專利名稱：同時測定煙田土壤中三種不同類型除草劑殘留量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于煙田土壤中農(nóng)藥殘留的理化檢測技術(shù)領(lǐng)域，主要涉及煙田土壤中敵
稗、砜密磺隆和精喹禾靈等三種農(nóng)藥殘留量的測定技術(shù)，具體來說就是一種同時測定煙田 土壤中三種不同類型除草劑殘留量的方法。
背景技術(shù)：
敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈是農(nóng)田常用的三種除草劑，主要用途是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn) 中用以消滅或控制雜草生長。其中敵稗(N-3，4-二氯苯基丙酰胺)是酰胺類觸殺型 芽后除草劑，主要是防除稻田稗草及其他禾本科雜草；砜密磺隆[l-(4，6二甲氧基嘧 啶-2-基)_3-(3-乙基磺酰基-2-吡啶磺酰)脲]屬磺酰脲類除草劑，可以有效防治多種 一年生和多年生禾本科雜草和闊葉雜草，如田薊、鐵荸薺、香附子、鈹葉酸模等多年生雜草； 精喹禾靈KR)-2-[4(6-氯-2-喹惡啉氧基)苯氧基]丙酸乙酯}屬雜環(huán)氧基苯氧基丙酸 類除草劑，防治大豆、花生、蔬菜、小米和棉花等作物中的禾本科雜草。上述的除草劑在煙草 的生產(chǎn)過程共同發(fā)揮著不可替代的作用，促進(jìn)了煙草生產(chǎn)，但長期使用除草劑產(chǎn)生的殘留 對人類健康和環(huán)境安全都具有潛在的危害，尤其是除草劑在土壤中殘留后直接影響到煙草 的安全生產(chǎn)，進(jìn)而影響到煙草及其煙草制品的質(zhì)量安全?，F(xiàn)有技術(shù)中，敵稗、砜密磺隆和精 喹禾靈只有各自單獨(dú)的檢測方法。其中NY/T761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷有機(jī)氯擬除 蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》規(guī)定了敵稗的殘留檢測方法，樣品以乙腈提取， 弗羅里硅土柱凈化，氣相色譜直接測定；祁彥，占春瑞，張新忠等《高效液相色譜法同時測定 大豆中10種磺酰脲類除草劑的殘留量》色譜[J]，2004(22) :634-638頁，介紹了樣品經(jīng)乙 腈提取、正己烷液_液分配、Florisil填充柱凈化后，采用高效液相色譜二極管陣列檢測器 (DAD)測定砜密磺隆的方法；曾得意，施海燕，李波等《氣相色譜法(NPD)測定水和土壤中精 喹禾靈的殘留量》貴州大學(xué)學(xué)報[J]，2006(23) :184-187頁，介紹了土壤樣品以丙酮提取， 石油醚萃取，弗羅里硅土柱凈化，氣相色譜測定精喹禾靈的分析方法。以上文獻(xiàn)為三種除草 劑的檢測提供了分析依據(jù)，資料顯示如果要檢測土壤中的敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈既需 要用到氣相色譜儀也要用到液相色譜儀，用到的檢測器包括電子捕獲檢測器，氮磷檢測器 和二極管陣列檢測器；以下捕獲檢測器簡稱ECD，氮磷檢測器簡稱NPD， 二極管陣列檢測器 簡稱DAD。而且三種農(nóng)藥有不同的前處理方法，用到大量的化學(xué)試劑，檢測三種除草劑要分 步進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)步驟相對繁瑣，需要耗費(fèi)大量時間和精力，且要求實(shí)驗(yàn)室同時配有氣相和液相 色譜儀，并配不同檢測器，對實(shí)驗(yàn)室條件要求較高，普及性很差。未見同時測定敵稗、砜密磺 隆和精喹禾靈這三種不同類型除草劑的其他文獻(xiàn)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的旨在克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種同時測定煙田土壤中三種不同類 型除草劑殘留量的方法。該方法克服了現(xiàn)有的方法不能同時檢測敵稗、砜密磺隆和精喹禾 靈三種不同類型除草劑殘留的不足，克服了傳統(tǒng)檢測方法需要用到氣相色譜儀和液相色譜
3儀不同檢測器的條件限制，無需液液萃取處理，縮減了操作步驟，能夠快速、準(zhǔn)確檢測煙田
土壤中敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈三種除草劑的殘留，測定結(jié)果準(zhǔn)確，干擾少。 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種同時測定煙田土壤中三種不同
類型除草劑殘留量的方法，包括以下步驟 (1)、稱取樣品準(zhǔn)確稱取一定量的土壤于三角燒瓶中，加入等量的超純水混合均 勻； (2)、乙腈提取將三角燒瓶置于振蕩器上振蕩，進(jìn)行農(nóng)藥提??； (3)、過濾濃縮提取液經(jīng)定性濾紙過濾，濾液加NaCl鹽析，定量吸取上層液體，置
于恒溫水浴上濃縮近干； (4)、固相萃取濃縮液過弗羅里硅土小柱固相萃取凈化，再次濃縮定容后，即為樣 品待測液； (5)、準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別移取100 ii L濃度均為1000mg/L的三種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶 液敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈到同一個10mL容量瓶中，用正己烷定容，并最終配制成具有 濃度梯度的三種混合農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液； (6)、氣相色譜測定吸取配制好的不同濃度的混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其中，進(jìn)氣 相色譜儀配ECD ; (7)、農(nóng)藥殘留量測定結(jié)果的計算 以外標(biāo)法進(jìn)行農(nóng)藥殘留量的定量分析，即以已知濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰面
