專利名稱：一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法。
背景技術(shù)：
世界貿(mào)易的全球化同時(shí)也帶來了食品安全風(fēng)險(xiǎn)。近年來，世界范圍內(nèi)屢屢發(fā)生食品安全事件，如美國爆發(fā)感染大腸的“菠菜中毒事件”，感染沙門菌的花生醬“沙門事件”，日本上萬人葡萄球菌腸毒素導(dǎo)致的雪印牛奶中毒、英國的瘋牛病、法國的李斯特氏菌感染、泰國的禽流感等等。全球每年發(fā)生食源性疾病高達(dá)數(shù)十億例，發(fā)達(dá)國家發(fā)生食源性疾病的概率也相當(dāng)高。每年由數(shù)十億例食源性疾病而導(dǎo)致的醫(yī)療費(fèi)增加、不安全食品的召回、以及產(chǎn)品的銷毀帶來的經(jīng)濟(jì)損失不可估量！更有甚者，由于抗生素的濫用，全球頻頻出現(xiàn)食源性致病菌的耐藥菌株，其迅速增加與擴(kuò)散，對(duì)相關(guān)感染的治療與救治帶來極大挑戰(zhàn)。食品中微生物污染，尤其是耐藥微生物污染，是導(dǎo)致食源性疾病發(fā)生和發(fā)展的主要原因。實(shí)時(shí)快速準(zhǔn)確地監(jiān)測(cè)食品中的微生物特征，并獲得其菌落總數(shù)及其耐藥性，對(duì)預(yù)防和控制食源性微·生物感染，保證人類健康、防止經(jīng)濟(jì)損失具有重要意義。目前，食源性致病菌的檢測(cè)方法主要有培養(yǎng)鑒定、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)、電阻抗技術(shù)以及全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)等。培養(yǎng)鑒定法是將經(jīng)過前處理的樣本接種于營養(yǎng)肉湯，然后肉眼觀察細(xì)菌的菌落生長(zhǎng)，進(jìn)行陰陽判定。對(duì)于陽性樣本，再通過藥敏實(shí)驗(yàn)鑒定。該方法大多要耗費(fèi)6名天時(shí)間，而且程序復(fù)雜，所用試劑繁多，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，等結(jié)果出來，疫情可能已經(jīng)發(fā)生；ELISA是把抗原抗體免疫反應(yīng)的特異性和酶的高效催化作用有機(jī)地結(jié)合起來的一種檢測(cè)技術(shù)，它既可測(cè)抗原，也可測(cè)抗體。該方法靈敏度和特異性較強(qiáng)，但所需試劑昂貴，且需多次洗滌及培養(yǎng)過程；PCR技術(shù)采用體外酶促反應(yīng)合成特異性DNA片段，再通過擴(kuò)增產(chǎn)物來識(shí)別細(xì)菌。PCR具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速等特點(diǎn)，但假陽性和假陰性率過高是影響其應(yīng)用的關(guān)鍵問題。電阻抗技術(shù)原理是細(xì)菌在培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)繁殖的過程中，將會(huì)使培養(yǎng)基的阻抗發(fā)生變化，通過檢測(cè)培養(yǎng)基的電阻抗變化情況，判定細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)繁殖特性，即可檢測(cè)出相應(yīng)的細(xì)菌。該法具有檢測(cè)速度快、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，但由于電路的穩(wěn)定性問題，導(dǎo)致假陽性率過高；法國生物梅里埃集團(tuán)公司出品的Vitek-AMS自動(dòng)微生物檢測(cè)系統(tǒng)屬當(dāng)今世界上最為先進(jìn)、自動(dòng)化程度最高的細(xì)菌鑒定儀器之一。它無須經(jīng)過微生物分離培養(yǎng)和純化過程，就能直接從樣品檢出特殊的微生物種類和菌群來。但該系統(tǒng)和配套試劑價(jià)格昂貴且需依賴進(jìn)口，嚴(yán)重制約了我國食源性致病菌研究水平的提高。因此，靈敏、快速、準(zhǔn)確而且價(jià)格便宜的食源性致病菌實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)設(shè)備的研究迫在眉睫。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是要克服現(xiàn)有方法不足之處而提供一種自動(dòng)、快速、準(zhǔn)確和可視化的食品中微生物生長(zhǎng)曲線實(shí)時(shí)測(cè)繪方法。