專利名稱：色譜定量測定裝置、色譜定量測定方法及其使用的色譜試驗片的制作方法
技術(shù)區(qū)域本發(fā)明涉及利用抗原抗體反應定量測定被測物質(zhì)的色譜定量測定裝置、其測定方法及其使用的色譜試驗片。
該免疫色譜試驗片稱為反應層載體。液體試樣添加到反應層載體上，放置一定時間。通過考察一定時間后出現(xiàn)的顯色反應，判斷有無被測物質(zhì)。也就是說，將液體試樣添加到試樣添加層43中，液體試樣浸透試樣添加層43，到達標識試劑保持層44。標識試劑在標識試劑保持層44中被液體試樣浸透溶解，同時向反應層42浸透。在這一過程中，液體試樣中的分析對象物與標識試劑結(jié)合，生成結(jié)合體。該結(jié)合體在反應層42的條狀反應區(qū)域46C與捕集試劑固定部位的捕集試劑發(fā)生特異性反應，引起顯色反應。
液體試樣中含有的分析對象物少時，標識試劑結(jié)合體的量也少，結(jié)果反應層42中的顯色部分僅限于多條反應區(qū)域46C中的上游部分，顯色條數(shù)少。另一方面，分析對象物多時，標識試劑結(jié)合體的量也多，顯色部分達到多條反應區(qū)域46C的下游部分。
以前，利用這種原理，通過考察反應區(qū)域46C的顯色條數(shù)，可以將液體試樣中含有的分析對象物的濃度半定量地評價為“多”-“少”的3個等級、5個等級、10個等級等。
例如，采用上述方法進行免疫色譜分析，對其結(jié)果進行定量的手段在特開平5-5743號公報中已經(jīng)公開。在這一現(xiàn)有技術(shù)中，獨立固定的捕集試劑分散在色譜試驗片反應區(qū)域的多個部位，其濃度按照從色譜試驗片上游到下游的順序逐步增加。而且，通過目測這種分散的多個部位中顯色的反應區(qū)域的數(shù)目，可以對分析對象物進行半定量化測定。
另外，其他的現(xiàn)有技術(shù)在特開平-341989號公報中已經(jīng)公開。在這一現(xiàn)有技術(shù)中，通過以一定量固定存在的分析對象物的抗體，捕集與固定的抗體量相應的試樣中一定量的分析對象物，使分析物減少。采用這種方法可以簡便地對分析對象物進行半定量。
另外，其他的現(xiàn)有技術(shù)在特開平-240591號公報中也有公開。在這一現(xiàn)有技術(shù)中，試樣添加到免疫色譜試驗片上，進行反應。之后，測定規(guī)定檢測區(qū)域中的顯色程度。也就是說，使用檢測儀器測定顯色部位的吸收或反射等信號，使測定結(jié)果定量化。
免疫色譜法的測定原理是利用抗原抗體反應的特異性，可以有效檢測各種分析對象物。但是，上述現(xiàn)有的免疫色譜法測定，只能依賴于分析對象物的種類進行半定量地測定，而定量測定則是不可能的。這樣，就會產(chǎn)生根據(jù)分析對象物的種類僅能得出半定量結(jié)果的限度。因此，期望出現(xiàn)一種使用免疫色譜試驗片可以得到正確分析結(jié)果的定量測定裝置。
使用免疫色譜試驗片進行定量測定的場合，可以認為是基于其顯色程度的強弱或濃淡，測定分析對象物濃度的方法。使用現(xiàn)有的免疫色譜試驗片時，色譜的展開是在沒有機械控制的狀態(tài)下進行的，不能人為地控制反應速度。因此，分析對象物的浸透速度依賴于試驗片自身的浸透性。因此，依賴于測定時間、試驗片的種類、同一試驗片上的部位、試樣量以及標識試劑的量等，試驗片上的顯色程度會有很大的不同。另外，反應區(qū)域限定于特定的場所，測量這種限定的特定反應區(qū)域的顯色程度時，受標識試劑的浸透性的影響，測定誤差較大。因此，難以對分析對象物的濃度進行數(shù)值化的定量測定。因此，采用免疫色譜法的定量測定的性能只是接近于半定量。
本發(fā)明的目的在于提供一種可以提高免疫色譜法的定量測定性能的色譜定量測定裝置、定量測定方法以及色譜試驗片。