積比對其相應(yīng)濃度進(jìn)行回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，對樣品進(jìn)行測定，測得檢出農(nóng)藥的色譜峰
面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得樣品中敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈等農(nóng)藥的殘留量。 在本發(fā)明中，恒溫水浴的溫度為7(TC;弗羅里硅土小柱固相萃取凈化條件為先用
5mL二氯甲烷丙酮二2 : 3預(yù)淋洗，再將樣品轉(zhuǎn)入小柱中，用5mL二氯甲烷將樣品溶解轉(zhuǎn)
移上柱，棄去淋洗液；再用二氯甲烷丙酮=2 : 3淋洗，收集淋洗液約12mL。 上述標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制方式如下分別移取100ii L濃度均為1000mg/L的三
種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈到同一個lOmL容量瓶中，用正己烷定容，配
制成濃度為10mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，再分別移取一定體積的10mg/L混合標(biāo)液于10mL容
量瓶中，用正己烷定容，即配制成不同濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，標(biāo)準(zhǔn)序列為0.01mg/L、
0. 05mg/L、0. Img/L、0. 5mg/L和1. Omg/L ;按稱取25g 土壤樣品計算，即得到標(biāo)準(zhǔn)序列為
0. 01mg/L、0. 05mg/L、0. Img/L、0. 5mg/L禾卩1. Omg/L。 在氣相色譜測定時，采用的色譜條件為色譜柱 VF-IMS(O. 25mmX30mX0. 25iim);分流進(jìn)樣，分流比1 : 10 ;進(jìn)樣口 250 。C，檢測室 320。C，載氣4，流速1. OmL/min ;柱升溫程序初始IO(TC，以l(TC /min升至280。C，保留 6min。 上述的濃縮近干的意思就是，接近干燥狀態(tài)，沒有具體的含水量。 本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)不能同時檢測三種不同類型除草劑殘留的缺陷，綜合煙田
土壤中敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈各自方法的特點(diǎn)，對樣品前處理方法和儀器檢測條件進(jìn)
行了優(yōu)化。與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明具有以下優(yōu)良效果 (1)本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了三種不同類型除草劑的一次性測定，實(shí)現(xiàn)了儀器設(shè)備的簡單化， 大大節(jié)約了檢測成本。現(xiàn)有的文獻(xiàn)報道，敵稗用氣相色譜儀配ECD檢測；砜密磺隆用液相色譜儀配DAD檢測；精喹禾靈用氣相色譜儀配NPD檢測。單從儀器設(shè)備來說就需要大量的硬件投入，后期的運(yùn)行維護(hù)成本更高，使很多實(shí)驗(yàn)室受到條件限制而無法完成檢測工作。本發(fā)明將三種不同類型除草劑同時用氣相色譜儀配ECD測定，大大節(jié)約了儀器設(shè)備與成本，可以滿足不同條件實(shí)驗(yàn)室的工作需求。 (2)本發(fā)明樣品前處理流程簡單，大大縮短了每個煙田土壤樣品的檢測時間。從敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈各自方法的前處理流程來看， 一般都需要液液萃取這一較為繁瑣的過程，本發(fā)明對弗羅里硅土小柱固相萃取凈化的條件進(jìn)行了優(yōu)化，不需先液液萃取凈化就直接上柱凈化，既縮短了前處理時間，又避免了樣品在液液萃取過程中待測農(nóng)藥組分的損失，使實(shí)驗(yàn)操作更加簡便、快捷。 (3)本發(fā)明采用乙腈作為提取試劑，克服了使用丙酮提取帶來的雜質(zhì)較多，容易揮
發(fā)改變提取溶液中農(nóng)藥組分濃度等問題，即保證了敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈等三種不同
類型除草劑的提取效率，又能減少土壤中雜質(zhì)的干擾。 (4)本發(fā)明具有檢測靈敏度高、準(zhǔn)確及重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。 ①本發(fā)明的檢測限 采用實(shí)際測定的方法，將不同濃度的敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)氣相色譜儀配ECD檢測，煙田土壤中敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈的檢測限均為0. 01mg/kg。