為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是，一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，包括以下步驟步驟一取25g食品樣品置于盛有225mL磷酸鹽緩沖液的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，以8000r/min的速度進(jìn)行均質(zhì)2min,制成I :10的樣品勻液；步驟二 設(shè)立微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置，包括傳感系統(tǒng)、讀數(shù)系統(tǒng)和顯示系統(tǒng)三部分，其中傳感系統(tǒng)包括帶有密封蓋的檢測(cè)管、控溫裝置、二電極、壓電體聲波傳感器和自激勵(lì)電路，所述的檢測(cè)管設(shè)于控溫裝置內(nèi)，所述的二電極由底部插入檢測(cè)管內(nèi)，其中一電極連接自激勵(lì)電路的輸入端，另一電極連接壓電體聲波傳感器的輸入端，壓電體聲波傳感器的輸出端連接至自激勵(lì)電路，所述的讀數(shù)系統(tǒng)包括分頻計(jì)、驅(qū)動(dòng)電路和單片機(jī)，所述的分頻計(jì)的輸入端連接至自激勵(lì)電路，自激勵(lì)電路的輸出端連接至驅(qū)動(dòng)電路，所述的單片機(jī)分別連接至自激勵(lì)電路和驅(qū)動(dòng)電路，所述的顯示系統(tǒng)包括顯示器，所述的顯示器通過MAX232串口連接至單片機(jī)；步驟三取9mL培養(yǎng)基和ImL由步驟一所得到的樣品勻液加入至微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置的檢測(cè)管中，擰緊密封蓋；
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步驟四將檢測(cè)管插入控溫裝置中，調(diào)節(jié)控溫裝置溫度為(37±0. 2) V ；步驟五啟動(dòng)微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置；步驟六傳感系統(tǒng)中壓電體聲波傳感器對(duì)與其串接對(duì)象檢測(cè)管中培養(yǎng)體系的電參數(shù)變化有靈敏的頻率響應(yīng)，讀數(shù)系統(tǒng)將檢測(cè)到的培養(yǎng)體系的頻率信號(hào)轉(zhuǎn)換成計(jì)算機(jī)可識(shí)別的數(shù)字信號(hào)發(fā)送給單片機(jī)，單片機(jī)以頻移-時(shí)間方式通過顯示器實(shí)時(shí)輸出培養(yǎng)體系響應(yīng)曲線，當(dāng)檢測(cè)管中有微生物生長(zhǎng)時(shí)，微生物可將培養(yǎng)基中電惰性的大分子物質(zhì)分解為電活性的小分子物質(zhì)，當(dāng)微生物濃度達(dá)到106cfu/mL左右時(shí)，檢測(cè)管中培養(yǎng)體系的電參數(shù)發(fā)生較顯著變化，導(dǎo)致壓電體聲波傳感器的頻移發(fā)生顯著改變，獲得食品中微生物實(shí)時(shí)生長(zhǎng)曲線，實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)自動(dòng)以TXT格式保存。所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，所述的液體培養(yǎng)基為廣譜液體培養(yǎng)基，所述的廣譜液體培養(yǎng)基成分為牛肉粉3g，酵母浸膏
I.5g,葡萄糖IOg,生長(zhǎng)因子，蒸懼水IOOOmL, pH值為7. 0 7. 2。所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，所述的生長(zhǎng)因子包括L-脯氨酸20mg，L-絲氨酸20mg，L-丙氨酸40mg，L-異亮氨酸70mg，L-亮氨酸98mg，L-門冬氨酸50mg, L-酪氨酸5mg, L-谷氨酸15mg, L-苯丙氨酸IOOmg, L-精氨酸鹽酸鹽IOOmg, L-賴氨酸鹽酸鹽80mg, L-纟顏氨酸70mg, L-蘇氨酸50mg, L-組氨酸鹽酸鹽50mg, L-色氨酸15mg,L-甲硫氨酸45mg, L-胱氨酸2mg,甘氨酸150mg。所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，電極為一對(duì)經(jīng)鈍化處理的不銹鋼棒直接封入聚碳酸酯中，并將端面磨平，得到位于同一平面的一對(duì)圓形平面電極，電極的電極常數(shù)為0. 