硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明的試紙條屬于食品安全快速檢測(cè)領(lǐng)域。試紙條包括底板、附著在底板上依次緊密相連的樣品墊、結(jié)合物釋放墊、反應(yīng)膜和吸水墊，結(jié)合物釋放墊的部分區(qū)域覆蓋于樣品吸收墊之下。在反應(yīng)膜上包被有硝基咪唑類(lèi)-載體蛋白偶聯(lián)物構(gòu)成的檢測(cè)線(xiàn)和包被有羊抗鼠IgG構(gòu)成的質(zhì)控線(xiàn)；結(jié)合物釋放墊包被有硝基咪唑類(lèi)的膠體金標(biāo)記物。該試紙條可以延長(zhǎng)檢測(cè)結(jié)果觀察時(shí)間，樣品吸收墊也可以將檢測(cè)液充分吸收與金標(biāo)抗體完全接觸而充分反應(yīng)，再層析至反應(yīng)膜上進(jìn)行反應(yīng)，可以有效的減少誤差。還可以防止檢測(cè)樣本中的一些干擾成份使金標(biāo)抗體中的蛋白失去活性，影響金標(biāo)抗體與包被原的結(jié)合。
【專(zhuān)利說(shuō)明】硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測(cè)硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條，屬于食品安全快速檢測(cè)領(lǐng)域。
技術(shù)背景
[0002]硝基咪唑類(lèi)藥物是帶有硝基的咪唑化合物，為白色或淡黃色結(jié)晶，弱堿性，能和酸結(jié)合成鹽，遇光易分解，易溶于甲醇，微溶于水，主要用于預(yù)防和治療家禽的滴蟲(chóng)病、豬的出血性下痢及厭氧菌感染。畜禽常用的硝基咪唑類(lèi)藥物包括甲硝唑(metronidazole, MNZ)、二 甲硝咪唑(dimertidazole, DMZ)、異丙硝唑(ipronidazole, IPZ)、洛硝唑ronidazole, DMZ)、奧硝唑(omidazole, ONZ)> 賽克硝唑 secnidazole, SCZ)和替硝唑(tinidazole, TNZ)等。這些藥物在動(dòng)物體內(nèi)通過(guò)C2側(cè)鏈的氧化而被代謝，代謝物與原藥具有相似的潛在毒性。硝基咪唑類(lèi)藥物具有三致作用和遺傳毒性，其中殘留對(duì)食品安全構(gòu)成威脅，因此，在各國(guó)該類(lèi)化合物的使用嚴(yán)格限制。在歐盟，RNZ與1993年，MNZ和IPZ于1998年被禁止用于食品動(dòng)物，DMZ于1995年被禁止作為獸藥使用，但仍可作為飼料添加齊U。2011年11月，歐盟禁止在飼料中投放DMZ作為添加劑。2002年美國(guó)食品與藥物管理局(FDA)公布了禁止在進(jìn)口動(dòng)物源性食品中使用的11中藥物，其中包括了 DMZ及其他硝基咪唑類(lèi)藥物。2003年加拿大公布了新的修改條例，基于缺乏結(jié)合殘留物的毒性信息，而取消所有5-硝基咪唑類(lèi)化合物作為藥物在食源性動(dòng)物中的使用。2002年3月，我國(guó)也開(kāi)始對(duì)硝基咪唑類(lèi)藥物進(jìn)行嚴(yán)格控制，農(nóng)牧發(fā)[2002] I號(hào)文件中規(guī)定在食品動(dòng)物中禁用DMZ和MNZ，在中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY 5030-2006無(wú)公害食品畜禽飼養(yǎng)獸藥使用準(zhǔn)則NY/T472-2006綠色食品獸藥使用準(zhǔn)則中規(guī)定了禁止以促進(jìn)生長(zhǎng)為目的在所有食品動(dòng)物中使用MNZ、DMZ及其鹽、酯及制劑。對(duì)飼料中硝基咪唑類(lèi)藥物的不合理添加而造成的可食源性動(dòng)物組織中藥物殘留問(wèn)題受到世界各國(guó)的關(guān)注。因此研制靈敏、快速、準(zhǔn)確的硝基咪唑類(lèi)藥物的檢測(cè)方法檢測(cè)食源性動(dòng)物組織中是否含有硝基咪唑類(lèi)藥物有著十分重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的:研制出特異、敏感、快速、簡(jiǎn)便的硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條。
