本發(fā)明涉及動物傳染性疾病檢測器械技術領域，具體是涉及一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒。

背景技術：

根據(jù)國家有關實驗室統(tǒng)計數(shù)據(jù)，2012年商品肉雞感疫病染率最高的依然是H9N2。如果將H9N2與H5加起來，總的感染率是82.21％。這說明每只雞死亡的原因，有82.21％來源于禽流感。而由其他疾病導致的只占17.79％。在商品肉雞、肉雜雞、青年雞群中，根據(jù)國家有關機構資料證明，H9N2流感病毒(AIV)隱性感染率1％。單獨感染H9N2之后并沒有固定的臨床表現(xiàn)癥狀。通過病毒接種實驗，看不到H9N2的任何病變和癥狀，曾采取肌注等多種方式攻毒后，未發(fā)現(xiàn)H9N2有任何的臨床表現(xiàn)癥狀。這說明H9N2并不單獨感染，也不致病，只有繼發(fā)或并發(fā)了其他的疾病之后才會表現(xiàn)出一些臨床癥狀。因此，在防控H9N2型禽流感時應將治療與它一起作怪的疾病同步進行。

H9N2流感在冬春季節(jié)發(fā)病時一般常見的發(fā)病形式是流感繼發(fā)氣囊炎形式，病變上主要表現(xiàn)部分雞腫頭腫臉、拉綠色糞便、有呼吸道癥狀、眼睛流淚、縮頭閉眼等。病變主要表現(xiàn)在胰臟邊沿出血、胸腺腫脹出血、氣管出血、氣管下部有出血環(huán)、纖維素性肺炎等。如果繼發(fā)感染后，主要表現(xiàn)腹腔、前胸氣囊內出現(xiàn)泡沫等漿液性滲出物，2天后肺臟會出現(xiàn)典型的纖維素性肺炎。出現(xiàn)水腫充血期(水腫充血期)、發(fā)紅出血(紅色肝變期)、肺臟淺灰色腫脹(灰色肝變期)、逐步出血纖維素樣壞死(纖維素樣肝變期)，部分地區(qū)出血結核性肺炎等病變。在中后期各個氣囊、腹腔內都會同時出現(xiàn)嚴重的干酪樣滲出物；部分有纖維素樣滲出物。就構成所謂的“氣囊炎病”或“流感氣囊炎病”。

目前對于H9N2亞型禽流感病毒的預防首先是增強雞的抵抗力，可以選用增強免疫的中藥方劑進行保健。一般免疫都是選在前三周進行，這三周至少要進行1-2個療程的保健，如果不保健的話，雞就極有可能發(fā)病，其次針對不同的雞群合理應用抗生素；此外，在免疫時須再次增強抵抗力，同時對H9N2亞型禽流感病毒的檢測也是至關重要，特別對于基層的動物疫控工作者來說，快速的檢測出病毒對于及時的防止感染有很關鍵的作用。

技術實現(xiàn)要素：

針對上述問題，本發(fā)明提供了一種靈敏度高、使用方便的快速檢測H9N2亞 型禽流感病毒的試劑盒。

本發(fā)明的技術方案為：一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒，包括盒體和檢測卡，所述的盒體包括樣品采集區(qū)和結果顯示區(qū)；所述的檢測卡鑲嵌在盒體中，包括底板、吸水濾紙、顯色墊和樣品墊，吸水濾紙、顯色墊和樣品墊依次粘結在底板上；所述的樣品墊包括保護墊和膠體金層，保護墊卡在膠體金層上方，所述的膠體金層是由涂有膠體金顆粒標記的H9N2亞型禽流感病毒的單克隆抗體的玻璃纖維膜制成，所述的顯色墊包括檢測區(qū)和質控區(qū)，所述檢測區(qū)包被有抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體，所述的質控區(qū)包被有兔抗鼠IgG抗體。