58cnTl. OOcm,電極常數(shù)=平面電極面積/圓形平面電極之間的距離，距離指兩圓心之間的距離。所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，控溫裝置是使用電阻絲繞在一個(gè)用紫銅材料做成的套筒上。所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線實(shí)時(shí)自動(dòng)測(cè)繪的方法，平面電極與壓電體聲波傳感器通過導(dǎo)線串聯(lián)。本發(fā)明對(duì)比已有技術(shù)來說，從食品中微生物生長(zhǎng)規(guī)律出發(fā)，提出了用測(cè)繪微生物生長(zhǎng)曲線來進(jìn)行微生物分析的新方法，是對(duì)傳統(tǒng)分析方法的技術(shù)創(chuàng)新；通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)壓電體聲波傳感器可將微生物生長(zhǎng)信息轉(zhuǎn)化為可測(cè)的頻率信息，從而為設(shè)計(jì)快速、高效的新型繪制裝置提供了設(shè)計(jì)原理。在新的檢測(cè)方法和設(shè)計(jì)原理的指導(dǎo)下設(shè)計(jì)制作出食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置。本發(fā)明的技術(shù)效果在于I、壓電體聲波傳感器的使用避免了雙電層電容的影響，提高了電信號(hào)的穩(wěn)定性，增強(qiáng)了信噪比；2、壓電體聲波傳感器與平面電極結(jié)合后顯著提高了檢測(cè)的精確度。3、傳感系統(tǒng)、讀數(shù)系統(tǒng)以及顯示系統(tǒng)的組合可實(shí)現(xiàn)裝置的自動(dòng)化處理，能實(shí)時(shí)、快速地獲取食品中微生物的頻移-時(shí)間測(cè)繪曲線，為食品中微生物的深入研究提供理論依據(jù)。


·圖I本發(fā)明裝置的結(jié)構(gòu)示意圖；其中I -傳感系統(tǒng)、II -讀數(shù)系統(tǒng)、III -顯示系統(tǒng)I為檢測(cè)裝置(1-1為密封蓋,1-2為檢測(cè)管，1-3為微生物，1-4為培養(yǎng)基,1-5為控溫裝置，1-6為電極)，2為壓電體聲波傳感器，3為自激勵(lì)電路，4為分頻計(jì)，5為驅(qū)動(dòng)電路，6為單片機(jī)，7為MAX232串口 ；圖2為本裝置的工作流程圖；圖3為食品中微生物生長(zhǎng)過程電導(dǎo)(A)和電容(B)的變化率；圖4為食品中微生物實(shí)時(shí)測(cè)繪生長(zhǎng)曲線(A)，空白曲線(B)和平板計(jì)數(shù)法所得生長(zhǎng)曲線(C)；圖5為鮮奶中不同初始濃度(cfu/mL)微生物生長(zhǎng)曲線A-1. I X IO6, B-7. 9 X IO4, C—9. 8 X IO3, D-1. 3 X IO3, E—97, F—12圖6為米粉中微生物實(shí)時(shí)生長(zhǎng)曲線A-米粉經(jīng)過121° C，IOmin處理；B，C-米粉經(jīng)過80° C，2min處理；D，E，F(xiàn)-未經(jīng)處理的米粉。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。本發(fā)明的基本思想是結(jié)合壓電體聲波傳感器、平面電極及外圍數(shù)據(jù)處理裝置實(shí)現(xiàn)食品中微生物生長(zhǎng)曲線的實(shí)時(shí)測(cè)繪，為食品中微生物的深入研究奠定理論基礎(chǔ)。食品中微生物生長(zhǎng)曲線實(shí)時(shí)測(cè)繪裝置見圖1，包括傳感系統(tǒng)、讀數(shù)系統(tǒng)和顯示系統(tǒng)三部分，其中傳感系統(tǒng)由壓電體聲波傳感器、檢測(cè)探頭、檢測(cè)管、控溫裝置及自激勵(lì)電路構(gòu)成；讀數(shù)系統(tǒng)由分頻計(jì)、驅(qū)動(dòng)電路、單片機(jī)及MAX232數(shù)據(jù)接口構(gòu)成；顯示器由顯示界面及配套軟件構(gòu)成；其中檢測(cè)探頭為自制的平面電極，材料為鈍化處理的316不銹鋼棒嵌入聚碳酸酯中，磨平，拋光；壓電體聲波傳感器(9MHz AT-切型，兩面鍍銀)購至北京707廠，平面電極與壓電體聲波傳感器通過導(dǎo)線串聯(lián)。