專利名稱：一種急性白血病的分型方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種急性白血病的分型方法，具體地說涉及一種利用在不同型的急性白血病中的獨(dú)特分子標(biāo)記物的不同對急性白血病的分型方法。
背景技術(shù)：
隨著大量生物體全基因組序列的獲得、特別是人類基因組序列草圖的完成，人們發(fā)現(xiàn)基因表達(dá)異常是引起疾病的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，cDNA微陣列分析方法證明其進(jìn)行腫瘤分子特征研究的可行性，但mRNA水平與蛋白質(zhì)水平并不是一一對應(yīng)的關(guān)系，蛋白質(zhì)是生物細(xì)胞賴以生存的各種代謝和調(diào)控途徑的主要執(zhí)行者，并且疾病的發(fā)生可能與蛋白質(zhì)修飾狀態(tài)的改變有關(guān)，蛋白質(zhì)研究是揭示人類自身生命活動(dòng)和疾病機(jī)理的最終階段。因此蛋白質(zhì)不僅是多種致病因子對機(jī)體作用最重要的靶分子，而且也成為大多數(shù)藥物的藥靶。蛋白質(zhì)組學(xué)研究直接定位于蛋白質(zhì)水平，但與以往蛋白質(zhì)化學(xué)的研究不同，蛋白質(zhì)組研究的對象不是單一或少數(shù)的蛋白，它著重的是從全面、整體、動(dòng)態(tài)、定量的角度去研究基因的功能，利用蛋白質(zhì)組研究方法從腫瘤細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)的整體水平上全景式的透視細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)變化，將更有助于了解腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)特征，故利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究疾病的本質(zhì)要比在基因組水平上的研究更能說明問題。因此，蛋白質(zhì)組學(xué)是從結(jié)構(gòu)基因組學(xué)轉(zhuǎn)向功能基因組學(xué)研究的一個(gè)重要組成部分。近年來，蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)成為新世紀(jì)生命科學(xué)研究的前沿。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在研究細(xì)胞的增殖、分化、異常轉(zhuǎn)化、腫瘤形成等方面進(jìn)行了有力的探索，為疾病的早期診斷、藥靶的發(fā)現(xiàn)、療效和預(yù)后的判斷提供了重要依據(jù)。許多藥物發(fā)揮作用靶標(biāo)分子為蛋白質(zhì)，藥物開發(fā)一般基于疾病發(fā)生過程中特異性上調(diào)或下調(diào)的蛋白質(zhì)的表達(dá)為候選靶標(biāo)。利用蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究疾病的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制、鑒定新的藥靶，以及新的生物標(biāo)志物，并用于指導(dǎo)臨床試驗(yàn)。這不但為治療各種疾病帶來新的思路、策略，而且蘊(yùn)藏著巨大的市場前景。
白血病是一種造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，其主要表現(xiàn)為異常的血細(xì)胞(即白血病細(xì)胞)在骨髓或其它造血組織中進(jìn)行性、失控制的異常增生，浸潤全身各臟器組織，使正常血細(xì)胞生成減少，外周血白細(xì)胞有質(zhì)和量的異常變化，從而產(chǎn)生相應(yīng)的臨床表現(xiàn)。白血病占惡性腫瘤總發(fā)病率的5％左右，白血病在我國被列為十大高發(fā)性腫瘤之一。全國性普查，我國白血病的發(fā)病率為2.62/10萬。我國白血病在惡性腫瘤發(fā)生中，男性為第6位，女性為第8位。目前在急性白血病(acute leukemia，AL)治療上，無論是成人急性非淋巴細(xì)胞白血病(ANLL)還是急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)，仍以化療為主，雖多數(shù)患者能夠取得完全緩解(或帶瘤生存)，但難以根除微小殘留病變，獲得長期緩解，并且傳統(tǒng)的化療藥物由于缺乏對腫瘤細(xì)胞特異性的識(shí)別，往往同時(shí)殺傷正常的造血干細(xì)胞，產(chǎn)生嚴(yán)重的中性粒細(xì)胞缺乏和血小板減少而危及生命。人們希望使用靶向治療方法可以選擇性地殺滅腫瘤細(xì)胞，最大限度地發(fā)揮治療作用，而盡可能地減少傳統(tǒng)化療所具有的毒副作用。近年來在這方面相關(guān)的基礎(chǔ)和臨床研究引起了廣泛關(guān)注。AL是一種具有特定生物學(xué)特征和預(yù)后特征的異質(zhì)性疾病，其正確的分型對治療方案選擇、預(yù)后判斷等具有十分重要的意義。