進一步的，所述的底板為合成樹脂材料制得，所述的合成樹脂為高分子化合物，是由低分子原料氯乙烯通過聚合反應結合成大分子懸浮聚合生產(chǎn)的，懸浮聚合將單體在機械攪拌或振蕩和分散劑的作用下，單體分散成液滴，通常懸浮于水中進行的聚合過程，這種方法物料粘度低，容易傳熱和控制，聚合后只需經(jīng)過簡單的分離、洗滌、干燥等工序，即得樹脂產(chǎn)品，產(chǎn)品純凈、均勻；所述的檢測區(qū)包被有H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體而形成的檢測線，所述的質控區(qū)包被有兔抗鼠IgG抗體的質控線，所述的檢測線采用抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體濃度為0.3-0.5mg/mL的包被液進行包被，所述質控線采用兔抗鼠IgG抗體濃度為1.0-1.2mg/mL的包被液進行包被；所述的保護墊為醫(yī)用皂化醋酸纖維素膜，所述的皂化醋酯纖維是用纖維素為原料，經(jīng)化學法轉化成醋酸纖維素酯制成的化學纖維，耐光性較好，伸縮率低，不受待檢成分中化學物質的影響。

一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒的制備方法為：

步驟一、膠體金標記抗原溶液制備：

a.將容器用純化水清洗干凈后，加入1wt％氯金酸水溶液加熱至100℃，再按3-5％的體積比滴加加入1.5wt％檸檬酸三鈉溶液，攪拌混勻，反應10-20min，膠體金溶液由完全變成紫色，繼續(xù)保持100℃加熱，膠體金溶液變成紫紅色后，停止加熱并冷卻至25℃，使用碳酸鉀溶液調節(jié)pH至8.0-9.0，得到膠體金溶液，備用；

b.用制備好的PBS緩沖液將H9N2亞型禽流感病毒抗原稀釋至蛋白含量為0.5-0.8mg/mL的稀釋液，所述的PBS緩沖液成分含量為8％BSA，3％蔗糖，0.8％NaCl和0.03％NaN3，再將稀釋液在5-8℃條件下2400-3000r/min離心10-20min， 去除沉淀得到上清液，將上清液逐滴加入到制備的膠體金溶液中，離心去除多余的抗原，在5-8℃條件下2400-3000r/min離心30-60min，靜置8-12h后，即得到膠體金標記的H9N2亞型禽流感病毒抗原；

步驟二、樣品墊制備：

a.將聚乙二醇200 12-15g、聚乙烯吡咯烷酮15-20g、牛血清白蛋白10-15g、屈立通X-1000 1-1.5ml、吐溫20 5-8ml混合后用5mM-10mM磷酸鹽緩沖液定容至1000ml，調節(jié)pH值9.3-9.5得到處理液，將所述的保護墊浸泡于處理液中20-30min，取出于37℃恒溫烘干后封存，備用；

b.將膠體金標記的H9N2亞型禽流感病毒抗原溶液均勻噴射到玻璃纖維素膜上，冷凍干燥，制得膠體金層，再將膠體金層與保護墊粘結，即制得所述的樣品墊。

步驟三、顯色墊制備：將抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體稀釋成濃度為0.3-0.5mg/mL的包被液，均勻噴射到硝酸纖維素膜上得到檢測線；將兔抗鼠IgG抗體稀釋成濃度為1.0-1.2mg/mL包被液，均勻噴射到硝酸纖維素膜上，得到質控線，37℃恒溫干燥3-5h，封存，即得到所述的顯色墊；

步驟四、試劑盒制備：給底板上粘結顯色墊，然后在顯色墊的上方粘結吸水濾紙，顯色墊與吸水濾紙相互交疊0.2mm，在顯色墊的下方粘結樣品墊，顯色墊和樣品墊之間相互交疊0.2mm，按5-8mm的寬度，25-30mm的長度進行切割裁剪，制得檢測卡，將檢測卡放在塑料殼體中，樣品墊與樣品采集區(qū)對準，顯色墊與結果顯示區(qū)對準，加上干燥劑，裝入盒體，即制得一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒。

本發(fā)明試劑盒的使用方法：將待檢測雞血液30μl滴于試劑盒樣品采集區(qū)的樣品墊上，5-10min之內觀察色變情況，雞血液中的紅細胞凝集與特異性免疫血清所抑制，若待檢樣品中含有H9N2亞型禽流感病毒，則與樣品墊中的膠體金標記的病毒特異性抗原結合，通過免疫層析作用與硝酸纖維素膜上的抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體結合后，會形成肉眼可見的一條紅色檢測線，未結合完的膠體金標記的病毒特異性抗原繼續(xù)層析與和兔抗鼠IgG抗體結合后亦形成肉眼可見的第二條紅色質控線；若待檢樣品中不含H9N2亞型禽流感病毒抗原，則僅出現(xiàn)一條紅色質控線；若紅色質控線未出現(xiàn)，則該檢測試劑盒失效。