壓電體聲波傳感器對(duì)檢測(cè)管中微生物的生長(zhǎng)有靈敏的頻率響應(yīng)，為消除外界因素影響，通過差分法統(tǒng)一用頻移值表示(A F=F0-Fi,其中Ftl為起始頻率,Fi為i時(shí)測(cè)得的頻率值)，獲得頻移響應(yīng)信號(hào)。而信號(hào)的采集由計(jì)算機(jī)控制，首先由計(jì)算機(jī)通過MAX232數(shù)據(jù)接口發(fā)指令給單片機(jī)，采集檢測(cè)管中的信號(hào)，計(jì)算機(jī)控制采集信號(hào)通道，采集的信號(hào)輸入頻率計(jì)，將其分為段信號(hào)和位信號(hào)傳給單片機(jī)，單片機(jī)通過數(shù)據(jù)接口傳給顯示系統(tǒng)，以頻移-時(shí)間形式自動(dòng)繪制出實(shí)時(shí)的響應(yīng)曲線。所有的頻移和時(shí)間數(shù)據(jù)，以TXT格式自動(dòng)保存。工作條件環(huán)境溫度10° C 30° C ;相對(duì)濕度< 85% ;大氣壓力86. OkPa 106. OkPa ；使用電源AV (220 ± 22) V，50Hz ± IHz。由于微生物在代謝過程中會(huì)分解電惰性的葡萄糖、氨基酸等大分子物質(zhì)為電活性的小分子，那么培養(yǎng)基體系的性質(zhì)，如電導(dǎo)率和介電常數(shù)會(huì)隨時(shí)間發(fā)生變化，這種變化恰恰反應(yīng)了微生物的生長(zhǎng)信息。圖3給出了 4192A LF阻抗分析儀測(cè)定的IO5CfuAiL的大腸桿 菌在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)過程的電參數(shù)變化情況，其縱坐標(biāo)以電參數(shù)的變化相對(duì)于初始電參數(shù)值的變化率來表示，橫坐標(biāo)為微生物的生長(zhǎng)時(shí)間，曲線A和B分別表示食品中微生物生長(zhǎng)過程的電導(dǎo)和電容的變化率。由圖可知,微生物在生長(zhǎng)過程中，電導(dǎo)增加大約16%，而電容變化為10%左右。結(jié)果表明，微生物菌落數(shù)量的測(cè)定問題可以轉(zhuǎn)化為電學(xué)測(cè)量的問題。電磁振蕩理論表明，LC電路的頻率f與自感系數(shù)L、電容C的關(guān)系是
/ = ^Olc0)由公式可知，線圈自感系數(shù)、電容變化可改變振蕩頻率，用相應(yīng)的測(cè)頻電路可以記錄這種頻率的變化。由于微生物在生長(zhǎng)過程中液體培養(yǎng)體系電參數(shù)會(huì)發(fā)生變化，進(jìn)而可以解決食品中微生物生長(zhǎng)信息轉(zhuǎn)換為可測(cè)信息的技術(shù)問題。實(shí)際電路中使用的振蕩器是壓電體聲波傳感器，其工作原理與LC振蕩電路的原理基本相同，但頻穩(wěn)性更好，可以減少檢測(cè)過程中的噪音，所以，在檢測(cè)系統(tǒng)中采用壓電體聲波傳感器。實(shí)施例I利用食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置及如圖2所示方法對(duì)IO5CfuAiL的大腸桿菌的生長(zhǎng)過程曲線(參見圖4曲線A，圖4曲線B為空白參比)進(jìn)行實(shí)時(shí)測(cè)繪并與平板計(jì)數(shù)法所獲得的生長(zhǎng)曲線(參見圖4曲線C)進(jìn)行對(duì)照。從圖4可知，在ab段，大腸桿菌處于遲緩期，在一段時(shí)間里并不馬上分裂，大腸桿菌的數(shù)量維持恒定，或增加很少，培養(yǎng)基的性質(zhì)變化也不明顯，所以頻移沒有明顯變化；在be階段，為大腸桿菌指數(shù)生長(zhǎng)期，大腸桿菌生理代謝作用使培養(yǎng)基中的碳水化合物、類脂及蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為電活性物質(zhì)，顯著地改變了培養(yǎng)基性質(zhì)，壓電體聲波傳感器對(duì)這一變化有靈敏的頻移響應(yīng)，頻移開始顯著變化的點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的時(shí)間定義為微生物檢出時(shí)間(MDT)，可為是否有微生物生長(zhǎng)提供理論依據(jù)。從平板計(jì)數(shù)法獲取的生長(zhǎng)曲線則需要人為從靜態(tài)培養(yǎng)裝置中無菌操作吸取菌液至平板中培養(yǎng)24h，繪制一條曲線需要接種數(shù)次，時(shí)間至少要滯后48h，費(fèi)時(shí)耗力，需要大量培養(yǎng)裝置，且無法實(shí)時(shí)獲得動(dòng)態(tài)曲線。