專利名稱：檢測裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于檢測裝置，更具體的講，是關(guān)于一種分析液體樣品中是否存分析物 質(zhì)的檢測裝置。
背景技術(shù)：
利用橫向流動免疫試劑條來檢測樣品中被分析物的裝置越來越普及，但是，檢測 的準(zhǔn)確性仍然需要改進(jìn)和提高。特別地，當(dāng)檢測樣品中的一些細(xì)菌或病毒抗原或抗體的 時候，需要準(zhǔn)確的獲得檢測結(jié)果更為重要。例如，利用雙抗體原理來檢測血液樣品中鏈球 菌(Strep Α)抗原的免疫檢測裝置中，通常需要把一種結(jié)合抗原的抗體固定在載體上，例 如硝酸纖維素膜上，然后再在載體上處理一些封閉試劑，例如牛血清蛋白(BSA)或酪蛋白 (Casein)，然后再把載體干燥，最后制備成干的載體或試劑條。這樣處理雖然可以提高檢測 的準(zhǔn)確性，當(dāng)大量規(guī)?；a(chǎn)時，這樣處理的過程過于煩瑣，另外，這樣的處理對某些被分 析物的檢測并不能明顯提高檢測的準(zhǔn)確性，還是容易出現(xiàn)假陽性的結(jié)果，例如丙型肝炎病 毒(HCV)抗原。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決以上問題，本發(fā)明提供一種檢測裝置和檢測方法，可以明顯提高檢測結(jié) 果的準(zhǔn)確性，同時簡化了生產(chǎn)工藝。一方面，本發(fā)明提供一種檢測裝置，包括支持液體流動的載體，在載體上包括 一個被分析物結(jié)合區(qū)，一個反應(yīng)試劑區(qū)；一個封閉試劑區(qū)；所述的被分析物結(jié)合區(qū)包括一 種特異性的結(jié)合分子；所述的封閉試劑區(qū)上包括一種或幾種封閉試劑；所述的反應(yīng)試劑區(qū) 上包括一種或幾種完成反應(yīng)的反應(yīng)試劑；其中，所述的封閉試劑比其中的一種反應(yīng)試劑提 前接觸所述被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。在一個優(yōu)選的方式中，在沒有施加液體樣 品到檢測裝置前，載體上各個區(qū)都以干的狀態(tài)存在，在被液體濕潤后，封閉試劑和反應(yīng)試劑 被液體向被分析物結(jié)合區(qū)移動。在一些具體的方式中，為了讓封閉試劑提前接觸被分析物結(jié)合分子的方式可以 是，讓封閉試劑與被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子之間的距離小于反應(yīng)試劑與被分析物 結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子之間的距離。更具體的一個方式中，讓封閉試劑區(qū)位于分析物結(jié) 合區(qū)的上游并且位于反應(yīng)試劑區(qū)的下游。另外，也可以讓封閉試劑區(qū)位于被分析物結(jié)合區(qū) 的下游，反應(yīng)試劑區(qū)位于的被分析物結(jié)合區(qū)的上游。還可以是，反應(yīng)試劑區(qū)位于被分析物結(jié) 合區(qū)的上游，封閉試劑區(qū)與反應(yīng)試劑區(qū)和被分析物結(jié)合區(qū)排列的方向垂直。在一些優(yōu)選的方式中，反應(yīng)試劑包括帶有顏色顆粒的特異結(jié)合被分析物的分子； 封閉試劑比帶有顏色顆粒的特異結(jié)合被分析物的分子提前接觸所述的被分析物結(jié)合區(qū)上 的特異結(jié)合分子。更為具體的方式中，帶有顏色的顆粒標(biāo)記物為金顆?；蛉槟z顆粒。更為 具體的方式中，被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子為被分析物(被分析物為抗原)的第一 抗體，帶有顏色顆粒的特異結(jié)合被分析物的分子為被分析物的第二抗體。4
在一些具體方案中，特異結(jié)合被分析物的結(jié)合分子被固定在載體上。在另外的一 些方式中，封閉區(qū)上的封閉試劑和反應(yīng)試劑可以隨液體移動。這里所說的“固定”是指那些 試劑被處理在載體上而不能隨液體一起移動，最優(yōu)的是90-100 %的試劑不能被移動，也可 能是80-95%的試劑不能隨液體在載體上移動；也可能是60-90%。這里所說的“移動“是 指那些被處理在載體上的試劑能夠被液體移動，最優(yōu)的是80-100%的試劑被液體在載體上 移動；也可能是60-95%的試劑被液體移動，還可能是1-60%的試劑被液體移動。在一些具體的方式中，封閉試劑可以結(jié)合被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子上的 非特異性結(jié)合位點.另一方面，本發(fā)明還提供一種分析液體樣品中被分析物質(zhì)的方法，包括提供一種 支持液體流動的載體，該載體上包括一個被分析物結(jié)合區(qū)，所述的結(jié)合區(qū)上包括一種特異 結(jié)合分子；一種或幾種完成反應(yīng)的反應(yīng)試劑；和一種或幾種與被分析物結(jié)合區(qū)上特異性結(jié) 合分子上的位點結(jié)合的封閉試劑；讓檢測試劑和封閉試劑隨著液體向被分析物結(jié)合區(qū)上的 特異結(jié)合分子移動；讓封閉試劑比反應(yīng)試劑提前接觸所述的被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合 分子。在一個具體的方式中，被分析物結(jié)合區(qū)上特異性結(jié)合分子包括特異結(jié)合被分析物 的一種抗體或抗體片段，反應(yīng)試劑包括特異結(jié)合被分析物質(zhì)的另一種抗體或片段。在以上所有的實施方式中，被分析物質(zhì)結(jié)合區(qū)可以位于硝酸纖維素膜上。另外，封 閉試劑可以為血清蛋白或酪蛋白中的一種或兩種。反應(yīng)試劑還可以包括帶顏色的顆粒標(biāo)記 物。被分析物可以包括丙肝病毒、乙肝病毒、乙肝表面抗原或艾滋病毒。封閉試劑可以帶有 正電荷。另外，在以上所有的實施方式中，載體和載體上的各個區(qū)在未進(jìn)行檢測前都可以為 干的狀態(tài)，當(dāng)進(jìn)行檢測的時候，樣品濕潤載體以及載體上個各個區(qū)，其中反應(yīng)試劑和封閉試 劑能夠被液體移動。有益效果利用本發(fā)明的裝置，可以明顯提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時簡化了生產(chǎn)該裝置的 生產(chǎn)工藝，降低了成本。