本發(fā)明的試劑盒的有益效果體現(xiàn)在：該試劑盒是一種特異性強、靈敏度高、簡易快速，能現(xiàn)場檢測，操作人員無需專業(yè)培訓，按說明書即可完成操作檢測試劑盒，利用膠體金免疫層析的原理，能在常溫下5-10min內得到檢測結果，便于對雞是否感染H9N2亞型禽流感病毒做出快速診斷，有很好的推廣意義。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒的結構示意圖；

圖2是本發(fā)明的快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒內的檢測卡結構示意圖；

其中，1-盒體，2-檢測卡，3-樣品采集區(qū),4-結果顯示區(qū)，5-底板，6-吸水濾紙，7-顯色墊，8-樣品墊，9-檢測區(qū)，10-質控區(qū)，11-保護墊，12-膠體金層。

具體實施方式

實施例1：一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒，包括盒體1和檢測卡2，所述的盒體包括樣品采集區(qū)3和結果顯示區(qū)4；所述的檢測卡鑲嵌在盒體1中，包括底板5、吸水濾紙6、顯色墊7和樣品墊8，吸水濾紙6、顯色墊7和樣品墊8依次粘結在底板5上；所述的樣品墊8包括保護墊11和膠體金層12，保護墊11卡在膠體金層12上方，所述的膠體金層12是由涂有膠體金顆粒標記的H9N2亞型禽流感病毒的單克隆抗體的玻璃纖維膜制成，所述的顯色墊7包括檢測區(qū)9和質控區(qū)10，所述檢測區(qū)9包被有抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體，所述的質控區(qū)10包被有兔抗鼠IgG抗體。

其中，所述的底板5為合成樹脂材料制得，所述的合成樹脂為高分子化合物，是由低分子原料氯乙烯通過聚合反應結合成大分子懸浮聚合生產(chǎn)的，懸浮聚合將單體在機械攪拌或振蕩和分散劑的作用下，單體分散成液滴，通常懸浮于水中進行的聚合過程，這種方法物料粘度低，容易傳熱和控制，聚合后只需經(jīng)過簡單的分離、洗滌、干燥等工序，即得樹脂產(chǎn)品，產(chǎn)品純凈、均勻；所述的檢測區(qū)9包被有H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體而形成的檢測線，所述的質控區(qū)10包被有兔抗鼠IgG抗體的質控線，所述的檢測線采用抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體濃度為0.3mg/mL的包被液進行包被，所述質控線采用兔抗鼠IgG抗體濃度為1.0mg/mL的包被液進行包被；所述的保護墊11為醫(yī)用皂化醋酸纖維素膜，所述的皂化醋酯纖維是用纖維素為原料，經(jīng)化學法轉化成醋酸纖維素酯制成的化學纖維，耐光性較好，伸縮率低，不受待檢成分中化學物質的影響。

一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒的制備方法為：

步驟一、膠體金標記抗原溶液制備：

a.將容器用純化水清洗干凈后，加入1wt％氯金酸水溶液加熱至100℃，再按3％的體積比滴加加入1.5wt％檸檬酸三鈉溶液，攪拌混勻，反應10min，膠體金溶液由完全變成紫色，繼續(xù)保持100℃加熱，膠體金溶液變成紫紅色后，停止加熱并冷卻至25℃，使用碳酸鉀溶液調節(jié)pH至8.0，得到膠體金溶液，備用；

b.用制備好的PBS緩沖液將H9N2亞型禽流感病毒抗原稀釋至蛋白含量為0.5mg/mL的稀釋液，所述的PBS緩沖液成分含量為8％BSA，3％蔗糖，0.8％NaCl和0.03％NaN3，再將稀釋液在5℃條件下2400r/min離心10min，去除沉淀得到上清液，將上清液逐滴加入到1制備的膠體金溶液中，離心去除多余的抗原，在5℃條件下2400r/min離心30min，靜置8h后，即得到膠體金標記的H9N2亞型禽流感病毒抗原；

