相關(guān)申請的交叉引用本申請要求2014年11月7日提交的美國臨時申請?zhí)?2/076,909和2014年11月26日提交的美國臨時申請?zhí)?2/084,870的權(quán)益，所述美國臨時申請以引用方式并入本文。
背景技術(shù)：
：a.
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明大體上涉及溶液的堿度的確定。具體地說，本發(fā)明的試劑盒和方法被用于確定分析物組合物的堿度，其通過向多個微孔的每個微孔中的凍干滴定劑組合物中添加所述分析物組合物以在每個微孔中形成具有不同ph的溶液來進(jìn)行。b.相關(guān)技術(shù)的說明堿度是溶液的緩沖能力。堿度是水中和酸和堿的能力的量度，從而維持相當(dāng)穩(wěn)定的ph值。水溶液包含諸如碳酸氫鹽、碳酸鹽和氫氧化物的化合物，其與來自水的水合氫(h+)離子組合，從而提高水的ph值(更高堿性)。為了在水體中維持相當(dāng)恒定的ph值，較高的堿度測量值是期望的。具有高堿度的水體可具有中和進(jìn)入水體中的酸性輸入物的能力。例如，巖石、土壤、鹽、一些植物活動以及工業(yè)廢水排放物可向水體提供足夠濃度的增加水體堿度的化合物。用于確定堿度的常規(guī)方法包括將目標(biāo)溶液滴定到消耗所有可滴定堿的ph值。通過添加比色ph指示劑(例如溴甲酚綠)并利用顏色變化的肉眼檢測確定終點來確定滴定的終點。這種技術(shù)有許多缺點。首先，目視技術(shù)要求分析人員將酸溶液手動逐滴滴定到目標(biāo)分析物溶液中。其次，目視技術(shù)要求主觀地確定顏色變化。這兩個缺點經(jīng)常導(dǎo)致錯誤，所述錯誤起因于分析人員由于添加過多的強(qiáng)酸而超過終點或錯誤判斷終點的顏色變化。因此，分析人員在許多情況下不得不重新實施滴定法。此外，手動滴定是耗時的。技術(shù)實現(xiàn)要素：已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了目視滴定法的缺點的一種解決方案。具體地說，該解決方案在于在微孔板中使用各種濃度的凍干滴定劑樣品。將分析物樣品添加到凍干樣品中并測量所得樣品在兩個不同波長處的吸光度，并且基于測量的吸光度值確定分析物組合物的堿度。值得注意的是，本發(fā)明通過消除主觀的肉眼確定來消除傳統(tǒng)手動滴定的缺陷，并提供準(zhǔn)確值，因為使用者只需將一種或多種分析物溶液添加到板中的每個微孔中，而不是手動滴定每個分析物溶液。此外，本發(fā)明通過使用分光光度計確定終點來去除終點的主觀肉眼確定。在本發(fā)明的一個方面，公開了堿度測定試劑盒。所述試劑盒包含a)微孔板和b)凍干滴定劑組合物，所述凍干滴定劑組合物包含酸、ph敏感染料和賦形劑。微孔板的多個微孔含有不同量的凍干滴定劑組合物，使得當(dāng)向多個微孔的每個微孔中的凍干滴定劑組合物中添加分析物組合物時，形成溶液，并且每個微孔中的溶液的ph值是不同的。微孔板可包含6個、24個、96個、384個或1536個微孔。在本發(fā)明的一些方面，微孔板包含6個微孔，并且每個微孔含有依序增加量的滴定劑組合物。在本發(fā)明的其它方面，微孔板具有至少24個或96個微孔，并且至少10個微孔含有依序增加量的滴定劑組合物。微孔中的凍干滴定劑的量可依序增加，并且每個微孔中的溶液的ph值依序降低?？擅芊舛鄠€微孔以防止滴定劑組合物離開多個微孔。在一些情況下，用塑料膜或箔密封多個微孔。堿度測定試劑盒還可包括能夠測量400到700納米(nm)的波長的分光光度計。在一些情況下，滴定劑組合物可包含能夠具有響應(yīng)于溶液的ph變化的比色響應(yīng)的ph敏感染料、酸化合物和賦形劑化合物。ph敏感染料可以是任何ph敏感染料。ph敏感染料可在特定ph范圍內(nèi)具有比色響應(yīng)。在一些情況下，ph敏感染料可具有酸形式，所述酸形式的吸光度值與ph敏感染料的堿形式的吸光度值不同。ph敏感染料的非限制性示例包括三苯甲烷染料、溴甲酚綠、結(jié)晶紫、甲酚紅、百里酚藍(lán)、2,4-二硝基酚、溴酚藍(lán)、甲基橙、甲基紅、羊毛鉻黑t和溴甲酚紫。在一種特定情況下，ph敏感染料是溴甲酚綠。