專利名稱：生物組織切片制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物組織切片制作的方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有生物組織切片制作時(shí)，將生物組織標(biāo)本固定在切片機(jī)的載物臺(tái)上面，固定的方式主要有低溫凍結(jié)固定或石蠟包埋固定；工作時(shí)載物臺(tái)不斷來(lái)回運(yùn)動(dòng)，來(lái)回運(yùn)動(dòng)方向與載物臺(tái)表面所在的平面基本平行，載物臺(tái)每進(jìn)行一趟來(lái)回運(yùn)動(dòng)后還自動(dòng)步進(jìn)一小段距離，步進(jìn)運(yùn)動(dòng)的方向與來(lái)回運(yùn)動(dòng)的方向垂直，從而帶動(dòng)組織標(biāo)本相對(duì)于靜止的刀具來(lái)回運(yùn)動(dòng)和步進(jìn)運(yùn)動(dòng)，將組織標(biāo)本逐步切成切片。這種方法適合應(yīng)用于對(duì)所得切片各層組織間的界面平整度要求不高的情況，例如應(yīng)用在醫(yī)院進(jìn)行病理診斷時(shí)，因?yàn)獒t(yī)院病理診斷主要是觀察生物標(biāo)本是否存在病變細(xì)胞或觀察細(xì)胞病變的程度，一般不必要求待檢的生物組織標(biāo)本具有特定方向或特定角度的切面。
但當(dāng)醫(yī)學(xué)上研究形狀扁平且具有層狀結(jié)構(gòu)的組織標(biāo)本(如皮膚或粘膜等)時(shí)，經(jīng)常希望切面垂直于標(biāo)本各層組織間的界面，使所得切片各層組織間的界面平直，特別是希望切片中的目標(biāo)細(xì)胞或目標(biāo)組織層可以在顯微鏡下方便快捷地挖取出來(lái)，這種情況下，傳統(tǒng)生物組織切片制作方法的缺點(diǎn)便顯現(xiàn)出來(lái)，因?yàn)?、如果將該組織標(biāo)本展平并平鋪在載物臺(tái)上，則該扁平組織標(biāo)本平鋪伸展的方向?qū)⑴c載物臺(tái)來(lái)回運(yùn)動(dòng)的方向基本平行，所得到切面將與組織標(biāo)本各層間的界面基本平行，得到的切面在理論上很可能只是組織標(biāo)本的某一層，而無(wú)法得到與組織標(biāo)本各層間界面垂直的理想切面；2、如果將該標(biāo)本以自然、隨機(jī)的形態(tài)固定于載物臺(tái)上，則所得切面各層組織間的界線將會(huì)褶皺、不平直，更不利于在顯微鏡下將切片中的目標(biāo)細(xì)胞或目標(biāo)組織層方便直捷地挖取出來(lái)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是要提供一種生物組織切片制作方法，它適合應(yīng)用于形狀扁平且具有層狀結(jié)構(gòu)的生物組織標(biāo)本，能使切面垂直于組織標(biāo)本各層間的界面，所得切片各層間的界面平直，便于在顯微鏡下將切片中的目標(biāo)細(xì)胞或目標(biāo)組織層方便快捷地挖取出來(lái)。
為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明的生物組織切片制作方法包括以下主要步驟A、取出形狀扁平且具有層狀結(jié)構(gòu)的組織標(biāo)本，將其拉伸展平并固定在一個(gè)倒T形非金屬支架的豎板上，將倒T形非金屬支架的底板平放并固定在切片機(jī)的載物臺(tái)上，使非金屬支架的豎板位于刀具刀鋒的正前方，并使非金屬支架的豎板所在平面與載物臺(tái)工作時(shí)來(lái)回運(yùn)動(dòng)方向的夾角小于30°；B、驅(qū)動(dòng)切片機(jī)的載物臺(tái)運(yùn)動(dòng)，載物臺(tái)帶動(dòng)非金屬支架和組織標(biāo)本相對(duì)于刀具運(yùn)動(dòng)，刀具同時(shí)將組織標(biāo)本連同非金屬支架的豎板逐步切成切片。上述所謂“倒T形非金屬支架”，是指由豎板和底板構(gòu)成的非金屬支架，其中豎板和底板互相垂直并連為一體，形成倒T字形(即“”形)。所謂“工作時(shí)載物臺(tái)來(lái)回運(yùn)動(dòng)方向”，對(duì)于滑動(dòng)式切片機(jī)而言，是指工作時(shí)載物臺(tái)來(lái)回運(yùn)動(dòng)的直線軌跡的方向；對(duì)于旋切式切片機(jī)而言，是指工作時(shí)載物臺(tái)每一趟來(lái)回運(yùn)動(dòng)中一個(gè)單程的起點(diǎn)和終點(diǎn)之間連線的方向。