[0004]本發(fā)明的技術(shù)方案:
一種硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條，底層為支撐層，中間層吸附層固定在支撐層上，外層保護(hù)膜固定在吸附層上，吸附層從測(cè)試端依次為纖維層，吸附金標(biāo)抗體纖維層，纖維素膜層及手柄端的吸水材料層，其中在纖維素膜層上有用偶聯(lián)硝基咪唑類(lèi)藥物的載體蛋白溶液印制的直線(xiàn)式檢測(cè)印跡，用羊抗或兔抗小鼠IgG溶液印制的直線(xiàn)式對(duì)照印跡，檢測(cè)印跡和對(duì)照印跡平行組合排列為“ II ”。支撐層是用不吸水的硬質(zhì)塑膠片條或硬紙條制成。測(cè)試端纖維層用玻璃棉、或尼龍膜、或聚偏二氟乙烯(PVDF)膜、或聚酚膜制成，優(yōu)選玻璃棉。吸水材料層用吸水紙制成。纖維素膜層用硝酸纖維素膜、或純纖維素膜，或梭化纖維素膜制成。金標(biāo)抗體纖維層用吸附硝基咪唑類(lèi)藥物的金標(biāo)抗體玻璃棉，硝基咪唑類(lèi)藥物金標(biāo)抗體為膠體金標(biāo)記硝基咪唑類(lèi)藥物的單克隆抗體或多克隆抗體，偶聯(lián)硝基咪唑類(lèi)藥物的載體蛋白溶液為硝基咪唑類(lèi)藥物與載體蛋白偶聯(lián)的復(fù)合溶液。在測(cè)試端吸附纖維層、金標(biāo)抗體纖維層及吸水材料層上覆蓋有保護(hù)膜，在測(cè)試端纖維層與金標(biāo)抗體纖維層交界處對(duì)應(yīng)的保護(hù)膜上印制有樣品標(biāo)記線(xiàn)，該標(biāo)記線(xiàn)偏向測(cè)試端纖維層一側(cè)約0.5cm處。偶聯(lián)硝基咪唑類(lèi)藥物的載體蛋白為牛血清白蛋白(BSA )，或?yàn)殡u卵清白蛋白(OVA)，或?yàn)殍F蛋白，或?yàn)檠{(lán)蛋白。
[0005]本發(fā)明的硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條具有以下優(yōu)點(diǎn):
(1)特異性強(qiáng)，敏感性高。該試紙條以膠體金標(biāo)記高親和力的單克隆抗體為基礎(chǔ)制備而成，金標(biāo)抗體中金顆粒與抗體分子之間無(wú)共價(jià)鍵形成，二者通過(guò)異性電荷間的范德華力相結(jié)合，膠體金標(biāo)對(duì)單克隆抗體特異性和親和力影響很小，且具有較高的標(biāo)記率。因此，快速檢測(cè)試紙條具有較高的特異性和敏感性；
(2)操作簡(jiǎn)便、快速。使用本發(fā)明試紙條時(shí)無(wú)需任何其它試劑，只需滴加100μ I左右待檢樣品于樣品墊上，在5分鐘內(nèi)即可判定檢測(cè)結(jié)果；
(3)結(jié)果顯示形象、直觀、準(zhǔn)確。本測(cè)試紙條以顯示紅棕色“I ”及“II”印跡作為檢測(cè)的陽(yáng)性和陰性標(biāo)記，即在纖維素膜上顯示一條棕紅色“ I ”印跡表示在被檢測(cè)樣品液中含有喹乙醇代謝物，兩條棕紅色“ II ”印跡表示在被檢樣品中不含喹乙醇代謝物，結(jié)果判定形象、直觀、準(zhǔn)確，簡(jiǎn)單明了，不易出現(xiàn)假陰性和假陽(yáng)性誤判；
(4)成本低，投資少。使用快速檢測(cè)試紙條，不需另配儀器設(shè)備及其它試劑，隨時(shí)隨地進(jìn)行檢測(cè)，費(fèi)用低廉，可節(jié)省大量貴重儀器及設(shè)備費(fèi)用；
