專(zhuān)利名稱(chēng)：：基于組蛋白macroH2A同工型預(yù)測(cè)癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的診斷方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于診斷哺乳動(dòng)物患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括檢測(cè)獲自所述患者的生物學(xué)樣品中macroH2Al.1和/或macroH2A2的表達(dá)，其中所述macroH2Al.1和/或maCr0H2A2的低表達(dá)或降低表達(dá)是所述患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提高的指征?；谒鲈\斷方法，本發(fā)明還涉及用于治療癌癥，特別是乳癌和/或肺癌的改進(jìn)方法。
背景技術(shù)：
：癌癥中，就新病例而言，肺癌是第二大最普遍的癌癥(在美國(guó)占所有癌癥的15%)(Jemal等，2007)，并且是全世界范圍內(nèi)癌癥死亡的首要原因(在美國(guó)占男性的31%和女性的沈％)。五分之四的肺癌是非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)，約三分之一的NSCLC患者診斷具有早期疾病。對(duì)于這些患者來(lái)說(shuō)，手術(shù)是最佳治療選擇，但是患者復(fù)發(fā)比例高，并且大多數(shù)死于其疾病。處于相同癌癥階段的患者往往顯示不同的復(fù)發(fā)率(Zhu等，2006)；因此，存在對(duì)分子標(biāo)志物的關(guān)注，所述分子標(biāo)志物能夠鑒別出在手術(shù)后更易于復(fù)發(fā)的患者(D’Amico,2008)。已經(jīng)測(cè)試了NSCLC的轉(zhuǎn)移性復(fù)發(fā)的數(shù)個(gè)潛在標(biāo)志物，但是所述標(biāo)志物都沒(méi)有證明它們足夠有用(Zhu等，2006)。通常認(rèn)為組蛋白以類(lèi)似水平存在于不同細(xì)胞類(lèi)型中。在數(shù)個(gè)分子和細(xì)胞特征方面，異染色質(zhì)組蛋白變體macroffiA是獨(dú)特的。在結(jié)構(gòu)水平，其具有大的C-末端延伸，即大結(jié)構(gòu)域(macrodomain)，這是約25kDa的球形構(gòu)件(globularmodule)，對(duì)于dmacroH2Al.1，其以高特異性結(jié)合ADP-核糖(Kustatscher等，2005)。此外，對(duì)于maCr0-H2A，在所有脊椎動(dòng)物中都存在保守的2個(gè)基因，以及稱(chēng)為maCroH2Al.2的maCroH2Al的第二剪切變體，其不能結(jié)合小分子。MacroH2A參與稱(chēng)為衰老的永久性生長(zhǎng)終止(Pehrson和Fried，1992；Zhang等，2005)。此現(xiàn)象已在體外針對(duì)原代細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行了描述(Hayflick，1960，該現(xiàn)象是對(duì)于例如端粒酶縮短、DNA損傷累積和某些致癌基因過(guò)度表達(dá)等壓力的反應(yīng)(krrano等，1991)。此外還令人感興趣關(guān)注的是，誘導(dǎo)致癌基因衰老已成為體內(nèi)有效的抗腫瘤機(jī)制(Braig等，2005；Chen等，2005；Collado等，2005；Michaloglou等，2005)。Holdenrieder等(在HoldenriederS,StieberP,BodenmiillerH,BuschΜ,FertigG,FiirstH,SchalhornA,SchmellerN,UntchΜ,SeidelD.Nucleosomesinserumofpatientswithbenignandmalignantdiseases.IntJCancer2001Mar20；95(2)114-20.中)觀察了進(jìn)行化療的20位患者和進(jìn)行放療的16位患者的血清樣品中的核小體和核小體濃度動(dòng)力學(xué)。相比健康人和患有良性疾病的患者的血清，患有惡性腫瘤的患者的血清中含有的核小體濃度顯著更高。他們提出，血清中核小體的濃度可成為用于監(jiān)測(cè)抗腫瘤治療過(guò)程中生化反應(yīng)的有用工具，尤其是用于治療效力的早期估測(cè)的有用工具。Kurdistani(在KurdistaniSK.Histonemodificationsasmarkersofcancerprognosis:acellularview.BrJCancer.2007Jul2；97(1)1-5.Epub2007Jun26.中)描述了組蛋白修飾的改變與在癌癥發(fā)展和進(jìn)程中具有重要作用的許多基因的失控表達(dá)有關(guān)。一直以來(lái)，都是從啟動(dòng)子特異性的角度對(duì)這些改變的作用進(jìn)行理解，集中于在組蛋白修飾形式中的基因與基因之間的差異。此外，提出了癌癥組織還在特異性組蛋白修飾的總量方面顯示出細(xì)胞與細(xì)胞之間的差異。這種新的細(xì)胞表觀遺傳異質(zhì)性(印igeneticheterogeneity)與癌癥患者的臨床結(jié)果有關(guān)，且可以用作預(yù)后的重要標(biāo)志物。Barlesi等(在BarlesiF,GiacconeG,Gallegos-RuizMI,LoundouA,SpanSff,LefesvreP,KruytFA,RodriguezJA.Globalhistonemodificationspredictprognosisofresectednonsmall-celllungcancer.JClinOncol.2007Oct1；25(28):4358-64.中)描述了考察表觀遺傳修飾是否會(huì)促進(jìn)癌癥的發(fā)展和進(jìn)程的研究?？疾炝松婕岸鄠€(gè)組蛋白的表觀遺傳改變對(duì)于非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者的預(yù)后的影響?？疾炝?38位NSCLC患者切除的腫瘤樣品中組蛋白3賴(lài)氨酸4二甲基化OKMdiMe)，以及組蛋白2A賴(lài)氨酸5(H2AK5Ac)、組蛋白2B賴(lài)氨酸12、組蛋白3賴(lài)氨酸9(H;3K9Ac)和組蛋白4賴(lài)氨酸8的乙?；?。I期患者所在的組(低于第一淋巴結(jié))顯示出存活的顯著差異(中值，具有H3K9Ac的腺癌患者存活10個(gè)月占68%，而具有H3K4diMe的非腺癌患者存活147個(gè)月占85%)。據(jù)說(shuō)所公開(kāi)的數(shù)據(jù)提供了采用標(biāo)準(zhǔn)化療和與組蛋白修飾相互作用的藥物相聯(lián)合的原理，所述藥物例如組蛋白去乙酰化酶抑制劑。