本發(fā)明涉及糖復(fù)合物(多糖、糖蛋白、糖脂)在生物樣品中簡(jiǎn)單、靈敏、準(zhǔn)確、無(wú)放射性污染、適用范圍廣泛的檢測(cè)和示蹤方法。屬于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

糖復(fù)合物是生物體內(nèi)除蛋白質(zhì)和核酸以外的又一類(lèi)重要的生物大分子，具有多種多樣的生物學(xué)功能，它幾乎沒(méi)有小分子化合物具有的異化生物代謝毒性，使用比較安全，和其他藥物的相互作用比較少。由于其上述特點(diǎn)和對(duì)許多目前缺少治療藥物的疾病具有良好的前景，已成為生命科學(xué)研究和新藥開(kāi)發(fā)中極受重視的一類(lèi)化合物。但是，由于其結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，分離純化困難，缺少簡(jiǎn)單、靈敏的檢測(cè)方法，其生物利用度和藥代動(dòng)力學(xué)的研究十分困難，嚴(yán)重制約了其研究和開(kāi)發(fā)。

生物利用度和藥代動(dòng)力學(xué)是借助動(dòng)力學(xué)原理對(duì)藥物的吸收、分布、代謝和排除(ADME)過(guò)程進(jìn)行研究。它是集中藥理學(xué)、藥物化學(xué)、分析化學(xué)、數(shù)學(xué)等學(xué)科于一體的邊緣學(xué)科。它承擔(dān)著闡明藥物作用機(jī)制和科學(xué)內(nèi)涵；設(shè)計(jì)及優(yōu)選給藥方案；促進(jìn)新藥開(kāi)發(fā)劑型優(yōu)選和質(zhì)量控制；在藥物的研發(fā)、應(yīng)用中具有重要的作用和位置。

糖復(fù)合物的生物利用度和藥代動(dòng)力學(xué)的研究相對(duì)困難，主要原因是缺少理想的在生物樣品中的檢測(cè)方法。目前糖復(fù)合物生物樣品中的檢測(cè)方法主要有：色譜法、放射性同位素標(biāo)記法、熒光測(cè)定法和生物測(cè)定法。由于糖類(lèi)結(jié)構(gòu)及其在體內(nèi)代謝的特點(diǎn)，其樣品和代謝產(chǎn)物是一組結(jié)構(gòu)和分子量近似的化合物。色譜法、生物法、熒光標(biāo)記法對(duì)糖類(lèi)化合物的藥代動(dòng)力學(xué)研究，或因?yàn)闄z測(cè)方法靈敏度不高、干擾強(qiáng)或因生物樣品處理困難、對(duì)測(cè)定結(jié)果影響嚴(yán)重等原因，使其應(yīng)用受到嚴(yán)重限制。同位素標(biāo)記法應(yīng)用的較多，該方法的靈敏度高、適用范圍廣，應(yīng)用較多。但是該方法對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求苛刻和成本高、易造成放射性污染。尋找和建立簡(jiǎn)單、方便的示蹤和測(cè)定方法，是在糖復(fù)合物藥代動(dòng)力學(xué)，包括生物利用度研究中的關(guān)鍵技術(shù)，也是糖復(fù)合物研究中亟待解決的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題之一。

糖蛋白因其含有胺基或酪氨酸可同碘發(fā)生取代反應(yīng)，對(duì)于不含有胺基的糖復(fù)合物,可通過(guò)制備它的熒光素衍生物后,再進(jìn)行碘代反應(yīng),生成穩(wěn)定的、對(duì)糖類(lèi)結(jié)構(gòu)影響較小的碘代化合物。在同位素標(biāo)記法進(jìn)行糖的藥代動(dòng)力學(xué)研究中,以碘的放射性同位素對(duì)糖復(fù)合物進(jìn)行標(biāo)記是經(jīng)典和適用的方法。