步驟二、樣品墊制備：

a.將聚乙二醇200 12g、聚乙烯吡咯烷酮15g、牛血清白蛋白10g、屈立通X-1000 1ml、吐溫20 5ml混合后用5mM磷酸鹽緩沖液定容至1000ml，調節(jié)pH值9.3得到處理液，將所述的保護墊11浸泡于處理液中20min，取出于37℃恒溫烘干后封存，備用；

b.將膠體金標記的H9N2亞型禽流感病毒抗原溶液均勻噴射到玻璃纖維素膜上，冷凍干燥，制得膠體金層12，再將膠體金層12與保護墊11粘結，即制得所述的樣品墊8。

步驟三、顯色墊7制備：將抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體稀釋成濃度為0.3mg/mL的包被液，均勻噴射到硝酸纖維素膜上得到檢測線；將兔抗鼠IgG抗體稀釋成濃度為1.0mg/mL包被液，均勻噴射到硝酸纖維素膜上，得到質控線，37℃恒溫干燥3h，封存，即得到所述的顯色墊7；

步驟四、試劑盒制備：給底板5上粘結顯色墊7，然后在顯色墊7的上方粘結吸水濾紙6，顯色墊7與吸水濾紙6相互交疊0.2mm，在顯色墊7的下方粘結樣品墊8，顯色墊7和樣品墊8之間相互交疊0.2mm，按5mm的寬度，25mm的長度進行切割裁剪，制得檢測卡2，將檢測卡2放在塑料殼體中，樣品墊8與樣品采集區(qū)3對準，顯色墊7與結果顯示區(qū)4對準，加上干燥劑，裝入盒體，即制得一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒。

實施例2：一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒，包括盒體1和檢測卡2，所述的盒體包括樣品采集區(qū)3和結果顯示區(qū)4；所述的檢測卡鑲嵌在盒體1中，包括底板5、吸水濾紙6、顯色墊7和樣品墊8，吸水濾紙6、顯色墊7和樣品墊8依次粘結在底板5上；所述的樣品墊8包括保護墊11和膠體金層12，保護墊11卡在膠體金層12上方，所述的膠體金層12是由涂有膠體金顆粒標記的H9N2亞型禽流感病毒的單克隆抗體的玻璃纖維膜制成，所述的顯色墊7包括檢測區(qū)9和質控區(qū)10，所述檢測區(qū)9包被有抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體，所述的質控區(qū)10包被有兔抗鼠IgG抗體。

其中，所述的底板5為合成樹脂材料制得，所述的合成樹脂為高分子化合物，是由低分子原料氯乙烯通過聚合反應結合成大分子懸浮聚合生產(chǎn)的，懸浮聚合將單體在機械攪拌或振蕩和分散劑的作用下，單體分散成液滴，通常懸浮于水中進行的聚合過程，這種方法物料粘度低，容易傳熱和控制，聚合后只需經(jīng)過簡單的分離、洗滌、干燥等工序，即得樹脂產(chǎn)品，產(chǎn)品純凈、均勻；所述的檢測區(qū)9包被有H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體而形成的檢測線，所述的質控區(qū)10包被有兔抗鼠IgG抗體的質控線，所述的檢測線采用抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體濃度為0.4mg/mL的包被液進行包被，所述質控線采用兔抗鼠IgG抗體濃度為1.1mg/mL的包被液進行包被；所述的保護墊11為醫(yī)用皂化醋酸纖維素膜，所述的皂化醋酯纖維是用纖維素為原料，經(jīng)化學法轉化成醋酸纖維素酯制成的化學纖維，耐光性較好，伸縮率低，不受待檢成分中化學物質的影響。