最初的分型方法是基于不同的臨床預(yù)后及微細(xì)的細(xì)胞核特征的差別。隨著1976年引入FAB分型方案，以細(xì)胞形態(tài)學(xué)和細(xì)胞組織化學(xué)為基礎(chǔ)進(jìn)行AL的診斷和分型，F(xiàn)AB分型方案為目前最經(jīng)典和廣泛應(yīng)用的分型方案，但由于白血病細(xì)胞的異質(zhì)性大，很容易造成分型誤差，其對白血病分型的正確率僅為60-70％，免疫表型分析、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)持術(shù)的發(fā)展進(jìn)一步補(bǔ)充了FAB分型方案的不足。但是，目前AL的分型方案仍存在不足和易發(fā)生錯(cuò)誤，最為重要的是現(xiàn)存的分型方案忽略了對臨床治療策略的制定、預(yù)后判斷等重要指導(dǎo)意義的白血病細(xì)胞生物學(xué)特征的反映。
AL發(fā)生是一個(gè)多基因參與、多階段的復(fù)雜過程，但癌變的機(jī)理仍然不大清楚，從蛋白質(zhì)整體水平上研究AL將有助于進(jìn)一步揭示AL的發(fā)病機(jī)制，發(fā)現(xiàn)AL特異性的標(biāo)志物及其藥物治療的靶標(biāo)。并且應(yīng)用新興的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究此過程有可能識(shí)別癌變相關(guān)蛋白質(zhì)，對提示白血病轉(zhuǎn)化機(jī)制具有重要的意義。而不同類AL的獨(dú)特生物學(xué)特征是由于其蛋白表達(dá)譜改變所致。具有不同蛋白質(zhì)表達(dá)特征的白血病細(xì)胞其具有不同的臨床生物學(xué)特征，包括對化療藥物的反應(yīng)，在臨床上有可能據(jù)此設(shè)計(jì)對某種白血病細(xì)胞特異的、毒性相對較小的治療方案。結(jié)合現(xiàn)有胞漿抗原檢測，已經(jīng)認(rèn)識(shí)到以前診斷的某些未分化型白血病，其實(shí)有確定的譜系，故對胞漿蛋白質(zhì)的研究對發(fā)現(xiàn)特異蛋白質(zhì)標(biāo)志物有重要的開發(fā)前景。目前對FAB分型的各型特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜(the distinct protein profiles，DPPs)仍不清楚。通過特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜對白血病進(jìn)行分型目前在國內(nèi)外未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是通過找到AL特異性的蛋白質(zhì)分子，作為AL的特異性分子標(biāo)記物，通過體外的試驗(yàn)檢測，提供一種用于AL分型的方法。
本發(fā)明的不同型的急性白血病的特異性的分子標(biāo)記物是通過以下方法篩選的。利用固相PH梯度雙向凝膠電泳分離以FAB分型為基礎(chǔ)對各型AL細(xì)胞及正常白細(xì)胞的總蛋白質(zhì)，凝膠經(jīng)顯色后，利用ImageMaster 2D圖象分析軟件進(jìn)行比較分析、識(shí)別差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF)得到相應(yīng)的肽質(zhì)指紋圖譜(peptide massfingerprint，PMF)，然后搜索數(shù)據(jù)庫鑒定部分差異蛋白質(zhì)點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下本發(fā)明中的各標(biāo)本AL細(xì)胞數(shù)均在90％以上，正常淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞比例在90-95％之間。得到分辨率較高、重復(fù)性較好的M1，M2，M3，M4，M5和ALL和正常淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的2-DE圖譜。經(jīng)ImageMaster 2-D Elite3.0軟件分析，每塊膠大約可觀察到1100個(gè)左右蛋白點(diǎn)。同一亞型的不同標(biāo)本2-DE圖譜非常相似，其匹配率為85％-95％之間，不同亞型標(biāo)本的2-DE圖譜有明顯的不同，其匹配率60％和70％之間。對差異蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行了肽質(zhì)指紋圖分析，獲得了以FAB分型為基礎(chǔ)的各型AL特異性DPPs。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了一些已報(bào)導(dǎo)過的與白血病分型和發(fā)生相關(guān)的蛋白，如髓系過氧化物酶(MPO)、Op18(oncoprotein 18)、增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclearantigen，PCNA)等，證明本發(fā)明實(shí)驗(yàn)體系的可靠性；同時(shí)發(fā)明人又新發(fā)現(xiàn)了一些AL與正常白細(xì)胞差異表達(dá)蛋白及AL各型間差異表達(dá)蛋白。