專利名稱：一種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到用于對過敏性疾病患者進行診斷和治療過程中的嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢 驗方法，特別是涉及到用于在呼吸科、五官科和皮膚科等科室對過敏性疾病患者進行診 斷和治療過程中的嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法。
背景技術(shù)：
在呼吸科、五官科、皮膚科和其他涉及過敏性疾病的科室對過敏性疾病患者進行診 斷和治療的過程中，常需要采取過敏性疾病患者的嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法，以輔助 對過敏性疾病的診斷和療效觀察。
嗜堿粒細(xì)胞是外周血中白細(xì)胞的一種，因其胞漿顆?？杀皇葔A性染料著色而得名。 嗜堿粒細(xì)胞具有高親和力IgE受體(Fc e R I )，通過受體連接的IgE與抗原結(jié)合，導(dǎo)致 釋放大量炎癥介質(zhì)。在外周血中，嗜堿粒細(xì)胞數(shù)量很少，約占白細(xì)胞總數(shù)的0.5%左右。 目前檢測嗜堿粒細(xì)胞的方法有三種1)血球計數(shù)儀方法；2)用染色方法對嗜堿粒細(xì)胞 絕對計數(shù)；3)流式細(xì)胞儀方法。上述三種方法的令人不滿意處分別是，血球計數(shù)儀方法 計數(shù)嗜堿粒細(xì)胞不準(zhǔn)確；現(xiàn)有用染色方法對嗜堿粒細(xì)胞絕對計數(shù)方法由于嗜堿粒細(xì)胞是 懸浮在染料中，嗜堿粒細(xì)胞不易識別，計數(shù)速度很慢，而且誤差較大；流式細(xì)胞儀方法 有速度快，結(jié)果較準(zhǔn)確，但儀器及試劑較貴，難以推廣。因此嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方 法還需作進一步的改進，使得操作更方便、快速、可靠和正確，成本更低
發(fā)明內(nèi)容
和具體實施方法 本發(fā)明的目的在于提出一種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法，實現(xiàn)受檢白細(xì)胞內(nèi)各種細(xì) 胞被差異染色顯示，從而使得嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗操作更方便、快速、可靠和正確， 成本更低。
目前，公知的染色嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法是，對受檢白細(xì)胞中的嗜堿粒細(xì)胞的 胞漿顆粒采用嗜堿性染料著色后，再識別計數(shù)。 本發(fā)明的任務(wù)是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的
將受檢白細(xì)胞固定于載玻片上，采用阿利新蘭和核固紅染料著色。染色后，其中嗜 堿粒細(xì)胞的胞漿顯示藍色，胞核顯示紅色；其它細(xì)胞的胞漿不著色，胞核顯示紅色。在 顯微鏡下，既可以采用選數(shù)個視野用肉眼計數(shù)，也可以采用計算機進行圖像處理計數(shù)， 即可算出嗜堿粒細(xì)胞占白細(xì)胞比例，再乘上白細(xì)胞總數(shù)即可得到嗜堿粒細(xì)胞絕對數(shù)。由
于受檢白細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞被差異染色顯示，從而使得嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗操作更方便、快速、可靠和正確，成本更低。
下面用舉例方式，陳述本發(fā)明的嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法的最佳實施例。本發(fā)明 的范圍將在權(quán)利要求中指出。參考最佳實施例的詳細(xì)敘述，將會更加清楚地理解達到本 發(fā)明上述目的和優(yōu)點的實際方式。
本發(fā)明的嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法的實施步驟
1) 采用密度梯度離心方法分離白細(xì)胞內(nèi)的單個核細(xì)胞。
2) 將單個核細(xì)胞固定于載玻片上。
3) 分別加阿利新蘭和核固紅染料著色。染色后，其中嗜堿粒細(xì)胞的胞漿顯示藍色， 胞核顯示紅色；其它細(xì)胞的胞漿不著色，胞核顯示紅色。
4) 在顯微鏡下，選數(shù)個視野用肉眼計數(shù)或者用計算機進行圖像處理 藍色細(xì)胞個數(shù)/紅色細(xì)胞個數(shù)=嗜堿粒細(xì)胞％ ,