滴定劑溶液可包含(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精、甘氨酸、檸檬酸鹽、乳糖、甘露醇、蔗糖、聚乙二醇或其任何組合作為賦形劑。在某些情況下，(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精被用作賦形劑。滴定劑溶液中的酸可以是樟腦磺酸、三氯乙酸、對甲苯磺酸、2-(n-嗎啉代)乙磺酸、?；撬峄蚱淙魏谓M合，優(yōu)選的酸是樟腦磺酸。所述組合物可以是粉末?？赏ㄟ^向一個或多個容器提供滴定劑組合物的水溶液并使至少一個所述容器經(jīng)受足以從所述水溶液中去除水以形成粉末的凍干條件來制得粉末。在一些情況下，一個或多個容器是微孔板的微孔。粉末可被包裝(例如，袋、小瓶或封裝的)。粉末可與試劑盒分開出售。本發(fā)明的堿度測定試劑盒可用于確定一種分析物組合物或多種分析物組合物的堿度。所述方法可包括：a)獲得本說明書通篇中所述的任一種堿度測定試劑盒；b)獲得分析物組合物；c)向微孔板的多個微孔中的每一個微孔中添加基本上相同體積的分析物組合物，以在多個微孔中的每一個微孔中由分析物組合物和凍干滴定組合物形成溶液，其中每個微孔中的溶液的ph值是不同的；d)在第一波長和第二波長處測量多個微孔中的每一個微孔中的每一溶液的吸光度值，并且基于所測量的吸光度值確定分析物組合物的堿度。微孔中的至少一種溶液具有在一個或多個波長處測量的吸光度值，所述吸光度值與具有比所述染料顯示比色響應(yīng)時的ph值低的ph值的溶液的吸光度值在統(tǒng)計學(xué)上不可區(qū)分且可被表示為多個波長的吸光度的比，從而表明所述溶液具有比中和所述分析物組合物的堿度所需的量大的酸量，并且微孔中的至少一種溶液具有在一個或多個波長處測量的吸光度值，所述吸光度值與具有比所述染料顯示比色響應(yīng)時的ph值低的ph值的溶液的吸光度值在統(tǒng)計學(xué)上可區(qū)分且可被表示為多個波長的吸光度的比，從而表明所述溶液具有比中和所述分析物組合物的堿度所需的量小的酸量。在一種情況下，至少一種溶液具有為第一波長處的吸光度值的0.4到1.7倍的第二波長處的吸光度值，并且其中至少一種溶液表示分析物組合物的堿度+/-40ppm。分析物可從各種來源如地表下烴形成中的地表下井、烴地表下層或水井獲得。在一些情況下，從烴鉆井過程或水力破碎過程獲得分析物溶液。分析物的堿度值可與水的硬度相關(guān)。在一些情況下，獲得具有相同分析物的多種溶液，并且從多個地表下井的不同井獲得每一分析物溶液。本說明書通篇中所述的堿度測定試劑盒可通過以下方式制得：a)獲得微孔板；b)獲得包含酸、ph敏感染料和賦形劑的凍干滴定劑組合物；c)向所述微孔板的多個微孔中添加依序增加量的所述凍干滴定劑組合物，使得當(dāng)向所述多個微孔的每個微孔中的所述凍干滴定劑組合物中添加分析物組合物時，形成溶液，并且每個微孔中的所述溶液的ph值依序降低。在一些情況下，所述試劑盒通過以下方式制得：a)向所述多個微孔中添加依序增加量的所述滴定劑組合物，使得當(dāng)向所述多個微孔的每個微孔中的所述凍干滴定劑組合物中添加分析物組合物時，形成溶液，并且每個微孔中的所述溶液的ph值依序降低，和b)凍干所述滴定劑溶液?？捎貌蛩芰夏っ芊舛鄠€微孔，以抑制或防止滴定劑組合物離開多個微孔。在一些實施方案中，滴定劑組合物基本上由樟腦磺酸、(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精和溴甲酚綠組成。在本發(fā)明的上下文中，描述了45個實施方案。實施方案1是用于確定溶液的堿度濃度的組合物，所述組合物包含能夠具有響應(yīng)于所述溶液的ph變化的比色響應(yīng)的ph敏感染料、酸化合物和賦形劑化合物。實施方案2是實施方案1的組合物，其中所述ph敏感染料具有酸形式，所述酸形式具有與所述ph敏感染料的堿形式的吸光度值不同的吸光度值。實施方案3是實施方案1到2中任一項的組合物，其中所述ph敏感染料包括三苯甲烷染料、溴甲酚綠、結(jié)晶紫、甲酚紅、百里酚藍(lán)、2,4-二硝基酚、溴酚藍(lán)、甲基橙、甲基紅、羊毛鉻黑t、溴甲酚紫或其任何組合。