Deligezer等(^t=DeligezerU,AkisikEE,ErtenN,DalayN.Sequence-specifichistonemethylationisdetectableoncirculatingnucleosomesinplasma.ClinChem.2008Jul；54(7):1125-31.Epub2008May16.中)描述了DNA甲基化和組蛋白修飾的改變參與致癌作用，并研究了是否可在血漿中檢測(cè)到作為組蛋白修飾模型的組蛋白甲基化。因此，通過(guò)染色質(zhì)免疫沉淀反應(yīng)在血漿中分析了單甲基化的H3K9(H;3K9mel)。還需要進(jìn)一步驗(yàn)證以證實(shí)循環(huán)系統(tǒng)中組蛋白修飾的癌癥特異性改變。最后，Seligson等(在SeligsonDB,HorvathS,McBrianMA,MahV,YuH,TzeS,WangQ,ChiaD,GoodglickL,KurdistaniSK.GlobalLevelsofHistoneModificationsPredictPrognosisinDifferentCancers.AmJPathol.2009Apr6.中)公開(kāi)了在各個(gè)基因的組蛋白修飾形式和各個(gè)細(xì)胞中單個(gè)核酸整體水平方面，癌細(xì)胞顯示出改變。公開(kāi)了組蛋白H3賴(lài)氨酸4二甲基化OKMmd)和H3K18乙酰化(ac)的較低整體/細(xì)胞水平會(huì)預(yù)測(cè)前列腺癌復(fù)發(fā)的較高風(fēng)險(xiǎn)，并且還顯示了H;3Mme2和HIlSac的細(xì)胞水平同樣預(yù)測(cè)了肺癌和腎癌患者的臨床結(jié)果，具有在兩個(gè)癌癥組中都預(yù)示顯著更差存活概率的較低水平。其還顯示，H;3K9me2(與基因活性和抑制相關(guān)的修飾)的更低細(xì)胞水平也是具有前列腺癌或腎癌的個(gè)體的較差結(jié)果的預(yù)兆。這些組蛋白修飾的預(yù)測(cè)能力與增殖標(biāo)志物Ki-67無(wú)關(guān)。染色質(zhì)免疫沉淀反應(yīng)實(shí)驗(yàn)表明，在侵襲性更高的癌細(xì)胞系中，組蛋白修飾的較低水平與DNA復(fù)制元件修飾的較低水平相關(guān)，但與整個(gè)基因組的基因啟動(dòng)子無(wú)關(guān)。該結(jié)果表明，組蛋白修飾的較低整體水平預(yù)示侵襲性更高的癌癥表型，揭示了不同組織來(lái)源的腺癌的預(yù)后表觀遺傳形式中令人吃驚的普遍性。發(fā)明概述肺癌是癌癥死亡的主要原因。盡管具有最佳診斷和早期治療，一些患者仍死于復(fù)發(fā)疾病。不存在足夠有用的生物標(biāo)志物來(lái)預(yù)測(cè)癌癥(特別是實(shí)體癌，例如肺癌)的腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。因此，本發(fā)明的目的是提供用于此類(lèi)復(fù)發(fā)癌癥的新的診斷分析，以及用于進(jìn)行所述分析的適合的工具。對(duì)于技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在閱讀了本發(fā)明下述更詳細(xì)的說(shuō)明之后，其它目的和優(yōu)點(diǎn)將是顯而易見(jiàn)的。在本發(fā)明優(yōu)選的第一方面，本發(fā)明涉及用于診斷哺乳動(dòng)物患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括檢測(cè)獲自所述患者的生物學(xué)樣品中maCroH2Al.1和/或maCroH2A2的表達(dá)，其中所述maCroH2Al.1和/或maCroH2A2的低表達(dá)或降低表達(dá)是所述患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提高的指征。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的方法還包括基于所述診斷預(yù)測(cè)所述癌癥復(fù)發(fā)，進(jìn)一步優(yōu)選預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)移性復(fù)發(fā)。在本發(fā)明優(yōu)選的第二方面，本發(fā)明涉及用于診斷上述哺乳動(dòng)物患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的方法，其還包括基于maCr0H2Al.1的表達(dá)，診斷腫瘤中的衰老細(xì)胞，特別是癌細(xì)胞。在本發(fā)明優(yōu)選的第三方面，本發(fā)明涉及maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性試劑的篩選方法，所述方法包括使macroH2Al.1或macroH2A與macroH2Al.1或macroH2A2潛在特異的試劑相接觸，并且測(cè)定所述試劑是否特異性地結(jié)合maCroH2A1.1或maCroH2A。在本發(fā)明優(yōu)選的第四方面，本發(fā)明涉及診斷試劑和/或治療試劑，根據(jù)本發(fā)明，其根據(jù)用于maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性試劑的篩選方法進(jìn)行篩選。在本發(fā)明優(yōu)選的第五方面，本發(fā)明涉及用于產(chǎn)生maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性抗體或者其maCr0H2Al.1或maCroH2A2特異性片段的方法，所述方法包括a)使用結(jié)合至色譜柱的maCroH2Al.1或maCroH2A2結(jié)構(gòu)域親和純化含有抗體的血清或細(xì)胞培養(yǎng)物上清液，或b)使用macroH2Al.1或macroH2A2結(jié)構(gòu)域篩選sc_Fv噬菌體展示庫(kù)。在本發(fā)明優(yōu)選的第六方面，本發(fā)明涉及用于進(jìn)行根據(jù)本發(fā)明的上述方法的診斷試劑盒，其包括根據(jù)本發(fā)明的診斷試劑，和/或根據(jù)本發(fā)明的maCr0H2Al.1或maCroH2A2特異性抗體或者其maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性片段，以及任選地其它助劑。在本發(fā)明優(yōu)選的第七方面，本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物患者中癌癥的方法，所述方法包括根據(jù)本發(fā)明的上述方法，以及治療和/或預(yù)防患者中所述癌癥的復(fù)發(fā)，優(yōu)選轉(zhuǎn)移性復(fù)發(fā)，所述患者是鑒定為所述患者中具有癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提高的患者。在本發(fā)明優(yōu)選的第八方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的方法篩選的試劑、和/或根據(jù)本發(fā)明的macroH2Al.1或macroH2A2特異性抗體或者其macroH2Al.1或macroH2A2特異性片段、或者根據(jù)本發(fā)明的試劑盒在預(yù)防、治療和/或診斷癌癥，特別是預(yù)防、治療和/或診斷癌癥復(fù)發(fā)，優(yōu)選其轉(zhuǎn)移性復(fù)發(fā)中的用途。