檢測(cè)傳感器結(jié)構(gòu)圖;
圖4為菌類檢測(cè)的感應(yīng)式傳感器縱向截面圖;
圖5為菌類檢測(cè)的感應(yīng)式傳感器結(jié)構(gòu)圖;
圖6為大腸桿菌檢測(cè)的單個(gè)脈沖信號(hào)實(shí)例圖;
圖7為不同濃度大腸桿菌檢測(cè)信號(hào)和濃度間的關(guān)系圖;
圖中:1、壓載水總管,2、旁通管路,3、濾器,4、樣品流道,41、第一樣品流道,42、第二樣品流道,5、檢測(cè)單元,6、微泵,7、熒光檢測(cè)光源,8、第一小孔光闌,9第一濾光片,10、熒光檢測(cè)微流控芯片,11、第二濾光,12、第二小孔光闌,13、光電接收器,14、暗室,15、菌類檢測(cè)微流控芯,16、檢測(cè)銅電極,17、底片,18、抗體吸附層,19、PDMS涂層,20、PDMS芯片層。
具體實(shí)施方式
為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白,以下結(jié)合附圖,對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。
如圖1-圖5所示,本實(shí)用新型所述壓載水實(shí)時(shí)排放監(jiān)控裝置包括:取樣單元、檢測(cè)單元、分析單元、執(zhí)行機(jī)構(gòu)、存儲(chǔ)顯示單元;
其中所述取樣單元與壓載水排出管路相連通,其用于自壓載水排出管路中提取適量樣品并輸送至檢測(cè)單元;具體的如圖2所示,所述取樣單元包括:與壓載水排出管路或稱為壓載水總管1相連通的旁通管路2,且在所述旁通管路2入口上設(shè)置有能夠?qū)α魅肱酝ü苈返臉悠愤M(jìn)行過濾的濾器3;以及與所述旁通管路相連通的微泵6,該微泵能夠提取過濾后的樣品通過樣品流道4輸送至檢測(cè)單元。作為優(yōu)選方案,所述濾器的濾網(wǎng)的濾孔孔徑應(yīng)當(dāng)小于所述檢測(cè)單元第一樣品流道41的橫向尺寸且小于第二樣品流道42的橫向尺寸,以濾除檢測(cè)單元無(wú)法處理的大顆粒進(jìn)而保證通過的樣品中的藻類和菌類尺寸不會(huì)堵塞檢測(cè)檢測(cè)單元通道,且濾器內(nèi)部安裝有實(shí)時(shí)檢測(cè)濾器是否臟堵的壓差傳感器,該壓差傳感器用于實(shí)時(shí)測(cè)量濾器兩側(cè)壓差,當(dāng)壓差達(dá)到一定值后,說明濾器堵塞嚴(yán)重需更換濾器,優(yōu)選的所述壓差傳感器信號(hào)可以傳遞給存儲(chǔ)顯示單元,以發(fā)出報(bào)警或顯示警告標(biāo)識(shí),提醒使用人員更換濾器。
所述檢測(cè)單元與所述取樣單元相連接,其能夠?qū)θ訂卧蛠?lái)的樣品進(jìn)行取樣檢測(cè)并輸出對(duì)應(yīng)的檢測(cè)信號(hào);依據(jù)檢測(cè)藻類和菌類濃度的需要,則所述檢測(cè)單元包括用于藻類檢測(cè)的熒光檢測(cè)傳感器和用于菌類檢測(cè)的感應(yīng)式傳感器;具體的如圖3所示,由于《2004年控制和管理船舶壓載水和沉積物國(guó)際公約》(以下簡(jiǎn)稱為《壓載水公約》)要求藻類檢測(cè)不需要區(qū)分種類,而菌類檢測(cè)需要區(qū)分種類,因此本例設(shè)置一個(gè)用于藻類檢測(cè)的熒光檢測(cè)傳感器和三個(gè)用于菌類檢測(cè)的感應(yīng)式傳感器,3個(gè)感應(yīng)式傳感器分別用于檢測(cè)大腸桿菌、腸球菌、有毒霍亂弧菌數(shù)據(jù)即所述樣品經(jīng)樣品流道進(jìn)入檢測(cè)單元的四個(gè)檢測(cè)傳感器。