特別優(yōu)選色譜定量測定裝置還具備對上述顯色程度的測定結(jié)果進行演算處理，計算出分析對象物的濃度數(shù)值的演算處理裝置。
本發(fā)明的測定液體試樣中所含分析對象物濃度的色譜定量測定方法包括下述步驟(a)提供具有多個反應區(qū)域的色譜試驗片，該反應區(qū)域上固定有能夠與含有上述分析對象物的物質(zhì)結(jié)合的捕集試劑，(b)用含有上述分析對象物的上述液體試樣潤濕上述色譜試驗片，使含有上述分析對象物的物質(zhì)與上述捕集試劑接觸，(c)通過光學測定和圖象測定中至少一種，測定上述反應區(qū)域中至少2個區(qū)域的上述捕集試劑與上述分析對象物特異性結(jié)合產(chǎn)生的顯色狀況，然后對該測定結(jié)果進行演算處理，計算出數(shù)值化的濃度。
本發(fā)明用于通過光學測定和圖象測定中至少一種方法測定液體試樣中所含分析對象物濃度的色譜試驗片包括上述液體試樣可以潤濕的潤濕部件、上述潤濕部件中設置的捕集試劑，上述捕集試劑具有能夠與含有上述分析對象物的物質(zhì)反應并顯色的性質(zhì)，上述捕集試劑以均勻的狀態(tài)含在上述潤濕部件中。
特別優(yōu)選上述色譜試驗片具有片狀的支持體和設置在上述支持體上的潤濕部件，上述潤濕部件可以被上述液體試樣潤濕，上述潤濕部件具有在與上述支持體面平行的方向上形成的試樣添加層、標識試劑保持層、反應層和吸收層，上述反應層具有上述反應區(qū)域，上述液體試樣依次從上述試樣添加層、上述標識試劑保持層、上述反應層、上述吸收層中通過。
采用這種結(jié)構(gòu)，可以提高免疫色譜法中的定量測定性能。
圖2表示本發(fā)明實施方式中色譜定量測定方法的步驟。
圖3是表示本發(fā)明實施方式中色譜定量測定裝置的色譜試驗片結(jié)構(gòu)的側(cè)視圖。
圖4是表示本發(fā)明的實施方式中反應層的反應區(qū)域模式的色譜試驗片平面圖。
圖5是表示本發(fā)明的實施方式中反應層的反應區(qū)域其他模式的色譜試驗片平面圖。
圖6是表示現(xiàn)有的色譜試驗片結(jié)構(gòu)的平面圖。
發(fā)明的最佳實施方式本發(fā)明的一個實施例的色譜定量測定裝置是通過分析色譜試驗片的顯色反應結(jié)果，測定液體試樣中分析對象物的濃度。該色譜試驗片包括片狀的支持體以及在上述支持體上層疊的可以潤濕的多個潤濕部件。上述多個潤濕部件設置在與上述支持體面平行的方向上。上述多個潤濕部件具有試樣添加層、標識試劑保持層、反應層和吸收層。上述反應層具有反應區(qū)域，該反應區(qū)域上固定有能夠與上述液體試樣中的分析對象物特異性結(jié)合的捕集試劑。分析上述反應層中的顯色反應結(jié)果。該色譜定量測定裝置包括上述色譜試驗片、通過光學測定或圖象測定定量測定上述反應區(qū)域中顯色反應程度的顯色程度測定手段以及演算處理其測定結(jié)果計算出分析對象物的數(shù)值化濃度的演算處理裝置。
采用這種結(jié)構(gòu)，通過測定色譜試驗片的反應層上固定有能夠與分析對象物特異性結(jié)合的捕集試劑的反應區(qū)域上的多個部位，不用控制液體試樣的浸透狀況，就可以正確地測定試驗片上的顯色反應。結(jié)果提高了定量測定性能。
特別優(yōu)選上述色譜定量測定裝置中，上述反應區(qū)域是在上述反應層上形成的多個斑點形態(tài)的部位。上述固定有捕集試劑的反應區(qū)域的形狀有點狀或球狀的斑點，多數(shù)個點或斑點在反應層上不規(guī)則地存在。通過在反應層上設置斑點形態(tài)的多個反應區(qū)域，根據(jù)反應區(qū)域與非反應區(qū)域的顏色對比可以測定全部反應層上的顯色程度。而且，由于反應區(qū)域不規(guī)則、均勻地存在于反應層上，即使顯色反應受液體試樣的浸透狀況影響時，也可以進行更準確地定量測定。而且，由于以斑點形態(tài)固定捕集試劑，可以減少必要的試劑量，降低成本。這樣，就可以不受液體試樣的浸透狀況影響，進行顯色反應。