本發(fā)明大體上基于發(fā)現(xiàn)組蛋白maCroH2Al.1和maCroH2A2的表達(dá)預(yù)測(cè)肺癌復(fù)發(fā)，將這些組蛋白變體鑒定為癌癥患者的改進(jìn)的風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)的新工具。MacroffiA同工型在經(jīng)歷衰老的細(xì)胞中上調(diào)并且高度表達(dá)，所述衰老已知是一種抗腫瘤機(jī)制，表明maCro-H2Al.1是腫瘤中衰老細(xì)胞的有用標(biāo)志物。MaCr0H2Al.1在具有更好預(yù)后的腫瘤中表達(dá)更高。此外，在本發(fā)明的上下文中可見(jiàn)，maCr0H2Al.1表達(dá)的預(yù)后相關(guān)性優(yōu)于通常用于評(píng)估癌癥患者預(yù)后的增殖標(biāo)志物Ki-67。本發(fā)明人觀察到maCroH2Al.1和maCroH2A2表達(dá)與腫瘤增殖速率之間有強(qiáng)的負(fù)相關(guān)性。緩慢增殖的腫瘤傾向于顯示高表達(dá)maCr0H2Al.1和maCr0H2A2，而具有高增殖指數(shù)的腫瘤(通常在臨床上侵襲性更高)具有較低的表達(dá)或降低表達(dá)，或甚至不表達(dá)。因此，在其第一方面，本發(fā)明涉及用于診斷哺乳動(dòng)物患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括檢測(cè)獲自所述患者的生物學(xué)樣品中maCroH2Al.1和/或maCroH2A2的表達(dá)，其中所述maCroH2Al.1和/或maCroH2A2的低表達(dá)或降低表達(dá)是所述患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提高的指征。優(yōu)選地，該表達(dá)分析的結(jié)果可以顯示在適合的裝置上。在本發(fā)明的上下文中，macroH2Al.1和/或maCroH2A2的“低”表達(dá)或“降低”表達(dá)應(yīng)當(dāng)意味著相比來(lái)自疾病復(fù)發(fā)之前的同一患者或者不具有復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的不同患者或者健康患者或患者組的樣品，macroH2Al.1和/或maCroH2A2的表達(dá)降低。確定低表達(dá)或降低表達(dá)的另一種策略是在優(yōu)選使用maCroH2Al.1和/或maCroH2A2-特異性抗體的組織切片上沒(méi)有染色，如下文進(jìn)一步所述。又一種策略是比較樣品中macroH2Al.1和/或macroH2A2的表達(dá)與macroH2Al.2的表達(dá)，并且在根據(jù)本發(fā)明方法的優(yōu)選實(shí)施方案中，所述表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)化為在所述樣品和/或?qū)φ諛悠分衜aCr0H2A1.2的表達(dá)。此外，所述對(duì)照樣品可以是來(lái)自復(fù)發(fā)之前的同一患者或者不具有復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的不同患者或者健康患者或患者組的樣品。在其優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及診斷哺乳動(dòng)物患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括檢測(cè)獲自所述患者的生物學(xué)樣品中maCr0H2Al.1和/或maCroH2A2的表達(dá)，并且將所述macroH2Al.1和/或macroH2A2的表達(dá)與對(duì)照樣品相比較，其中所述macroH2Al.1和/或maCr0H2A2的低表達(dá)或降低表達(dá)是所述患者中肺癌復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)提高的指征。優(yōu)選地，所述表達(dá)分析和/或比較的結(jié)果可以顯示在或者放在適合的裝置上，例如診斷計(jì)算機(jī)。根據(jù)本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，macroH2Al.1或maCroH2A2的表達(dá)與無(wú)病存活之間的相關(guān)性具有P<0.05、優(yōu)選P<0.01、更優(yōu)選P<0.006的顯著性。根據(jù)本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，還包括檢測(cè)諸如Ki-67的其它癌癥標(biāo)志物的表達(dá)。優(yōu)選地，所述生物學(xué)樣品中所述maCroH2Al.1和/或maCroH2A2的表達(dá)與Ki_67的表達(dá)負(fù)相關(guān)。根據(jù)本發(fā)明方法的又一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，還包括基于根據(jù)本發(fā)明所述診斷預(yù)測(cè)所述癌癥復(fù)發(fā)的步驟。本文使用的“復(fù)發(fā)”是指在患者無(wú)病存活時(shí)間后臨床顯現(xiàn)癌癥參數(shù)，例如優(yōu)選地，出現(xiàn)腫瘤組織和轉(zhuǎn)移。所述預(yù)測(cè)(或可能性)還可以包括其它參數(shù)，例如，如患者或患者組的臨床參數(shù)、腫瘤類(lèi)型等。預(yù)測(cè)的結(jié)果可以優(yōu)選顯示在適合的裝置上。根據(jù)本發(fā)明的方法可用于診斷任何類(lèi)型的實(shí)體癌。因此，優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的方法，其中所述癌癥選自實(shí)體癌、肺癌、乳癌、腎癌、肝癌、頭頸部癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、食管癌和腦癌。更優(yōu)選用于診斷乳癌或肺癌的方法。任何生物學(xué)樣品都可用于根據(jù)本發(fā)明的方法，只要其允許直接或間接檢測(cè)根據(jù)本發(fā)明的標(biāo)志物的表達(dá)。因此，所述生物學(xué)樣品可以選自來(lái)自肺腫瘤、乳腺腫瘤、腎腫瘤、肝腫瘤、頭頸部腫瘤、前列腺腫瘤、胰腺腫瘤、胃腫瘤、結(jié)腸腫瘤、甲狀腺腫瘤、食管腫瘤和腦腫瘤的細(xì)胞、全血、血清、血漿、尿液、淋巴液、腦液、組織樣品和制備的組織樣品例如組織切片。優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的方法，其中所述樣品在手術(shù)期間取自患者或者為血清樣品。