一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒的制備方法為：

步驟一、膠體金標記抗原溶液制備：

a.將容器用純化水清洗干凈后，加入1wt％氯金酸水溶液加熱至100℃，再按4％的體積比滴加加入1.5wt％檸檬酸三鈉溶液，攪拌混勻，反應15min，膠體金溶液由完全變成紫色，繼續(xù)保持100℃加熱，膠體金溶液變成紫紅色后，停止加熱并冷卻至25℃，使用碳酸鉀溶液調節(jié)pH至8.5，得到膠體金溶液，備用；

b.用制備好的PBS緩沖液將H9N2亞型禽流感病毒抗原稀釋至蛋白含量為0.65mg/mL的稀釋液，所述的PBS緩沖液成分含量為8％BSA，3％蔗糖，0.8％NaCl和0.03％NaN3，再將稀釋液在6.5℃條件下2700r/min離心15min，去除沉淀得到上清液，將上清液逐滴加入到1制備的膠體金溶液中，離心去除多余的抗原， 在6.5℃條件下2700r/min離心45min，靜置10h后，即得到膠體金標記的H9N2亞型禽流感病毒抗原；

步驟二、樣品墊制備：

a.將聚乙二醇200 13.5g、聚乙烯吡咯烷酮17.5g、牛血清白蛋白12.5g、屈立通X-1000 1.25ml、吐溫20 6.5ml混合后用7.5mM磷酸鹽緩沖液定容至1000ml，調節(jié)pH值9.4得到處理液，將所述的保護墊11浸泡于處理液中25min，取出于37℃恒溫烘干后封存，備用；

b.將膠體金標記的H9N2亞型禽流感病毒抗原溶液均勻噴射到玻璃纖維素膜上，冷凍干燥，制得膠體金層12，再將膠體金層12與保護墊11粘結，即制得所述的樣品墊8。

步驟三、顯色墊7制備：將抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體稀釋成濃度為0.4mg/mL的包被液，均勻噴射到硝酸纖維素膜上得到檢測線；將兔抗鼠IgG抗體稀釋成濃度為1.1mg/mL包被液，均勻噴射到硝酸纖維素膜上，得到質控線，37℃恒溫干燥4h，封存，即得到所述的顯色墊7；

步驟四、試劑盒制備：給底板5上粘結顯色墊7，然后在顯色墊7的上方粘結吸水濾紙6，顯色墊7與吸水濾紙6相互交疊0.2mm，在顯色墊7的下方粘結樣品墊8，顯色墊7和樣品墊8之間相互交疊0.2mm，按6.5mm的寬度，27.5mm的長度進行切割裁剪，制得檢測卡2，將檢測卡2放在塑料殼體中，樣品墊8與樣品采集區(qū)3對準，顯色墊7與結果顯示區(qū)4對準，加上干燥劑，裝入盒體，即制得一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒。

實施例3：一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒，包括盒體1和檢測卡2，所述的盒體包括樣品采集區(qū)3和結果顯示區(qū)4；所述的檢測卡鑲嵌在盒體1中，包括底板5、吸水濾紙6、顯色墊7和樣品墊8，吸水濾紙6、顯色墊7和樣品墊8依次粘結在底板5上；所述的樣品墊8包括保護墊11和膠體金層12，保護墊11卡在膠體金層12上方，所述的膠體金層12是由涂有膠體金顆粒標記的H9N2亞型禽流感病毒的單克隆抗體的玻璃纖維膜制成，所述的顯色墊7包括檢測區(qū)9和質控區(qū)10，所述檢測區(qū)9包被有抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體，所述的質控區(qū)10包被有兔抗鼠IgG抗體。

其中，所述的底板5為合成樹脂材料制得，所述的合成樹脂為高分子化合物， 是由低分子原料氯乙烯通過聚合反應結合成大分子懸浮聚合生產(chǎn)的，懸浮聚合將單體在機械攪拌或振蕩和分散劑的作用下，單體分散成液滴，通常懸浮于水中進行的聚合過程，這種方法物料粘度低，容易傳熱和控制，聚合后只需經(jīng)過簡單的分離、洗滌、干燥等工序，即得樹脂產(chǎn)品，產(chǎn)品純凈、均勻；所述的檢測區(qū)9包被有H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體而形成的檢測線，所述的質控區(qū)10包被有兔抗鼠IgG抗體的質控線，所述的檢測線采用抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體濃度為0.5mg/mL的包被液進行包被，所述質控線采用兔抗鼠IgG抗體濃度為1.2mg/mL的包被液進行包被；所述的保護墊11為醫(yī)用皂化醋酸纖維素膜，所述的皂化醋酯纖維是用纖維素為原料，經(jīng)化學法轉化成醋酸纖維素酯制成的化學纖維，耐光性較好，伸縮率低，不受待檢成分中化學物質的影響。