特別優(yōu)選上述反應區(qū)域在上述反應層的整個區(qū)域內(nèi)形成。上述固定有捕集試劑的反應區(qū)域的形狀為面狀，在反應層上廣泛存在。采用這種結(jié)構(gòu)，反應層的整個區(qū)域均為反應區(qū)域，可以測定整個反應層上的顯色反應。而且，由于在整個反應層上均勻地存在反應區(qū)域，即使顯色反應受液體試樣的浸透狀況影響時，也可以更準確地定量測定。可以不受液體試樣的浸透狀況的影響進行顯色反應。
特別優(yōu)選上述反應層上固定的捕集試劑的濃度在所有反應區(qū)域是一定的。采用這種結(jié)構(gòu)，顯色反應可以達到均勻。由于反應層上固定的捕集試劑的濃度在所有區(qū)域均是一定的，即使顯色反應受液體試樣的浸透狀況影響時，也可以把握全部反應層的反應狀況，更準確地定量測定?？梢圆皇芤后w試樣的浸透狀況的影響進行顯色反應。
特別優(yōu)選上述反應區(qū)域以均勻分散的狀態(tài)設置在上述反應層上。采用這種結(jié)構(gòu)，顯色均勻。結(jié)果，提高了定量測定的精度。
本發(fā)明的另一實施例的色譜定量測定方法包括下述步驟在具有由一個至任意多個部件構(gòu)成的可以潤濕的層的色譜試驗片上，通過光學測定或圖象測定測量固定有能夠與液體試樣中含有分析對象物的物質(zhì)特異性結(jié)合的捕集試劑的反應區(qū)域上多個部位的顯色狀況；對該測定結(jié)果進行演算處理，從而計算出分析對象物的數(shù)值化濃度。采用這種方法，可以不控制液體試樣的浸透狀況，正確測定試驗片上的顯色反應，結(jié)果提高了定量性能。
特別優(yōu)選上述反應區(qū)域是在上述反應層上形成的多個斑點形態(tài)的部位。固定有捕集試劑的反應區(qū)域的形狀由點狀或球狀的斑點構(gòu)成，一個以上的多個斑點在反應層上均勻、不規(guī)則地存在。采用這種結(jié)構(gòu)，就可以不受液體試樣的浸透狀況影響，進行顯色反應。
特別優(yōu)選上述反應層上固定的捕集試劑在所有反應部位固定有同樣的捕集試劑。同樣的捕集試劑呈點狀或球狀的斑點形態(tài)，均勻、不規(guī)則地存在于反應層上。這樣，可以不受液體試樣的浸透狀況的影響，進行顯色反應。
特別優(yōu)選上述反應區(qū)域在上述反應層的整個區(qū)域內(nèi)形成。固定有捕集試劑的反應區(qū)域的形狀為面狀，該反應區(qū)域在反應層上廣泛存在。采用這種結(jié)構(gòu)，可以不受液體試樣的浸透狀況的影響進行顯色反應。
特別優(yōu)選上述反應層上固定的捕集試劑的濃度在所有反應區(qū)域是一定的。采用這種結(jié)構(gòu)，顯色反應可以達到均勻。
以下，詳細說明本發(fā)明實施例的色譜定量測定裝置和測定方法。本發(fā)明的一個實施例的色譜定量測定裝置在改良免疫色譜試驗片結(jié)構(gòu)的同時，采用光學測定或圖象測定測量分析對象物與色譜試驗片上含有的捕集試劑反應的結(jié)果，即顯色程度，通過演算處理裝置將該測定結(jié)果數(shù)值化，可以定量地讀取液體試樣中含有的分析對象物的濃度。在免疫色譜定量測定中，為了提供不用控制液體試樣的流量和浸透性，并具有更高靈敏度和高性能的定量精度的免疫色譜試驗片，免疫色譜試驗片的特征在于由色譜材料構(gòu)成的反應層載體的表面上具有多個反應區(qū)域。