根據(jù)本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選方面則涉及基于maCr0H2Al.1的表達(dá)，診斷或進(jìn)一步診斷腫瘤中的衰老細(xì)胞，特別是癌細(xì)胞。已知具有大量衰老細(xì)胞的嚙齒類(lèi)動(dòng)物肺腺瘤中富含maCroH2Al.1，但是maCroH2Al.1在已克服衰老并顯示出增殖失控的肺腺癌中下調(diào)或者缺乏，這一發(fā)現(xiàn)同樣與這些結(jié)論一致，強(qiáng)調(diào)了衰老是抗腫瘤機(jī)制的觀點(diǎn)。因此，在根據(jù)本發(fā)明方法的此優(yōu)選方面，基于標(biāo)志物maCr0H2Al.1的表達(dá)，所述表達(dá)可以用于大體上監(jiān)測(cè)腫瘤中的衰老細(xì)胞的量或比率，特別是癌細(xì)胞的量或比率。作為腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的指示物，可使用衰老細(xì)胞的量或比率來(lái)監(jiān)測(cè)抗腫瘤治療(例如化療或放療)的成效或作用，或者用于觀察癌細(xì)胞的數(shù)量是否正在增加，以作為患者疾病復(fù)發(fā)的指征。還可以測(cè)量其它衰老標(biāo)志物，并且用于測(cè)量或監(jiān)測(cè)所述標(biāo)志物的方法是技術(shù)人員已知的和如本文針對(duì)標(biāo)志物macroH2Al.1和/或macroH2A2所述。在根據(jù)本發(fā)明方法的上下文中，可以使用允許測(cè)量標(biāo)志物表達(dá)的技術(shù)人員已知的任何方法。方法的選擇將取決于表達(dá)是在核酸水平上和/或在蛋白水平上測(cè)量，以及取決于待分析的樣品。優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的方法，其中所述檢測(cè)表達(dá)包括聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)，即核酸擴(kuò)增，特別是rtPCR，或免疫組化染色(即在蛋白水平上)，特別是使用macroH2Al.1-特異性抗體或macroH2A2_特異性抗體，如本文所述，和/或mRNA分析。本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選方面則涉及用于maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性試劑的篩選方法，所述方法包括使macroH2Al.1或macroH2A與macroH2Al.1或macroH2A2潛在特異的試劑相接觸，并且測(cè)定所述試劑是否特異性地結(jié)合maCroH2Al.1或maCroH2A。某些蹄選方法是本領(lǐng)域己知的，并在例如InvitroMethodsinPharmaceuticalResearch,AcademicPress,1997和美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，030,015中有所討論。優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的篩選方法，其中所述maCroH2Al.1或maCroH2A2潛在特異的試劑存在于化合物庫(kù)、噬菌體展示庫(kù)(特別是sc-Fv噬菌體展示庫(kù))或抗體庫(kù)中。進(jìn)一步優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的篩選方法，其中所述maCroH2Al·1或maCroH2A2潛在特異的試劑為診斷試劑和/或治療試劑。即，所述試劑可以用于上述診斷方法中，例如，如用于診斷哺乳動(dòng)物患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)或者監(jiān)測(cè)衰老細(xì)胞的量或比率，或者治療試劑可以用于例如增加腫瘤細(xì)胞的衰老。本發(fā)明的另一方面則涉及根據(jù)本發(fā)明的方法篩選的診斷試劑和/或治療試劑。根據(jù)本發(fā)明，該試劑可以以制備藥物組合物的方法配制成藥物組合物，所述方法包括上述篩選方法，并將所述試劑與藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑和/或穩(wěn)定劑一起配制。優(yōu)選的試劑是根據(jù)本發(fā)明的maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性抗體，其選自任選地包含標(biāo)記的單克隆抗體、多克隆抗體、人抗體、人源化的抗體和/或重組抗體或者其功能片段。可接受的載體、賦形劑或穩(wěn)定劑采用的劑量和濃度對(duì)受體是無(wú)毒的，并且包括緩沖劑，例如磷酸鹽、檸檬酸鹽和其它有機(jī)酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸和甲硫氨酸；防腐劑(例如，氯化十八烷基二甲基芐基銨；六甲氯銨；苯扎氯銨、芐索氯銨；苯酚、丁醇或芐醇；對(duì)羥基苯烷基酯，例如對(duì)羥基苯甲酯或?qū)αu基苯丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環(huán)己醇；3-戊醇；以及間甲酚)；低分子量(少于約10個(gè)殘基)多肽；蛋白質(zhì)，例如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，例如甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、組氨酸、精氨酸或賴(lài)氨酸；單糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合齊U，例如EDTA；糖，例如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成鹽反離子，例如鈉；金屬絡(luò)合物(例如Zn-蛋白絡(luò)合物)；和/或非離子表面活性劑，例如TWEEN、PLURONICS或聚乙二醇(PEG)。并且，本發(fā)明的另一方面涉及上述制備的藥物組合物或制劑，其含有根據(jù)本發(fā)明的上述方法篩選的診斷試劑和/或治療試劑。此外，本發(fā)明的另一方面涉及用于產(chǎn)生maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性抗體或者其maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性片段的方法，所述方法包括下述步驟a)使用結(jié)合至色譜柱的maCroH2Al.1或maCroH2A2結(jié)構(gòu)域親和純化含有抗體的血清，或b)使用macroH2Al.1或macroH2A2結(jié)構(gòu)域篩選sc_Fv噬菌體展示庫(kù)。這些方法各自的細(xì)節(jié)是技術(shù)人員已知的，并且如本文所述，例如對(duì)于a)，使用含抗macroH2Al.1或macroH2A2結(jié)構(gòu)域的特異性抗體的兔血清；對(duì)于b)，使用重組macroH2Al.1或macroH2A2結(jié)構(gòu)域。