[0031 ] 2)凍干脂肪酶的制備:將濃度為0.2mol/L pH值為7.5的磷酸鹽緩沖液與脂肪酶混 合，磷酸緩沖溶液與脂肪酶質(zhì)量比為1:3，凍干后，得凍干脂肪酶，備用；
[0032] 3)將步驟2)中所得的凍干脂肪酶置于密閉容器中，與氯化鈉的飽和水溶液氣相平 衡72h以上，并將羧甲基纖維素和步驟1)中所得的脫水有機(jī)溶劑置于另一密閉容器中，與氯 化鈉的飽和水溶液氣相平衡72h以上，使固定化脂肪酶的水活度與飽和鹽溶液的水活度相 同；
[0033] 4)羧甲基纖維素接枝化合物的制備:在反應(yīng)容器中加入步驟3)中所得到的羧甲基 纖維素，油酸甲酯、N，N-二甲基甲酰胺，并加入步驟3)中所得的脂肪酶，反應(yīng)Ih后加入經(jīng)過 活化處理的分子篩，羧甲基纖維素：油酸甲酯:脂肪酶:分子篩:N，N-二甲基甲酰胺：1:3:5:5 :50，60°C，于200r/min，36h反應(yīng)結(jié)束，得羧甲基纖維素接枝化合物；
[0034] 5)制備羧甲基纖維素微囊:將制備所得的羧甲基纖維素接枝化合物經(jīng)甲醇透析， 后經(jīng)冷凍干燥機(jī)干燥，所得到的反應(yīng)物溶解在蒸餾水中，經(jīng)超聲處理，即得羧甲基纖維素微 囊。
[0035] 實(shí)施例4:
[0036] -種可生物降解的羧甲基纖維素微囊的制備方法，包括如下步驟：
[0037] 1)脫水有機(jī)溶劑的制備:將分子篩于180-200°C烘箱內(nèi)活化4h，置于干燥器中冷卻 后，與N，N-二甲基甲酰胺，分子篩與有機(jī)溶劑的質(zhì)量比為1:10-30,加入反應(yīng)容器中，于室溫 下震蕩48h后，濾去分子篩，得脫水有機(jī)溶劑，備用；
[0038] 2)凍干脂肪酶的制備:將濃度為0.2mol/L pH值為7.5的磷酸鹽緩沖液與脂肪酶混 合，磷酸緩沖溶液與脂肪酶質(zhì)量比為1:4，凍干后，得凍干脂肪酶，備用；
[0039] 3)將步驟2)中所得的凍干脂肪酶置于密閉容器中，與氯化鈉的飽和水溶液氣相平 衡72h以上，并將羧甲基纖維素和步驟1)中所得的脫水有機(jī)溶劑置于另一密閉容器中，與氯 化鈉的飽和水溶液氣相平衡72h以上，使固定化脂肪酶的水活度與飽和鹽溶液的水活度相 同；
[0040] 4)羧甲基纖維素接枝化合物的制備:在反應(yīng)容器中加入步驟3)中所得到的羧甲基 纖維素，油酸甲酯、N，N-二甲基甲酰胺，并加入步驟3)中所得的脂肪酶，反應(yīng)Ih后加入經(jīng)過 活化處理的分子篩，羧甲基纖維素：油酸甲酯:脂肪酶:分子篩:N，N-二甲基甲酰胺：1:4:5:5 :50，60°C，于200r/min，36h反應(yīng)結(jié)束，得羧甲基纖維素接枝化合物；
[0041] 5)制備羧甲基纖維素微囊:將制備所得的羧甲基纖維素接枝化合物經(jīng)甲醇透析， 后經(jīng)冷凍干燥機(jī)干燥，所得到的反應(yīng)物溶解在蒸餾水中，經(jīng)超聲處理，即得羧甲基纖維素微 囊。
[0042] 實(shí)施例5:
[0043] -種可生物降解的羧甲基纖維素微囊的制備方法，包括如下步驟：
[0044] 1)脫水有機(jī)溶劑的制備:將分子篩于190°C烘箱內(nèi)活化2h_4h，置于干燥器中冷卻 后，與N，N_二甲基甲酰胺，分子篩與有機(jī)溶劑的質(zhì)量比為1:15,加入反應(yīng)容器中，于室溫下 震蕩48h后，濾去分子篩，得脫水有機(jī)溶劑，備用；
[0045] 2)凍干脂肪酶的制備:將濃度為0.2mol/L pH值為7.5的磷酸鹽緩沖液與脂肪酶混 合，磷酸緩沖溶液與脂肪酶質(zhì)量比為1:4.5，凍干后，得凍干脂肪酶，備用；
[0046] 3)將步驟2)中所得的凍干脂肪酶置于密閉容器中，與氯化鈉的飽和水溶液氣相平 衡72h以上，并將羧甲基纖維素和步驟1)中所得的脫水有機(jī)溶劑置于另一密閉容器中，與氯 化鈉的飽和水溶液氣相平衡72h以上，使固定化脂肪酶的水活度與飽和鹽溶液的水活度相 同；
[0047] 4)羧甲基纖維素接枝化合物的制備:在反應(yīng)容器中加入步驟3)中所得到的羧甲基 纖維素，油酸甲酯、N，N_二甲基甲酰胺，并加入步驟3)中所得的脂肪酶，反應(yīng)Ih后加入經(jīng)過 活化處理的分子篩，羧甲基纖維素：油酸甲酯:脂肪酶:分子篩:N，N-二甲基甲酰胺：1:5:5:5 :50，50°C，于200r/min，36h反應(yīng)結(jié)束，得羧甲基纖維素接枝化合物；