圖1為利用三明志雙抗體夾心法檢測樣品中抗原的傳統(tǒng)裝置中試劑條的俯視結(jié) 構(gòu)示意圖，圖IA為未施加液體樣品前的檢測裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；IB為施加液體樣品后 的檢測裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測裝置中，包括一個載體100，在100上包括被分析物 結(jié)合區(qū)105，在105上包括一種特異被分析物質(zhì)的結(jié)合分子101，例如被分析物的第一抗體； 和一個反應(yīng)試劑區(qū)106，在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的另一個特異結(jié) 合分子，被分析物的第二抗體；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑區(qū)被布置在同一個液體流動方 向的上下游。在進(jìn)行檢測的時候，把液體樣品施加到載體100上，讓其從反應(yīng)試劑區(qū)域向被分 析物結(jié)合區(qū)移動，在濕潤的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果 樣品中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過計算標(biāo)記物質(zhì)累 積的多少來判斷被分析物的多少。圖2為本發(fā)明的一個具體實施方式
，圖2A為未施加液體樣品前的檢測裝置的俯視5結(jié)構(gòu)示意圖；圖2B為施加液體樣品后的檢測裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測裝置中，包括 一個單一的載體100，在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105，在105上包括一種特異性的結(jié)合 分子101，和一個反應(yīng)試劑區(qū)106，在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的另一 個特異結(jié)合分子；和一個封閉區(qū)域104，104包括封閉試劑103 ；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑 區(qū)被布置在同一個液體流動方向的上下游，而封閉區(qū)104被設(shè)置成與被分析物結(jié)合區(qū)垂直 (圖2A)，同時讓反應(yīng)試劑區(qū)106與被分析物結(jié)合區(qū)105的距離大于封閉試劑區(qū)104與被分 析物結(jié)合區(qū)105的距離，這樣讓流體在兩個區(qū)間的流動時間不同，從而表現(xiàn)出達(dá)到結(jié)合區(qū) 105的時間有先后。在進(jìn)行檢測的時候，把液體樣品施加到載體100上，讓其從反應(yīng)試劑區(qū) 域向被分析物結(jié)合區(qū)移動，另外把液體樣品施加到載體104上，讓液體沿著載體104向被分 析物結(jié)合區(qū)移動，這樣封閉試劑被液體帶到被分析物結(jié)合區(qū)域先結(jié)合特異結(jié)合分子101上 的一些位點，在濕潤的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑隨后到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果 樣品中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過計算標(biāo)記物質(zhì)累 積的多少來判斷被分析物的多少。圖3為本發(fā)明的一個具體實施方式
，圖3A為未施加液體樣品前的檢測裝置的俯視 結(jié)構(gòu)示意圖；圖3B為施加液體樣品后的檢測裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測裝置中，包括 一個載體100，在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105，在105上包括一種特異結(jié)合被析物質(zhì)的 第一抗體101，和一個反應(yīng)試劑區(qū)106，在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的 另另一個抗體；和一個封閉區(qū)域104，104包括封閉試劑103 ；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑區(qū) 被布置在同一個液體流動方向的上下游，而封閉區(qū)域被設(shè)置在反應(yīng)試劑區(qū)和被分析物結(jié)合 區(qū)之間。在進(jìn)行檢測的時候，把液體樣品施加到載體100上的反應(yīng)試劑區(qū)106上，讓其從反 應(yīng)試劑區(qū)域向被分析物結(jié)合區(qū)105移動，由于位置的不同，液體中的水分子運(yùn)動的速度比 較快，先行到達(dá)封閉區(qū)，這樣封閉試劑先行通過載體到達(dá)被分析物結(jié)合區(qū)先結(jié)合第一抗體 101上的一些位點，同時，也可以先行封閉載體上的一些大的孔，減少這些大孔對反應(yīng)試劑 的截獲；在濕潤的情況下，液體帶著被標(biāo)記的第二抗體隨后到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果樣品 中不存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上就不會發(fā)生非特異性的結(jié)合，不累積標(biāo)記物 質(zhì)，從而通過計算標(biāo)記物質(zhì)累積的多少來判斷被分析物的多少。圖4描繪了本發(fā)明的另一個優(yōu)選的具體實施方式