電感耦合等離子體質(zhì)譜(Inductively coupled plasma mass spectrometry，ICP-MS)，是近年發(fā)展起來(lái)的新的分析測(cè)試技術(shù)。它不僅可以取代傳統(tǒng)的無(wú)機(jī)分析技術(shù)如電感耦合等離子體光譜技術(shù)、石墨爐原子吸收等,進(jìn)行定性、定量分析及同位素比值的準(zhǔn)確測(cè)量等,還可檢測(cè)上述方法難以檢測(cè)的元素，如鹵族元素；同時(shí)它還可以與其他技術(shù)如HPLC、HPCE、GC聯(lián)用進(jìn)行元素的形態(tài)、分布特性等的分析，具有靈敏度高、結(jié)果穩(wěn)定的特點(diǎn)。將碘代多糖與ICP-MS檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，集成創(chuàng)新，有望建立一種新的簡(jiǎn)單、方便、可靠、適用范圍廣的糖復(fù)合物示蹤和測(cè)定方法。

本發(fā)明完成前未發(fā)現(xiàn)有關(guān)碘代糖復(fù)合物與ICP-MS相結(jié)合測(cè)定生物樣品中糖復(fù)合物含量的報(bào)道，本發(fā)明具有廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的之一是制備碘代糖復(fù)合物.根據(jù)糖復(fù)合物化學(xué)性質(zhì)的不同,進(jìn)行不同的取代反應(yīng).

一、對(duì)于含有絡(luò)氨酸糖復(fù)合物,直接通過(guò)化學(xué)反應(yīng)，以共價(jià)鍵與碘連接，生成碘代糖復(fù)合物。該反應(yīng)可通過(guò)氯胺T催化，直接進(jìn)行碘的取代反應(yīng)，生成碘代多糖.

二、對(duì)多糖、糖脂類(lèi)不含有可同碘直接發(fā)生取代反應(yīng)的成分，首先制備其與熒光素的衍生物，再將碘與熒光素反應(yīng)，制備碘-熒光素-多糖復(fù)合物。

本發(fā)明的目的之二是以電感耦合等離子體質(zhì)譜(Inductively coupled plasma mass spectrometry，ICP-MS)測(cè)定碘代糖復(fù)合物的含量。

ICP-MS是近年發(fā)展起來(lái)的新的分析測(cè)試技術(shù)。它不僅可以取代傳統(tǒng)的無(wú)機(jī)分析技術(shù)如電感耦合等離子體光譜技術(shù)、石墨爐原子吸收等,進(jìn)行定性、定量分析及同位素比值的準(zhǔn)確測(cè)量等,還可檢測(cè)上述方法難以檢測(cè)的元素，如鹵族元素；同時(shí)它還可以與其他技術(shù)如HPLC、HPCE、GC聯(lián)用進(jìn)行元素的形態(tài)、分布特性等的分析，具有靈敏度高、結(jié)果穩(wěn)定的特點(diǎn)。

本發(fā)明是根據(jù)測(cè)定的碘含量，計(jì)算各樣品中糖復(fù)合物的含量。將碘代多糖與ICP-MS檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，建立新的生物樣品中測(cè)定多糖含量的方法，為集成創(chuàng)新，該方法是簡(jiǎn)單、方便、可靠、適用范圍廣的糖復(fù)合物的示蹤和測(cè)定方法，具有實(shí)質(zhì)的突出特點(diǎn)和顯著的技術(shù)進(jìn)步。

具體操作為：

1、一種測(cè)定生物樣品中多糖含量的新方法,所述的方法為：

(1)糖蛋白中含有游離胺基，在催化劑的催化下，游離胺基中的氫可被碘取代，生成碘代多糖，具體操作方法為：取糖蛋白樣品0.2g，以水5ml溶解，以氯胺T為催化劑，加入濃度為0.5mol/L的碘化鉀碘1ml，進(jìn)行碘代反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)凝膠柱層析純化，收集糖蛋白類(lèi)化合物部分，冷凍干燥得到碘代糖蛋白；