較好的是上述A步驟中，組織標(biāo)本可以采用凍結(jié)的方式固定在非金屬支架的豎板上。
更好的是在上述B步驟之后，組織標(biāo)本和非金屬支架豎板被切出來(lái)的切片停留在刀具側(cè)面上方，此后，采用載玻片將組織標(biāo)本的切片黏附起來(lái)，將組織標(biāo)本的切片隨同載玻片移開(kāi)，而非金屬支架豎板的切片仍留在刀具上方，由此實(shí)現(xiàn)組織標(biāo)本切片與非金屬支架豎板切片的分離。
上述A步驟中，組織標(biāo)本也可以采用石蠟包埋的方式固定在非金屬支架的豎板上。
上述A步驟中，非金屬支架的豎板所在平面最好與載物臺(tái)工作時(shí)來(lái)回運(yùn)動(dòng)的方向平行。
非金屬支架可以為塑料支架。
非金屬支架也可以為有機(jī)玻璃支架。
上述切片機(jī)可以為滑動(dòng)式切片機(jī)。這樣工作時(shí)載物臺(tái)來(lái)回運(yùn)動(dòng)的軌跡為直線段。
上述切片機(jī)可以為旋切式切片機(jī)。這樣工作時(shí)載物臺(tái)來(lái)回運(yùn)動(dòng)的軌跡為弧線段(近似為直線段)。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果1.本發(fā)明方法將非金屬支架的豎板直立于刀具刀鋒的正前方，并使倒T形非金屬支架的豎板所在平面與載物臺(tái)來(lái)回運(yùn)動(dòng)方向基本平行，扁平組織標(biāo)本攤平并固定在非金屬支架的豎板上，這樣，刀刃前鋒線相對(duì)運(yùn)動(dòng)(以組織標(biāo)本為參照物)所形成的軌跡面大致垂直于組織標(biāo)本各層間的界面，能使切面垂直于組織標(biāo)本各層間的界面，所得切片各層間的界面平直，層次分明地展示出組織標(biāo)本的解剖結(jié)構(gòu)，也便于在顯微鏡下將切片中的目標(biāo)細(xì)胞或目標(biāo)組織層方便快捷地挖取出來(lái)。
2、本發(fā)明將組織標(biāo)本連同非金屬支架豎板一同切出的方法，是前所未有的創(chuàng)新方法(假如按傳統(tǒng)思維，將非金屬支架的豎板當(dāng)成砧板，則非金屬支架的豎板將會(huì)被橫立在刀具的前方，這樣會(huì)造成以下缺點(diǎn)①、刀鋒與組織標(biāo)本接觸面積大，切削力作用點(diǎn)分散，切削時(shí)阻力大，刀具對(duì)非金屬支架所產(chǎn)生的推力也大；②、在載物臺(tái)每一個(gè)來(lái)回運(yùn)動(dòng)行程中，大部分行程處于空載的狀態(tài)，只有在某一瞬間，組織標(biāo)本突然接觸到刀鋒，非金屬支架在受刀具突然撞擊后容易傾倒；③、組織標(biāo)本被切成長(zhǎng)條形的切片后，長(zhǎng)條形的切片只能停留在刀具刀刃邊緣線附近上方，容易掉落，不易收集)。而本發(fā)明方法將非金屬支架的豎板縱向直立在刀具的前方，具有以下優(yōu)點(diǎn)①、切削過(guò)程平穩(wěn)，刀鋒切削力作用點(diǎn)集中，切削時(shí)阻力小，反過(guò)來(lái)，非金屬支架在切削過(guò)程中受到的推力也較小，非金屬支架穩(wěn)當(dāng)；②、切削過(guò)程中，所得切片不會(huì)橫向地停留在刀具刀刃邊緣線附近上方，而會(huì)逐漸向刀具縱深方向推進(jìn)，當(dāng)被切成長(zhǎng)條形的切片后，該長(zhǎng)條形切片停放在刀具側(cè)面上方的方向?qū)⑴c刀刃邊緣線垂直，停放穩(wěn)當(dāng)，便于下一步切片的收集工作。