進(jìn)一步的如圖4所示,所述熒光檢測(cè)傳感器包括暗室14,所述暗室內(nèi)自上至下依次設(shè)置熒光檢測(cè)光源7、第一小孔光闌8、第一濾光片9、熒光檢測(cè)微流控芯片10、第二濾光片11、第二小孔光闌12以及光電接收器13,且所述熒光檢測(cè)微流控芯片上凹刻有供樣品流通的第一樣品流道41;其中熒光檢測(cè)光源(采用激光器)發(fā)射光信號(hào)照射樣品,若樣品中存在藻類,則藻類的熒光素激發(fā)出熒光即樣品在流經(jīng)第一樣品流道41上檢測(cè)區(qū)時(shí),藻類細(xì)胞中的熒光物質(zhì)受激發(fā)會(huì)發(fā)出熒光照射到光電探測(cè)器或稱為光電接收器13上,光電接收器13會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)電信號(hào)并傳送給分析單元;同時(shí)上述熒光檢測(cè)光源7、第一小孔光闌8、第一濾光片9、供樣品流通的熒光檢測(cè)微流控芯片10、第二濾光片11、第二小孔光闌12以及光電接收器13的中心最好位于同一條垂直線上,以保證檢測(cè)效果。進(jìn)一步的如圖5所示,各所述感應(yīng)式傳感器均包括微流控芯片,且所述微流控芯片具有:底片17、被設(shè)置于所述底片17上的微流控基片-PDMS基片以及被設(shè)置于所述底片與微流控基片之間的檢測(cè)電極-檢測(cè)銅電極16;所述微流控基片包括凹刻有第二樣品流道42的PDMS芯片層20、被設(shè)置于檢測(cè)電極上方的PDMS涂層19以及被設(shè)置于所述檢測(cè)電極與樣品通道重疊區(qū)域所對(duì)應(yīng)的PDMS涂層上、用于捕獲船舶壓載水水樣中的菌類抗原的抗體吸附層18。其中,所述檢測(cè)銅電極粘貼在底片上;所述PDMS涂層其厚度可以為幾百微米厚,優(yōu)選的其可通過在所述檢測(cè)銅電極25所在區(qū)域上方旋涂有一層幾百微米厚的PDMS涂層獲得;所述抗體吸附層為與待檢測(cè)抗原類型相對(duì)應(yīng)的抗體溶液在PDMS涂層表面經(jīng)自然風(fēng)干所形成的吸附層,吸附是指抗體溶液自然風(fēng)干后會(huì)使抗體吸附在PDMS涂層表面,抗原類型包括大腸桿菌、腸球菌或有毒霍亂弧菌;上述菌類檢測(cè)感應(yīng)式傳感器的設(shè)計(jì)原理:由于檢測(cè)電極上方的PDMS涂層表面吸附有抗體即所述抗體吸附層,則此時(shí)PDMS涂層表面的電勢(shì)計(jì)為V0;當(dāng)含有菌類抗原的船舶壓載水水樣流經(jīng)抗體吸附層時(shí),抗體會(huì)與抗原相結(jié)合,生成抗原-抗體復(fù)合體,從而會(huì)改變PDMS涂層19表面的電勢(shì)(此時(shí)的電勢(shì)計(jì)為V1),如圖6,在該過程中的這種電勢(shì)變化所產(chǎn)生的電信號(hào),由PDMS涂層下方的檢測(cè)銅電極檢測(cè),同時(shí)由于檢測(cè)銅電極探查到的電勢(shì)變化與水樣中菌類抗原濃度成正比,如圖7,則可以方便快捷地實(shí)現(xiàn)船舶壓載水水樣中菌類抗原濃度的檢測(cè),上述檢測(cè)過程的工作原理為電容充放電的原理,抗體吸附層與檢測(cè)銅電極相當(dāng)于電容器的兩個(gè)電極,中間隔著的PDMS涂層相當(dāng)于電解質(zhì)。