實施方案4是實施方案3的組合物，其中所述ph敏感染料是溴甲酚綠。實施方案5是實施方案到4中任一項的組合物，其中所述酸化合物可包括樟腦磺酸、三氯乙酸、對甲苯磺酸、2-(n-嗎啉代)乙磺酸、?；撬峄蚱淙魏谓M合。實施方案6是實施方案5的組合物，其中所述酸化合物是樟腦磺酸。實施方案7是實施方案1到6中任一項的組合物，其中所述賦形劑包括(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精、甘氨酸、檸檬酸鹽、乳糖、甘露醇、蔗糖、聚乙二醇或其任何組合作為賦形劑。實施方案8是實施方案7的組合物，其中所述賦形劑是(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精，優(yōu)選(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精。在實施方案9中，實施方案1到8中任一項的組合物，其中所述組合物基本上由溴甲酚綠、樟腦磺酸和(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精組成。實施方案10是實施方案到9中任一項的組合物，其中所述組合物是粉末。實施方案11是實施方案10的組合物，其中通過向一個或多個容器提供所述滴定劑組合物的水溶液并使至少一個所述容器經(jīng)受足以從所述水溶液中去除水以形成所述粉末的凍干條件來制得所述粉末。實施方案12是實施方案11的組合物，其中所述一個或多個容器是微孔板的微孔。實施方案13是實施方案11的組合物，其中所述容器是袋或小瓶。實施方案14描述了堿度測定試劑盒。所述堿度測定試劑盒可包含(a)微孔板；和(b)凍干滴定劑組合物，其包含酸、ph敏感染料和賦形劑，其中所述微孔板的多個微孔含有不同量的所述凍干滴定劑組合物，使得當(dāng)向所述多個微孔的每個微孔中的所述凍干滴定劑組合物中添加分析物組合物時，形成溶液，并且每個微孔中的所述溶液的ph值是不同的。實施方案14是實施方案14的堿度測定試劑盒，其中所述微孔板可包含6個、24個、96個、384個或1536個微孔。實施方案15是實施方案15的堿度測定試劑盒，其中所述微孔板包括6個微孔，并且每個微孔含有依序增加量的所述滴定劑組合物。實施方案17是實施方案15的堿度測定試劑盒，其中所述微孔板包含24個微孔或96個微孔，并且至少10個微孔含有依序增加量的所述滴定劑組合物。實施方案18是實施方案14到17中任一項的堿度測定試劑盒，其中所述凍干滴定劑的量依序增加，并且每個微孔中的所述溶液的ph依序降低。實施方案19是實施方案14到18中任一項的堿度測定試劑盒，其中所述ph敏感染料具有酸形式和堿形式，其中所述酸形式的吸光度值不同于所述堿形式的吸光度值。實施方案20是實施方案14到18中任一項的堿度測定試劑盒，其中所述ph敏感染料在特定ph范圍內(nèi)具有比色響應(yīng)。實施方案21是實施方案19和20中任一項的堿度測定試劑盒，其中所述ph敏感染料是三苯甲烷染料、溴甲酚綠、結(jié)晶紫、甲酚紅、百里酚藍(lán)、2,4-二硝基酚、溴酚藍(lán)、甲基橙、甲基紅、羊毛鉻黑t、溴甲酚紫或其任何組合。實施方案22是實施方案21的堿度測定試劑盒，其中所述ph敏感染料是溴甲酚綠。實施方案23是實施方案14到22中任一項的堿度測定試劑盒，其中所述賦形劑是(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精、甘氨酸、檸檬酸鹽、乳糖、甘露醇、蔗糖、聚乙二醇或其任何組合。實施方案24是實施方案23的堿度測定試劑盒，其中所述賦形劑是(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精。實施方案25是實施方案14到24中任一項的堿度測定試劑盒，其中所述酸是樟腦磺酸、三氯乙酸、對甲苯磺酸、?；撬峄蚱淙魏谓M合。實施方案26是實施方案25的堿度測定試劑盒，其中所述酸性組合物是樟腦磺酸。實施方案27是實施方案14到26中任一項的堿度測定試劑盒，其中所述多個微孔被密封以防止所述滴定劑組合物離開所述多個微孔。實施方案28是實施方案26的堿度測定試劑盒，其中用塑料膜或箔密封所述多個微孔。