。圖4A為試劑條結(jié)構(gòu)的立體結(jié) 構(gòu)示意圖，圖4B為試劑條結(jié)構(gòu)的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測裝置中，構(gòu)成樣品墊18的載體 材料為玻璃纖維；構(gòu)成標(biāo)記墊的材料為聚脂膜12，在標(biāo)記墊上處理有帶有乳膠顆粒的抗丙 型肝炎病毒的第一種單克窿抗體；構(gòu)成封閉墊的材料為聚脂膜14，在該膜上處理有酪蛋白 (Casein)；構(gòu)成被分析結(jié)合墊15的材料為硝酸纖維素膜，在該膜上固定了特異結(jié)合丙型肝 炎病毒的另一種單克窿抗體11 ；和構(gòu)成吸水墊17的濾紙，他們首尾相連，讓液體樣品能夠 從樣品墊18流到吸水墊17上。圖5為本發(fā)明的一個具體實施方式
，圖5A為未施加液體樣品前的檢測裝置的俯視 結(jié)構(gòu)示意圖；圖5B為施加液體樣品后的檢測裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測裝置中，包括 一個載體100，在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105，在105上包括一種特異結(jié)合帶有標(biāo)記物 質(zhì)的結(jié)合分子101，和一個反應(yīng)試劑區(qū)106，在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析 物的特異結(jié)合分子；和一個封閉試劑區(qū)104，104包括封閉試劑103 ；反應(yīng)試劑區(qū)106位于被6分析物結(jié)合區(qū)的上游；封閉試劑區(qū)位于被分析物結(jié)合區(qū)的下游，封閉試劑區(qū)與特異結(jié)合分 子的距離小于反應(yīng)試劑區(qū)與特異結(jié)合分子的距離。在進(jìn)行檢測的時候，把液體樣品同時施加到載體100上的反應(yīng)試劑區(qū)106上和封 閉區(qū)上，這樣封閉試劑先行通過載體到達(dá)被分析物結(jié)合區(qū)先結(jié)合特異結(jié)合分子101上的一 些位點，在濕潤的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑隨后到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果樣品 中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過計算標(biāo)記物質(zhì)累積的 多少來判斷被分析物的多少。圖6描繪了本發(fā)明的另一些優(yōu)選的具體實施方式
。圖6A為試劑條結(jié)構(gòu)的立體結(jié) 構(gòu)示意圖，圖6B為試劑條結(jié)構(gòu)的剖面結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測裝置中，構(gòu)成樣品墊18的載體材 料為玻璃纖維；構(gòu)成標(biāo)記墊的材料為聚脂膜12，標(biāo)記墊位于樣品接收墊之上，在墊18的一 端14靠近纖維素薄膜上處理封閉試劑；標(biāo)記墊上處理帶有顏色顆粒的抗被分析物質(zhì)的一 種抗體；構(gòu)成被分析結(jié)合墊15的材料為硝酸纖維素膜，在該膜上固定了特異結(jié)合被分析物 質(zhì)的另一種抗體；和構(gòu)成吸水墊17的濾紙。標(biāo)記說明；載體100 ；特異結(jié)合分子101，反應(yīng)試劑區(qū)106，反應(yīng)試劑102 ；封閉試劑 103 ；封閉區(qū)域104 ；樣品施加墊18 ；構(gòu)成標(biāo)記墊12 ；封閉墊14 ；被分析結(jié)合墊15 ；被分析物 質(zhì)的特異結(jié)合分子帶或檢測線(T線)11 ；吸水墊17。
具體實施例方式下面對本發(fā)明涉及的結(jié)構(gòu)或這些所使用的技術(shù)術(shù)語做進(jìn)一步的說明。腿檢測表示化驗、分析或測試一種物質(zhì)或材料是否存在，比如，但并不限于此，化學(xué) 物質(zhì)、有機(jī)化合物、無機(jī)化合物、新陳代謝產(chǎn)物、藥物或者藥物代謝物、有機(jī)組織或有機(jī)組織 的代謝物、核酸、蛋白質(zhì)或聚合物。另外，檢測表示測試物質(zhì)或材料的數(shù)量。進(jìn)一步說，檢測 還表示免疫檢測，化學(xué)檢測、酶檢測等。鍵支持液體流動的載體是指液體可以在載體上從一個區(qū)流動到另一個區(qū)。在一個具 體的方式中，液體可以從反應(yīng)試劑區(qū)或封閉試劑區(qū)流到到被分析物結(jié)合區(qū)，處理在反應(yīng)試 劑區(qū)或封閉試劑區(qū)上的試劑可以被液體移動到被分析結(jié)合區(qū)上。一方面，這種液體的流動可以是載體本身材質(zhì)的不同而讓液體主動的被移動。在 一個具體方案中，裝置包含一種吸水材料，提供了支持液體流動的載體材料?！拜d體材料”是 指支持液體流動和運(yùn)輸?shù)囊环N材料。在一個具體方案中，載體材料是一種吸水材料。液體 流過本裝置是借助于毛細(xì)管運(yùn)動作用實現(xiàn)的。在不同的具體方案中，載體材料可以是單一 材料構(gòu)成的條狀物(圖2)，也可以是由多種在液體中相互作用的吸水材料組成，如圖4或 6所示，載體包括玻璃纖維組成的樣品應(yīng)用墊18、聚脂材料組成的標(biāo)記墊12、聚脂材料組成 的封閉墊14、硝酸纖維膜組成的被分析物結(jié)合墊15和濾紙組成的吸水墊17?！蔽摹辈?料是指那些可以穩(wěn)定地吸收水分并使水分在其中通過毛細(xì)管運(yùn)動作用運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)。吸水材 料的例子包括硝化纖維，濾紙，玻璃纖維，聚酯和其它合適的物質(zhì)。同時，這種載體材料還包 括只提供一個或幾個單獨(dú)的毛細(xì)管的載體，液體通過這些單獨(dú)的毛細(xì)管作用進(jìn)行移動。另一個方面，這種液體的流動也包括通過機(jī)械或外力的作用進(jìn)行被動移動，例如當(dāng)液體被施加在載體上時，例如由塑料，玻璃等非吸水材料組成的載體，讓載體通過外力傾 斜，液體在重力的作用下從一個區(qū)移動到另一個區(qū)。在一個優(yōu)選的方式中，處理在載體上的試劑以干的狀態(tài)存在，當(dāng)液體被施加到在 載體上的時候，載體被液體濕潤。