一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒的制備方法為：

步驟一、膠體金標記抗原溶液制備：

a.將容器用純化水清洗干凈后，加入1wt％氯金酸水溶液加熱至100℃，再按5％的體積比滴加加入1.5wt％檸檬酸三鈉溶液，攪拌混勻，反應20min，膠體金溶液由完全變成紫色，繼續(xù)保持100℃加熱，膠體金溶液變成紫紅色后，停止加熱并冷卻至25℃，使用碳酸鉀溶液調節(jié)pH至9.0，得到膠體金溶液，備用；

b.用制備好的PBS緩沖液將H9N2亞型禽流感病毒抗原稀釋至蛋白含量為0.8mg/mL的稀釋液，所述的PBS緩沖液成分含量為8％BSA，3％蔗糖，0.8％NaCl和0.03％NaN3，再將稀釋液在8℃條件下3000r/min離心20min，去除沉淀得到上清液，將上清液逐滴加入到1制備的膠體金溶液中，離心去除多余的抗原，在8℃條件下3000r/min離心60min，靜置12h后，即得到膠體金標記的H9N2亞型禽流感病毒抗原；

步驟二、樣品墊制備：

a.將聚乙二醇200 15g、聚乙烯吡咯烷酮20g、牛血清白蛋白15g、屈立通X-1000 1.5ml、吐溫20 8ml混合后用10mM磷酸鹽緩沖液定容至1000ml，調節(jié)pH值9.5得到處理液，將所述的保護墊11浸泡于處理液中30min，取出于37℃恒溫烘干后封存，備用；

b.將膠體金標記的H9N2亞型禽流感病毒抗原溶液均勻噴射到玻璃纖維素膜上，冷凍干燥，制得膠體金層12，再將膠體金層12與保護墊11粘結，即制得 所述的樣品墊8。

步驟三、顯色墊7制備：將抗H9N2亞型禽流感病毒的多克隆抗體稀釋成濃度為0.5mg/mL的包被液，均勻噴射到硝酸纖維素膜上得到檢測線；將兔抗鼠IgG抗體稀釋成濃度為1.2mg/mL包被液，均勻噴射到硝酸纖維素膜上，得到質控線，37℃恒溫干燥5h，封存，即得到所述的顯色墊7；

步驟四、試劑盒制備：給底板5上粘結顯色墊7，然后在顯色墊7的上方粘結吸水濾紙6，顯色墊7與吸水濾紙6相互交疊0.2mm，在顯色墊7的下方粘結樣品墊8，顯色墊7和樣品墊8之間相互交疊0.2mm，按8mm的寬度，30mm的長度進行切割裁剪，制得檢測卡2，將檢測卡2放在塑料殼體中，樣品墊8與樣品采集區(qū)3對準，顯色墊7與結果顯示區(qū)4對準，加上干燥劑，裝入盒體，即制得一種快速檢測H9N2亞型禽流感病毒的試劑盒。

試劑盒特異性檢測

特異性檢測：滅活的H9N2亞型禽流感病毒60份為待測樣品，分別用由實施例1、實施例2、實施例3制備的試劑盒進行檢測，檢測方法如下：將待測樣品滴加到試劑盒的樣品采集區(qū)中，任其沿著試劑盒內的檢測卡自由擴散，5-10min內觀察結果。

結果：滅活H9N2亞型禽流感病毒出現(xiàn)一條紅色檢測線和一條紅色質控線，則結果判定為陽性，只出現(xiàn)一條紅色質控線，結果判定為陰性，如果無紅色線出現(xiàn)則失效，經(jīng)過試驗得出三組實施例制備的試劑盒對滅活的H9N2亞型禽流感病毒檢測的準確率為100％，特異性明確。

最后應說明的是：以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案，而非對其限制；盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，本領域的普通技術人員應當理解：其依然可以對前述實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應技術方案的本質脫離本發(fā)明實施例技術方案的精神和范圍。