[0048] 5)制備羧甲基纖維素微囊:將制備所得的羧甲基纖維素接枝化合物經(jīng)甲醇透析， 后經(jīng)冷凍干燥機(jī)干燥，所得到的反應(yīng)物溶解在蒸餾水中，經(jīng)超聲處理，即得羧甲基纖維素微 囊。
[0049] 為了進(jìn)一步證實(shí)本發(fā)明的有益效果，特列舉下列實(shí)驗(yàn)例：
[0050] 1、由實(shí)施例1-5所得的產(chǎn)物，分別測定產(chǎn)物的取代度，結(jié)果見表格1 L〇〇52J 表 1
[0053]隨著羧甲基纖維素與油酸甲酯的比值增加，取代度逐漸增加。由于固定化脂肪酶 的專一性，反應(yīng)無副產(chǎn)物產(chǎn)生，相比化學(xué)催化劑，此反應(yīng)步驟少，且不需要高溫即能催化反 應(yīng)。
[0054] 2、由實(shí)施例1-5所得產(chǎn)物，進(jìn)行同樣條件的超聲處理，得到空白的羧甲基纖維素微 囊，具體粒徑見表格2
[0056] 表2
[0057] 空白的羧甲基纖維素微囊可以與化妝品，食品、藥品，農(nóng)藥等行業(yè)，具有緩釋和生 物可降解等功能。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種可生物降解的羧甲基纖維素微囊的制備方法，其特征在于:包括如下步驟： 1) 脫水有機(jī)溶劑的制備:將分子篩于180-200°c烘箱內(nèi)活化2h-4h，置于干燥器中冷卻 后，與N，N-二甲基甲酰胺加入反應(yīng)容器中，分子篩與N，N-二甲基甲酰胺的質(zhì)量比為1:10-30，于室溫下震蕩48h后，濾去分子篩，得脫水有機(jī)溶劑，備用； 2) 凍干脂肪酶的制備:將濃度為0.2mol/L，pH值為7.5的磷酸鹽緩沖液與脂肪酶混合， 磷酸緩沖溶液與脂肪酶質(zhì)量比為1:3-5，凍干后，得凍干脂肪酶，備用； 3) 將步驟2)中所得的凍干脂肪酶置于密閉容器中，與氯化鈉的飽和水溶液氣相平衡 72h以上，并將羧甲基纖維素和步驟1)中所得的脫水有機(jī)溶劑置于另一密閉容器中，與氯化 鈉的飽和水溶液氣相平衡72h以上，使固定化脂肪酶的水活度與飽和鹽溶液的水活度相同； 4) 羧甲基纖維素接枝化合物的制備:在反應(yīng)容器中加入步驟3)中所得到的羧甲基纖維 素，和油酸甲酯、N，N-二甲基甲酰胺，并加入步驟3)中所得的脂肪酶，反應(yīng)lh后加入經(jīng)過活 化處理的分子篩，羧甲基纖維素：油酸甲酯:脂肪酶:分子篩:N，N-二甲基甲酰胺：1:1-5:3-5 :2-5:30-50，40-60°C，于200r/min，36h反應(yīng)結(jié)束，得羧甲基纖維素接枝化合物； 5) 制備羧甲基纖維素微囊:將制備所得的羧甲基纖維素接枝化合物經(jīng)甲醇透析，后經(jīng) 冷凍干燥機(jī)干燥，所得到的反應(yīng)物溶解在蒸餾水中，經(jīng)超聲處理，即得羧甲基纖維素微囊。2. -種如權(quán)利要求1所述的可生物降解的羧甲基纖維素微囊的制備方法所制得的羧甲 基纖維素微囊。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種可生物降解的羧甲基纖維素微囊及其制備方法，具體包括：1)脫水有機(jī)溶劑的制備；2)凍干脂肪酶的制備：3)固定化脂肪酶活化4)羧甲基纖維素接枝化合物的制備，5)制備羧甲基纖維素微囊，本發(fā)明通過固定化脂肪酶合成CMC接枝化合物，克服化學(xué)反應(yīng)步驟繁瑣，反應(yīng)條件高，副產(chǎn)物多，反應(yīng)產(chǎn)物提純難等缺點(diǎn)，用本發(fā)明中的制備方法所制備的CMC接枝化合物用于制備兩性化合物的微囊。
【IPC分類】B01J13/02, C12P19/04
【公開號(hào)】CN105664810
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610124566
【發(fā)明人】顧愛國
【申請(qǐng)人】南京高正農(nóng)用化工有限公司
【公開日】2016年6月15日
【申請(qǐng)日】2016年3月4日