3、對(duì)于組織標(biāo)本采用凍結(jié)的方式固定在非金屬支架豎板上的方式而言，由于組織標(biāo)本和非金屬支架變形程度不同，而且一部分切削力會(huì)分解成為橫向的推力，在各種材料和力學(xué)因素綜合作用下，使兩者在切削過(guò)程中黏結(jié)力逐漸變?nèi)?，加上兩者在被切成長(zhǎng)條形切片后接觸面積很小，會(huì)使兩者一同停留在刀具側(cè)面上方時(shí)，黏結(jié)力變得很薄弱，因此可以采用載玻片黏附、收集組織標(biāo)本切片，由于組織標(biāo)本切片與載玻片之間存在黏結(jié)力，而非金屬支架切片與載玻片之間不存在黏結(jié)力，因此組織標(biāo)本切片將隨同載玻片被移開(kāi)，這樣很巧妙、簡(jiǎn)單易行地實(shí)現(xiàn)組織標(biāo)本切片與非金屬支架切片的最終分離，更進(jìn)一步體現(xiàn)出本發(fā)明的創(chuàng)造性。


圖1是本發(fā)明第一個(gè)具體實(shí)施例中使用的倒T形非金屬支架的形狀結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2是圖1中倒T形非金屬支架的側(cè)視圖。
圖3是本發(fā)明第一個(gè)具體實(shí)施例的一種工作狀態(tài)示意圖。
圖4是圖3中組織標(biāo)本和非金屬支架的位置關(guān)系示意圖。
圖5是本發(fā)明第一個(gè)具體實(shí)施例的另一種工作狀態(tài)示意圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一該方法應(yīng)用于制作形狀扁平且具有三層結(jié)構(gòu)(即圖4中41層、42層、43層)的組織標(biāo)本切片，包括以下主要步驟A、取出具有層狀結(jié)構(gòu)的扁平組織標(biāo)本4，利用自身的黏結(jié)力將其初步粘附在一個(gè)倒T形塑料支架1的豎板12上，并拉伸展平；將倒T形塑料支架的底板11平放并粘固在切片機(jī)的載物臺(tái)2上，使塑料支架的豎板12位于刀具3刀鋒的正前方，使塑料支架的豎板12所在平面與載物臺(tái)3工作時(shí)來(lái)回運(yùn)動(dòng)方向(即圖3中箭頭方向)基本平行，如圖3所示；將扁平組織標(biāo)本4冷凍，使其進(jìn)一步凍結(jié)固定在塑料支架的豎板12上；B、驅(qū)動(dòng)切片機(jī)的載物臺(tái)3來(lái)回運(yùn)動(dòng)，載物臺(tái)3帶動(dòng)塑料支架1和組織標(biāo)本4相對(duì)于刀具3來(lái)回運(yùn)動(dòng)，如圖3中箭頭所示，刀刃前鋒線ab相對(duì)運(yùn)動(dòng)(以組織標(biāo)本為參照物)所形成的軌跡面大致垂直于生物組織標(biāo)本各層間的界面，刀具3同時(shí)將組織標(biāo)本4連同塑料支架的豎板12逐步切成切片(其中一次分切過(guò)程的分切線軌跡如圖4中虛線所示。每分切一次，載物臺(tái)2就向上移動(dòng)一定距離，該距離就是每次切削的厚度，這與傳統(tǒng)方法一樣)；C、組織標(biāo)本切片44和塑料支架豎板切片124停留在刀具側(cè)面上方，長(zhǎng)條形切片停放在刀具側(cè)面上方的方向?qū)⑴c刀刃前鋒線ab垂直(圖5所示)，接著采用載玻片將組織標(biāo)本的切片黏附起來(lái)，組織標(biāo)本的切片44隨同載玻片被移開(kāi)，而塑料支架豎板的切片124仍留在刀具上方，由此實(shí)現(xiàn)組織標(biāo)本的切片與非金屬支架豎板的切片分離。上述所謂“倒T形的非金屬支架”，是指由豎板12和底板11構(gòu)成的塑料支架，其中豎板和底板互相垂直并連為一體，形成倒T字形(即“”形)，如圖1、圖2所示。
實(shí)施例二該方法包括以下主要步驟A、將具有層狀結(jié)構(gòu)的扁平組織標(biāo)本攤平在倒T形的有機(jī)玻璃支架的豎板上，用石蠟包埋，使有機(jī)玻璃支架的底板平放并固定在旋切式切片機(jī)的載物臺(tái)上，使有機(jī)玻璃支架的豎板位于刀具刀鋒的正前方，并使有機(jī)玻璃支架的豎板所在平面與載物臺(tái)每一趟來(lái)回運(yùn)動(dòng)起點(diǎn)和終點(diǎn)之間連線的方向相交成約30°的夾角；B、驅(qū)動(dòng)切片機(jī)的載物臺(tái)運(yùn)動(dòng)，載物臺(tái)帶動(dòng)有機(jī)玻璃支架和組織標(biāo)本相對(duì)于刀具運(yùn)動(dòng)，刀具將組織標(biāo)本連同塑料支架的豎板逐步切成切片；C、將B步驟所得的切片放入熱水，組織標(biāo)本切片與有機(jī)玻璃切片分離，有機(jī)玻璃切片沉入水底，組織切片漂浮在水面，用載玻片將組織切片撈起并黏附，然后烘干。