本實施例的色譜定量分析裝置以及定量測定方法具有使用測定儀器測量上述免疫色譜試驗片的多個部位的顯色程度，之后演算處理該測定結(jié)果，計算出分析對象物的濃度的功能。采用這種結(jié)構(gòu)，可以不受色譜試驗片上試樣的流量和浸透性的影響，得到高靈敏度和高性能的色譜定量分析裝置和測定方法。
免疫色譜試驗片的反應區(qū)域固定有能夠與分析對象物特異性結(jié)合的捕集試劑。該捕集試劑在所有反應區(qū)域具有一定的濃度。使用這種結(jié)構(gòu)的免疫色譜試驗片，反應區(qū)域或測量部位并不局限于特定部位。因此，在反應層載體的任意部位均可見顯色反應。因此，反映隨液體試劑浸透展開的標識試劑溶出狀況的顯色反應作為結(jié)果在所有反應層載體均有所體現(xiàn)。采用顯色程度測定手段測量其顯色程度，并對該結(jié)果進行演算處理，可以實現(xiàn)更高靈敏度和高性能的色譜定量測定。
另外，在本實施例中，使用由硝酸纖維素或玻璃纖維濾紙等任意多孔性載體構(gòu)成的色譜材料形成的試驗片作為反應層載體。該試驗片通過采用抗原抗體反應等測定原理，可以分析檢測特定物質(zhì)，具有定量化功能。液體試樣可以使用例如水、水溶液、尿、血液、體液、溶解有固體和粉體或氣體的溶液等試樣。作為試驗項目，例如可以進行尿檢查、妊娠檢查、水質(zhì)檢查、便檢查、土壤分析、食品分析等。這樣，可以簡單而且準確地定量測定任意被測溶液中存在的分析對象物。典型實施例參照

圖1、圖2、圖3、圖4、圖5說明本發(fā)明的色譜定量測定裝置、測定方法以及色譜試驗片的典型實施方式。圖1是本發(fā)明一個實施例的色譜定量測定裝置的側(cè)視圖。圖2表示本發(fā)明一個實施例的色譜定量測定方法的步驟。圖3是表示本發(fā)明一個實施例進行免疫測定的免疫色譜試驗片結(jié)構(gòu)的側(cè)視圖。這里，免疫色譜試驗片總稱為反應層載體。
如圖2所示，本發(fā)明的典型實施例的測定液體試樣中所含分析對象物濃度的色譜定量測定方法包括下述步驟(a)提供具有多個反應區(qū)域的色譜試驗片，該反應區(qū)域上固定有能夠與含有上述分析對象物的物質(zhì)結(jié)合的捕集試劑，(b)用含有上述分析對象物的上述液體試樣潤濕上述色譜試驗片，使含有上述分析對象物的物質(zhì)與上述捕集試劑接觸，(c)通過光學測定和圖象測定中至少一種，測定上述反應區(qū)域中至少2個區(qū)域的上述捕集試劑與上述分析對象物特異性結(jié)合產(chǎn)生的顯色狀況，而且對該測定結(jié)果進行演算處理，計算出數(shù)值化的濃度。
如圖3所示，反應層載體10包括支持體1、反應層2、試樣添加層3、標識試劑保持層4和吸水層5。在形成的反應層載體10上，液體試樣按照試樣添加層3、標識試劑保持層4、反應層2以及吸水層5的順序流過。
支持體1具有支持色譜材料的功能，由塑料材料等制成。試樣添加層3設置在支持體1上，該試樣添加層3具有容易被液體試樣潤濕的性質(zhì)。這種具有潤濕部件的試樣添加層3例如由無紡布等制成。含有被測物質(zhì)的液體試樣添加或涂敷在試樣添加層3上。標識試劑保持層4具有潤濕部件、該潤濕部件上保持的標識試劑。標識試劑被液體試樣浸透后可以移動。該潤濕部件例如由無紡布制成。反應層2是抗體和抗原反應的區(qū)域。反應層2由硝酸纖維素等制成。反應層2具有多個反應區(qū)域，在各個反應區(qū)域固定有能夠與分析對象物(被測物質(zhì))特異性結(jié)合的捕集試劑。多個反應區(qū)域以均勻地或不規(guī)則地或均勻分散的狀態(tài)或斑點狀分散的狀態(tài)或點狀分布的狀態(tài)等設置在反應層2上。吸水層5上最終吸收液體試樣的區(qū)域。