樣品施加區(qū)檢測裝置可以包括一個樣品施加區(qū)。樣品施加區(qū)可能包括一種緩沖液以溶解樣 品，也可能僅僅是一個載體上的加入樣品的部位，但是也可能包含進(jìn)行試驗的其它試劑。例 如，在那些可以結(jié)合樣品中干擾反應(yīng)的物質(zhì)的“清道夫”抗體有用的具體方案中，“清道夫” 抗體可以放在樣品應(yīng)用區(qū)，試劑區(qū)或者載體的其它區(qū)上。因此樣品施加區(qū)也成了反應(yīng)試劑 區(qū)。進(jìn)行試驗時液體樣品使用較方便，但是它也可能在試驗條上變干，只能加水、緩沖液和 其它試劑以溶解樣品開始試驗。樣品本身可能是液體樣品，也可能是被溶解的或者被制備 成液體狀的固體樣品。樣品應(yīng)用區(qū)也可以包括樣品應(yīng)用墊18，在檢測的時候，把液體樣品施 加到樣品應(yīng)用墊18上。反應(yīng)試劑包含在試劑區(qū)中的完成反應(yīng)的試劑是可以移動的。在一個具體的實施例子中，一 些試劑能夠附帶在標(biāo)記物質(zhì)上，并與樣品中的目標(biāo)被分析物結(jié)合，形成帶標(biāo)記的被分析物。 樣品應(yīng)用區(qū)和/或反應(yīng)試劑區(qū)也可能包含特殊試驗中需要的溶解樣品和調(diào)節(jié)PH值的緩沖 液。在一個具體方案中，試劑區(qū)包含一種特異性的結(jié)合分子(例如一種抗體或抗體片斷) 和標(biāo)記物質(zhì)相連接。標(biāo)記物質(zhì)可以是任何合適的標(biāo)記，例如金溶膠、熒光染料或者水溶性染 料。特異性的結(jié)合分子能夠特異性地結(jié)合目標(biāo)被分析物的一個或者多個抗原決定基，從而 標(biāo)記被分析物。反應(yīng)試劑區(qū)、被分析物結(jié)合區(qū)結(jié)合目標(biāo)被分析物的標(biāo)記提供產(chǎn)生了被分析物結(jié)合區(qū)的可以觀察到的檢測信號， 當(dāng)樣品中含有被分析物時，被分析結(jié)合區(qū)域上出現(xiàn)標(biāo)記物質(zhì)。被分析物的特異性結(jié)合分子 攜帶有試劑區(qū)的標(biāo)記。當(dāng)被分析物結(jié)合去上的特異性的結(jié)合分子捕獲被分析物而且被標(biāo)記 了的被分析物在被分析物結(jié)合區(qū)被結(jié)合的時候，由于標(biāo)記物質(zhì)在這里積聚這個區(qū)就可以觀 察到。被分析物的特異性的結(jié)合分子也可以和表明樣品中被分析物的存在或者與被分析物 的存在相關(guān)聯(lián)的分子相結(jié)合。牢固結(jié)合是指結(jié)合達(dá)到改變試驗結(jié)果或者使試驗結(jié)果不明顯 的程度。在一些具體方案中，特異性的結(jié)合分子可能是一種抗體或者一種抗體片段(例如， 一種抗體的Fab區(qū))，一種抗原，一種結(jié)合配體的受體或者受體的片段，或者生物素-鏈霉菌 抗生物素蛋白結(jié)合對的一個成分或者其它類型的結(jié)合對。這樣試劑區(qū)就可以提供標(biāo)記物質(zhì)，當(dāng)樣品流過試劑區(qū)的時候，被分析物結(jié)合了可 以產(chǎn)生可檢測信號的標(biāo)記物質(zhì)。“標(biāo)記物質(zhì)區(qū)塊”是指載體上含有可以結(jié)合樣品中可能存在 的被分析物的物質(zhì)的部位。因此一個試劑區(qū)就是一個標(biāo)記區(qū)塊?！皹?biāo)記”可以是產(chǎn)生可檢測 信號的任何合適的標(biāo)記物質(zhì)。例如，標(biāo)記可以是可溶性顆粒，熒光顆粒，化學(xué)發(fā)光顆粒，金屬 或者合金(例如，膠體金)，或者囊，特別是包含可見染料的脂質(zhì)體。疏水溶膠也是有用的， 疏水的有機(jī)染料或者色素在水中不可溶或者只有很有限的一小部分可溶。標(biāo)記物質(zhì)還可以 是聚合體顆粒，例如有色的聚苯乙烯顆粒(例如，球狀的)。其它有用的顆粒狀的標(biāo)記包括 鐵蛋白，藻紅蛋白，藻膽素-蛋白，沉淀的或者可溶性的金屬或者合金，真菌，海藻，或者細(xì)菌的色素或衍生物，例如細(xì)菌的葉綠素或者其它的植物原料。在某些具體方案中，標(biāo)記是有 色顆粒，例如右旋糖苷顆粒。在其它的具體方案中，標(biāo)記可能是被分析物的一種帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異性結(jié)合分 子(例如，一種抗體)。例如，在一個具體方案中，目標(biāo)被分析物是血液樣品中的丙肝病毒 (HCV)，結(jié)合HCV的是帶有金溶膠標(biāo)記的抗HCV抗體。當(dāng)樣品到達(dá)試劑區(qū)(或者標(biāo)記區(qū)塊) 時，樣品中的HCV被金溶膠標(biāo)記的抗HCV抗體結(jié)合。標(biāo)記抗體并不干擾被分析物結(jié)合區(qū)上被 固定的另一種特異結(jié)合分子(捕獲分子)和標(biāo)記的HCV相結(jié)合。例如，標(biāo)記可以結(jié)合被分析 物的一個部分，而捕獲分子可以結(jié)合被分析物的另一個部分或者結(jié)合標(biāo)記。HCV-抗-HCV抗 體-金復(fù)合物移動到載體的下游。當(dāng)復(fù)合物到達(dá)被分析物結(jié)合區(qū)時和捕獲分子相結(jié)合形成 金-抗HCV抗體-HCV-抗HCV抗體。捕獲分子可能是HCV的另一種特異性結(jié)合分子，或者是 結(jié)合HCV被分析物的半體的特異性結(jié)合分子。當(dāng)金-抗-HCV特異性結(jié)合分子-HCV-抗-HCV 特異性結(jié)合分子復(fù)合物結(jié)合到被分析物結(jié)合區(qū)時，被分析物結(jié)合區(qū)被復(fù)合物上的金標(biāo)記著 色并且在被分析物結(jié)合區(qū)金標(biāo)記變得肉眼可見。在一個具體方案中，特異性的結(jié)合分子是 抗體或者抗體片段。標(biāo)記和捕獲結(jié)合分子能夠結(jié)合被分析物上不同的抗原決定部位，在一 個具體方案中，標(biāo)記的特異性結(jié)合分子結(jié)合了 β _hCG，而捕獲結(jié)合分子結(jié)合了 a-hCG?！翱贵w”是指免疫球蛋白，無論是天然的還是部分或者全部合成的。