(2)對(duì)于不含有游離氨基的多糖、糖脂，可首先制備它們與熒光素的衍生物，再與碘進(jìn)行取代反應(yīng)，具體操作方法為：取樣品1g，溶解二甲基亞砜在10ml中，加吡啶10滴，加入熒光素0.1g，再加入二月桂酸二丁基錫20mg，95℃混合加熱2小時(shí)，加入無(wú)水乙醇50mL，放置,傾去上清,以乙醇反復(fù)清洗,洗去多余的染料，離心，得熒光素-多糖復(fù)合物，該復(fù)合物按照步驟(1)中所述進(jìn)行碘代反應(yīng)，制得碘代多糖或碘代糖脂；

(3)由步驟(1)或者(2)所制備的糖復(fù)合物的碘代產(chǎn)物，進(jìn)行動(dòng)物或細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，收集需測(cè)定的樣品，經(jīng)消化后，以ICP-MS測(cè)定樣品中碘的含量，根據(jù)樣品中碘的標(biāo)記量，換算成各樣品中糖復(fù)合物的含量。

下面以銀耳糖蛋白為例對(duì)本發(fā)明測(cè)定方法的具體內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。由于無(wú)市售樣品可用，我們需自制銀耳糖蛋白，作為研究的樣品。

糖復(fù)合物包含糖蛋白、多糖和糖脂。糖蛋白均含有一定量的絡(luò)氨酸，可同碘直接發(fā)生取代反應(yīng)；多糖和糖脂由于不含有可同碘直接發(fā)生反應(yīng)的基團(tuán)，需制成可同碘發(fā)生取代反應(yīng)的衍生物后，與碘反應(yīng)生成碘代衍生物。生成的碘代糖復(fù)合物，測(cè)定碘含量后，進(jìn)行動(dòng)物或細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，制備需要的生物樣品；經(jīng)消解后，以ICP-MS測(cè)定其中碘的含量，根據(jù)樣品中碘含量，計(jì)算樣品中糖復(fù)合物的含量。

一.碘代糖蛋白-的制備

1.銀耳糖蛋白的制備 我們以前的研究表明，采用適當(dāng)?shù)姆椒?，可由銀耳制備銀耳糖蛋白，解決無(wú)合適商品試劑的問(wèn)題。因此糖蛋白以銀耳多糖復(fù)合物為代表.制備方法為:取銀耳孢糖一公斤，加入5倍量純水，加溫至70℃，攪拌2小時(shí)，離心(3000rpm,10min.),收集上清液，減壓蒸發(fā)至700ml，攪拌下加無(wú)水乙醇4000ml，靜置過(guò)夜后離心，收集沉淀部分，冷凍干燥。粗制銀耳糖蛋白經(jīng)Sephadex G-100中壓凝膠柱層析，收集分子量1萬(wàn)的部分，濃縮，凍干，得到銀耳糖蛋白。

2.銀耳糖蛋白樣品的分析 干燥后的樣品中總糖、糖醛酸、蛋白質(zhì)分別以苯酚-硫酸法、間羥二酚法、Lowery法測(cè)定，甘露糖、葡萄糖醛酸和牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn)品，結(jié)果表明其中總糖的含量為80.2％，糖醛酸含量為6.5％，蛋白質(zhì)含量為7.8％；分子量分布以HPGPC法測(cè)定，以系列右旋糖酐為分子量對(duì)照品，OHPAK-SB804HQ色譜柱，RID-10A檢測(cè)器，流動(dòng)相為0.7％的硫酸鈉溶液，結(jié)果通過(guò)GPC軟件計(jì)算，銀耳多糖復(fù)合物的峰位分子量為10.23KDa；組成糖分析采用PMP衍生化法，根據(jù)各標(biāo)準(zhǔn)單糖和樣品衍生物的保留時(shí)間和峰面積，確定樣品中組成糖的種類(lèi)和比例，結(jié)果表明，該多糖復(fù)合物中糖的部分由木糖、甘露糖、葡萄糖醛酸以及葡萄糖組成；蛋白部分由精氨酸、絡(luò)氨酸、丙氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等9種氨基酸組成。分析結(jié)果表明，制得的銀耳糖蛋白符合要求。