與正常白細(xì)胞(NWBCs)相比，一些與正常細(xì)胞功能相關(guān)的蛋白如MLC-2和MLC-3及基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)在AL細(xì)胞低表達(dá)。AML與ALL差異表達(dá)蛋白，包括，轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白(高移動(dòng)群蛋白HMG andTy5同源物抑制蛋白Supt5H)，耐藥相關(guān)蛋白，糖化蛋白I，磷酸甘油激酶(PGK1)，分子伴侶(熱休克蛋白HSP70，cyclophilins)和RNA識(shí)別蛋白(UP1)。發(fā)明人也發(fā)現(xiàn)一些在ALL中高表達(dá)，而在AML和NWBCs中低表達(dá)或不表達(dá)得到蛋白質(zhì)，包括Bridgingintegrator-2。另外，如磺基轉(zhuǎn)移酶，磷脂蛋白A2(P36)，乙?；姿岷颂寝D(zhuǎn)移酶和HSPC124在M5中表達(dá)，而在AL的其它亞型中不表達(dá)。蛋白酶3、Azurocidin和cationic antimicrobial peptides未在低分化M1中表達(dá)，在所有ALL中均無表達(dá)，僅在M2、M3和分化的正常中性粒細(xì)胞中高表達(dá)。延伸因子2和RhoG在M2中高表達(dá)。cathepsin G僅在M3中表達(dá)，未見在其它類型AL中表達(dá)。與其它亞型AL相比，非轉(zhuǎn)移細(xì)胞1蛋白non-metastaticcells 1 protein(NM23-H1)在M3型中低表達(dá)，進(jìn)一步顯示在M3a中NM23-H1表達(dá)與NWBC表達(dá)量一樣，與M3b有明顯差別。在臨床觀察中，M3a的預(yù)后好于其它類型AL，提示NM23-H1是一個(gè)重要預(yù)后判斷的因素。磷酸化OP18在M1型白血病及ALL中高表達(dá)，提示其與原始細(xì)胞高度增殖特征有關(guān)。
本發(fā)明實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示白血病的發(fā)生是多種致病因素起作用，通過對白血病細(xì)胞DPP的不斷深入研究，發(fā)現(xiàn)FAB AL亞型的療效與預(yù)后存在明顯的異質(zhì)性。各型白血病之間不僅存在不同致病機(jī)理，而且藥物代謝特點(diǎn)上也存在著差異。本發(fā)明針對FAB診斷標(biāo)準(zhǔn)的缺點(diǎn)在FAB分型的框架下，以白血病細(xì)胞生物學(xué)特征為主線進(jìn)行白血病細(xì)胞DPP的研究，使其更能適合現(xiàn)代白血病治療策略的制定。DPP分析將AL診斷、治療策略制定、預(yù)后以及發(fā)病機(jī)制研究中的地位提高到一個(gè)新的高度。本發(fā)明包括三套DPP，一是可以了解正常細(xì)胞與白血病細(xì)胞之間的生物學(xué)差別；二可以確定白血病的系屬髓系或淋巴系白血?。蝗烧J(rèn)進(jìn)一步確定系內(nèi)亞型。各型AL DPP有助于通過體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)行AL的分型、鑒別診斷及指導(dǎo)治療。
實(shí)驗(yàn)例3測試噴嘴堵塞將根據(jù)實(shí)施例1-6和比較例1-6制備的墨水組合物置于SAMSUNGELECTRONICS CO.墨盒M-50上，在環(huán)境溫度(25℃)和低溫(-18℃)保持2周，然后如下評定噴嘴堵塞的程度，噴嘴堵塞以致于當(dāng)用印刷機(jī)(MJC-2400C，由SAMSUNG ELECTRONICS CO.生產(chǎn))在常用紙(PREMIUM COPY PAPER，由SAMSUNG ELECTRONICS CO.制造)上印刷時(shí)其不能噴射墨水，結(jié)果示于下表5中。
表5

○所有噴嘴沒有觀察到堵塞△觀察到1或2個(gè)噴嘴堵塞×觀察到多于3個(gè)噴嘴堵塞從表5可以看出根據(jù)本發(fā)明的墨水組合物即使儲(chǔ)存在環(huán)境溫度或低溫后也可以使用，而噴嘴沒有堵塞。特別地，對于比較例1、2和4中制備的墨水組合物，出現(xiàn)1或2個(gè)噴嘴堵塞，或多于3個(gè)噴嘴堵塞，然而對于根據(jù)實(shí)施例1、2和4的墨水組合物，沒有出現(xiàn)噴嘴堵塞，實(shí)施例1，2和4使用了根據(jù)本發(fā)明的可自分散炭黑顏料，其中親水基團(tuán)引入到在比較例1、2和4中使用的常用炭黑顏料中。從該結(jié)果可以看出根據(jù)本發(fā)明制備的可自分散顏料提供了與常規(guī)顏料的長期儲(chǔ)存穩(wěn)定性相比顯著改進(jìn)的長期儲(chǔ)存穩(wěn)定性。