因此，本發(fā)明的另一方面涉及根據(jù)本發(fā)明的方法產(chǎn)生的macroffiAl.1或macroH2A2特異性抗體或者其macroH2Al.1或macroH2A2特異性片段(例如sc_Fv片段)。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的所述macroffiAl.1或maCroH2A2特異性抗體選自任選地包含標(biāo)記的單克隆抗體、多克隆抗體、人抗體、人源化的抗體和/或重組抗體。在本發(fā)明的上下文中，“macroH2Al.1或macroH2A2特異性”應(yīng)當(dāng)意味著抗體特異性地結(jié)合macroH2A1.1或maCr0H2A2的大結(jié)構(gòu)域上的表位，并且顯示與待分析樣品中的其它抗原無(wú)交叉反應(yīng)性或基本上無(wú)交叉反應(yīng)性。本發(fā)明的又一方面則涉及用于進(jìn)行根據(jù)本發(fā)明的方法的診斷試劑盒，其包括根據(jù)本發(fā)明的診斷試劑，和/或根據(jù)本發(fā)明的macroffiAl.1或maCroH2A2特異性抗體或者其macroH2Al.1或maCroH2A2特異性片段，以及任選地其它助劑。優(yōu)選地，所述試劑盒含有進(jìn)行根據(jù)本發(fā)明的方法所需的化學(xué)物質(zhì)、染料、緩沖劑等。所述試劑盒還可以含有用于分析的DNA或蛋白芯片或微陣列，以及為顯示和解讀診斷結(jié)果的手冊(cè)和軟件以及設(shè)備。本發(fā)明的又一方面則涉及治療哺乳動(dòng)物患者中癌癥的方法，所述方法包括根據(jù)本發(fā)明的方法，以及治療和/或預(yù)防患者中所述癌癥的復(fù)發(fā)，所述患者是鑒定為所述患者中具有癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提高的患者。本文使用的“治療”是指治療性治療和避免性或預(yù)防性方法，其中的目的是預(yù)防或減緩(減輕)靶向的病理癥狀或病癥，特別是癌癥復(fù)發(fā)。有治療需要的那些包括已經(jīng)患有所述病癥的那些以及傾向于患有所述病癥的那些或者所述病癥已經(jīng)得到預(yù)防的那些。所述治療還可以包括輔助治療和治療原發(fā)患者的一線治療，并且可以與其它抗癌策略例如化療和/或放療相聯(lián)合。優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明治療哺乳動(dòng)物患者中癌癥的方法，其中所述治療包括向有此需要的所述患者給予根據(jù)本發(fā)明的上述方法篩選的試劑，優(yōu)選以上述藥物組合物的形式。優(yōu)選的試劑是小化學(xué)分子或者上述抗體或其片段。進(jìn)一步優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明治療哺乳動(dòng)物患者中癌癥的方法，其還包括基于macroH2Al.1的表達(dá)，監(jiān)測(cè)響應(yīng)于所述治療的腫瘤中衰老細(xì)胞的量和/或比例，特別是癌細(xì)胞的量和/或比例。已知具有大量衰老細(xì)胞的嚙齒類(lèi)動(dòng)物肺腺瘤中富含macroffiAl.1，但是macroH2Al.1在已克服衰老并顯示出增殖失控的肺腺癌中下調(diào)或者缺乏，這一發(fā)現(xiàn)同樣與這些結(jié)論一致，強(qiáng)調(diào)了衰老是抗腫瘤機(jī)制的觀點(diǎn)。因此，在根據(jù)本發(fā)明方法的此優(yōu)選方面，基于標(biāo)志物macroffiAl.1的表達(dá)，所述表達(dá)可以用于大體上監(jiān)測(cè)腫瘤中衰老細(xì)胞的量或比率，特別是癌細(xì)胞的量或比率。作為腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的指示物，可使用衰老細(xì)胞的量或比率來(lái)監(jiān)測(cè)抗腫瘤治療(例如化療或放療)的成效或作用，或者用于觀察癌細(xì)胞的數(shù)量是否正在增加，以作為患者疾病復(fù)發(fā)的指征。還可以測(cè)量其它衰老標(biāo)志物，并且用于測(cè)量或檢測(cè)所述標(biāo)志物的方法是技術(shù)人員已知的和如本文針對(duì)標(biāo)志物macroffiAl.1和/或maCroH2A2所述。根據(jù)本發(fā)明的待治療的癌癥可以選自實(shí)體癌、肺癌、乳癌、腎癌、肝癌、頭頸部癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、骨癌、食管癌和腦癌，優(yōu)選乳癌和/或肺癌。所表明的癌癥還包括其轉(zhuǎn)移形式。本發(fā)明的又一方面則涉及根據(jù)本發(fā)明的方法篩選的試劑和/或根據(jù)本發(fā)明的macroH2Al.1或macroH2A2特異性抗體或者其macroH2Al.1或macroH2A2特異性片段或根據(jù)本發(fā)明的試劑盒在預(yù)防、治療和/或診斷癌癥，特別是在預(yù)防、治療和/或診斷癌癥復(fù)發(fā)(特別是乳癌和/或肺癌復(fù)發(fā))中的用途，或者涉及根據(jù)本發(fā)明的方法篩選的試劑和/或根據(jù)本發(fā)明的macroH2Al.1或macroH2A2特異性抗體或者其macroH2Al.1或macroH2A2特異性片段或根據(jù)本發(fā)明的試劑盒在制備預(yù)防、治療和/或診斷癌癥，特別是制備預(yù)防、治療和/或診斷癌癥復(fù)發(fā)(特別是乳癌和/或肺癌復(fù)發(fā))的藥物中的用途。優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的用途，其中所述癌癥選自實(shí)體癌、肺癌、乳癌、腎癌、肝癌、頭頸部癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、骨癌、食管癌和腦癌，優(yōu)選乳癌和/或肺癌。所表明的癌癥還包括其轉(zhuǎn)移形式。通常認(rèn)為組蛋白以相似水平存在于不同細(xì)胞類(lèi)型中。在數(shù)個(gè)分子和細(xì)胞特征方面，異染色質(zhì)組蛋白變體maCr0H2A是獨(dú)特的。在結(jié)構(gòu)水平，其具有大的C-末端延伸，即大結(jié)構(gòu)域，這是約25kDa的球形構(gòu)件，在maCroH2Al.1的情況中，其以高特異性結(jié)合ADP-核糖(Kustatscher等，2005)。此外，對(duì)于maCr0-H2A，在所有脊椎動(dòng)物中都存在保守的2個(gè)基因，以及稱(chēng)為maCroH2Al.2的maCroH2Al的第二剪切變體，其不能結(jié)合小分子。本文中，本發(fā)明人已開(kāi)發(fā)了抗所有macroH2A同工型(macroH2Al.1、macroH2Al.2和macroH2A2)的多克隆和單克隆抗體，并采用這些抗體研究了maCr0H2A組蛋白在培養(yǎng)細(xì)胞中和體內(nèi)的細(xì)胞定位和豐度。