權(quán)利要求
1.一種生物組織切片制作方法，包括以下主要步驟A、取出形狀扁平且具有層狀結(jié)構(gòu)的組織標(biāo)本，將其拉伸展平并固定在一個(gè)倒T形非金屬支架的豎板上，使倒T形非金屬支架的底板平放并固定在切片機(jī)的載物臺(tái)上，使非金屬支架的豎板位于刀具刀鋒的正前方，并使非金屬支架的豎板所在平面與載物臺(tái)工作時(shí)來(lái)回運(yùn)動(dòng)方向的夾角小于30°；B、驅(qū)動(dòng)切片機(jī)的載物臺(tái)運(yùn)動(dòng)，載物臺(tái)帶動(dòng)非金屬支架和組織標(biāo)本相對(duì)于刀具運(yùn)動(dòng)，刀具同時(shí)將組織標(biāo)本連同非金屬支架的豎板逐步切成切片。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的生物組織切片制作方法，其特征在于上述A步驟中，組織標(biāo)本采用凍結(jié)的方式固定在非金屬支架的豎板上。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的生物組織切片制作方法，其特征在于在上述B步驟之后，組織標(biāo)本和非金屬支架豎板被切出來(lái)的切片停留在刀具側(cè)面上方，此后，采用載玻片將組織標(biāo)本的切片黏附起來(lái)，將組織標(biāo)本的切片隨同載玻片移開(kāi)，而非金屬支架豎板的切片仍留在刀具上方，由此實(shí)現(xiàn)組織標(biāo)本的切片與非金屬支架豎板的切片分離。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的生物組織切片制作方法，其特征在于上述A步驟中，組織標(biāo)本采用石蠟包埋的方式固定在非金屬支架的豎板上。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任何一項(xiàng)的生物組織切片制作方法，其特征在于上述A步驟中，非金屬支架的豎板所在平面與載物臺(tái)工作時(shí)來(lái)回運(yùn)動(dòng)的方向平行。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至4任何一項(xiàng)的生物組織切片制作方法，其特征在于非金屬支架為塑料支架。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至4任何一項(xiàng)的生物組織切片制作方法，其特征在于非金屬支架為有機(jī)玻璃支架。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至4任何一項(xiàng)的生物組織切片制作方法，其特征在于切片機(jī)為滑動(dòng)式切片機(jī)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至4任何一項(xiàng)的生物組織切片制作方法，其特征在于切片機(jī)為旋切式切片機(jī)。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至3任何一項(xiàng)的生物組織切片制作方法，其特征在于非金屬支架的底板采用粘固的方式固定在切片機(jī)的載物臺(tái)上。
全文摘要
一種生物組織切片制作方法，包括以下主要步驟A.將組織標(biāo)本展平并固定在倒T形非金屬支架豎板上，將支架底板平放并固定在載物臺(tái)上，使支架豎板位于刀具正前方，并使支架豎板所在平面與載物臺(tái)來(lái)回運(yùn)動(dòng)方向基本平行；B.切片機(jī)刀具同時(shí)將組織標(biāo)本連同非金屬支架的豎板逐步切成切片。本發(fā)明能使切面垂直于組織標(biāo)本各層間的界面，所得切片各層間的界面平直，便于在顯微鏡下將切片中的目標(biāo)細(xì)胞或目標(biāo)組織層方便快捷地挖取出來(lái)。
文檔編號(hào)G01N1/04GK1687735SQ20051003441
公開(kāi)日2005年10月26日 申請(qǐng)日期2005年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月23日
發(fā)明者胡盛平 申請(qǐng)人:胡盛平