(5)應(yīng)用范圍廣，便于推廣應(yīng)用。本發(fā)明快速檢測(cè)試紙操作簡(jiǎn)單，能滿(mǎn)足不同層次人員的需要，包括專(zhuān)業(yè)化驗(yàn)、海關(guān)檢疫、衛(wèi)生防疫、質(zhì)量監(jiān)測(cè)、畜產(chǎn)品加工、集約化養(yǎng)殖到個(gè)體養(yǎng)殖等，具有廣闊的市場(chǎng)前景和較好的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)效益。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0006]圖1為硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條結(jié)構(gòu)示意圖(其中1、樣品吸收墊；2、結(jié)合物釋放墊；3、反應(yīng)膜；4、吸水墊；5、檢測(cè)線(xiàn)；6.質(zhì)控線(xiàn)；7、底板)。
[0007]圖2為硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條俯視結(jié)構(gòu)示意圖(其中8-1和8-2是覆蓋在試紙卡兩端的保護(hù)膜，9為標(biāo)記線(xiàn))。
[0008]圖3為硝基咪唑類(lèi)藥物快速檢測(cè)試紙卡陰性(圖3.a )、陽(yáng)性(圖3.b)，無(wú)效(圖
3.c)顯色示意圖，其中T質(zhì)控區(qū)，C為檢測(cè)區(qū)。
【具體實(shí)施方式】
[0009]制備硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條，首先需制備偶聯(lián)硝基咪唑類(lèi)藥物的載體蛋白和金標(biāo)抗體，從而制備檢測(cè)印跡和金標(biāo)抗體纖維；其次需制備羊抗或兔抗小鼠IgG抗體，用于制備對(duì)照印跡。
[0010]1.硝基咪唑類(lèi)藥物半抗原的合成
稱(chēng)取硝基咪唑類(lèi)藥物0.9 g放在50 mL的圓底燒瓶中；加入IM的NaOH溶液20 mL充分溶解后，放在恒溫磁力加熱攪拌反應(yīng)器上，回流反應(yīng)15h ;向反應(yīng)液中加入IM HCl使pH值呈中性，此時(shí)有沉淀析出，離心，取沉淀，烘干，得到硝基咪唑類(lèi)藥物水解產(chǎn)物①。稱(chēng)取化合物①0.6 g、戊二酸酐0.5 g放在50 mL的圓底燒瓶中；加入20 mL無(wú)水吡啶充分溶解后，放在恒溫磁力加熱攪拌反應(yīng)器上，回流反應(yīng)24 h ;用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋蒸，除去毗陡，然后添加30 mL蒸餾水，用乙酸乙酷進(jìn)行萃取，取有機(jī)層；旋轉(zhuǎn)蒸干有機(jī)層得黃色油狀物，加入乙酸乙酯和石油醚析出晶體，即硝基咪唑類(lèi)藥物半抗原。
[0011]2.硝基咪唑類(lèi)藥物半抗原與載體蛋白的偶聯(lián)
分別采用混合酸酐法和碳化二亞胺法將前述半抗原和卵清蛋白和血藍(lán)蛋白偶聯(lián)得到包被原(用于固定在反應(yīng)膜上)和免疫原(用于制備單克隆抗體)。
[0012](1)包被原的制備:
①將1Omg步驟I得到的半抗原用0.5mL甲酰胺(DMF )溶解，冷卻至10°C，加入氯甲酸異丁酯5 μ 1，10°C攪拌反應(yīng)30min，即可得到反應(yīng)液I液；
②稱(chēng)取卵清蛋白(OVA)36mg,使之充分溶解在2mL 50mM碳酸鈉溶液中，即可得到反應(yīng)液II液；其中硝基咪唑類(lèi)藥物半抗原與所述卵清蛋白的摩爾配比為(12-18 ):1 ；
③將反應(yīng)I液逐滴緩慢滴加到該反應(yīng)II溶液中，10°C反應(yīng)4h，4°C過(guò)夜。取最終反應(yīng)物于pH7.4，0.02M磷酸鹽緩沖液中透析純化24 h,3000 g以上離心30 min，收集上清液，即得到包被原。
[0013](2)免疫原的制備:
①將IOmg步驟I得到的半抗原將、10mg N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)，以及12.5 mg碳化二亞胺(EDC)充分溶解于I mL DMF中，于室溫下攪拌24 h，即可得到反應(yīng)液I液；