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)maCr0H2A在已經(jīng)歷復(fù)制衰老的原代成纖維細(xì)胞中上調(diào)。此外，在人類(lèi)癌癥中，macroH2Al.1和Ki_67的表達(dá)之間存在強(qiáng)的負(fù)相關(guān)性。經(jīng)歷快速細(xì)胞分裂(以增殖標(biāo)志物Ki-67的高表達(dá)為標(biāo)志)的腫瘤表達(dá)低水平的maCroH2Al.1，而具有低有絲分裂指數(shù)的腫瘤則富含組蛋白。這兩個(gè)發(fā)現(xiàn)都說(shuō)明maCr0H2Al.1與細(xì)胞分化程度相關(guān)，并標(biāo)志已退出細(xì)胞周期的細(xì)胞。已知具有大量衰老細(xì)胞的嚙齒類(lèi)動(dòng)物肺腺瘤中富含macroffiAl.1，但是macroH2Al.1在已克服衰老并顯示出增殖失控的肺腺癌中下調(diào)或者缺乏，這一發(fā)現(xiàn)同樣與這些結(jié)論一致，強(qiáng)調(diào)了衰老是抗腫瘤機(jī)制的觀點(diǎn)。顯著地，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)macroffiAl.1水平是肺癌的腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的良好預(yù)測(cè)物。在發(fā)明人可以分析的有限數(shù)量的患者中，證明了其在統(tǒng)計(jì)學(xué)上優(yōu)于與常用增殖標(biāo)志物Ki-67的相關(guān)性(對(duì)于macroffiAl.1，P=0.0058；而對(duì)于Ki-67，P=O.07983)。對(duì)于乳癌組織陣列的目前可獲得的患者信息不足以評(píng)估m(xù)acroffiAl.1水平和臨床結(jié)果之間的相關(guān)性。在來(lái)自肺腫瘤的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上，macroffiAl.1似乎也是乳癌的有用預(yù)后生物標(biāo)志物。其它測(cè)試將表明其在其它癌癥中的用途。支持macroffiAl.1基因產(chǎn)物在細(xì)胞衰老期間上調(diào)以及其在致癌中作用的機(jī)制還有待闡明。初步證據(jù)表明，衰老期間mRNA水平并不會(huì)改變，說(shuō)明轉(zhuǎn)錄后加工可能造成macroH2Al.1上調(diào)。關(guān)于具有無(wú)病存活的macroffiAl.1表達(dá)的以統(tǒng)計(jì)方式記錄的觀察結(jié)果為癌癥且特別是肺癌患者的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分的改進(jìn)帶來(lái)了希望，并且應(yīng)當(dāng)用更大的患者群進(jìn)行重復(fù)。進(jìn)一步的研究將針對(duì)macroffiAl.1上調(diào)是否是人類(lèi)腫瘤中衰老細(xì)胞的普遍特征和macroH2Al.1高染色是否大體上反映腫瘤細(xì)胞中細(xì)胞分化程度而提供甚至更為深入的了解。本發(fā)明的新工具將改進(jìn)對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)癌癥，特別是乳癌或肺癌患者的鑒別，從而允許更好地靶向預(yù)后困難的癌癥的治療策略。附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明將在下述實(shí)施例中參考附圖進(jìn)一步描述本發(fā)明，然而本發(fā)明并不限于此。為了本發(fā)明的目的，本文引用的所有參考文獻(xiàn)都通過(guò)全文引用的方式并入本文。附圖中圖1示出了與增殖相關(guān)的macroffiA同工型的表達(dá)。(a)通過(guò)免疫組化測(cè)定一組260份乳癌樣品中的增殖指數(shù)和組蛋白變體的水平，所述免疫組化采用抗增殖標(biāo)志物Ki-67、macroHlAl.l、macroH2Al.2和macroH2A2的抗體。Ki_67以核心內(nèi)所有腫瘤細(xì)胞中陽(yáng)性染色的腫瘤細(xì)胞的百分比進(jìn)行評(píng)分。以半定量方式測(cè)定maCr0H2Al.1的表達(dá)水平(評(píng)分0-1，陰性/弱染色；1-2，中度染色；2-3，強(qiáng)的細(xì)胞核陽(yáng)性)。(b)箱線圖示出了隨著增殖指數(shù)提高，maCroH2Al.1的表達(dá)降低(P<0.001)。(c)對(duì)maCroH2A2觀察到了相同的相關(guān)性。在這些樣品中普遍以高水平表達(dá)MaCroH2Al.2。圖2示出了maCroH2Al.1表達(dá)預(yù)測(cè)癌癥，優(yōu)選肺癌的復(fù)發(fā)。(a)通過(guò)免疫組化測(cè)定肺腫瘤的增殖指數(shù)，所述免疫組化采用抗Ki-67的抗體。(b)隨著增殖指數(shù)提高，macroH2Al.1的表達(dá)水平降低(P<0.001)。(c)在肺腫瘤樣品中，表達(dá)水平顯示與無(wú)病存活顯著相關(guān)(P=0.0058)。圖3示出了macroH2A同工型在衰老期間上調(diào)。(a)macroH2Al同工型在K-fcis+/LSLC12Vgeo敲進(jìn)(knock-in)小鼠的肺部的表達(dá)。在含有低級(jí)別腺瘤(L)和高級(jí)別腺癌(H)的石蠟包埋的肺組織的連續(xù)切片中分析了maCroH2Al.1(上圖)和maCroH2Al.2水平(下圖)的免疫組化檢測(cè)。在低級(jí)別腺瘤中衰老期間富含MaCr0H2Al·1表達(dá)。(b)增殖(小核)和衰老(大核)的W138原代成纖維細(xì)胞的免疫染色。MacroH2Al.1和macroH2Al.2定位于衰老相關(guān)的異染色質(zhì)位點(diǎn)(heterochromaticfoci,SAHF)，并且在衰老細(xì)胞中以更高水平表達(dá)。相反地，衰老不改變常規(guī)組蛋白。(e)在衰老期間maCr0H2Al上調(diào)的蛋白質(zhì)印跡。ITM細(xì)胞是原代成纖維細(xì)胞，將其改造以經(jīng)添加它莫西芬(tamoxifen)類(lèi)似物40HT而進(jìn)行致癌基因同時(shí)誘導(dǎo)的衰老(Collado等，2005)。本發(fā)明人連續(xù)觀察到maCroH2Al在衰老細(xì)胞中的水平升高。常規(guī)組蛋白H2A和H3的蛋白水平在衰老細(xì)胞中略微降低。圖4示出的蛋白質(zhì)印跡顯示了親和純化的抗體對(duì)三種macroffiA同工型的特異性。HA標(biāo)記的macroffiA同工型在HEK293細(xì)胞中表達(dá)，并且將全細(xì)胞提取物上樣用于蛋白質(zhì)印跡分析。圖5示出了macroffiA同工型在一組260份乳癌樣品中的表達(dá)。(a)通過(guò)免疫組化測(cè)定增殖指數(shù)和組蛋白變體的水平，所述免疫組化采用抗Ki-67、macroHlAl.1、macroH2Al.2,macroH2A2的抗體。