這個術(shù)語還包 括其中保持結(jié)合能力的抗體的衍生物，也包括任何含有與免疫球蛋白的結(jié)合域同源的或者 很大程度上同源的結(jié)合域的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)可能是源自天然物質(zhì)，也可能是部分或者 全部合成的。一種抗體可能是單克隆的或者是多克隆的。一種抗體可能是任何免疫球蛋白 類型中的一員，包括任何人類的免疫球蛋白類型IgG，IgM, IgA, IgD, IgG和IgE?！翱贵w片 段”是抗體的衍生物或者抗體的小于全長的一個部分?？贵w片段能夠保留至少一個全長抗 體的結(jié)合能力的顯著位點?？贵w片斷的例子包括Fab，F(xiàn)ab，，F(xiàn)(ab，)2，scFv, Fv, dsFv 二聚 體，和Fd碎片，但是不僅僅包括以上這些。抗體片段可以由任何方式生成。例如，抗體片段可以通過酶解或者化學(xué)裂解一個 完整的抗體來生成，或者也可以通過從編碼部分抗體序列的基因重組。換句話說，抗體片段 可以部分地或者全部地重組產(chǎn)生?？贵w片段可以是任意的單鏈抗體片段。換句話說，抗體 片段可以包含多條相互聯(lián)結(jié)的肽鏈，例如，通過二硫鍵相聯(lián)結(jié)?？贵w片段也可以是任意的一 種多分子復(fù)合物。一個有功能的抗體片段通常包含至少大約50個氨基酸，而更多的抗體片 段通常包含至少大約200個氨基酸。單鏈Fvs (scFvs)是重組的抗體片段，它僅由可變輕鏈(Vj和可變重鏈(Vh)相互 以多肽鏈共價結(jié)合。\和Vh中一方具有胺基端區(qū)域。多肽鏈長度和組成是可變的，其長度 可以使兩個可變域相互橋聯(lián)并且對原子的排列沒有嚴(yán)重影響。多肽鏈通常主要由甘氨酸 和絲氨酸殘基延伸構(gòu)成，其中有一些谷氨酸和賴氨酸殘基散在分布以增加其溶解度。“二聚 體”是指單鏈Fvs的二聚物。二聚體的單體包含的肽鏈通常比大多數(shù)單鏈Fvs的短，并且它 們顯示出形成二聚物的傾向。"Fv"片段由一個Vh和一個八域以非共價相互連接組成。術(shù)語“dsFv”在這里是 指包含一個穩(wěn)定對的分子間二硫鍵的Fv?！癋(ab’)2”片段是抗體的一個片段，本質(zhì)上 和用胃蛋白酶在PH 4. 0-4. 5時消化免疫球蛋白(通常是IgG)得到的片段相同。這個片段 也可以重組合成?！癋ab’ ”片段是一種抗體片段，本質(zhì)上和通過減少F(ab’)2片段上的兩條重鏈相互連接的雙硫鍵得到的片段相同。Fab’片段也可以重組合成?！癋ab”片段是一種本 質(zhì)上和用木瓜蛋白酶消化免疫球蛋白(通常IgG)得到的片段相同的抗體片段。Fab片段也 可以重組合成。Fab片段上的重鏈片段是Fd碎片。封閉試布丨封閉試劑區(qū)包括在封閉試劑區(qū)的封閉試劑是可移動的。任何不會實質(zhì)影響特異結(jié)合分子之間 的結(jié)合反應(yīng)的試劑都可以作為封閉試劑，例如一些惰性蛋白，包括酪蛋白或白蛋白，例如牛 血清白蛋白。把封閉試劑處理在載體上的技術(shù)也是本領(lǐng)域常見的技術(shù)手段，例如把封閉試 劑配置成溶液然后浸泡載體，然后把載體干燥。當(dāng)然，也可以在封閉試劑中添加其他的試劑 來改善封閉試劑的溶解性能或結(jié)合載體的性能，例如把酪蛋白溶解在PH值為7-9. 5Tris緩 沖溶液中。當(dāng)液體經(jīng)過封閉試劑區(qū)的時候，被處理在該區(qū)上的封閉試劑被液體濕潤然后隨 液體一起向被分析物結(jié)合區(qū)域移動。在一個具體的例子中，在濕潤的情況下，封閉試劑先于 反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。在另一個具體的例子中，檢測裝置中的 各個區(qū)為干的時候，當(dāng)需要檢測的時候，向載體上施加液體樣品讓裝置中的各個區(qū)順次濕 潤，然后完成檢測。在這種濕潤的情況下，我們驚訝的發(fā)現(xiàn)封閉試劑對載體上的孔或者特異 結(jié)合分子上的位點具有良好的封閉效果。讓封閉試劑先于反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子的方式有多種。在一個具體的方式中，例如圖5所示，讓封閉區(qū)104和反應(yīng)試劑區(qū)106位于被分析 物結(jié)合區(qū)105的兩側(cè)，讓封閉區(qū)上的封閉試劑103與特異結(jié)合分子101的距離小于反應(yīng)試 劑與特異結(jié)合分子的距離，這里，反應(yīng)試劑102包括目的被分析物的一種抗體，被分析物結(jié) 合區(qū)105上的特異結(jié)合分子101包括目的被分析物的另一種抗體，該抗體被固定在結(jié)合區(qū) 105上。反應(yīng)試劑和封閉試劑也被處理在載體上，他們可以隨液體樣品移動。在檢測的時 候，向反應(yīng)試劑區(qū)106上施加液體樣品，讓反應(yīng)試劑隨液體樣品向特異結(jié)合分子101移動， 同時，向封閉區(qū)104施加液體樣品，讓封閉試劑隨液體樣品向特異結(jié)合分子101移動，當(dāng)載 體的材質(zhì)一樣的時候，封閉試劑會先于反應(yīng)試劑到達(dá)被分析物結(jié)合區(qū)域105并與特異結(jié)合 分子101上的一些位點結(jié)合。被封閉的位點可能是特異結(jié)合分子上的一些非特異位點。隨 后，反應(yīng)試劑到達(dá)被分析物特異結(jié)合分子101上，由于一些非特異的位點被結(jié)合后，如果樣 品中不存在目的被分析物質(zhì)，反應(yīng)試劑就不會和特異結(jié)合分子發(fā)生特異結(jié)合，讓檢測結(jié)果 為準(zhǔn)確的陰性結(jié)果。除了以上方式外，還可以改變施加樣品的先后順序讓封閉試劑先于反 應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。例如，先施加樣品到封閉區(qū)103上，然后 再施加樣品到反應(yīng)試劑區(qū)106上；或者直接在被分析物結(jié)合區(qū)域上施加微量的封閉試劑溶 液，例如1-10微升，然后再在反應(yīng)試劑取上施加液體樣品。在另一個具體的方式中，讓封閉試劑區(qū)105和反應(yīng)試劑區(qū)106都位于被分析結(jié)合 區(qū)105的上游，同時，讓封閉試劑區(qū)位于反應(yīng)試劑區(qū)和被分析結(jié)合區(qū)之間，如圖3所示。