②稱(chēng)取血藍(lán)蛋白50mg，使之充分溶解在3 mL 40 mM碳酸鈉溶液中，即得到反應(yīng)液II液，其中硝基咪唑類(lèi)藥物半抗原與所述血藍(lán)蛋白的摩爾配比為(8-10):1 ；
③將反應(yīng)液I液逐滴緩慢滴加到反應(yīng)液II液中，并于室溫下攪拌3h，然后4 °C過(guò)夜，過(guò)柱，用緩沖液平衡和洗脫，進(jìn)一步純化后得到免疫原。
[0014]3.抗硝基咪唑類(lèi)藥物單克隆抗體的制備
(1)動(dòng)物免疫:將免疫原注入到Balb/c小鼠體內(nèi)，免疫劑量為100μ g/只，使其產(chǎn)生抗血清；
(2)細(xì)胞融合和克隆化:小鼠血清測(cè)定結(jié)果較高后，取其脾細(xì)胞，按7:1比例(數(shù)量配比)與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合，采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA測(cè)定細(xì)胞上清液，篩選陽(yáng)性孔。利用有限稀釋法對(duì)陽(yáng)性孔進(jìn)行克隆化，直到得到分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株；
(3)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇:將前述單克隆雜交瘤細(xì)胞株用凍存液制成IXlO6個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，在液氮中長(zhǎng)期保存。復(fù)蘇時(shí)取出凍存管，立即放入37°C水浴中速融，離心去除凍存液后，移入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)；
(4)單克隆抗體的生產(chǎn)與純化:將Balb/c小鼠腹腔注入滅菌石蠟油0.5 mL/只，7天后腹腔注射硝基咪唑類(lèi)藥物的單克隆雜交瘤細(xì)胞株5X IO7個(gè)/只，7天后采集腹水。用辛酸-飽和硫酸銨法進(jìn)行腹水純化，得到單克隆抗體，于_20°C保存。
[0015]4.硝基咪唑類(lèi)藥物金標(biāo)抗體和金標(biāo)抗體玻璃棉的制備
以檸檬酸鈉還原法制備金溶膠，即在5(Tl00 mL沸騰的0.01~0.05%氯金酸水溶液中加入2~4 mL的0.5~2%檸檬酸三鈉溶液，獲得直徑15 nm左右的膠體金。以0.1 mo I/L的K2CO3調(diào)膠體金pH至8.5^9.5，置于以1:100(Tl300的標(biāo)記比將待標(biāo)記的硝基咪唑類(lèi)藥物單克隆抗體加入PH8.5~9.5的金溶膠中，標(biāo)記10 min后，加20%PEG 10000至終濃度0.05%,4°C、1500~3000 rpm離心20 min,除去未結(jié)合的膠體金顆粒,4°C, 15000 rpm離心I h,棄上清，獲初步純化金標(biāo)抗體蛋白混合物后，用丙烯葡聚糖S-400柱層析，分離純化金標(biāo)蛋白，獲硝基咪唑類(lèi)藥物的膠體金標(biāo)記抗體。將1:(100-500 )稀釋的膠金標(biāo)記抗體吸附于精制玻璃棉中，4°C低溫真空干燥，制備硝基咪唑類(lèi)藥物金標(biāo)抗體玻璃棉。
[0016]5.羊抗或兔抗小鼠IgG的制備
以飽和硫酸銨提取小鼠血清IgG，取1份小鼠血清加2份PBS (pH 7.2)混勻，加等體積飽和硫酸銨混勻，置4°C冰箱2 h，4°C，1200 r/min離心15 min，棄上清;以適量PBS (pH7.2)溶解沉淀，加飽和硫酸銨至終濃度33%，置4°C冰箱2h，4°C，1200 r/min離心15 min，棄上清，以少量PBS印H7.2)溶解沉淀，置4°C冰箱內(nèi)用PBS (pH7.2)過(guò)夜透析，換液2~3次，4°C，12000 r/min離心15 min，收集上清，以紫外分光光度計(jì)測(cè)定其蛋白濃度，以50-?00 μ g/kg體重(小鼠血清IgG)經(jīng)皮下和肌肉注射免疫健康羊或家兔3 ^4次，末次免疫10天后，靜脈采血，以ELISA測(cè)定其血清抗體效價(jià)在1:2000以上，心臟采血或頸動(dòng)脈放血，收集其高免血清，以飽和硫酸銨提取羊抗或兔抗小鼠IgG(方法與提取小鼠血清IgG相同，不重述)，用于硝基咪唑類(lèi)藥物快速檢測(cè)試紙條對(duì)照顯示印跡的制備。
