專利名稱：HAuCl₄分光光度法檢測(cè)痕量金納米粒子的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及金納米粒子的檢測(cè)，具體是用HAuCU分光光度法檢測(cè)痕量金納 米粒子的方法。
背景技術(shù)：
由于納米金容易制備、高電子密度、獨(dú)特的光學(xué)和電學(xué)性質(zhì)及生物相容性 而被廣泛應(yīng)用于生物芯片、生物傳感器和生物分子標(biāo)記研究。近來，納米金微
?？勺鳛榫ХN形成大粒徑的復(fù)合物引起了科學(xué)家的極大興趣。Dansher建立了 用銀顯影液增強(qiáng)光鏡下金顆?？梢娦缘慕疸y染色法(GSS)。銀增強(qiáng)方法檢測(cè)分枝 桿菌抗原濃度可以達(dá)到100pg mL—、 1999年Hainfeld建立了與銀增強(qiáng)法相似 反應(yīng)模式的金增強(qiáng)法，大大地提高了檢測(cè)信號(hào)并且克服了銀增強(qiáng)法帶來的問題。 Ma使用混合的HAuCl4—NH20H溶液增大固定在硝酸纖維素膜免疫金微粒，用人眼 檢測(cè)h-IgG，其檢測(cè)限達(dá)10pg mL—、 Jagotamoy D等利用納米金標(biāo)記鼠-IgG對(duì) 硝基苯酚與硼氫化鈉反應(yīng)的催化作用，用電化學(xué)可檢測(cè)lfg mL—1鼠-IgG。這些 增強(qiáng)法大多先將被分析物固定在載體上，然后標(biāo)記納米金與其反應(yīng)，再催化增 大標(biāo)記納米金粒徑進(jìn)而增強(qiáng)分析信號(hào)，其實(shí)質(zhì)是通過檢測(cè)納米金顆粒濃度來間 接檢測(cè)分析物濃度，因此研究納米金顆粒催化性能及其高靈敏檢測(cè)納米金的新 方法具有重要意義。
本發(fā)明HAuCU分光光度法檢測(cè)痕量金納米粒子，方法靈敏、快速、研究了 Au納米粒子對(duì)NH20H—HAuCl4微粒反應(yīng)的催化效果，發(fā)現(xiàn)納米金具有強(qiáng)的催化作 用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是要提供一種設(shè)備簡(jiǎn)單、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、快速的測(cè)定 痕量金納米粒子的方法。
本發(fā)明的目的采用下述技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)
本發(fā)明通過研究Au納米粒子對(duì)麗20H—HAuCl4微粒反應(yīng)的催化效果，發(fā)現(xiàn)納 米金具有強(qiáng)的催化作用，根據(jù)金納米粒子能催化HAuCU和NH20H'HC1反應(yīng)， 隨著催化劑金納米微粒濃度的增大，296nm (此為HAuCl4吸收峰)處的吸光強(qiáng)度 減小，且催化劑金納米微粒濃度與296nm處的吸光度呈線性關(guān)系。據(jù)此，建立 了 HAuCU分光光度法測(cè)量痕量金納米粒子的方法。
HAuCU分光光度法檢測(cè)痕量金納米粒子的方法包括如下步驟
① 在0.2 0.4mL pH為2.27 2.97的檸檬酸鈉-鹽酸緩沖溶液中，加入一定 量粒徑為5 50nm的金納米粒子，0.3 1.0mL 0.59m mol/L HAuCU和0.2 0.8mL 8.0m mol/L NH20H'HC1于5.0mL刻度試管，然后定容到2.0mL;
② 將上述試管溶液置于28 34。C恒溫水浴4 8min;
③ 上述反應(yīng)完成后，取適量溶液于石英池中，置于雙光束紫外可見分光光度 計(jì)上，測(cè)出296nm處的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，根據(jù)工作曲線，即可求得 納米金的濃度。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是
(1) 設(shè)備簡(jiǎn)單，僅需紫外可見分光光度計(jì)，操作簡(jiǎn)便快速、靈敏度高，檢 測(cè)限低，達(dá)到0.25 nmol/L。