實(shí)施例2利用食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置測(cè)定了不同細(xì)菌初始濃度的鮮奶樣品的典型生長(zhǎng)曲線，其結(jié)果如圖5所示。由圖可知，細(xì)菌初始濃度越大，MDT越小，反之，細(xì)菌初始濃度越小，MDT越大。在細(xì)菌初始濃度約為10-106Cfu/mL時(shí)，細(xì)菌初始濃度的對(duì)數(shù)與MDT之間存在線性關(guān)系，具體關(guān)系式如下LgC=I. 216-0. 432MDT(4)式中C是鮮奶樣品中的微生物的初始濃度，MDT是微生物檢出時(shí)間，其相關(guān)系數(shù)大約0. 96，說明MDT和被測(cè)樣品中細(xì)菌初始濃度對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系。根據(jù)檢測(cè)所得MDT就可推算出樣品中的細(xì)菌數(shù)量，進(jìn)而可以進(jìn)行微生物的定量分析。實(shí)施例3利用食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置對(duì)米粉中的微生物生長(zhǎng)曲線進(jìn)行實(shí)時(shí)測(cè)繪，其結(jié)果參見圖6，曲線A為米粉經(jīng)過121° C，IOmin處理后的生長(zhǎng)曲線，曲線B和C為 米粉經(jīng)過80° C，2min處理后的生長(zhǎng)曲線，曲線D、E和F為未經(jīng)處理的米粉中微生物的生長(zhǎng)曲線。從圖6可知，曲線A無明顯的頻移變化，無微生物檢出時(shí)間，可推斷米粉經(jīng)121° C，IOmin處理后，其中的微生物可被完全抑制；曲線B和C大概在10小時(shí)后才出現(xiàn)顯者的頻移變化，表明經(jīng)80° C，2min處理后米粉中微生物的生長(zhǎng)受到抑制，大部分微生物被殺死；曲線D、E和F在3小時(shí)之內(nèi)就出現(xiàn)了顯著的頻移，表明未經(jīng)處理的米粉中微生物的數(shù)量較多，會(huì)對(duì)米粉的品質(zhì)造成一定的影響。從以上結(jié)果可知，通過對(duì)食品中微生物實(shí)時(shí)生長(zhǎng)曲線的分析可判定食品對(duì)象的微生物活性狀態(tài)，為食品的加工方式提供理論依據(jù)。
權(quán)利要求
1.一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，其特征在于，包括以下步驟 步驟一取25g食品樣品置于盛有225mL磷酸鹽緩沖液的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，以8000r/min的速度進(jìn)行均質(zhì)2min，制成I :10的樣品勻液； 步驟二 設(shè)立微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置，包括傳感系統(tǒng)、讀數(shù)系統(tǒng)和顯示系統(tǒng)三部分，其中傳感系統(tǒng)包括帶有密封蓋的檢測(cè)管、控溫裝置、二電極、壓電體聲波傳感器和自激勵(lì)電路，所述的檢測(cè)管設(shè)于控溫裝置內(nèi)，所述的二電極由底部插入檢測(cè)管內(nèi)，其中一電極連接自激勵(lì)電路的輸入端，另一電極連接壓電體聲波傳感器的輸入端，壓電體聲波傳感器的輸出端連接至自激勵(lì)電路，所述的讀數(shù)系統(tǒng)包括分頻計(jì)、驅(qū)動(dòng)電路和單片機(jī)，所述的分頻計(jì)的輸入端連接至自激勵(lì)電路，自激勵(lì)電路的輸出端連接至驅(qū)動(dòng)電路，所述的單片機(jī)分別連接至自激勵(lì)電路和驅(qū)動(dòng)電路，所述的顯示系統(tǒng)包括顯示器，所述的顯示器通過MAX232串口連接至單片機(jī)； 步驟三取9mL培養(yǎng)基和ImL由步驟一所得到的樣品勻液加入至微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)·測(cè)繪裝置的檢測(cè)管中，擰緊密封蓋； 步驟四將檢測(cè)管插入控溫裝置中，調(diào)節(jié)控溫裝置溫度為(37±0.2)°C ； 步驟五啟動(dòng)微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置； 