藍色細(xì)胞個數(shù)/紅色細(xì)胞個數(shù)X白細(xì)胞總數(shù)=嗜堿粒細(xì)胞絕對數(shù)。 根據(jù)上述詳細(xì)介紹可知，本發(fā)明的嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法具有如下特點由于 受檢白細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞被差異染色顯示，從而無論采用選數(shù)個視野用肉眼計數(shù)還是采用 計算機進行圖像處理，都可以使得嗜堿粒細(xì)胞更容易被從白細(xì)胞內(nèi)的各種細(xì)胞中辨別出 來。與現(xiàn)有的各種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法相比較，本發(fā)明的嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗 操作更方便、快速、可靠和正確，成本更低。
于是可以看出，上述所陳述的目標(biāo)，包括由前面說明所顯示的那些目標(biāo)被有效地達 到了。這里所述的僅僅是本發(fā)明申請的典型的最佳實施形式，可以對上述結(jié)構(gòu)作某些變 化也不違背本發(fā)明的精神和范圍。本發(fā)明不局限或被限止于這里所陳述的具體細(xì)節(jié)，而 應(yīng)如同權(quán)利要求的限定中陳述的那樣保留對所屬領(lǐng)域中等技術(shù)人員來說是顯而易見的 任何改進或改型。
權(quán)利要求
1、一種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法，對受檢白細(xì)胞中的嗜堿粒細(xì)胞的胞漿顆粒采用嗜堿性染料著色后，再識別計數(shù)。其特征在于將受檢白細(xì)胞固定于載玻片上，采用阿利新蘭和核固紅染料著色；染色后，其中嗜堿粒細(xì)胞的胞漿顯示藍色，胞核顯示紅色；其它細(xì)胞的胞漿不著色，胞核顯示紅色。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法，其特征是，在顯微鏡下， 對上述受檢白細(xì)胞染料著色后，采用選數(shù)個視野用肉眼計數(shù)，算出嗜堿粒細(xì)胞占白細(xì)胞 比例，再乘上白細(xì)胞總數(shù)得到嗜堿粒細(xì)胞絕對數(shù)。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法，其特征是，在顯微鏡下， 對上述受檢白細(xì)胞染料著色后，釆用計算機進行圖像處理計數(shù)，算出嗜堿粒細(xì)胞占白細(xì) 胞比例，再乘上白細(xì)胞總數(shù)得到嗜堿粒細(xì)胞絕對數(shù)。
4、 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的一種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法，其特征是，上述嗜 堿粒細(xì)胞占白細(xì)胞比例的計算公式為藍色細(xì)胞個數(shù)+紅色細(xì)胞個數(shù)=嗜堿粒細(xì)胞％。
5、 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的一種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法，其特征是，上述嗜 堿粒細(xì)胞絕對數(shù)的計算公式為藍色細(xì)胞個數(shù)+紅色細(xì)胞個數(shù)X白細(xì)胞總數(shù)=嗜堿粒細(xì) 胞絕對數(shù)。
6、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法，其特征是，先采用密度 梯度離心方法分離上述受檢白細(xì)胞內(nèi)的單個核細(xì)胞，然后將上述單個核細(xì)胞固定于上述 載玻片上。
全文摘要
一種嗜堿粒細(xì)胞計數(shù)的檢驗方法，將受檢白細(xì)胞固定于載玻片上，采用阿利新蘭和核固紅染料著色。染色后，其中嗜堿粒細(xì)胞的胞漿顯示藍色，胞核顯示紅色；其它細(xì)胞的胞漿不著色，胞核顯示紅色。由于受檢白細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞被差異染色顯示，從而無論采用選數(shù)個視野用肉眼計數(shù)還是采用計算機進行圖像處理，都可以使得嗜堿粒細(xì)胞更容易被從白細(xì)胞內(nèi)的各種細(xì)胞中辨別出來。
文檔編號G01N33/48GK101451991SQ20071017171
公開日2009年6月10日 申請日期2007年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月4日
發(fā)明者孔憲明, 曹蘭芳, 王利民 申請人:上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟醫(yī)院