(b)箱線圖示出了隨著增殖指數(shù)提高，maCroH2Al.1的表達(dá)水平降低(P<0.001)。(c)對(duì)maCroH2A2同工型觀察到了相同的相關(guān)性。值得注意的是，在這些樣品中普遍以高水平表達(dá)MacroH2Al.2。圖6示出了mH2A2在肺癌中的表達(dá)水平。(a)通過(guò)免疫組化檢測(cè)Ki_67和maCroH2A2來(lái)測(cè)定增殖指數(shù)和組蛋白變體的表達(dá)水平。(b)隨著增殖提高，maCroH2A2的表達(dá)水平降低(P<0.001)。(c)macroH2A2的表達(dá)水平與腫瘤復(fù)發(fā)相關(guān)(P=0.04146)。圖7示出了macroffiAl.2在大部分肺腫瘤中以高水平表達(dá)。通過(guò)免疫組化檢測(cè)Ki-67、macroH2Al.2和H3來(lái)測(cè)定增殖指數(shù)、組蛋白變體和核心組蛋白的表達(dá)。在mH2Al.2和Ki-67表達(dá)之間不存在相關(guān)性，組蛋白H3在所有細(xì)胞中都表達(dá)強(qiáng)烈。SEQIDNo.1至SEQIDNo.8示出了在下文的實(shí)施例中使用的寡核苷酸的序列。實(shí)施例材料和方法組蛋白和mRNA提取、蛋白質(zhì)印跡和實(shí)時(shí)PCR之前已描述了表達(dá)開(kāi)關(guān)MEKl-ER融合蛋白的ITM細(xì)胞的生成。在用或不用40HT孵育后，收獲細(xì)胞并分成等分試樣。將一個(gè)細(xì)胞等分試樣重懸于0.4MHCl中，孵育4h以提取組蛋白，離心并以水透析。使用RNeasyMinift·印試劑盒^jiagen)提取RNA。用丙酮從RNAeasy旋轉(zhuǎn)柱的流過(guò)液中沉淀蛋白。在上樣之前通過(guò)考馬斯亮藍(lán)(Bradford)法將蛋白提取物標(biāo)準(zhǔn)化。使用同工型-特異性macroH2A抗體以及抗H2A(Abcam，abl5653;13000)和H3(Abcam;abl791;130000)的商業(yè)抗體進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡。使用SuperscriptII逆轉(zhuǎn)錄酶(Invitrogen)進(jìn)行第一鏈cDNA合成。然后通過(guò)實(shí)時(shí)PCR(AppliedBiosystems)使用下述引物分析cDNAmH2Al.1AAGTTGTACAGGCTGACATTGC(SEQIDNo.1)；GTTCTTTTTCCGGAGTTCCA(SEQIDNo.2)，mH2Al.2CTTTGAGGTGGAGGCCATAA(SEQIDNo.3)；CACAAACTCCTTGCCACCTT(SEQIDNo.4)，mH2A2GGACGTCCAAAAAGTCCAAA(SEQIDNo.5)；GCTTCTGTCCCAGAACAAGG(SEQIDNo.6)，禾口GAPDHTGGGTGTGAACCATGAGAAGTA(SEQIDNo.7)；CCTTCCACGATACCAAAGTTGT(SEQIDNo.8)。將樣品標(biāo)準(zhǔn)化為GAPDH，所述GAPDH之前由本發(fā)明人鑒定為對(duì)于這些實(shí)驗(yàn)測(cè)試運(yùn)行中的可靠對(duì)照?？贵w的生成表達(dá)MacroH2A1.1(氨基酸198-226)和macroH2Al.2(氨基酸198-228)并純化為GST-融合蛋白。將maCroH2A2的大結(jié)構(gòu)域(氨基酸162-372)純化為(His)6-標(biāo)記的融合蛋白。將抗原注射到兔(Eurogentec)中。使用HiTrap蛋白-GHP柱(GEHealthcareLifeSciences)根據(jù)制造商的說(shuō)明從兔血清中回收抗體。將maCroH2A的3個(gè)同工型重組的(His)6-標(biāo)記的大結(jié)構(gòu)域結(jié)合到HiTrapNHS-活化的HP(GEHealthcare)上。之后將這些柱子用于親和純化同工型-特異性抗體。乳癌組織微陣列乳癌TMA由德國(guó)國(guó)家腫瘤疾病中心(NationalCenterofTumorDiseases(NCT)，海德堡，德國(guó))提供。它們含有260位患者的福爾馬林固定和石蠟包埋的樣品，其中每個(gè)玻片上有每位患者的2份樣品，并分布于不同的塊。所有的乳癌患者均為女性，中值年齡為58歲(范圍30-88歲)。與這些患者相關(guān)的臨床數(shù)據(jù)還不足以進(jìn)行進(jìn)一步分析。肺癌患者和肺組織微陣列肺癌TMA由德國(guó)海德堡胸科診所(Thoraxklinik)和NCT提供。玻片上含有41位患有可切除NSCLC的患者的樣品，且患者在2004年3月至12月接受過(guò)手術(shù)(23位患有腺瘤，18位患有鱗狀細(xì)胞癌)。在手術(shù)期間收集這些患者的樣品，并經(jīng)福爾馬林固定和石蠟包埋，然后用于構(gòu)建TMA，所述TMA還包括對(duì)照樣品。出于質(zhì)量原因，2位患者的樣品無(wú)法分析，因此在分析中包括39位患者的樣品。研究群體的臨床特征參見(jiàn)表1。人體材料的收集和使用經(jīng)地方倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(倫理表決#270/2001,2005年更新)?；颊咧橥?。表1非小細(xì)胞肺癌研究群體的特征權(quán)利要求1.用于診斷哺乳動(dòng)物患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括檢測(cè)獲自所述患者的生物學(xué)樣品中macroH2Al.1和/或macroH2A2的表達(dá)，其中所述macroH2Al.1和/或maCr0H2A2的低表達(dá)或降低表達(dá)是所述患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提高的指征。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中將所述表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)化為所述樣品和/或?qū)φ諛悠分衜acroH2Al.2的表達(dá)。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述maCroH2Al.1或maCroH2A2的表達(dá)與無(wú)病存活之間的相關(guān)性為P<0.05，優(yōu)選P<0.01，更優(yōu)選P<0.006。4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述癌癥選自實(shí)體癌、肺癌、乳癌、腎癌、肝癌、頭頸部癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、食管癌和腦癌。5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述生物學(xué)樣品選自來(lái)自肺腫瘤、乳腺腫瘤、腎腫瘤、肝腫瘤、頭頸部腫瘤、前列腺腫瘤、胰腺腫瘤、胃腫瘤、結(jié)腸腫瘤、甲狀腺腫瘤、食管腫瘤和腦腫瘤的細(xì)胞、全血、血清、血漿、尿液、淋巴液、胸膜液以及腦液。