專利名稱：一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及蛋白芯片技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說，涉及一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片。
背景技術(shù)：
近年來，惡性腫瘤已經(jīng)成為嚴(yán)重影響人類健康、威脅人類生命的主要疾病之一，且治療費(fèi)用昂貴，但是惡性腫瘤并非不治之癥，其早期檢測及診斷對于降低患者死亡率與改善治療效果有重大意義。只要早發(fā)現(xiàn)，早治療，治愈率可達(dá)90%以上，而且早期治療費(fèi)用也 相對低廉。隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的發(fā)展，惡性腫瘤的早期診斷方面取得了非常巨大的進(jìn)步。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對惡性腫瘤的早期診斷有許多方法，包括影像學(xué)檢查、內(nèi)鏡檢查、病理形態(tài)學(xué)檢查、血清學(xué)檢查、免疫學(xué)檢查、流式細(xì)胞分析術(shù)(FCM)和基因診斷等等。但檢測方法均存在操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)、重復(fù)、費(fèi)力、成本高等缺點(diǎn)。肺癌是最常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤。由于吸煙以及包括燃燒煤炭在內(nèi)的環(huán)境污染，近年來，由于吸煙人群的上升和環(huán)境因素的改變，肺癌的發(fā)病率和病死率均迅速上升，死于癌病的男性病人中肺癌已居首位。鑒于肺癌的病死率極高，平均5年生存率不到10%，因此，早期發(fā)現(xiàn)肺癌，以爭取采用以手術(shù)為主的綜合治療措施，是提高5年生存率的關(guān)鍵。早期肺癌與肺部感染常有相似癥狀，中晚期肺癌中相當(dāng)一部分患者因各種原因而無法得到明確診斷。血清腫瘤標(biāo)志物的檢測對肺癌診斷、治療、愈后判斷及病情進(jìn)展具有重要的意義。目前最新的惡性腫瘤早期檢測方法有多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)(C12芯片)、腫瘤基因突變檢測試劑盒、六項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物測定試劑盒、人惡性腫瘤特異性生長因子(TSGF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒。但是，多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)(C12芯片)的檢測假陽性較高，且沒有具有針對性的肺癌檢測標(biāo)志物，檢測效率低。腫瘤基因突變檢測試劑依靠聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)這樣繁復(fù)的操作，且容易產(chǎn)生假陽性，是一種不可靠的分析方法。六項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物測定試劑盒和人惡性腫瘤特異性生長因子(TSGF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒，只能測出患者有腫瘤，但不能判斷腫瘤的具體類型。