3.銀耳糖蛋白樣品的碘代 樣品500mg以5ml純水溶解，加入NaI溶液(0.5mol/L)3ml，充分混勻,加入氯胺T溶液(0.1g/ml)3ml，充分混勻后震蕩反應(yīng)1min，加入偏重亞硫酸鈉3ml(0.1g/ml)，混勻后加入碘化鉀5ml(0.1g/ml),充分混勻,離心(5000r/min,10min)后取上清，冷凍干燥，得碘代銀耳糖蛋白。

4.碘代銀耳糖蛋白的純化 碘代銀耳糖蛋白的分離純化在中壓凝膠色譜儀上進(jìn)行。碘代銀耳糖蛋白200mg，以純水溶解后上樣到Sephadex G-50凝膠色譜柱(40cm x5cm)，以水洗脫，收集洗脫液(10ml/管)，根據(jù)該色譜柱的內(nèi)外水體積確定開(kāi)始和結(jié)束收集時(shí)間。以苯酚-硫酸法測(cè)定各管中的糖含量，以糖含量為縱坐標(biāo)，管數(shù)為橫坐標(biāo)作圖，根據(jù)洗脫圖(見(jiàn)圖1)，收集10-25管，濃縮、冷凍干燥，得到純化碘代銀耳糖蛋白。

5.碘代銀耳糖蛋白的分析

通過(guò)碘取代反應(yīng)制得的碘代銀耳糖蛋白進(jìn)行了光譜分析。紫外光譜表明，碘代前后其最大吸收均在234nm，未發(fā)生改變。紅外光譜表明，碘代前后發(fā)生了明顯改變，碘代后最大吸收為:3363、3267、1631、1527、1396、1303、1087、902、810、624、536cm-1,而碘代前,銀耳糖蛋白的最大吸收為:3309、2931、1462、1381、1319、1261、1084、1022、729、624cm-1,產(chǎn)生了明顯的鹵代烷烴峰(536cm^-1)，表明碘通過(guò)化學(xué)鍵連接到糖中。碘代銀耳糖蛋白通過(guò)ICP-MS測(cè)定其碘代率為0.55％，進(jìn)一步表明，碘代反應(yīng)成功。

6.碘代糖蛋白穩(wěn)定性研究

碘標(biāo)記后的糖復(fù)合物在進(jìn)行動(dòng)物、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)是否穩(wěn)定，以下述實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了研究：

取碘代銀耳糖蛋白10mg，溶解在10ml細(xì)胞培養(yǎng)液()中，置于37C0恒溫振蕩，分別在1,2,3小時(shí)吸取2ml，通過(guò)Sephadex G-50進(jìn)行凝膠柱層析(30cm X 1cm)，水洗脫液以自動(dòng)收集器收集(1ml/管)，以ICP-MS隔管測(cè)定其中的碘含量，結(jié)果表明，碘代銀耳糖蛋白和經(jīng)培養(yǎng)1,2,3小時(shí)的碘代銀耳糖蛋白的層析曲線(xiàn)基本相同，在小分子量的流分(Ve)附近未檢測(cè)到游離的碘，表明碘代銀耳糖蛋白中的碘未發(fā)生裂解，碘代產(chǎn)物穩(wěn)定。

二.樣品的處理將碘代糖復(fù)合物樣品或凍干后的生物樣品粉碎，在頂空進(jìn)樣瓶(10ML)內(nèi)準(zhǔn)確稱(chēng)取適量，加入4ml超純水潤(rùn)濕后依次加入3ml TMAH和0.1ml H₂O₂，混勻，旋緊頂蓋，80℃下超聲破碎30min，定容至25ml。以0.45um濾膜過(guò)濾，濾液進(jìn)行ICP-MS測(cè)定。

三.樣品的測(cè)定測(cè)定在電感耦合等離子體-質(zhì)譜(ICP-MS)(Agilent JL-713-IP001-YQ030)上進(jìn)行.