根據(jù)本發(fā)明的可自分散著色劑可以由通過一步方法將親水基團(tuán)引入著色劑而制備，從而，制備根據(jù)本發(fā)明的可自分散著色劑的方法所需成本可以顯著降低。包含根據(jù)本發(fā)明的可自分散著色劑的墨水組合物由于即使在

注1-11為與正常血細(xì)胞相比，在AL中高表達(dá)的蛋白，12-29為在AL中低表達(dá)的蛋白二、以FAB分型為基礎(chǔ)的各型特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜(the distinct proteinprofiles，DPPs)中新發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)如下表所示1、AML(主要是M1-M5型AML)中高表達(dá)的蛋白


2、急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)中高表達(dá)的蛋白

3、急性粒細(xì)胞白血病(M1-M3型AML)中高表達(dá)蛋白；


4、M5型急性白血病中高表達(dá)的蛋白

5、M2和M3型急性白血病中高表達(dá)的蛋白

6、M2中高表達(dá)的蛋白

7、M3型急性白血病中高表達(dá)的蛋白

注7，12，13為在M3中低表達(dá)的蛋白隨著研究方法和手段的不斷進(jìn)展，急性白血病的治療已從過去單一依靠化療殺滅白血病細(xì)胞向特異性治療方向轉(zhuǎn)變，此特異性治療的基礎(chǔ)是對白血病的發(fā)病機(jī)制及其病理生理過程的深入了解，更大程度地選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞，減少對正常造血干細(xì)胞的抑制作用，降低對全身其他臟器的毒副作用。
本發(fā)明從細(xì)胞功能的直接執(zhí)行者-蛋白質(zhì)水平進(jìn)行急性白血病(AL)分型，這樣更能反映AL的生物學(xué)特征，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)一組AL與正常細(xì)胞差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，并發(fā)現(xiàn)了以FAB分型為基礎(chǔ)的各型AL的蛋白質(zhì)差異表達(dá)譜(DDP)。本發(fā)明對于篩選潛在的針對白血病等腫瘤的藥物靶標(biāo)分子和功能蛋白質(zhì)，研制和開發(fā)新的AL治療藥物，具有重要的意義，有巨大的市場前景和社會(huì)與經(jīng)濟(jì)效益。
權(quán)利要求
1.一種急性白血病的分型方法，其特征在于通過篩選不同型的白血病的特異性的分子標(biāo)記物，組成各型急性白血病的特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜，利用該特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜進(jìn)行急性白血病分型。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中篩選不同型急性白血病的特異性分子標(biāo)記物的方法包括如下步驟(1)利用雙向凝膠電泳分離各型急性白血病細(xì)胞及正常白細(xì)胞的總蛋白質(zhì)；(2)利用圖象分析軟件進(jìn)行比較分析、識(shí)別差異表達(dá)的蛋白質(zhì)；(3)應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜得到相應(yīng)的肽質(zhì)指紋圖譜；(4)鑒定部分差異蛋白質(zhì)點(diǎn)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜包括以下三種(1)確定正常細(xì)胞與急性白血病細(xì)胞之間的生物學(xué)差別的特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜；(2)確定急性白血病的系屬髓系或淋巴系白血病的特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜；(3)確定急性白血病系內(nèi)亞型的特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中確定正常細(xì)胞與急性白血病細(xì)胞之間的生物學(xué)差別的特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜包括如下蛋白質(zhì)(1)PTK9L protein tyrosine kinase 9-like(A6-related protein)；(2)guanine nucleotide binding protein(G protein)(3)Rho GDP dissociation inhibitor(GDI)alpha(4)BCL2-associated athanogene 5；BAG-family molecular chaperone regulator-5(5)TNF inhibitory protein(TIP)(6)voltage-dependent anion channel 