(2) 試劑易得，成本低廉，此法為定量分析痕量納米金微粒提供了一個(gè)有 價(jià)值的方法，該法與免疫反應(yīng)結(jié)合，對(duì)于提高納米免疫標(biāo)記的分析靈敏度有較 好的應(yīng)用價(jià)值。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例粒徑為5nm的納米金微粒催化氯金酸和鹽酸羥胺反應(yīng) 的紫外可見吸收光譜圖； 圖2為本發(fā)明實(shí)施例納米金催化原理圖。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式作進(jìn)一步的闡述 圖1為本發(fā)明實(shí)施例粒徑為5nm的納米金催化氯金酸和鹽酸羥胺反應(yīng)紫外 可見吸收光譜圖，其操作過程如下依次移取0.20mL pH為2.62的檸檬酸鈉-鹽酸緩沖溶液，加入O(a) 、10(b)、20(c)、30(d)uL0.5umol/L納米金、60mL 0.59m mol/L HAuCU和0.40mL 8.0m mol/L NH20H'HC1于5.0mL刻度試管，然后定容 到2.0mL置于34t:恒溫水浴6min，反應(yīng)完成后，取適量溶液于石英池中，置于 雙光束紫外可見分光光度計(jì)上掃描光譜。從圖1中可見，金鈉米粒子能催化
HAuCU和NH20H.HCl反應(yīng)，隨著催化劑金納米微粒濃度的增大，296nm (此為 HAuCU吸收峰)處的吸光強(qiáng)度減小，且催化劑金納米微粒濃度與296nm處的吸 光度呈線性關(guān)系，如5 nm的為Aabs=—0.017c(nmol/L)+0.22,線性范圍為0.25 10.15 nmol/L，根據(jù)工作曲線，可求得鈉米金的濃度。
雖然以上通過實(shí)例對(duì)本發(fā)明實(shí)施方式進(jìn)行了描述，但本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng) 該知道，上述僅為舉例，可以對(duì)實(shí)施方式做出多種變更和修改，本發(fā)明的范圍 僅由所附權(quán)利要求書限制。
權(quán)利要求
1.HAuCl4分光光度法檢測(cè)痕量金納米粒子的方法，其特征是檢測(cè)方法包括步驟如下①在檸檬酸鈉-鹽酸緩沖溶液中，加入金納米粒子、HAuCl4和NH2OH·HCl于刻度試管，然后定容；②將試管置于溫水浴中反應(yīng)；③上述反應(yīng)完成后，取適量所得溶液于石英池中，置于雙光束紫外可見分光光度計(jì)上，測(cè)出296nm處的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，根據(jù)工作曲線，可求得納米金的濃度。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是步驟1所述的刻度試管為5.0 mL 的刻度試管，加入的檸檬酸鈉-鹽酸緩沖溶液pH為2.27 2.97，用量為0.2 0.4mL，加入的金納米粒子粒徑為5 50nm， HAuCU濃度為0.59mmol/L，用量 為0.3 1.0mL， NH20H.HC1濃度為8.Ommol/L，用量為0.2 0.8mL，定容體積 為2.0mL。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是步驟2所述的恒溫水浴溫度為 28 34°C，反應(yīng)時(shí)間為4 8min。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是步驟3所述的吸光度測(cè)量波長 為296 nm。
全文摘要
本發(fā)明公開了HAuCl₄分光光度法檢測(cè)痕量金納米粒子的方法，它是在檸檬酸鈉-鹽酸緩沖溶液中，加入一定量的金納米粒子，氯金酸溶液和NH₂OH·HCl，水浴反應(yīng)一定時(shí)間，取適量于石英比色池中，置于雙光束紫外可見分光光度計(jì)上，測(cè)出296nm處的吸光度，根據(jù)工作曲線，求得納米金的濃度。本方法的優(yōu)點(diǎn)(1)設(shè)備簡(jiǎn)單，僅需紫外可見分光光度計(jì)，操作簡(jiǎn)便快速、靈敏度高，檢測(cè)限低，達(dá)到0.25nmol/L；(2)試劑易得，成本低廉，此法為定量分析痕量納米金微粒提供了一個(gè)有價(jià)值的方法，該法與免疫反應(yīng)結(jié)合，用于納米免疫分析將有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，將有較好的應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號(hào)G01N21/33GK101201318SQ20071004997
公開日2008年6月18日 申請(qǐng)日期2007年9月4日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月4日
發(fā)明者張聲森, 蔣治良 申請(qǐng)人:廣西師范大學(xué)