發(fā)明內(nèi)容I.實(shí)用新型要解決的技術(shù)問題本實(shí)用新型的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中蛋白芯片對肺癌檢測效率低，且無法做到對各種常見類型癌癥進(jìn)行普查的缺點(diǎn)，提供一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片，采用本實(shí)用新型的蛋白芯片，通過一次檢測及分析，可同時(shí)檢出多位被檢者體內(nèi)是否存在肺癌等多種癌癥癥狀，通過多種標(biāo)志物的聯(lián)合檢測，可以進(jìn)行多種肺癌的聯(lián)合普查，且靈敏度高，可靠性強(qiáng)，可以作為臨床診斷的依據(jù)。2.技術(shù)方案為達(dá)到上述目的，本實(shí)用新型提供的技術(shù)方案為[0009]本實(shí)用新型的一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片，包括片基和分布于片基上的標(biāo)志物抗體，所述的片基為具有三維硝酸纖維素基質(zhì)的FAST蛋白芯片片基，該FAST蛋白芯片片基上設(shè)有一個(gè)或一個(gè)以上的點(diǎn)樣模塊，所述的點(diǎn)樣模塊上固定有如下標(biāo)志物抗體14-3-3 Θ、LAMR-I、TSGF、CEA、SCC、CYFRA21-1 和陽性對照。作為本實(shí)用新型更進(jìn)一步地改進(jìn)，所述的點(diǎn)樣模塊上還固定有如下標(biāo)志物抗體AFP、CA242、MG-Ag、CA199、TPA 和 EA-IgA。作為本實(shí)用新型更進(jìn)一步地改進(jìn)，所述的點(diǎn)樣模塊上還固定有如下標(biāo)志物抗體CA125、CA153、SF 和 PSA。作為本實(shí)用新型更進(jìn)一步地改進(jìn)，所述的FAST蛋白芯片片基為長方體結(jié)構(gòu)，其上 表面上設(shè)置有16個(gè)點(diǎn)樣模塊，所述的點(diǎn)樣模塊上設(shè)置有五 七行、六列圓形的點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽，所述的標(biāo)志物抗體固定于上述點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽內(nèi)。本實(shí)用新型中各癌癥的標(biāo)志物按照特異性與普遍性相結(jié)合的特點(diǎn)取長補(bǔ)短而設(shè)計(jì)點(diǎn)樣完成，從這種角度出發(fā)真正做到檢測的廣泛性與特異性相結(jié)合，達(dá)到檢出的高準(zhǔn)確率，各癌癥與各種標(biāo)志物的對應(yīng)性關(guān)系如下表I和表2，其中表I為以肺癌為主的各癌癥與標(biāo)志物對應(yīng)關(guān)系，表2為男女特有癌癥與標(biāo)志物對應(yīng)關(guān)系。采用以上癌癥標(biāo)志物的選擇原貝U，使蛋白芯片具有更好的臨床適用性，將廣泛性與特異性有效結(jié)合，這樣的設(shè)計(jì)可以使臨床醫(yī)生更好的做診斷參照，本實(shí)用新型的多樣本高通量的芯片設(shè)計(jì)平臺更適合高密度的臨床普查。表I以肺癌為主的各癌癥與標(biāo)志物對應(yīng)關(guān)系
類望際龍枋
!4-3-.W LAMR-I 丁 SGF CIA SCC CYFRAH
Ir*AfP_
胃邊 CA242 CEA MG-Ag CA 19911 CEA CAim CA242 TPA
+1: CEA SCC 暴殘- EA-IgA
CA242 CAim CEA表2男女特有癌癥與標(biāo)志物對應(yīng)關(guān)系
I 璧登類^
[Sljg .(女 i SCC CEA CA125 CYFRA21-1I 乳變g.:+女 I CA15-J CEA SF CYFRA2I-1 TPA i PBm ::女) CA! 25 CA 199 SF3.有益效果采用本實(shí)用新型提供的技術(shù)方案，與已有的公知技術(shù)相比，具有如下顯著效果使用本實(shí)用新型的一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片，不僅具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確率高、結(jié)果穩(wěn)定、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，而且操作簡便，是醫(yī)務(wù)工作者對肺癌和其他多種癌癥早期診斷的可靠工具手段，提高了勞動(dòng)效率，節(jié)省國家財(cái)力物力，使患者更早接受治療，提聞了存活率。同時(shí)，將多種癌癥指標(biāo)聞度集成，能提聞芯片的使用率，芯片本身設(shè)計(jì)的準(zhǔn)確性和靈敏性。以肺癌為主的多癌癥普查蛋白芯片的建立是極具針對性的對專一癌癥的血清學(xué)檢測，且可以集成其他多種癌癥標(biāo)志物抗體，對于肺癌的檢出提供依據(jù)，是一種有效的臨床檢測肺癌的手段，對肺癌的治療具有深刻意義，有效地提高了肺癌的存活率。