作為這種反應層載體的試驗片中，將含有分析對象物的液體試樣添加到試樣添加層3上。液體試樣從試樣添加層3到達標識試劑保持層4時，該標識試劑保持層4中所保持的標識試劑通過液體試樣的浸透而被溶解。在這一過程中，分析對象物與標識試劑結(jié)合。含有該分析對象物的結(jié)合物流到反應層2時，反應區(qū)域所含的捕集試劑與流過的分析對象物發(fā)生特異性化學反應，出現(xiàn)顯色反應，產(chǎn)生顯色狀態(tài)。另外，捕集試劑與分析對象物和標識試劑中的至少一種反應并顯色。最終液體試樣流動，被吸水層5吸收。液體試樣添加到反應層載體上，放置一定時間。通過定量測定一定時間后的顯色，可以測定被測物質(zhì)的定量數(shù)值。
也就是說，將液體試樣添加到試樣添加層3時，液體試樣浸透試樣添加層3，到達標識試劑保持層4。標識試劑在標識試劑保持層4上被液體試樣浸透，溶解的同時向反應層2浸透。在這一過程中，液體試樣中的分析對象物與標識試劑結(jié)合，生成結(jié)合體。該結(jié)合體在反應層2與捕集試劑發(fā)生特異性反應，引起顯色反應。液體試樣最終被吸水層5吸收，反應結(jié)束。
液體試樣中存在分析對象物時，在反應層2的反應區(qū)域可見任何顯色反應。使用光學測定或圖象測定等顯色程度測定手段11測量該顯色反應。而且，用演算處理裝置12對該測定結(jié)果進行演算處理，計算出分析對象物的數(shù)值化濃度。這樣，就可以定量地測定分析對象物。
另外，在上述實施例中，支持體1由塑料制成，反應層2、試樣添加層3、標識試劑保持層4、吸水層5由無紡布和硝酸纖維素制成，但這些材料都只是一個例子，并不僅限于上述材料。例如，支持體1可以由任意的非液體透過性材料制成。反應層2、試樣添加層3、標識試劑保持層4、吸水層5等潤濕部件可以由任意的具有多孔性的載體制成。
其次，采用圖4和圖5說明反應層2的反應區(qū)域的方式。圖4和圖5是表示具有不同反應區(qū)域的反應層載體10的實例的平面圖。圖4中，反應層2A上設置以多個點狀或斑點狀固定有捕集試劑的反應區(qū)域6A。圖5中，反應層2B上設置全部反應層都固定有捕集試劑的反應區(qū)域6B。采用這種反應層2A和反應層2B的結(jié)構(gòu)，流過反應層載體的分析對象物不論浸透狀況如何都可以確實被捕獲。結(jié)果，可以防止每個試驗片顯色程度的差異、不均勻等，正確地顯色。
使用具有以上結(jié)構(gòu)的免疫色譜試驗片，為了測量反應層2的顯色程度，隨機選取多個區(qū)域進行測定。
如圖1所示，顯色程度測定手段11可以利用讀取顯色狀態(tài)吸收信號的儀器、讀取顯色狀態(tài)反射信號的儀器或使用CCD的圖象解析儀器。
另外，演算處理裝置12使用通常的演算處理裝置。該演算處理裝置基于上述測定結(jié)果，計算出分析對象的數(shù)值化濃度。這樣，計算出顯色程度的平均值。通過增多取樣數(shù)可以正確地定量測定。
這樣，可以實現(xiàn)能高靈敏度和高性能定量測定的色譜定量測定裝置。
如上所述，本發(fā)明的測定裝置中具備光學或圖象讀取反應區(qū)域顯色程度的手段，可以更正確地測定顯色程度。因此，可以使用色譜試驗片，正確地定量測定。
通過在反應層上設置斑點狀的多個部位的反應區(qū)域，通過反應區(qū)域與非反應區(qū)域的顏色對比可以正確地測定全部反應層上的顯色程度。而且，由于反應層上不規(guī)則地存在反應區(qū)域，即使顯色反應受液體試樣的浸透狀態(tài)影響時，也可以更準確地定量測定。而且，由于以斑點形態(tài)固定捕集試劑，可以使試劑量達到最小，成本降低。由于反應層上全部為反應區(qū)域，可以測定全部反應層上的顯色反應。同時，由于全部反應層上均勻地存在反應區(qū)域，即使顯色反應受液體試樣的浸透狀況影響時，也可以更準確地定量測定。
本發(fā)明的測定方法中，測定反應區(qū)域上多個部位的顯色反應狀況，并對該測定結(jié)果進行演算處理。因此，可以把握全部反應層的顯色反應狀況，不受液體試樣浸透狀況的影響，可以更準確地定量測定。