[0017]6.硝基咪唑類(lèi)藥物快速檢測(cè)試紙條反應(yīng)原理
(1)當(dāng)待檢樣品溶液滴入試紙條加樣孔后，樣品溶液因硝酸纖維素膜載體的毛細(xì)管作用向另一端擴(kuò)散。在移動(dòng)的過(guò)程中，會(huì)發(fā)生相應(yīng)的抗原抗體反應(yīng)，并通過(guò)免疫膠體金的顏色顯示出來(lái)。如果樣品溶液含有硝基咪唑類(lèi)藥物殘留，硝基咪唑類(lèi)藥物先和膠體金顆粒上的抗體反應(yīng)，因此當(dāng)膠體金顆粒隨樣品溶液擴(kuò)散至檢測(cè)線(xiàn)時(shí)，膠體金顆粒上抗體的活性位點(diǎn)因被樣品溶液中的硝基咪唑類(lèi)藥物占據(jù)而無(wú)法與檢測(cè)線(xiàn)上硝基咪唑類(lèi)藥物抗原結(jié)合，不能顯示檢測(cè)印跡，而羊抗鼠IgG抗體則可與金標(biāo)抗體結(jié)合，質(zhì)控區(qū)顯色，形成一條紅色對(duì)照印跡“ I ”，呈一條印跡為陽(yáng)性；相反樣本溶液中無(wú)硝基咪唑類(lèi)藥物則不能阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上硝基咪唑類(lèi)藥物抗原偶聯(lián)載體蛋白檢測(cè)印跡結(jié)合，檢測(cè)區(qū)顯示紅色印跡“ I ”，同樣羊抗鼠IgG抗體也與金標(biāo)抗體結(jié)合，質(zhì)控區(qū)也顯示紅色對(duì)照印跡“ I ”，形成兩條紅線(xiàn)“ II ”陰性標(biāo)記，如果纖維素膜上沒(méi)有紅色標(biāo)記顯示，則試紙卡無(wú)效。
[0018](2)硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條的結(jié)構(gòu)，參見(jiàn)圖1、圖2。圖中I為樣品吸收墊，用玻璃棉制成，2為結(jié)合物釋放墊層，根據(jù)上述【具體實(shí)施方式】4中所述的制備方法，制備吸附有硝基咪唑類(lèi)藥物單克隆抗體的金標(biāo)抗體纖維層，3為反應(yīng)膜層，采用硝酸纖維素膜，4為吸水材料層，用吸水濾紙制成，將編號(hào)1，2，3，4各層從左至右依次粘貼固定在塑膠條7上，各層交界處纖維互相交叉滲透。5為用偶聯(lián)硝基咪唑類(lèi)藥物的卵清蛋白(OVA)溶液印上檢測(cè)印跡“ I ”，6為用羊抗小鼠IgG溶液印上對(duì)照印跡“ I ”，兩印跡平行排列形成組合印跡帶“II”。8-1為覆蓋在樣品吸收墊層I和金標(biāo)抗體纖維層2上面的測(cè)試樣品端白色保護(hù)膜，在I和2交界處對(duì)應(yīng)保護(hù)膜8-1位置上偏向于樣品吸收墊一側(cè)0.5 cm處印有標(biāo)記線(xiàn)9,9的右端印有箭頭及max字樣，濾紙層4為吸水層(手柄端)上覆蓋有其它顏色(如黃色)保護(hù)膜8-2。
[0019]7.檢測(cè)樣品液的制備:
(1)取2g動(dòng)物組織勻漿物于50mL聚苯乙烯離心管中；
(2)加入2mL 0.15-0.25M的氫氧化鈉溶液和8 mL乙酸乙酯，充分混勻，室溫以3000 g以上的速度離心5-10 min ；
(3)取4mL上層液體吹干，加入I mL正己烷和0.5 mL 0.02 M的PBS緩沖液，混勻，室溫以3000 g以上的速度離心離心5 min ；
(4)去除上層正己烷層，取下層液待測(cè)。
[0020]8.檢測(cè)操作方法:從包裝袋中取出試紙條，用滴管吸取待檢溶液，在加樣孔中滴入3滴(約100 μ L)，加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí)，結(jié)果應(yīng)在3-5分鐘讀取，其他時(shí)間判讀無(wú)效。