在 進(jìn)行測試前，載體為干的狀態(tài)；當(dāng)把液體樣品施加到反應(yīng)試劑區(qū)上，液體樣品首先和反應(yīng)試 劑接觸并帶動反應(yīng)試劑向被分析物結(jié)合區(qū)移動，由于反應(yīng)試劑事先以干的狀態(tài)存在于反應(yīng) 試劑區(qū)上，需要大約一小段時間，大約5-20秒鐘，讓這些干的試劑被液體樣品溶解或濕潤。 在此過程中，由于液體樣品中的部分水分子運(yùn)動速度較快，可以提前接觸位于下游的封閉 區(qū)域并濕潤其上的封閉試劑，讓封閉試劑快于反應(yīng)試劑向被分析物結(jié)合區(qū)域移動。提前移 動的部分封閉試劑提前經(jīng)過被分析物結(jié)合區(qū)域，一方面可能對位于封閉試劑和被分析物結(jié)10合區(qū)域之間的載體，例如硝酸纖維素膜，進(jìn)行預(yù)先的處理，另一方面也可能提前封閉該區(qū)域 上特異結(jié)合分子上一些非特意性結(jié)合位點，另外，還可能中和被分析結(jié)合區(qū)上特異結(jié)合分 子的電荷等。這樣，讓隨后的反應(yīng)試劑，例如帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物質(zhì)的抗體或 片段與被分析物特異結(jié)合區(qū)域上的特異結(jié)合分子，如特異結(jié)合被分析物的另一抗體或片段 進(jìn)行特異性的結(jié)合，減少了非特異性的結(jié)合，提高了檢測的準(zhǔn)確性。在另一個方式中，組成檢測裝置的是硝酸纖維素膜試劑條，包括液體樣品施加墊 18，在樣品墊上設(shè)置一個標(biāo)記墊12并讓標(biāo)記墊遠(yuǎn)離封閉試劑；在樣品施加墊的一端14處理 有封閉試劑。和一個硝酸纖維素膜15，在薄膜上處理特異結(jié)合分子帶16和與薄膜15連接 的濾紙17，圖6B表示試劑條的剖面示意圖；圖6A表示試劑條的立體結(jié)構(gòu)示意圖。當(dāng)把液 體樣品施加到施加墊上，部分液體樣品沿著箭頭方向直接流到封閉試劑區(qū)域14上，而另一 部分液體樣品需要先濕潤標(biāo)記墊14，濕潤標(biāo)記墊上預(yù)先被處理的干的帶有顏色顆粒的特異 結(jié)合分子；由于液體流向的路徑不同而讓封閉試劑在濕潤的條件下先于標(biāo)記墊14上的試 劑接觸被分析結(jié)合區(qū)域上的特異結(jié)合分子。圖2為本發(fā)明的一個具體實施方式
，圖2A為未施加液體樣品前的檢測裝置的俯視 結(jié)構(gòu)示意圖；圖2B為施加液體樣品后的檢測裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測裝置中，包括 一個單一的載體100，在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105，在105上包括一種特異性的結(jié)合 分子101，和一個反應(yīng)試劑區(qū)106，在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的另一 個特異結(jié)合分子；和一個封閉區(qū)域104，104包括封閉試劑103 ；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑 區(qū)被布置在同一個液體流動方向的上下游，而封閉區(qū)104被設(shè)置成與被分析物結(jié)合區(qū)垂直 (圖2A)，同時讓反應(yīng)試劑區(qū)106與被分析物結(jié)合區(qū)105的距離大于封閉試劑區(qū)104與被分 析物結(jié)合區(qū)105的距離，這樣讓流體在兩個區(qū)間的流動時間不同，從而表現(xiàn)出達(dá)到結(jié)合區(qū) 105的時間有先后。在進(jìn)行檢測的時候，把液體樣品施加到載體100上，讓其從反應(yīng)試劑區(qū) 域向被分析物結(jié)合區(qū)移動，另外把液體樣品施加到載體104上，讓液體沿著載體104向被分 析物結(jié)合區(qū)移動，這樣封閉試劑被液體帶到被分析物結(jié)合區(qū)域先結(jié)合特異結(jié)合分子101上 的一些位點，在濕潤的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑隨后到達(dá)特異結(jié)合區(qū)105，如果 樣品中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過計算標(biāo)記物質(zhì)累 積的多少來判斷被分析物的多少。圖4描繪了本發(fā)明的另一個優(yōu)選的具體實施方式
。圖4A為試劑條結(jié)構(gòu)的立體結(jié) 構(gòu)示意圖，圖4B為試劑條結(jié)構(gòu)的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測裝置中，構(gòu)成樣品施加墊18的載 體材料為玻璃纖維；構(gòu)成標(biāo)記墊的材料為聚脂膜12，在標(biāo)記墊上處理有帶有乳膠顆粒的抗 丙型肝炎病毒的第一種單克窿抗體；構(gòu)成封閉墊的材料為聚脂膜14，在該膜上處理有酪蛋 白；構(gòu)成被分析結(jié)合墊15的材料為硝酸纖維素膜，在該膜上固定了特異結(jié)合丙型肝炎病毒 的另一種單克窿抗體11 ；和構(gòu)成吸水墊17的濾紙，他們首尾相連，讓液體樣品能夠從樣品 墊18流到吸水墊17上。封閉試劑“先于”反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子中的“先于” 在本發(fā)明可以表示為提前，提早，早于。可能有1-99%的封閉試劑先于1-99%的反應(yīng)試 劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的1-99%的特異結(jié)合分子；也可能有10-99%的封閉試劑先于 10-90%的反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的20-99%的特異結(jié)合分子；還可能有50-99% 的封閉試劑先于30-80%的反應(yīng)試劑接觸被分析物結(jié)合區(qū)上的10-80%的特異結(jié)合分子。11