實施方案29是實施方案14到28中任一項的堿度測定試劑盒，其進(jìn)一步包括能夠測量400到700納米的波長的分光光度計。實施方案30描述了確定分析物組合物的堿度的方法。所述方法可包括：(a)獲得實施方案1到14的組合物或?qū)嵤┓桨?4到29的堿度測定試劑盒中的任一種；(b)獲得分析物組合物；(c)向所述微孔板的所述多個微孔中的每一個微孔中添加基本上相同體積的所述分析物組合物，以在所述多個微孔中的每一個微孔中由所述分析物組合物和所述凍干滴定組合物形成溶液，其中每個微孔中的所述溶液的ph值是不同的；和(d)在第一波長和第二波長處測量所述多個微孔中的每一個微孔中的每一溶液的吸光度值，并且基于所測量的吸光度值確定所述分析物組合物的堿度。實施方案31是實施方案30的方法，其中每個微孔中的所述溶液的ph值依序降低。實施方案32是實施方案30到31中任一項的方法，其中所述ph敏感染料具有酸形式和堿形式，其中所述酸形式的吸光度值與所述第一波長相關(guān)，并且所述堿形式的吸光度值與所述第二波長相關(guān)。實施方案33是實施方案32的方法，其中所述ph敏感染料是三苯甲烷染料、溴甲酚綠、結(jié)晶紫、甲酚紅、百里酚藍(lán)、2,4-二硝基酚、溴酚藍(lán)、甲基。實施方案34是實施方案33的方法，其中所述ph敏感染料是溴甲酚綠。實施方案35是實施方案30到34中任一項的方法，其中：(i)至少一種所述溶液具有在一個或多個波長處測量的吸光度值，所述吸光度值與具有比所述染料顯示比色響應(yīng)時的ph值低的ph值的溶液的吸光度值在統(tǒng)計學(xué)上不可區(qū)分且可被表示為多個波長的吸光度的比，從而表明所述溶液具有比中和所述分析物組合物的所述堿度所需的量大的酸量；并且(ii)至少一種所述溶液具有在一個或多個波長處測量的吸光度值，所述吸光度值與具有比所述染料顯示比色響應(yīng)時的ph值低的ph值的溶液的吸光度值在統(tǒng)計學(xué)上可區(qū)分且可被表示為多個波長的吸光度的比，從而表明所述溶液具有比中和所述分析物組合物的所述堿度所需的量小的酸量。實施方案36是實施方案30到34中任一項的方法，其中至少一種所述溶液具有為所述第一波長處的吸光度值的0.4到1.7倍的所述第二波長處的吸光度值，并且其中所述至少一種溶液表示所述分析物組合物的所述堿度+/-40ppm。實施方案37是實施方案30到36中任一項的方法，其中所述分析物是從地表下井獲得的水性組合物。實施方案38是實施方案30到36中任一項的方法，其中所述分析物溶液可包括具有相同分析物的多種溶液，并且從多個地表下井的不同井獲得每一分析物溶液。實施方案39是實施方案37到38的方法，其中所述井是地表下烴形成中的烴井或水井。實施方案40是實施方案30到39中任一項的方法，其中從鉆井過程或液壓過程獲得所述分析物溶液。實施方案41是實施方案30到40中任一項的方法，其中所確定的所述分析物的堿度值與水的硬度相關(guān)。實施方案42描述了制備實施方案14到29的任一種堿度測定試劑盒的方法。所述方法可包括(a)獲得微孔板；(b)獲得包含酸、ph敏感染料和賦形劑的凍干滴定劑組合物；和(c)向所述微孔板的多個微孔中添加依序增加量的所述凍干滴定劑組合物，使得當(dāng)向所述多個微孔的每個微孔中的所述凍干滴定劑組合物中添加分析物組合物時，形成溶液，并且每個微孔中的所述溶液的ph值依序降低。實施方案43是實施方案42的方法，其中獲得凍干滴定劑組合物包括向所述微孔板的一個或多個微孔中提供所述滴定劑組合物的水溶液，并使所述微孔板經(jīng)受足以從所述水溶液中去除水并形成粉末的凍干條件。實施方案44是實施方案42到43中任一項的方法，其中密封所述多個微孔以防止所述滴定劑組合物離開所述多個微孔。實施方案45是實施方案44的方法，其中用塑料膜或箔密封所述多個微孔。術(shù)語“酸性溶液”是指氫離子濃度大于氫氧根離子濃度([h+]>[oh-])的溶液。術(shù)語“堿度”是指水溶液中和酸度的能力的量度。堿度通常以ppm的碳酸鈣(caco3)表示。術(shù)語“堿性溶液(basicsolution)或(alkalinesolution)”是指氫離子濃度小于氫氧根離子濃度([h+]<[oh-])的溶液。