步驟六傳感系統(tǒng)中壓電體聲波傳感器對(duì)與其串接對(duì)象檢測(cè)管中培養(yǎng)體系的電參數(shù)變化有靈敏的頻率響應(yīng)，讀數(shù)系統(tǒng)將檢測(cè)到的培養(yǎng)體系的頻率信號(hào)轉(zhuǎn)換成計(jì)算機(jī)可識(shí)別的數(shù)字信號(hào)發(fā)送給單片機(jī)，單片機(jī)以頻移-時(shí)間方式通過顯示器實(shí)時(shí)輸出培養(yǎng)體系響應(yīng)曲線，當(dāng)檢測(cè)管中有微生物生長(zhǎng)時(shí)，微生物可將培養(yǎng)基中電惰性的大分子物質(zhì)分解為電活性的小分子物質(zhì)，當(dāng)微生物濃度達(dá)到IO6CfuAiL左右時(shí)，檢測(cè)管中培養(yǎng)體系的電參數(shù)發(fā)生較顯著變化，導(dǎo)致壓電體聲波傳感器的頻移發(fā)生顯著改變，獲得食品中微生物實(shí)時(shí)生長(zhǎng)曲線。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，其特征在于，培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，所述的液體培養(yǎng)基為廣譜液體培養(yǎng)基，所述的廣譜液體培養(yǎng)基成分為牛肉粉3g，酵母浸膏1.5g，葡萄糖10g，生長(zhǎng)因子，蒸餾水1000mL，pH值為7. 0 7. 2。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，其特征在于，所述的生長(zhǎng)因子包括L-脯氨酸20mg，L-絲氨酸20mg，L-丙氨酸40mg，L-異亮氨酸70mg，L-亮氨酸98mg,L-門冬氨酸50mg,L-酪氨酸5mg,L-谷氨酸15mg,L_苯丙氨酸IOOmg, L-精氨酸鹽酸鹽lOOmg，L-賴氨酸鹽酸鹽80mg，L-纈氨酸70mg，L-蘇氨酸50mg，L-組氨酸鹽酸鹽50mg, L-色氨酸15mg, L-甲硫氨酸45mg, L-胱氨酸2mg,甘氨酸150mg。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，其特征在于，電極為一對(duì)經(jīng)鈍化處理的不銹鋼棒直接封入聚碳酸酯中，并將端面磨平，得到位于同一平面的一對(duì)圓形平面電極，電極的電極常數(shù)為0. 58cnTl. 00cm。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，其特征在于，控溫裝置是使用電阻絲繞在一個(gè)用紫銅材料做成的套筒上。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線實(shí)時(shí)自動(dòng)測(cè)繪的方法，其特征在于，平面電極與壓電體聲波傳感器通過導(dǎo)線串聯(lián)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪的方法，其主要貢獻(xiàn)在于1)從食品中微生物生長(zhǎng)規(guī)律出發(fā)，提出了用測(cè)繪微生物生長(zhǎng)曲線來進(jìn)行微生物分析的新方法，是對(duì)傳統(tǒng)分析方法的技術(shù)創(chuàng)新；2)通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)壓電體聲波傳感器可將微生物生長(zhǎng)信息轉(zhuǎn)化為可測(cè)的頻率信息，從而為設(shè)計(jì)快速、高效的新型測(cè)繪裝置提供了設(shè)計(jì)原理。3)在新的檢測(cè)方法和設(shè)計(jì)原理的指導(dǎo)下設(shè)計(jì)制作出食品中微生物生長(zhǎng)曲線自動(dòng)測(cè)繪裝置。本發(fā)明所構(gòu)建的裝置可實(shí)現(xiàn)食品中微生物生長(zhǎng)曲線的實(shí)時(shí)、自動(dòng)測(cè)繪，依據(jù)所獲得的生長(zhǎng)曲線可進(jìn)行食品中微生物的深入研究，如食品加工方法、食品貨架期、微生物抑菌性研究等等，由于該裝置具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確等特點(diǎn)，有望在食品加工、儲(chǔ)存以及經(jīng)營中的微生物相關(guān)研究中推廣應(yīng)用。
文檔編號(hào)G01N27/07GK102749516SQ20121023044
公開日2012年10月24日 申請(qǐng)日期2012年7月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月4日
發(fā)明者任佳麗, 周逸陽, 張慧, 李忠海, 林親錄, 馬麗娜 申請(qǐng)人:中南林業(yè)科技大學(xué)