圖I為本實(shí)用新型肺癌芯片的點(diǎn)樣設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖；圖2為本實(shí)用新型以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片的點(diǎn)樣設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖；圖3為本實(shí)用新型擴(kuò)展男女特有癌癥的以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片的點(diǎn)樣設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖；圖4為本實(shí)用新型的四張芯片制成的芯片組結(jié)構(gòu)示意圖。不意圖中的標(biāo)號說明10、芯片組；11、FAST蛋白芯片片基；12、點(diǎn)樣I旲塊；13、點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽。
具體實(shí)施方式
為進(jìn)一步了解本實(shí)用新型的內(nèi)容，結(jié)合附圖和實(shí)施例對本實(shí)用新型作詳細(xì)描述。實(shí)施例I結(jié)合圖1，本實(shí)施例的蛋白芯片適用于肺癌早期普查，包括片基和分布于片基上的標(biāo)志物抗體，本實(shí)施例的片基為具有三維硝酸纖維素基質(zhì)的FAST蛋白芯片片基11，蛋白芯片技術(shù)的檢測效能依賴于蛋白質(zhì)與載體平面的穩(wěn)定性，早期肺癌普查蛋白芯片的癌癥標(biāo)志物其生物學(xué)活性較難維持，在傳統(tǒng)的芯片載體上固定效率低，且不穩(wěn)定，這樣限制了這種芯片的檢測效力，三維硝酸纖維素基質(zhì)是一種三維立體結(jié)構(gòu)，這種基質(zhì)可與蛋白質(zhì)產(chǎn)生不可逆的非共價(jià)結(jié)合，且三維硝酸纖維結(jié)構(gòu)從光學(xué)角度出發(fā)對蛋白信號接收強(qiáng)度有較寬的閾值，使檢測蛋白的濃度低達(dá)pg/ml級。本實(shí)施例的FAST蛋白芯片片基11為長方體結(jié)構(gòu)，該FAST蛋白芯片片基11上設(shè)置有16個(gè)點(diǎn)樣模塊12，每個(gè)點(diǎn)樣模塊12適用于一個(gè)被檢者，這16個(gè)點(diǎn)樣模塊12分為兩列，每一列為8個(gè)點(diǎn)樣模塊12，根據(jù)實(shí)際需要，也可以設(shè)計(jì)成4個(gè)、6個(gè)等多個(gè)點(diǎn)樣模塊12的FAST蛋白芯片片基11，點(diǎn)樣模塊12上設(shè)置有五行六列圓形的點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽13，點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽13內(nèi)固定有如下標(biāo)志物抗體14-3-3 Θ、LAMR-1、TSGF、CEA、SCC、CYFRA21-1和陽性對照，通過大量研究表明，肺癌六種腫瘤標(biāo)志物14_3_3 Θ、LMAR-I、TSGF, CEA、SCC、CYFRA21-1是早期肺癌檢出效率的保證，是肺癌檢測中不可或缺的標(biāo)準(zhǔn)肺癌血清學(xué)檢測標(biāo)志物，本實(shí)用新型將特異性肺癌標(biāo)志物14-3-3 Θ、LMAR-I與普遍性腫瘤標(biāo)志物TSGF、CEA、SCC、CYFRA21-1結(jié)合檢測，六種標(biāo)志物作為一個(gè)整體，是肺癌血清學(xué)檢測的核心標(biāo)志物，其他肺癌檢測可以基于這六種腫瘤標(biāo)志物加以設(shè)計(jì)，但必不可缺，能提高肺癌的檢測效率。