所述分析單元與所述檢測(cè)單元相連接,其用于對(duì)接收到的檢測(cè)信號(hào)進(jìn)行信號(hào)處理并輸出相應(yīng)的控制命令,所述的信號(hào)處理包括對(duì)電信號(hào)進(jìn)行放大、濾波等處理,并獲得該信號(hào)相對(duì)應(yīng)的藻類或菌類濃度數(shù)據(jù),依據(jù)所獲得濃度數(shù)據(jù)輸出控制信號(hào)控制執(zhí)行機(jī)構(gòu)動(dòng)作。具體的,所述分析單元包括對(duì)電信號(hào)進(jìn)行放大的差分放大器、對(duì)放大的電信號(hào)進(jìn)行濾波處理的濾波器、微處理器及與所述執(zhí)行機(jī)構(gòu)相連接的繼電器;優(yōu)選的所述微處理器依據(jù)上述電信號(hào)獲得相應(yīng)的藻類和菌類的濃度信息(由于檢測(cè)銅電極探查到的電勢(shì)變化與水樣中菌類抗原濃度成正比,則可通過實(shí)驗(yàn)獲得兩者間的對(duì)應(yīng)關(guān)系曲線進(jìn)而獲得藻類和菌類的濃度信息),并輸出與所獲濃度信息相匹配的控制命令;優(yōu)選的,可以分別設(shè)置與藻類以及每一種待檢菌類類型相匹配的濃度閾值,具體閾值選取可參考《壓載水公約》所設(shè)定的排放標(biāo)準(zhǔn);若所獲藻類和菌類濃度滿足《壓載水公約》的排放標(biāo)準(zhǔn),則輸出控制執(zhí)行機(jī)構(gòu)使壓載水排放入海的指令,否則則輸出控制執(zhí)行機(jī)構(gòu)使壓載水回流至壓載水艙指令。
所述執(zhí)行機(jī)構(gòu)受控于所述分析單元,其能夠依據(jù)接收到的控制命令進(jìn)行動(dòng)作,以控制壓載水排出管路中壓載水的流向;具體的,所述執(zhí)行機(jī)構(gòu)包括但不限于設(shè)置于壓載水排出管路上的三通閥,該三通閥可與入海管路連接;若分析單元檢測(cè)所得濃度滿足對(duì)應(yīng)的濃度閾值(濃度閾值設(shè)定參考《壓載水公約》標(biāo)準(zhǔn)),則將壓載水排放入海,若不滿足則控制三通閥切換流向,使壓載水回流至壓載水艙重新處理。
所述存儲(chǔ)顯示單元與所述分析單元相連接,其能夠存儲(chǔ)壓載水樣品檢測(cè)數(shù)據(jù)并進(jìn)行顯示。如可通過顯示器、打印機(jī)顯示給使用人員。
綜上所述,本實(shí)用新型所述壓載水實(shí)時(shí)監(jiān)控裝置具有實(shí)時(shí)性,其能夠便捷地在壓載水排放過程中實(shí)時(shí)檢測(cè)壓載水中藻類和菌類濃度;且兼具檢測(cè)和排放控制兩方面內(nèi)容,可根據(jù)實(shí)時(shí)檢測(cè)所得濃度信息,控制壓載水的流向。
本實(shí)用新型具體工作過程如下:
首先,通過取樣單元從壓載水總管中提取壓載水樣本送給檢測(cè)單元;通過檢測(cè)單元的熒光檢測(cè)傳感器和感應(yīng)式傳感器檢測(cè),將包含藻類和菌類濃度信息的電信號(hào)送給分析單元;分析單元通過對(duì)檢測(cè)單元送來(lái)的電信號(hào)進(jìn)行信號(hào)處理,獲得藻類和菌類在壓載水中的濃度,并依據(jù)《壓載水公約》的排放標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置相應(yīng)的濃度閾值,當(dāng)藻類和菌類濃度滿足《壓載水公約》標(biāo)準(zhǔn)時(shí),控制執(zhí)行機(jī)構(gòu)的三通閥,使壓載水排放入海,當(dāng)濃度不滿足《壓載水公約》標(biāo)準(zhǔn)時(shí),控制執(zhí)行機(jī)構(gòu)三通閥使壓載水回流至壓載水艙。
以上所述,僅為本實(shí)用新型較佳的具體實(shí)施方式,但本實(shí)用新型的保護(hù)范圍并不局限于此,任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本實(shí)用新型揭露的技術(shù)范圍內(nèi),根據(jù)本實(shí)用新型的技術(shù)方案及其實(shí)用新型構(gòu)思加以等同替換或改變,都應(yīng)涵蓋在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。