[0021]9.檢測(cè)結(jié)果判斷:如果在纖維素膜上有一條紅棕色標(biāo)記“ I ”顯示，檢側(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，表示在被檢測(cè)樣品液中含硝基咪唑類(lèi)藥物(如圖3b所示)，含量超過(guò)國(guó)家殘留標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品不能在市場(chǎng)上流通；如果硝基咪唑類(lèi)藥物快速檢測(cè)試紙條上的纖維素膜上出現(xiàn)兩條紅棕色標(biāo)記“ II ”，檢測(cè)結(jié)果呈陰性，表示待檢樣品中不含硝基咪唑類(lèi)藥物成份(如圖3a所示)，如未出現(xiàn)C線(xiàn)，可能操作不當(dāng)或試劑板已失效(如圖3.c所示)。
[0022]
【權(quán)利要求】
1.一種硝基咪唑類(lèi)藥物殘留快速檢測(cè)試紙條，含有底層為支撐層，中間層吸附層固定在支撐層上，外層保護(hù)層固定在吸附層上，其特征是:吸附層從測(cè)試端依次為纖維層、吸附金標(biāo)抗體纖維層、纖維素膜層及手柄端的吸水材料層，其中在纖維素膜層上有用偶聯(lián)硝基咪唑類(lèi)藥物的載體蛋白溶液印制的直線(xiàn)式檢測(cè)印跡，有用羊抗或兔抗小鼠IgG溶液印制的直線(xiàn)式對(duì)照印跡，檢測(cè)印跡和對(duì)照印跡平行組合排列為“ II ”。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試紙條，其特征是:支撐層是用不吸水的硬質(zhì)塑膠條或硬紙條制成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試紙條，其特征是:測(cè)試端纖維層用玻璃棉、或尼龍膜、或聚偏二氟乙烯膜、或聚酯膜制成。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試紙條，其特征是:吸水材料層用吸水紙制成。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試紙條，其特征是:纖維素膜層用硝酸纖維素膜、或純纖維素膜、或羧化纖維素膜制成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試紙條，其特征是:金標(biāo)抗體纖維層用吸附硝基咪唑類(lèi)藥物的金標(biāo)抗體玻璃棉，硝基咪唑類(lèi)藥物金標(biāo)抗體為膠體金標(biāo)記的硝基咪唑類(lèi)藥物單克隆抗體或多克隆抗體，偶聯(lián)硝基咪唑類(lèi)藥物的載體蛋白溶液為硝基咪唑類(lèi)藥物與載體蛋白偶聯(lián)的復(fù)合溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試紙條，其特征是:在測(cè)試端吸附纖維層、金標(biāo)抗體纖維層及吸水材料層上覆蓋有保護(hù)膜，在測(cè)試端纖維層與金標(biāo)抗體纖維層交界處對(duì)應(yīng)的保護(hù)膜上印制有樣品標(biāo)記線(xiàn)，該標(biāo)記線(xiàn)偏向測(cè)試端纖維層一側(cè)約0.5 cm處。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試紙條，其特征是:偶聯(lián)硝基咪唑類(lèi)藥物的載體蛋白為牛血清白蛋白(BSA)，或?yàn)殡u卵清白蛋白(OVA)，或?yàn)殍F蛋白，或?yàn)檠{(lán)蛋白
【文檔編號(hào)】G01N33/558GK103792349SQ201210435614
【公開(kāi)日】2014年5月14日 申請(qǐng)日期:2012年11月5日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月5日
【發(fā)明者】杜道林, 邢海龍 申請(qǐng)人:江蘇維賽科技生物發(fā)展有限公司