ICP-MS設(shè)定的條件如下表：

表1 ICP-MS儀器的參考工作條件

四.測(cè)定結(jié)果

1方法檢出限和線(xiàn)性范圍

1％TMAH溶液作為溶劑，配制1mg/ml的NaI標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別稀釋至5ng/ml、10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、300ng/ml碘標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。測(cè)得工作曲線(xiàn)(見(jiàn)圖2)的標(biāo)準(zhǔn)方程為y＝0.0075×+0.0232，R＝0.9996，線(xiàn)性范圍較寬。

2方法精密度

準(zhǔn)確稱(chēng)取0.05g碘代銀耳糖蛋白，樣品處理過(guò)程同前，重復(fù)測(cè)定10次，進(jìn)行精密度實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表(表2)，從結(jié)果中可知，樣品測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)值為3.89％。

表2碘代銀耳糖蛋白精密度測(cè)定結(jié)果(n＝10)

3方法重現(xiàn)性

準(zhǔn)確稱(chēng)取0.05g碘代銀耳糖蛋白，共6份，每份處理過(guò)程同，進(jìn)行方法重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3，從結(jié)果中可知，樣品測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.5％。

表3碘代銀耳糖蛋白重現(xiàn)性測(cè)定結(jié)果

4方法穩(wěn)定性

50mg碘代銀耳糖蛋白樣品，消解后每隔兩小時(shí)測(cè)定一次，結(jié)果如表4。表明在8小時(shí)內(nèi)樣品穩(wěn)定。

表4碘代銀耳糖蛋白重現(xiàn)性測(cè)定結(jié)果

5.加標(biāo)回收率

本方法以碘代銀耳糖蛋白為試樣進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)，準(zhǔn)確稱(chēng)取碘代銀耳糖蛋白，以純水溶解，制成50mg/3.5ml溶液共6份，每份添加1mg/ml碘化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5ml，處理過(guò)程同7，將濾液稀1000倍.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算，加標(biāo)回收率在92％-101％之間，RSD值為5.16％。

表5碘代銀耳糖蛋白加標(biāo)回收率測(cè)定結(jié)果

五.銀耳糖蛋白在生物樣品中的含量及分布

5.1生物樣品的制備方法

SD大鼠在適應(yīng)環(huán)境3天后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。采血前禁食12h，自由飲水。本試驗(yàn)以碘代銀耳糖蛋白為樣品，分為實(shí)驗(yàn)組和空白對(duì)照組，每組3只大鼠，實(shí)驗(yàn)組給予給碘代銀耳糖蛋白，空白組給予生理鹽水，給藥劑量為0.2g/只，給藥容量為12m L/只，灌胃給藥，取血方式為眼球取血和腹主動(dòng)脈取血；1h取血點(diǎn)為大鼠左眼，2h取血點(diǎn)為大鼠右眼，3h取血點(diǎn)為大鼠腹主動(dòng)脈，每只大鼠共3次取血，將血液0.5ml除最后稀釋10倍外，其他處理過(guò)程同前.取給藥3h后大鼠心、肝、脾、肺、腎分別真空冷凍干燥，稱(chēng)重，研磨均勻，稱(chēng)取樣品100mg,除最后濾液不必稀釋外，其他處理過(guò)程同前。

5.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

5.2.1不同時(shí)間點(diǎn)大鼠血液中銀耳糖蛋白含量測(cè)定結(jié)果

一般情況下，大鼠的血容量占體重的7.4％，大鼠平均體重190g，故大鼠體內(nèi)全血量以12.6ml計(jì)算出一只大鼠全血中銀耳糖蛋白含量。由結(jié)果可見(jiàn)(表6)，隨著給藥后時(shí)間的增加，吸收入血量也在增加，3小時(shí)后，將近5％的銀耳糖蛋白存在血液中。