本實(shí)施例中從上到下、從左到右數(shù)，點(diǎn)樣模塊12第一行固定有陽性對照I、陽性對照2 ;第二行固定有14-3-3 Θ、LAMR-I ;第三行固定有TSGF、CEA ;第四行固定有SCC、CYFRA21-1 ;第五行固定有陽性對照3、陽性對照4。值得說明的是，可以將本實(shí)用新型的四張蛋白芯片組合制成一個(gè)芯片組10，其結(jié)構(gòu)示意圖如圖4所示，這樣適合更多的被檢者使用，可用于早期肺癌普查使用。對于上述癌癥的標(biāo)志物作如下說明1) 14-3-3 Θ，能夠引起肺癌患者機(jī)體自身免疫，產(chǎn)生相應(yīng)抗體，研究發(fā)現(xiàn)，其特異性高達(dá)95%，靈敏度為55%，適合作為肺癌早期診斷的一種標(biāo)志物；2)LAMR-I，層粘連蛋白受體1，LAMR-I參與細(xì)胞的黏附、轉(zhuǎn)移和侵襲，其前體蛋白作為核蛋白參與細(xì)胞蛋白的合成，是具有轉(zhuǎn)移性的肺癌早期診斷標(biāo)志物；3)TSGF，腫瘤特異性生長因子(Tumor Supplied Group of Factors),當(dāng)腫瘤產(chǎn)生時(shí),血液中腫瘤相關(guān)物質(zhì)含量升高，是腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)、術(shù)后及放、化療、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的重要線索，臨床試驗(yàn)證明，測定血清中腫瘤相關(guān)物質(zhì)的含量，將為腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)、篩查，良性腫瘤的鑒別和患者病情變化的動(dòng)態(tài)檢測提供有效的參考依據(jù)；4) CEA,癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen),在正常人血清中僅能測出微量CEA，已經(jīng)證實(shí)肺癌細(xì)胞能直接產(chǎn)生CEA，因此測定血清中CEA含量可作為診斷肺癌的一項(xiàng)指標(biāo)，研究表明，肺癌血清CEA陽性率為40°/Γ80%，在肺腺癌組織中·的陽性撿出率最高，通常為7(T90%，CEA對診斷腺癌的臨床價(jià)值較大，其中主要是肺腺癌廣泛期小細(xì)胞肺癌病人血清CEA水平顯著高于局限性病變，可考慮作為評價(jià)預(yù)后的指標(biāo)，在非小細(xì)胞肺癌等患者亦可出現(xiàn)不同程度的升高，是臨床常用的經(jīng)典的診斷指標(biāo)；5) SCCJ-狀細(xì)胞癌抗原(Squamous cell carcinoma antigen),為避免其他因素影響CEA陽性患者的診斷，本實(shí)用新型加入SCC標(biāo)志物，肺鱗狀細(xì)胞癌可有50%陽性率，而其他肺癌的陽性率不足30%，故SCC是普遍的肺癌標(biāo)志物；6) CYFRA21-1，細(xì)胞角蛋白19片段，上皮細(xì)胞凋亡時(shí)，細(xì)胞中含有的角蛋白的碎片降解后變成可溶性物質(zhì)而進(jìn)入血液，使血中含量增高，是非小細(xì)胞肺癌的首選標(biāo)志物，特別是鱗狀上皮細(xì)胞癌目前首選的癌癥標(biāo)志物，靈敏度可達(dá)60%，特異性可達(dá)95%，它對非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的早期診斷、療效監(jiān)測和預(yù)后判斷均有重要意義，除了在肺癌中表達(dá)外在其他癌癥中亦有表達(dá)，尤其是女性宮頸癌、乳腺癌患者，有證據(jù)表明CEA和SCC、CYFRA21-1聯(lián)合肺癌血清學(xué)檢測有極高的檢出率。