術(shù)語“ph”是指水或其它介質(zhì)中氫離子的濃度的量度。ph通常表示為基于10的對數(shù)標(biāo)度，其中ph＝-log[h+]。術(shù)語“約”或“大約”被定義為接近于如本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所理解的，并且在一個非限制性實施方案中，所述術(shù)語被定義為在10％以內(nèi)，優(yōu)選在5％以內(nèi)，更優(yōu)選地在1％以內(nèi)，且最優(yōu)選在0.5％以內(nèi)。術(shù)語“基本上”和其變化形式被定義為在很大程度上但不一定完全是如本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所理解的被規(guī)定內(nèi)容，并且在一個非限制性實施方案中基本上是指在10％以內(nèi)、在5％以內(nèi)、在1％以內(nèi)或在0.5％以內(nèi)的范圍。當(dāng)用于權(quán)利要求和/或說明書中時，術(shù)語“抑制”或“降低”或“預(yù)防”或“避免”或這些術(shù)語的任何變化形式包括任何可測量的降低或完全抑制以實現(xiàn)期望的結(jié)果。當(dāng)術(shù)語“有效的”在本說明書和/或權(quán)利要求書中使用時，所述術(shù)語意指足以實現(xiàn)期望的、預(yù)期的或想要的結(jié)果。當(dāng)在權(quán)利要求書或說明書中與術(shù)語“包含”結(jié)合使用時，詞語“一(a或an)”的使用可意指“一種(個)”，但其也與“一種(個)或多種(個)”、“至少一種(個)”和“一種(個)或超過一種(個)”的含義一致。詞語“包含(comprising)”(和包含的任何形式，例如“comprise”和“comprises”)、“具有(having)”(和具有的任何形式，例如“have”和“has”)、“包括(including)”(和包括的任何形式，例如“includes”和“include”)或“含有(containing)”(和含有的任何形式，例如“contains”和“contain”)是包括的或開放式的，且不排除額外的、未述及的要素或方法步驟。本發(fā)明的堿度測定試劑盒以及使用和制備本發(fā)明的堿度測定試劑盒的方法可“包含”本說明書通篇中所公開的特定成分、組分、組合物等，“基本上由本說明書通篇中所公開的特定成分、組分、組合物等組成”或“由本說明書通篇中所公開的特定成分、組分、組合物等組成”。關(guān)于過渡性短語“基本上由……組成”，在一個非限制性方面，本發(fā)明的試劑盒的基本和新穎特征是使用光譜測定分析來確定水溶液的堿度的能力。根據(jù)下文附圖、詳細(xì)描述和實施例將明了本發(fā)明的其它目標(biāo)、特征和優(yōu)點。然而，應(yīng)當(dāng)理解，當(dāng)指示本發(fā)明的具體實施方案時，附圖、詳細(xì)描述和實施例僅以說明的方式給出，并不意在進(jìn)行限制。另外，預(yù)期根據(jù)該詳細(xì)描述屬于本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)的變化和修改對于本領(lǐng)域技術(shù)人員將變得顯而易見。附圖簡單說明圖1a-1c是本發(fā)明的堿度測定試劑盒的示意圖。圖2是描繪確定水體的堿度的方法的流程圖。具體實施方式用于確定溶液的堿度的常規(guī)技術(shù)涉及目視滴定方法，所述方法是耗時且經(jīng)常不準(zhǔn)確的。許多時候，手動目視滴定導(dǎo)致錯誤，所述錯誤起因于分析人員由于添加過多的強(qiáng)酸而超過終點或錯誤判斷終點的顏色變化。已經(jīng)獲得以下發(fā)現(xiàn)：避免超過終點，并且消除了對向包含分析物的水溶液中逐滴添加酸性溶液的目視滴定的需要。該發(fā)現(xiàn)在于使用用于微孔板中的凍干滴定劑樣品。滴定劑樣品可包括ph敏感染料、酸和賦形劑。微孔板的微孔的每個微孔具有至少兩個具有不同ph值的微孔。向滴定劑中添加分析物溶液以形成溶液，并且在第一波長和第二波長處測量多個微孔中的每一個微孔中的每一溶液的吸光度值并基于所測量的吸光度值確定所述分析物組合物的堿度來確定所述溶液的堿度。