②本發(fā)明的添加回收率和重現(xiàn)性 在煙田土壤中加入兩個濃度梯度的敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后進(jìn)行前處理，再用氣相色譜儀配ECD檢測分析，并按照加標(biāo)量和測定值計算其添加回收率，結(jié)果見表1，由表1可以看出，均按0. Olmg/L和0. lmg/L兩個濃度梯度進(jìn)行添加，三種不同類型除草劑在煙田土壤中的添加回收率在77. 13%-105. 64%之間，變異系數(shù)(C. V)在5. 50-10. 54之間，說明本發(fā)明回收率高，重現(xiàn)性好。 表1煙田土壤中敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈的添加回收率和重現(xiàn)性
除草劑添加濃度添加回收率(％)變異系數(shù)
品禾中(mg/kg)1234平均值(%)
敵稗0.0191.2580.6888.8681.0684.5785.285.50
0.194.6298.2982.33105.6484.0592.9910.54
砜嘧磺隆0.0178.6283.1279.3889.3295.6585.228.46
0.180.4592.8794.2186.6379.3486.707.90
精喹禾靈0.0195.6878.0983.1677.1381.9783.218.92
0.180.2697.3381.5388.3881.7685.858.3

圖1為本發(fā)明的測定方法流程圖。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例做進(jìn)一步描述，但并不是限制本發(fā)明。
實(shí)施例
5
—種同時測定煙田土壤中三種不同類型除草劑殘留量的方法。
(1)、儀器、試劑及材料 美國Agilent GC-6890N氣相色譜儀(帶ECD和Agilent 7683series自動進(jìn)樣 器)，振蕩器，梅特勒AB204-E型電子天平(0. 0001) ， SHZ-C型水浴恒溫振蕩器，Varian弗羅 里硅土小柱(6mL/1000mg)等。 二氯甲烷、乙腈、丙酮、正己烷均為色譜純，氯化鈉為分析純。敵稗、砜密磺隆和精 喹禾靈共三種標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度均為1000mg/L。
(2)、樣品前處理 提取稱取煙田土壤樣品25. Og于250mL三角瓶中，加20mL蒸餾水，50mL乙腈，搖 勻后在振蕩器上振蕩提取30分鐘，用玻璃漏斗過濾，收集濾液于裝有5gNaCl的100mL具塞 量筒中，劇烈振搖lmin，靜置10min，待液面完全分層，用20mL移液管移取上層有機(jī)相20mL 于50mL小燒杯中，于70。C恒溫水浴上濃縮近干，待凈化。 凈化弗羅里硅土小柱凈化，先用5mL 二氯甲烷丙酮=2 : 3預(yù)淋洗，再將樣品
轉(zhuǎn)入小柱中，用5mL二氯甲烷將樣品溶解轉(zhuǎn)移上柱，棄去淋洗液；再用二氯甲烷丙酮=
2 : 3淋洗，收集淋洗液12mL，于7(TC恒溫水浴上濃縮近干，濃縮液用正己烷定容至2mL容
量瓶，待氣相色譜測定。 (3)、準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)工作溶液 分別移取100 ii L濃度均為1000mg/L的三種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液敵稗、砜密磺隆和精喹 禾靈到同一個lOmL容量瓶中，用正己烷定容，配制成濃度為10mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，再分 別移取一定體積的10mg/L混合標(biāo)液于lOmL容量瓶中，用正己烷定容，即配制成不同濃度的 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，標(biāo)準(zhǔn)序列為0. 01mg/L、0. 05mg/L、0. Img/L、0. 5mg/L和1. Omg/L ;按稱 取25g土壤樣品計算，即得到標(biāo)準(zhǔn)序列為0. 01mg/L、0. 05mg/L、0. Img/L、0. 5mg/L和1. Omg/ L。 (4)、測定方法 將配制好的不同濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液注入氣相色譜儀配ECD，以農(nóng)藥色譜 峰面積比對其相應(yīng)濃度進(jìn)行回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。對樣品待測液進(jìn)行測定，測得檢出 農(nóng)藥的色譜峰面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得樣品中敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈的含量分別為 0. 056mg/Kg、0. 12mg/Kg禾口 0. 27mg/Kg。 采用的色譜條件為色譜柱VF-IMS(O. 25mmX 30mXO. 25 y m);分流進(jìn)樣，分流比 1 : 10 ;進(jìn)樣口 250。C，檢測室:320。C，載氣4，流速1. OmL/min ;柱升溫程序初始IO(TC， 以10°C /min升至280°C ，保留6min。 在上述色譜分析條件下敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈的保留時間分別為13. 158、 18.525和21. 494min。 為判斷方法的準(zhǔn)確性，在此煙田土壤中加入0. 05mg/Kg的敵稗、0. 10mg/Kg的砜密 磺隆和0. 30mg/Kg精喹禾靈標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行同上的樣品處理，以氣相色譜儀(配ECD)測定 敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈的色譜峰面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得此時樣品中的敵稗、砜密磺 隆和精喹禾靈含量分別為0. 10mg/Kg、0. 205mg/Kg和0. 55mg/Kg，即敵稗、砜密磺隆和精喹 禾靈的加標(biāo)回收率分別為88. 0%、85. 0%和93. 3% ，說明此方法是準(zhǔn)確的。