表6不同時(shí)間點(diǎn)大鼠全血中銀耳多糖含量

5.2.2碘代銀耳糖蛋白給藥3小時(shí)后,在大鼠主要臟器中含量結(jié)果見(jiàn)表7；

表7大鼠內(nèi)臟中含有碘代銀耳糖蛋白的量

由測(cè)定結(jié)果可見(jiàn)，該方法靈敏度高，結(jié)果穩(wěn)定。

本發(fā)明將碘代多糖與ICP-MS檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，建立新的生物樣品中測(cè)定多糖含量的方法，為集成創(chuàng)新，具有實(shí)質(zhì)的突出特點(diǎn)和顯著的技術(shù)進(jìn)步。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖和實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明。

圖1是碘代銀耳糖蛋白的分離純化洗脫圖；

圖2是方法檢出限和線(xiàn)性范圍曲線(xiàn)圖。

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。但下述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明的簡(jiǎn)易例子，并不代表或限制本發(fā)明的權(quán)利保護(hù)范圍，本發(fā)明的保護(hù)范圍以權(quán)利要求書(shū)為準(zhǔn)。

具體實(shí)施方式

為更好地說(shuō)明本發(fā)明，便于理解本發(fā)明的技術(shù)方案，本發(fā)明的典型但非限制性的實(shí)施例如下。

實(shí)施例1銀耳糖蛋白的測(cè)定

其方法與結(jié)果與前述發(fā)明內(nèi)容中相同，在此不再贅述。

實(shí)施例2碘代多糖、糖脂的測(cè)定

天然產(chǎn)物中許多糖的復(fù)合物不含有絡(luò)氨酸，不能與碘直接發(fā)生取代反應(yīng)。需要將它們首先與可同碘發(fā)生取代發(fā)生的基團(tuán)連接，再進(jìn)行碘的取代反應(yīng)。

一、熒光素(FITC)標(biāo)記多糖

熒光素可在堿性條件下與多糖中的發(fā)生取代反應(yīng)，生成熒光素-多糖復(fù)合物。該復(fù)合物在生理?xiàng)l件下穩(wěn)定，是熒光標(biāo)記多糖常用的方法。

1、多糖樣品

我們選擇杏鮑菇多糖(PEPI)作為樣品。PEPI為實(shí)驗(yàn)室自制的均

一多糖，不含有蛋白。

2、熒光素標(biāo)記PEPI

樣品(1g)溶解在10ml二甲基亞砜中，加10滴吡啶，加入FITC0.1g，再加入二月桂酸二丁基錫20mg，95℃混合加熱2h。加入無(wú)水乙醇50ML.放置,傾去上清,以乙醇反復(fù)清洗,洗去多余的染料，離心，得FITC-PEPI復(fù)合物。

3、碘代熒光素-PEPI和樣品的純化

熒光素-PEPI的碘取代反應(yīng)方法同糖蛋白的碘代方法，在此不再贅述。

碘代多糖的純化方法同碘代銀耳糖蛋白的純化方法。測(cè)定方法同銀耳糖蛋白，在此不再贅述。

樣品的處理及樣品的測(cè)定均同銀耳多糖蛋白的方法，在此不再贅述。

二、杏鮑菇多糖在生物樣品中的含量及分布

1、生物樣品的制備方法

實(shí)驗(yàn)分組和給藥劑量均同銀耳糖蛋白。

2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1不同時(shí)間點(diǎn)大鼠血液中杏鮑菇多糖含量測(cè)定結(jié)果

一般情況下，大鼠的血容量占體重的7.4％，大鼠平均體重190g，故大鼠體內(nèi)全血量以12.6ml計(jì)算出一只大鼠全血中銀耳糖蛋白含量。由結(jié)果可見(jiàn)(表8)，1h時(shí)，杏鮑菇多糖在血液中的濃度達(dá)到高峰，隨著給藥后時(shí)間的增加，吸收入血量減少。

表8不同時(shí)間點(diǎn)大鼠全血中杏鮑菇多糖含量

2.2杏鮑菇多糖給藥3小時(shí)后,在大鼠主要臟器中含量結(jié)果見(jiàn)表9。

表9大鼠內(nèi)臟中含有碘代杏鮑菇多糖的量