本發(fā)明的這些和其它非限制性方面將在以下部分中進(jìn)一步予以詳細(xì)討論。a.堿度測定試劑盒圖1a-1c描繪了堿度測定系統(tǒng)100的實施方案的示意圖。堿度測定系統(tǒng)或試劑盒包括具有多個微孔104的微孔板102。多個微孔104可被組裝在可移除的保持器106中。保持器106可包括位于側(cè)壁110的頂部上的構(gòu)件108。保持器106可被置于微孔板102的底壁112上，或懸置于微孔板102的底壁112上方。如所示的，保持器106包含八個(8)微孔104，然而，應(yīng)當(dāng)理解，可根據(jù)微孔板102的大小來調(diào)節(jié)微孔的數(shù)目。例如，微孔104的數(shù)目可以是2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20等。如圖1a中所示的，微孔板102不包含任何滴定劑組合物。圖1b描繪了具有滴定劑組合物114的所有微孔并且圖1c描繪了具有滴定劑組合物114的一些微孔。微孔104可容納20微升、50微升、300微升、500微升、優(yōu)選300微升或400微升的體積。微孔板102、微孔104、保持器106可由具有化學(xué)耐酸性的任何材料制成。材料的非限制性示例包括聚合物、聚合物的共聚物、聚苯乙烯、聚丙烯、環(huán)烯烴等。保持器106可以是聚合物帶或塑料帶，微孔104被壓印在所述帶上。微孔板可從thermofisherscientific(waltham,ma,usa)商購。如圖1b中所示的，微孔104可用依序增加量的凍干滴定劑組合物填充，使得每個微孔具有增加量的酸。在一些實施方案中，每個微孔可具有增加量的酸，然后可將其它試劑添加到微孔中。例如，微孔104-1可具有最少量的酸并且微孔104-56可具有最多量的酸。在其它實施方案中，每個保持器106中的微孔104均可具有增加量的酸，但是每個保持器106具有相同量的酸。例如，微孔104-1、104-9、104-17、104-25、104-33、104-41、104-49可具有相同量的酸并且微孔104-8、104-16、104-32、104-40、104-48和104-56可具有相同量的酸。應(yīng)當(dāng)理解，只要微孔104的兩個具有不同量的酸，則微孔104中的滴定劑量的配置可以是任何所選的配置。在一些情況下，酸、染料和賦形劑可在微孔板102中的微孔104中被凍干。凍干條件包括在100毫托-60攝氏度。微孔104、微孔保持器106和/或微孔板可用已知的密封劑(例如，塑料膜或箔)密封，以允許微孔板102或微孔保持器106被儲存或運輸。在一些實施方案中，堿度測定系統(tǒng)包括能夠測量所選比色染料的吸光度的分光光度計。b.確定溶液的堿度的方法本說明書通篇中所述的堿度測定系統(tǒng)和試劑盒可用于確定溶液的堿度。溶液可以是來自諸如烴地層中的地下水井、湖泊、河流、運河等的水體的樣品。參考圖2，描繪了用于確定堿度的流程圖。在方法200中，在步驟202中獲得含有凍干滴定劑組合物114的微孔板102。在步驟204中，使用遞送設(shè)備(例如，多通道移液管)將已知量的分析物溶液(例如300微升)添加到微孔104中的凍干滴定劑組合物114試劑中。在步驟206中，在板中的固體已完全溶解之后，將微孔板102置于分光光度計(例如，板計數(shù)器)中，并測量每個微孔在比色染料的波長處的吸光度。在比色染料為溴甲酚綠時的實施方案中，測量460nm和620nm處的吸光度。微孔104中的至少一種溶液具有所測量的波長處的吸光度值，所述吸光度值與具有比所述染料顯示比色響應(yīng)時的ph值低的ph值的溶液的吸光度值在統(tǒng)計學(xué)上不可區(qū)分。所述吸光度值可表示為多個波長的吸光度的比，從而表明所述溶液的具有比中和分析物組合物的堿度所需的量的大的酸量。至少一種溶液具有在一個或多個波長處測量的吸光度值，所述吸光度值與具有比所述染料顯示比色響應(yīng)時的ph值低的ph值的溶液的吸光度值在統(tǒng)計學(xué)上可區(qū)別且可被表示為多個波長的吸光度，從而表明所述溶液具有比中和所述分析物組合物的堿度所需的量小的酸量。