權(quán)利要求
一種同時測定煙田土壤中三種不同類型除草劑殘留量的方法，其特征在于包括以下步驟(1)、稱取樣品準(zhǔn)確稱取一定量的土壤于三角燒瓶中，加入等量的超純水混合均勻；(2)、乙腈提取將三角燒瓶置于振蕩器上振蕩，進(jìn)行農(nóng)藥提?。?3)、過濾濃縮提取液經(jīng)定性濾紙過濾，濾液加NaCl鹽析，定量吸取上層液體，置于恒溫水浴上濃縮近干；(4)、固相萃取濃縮液過弗羅里硅土小柱固相萃取凈化，再次濃縮定容后，即為樣品待測液；(5)、準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別移取100μL濃度均為1000mg/L的三種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈到同一個10mL容量瓶中，用正己烷定容，并最終配制成具有濃度梯度的三種混合農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；(6)、氣相色譜測定吸取配制好的不同濃度的混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其中，進(jìn)氣相色譜儀配ECD；(7)、農(nóng)藥殘留量測定結(jié)果的計算以外標(biāo)法進(jìn)行農(nóng)藥殘留量的定量分析，即以已知濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰面積比對其相應(yīng)濃度進(jìn)行回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，對樣品進(jìn)行測定，測得檢出農(nóng)藥的色譜峰面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得樣品中敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈等農(nóng)藥的殘留量。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時測定煙田土壤中三種不同類型除草劑殘留量的方法，其特征在于所述的恒溫水浴的溫度為70°C ;弗羅里硅土小柱固相萃取凈化條件為先用5mL二氯甲烷丙酮=2 : 3預(yù)淋洗，再將樣品轉(zhuǎn)入小柱中，用5mL二氯甲烷將樣品溶解轉(zhuǎn)移上柱，棄去淋洗液；再用二氯甲烷丙酮=2 : 3淋洗，收集淋洗液約12mL。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時測定煙田土壤中三種不同類型除草劑殘留量的方法，其特征在于所述的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制方式如下分別移取100ii L濃度均為1000mg/L的三種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈到同一個10mL容量瓶中，用正己烷定容，配制成濃度為10mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，再分別移取一定體積的10mg/L混合標(biāo)液于10mL容量瓶中，用正己烷定容，即配制成不同濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，標(biāo)準(zhǔn)序列為0.01mg/L、0. 05mg/L、0. Img/L、0. 5mg/L和1. 0mg/L ;按稱取25g 土壤樣品計算，即得到標(biāo)準(zhǔn)序列為0. 01mg/L、0. 05mg/L、0. Img/L、0. 5mg/L和1. 0mg/L。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時測定煙田土壤中三種不同類型除草劑殘留量的方法，其特征在于所述的氣相色譜測定所采用的色譜條件為色譜柱VF-IMS(O. 25mmX30mX0. 25iim);分流進(jìn)樣，分流比1 : 10 ;進(jìn)樣口 250 。C，檢測室320。C，載氣4，流速1. OmL/min ;柱升溫程序初始IO(TC，以l(TC /min升至280。C，保留6min。
全文摘要
本發(fā)明是一種同時測定煙田土壤中三種不同類型除草劑殘留量的方法。屬于煙田土壤中農(nóng)藥殘留的理化檢測技術(shù)領(lǐng)域。具體來說就是用乙腈提取，弗羅里硅土固相萃取，以氣相色譜儀配電子捕獲檢測器直接測定煙田土壤中敵稗、砜密磺隆和精喹禾靈等三種不同類型除草劑的殘留量。本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)的缺陷和條件的限制，對煙田土壤樣品前處理方法和儀器檢測條件進(jìn)行了優(yōu)化，與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明具有如下優(yōu)良效果本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了三種不同類型除草劑的一次性檢測，前處理流程簡便，具有檢測靈敏度高、準(zhǔn)確及重現(xiàn)性好的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號G01N30/00GK101718756SQ200910227008
公開日2010年6月2日 申請日期2009年11月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月24日
發(fā)明者劉春來, 匡傳富, 史雄彬, 周國生, 成軍平, 曾維愛, 李曉燕, 鄧正平, 鄭雄志, 黃艷寧 申請人:湖南省煙草公司郴州市公司;曾維愛;劉春來