圖1為傳統(tǒng)裝置中試劑條的俯視結(jié)構(gòu)示意圖，圖IA為未施加液體樣品前的檢測 裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；IB為施加液體樣品后的檢測裝置的俯視結(jié)構(gòu)示意圖。在檢測裝置 中，包括一個載體100，在100上包括被分析物結(jié)合區(qū)105，在105上包括一種特異被分析物 質(zhì)的結(jié)合分子101，通常，在檢測前，事先在被分析物質(zhì)結(jié)合區(qū)10上處理有封閉試劑并且被 干燥；和一個反應(yīng)試劑區(qū)106，在106上包括帶有標(biāo)記物質(zhì)的特異結(jié)合被分析物的另一個特 異結(jié)合分子；被分析物結(jié)合區(qū)和反應(yīng)試劑區(qū)被布置在同一個液體流動方向的上下游；這種 試劑條為干的試劑條。在進(jìn)行檢測的時候，把液體樣品施加到載體100上，讓其從反應(yīng)試劑 區(qū)域向被分析物結(jié)合區(qū)移動，在濕潤的情況下，液體帶著試劑區(qū)域上的試劑到達(dá)特異結(jié)合 區(qū)105，如果樣品中存在被分析物質(zhì)，在被分析物結(jié)合區(qū)域上累積標(biāo)記物質(zhì)，從而通過計算 標(biāo)記物質(zhì)累積的多少來判斷被分析物的多少。檢測方法另一方面，本發(fā)明還提供一種分析液體樣品中被分析物質(zhì)的方法，包括提供一種 支持液體流動的載體100，該載體上包括一個被分析物結(jié)合區(qū)105，所述的結(jié)合區(qū)上包括 一種特異結(jié)合分子101 ；—種或幾種完成反應(yīng)的反應(yīng)試劑102 ；和一種或幾種封閉試劑103 ； 讓檢測試劑和封閉試劑隨著液體向被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子移動；讓封閉試劑比 反應(yīng)試劑提前接觸所述的被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。在一個具體的方式中，被分 析物結(jié)合區(qū)上特異性結(jié)合分子包括特異結(jié)合被分析物的一種抗體或抗體片段，反應(yīng)試劑包 括特異結(jié)合被分析物質(zhì)的另一種抗體或片段。在一個具體方式中，封閉試劑包括與被分析 物結(jié)合區(qū)上特異性結(jié)合分子上的位點結(jié)合的試劑。與傳統(tǒng)的技術(shù)相比，本發(fā)明的這種裝置或方法可以很好地提高檢測的準(zhǔn)確性，其 原因可能是在濕潤情況下，封閉試劑對一些分子上的位點或載體上的孔具有更好的封閉 作用，同時又不對載體本身產(chǎn)生一些不利的影響。因為在傳統(tǒng)的封閉技術(shù)中，需要先把載體 浸泡在封閉溶液中，然后再對載體進(jìn)行干燥，在這樣的處理過程中，可能讓載體上的一些表 面活性試劑被封閉溶液洗脫掉，從而影響了載體的性能。另外，本發(fā)明裝置中的封閉試劑可 以在濕潤的情況下帶負(fù)電荷，可以提前接觸被分析結(jié)合區(qū)上帶有正電荷的特異結(jié)合分子， 中和了特異分子上的正電荷，減少特異結(jié)合分子和反應(yīng)試劑的非特異性的結(jié)合。特別地， 當(dāng)反應(yīng)試劑中包括有金顆粒標(biāo)記的抗體的時候，它常帶有負(fù)電荷，被分析物結(jié)合區(qū)上的特 異結(jié)合分子的電荷被封閉試劑中和后減少了對金顆?？贵w的結(jié)合，從而提高了檢測的準(zhǔn)確 性。樣品的類型任何類型的樣品都能夠用本發(fā)明的裝置進(jìn)行試驗，包括體液(例如，尿液和其它 體液，以及臨床樣品)。液體樣品可能源自固體的或者半固體的樣品，包括糞，生物組織和 食物樣品。這些固體的和半固體的樣品可以通過任何適合的方法轉(zhuǎn)變成液體樣品，例如在 一種適當(dāng)?shù)囊后w中混合，跺碎，浸軟，孵育，溶解或者酶解固體樣品(例如，水，磷酸鹽緩沖 液或者其它緩沖液)?！吧飿悠贰卑ㄔ醋曰畹膭游?、植物和食物的樣品，也包括尿液、唾 液、血液和血液成分、腦脊液、陰道拭子，精液、糞便、汗液、分泌物、組織、器官、腫瘤、組織和 器官的培養(yǎng)物，細(xì)胞培養(yǎng)物和那里的條件介質(zhì)，不管是人的還是動物的。食物樣品包括加 工過的食物成分和最后的產(chǎn)品，肉，奶酪，酒，牛奶和飲用水。植物樣品包括源自任何植物、 植物組織、植物細(xì)胞培養(yǎng)物和那里的條件介質(zhì)的樣品?！碍h(huán)境樣品”是那些源自環(huán)境的樣品(例如，湖水樣品或者其它水體的樣品，污水樣品，土壤樣品，地下水樣品，海水樣品，廢物廢 水的樣品)。污水和相關(guān)的廢物也可以包含在環(huán)境樣品中。被分析物的類型用本發(fā)明可以分析任何被分析物質(zhì)。能夠用本發(fā)明穩(wěn)定檢測的被分析物的例子包 括(但是不僅僅包括)人絨毛膜促性腺激素(hCG)，黃體生成素(LH)，卵巢刺激素(FSH)， 丙肝病毒(HCV)，乙肝病毒(HBV)，乙肝表面抗原，艾滋病病毒和任何濫用的藥物。被分析物 能夠在任何的液體或者液化樣品中檢測到，例如尿液，唾液，口水，血液，血漿，或者血清。其 它的被分析物的例子還有肌氨酐酸，膽紅素，亞硝酸鹽，蛋白質(zhì)(非特異性的)，血液，白細(xì) 胞，血糖，重金屬和毒素，細(xì)菌成分(例如，特定類型的細(xì)菌的特殊的蛋白質(zhì)和糖分，例如大 腸桿菌0157 H7，金黃色葡萄球菌，沙門氏菌，產(chǎn)氣莢膜梭菌，彎曲桿菌，單核增生李斯特菌， 腸炎弧菌，或者臘狀芽孢桿菌)。任何其它的適合側(cè)流試驗形式的被分析物都可以用本裝置 檢測。碰封閉試劑在膠體金側(cè)向?qū)游鲈\斷試紙條中的應(yīng)用下面的實施例將進(jìn)一步說明本發(fā)明，但無論如何不應(yīng)理解為對本發(fā)明范圍的限 制。結(jié)合說明書附圖4來說明本試驗所使用的試劑條的結(jié)構(gòu)和相關(guān)材料和試劑的準(zhǔn)備。1.試驗材料1.1蛋白原料和材料
權(quán)利要求
