一種利用fgf21因子診斷奶牛隱性酮病的方法
【專利摘要】一種利用FGF21因子診斷奶牛隱性酮病的方法。FGF21因子與奶牛隱性酮病呈正相關(guān)，應(yīng)用ELISA試劑盒和生化分析儀測(cè)定牛血清中FGF21因子濃度以及酮病、隱性酮病時(shí)奶牛血清指標(biāo)，通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析FGF21與隱性酮病呈明顯相關(guān)，與臨床酮病無(wú)相關(guān)性；當(dāng)335ng/ml<FGF21<443ng/ml時(shí)可以診斷為奶牛隱性酮病。該方法確定FGF21與奶牛隱性酮病呈正相關(guān)，奶牛血清FGF21可以替代BHBA診斷奶牛隱性酮病，因此能夠較早的監(jiān)測(cè)出隱性酮病將會(huì)減少奶牛養(yǎng)殖業(yè)的損失。
【專利說(shuō)明】-種利用FGF21因子診斷奶牛隱性酮病的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種診斷奶牛隱性酮病的方法，特別是一種利用FGF21因子診斷奶牛 隱性酮病的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 奶牛養(yǎng)殖業(yè)是我國(guó)畜牧業(yè)產(chǎn)業(yè)支柱之一，但是奶牛酮病給奶牛業(yè)帶來(lái)了較嚴(yán)重 經(jīng)濟(jì)損失。尤其是奶牛隱性酮病，由于隱性酮病臨床癥狀不明顯，這就給診斷和防治帶來(lái) 了極大的困難，因此較早的監(jiān)測(cè)出隱性酮病將會(huì)減少奶牛養(yǎng)殖業(yè)的損失。
[0003] FGF21是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族成員之一。最新研究表明，F(xiàn)GF21刺激脂肪細(xì)胞 攝取葡萄糖，而對(duì)其它類型細(xì)胞沒(méi)有這個(gè)作用，這種作用實(shí)際上是相當(dāng)于增強(qiáng)了胰島素活 性。肥胖小鼠注射FGF21后，脂肪組織葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1顯著增力口。在飲食誘導(dǎo)肥胖、低血 糖和高甘油三酯水平情況下，F(xiàn)GF21對(duì)糖尿病老鼠具有保護(hù)作用。進(jìn)一步的研究結(jié)果表明， 動(dòng)物注射FGF21后，導(dǎo)致能量消耗增加，脂肪利用和脂質(zhì)排泄加快。且有FGF21可以用來(lái)作 為診斷脂肪肝的報(bào)道。
[0004] 目前隱性酮病的監(jiān)測(cè)主要是根據(jù)BHBA濃度變化，當(dāng)1. 2mmol/L〈BHBA〈l. 6mmol/L 時(shí)可診斷為奶牛隱性酮病，但是此種方法敏感性較低，容易造成漏診。因此需要尋找靈敏度 更高的因子進(jìn)行奶牛隱性酮病的監(jiān)測(cè)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供一種利用FGF21因子診斷奶牛隱性酮病的方法，所述FGF21對(duì)奶牛酮 病時(shí)酮體改變比較敏感，特別是在奶牛隱性酮病階段，闡明能量代謝特征性指標(biāo)BHBA與體 內(nèi)FGF21之間的關(guān)系，表明FGF21與奶牛隱性酮病呈正相關(guān)。
[0006] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種利用FGF21因子診斷奶牛隱性酮病的方 法，F(xiàn)GF21因子與奶牛隱性酮病密切相關(guān)，應(yīng)用ELISA試劑盒和生化分析儀測(cè)定牛血清中 FGF21因子濃度以及酮病、隱性酮病時(shí)奶牛血清指標(biāo)，通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析FGF21與隱性酮病呈 明顯相關(guān)，與臨床酮病無(wú)相關(guān)性；當(dāng)335ng/ml〈FGF21〈443ng/ml時(shí)可以診斷為奶牛隱性酮 病。
[0007] 上述方案中的分析血清FGF21代謝指標(biāo)與臨床酮病組、隱性酮病組、健康組主要 檢測(cè)結(jié)果，臨床酮病組，隱性酮病組和健康組血清FGF21具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P〈0. 05 ;健康 組，隱性酮病組、臨床酮病組比較血清中BHBA具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P〈0. 05 ;隱性酮病時(shí)血清 FGF21因子與BHBA呈正相關(guān)，r = 0.659, p = 0.005 ;臨床酮病時(shí)血清FGF21因子與BHBA 無(wú)相關(guān) r = 0· 005, p = 0· 979。