本實(shí)施例的蛋白芯片制備方法如下(I)根據(jù)不同癌癥類型的相關(guān)癌癥標(biāo)志物設(shè)計(jì)適當(dāng)?shù)年嚵信挪迹鶕?jù)接觸點(diǎn)樣原理用高速全自動(dòng)點(diǎn)樣儀將多種癌癥標(biāo)志物抗體及陽性對照固定于三維硝酸纖維素基質(zhì)的FAST蛋白芯片片基11的同一點(diǎn)樣模塊12 ；(2)常溫條件下(約25°C左右)過夜孵育，使蛋白質(zhì)的氨基與硝酸纖維上的硝酸基發(fā)生縮合反應(yīng)，以固定樣品；(3)利用制作蛋白芯片的常規(guī)方法進(jìn)行封閉、洗滌、干燥、包裝、保存等。本實(shí)施例的蛋白芯片雜交反應(yīng)如下(I)在點(diǎn)好的蛋白芯片上滴加待測血清和封閉緩沖液，室溫常溫下孵育過夜；(2)用配好用于FAST蛋白芯片的洗脫液洗去多余樣品；
(3)滴加封閉液稀釋過的生物素標(biāo)記的抗癌癥標(biāo)志物抗體混合物(其中含重組抗原溶液)，室溫常溫孵育f 20分鐘后洗去未結(jié)合物；(4)滴加封閉液稀釋過的熒光標(biāo)記的抗癌癥標(biāo)志物抗體混合物，室溫常溫孵育廣20分鐘后洗去未結(jié)合物；(5)最后用去離子水充分沖洗并晾干待檢。反應(yīng)結(jié)束后，利用芯片掃描儀進(jìn)行結(jié)果的采集與判讀，樣品點(diǎn)的熒光強(qiáng)度與血清中的癌癥標(biāo)志物的含量成正相關(guān)，且可以按需計(jì)算出血清中癌癥標(biāo)志物的具體含量，可以用專業(yè)的FAST蛋白芯片數(shù)據(jù)處理軟件MicroVigene進(jìn)行進(jìn)一步分析。實(shí)施例2結(jié)合圖2，本實(shí)施例是以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片包括片基和分布于片基上的標(biāo)志物抗體，本實(shí)施例的片基為具有三維硝酸纖維素基質(zhì)的FAST蛋白芯片片基11，F(xiàn)AST蛋白芯片片基11為長方體結(jié)構(gòu)，該FAST蛋白芯片片基11上設(shè)置有16個(gè)點(diǎn)樣模塊12，每個(gè)點(diǎn)樣模塊12適用于一個(gè)被檢者，這16個(gè)點(diǎn)樣模塊12分為兩列，每一列為8個(gè)點(diǎn)樣模塊12，點(diǎn)樣模塊12上設(shè)置有七行六列圓形的點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽13，點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽13內(nèi)固定有如下標(biāo)志物抗體14-3-3 Θ、LAMR-U TSGF, CEA、SCC、CYFRA21-1、AFP、CA242、MG-Ag,CA199、TPA、EA-IgA和陽性對照，本實(shí)施例中從上到下、從左到右數(shù)，點(diǎn)樣模塊12第一行固定有陽性對照1、14-3-3 Θ ;第二行固定有AFP、MG-Ag ;第三行固定有EA_IgA、TSGF ;第四行固定有LAMR-1、TPA ;第五行固定有CA242、CA 199 ;第六行固定有CEA、SCC ;第七行固定有CYFRA21-1、陽性對照2。值得說明的是，可以將本實(shí)用新型的四張蛋白芯片組合制成一個(gè)芯片組10，其結(jié)構(gòu)示意圖如圖4所示，這樣適合更多的被檢者使用，可用于以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查使用。對于上述以肺癌為主的早期癌癥標(biāo)志物作如下說明1)AFP甲胎蛋白，AFP可以在 大約80%的肝癌患者血清中升高，是臨床血清學(xué)診斷肝癌的常用指標(biāo)；2)CA242癌抗原242，CA242是一種唾液酸化的鞘糖脂類抗原，在臨床上被用于消化道惡性癌癥尤其是胰腺癌、結(jié)直腸癌的診斷，與CA199、CA50相比，新一代的CA242在胰腺癌、膽囊癌和消化道癌中的靈敏度、特異性更高；3) MG-Ag胃癌相關(guān)抗原，免疫組化證實(shí)MG-Ag主要分布在胃癌，在肝、胰等腫瘤組織及正常消化道黏膜無分布，其產(chǎn)生、表達(dá)和消長反映著胃癌細(xì)胞的某些生物學(xué)行為改變，有關(guān)研究報(bào)告MG-Ag在胃癌中有819Γ91. 