1.一種檢測裝置，包括支持液體流動的載體，在載體上包括一個被分析物結(jié)合區(qū)， 一個反應(yīng)試劑區(qū)；一個封閉試劑區(qū)；所述的被分析物結(jié)合區(qū)包括一種特異性的結(jié)合分子； 所述的封閉試劑區(qū)上包括一種或幾種封閉試劑；所述的反應(yīng)試劑區(qū)上包括一種或幾種完成 反應(yīng)的反應(yīng)試劑；其中，所述的封閉試劑比其中的一種反應(yīng)試劑提前接觸所述被分析物結(jié) 合區(qū)上的特異結(jié)合分子。
2.如權(quán)利要求1所述的裝置，其中，封閉試劑與被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子之 間的距離小于反應(yīng)試劑與被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子之間的距離。
3.如權(quán)利要求2所述的裝置，其中，封閉試劑區(qū)位于被分析物結(jié)合區(qū)的上游并且位于 反應(yīng)試劑區(qū)的下游。
4.如權(quán)利要求2所述的裝置，其中，封閉試劑區(qū)位于被分析物結(jié)合區(qū)的下游，反應(yīng)試劑 區(qū)位于被分析物結(jié)合區(qū)的上游。
5.如權(quán)利要求2所述的裝置，其中，反應(yīng)試劑區(qū)位于被分析物結(jié)合區(qū)的上游，封閉試劑 區(qū)與反應(yīng)試劑區(qū)和被分析物結(jié)合區(qū)排列的方向垂直。
6.如權(quán)利要求1所述的裝置，其中，所述的反應(yīng)試劑包括特異結(jié)合被分析物的分子；被 分析物結(jié)合區(qū)上的特異性結(jié)合分子能夠結(jié)合反應(yīng)試劑區(qū)上的特異結(jié)合被分析物的分子。
7.如權(quán)利要求6所述的裝置，其中，反應(yīng)試劑還包括帶有顏色的標(biāo)記顆粒。
8.如權(quán)利要求6所述的裝置，其中，被分析物質(zhì)結(jié)合區(qū)位于硝酸纖維素膜上。
9.如權(quán)利要求2所述的裝置，其中，所述的封閉試劑和反應(yīng)試劑隨液體向被分析物結(jié) 合區(qū)移動。
10.如權(quán)利要求1所述的裝置，其中，反應(yīng)試劑包括與顏色顆粒連接的特異結(jié)合被分析 物的分子；封閉試劑比帶有顏色顆粒的特異結(jié)合被分析物的分子提前接觸所述被分析物結(jié) 合區(qū)上的特異性結(jié)合分子。
11.如權(quán)利要求10所述的裝置，其中，被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子為被分析物 的第一抗原，帶有顏色顆粒的特異結(jié)合被分析物的分子為被分析物的第二抗原。
12.如權(quán)利要求10所述的裝置，其中，被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子特異結(jié)合帶 有顏色顆粒的特異結(jié)合被分析物的分子。
13.如權(quán)利要求1-12之一所述的裝置，其中，所述被分析物結(jié)合區(qū)上的特異性的結(jié)合 分子固定在載體上
14.如權(quán)利要求1或9所述的裝置，其中，被分析物包括肝炎病毒、鏈球菌、或艾滋病毒。
15.如權(quán)利要求14所述的裝置，其中，肝炎病毒為丙肝病毒、乙肝病毒、乙肝表面抗原。
16.如權(quán)利要求11所述的裝置，其中，被分析物的第一抗原固定在載體上。
17.如權(quán)利要求1-12之一所述的裝置，其中，所述的封閉試劑為血清蛋白或酪蛋白中 的一種或兩種。
18.如權(quán)利要求1-10之一所述的裝置，其中，所述的特異結(jié)合分子為抗體或抗體片段。
19.如權(quán)利要求1-12之一所述的裝置，其中，所述的封閉試劑結(jié)合特異結(jié)合分子上的 非特異性結(jié)合位點。
20.如權(quán)利要求1所述的裝置，其中，封閉試劑帶有正電荷。
21.一種分析液體樣品中被分析物質(zhì)的方法，包括提供一種支持液體流動的載體，該載體上包括一個被分析物結(jié)合區(qū)，所述的結(jié)合區(qū)上包括一種特異結(jié)合分子；一種或幾種完成反應(yīng)的反應(yīng)試劑；和 一種或幾種封閉試劑；讓檢測試劑和封閉試劑隨著液體向被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子移動； 其中，封閉試劑比反應(yīng)試劑提前接觸所述的被分析物結(jié)合區(qū)上的特異結(jié)合分子。
22.如權(quán)利要求21所述的方法，其中，所述的封閉試劑結(jié)合特異結(jié)合分子上的非特異 性結(jié)合位點。
23.如權(quán)利要求21所述的方法，其中，被分析物結(jié)合區(qū)上特異性結(jié)合分子包括特異結(jié) 合被分析物的一種抗體或抗體片段，反應(yīng)試劑包括特異結(jié)合被分析物質(zhì)的另一種抗體或片 段。
24.如權(quán)利要求21所述的方法，其中，所述的封閉試劑包括為血清蛋白或酪蛋白中的 一種或兩種。
25.如權(quán)利要求21所述的方法，其中，所述的反應(yīng)試劑還包括帶顏色的顆粒標(biāo)記物。
26.如權(quán)利要求25所述的方法，其中，所述的帶顏色的顆粒標(biāo)記物包括金顆?；蛉槟z顆粒。
27.如權(quán)利要求21所述的方法，其中，封閉試劑帶有正電荷。
全文摘要
本發(fā)明提供一種檢測裝置，包括支持液體流動的載體，在載體上包括一個被分析物結(jié)合區(qū)，一個反應(yīng)試劑區(qū)；一個封閉試劑區(qū)；所述的被分析物結(jié)合區(qū)包括一種特異性的結(jié)合分子；所述的封閉試劑區(qū)上包括一種或幾種封閉試劑；所述的反應(yīng)試劑區(qū)上包括一種或幾種完成反應(yīng)所必須的反應(yīng)試劑；其中，封閉試劑比其中的一種反應(yīng)試劑提前接觸所述的特異結(jié)合分子。本發(fā)明的裝置可以減少檢測的假陽性，提高檢測的準(zhǔn)確性。
文檔編號G01N33/543GK102053152SQ20091015410
公開日2011年5月11日 申請日期2009年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月9日
發(fā)明者劉毅, 吳銀飛, 胡伯里, 高飛 申請人:艾博生物醫(yī)藥(杭州)有限公司