反應層上形成了斑點形態(tài)的多個部位的反應區(qū)域。因此，可以測定反應區(qū)域和不含捕集試劑的區(qū)域之間的顯色程度對比。另外，由于反應層上不規(guī)則地存在反應區(qū)域，即使受液體試樣的浸透狀況影響，反應層上的顯色狀況出現(xiàn)差異時，通過測定多個部位后進行演算處理，可以緩和這種差異，結(jié)果可以更準確地定量測定。
反應層上以斑點形態(tài)設置的多個部位的反應區(qū)域上的捕集試劑種類相同。因此，可以測定全部反應層上的顯色反應。同時，通過對比反應區(qū)域和不含捕集試劑的區(qū)域的顯色程度，可以更準確地定量測定。另外，由于在反應層上不規(guī)則地存在反應區(qū)域，即使受液體試樣的浸透狀況影響，反應層上的顯色狀況出現(xiàn)差異時，通過測定多個部位后進行演算處理，可以緩和這種差異，結(jié)果可以更準確地定量測定。而且，由于以斑點形態(tài)固定捕集試劑，可以使試劑量達到最小，成本降低。由于反應層上全部為反應區(qū)域，可以測定全部反應層上的顯色反應。另外，由于全部反應層上均勻地存在反應區(qū)域，即使反應層上的顯色狀況出現(xiàn)差異時，通過測定多個部位后進行演算處理，可以緩和這種差異，結(jié)果可以更準確地定量測定。
由于反應層上固定的捕集試劑的濃度在所有區(qū)域是一定的，液體試樣浸透狀況影響顯色反應時，也能夠把握全部反應層的反應狀況。另外，即使受液體試樣浸透狀況的影響，反應層上的顯色狀況出現(xiàn)差異時，通過測定多個部位后進行演算處理，可以緩和這種差異，結(jié)果可以更準確地定量測定。
工業(yè)實用性采用本發(fā)明的結(jié)構(gòu)，不需要控制液體試樣的浸透和標識試劑的展開，可以更高靈敏度和高性能地進行色譜定量測定。
權(quán)利要求
1.測定液體試樣中所含分析對象物濃度的色譜定量測定裝置，包括色譜試驗片和顯色程度測定手段，色譜試驗片具有多個反應區(qū)域，該反應區(qū)域上保持有能夠與上述分析對象物發(fā)生特異性反應并顯色的捕集試劑，顯色程度測定手段能夠?qū)ι鲜龆鄠€反應區(qū)域中至少2個以上反應區(qū)域的顯色程度進行定量數(shù)值化測定，上述顯色程度測定手段具有對通過上述捕集試劑與上述分析對象物發(fā)生特異性反應顯色的上述顯色程度進行光學測定和圖象測定中至少一種測定的功能。
2.如權(quán)利要求1所述的色譜定量測定裝置，還具備對上述顯色程度的測定結(jié)果進行演算處理，計算出分析對象物的數(shù)值化濃度的演算處理裝置。
3.如權(quán)利要求1所述的色譜定量測定裝置，上述色譜試驗片包括片狀的支持體以及在上述支持體上層疊的反應層，上述反應層具有均勻設置的上述多個反應區(qū)域，上述反應層具有可以被上述液體試樣潤濕的潤濕部件，上述潤濕部件中含有上述捕集試劑，上述捕集試劑與含有上述分析對象物的物質(zhì)發(fā)生顯色反應，上述顯色反應程度測定手段可以測定均勻設置的上述多個反應區(qū)域中的顯色狀態(tài)。
4.如權(quán)利要求1所述的色譜定量測定裝置，上述色譜試驗片包括片狀的支持體、試樣添加層、標識試劑保持層、反應層和吸收層，標識試劑保持層、反應層和吸收層分別設置在上述支持體上，上述反應層具有上述多個反應區(qū)域，上述液體試樣依次通過上述試樣添加層、上述標識試劑保持層、上述反應層、上述吸收層。
5.如權(quán)利要求1所述的色譜定量測定裝置，上述多個反應區(qū)域具有多個點和多個斑點中的至少一個區(qū)域，上述顯色程度測定手段測定上述至少一個區(qū)域的顯色程度。
6.如權(quán)利要求1所述的色譜定量測定裝置，上述色譜試驗片具有反應層，上述多個反應區(qū)域設置在上述反應層的整個區(qū)域。