9%的陽性表達(dá)率，可作為胃癌早期診斷的有效指標(biāo)；4) CA199癌抗原199，CA199指一種與胰腺癌、膽囊癌、結(jié)腸癌和胃癌等相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，又稱胃腸道相關(guān)抗原，CA199診斷胃癌的靈敏度為38. 49Γ46. 9% ;5)TPA組織多態(tài)抗原組織多肽抗原，TPA是一種非特異性腫瘤標(biāo)志物，血液內(nèi)TPA水平與細(xì)胞分裂增殖程度密切相關(guān)，惡性腫瘤細(xì)胞分裂，增殖活躍，所以血清中TPA水平增高，正常人陽性率4. 7% ；6)EA-IgA, EB病毒早期抗體，EB病毒與鼻咽癌的發(fā)生緊密聯(lián)系，EA-IgA是臨床上普遍適用的特異檢測鼻咽癌的血清學(xué)指標(biāo)。實(shí)施例3結(jié)合圖3，本實(shí)施例是擴(kuò)展男女特有癌癥的以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片包括片基和分布于片基上的標(biāo)志物抗體，本實(shí)施例的片基為具有三維硝酸纖維素基質(zhì)的FAST蛋白芯片片基11，F(xiàn)AST蛋白芯片片基11為長方體結(jié)構(gòu)，該FAST蛋白芯片片基11上設(shè)置有16個(gè)點(diǎn)樣模塊12，每個(gè)點(diǎn)樣模塊12適用于一個(gè)被檢者，這16個(gè)點(diǎn)樣模塊12分為兩列，每一列為8個(gè)點(diǎn)樣模塊12，點(diǎn)樣模塊12上設(shè)置有六行六列圓形的點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽13，點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽13內(nèi)固定有如下標(biāo)志物抗體14-3-3 Θ、LAMR-I、TSGF、CEA、SCC、AFP、CA242、MG-Ag、CA199、TPA、EA-IgA, CA125、CYFRA21-1、CA153、SF、PSA 和陽性對照，本實(shí)施例中從上到下、從左到右數(shù)，點(diǎn)樣模塊12第一行固定有陽性對照、14-3-3 Θ、AFP ;第二行固定有MG-Ag、EA-IgA、PSA ;第三行固定有 CA153、TSGF、LAMR-I ;第四行固定有 TPA、CA242、CA199 ；第五行固定有CA125、CEA、SCC ;第六行固定有SF、CYFRA21-1和陽性對照。值得說明的是，可以將本實(shí)用新型的四張蛋白芯片組合制成一個(gè)芯片組10，其結(jié)構(gòu)示意圖如圖4所示，這樣適合更多的被檢者使用，可用于擴(kuò)展男女特有癌癥的以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查使用。[0040]對于上述擴(kuò)展男女特有癌癥的以肺癌為主的早期癌癥標(biāo)志物作如下說明1)CA125癌抗原125，是一種糖蛋白，是卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的首選標(biāo)志物，60°/Γ97%陽性率，其他非卵巢惡性腫瘤也有部分CA125陽性，其中肺癌41. 1%，也有研究發(fā)現(xiàn)，CA125在肺癌的陽性率為39%-69% ;2)CA153癌抗原153，CA153是乳腺癌的最重要的特異性標(biāo)志物，30% 50%的乳腺癌患者的CA153明顯升高，其含量的變化與治療效果密切相關(guān)，是乳腺癌患者診斷和監(jiān)測術(shù)后復(fù)發(fā)、觀察療效的最佳指標(biāo)，CA153動(dòng)態(tài)測定有助于II期和III期乳腺癌病人治療后復(fù)發(fā)的早期發(fā)現(xiàn)，當(dāng)CA153大于100U/ml時(shí)，可認(rèn)為有轉(zhuǎn)移性病變；3) SF血清鐵蛋白，SF是鐵的貯存形式，其含量變化可作為判斷是否缺鐵或鐵負(fù)荷過量的指標(biāo)，SF在多種癌癥中顯著升高，并在癌前病變時(shí)即可出現(xiàn)，血清鐵蛋白尚不能獨(dú)立作為癌癥早期診斷指標(biāo)，作為初篩指標(biāo)，可能有一定的潛在價(jià)值；4)PSA前列腺特異性抗原，PSA作為前列腺癌的特異性標(biāo)志物，對前腺癌的診斷特異性達(dá)90% 97%。 