[0008] 本發(fā)明具有的有益效果是：本發(fā)明基于上述背景通過(guò)對(duì)奶牛臨床酮病、隱性酮 病和健康奶牛血液中FGF21對(duì)奶牛酮病時(shí)重要中間代謝產(chǎn)物BHBA水平反應(yīng)，明確隱性酮 病時(shí)奶牛體內(nèi)FGF21變化規(guī)律，測(cè)量牛群樣本中的代謝指標(biāo)及FGF21因子，確定FGF21 與奶牛隱性酮病呈正相關(guān)，奶牛血清FGF21可以替代BHBA診斷奶牛隱性酮病，當(dāng)335ng/ ml〈FGF21〈443ng/ml時(shí)可以確定奶牛為隱性酮病，因此能夠較早的監(jiān)測(cè)出隱性酮病將會(huì)減 少奶牛養(yǎng)殖業(yè)的損失。

【具體實(shí)施方式】
[0009] 下面結(jié)合實(shí)驗(yàn)對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明：
[0010] 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：奶牛均來(lái)自黑龍江省密山某牛場(chǎng)，奶牛間年齡、胎次差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué) 意義，所有奶牛圍產(chǎn)期TMR飼喂。BHBA>1.2mm 〇l/L作為診斷奶牛酮病標(biāo)準(zhǔn)，如果奶 牛血清中BHBA>1.6mmol/L，且表現(xiàn)明顯臨床癥狀，被診斷為臨床酮病組；如果1. 2mmol/ L〈BHBA〈1. 6mmol/L，且沒(méi)有明顯臨床癥狀，被診斷為隱性酮病組；BHBA〈1. 2mmol/L且沒(méi)有 任何臨床癥狀表現(xiàn)，作為健康組。其中健康30頭，隱性30頭，臨床30頭。此外，其中患 有乳腺炎，子宮炎，流產(chǎn)，由于藥物導(dǎo)致的肝病，發(fā)熱等疾病的奶牛被排除本試驗(yàn)。
[0011] 樣品采集和處理
[0012] 所有奶牛均于早晨空腹抽取尾靜脈血，不加抗凝劑，將采樣試管置于冰盒之中，lh 之內(nèi)被帶回實(shí)驗(yàn)室，3000g離心15min，分離血清-20°c下保存?zhèn)溆谩?br> [0013] 指標(biāo)測(cè)定方法：FGF21使用RD牛成纖維細(xì)胞因子ELISA試劑盒，其余代謝指標(biāo)分 別在自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行測(cè)定。
[0014] 數(shù)據(jù)分析：所有數(shù)據(jù)應(yīng)用IBMSPSS19. 0軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用均數(shù)以i±s表 示，組間均值差異顯著性采用單因素方差統(tǒng)計(jì)分析，相關(guān)性分析采用Pearson直線相關(guān)性 分析。p〈0. 05為顯著相關(guān)。
[0015] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0016] 單因素方差分析90例奶牛的FGF21，血糖，BHBA，NEFA檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。
[0017] 表1奶牛血清主要檢測(cè)指標(biāo)情況
[0018]

【權(quán)利要求】
1. 一種利用FGF21因子診斷奶牛隱性酮病的方法，其特征在于：FGF21因子與奶牛隱 性酮病密切相關(guān)，應(yīng)用ELISA試劑盒和生化分析儀測(cè)定牛血清中FGF21因子濃度以及酮病、 隱性酮病時(shí)奶牛血清指標(biāo)，通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析FGF21與隱性酮病呈明顯相關(guān)，與臨床酮病無(wú) 相關(guān)性；當(dāng)335ng/ml〈FGF21〈443ng/ml時(shí)可以診斷為奶牛隱性酮病。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用FGF21因子診斷奶牛隱性酮病的方法，其特征在于：分 析血清FGF21代謝指標(biāo)與臨床酮病組、隱性酮病組、健康組主要檢測(cè)結(jié)果，臨床酮病組，隱 性酮病組和健康組血清FGF21具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P〈0. 05 ;健康組，隱性酮病組、臨床酮病組 比較血清中BHBA具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P〈0. 05 ;隱性酮病時(shí)血清FGF21因子與BHBA呈正相關(guān)， r = 0· 659, p = 0· 005 ;臨床酮病時(shí)血清 FGF21 因子與 BHBA 無(wú)相關(guān) r = 0· 005, p = 0· 979。
【文檔編號(hào)】G01N33/68GK104215774SQ201410418651
【公開(kāi)日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2014年8月22日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月22日
【發(fā)明者】徐闖, 陳媛媛, 夏成, 張洪友, 許秋實(shí), 楊威 申請(qǐng)人:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)