7.如權(quán)利要求1所述的色譜定量測定裝置，上述色譜試驗片具有反應層，上述反應層具有可以被上述液體試樣潤濕的潤濕部件，上述潤濕部件中含有上述捕集試劑，上述多個反應區(qū)域設置在上述反應層的整個區(qū)域，上述潤濕部件中上述捕集試劑的濃度在上述多個反應區(qū)域的所有區(qū)域均是相同的。
8.如權(quán)利要求1所述的色譜定量測定裝置，上述顯色程度測定手段具有選自讀取上述顯色吸收信號的儀器、讀取上述顯色反射信號的儀器以及具有CCD的圖象解析儀器中的至少一種儀器。
9.如權(quán)利要求1所述的色譜定量測定裝置，上述色譜試驗片還具有標識試劑保持層，上述標識試劑保持層具有能夠與上述分析對象物和上述捕集試劑中至少一種結(jié)合的標識試劑，通過上述捕集試劑與上述標識試劑的結(jié)合反應，發(fā)生上述顯色。
10.如權(quán)利要求1所述的色譜定量測定裝置，上述色譜試驗片具有片狀的支持體以及設置在上述支持體上的多個潤濕部件，上述多個潤濕部件可以被上述液體試樣潤濕，上述多個潤濕部件具有在與上述支持體面平行的方向上形成的試樣添加層、標識試劑保持層、反應層和吸收層，上述反應層具有上述多個反應區(qū)域，上述液體試樣依次從上述試樣添加層、上述標識試劑保持層、上述反應層、上述吸收層中通過。
11.如權(quán)利要求10所述的色譜定量測定裝置，上述多個反應區(qū)域具有多個斑點，上述顯色程度測定手段定量測定上述多個斑點的顯色程度。
12.如權(quán)利要求10所述的色譜定量測定裝置，上述多個反應區(qū)域在上述反應層的整個面上形成，上述顯色程度測定手段定量測定上述反應層的顯色程度。
13.如權(quán)利要求10所述的色譜定量測定裝置，上述多個反應區(qū)域在上述反應層的整個區(qū)域形成，上述捕集試劑的濃度在反應層的整個區(qū)域上是一定的，上述顯色程度測定手段定量測定上述反應層的顯色程度。
14.如權(quán)利要求10所述的色譜定量測定裝置，上述標識試劑保持層具有能夠與上述分析對象物和上述捕集試劑中至少一種結(jié)合的標識試劑，通過上述捕集試劑與上述標識試劑的結(jié)合反應發(fā)生上述顯色。
15.測定液體試樣中所含分析對象物濃度的色譜定量測定方法，包括下述步驟(a)提供具有多個反應區(qū)域的色譜試驗片，該反應區(qū)域上固定有能夠與上述分析對象物特異性結(jié)合的捕集試劑，(b)用含有上述分析對象物的上述液體試樣潤濕上述色譜試驗片，使含有上述分析對象物的物質(zhì)與上述捕集試劑接觸，(c)通過光學測定和圖象測定中至少一種，測定上述多個反應區(qū)域中至少2個區(qū)域的上述捕集試劑與上述分析對象物特異性結(jié)合產(chǎn)生的顯色狀況，然后對該測定結(jié)果進行演算處理，計算出數(shù)值化的濃度。
16.如權(quán)利要求15所述的色譜定量測定方法，上述色譜試驗片具有潤濕部件，上述捕集試劑固定在上述潤濕部件中，在上述步驟(b)中，上述液體試樣從上述潤濕部件中通過時，上述含有分析對象物的物質(zhì)與上述捕集試劑反應并顯色。
17.如權(quán)利要求15所述的色譜定量測定方法，上述多個反應區(qū)域在上述反應層上形成斑點形態(tài)，上述步驟(c)對上述斑點形態(tài)的顯色狀況進行數(shù)值化測定。
18.如權(quán)利要求15所述的色譜定量測定方法，上述多個反應區(qū)域分別含有的上述捕集試劑為同樣的捕集試劑。
19.如權(quán)利要求15所述的色譜定量測定方法，上述色譜試驗片具有反應層，上述多個反應區(qū)域在上述反應層的整個區(qū)域形成。