2(7)heat shock 27kDa protein 1(HSP 27)(8)apoptosis inhibitor homolog(IAP)(9)Similar to proteasome(prosome，macropain)subunit，alpha type，(10)peroxiredoxin 6；antioxidant protein 2(AOP2)(11)peroxisomal enoyl-CoA hydratase 1(12)ras suppressor protein 1(13)glutathione-S-transferase like；glutathione-S-transferase omega(GST)(14)Chain A，Manganese Superoxide Dismutase(MnSOD)(15)myosin regulatory light chain(MRCL2)(16)similar to Homo sapiens mRNA for KIAA0120 gene with GenBankAccession Number D21261.1(17)myosin regulatory light chain MRCL3(18)GDP dissociation inhibitor 2；(19)actin related protein 2/3 complex subunit 5(20)Chain A，Dimeric Form Of The Haemopexin Domain Of Mmp9(21)Lactoferrin(22)unnamed protein product(23)S100 calcium-binding protein A12(24)Chain A，Crystal Structure Of The Mrp 14 Complexed With Chaps(25)CFAg(AA 1-94)(26)5′-methylthioadenosine phosphorylase(27)endoplasmic reticulum protein 29 precursor(28)Chain B，Crystal Structure Of A Rac-Rhogdi Complex(29)Chain A，Carboxylic Ester Hydrolase，P 1 21 1 Space Group其中(1)-(11)為與正常血細(xì)胞相比，在急性白血病細(xì)胞中高表達(dá)的蛋白質(zhì)，(12)-(29)為在急性白血病細(xì)胞中低表達(dá)的蛋白質(zhì)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中確定急性白血病的系屬髓系或淋巴系白血病以及系內(nèi)亞型的特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜包括如下蛋白質(zhì)(1)AML(主要是M1-M5型AML)中高表達(dá)的蛋白(1)Uracil DNA glycosylase(2)Hypothetical protein XP_297896(3)BC37295_1(4)Coding sequence(5)Vimentin(6)Unnamed protein product(7)Coactosin-like 1(8)Cytochrome oxidase subunit VIb(9)ATP synthase，H+transporting，mitochondrial F1 complex(10)Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(11)Heat shock 70kDa protein 8 isoform 2；(12)F-actin capping protein beta subunit；Cap Z(13)Chain A，Crystal Structure Of The Mrp 14 Complexed With Chaps(14)S100 calcium-binding protein A8(Mrp8)(15)glyoxalase I(16)annexin I；lipocortin I(17)phosphoglycerate kinase 1(18)Proteasome beta subunit(19)adenylate kinase，mitochondrial；ATP-AMP transphosphorylase(20)Chain A，structure of up 1-telomeric dna Complex(21)Up1，The Two Rna-Recognition Motif Domain Of Hnrnp A1(22)Nit protein 2(23)Aldolase A(2)急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)中高表達(dá)的蛋白(1)immunoglobulin heavy chain(2)stathmin；leukemia-associated phosphoprotein p18(OP18)(3)bridging integrator 2；breast cancer associated protein