中華鱘等滲鹽度點的實驗及計算方法
【專利摘要】中華鱘等滲鹽度點的實驗及計算方法，該方法步驟如下：先將中華鱘血液，制備血清，備用；然后測定6-15份同齡但不同個體的中華鱘血清的滲透壓值，并利用統(tǒng)計軟件SASV8計算血清滲透壓均值，制成表格，再將淡水中血清滲透壓轉(zhuǎn)化為等滲點鹽度條件下的血清滲透壓，即血清滲透壓均值即為環(huán)境滲透壓，最后根據(jù)公式計算出中華鱘的等滲點。本方法簡單易行，克服了設(shè)立多梯度鹽度組、實驗系統(tǒng)難實現(xiàn)，難操作，樣本數(shù)少等實驗問題，為揭示各齡中華鱘的等滲鹽度點提供了較好的方法。
【專利說明】中華鱘等滲鹽度點的實驗及計算方法【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬水產(chǎn)科學(xué)領(lǐng)域，特別涉及到中華鱘的等滲鹽度點的研究。
【背景技術(shù)】
[0002]全世界現(xiàn)存27種鱘魚中有16種屬于廣鹽性魚類，即在淡水和咸水中均能生存，包括中華鱘。中華鱘屬于國家一級保護動物，瀕危等級為極危，為保護這一物種國家投入了大量的人財物力。等滲點鹽度，是指魚體生長的一定鹽度的環(huán)境水體滲透壓等于魚自身滲透壓。在等滲環(huán)境下，魚類不用在滲透壓調(diào)節(jié)方面消耗能量，同時等滲鹽度對血液電解質(zhì)組成有顯著影響。因此，找到中華鱘等滲點格外重要。另外，滲透壓和年齡相關(guān)性顯著，隨年齡變化滲透壓顯著變化。故找到中華鱘各年齡段的等滲點鹽度或者等滲點鹽度關(guān)于年齡的變化方程對物種保護意義重大。
[0003]現(xiàn)有關(guān)于等滲點求法的實驗的描述，具體是將實驗對象養(yǎng)殖在4-5個不同的梯度鹽度下，由于實驗對象對新的鹽度環(huán)境的應(yīng)激，需要使實驗對象適應(yīng)新環(huán)境，消除應(yīng)激，從而得到準(zhǔn)確的實驗數(shù)據(jù)。在等到實驗對象適應(yīng)新的環(huán)境后，進入長期養(yǎng)殖階段，該階段一般持續(xù)10-20天，期間保證實驗對象行為和攝食均正常。然后抽取血液，制備血清。待血清穩(wěn)定后，測定各鹽度下制備的實驗對象血清和環(huán)境滲透壓，用鹽度或者環(huán)境滲透壓(X軸)建立血清滲透壓(Y軸)的函數(shù)關(guān)系式，再令Y=X，即得出等滲滲透壓，相應(yīng)的鹽度即為等滲鹽度(Sampaio, 2002).考慮到實驗樣本數(shù)需求(5_30)，以及過程操作(各個梯度鹽度環(huán)境的設(shè)置、空間的麻醉、采血)。該方法一般需要建立以下條件:1.各個梯度鹽度環(huán)境的設(shè)置，需要有足夠多的海水或者海水素進行稀釋；或者價格昂貴的維生系統(tǒng)保證鹽度環(huán)境的質(zhì)量；2.需要額外建立較大的實驗場所和空間，特別對于像中華鱘這樣的大型魚類，體長達(dá)到2 m以上后，難有理想的實驗系統(tǒng)滿足其生長環(huán)境；因此，用該方法很難完實現(xiàn)中華鱘各年齡段的鹽度實驗。而特別對于成年中華鱘而言，目前遷地保護下養(yǎng)殖在淡水水體，如經(jīng)同樣的方法來計算等滲點，不僅面臨以上困難，還面臨著樣本數(shù)量不足的問題。如果僅以淡水一個鹽度作為實驗組，那么就可以節(jié)約使用3-4組實驗對象。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種中華鱘等滲鹽度點的實驗及計算方法，該方法不僅適用于小型中華鱘，也適用于于成年中華鱘，且該方法簡單易行，克服了設(shè)立多梯度鹽度組、實驗系統(tǒng)難實現(xiàn)，難操作，樣本數(shù)少等實驗問題，為揭示各齡中華鱘的等滲鹽度點提供了較好的方法。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為:
中華鱘等滲鹽度點的實驗及計算方法，其特征在于:該方法步驟如下:
1.將中華鱘血液，制備血清，備用；
2.測定6-15份同齡但不同個體的中華鱘血清的滲透壓值，并利用統(tǒng)計軟件SASV8計算血清滲透壓均值，制成表格。[0006]3.將淡水中血清滲透壓轉(zhuǎn)化為等滲點鹽度條件下的血清滲透壓，即血清滲透壓均值即為環(huán)境滲透壓“Yw”。
[0007]4.將各年齡段中華鱘血清均滲透壓均值帶入下列公式式:Yw=8.45293+26.6572x，其中“Yw”表示環(huán)境滲透壓，“x”表示鹽度，以血清滲透壓為Yw賦值，即可計算出中華鱘的等滲點X。
[0008]本發(fā)明的積極效果為:
1.本發(fā)明證明了在中華鱘在淡水滲透壓等于等滲環(huán)境的滲透壓，為求中華鱘等滲鹽度點提供了捷徑。
[0009]2.本發(fā)明克服了設(shè)立多梯度鹽度組、較大的實驗場地和空間等實驗等問題，同時無需購買特別的維生系統(tǒng)和實驗設(shè)備，極大地節(jié)約了資金和人力支出。只需在淡水中進行適應(yīng)養(yǎng)殖，而目前中華鱘子一代后代均在淡水中養(yǎng)殖，為實驗提供了極大的便利。
[0010]3.緩解了實驗樣本少的問題。
【具體實施方式】
[0011]下面結(jié)合實施例，對本發(fā)明作進一步說明。
[0012]實施例一
12齡中華鱘等滲點的實驗及計算方法
1、12齡中華鱘血清的制備
將11份12齡中華鱘血液各1ml，靜置2小時后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘，得上清液即制得 血清。
[0013]2、血清滲透壓的測定
血清滲透壓經(jīng)由冰點滲透壓儀測定，取20 μ L血清于Advanced 210微量樣品滲透壓管，探針測得冰點值，然后轉(zhuǎn)化滲透壓值。滲透壓值見表1。
[0014]表1淡水環(huán)境中12齡中華鱘血清滲透壓_
【權(quán)利要求】
1.中華鱘等滲鹽度點的實驗及計算方法，其特征在于:該方法步驟如下: (1)將中華鱘血液，制備血清，備用； (2)測定6-15份同齡但不同個體的中華鱘血清的滲透壓值，并利用統(tǒng)計軟件SASV8計算血清滲透壓均值，制成表格； (3)將淡水中血清滲透壓轉(zhuǎn)化為等滲點鹽度條件下的血清滲透壓，即血清滲透壓均值即為環(huán)境滲透壓“Yw”； (4)將各年齡段中華鱘血清均滲透壓均值帶入下列公式式:Yw=8.45293+26.6572x ，其中“Yw”表示環(huán)境滲透壓，“x”表示鹽度，以血清滲透壓為Yw賦值，即可計算出中華鱘的等滲點X。
【文檔編號】G01N33/48GK103808915SQ201410081824
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2014年3月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月7日
【發(fā)明者】李偉, 危起偉, 李創(chuàng)舉, 劉志剛 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所