20.如權(quán)利要求15所述的色譜定量測定方法，上述色譜試驗片具有潤濕部件，上述潤濕部件中固定有上述捕集試劑，上述捕集試劑相對于上述潤濕部件的濃度在所有多個反應區(qū)域中均是相同的。
21.如權(quán)利要求15所述的色譜定量測定方法，上述色譜試驗片具有片狀的支持體以及設置在上述支持體上的多個潤濕部件，上述多個潤濕部件可以被上述液體試樣潤濕，上述多個潤濕部件具有在與上述支持體面平行的方向上形成的試樣添加層、標識試劑保持層、反應層和吸收層，上述反應層具有上述多個反應區(qū)域，上述液體試樣依次從上述試樣添加層、上述標識試劑保持層、上述反應層、上述吸收層中通過，上述標識試劑保持層具有能夠與上述分析對象物和上述捕集試劑中的至少一種結(jié)合的標識試劑，通過上述捕集試劑與標識試劑的結(jié)合反應發(fā)生上述顯色。
22.色譜試驗片，用于通過光學測定和圖象測定中至少一種方法測定液體試樣中所含分析對象物濃度，包括上述液體試樣可以潤濕的潤濕部件、上述潤濕部件中設置的捕集試劑，上述捕集試劑具有能夠與含有上述分析對象物的物質(zhì)特異性反應并顯色的性質(zhì)，上述捕集試劑以均勻的狀態(tài)含在上述潤濕部件中。
23.如權(quán)利要求22所述的色譜試驗片，上述潤濕部件具有試樣添加層、標識試劑保持層、反應層和吸收層，上述反應層具有含上述捕集試劑的多個反應區(qū)域，上述液體試樣可以依次從上述試樣添加層、上述標識試劑保持層、上述反應層、上述吸收層中通過。
24.如權(quán)利要求23所述的色譜試驗片，上述多個反應區(qū)域具有多個斑點，上述多個斑點的顯色程度可以通過上述光學測定和上述圖象測定中的至少一種測定進行定量測定。
25.如權(quán)利要求23所述的色譜試驗片，上述潤濕部件具有反應層，上述多個反應區(qū)域在上述反應層的整個區(qū)域形成。
26.如權(quán)利要求23所述的色譜試驗片，上述捕集試劑相對于上述潤濕部件的濃度在上述多個反應區(qū)域的所有區(qū)域均是一定的。
27.如權(quán)利要求22所述的色譜試驗片，上述多個潤濕部件可以被上述液體試樣潤濕，上述多個潤濕部件具有在與上述支持體面平行的方向上形成的試樣添加層、標識試劑保持層、反應層和吸收層，上述反應層具有上述多個反應區(qū)域，上述液體試樣依次從上述液體試樣添加層、上述標識試劑保持層、上述反應層、上述吸收層中通過，上述標識試劑保持層具有能夠與上述分析對象物和上述捕集試劑中的至少一種結(jié)合的標識試劑，通過上述捕集試劑與標識試劑的結(jié)合反應發(fā)生上述顯色。
28.如權(quán)利要求23所述的色譜試驗片，上述多個反應區(qū)域以均勻分散的狀態(tài)設置在上述反應層上。
全文摘要
可以定量地準確測定液體試樣中含有的分析對象物的濃度。包括色譜試驗片(10)和顯色程度測定手段(11),色譜試驗片具有多個反應區(qū)域(6A,6B),該反應區(qū)域上保持有能夠與上述分析對象物發(fā)生特異性反應并顯色的捕集試劑,顯色程度測定手段能夠?qū)ι鲜龆鄠€反應區(qū)域中至少2個以上反應區(qū)域的顯色程度進行定量的數(shù)值化測定。上述顯色程度測定手段具有對通過上述捕集試劑與上述分析對象物發(fā)生反應顯色的上述顯色程度進行光學測定和圖象測定中至少一種測定的功能。用演算處理裝置(12)對該測定結(jié)果進行演算處理,可以計算出分析對象物的數(shù)值化濃度。
文檔編號G01N33/543GK1304490SQ00800837
公開日2001年7月18日 申請日期2000年5月11日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月13日
發(fā)明者高橋三枝, 灘岡正剛, 田中宏橋 申請人:松下電器產(chǎn)業(yè)株式會社