BRAP1(3)急性粒細(xì)胞白血病(M1-M3型AML)中高表達(dá)蛋白(1)dnaK-type molecular chaperone HSPA5 precursor(2)similar to ribosomal protein S12；40S ribosomal protein S12(3)fatty acid binding protein 5(psoriasis-associated)；E-FABP(4)actin gamma(5)alpha enolase(6)beta5-tubulin(7)BiP protein(8)3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase，isoform 2(9)Suppressor of Ty 5 homolog(SupT5H)(10)Peroxiredoxin 2；Thiol-specific antioxidant protein)(TSA)(11)glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(phosphorylating)(12)CDC42 GAP-related protein(13)similar to VENT-like homeobox 2；haemopoietic progenitor homeobox(4)M5型急性白血病中高表達(dá)的蛋白(1)adenine phosphoribosyltransferase；AMP pyrophosphorylase；(2)annexin A2；annexin II(lipocortin II)；(3)HSPC124(4)sulfotransferase family，cytosolic，1A，(5)unnamed protein product(6)inorganic pyrophosphatase 2 isoform 2(7)hypothetical protein(8)Unknown(protein for MGC27221)(5)M2和M3型急性白血病中高表達(dá)的蛋白(1)Chain A，Cyclophilin B(2)vimentin(3)unnamed protein product(4)annexin I；lipocortin I(6)M2中高表達(dá)的蛋白(1)elongation factor 2(2)Small GTP binding protein RhoG(7)M3型急性白血病中高表達(dá)的蛋白(1)unnamed protein product(2)Chain A，Human Cathepsin G(3)Human Heparin Binding Protein(4)Chain A，F(xiàn)kbp-Rapamycin Binding Domain(Frb)Of TheFkbp-Rapamycin Associated Protein(5)azurocidin(6)similar to retinoic acid，EGF，and NGF upregulated；REN(7)non-metastatic cells 1 protein(8)S100 calcium binding protein A 11(calgizzarin)(9)RNA-binding protein regulatory subunit；oncogene DJ1(10)transferrin(11)Chain B，Nmr Structure Of PCAF Bromodomain(12)isocitrate dehydrogenase 3(NAD+)alpha precursor(13)eukaryotic translation initiation factor 5A；(eIF5A)其中(7)(12)(13)為在M3中低表達(dá)的蛋白。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種急性白血病的分型方法，具體地說公開了一種利用不同型的急性白血病的特異性分子標(biāo)記物不同對急性白血病分型的方法。篩選特異性的分子標(biāo)記物包括利用雙向凝膠電泳分離各型急性白血病細(xì)胞及正常白細(xì)胞的總蛋白質(zhì)，利用圖象分析軟件進(jìn)行比較分析、識(shí)別差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，應(yīng)用質(zhì)譜分析鑒定部分差異蛋白質(zhì)點(diǎn)。通過本發(fā)明篩選得到的各型急性白血病特異性的分子標(biāo)記物組成的特定蛋白質(zhì)表達(dá)譜，來對急性白血病進(jìn)行分型，具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)G01N33/558GK1619311SQ20031011502
公開日2005年5月25日 申請日期2003年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月20日
發(fā)明者王冠軍, 張學(xué)敏, 崔久嵬, 王杰 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)分析中心, 吉林大學(xué)第一醫(yī)院