以上示意性的對本實(shí)用新型及其實(shí)施方式進(jìn)行了描述，該描述沒有限制性，附圖中所示的也只是本實(shí)用新型的實(shí)施方式之一，實(shí)際的結(jié)構(gòu)并不局限于此。所以，如果本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員受其啟示，在不脫離本實(shí)用新型創(chuàng)造宗旨的情況下，不經(jīng)創(chuàng)造性的設(shè)計(jì)出與該技術(shù)方案相似的結(jié)構(gòu)方式及實(shí)施例，均應(yīng)屬于實(shí)用新型的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求1.一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片，包括片基和分布于片基上的標(biāo)志物抗體，其特征在于所述的片基為具有三維硝酸纖維素基質(zhì)的FAST蛋白芯片片基(11)，該FAST蛋白芯片片基(11)上設(shè)有一個(gè)或一個(gè)以上的點(diǎn)樣模塊(12)，所述的點(diǎn)樣模塊(12)上固定有如下標(biāo)志物抗體14-3-3 9、LAMR-U TSGF, CEA、SCC、CYFRA21-1和陽性對照。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片，其特征在于所述的點(diǎn)樣模塊(12)上還固定有如下標(biāo)志物抗體AFP、CA242、MG-Ag, CA199、TPA和EA-IgA0
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片，其特征在于所述的點(diǎn)樣模塊(12)上還固定有如下標(biāo)志物抗體CA125、CA153、SF和PSA。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片，其特征在于所述的FAST蛋白芯片片基(11)為長方體結(jié)構(gòu)，其上表面上設(shè)置有16個(gè)點(diǎn)樣模塊(12)， 所述的點(diǎn)樣模塊(12)上設(shè)置有五 七行、六列圓形的點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽(13)，所述的標(biāo)志物抗體固定于上述點(diǎn)樣點(diǎn)凹槽(13)內(nèi)。
專利摘要本實(shí)用新型公開了一種以肺癌為主的早期癌癥聯(lián)合普查蛋白芯片，屬于蛋白芯片技術(shù)領(lǐng)域。本實(shí)用新型包括片基和分布于片基上的標(biāo)志物抗體，所述的片基為具有三維硝酸纖維素基質(zhì)的FAST蛋白芯片片基，該FAST蛋白芯片片基上設(shè)有一個(gè)或一個(gè)以上的點(diǎn)樣模塊，所述的點(diǎn)樣模塊上固定有如下標(biāo)志物抗體14-3-3θ、LAMR-1、TSGF、CEA、SCC、CYFRA21-1和陽性對照；還固定有如下標(biāo)志物抗體AFP、CA242、MG-Ag、CA199、TPA和EA-IgA；還固定有如下標(biāo)志物抗體CA125、CA153、SF和PSA。本實(shí)用新型將相關(guān)指標(biāo)高度集成，且穩(wěn)定性好，特異性強(qiáng)，保存期長，靈敏度高，可重復(fù)性好，而且操作簡便，成本低，提高了勞動(dòng)效率，使癌癥患者在臨床癥狀出現(xiàn)前從普查中便能診斷并接受治療。
文檔編號G01N33/574GK202770839SQ20122050162
公開日2013年3月6日 申請日期2012年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月31日
發(fā)明者阮俞敏子, 張荔 申請人:馬鞍山微因泰克生物科技有限公司