然后使用吸光度數(shù)據(jù)，使用染料的酸性形式和堿性形式各自的消光系數(shù)來計算它們的濃度。該數(shù)據(jù)可用于通過允許對具有接近中和樣品所需的確切酸量的孔進(jìn)行評估來提高系統(tǒng)的準(zhǔn)確度。然后可基于準(zhǔn)確的孔而不是在兩個不同的孔之間確定樣品的堿度。用于計算堿度的染料的酸形式和堿形式的濃度的比僅受限于所用檢測器的精確度和準(zhǔn)確度。如針對兩孔情況所發(fā)現(xiàn)的，經(jīng)常期望對于單孔情況下的不確定度使用相同的值。窗口越窄，結(jié)果將越準(zhǔn)確。然而，樣品落入更小的窗口中也是不可能。如果一種特定情況使用了具有間隔80ppm堿度的孔的應(yīng)用，使得兩個孔的情況下的不確定度為+/-40ppm，則可將用于計算單孔情況下的堿度的比選擇為使得不確定度為+/-40ppm。某些實驗條件可能需要根據(jù)期望的吸光度比率進(jìn)行改變以匹配期望的不確定度窗口。在使用溴甲酚綠作為染料的非限制性實施方案中，如果460nm處的吸光度大于620nm處的吸光度的1.7倍，則微孔具有比中和堿度所需的酸多的酸。如果460nm處的吸光度小于620nm處的吸光度的0.4倍，則微孔不具有足以中和堿度的酸。被發(fā)現(xiàn)具有比所需的酸多的第一微孔表示堿度的最大值。具有比所需的酸少的最后一個微孔表示堿度的最小值。因此，評估的堿度是兩個孔的平均堿度能力+/-它們的平均堿度能力的一半。如果微孔展示460nm處的吸光度為620處的吸光度的0.4到1.7倍，則堿度是由該微孔表示的值+/-期望的不確定度窗口。例如，對于使用溴甲酚實施方案的實施方案，將吸光度比率設(shè)定為0.4到1.7產(chǎn)生+/-40ppm的不確定度窗口。系統(tǒng)100可被自動化以獲取數(shù)據(jù)。所獲取的數(shù)據(jù)可被傳送到一個或多個計算機(jī)系統(tǒng)。計算機(jī)系統(tǒng)可包括諸如cpu或具有相關(guān)的機(jī)器可讀介質(zhì)或制品的應(yīng)用的組件，所述機(jī)器可讀介質(zhì)或制品可存儲指令或指令集，如果由機(jī)器執(zhí)行所述指令或指令集，則可使該機(jī)器執(zhí)行根據(jù)本發(fā)明的方法的方法和/或操作。例如，微孔板102可被置于板讀數(shù)器中，并且分光光度計可自動測量每個樣品的吸光度。測量的吸光度可被存儲在分光光度計中的計算機(jī)系統(tǒng)中和/或被傳送到另一計算機(jī)系統(tǒng)。任何計算機(jī)均能夠處理吸光度并展示或打印一系列分析物的堿度值。這樣的機(jī)器可包括例如任何適合的處理平臺、計算平臺、計算裝置、處理裝置、計算系統(tǒng)、處理系統(tǒng)、計算機(jī)、處理器等，并且可使用硬件和/或軟件的任何適合組合來執(zhí)行。機(jī)器可讀介質(zhì)或制品可包括例如任何適合類型的存儲器單元、存儲器裝置、存儲器制品、存儲器介質(zhì)、存儲裝置、存儲制品、存儲介質(zhì)和/或存儲單元，例如存儲器、可移除或不可移除介質(zhì)、可擦除或不可擦除介質(zhì)、可寫入或可重寫入介質(zhì)、數(shù)字或模擬介質(zhì)、硬盤、軟盤、光盤只讀存儲器(cd-rom)、可刻錄光盤(cd-r)、可重寫入光盤(cd-rw)、光盤、磁介質(zhì)、磁光介質(zhì)、可移除存儲器卡或磁盤、各種類型的數(shù)字通用盤(dvd)、磁帶、盒式磁帶等。指令可包括任何適合類型的代碼，如源代碼、編譯代碼、解釋代碼、可執(zhí)行代碼、靜態(tài)代碼、動態(tài)代碼等?？墒褂萌魏芜m合的高級、低級、面向?qū)ο?、可視、編譯和/或解釋的編程語言，如c、c++、java、basic、perl、matlab、pascal、visualbasic、匯編語言、機(jī)器代碼等。計算機(jī)系統(tǒng)可進(jìn)一步包括諸如監(jiān)視器的顯示裝置、諸如鍵盤的字母數(shù)字輸入裝置以及諸如鼠標(biāo)的定向輸入裝置。實施例將通過具體實施例更詳細(xì)地描述本發(fā)明。