6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括檢測(cè)諸如Ki-67的其它癌癥標(biāo)志物的表達(dá)。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述樣品中所述maCroH2Al.1和/或maCroH2A2的所述表達(dá)與Ki-67的表達(dá)負(fù)相關(guān)。8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括基于maCr0H2Al.1的表達(dá)，診斷腫瘤中的衰老細(xì)胞，特別是癌細(xì)胞。9.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的方法，其還包括基于所述診斷預(yù)測(cè)所述癌癥復(fù)發(fā)。10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述樣品在手術(shù)期間取自患者。11.根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述檢測(cè)表達(dá)包括PCR，特別是rtPCR；免疫組化染色，特別是使用maCroH2Al.1-特異性抗體或maCroH2A2-特異性抗體；禾口/或mRNA分析。12.用于maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性試劑的篩選方法，所述方法包括使macroH2Al.1或macroH2A與macroH2Al.1或macroH2A2潛在特異的試劑相接觸，并且測(cè)定所述試劑是否特異性地結(jié)合macroH2Al.1或macroH2A。13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的篩選方法，其中所述maCroH2Al.1或maCroH2A2潛在特異的試劑存在于化合物庫(kù)；噬菌體展示庫(kù)，特別是sc-Fv噬菌體展示庫(kù)；或抗體庫(kù)中。14.根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的篩選方法，其中所述maCroH2Al·1或maCroH2A2潛在特異的試劑為診斷試劑和/或治療試劑。15.根據(jù)權(quán)利要求12至14中任一項(xiàng)所述方法篩選的診斷試劑和/或治療試劑。16.用于產(chǎn)生macroH2Al.1或macroH2A2特異性抗體或者其macroH2Al.1或macroH2A2特異性片段的方法，所述方法包括以下步驟a)使用結(jié)合至色譜柱的maCroH2Al.1或maCroH2A2結(jié)構(gòu)域親和純化含有抗體的血清或細(xì)胞培養(yǎng)物上清液，或b)使用macroH2Al.1或macroH2A2結(jié)構(gòu)域篩選sc-Fv噬菌體展示庫(kù)。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述方法產(chǎn)生的maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性抗體或者其macroH2Al.1或macroH2A2特異性片段。18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的maCroH2Al.1或maCroH2A2特異性抗體，其選自任選地包含標(biāo)記的單克隆抗體、多克隆抗體、人抗體、人源化的抗體和/或重組抗體。19.用于進(jìn)行根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述方法的診斷試劑盒，其包括根據(jù)權(quán)利要求15所述的診斷試劑和/或根據(jù)權(quán)利要求17或18所述的macroH2Al.1或macroH2A2特異性抗體或者其maCr0H2Al.1或maCroH2A2特異性片段，以及任選地其它助劑。20.治療哺乳動(dòng)物患者中癌癥的方法，所述方法包括根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的方法，以及治療和/或預(yù)防患者中所述癌癥的復(fù)發(fā)，所述患者是鑒定為具有癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提高的患者。21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的治療哺乳動(dòng)物患者中癌癥的方法，其中所述治療包括向有此需要的所述患者給予根據(jù)權(quán)利要求10至12中任一項(xiàng)所述方法篩選的試劑。22.根據(jù)權(quán)利要求20或21所述的治療哺乳動(dòng)物患者中癌癥的方法，其還包括基于macroH2Al.1的表達(dá)，在響應(yīng)于所述治療的腫瘤中監(jiān)測(cè)衰老細(xì)胞，特別是癌細(xì)胞的量和/或比例。23.根據(jù)權(quán)利要求12至14中任一項(xiàng)所述的方法篩選的試劑、和/或根據(jù)權(quán)利要求16或17所述的macroH2Al.1或macroH2A2特異性抗體或者其macroH2Al.1或macroH2A2特異性片段、或根據(jù)權(quán)利要求19所述的試劑盒在預(yù)防、治療和/或診斷癌癥，特別是預(yù)防、治療和/或診斷癌癥復(fù)發(fā)中的用途。24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的用途，其中所述癌癥選自實(shí)體癌、肺癌、乳癌、腎癌、肝癌、頭頸部癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、食管癌和腦癌。全文摘要本發(fā)明涉及用于診斷哺乳動(dòng)物患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的方法，所述方法包括檢測(cè)獲自所述患者的生物學(xué)樣品中macroH2A1.1和/或macroH2A2的表達(dá)，其中所述macroH2A1.1和/或macroH2A2的低表達(dá)或降低表達(dá)是所述患者中癌癥復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)提高的指征?；谒鲈\斷方法，本發(fā)明還涉及用于治療癌癥，特別是乳癌和/或肺癌的改進(jìn)方法。文檔編號(hào)G01N33/574GK102472753SQ201080029880公開(kāi)日2012年5月23日申請(qǐng)日期2010年7月2日優(yōu)先權(quán)日2009年7月2日發(fā)明者安德里亞·拉杜爾奈爾,托馬斯·穆雷,朱迪斯·斯珀?duì)柖魃暾?qǐng)人:歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,海德堡胸科診所有限公司