提供以下實施例僅用于說明目的，并不意在以任何方式限制本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地認(rèn)識到可改變或修改以產(chǎn)生基本上相同結(jié)果的各種非關(guān)鍵參數(shù)。實施例1(堿度測定試劑盒)在添加樣品后，用依序增加量的酸填充96孔微孔板的微孔(300微升)，以產(chǎn)生表1中所列的ph值。向每個孔中添加溴甲酚綠(0.00028mg，(usa))和(2-羥基丙基)-β-環(huán)糊精(0.01mg)。將所得的滴定劑水溶液在-60℃和100毫托凍干。表1孔號ph14.19928292222.79674947632.50440016542.33124145852.20777645762.11175309272.03316395181.96664058991.908966484101.858061333111.812501841121.771271221131.733617761141.698970004實施例2(水體的堿度的確定)堿度測定.將含有未知量的碳酸根離子的分析物溶液(300微升)添加到實施例1中制備的96孔板的微孔中。在凍干滴定劑樣品溶解后，將微孔板置于板讀數(shù)器中，并確定板的吸光度值。基于堿度測定從3個產(chǎn)生的水體的運行中收集表2中所示的數(shù)據(jù)。每組2列中的值表示完整測定的14個孔。給出的第一行是空白。使用行“空白460”和“空白620”給出的吸光度比率來計算每個樣品的堿度。這使得可以分別計算3個樣品的832+/-40、543+/-40和294+/-40ppm堿度。表21234560.0660.0640.0330.0320.0360.0334600.0430.0420.0340.0320.0350.0336200.0260.025-0.006-0.007-0.003-0.006空白4600.0080.007-0.001-0.0030-0.002空白6200.10.1170.0750.2310.0720.2314600.490.4890.490.0370.4880.0366200.060.0780.0360.1920.0330.192空白4600.4550.4540.4550.0020.4530.001空白6200.0910.1140.0620.2480.0640.2324600.5130.4720.5060.0550.4990.0366200.0520.0750.0230.2080.0250.193空白4600.4780.4370.4710.020.4640.001空白6200.090.1260.0630.2330.0770.234600.5060.4550.5080.0410.460.0366200.0510.0860.0240.1940.0380.19空白4600.4710.420.4730.0060.4250.001空白6200.1020.2240.0630.2450.1970.2314600.5190.2980.4980.0530.1540.0376200.0630.1850.0240.2060.1570.192空白4601234560.4840.2630.4630.0180.1190.002空白6200.090.2450.0950.2340.230.2334600.4850.0620.4320.040.0440.0356200.0510.2050.0560.1950.1910.194空白4600.450.0270.3970.0050.0090空白6200.1120.3050.140.2250.2320.2324600.5040.1210.3590.0350.040.0376200.0720.2660.1010.1860.1930.193空白4600.4690.0860.32400.0050.002空白6200.1030.2360.2110.2150.2180.224600.4660.0590.1690.0350.0380.0366200.0640.1970.1720.1760.1780.18空白4600.430.0240.13400.0030.001空白620當(dāng)前第1頁12