一種改良養(yǎng)殖池塘底泥環(huán)境復(fù)合菌劑及其制作方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及養(yǎng)殖魚塘底泥改良技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種改良養(yǎng)殖池塘底泥環(huán)境復(fù)合菌劑及其制作方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002]目前國內(nèi)以高密度池塘養(yǎng)殖方式為主，這種集約化水產(chǎn)養(yǎng)殖雖然在很大程度上滿足了人們對水產(chǎn)品的需求，但養(yǎng)殖環(huán)境和養(yǎng)殖安全成為消費(fèi)者最為關(guān)注的問題。這種高密度、集約化養(yǎng)殖方式中營養(yǎng)物質(zhì)的利用率偏低，只有少部分飼料被養(yǎng)殖動物吸收利用進(jìn)而形成生物量，大部分則與其排泄物、尸體殘骸等一起通過物理、化學(xué)或生物作用逐漸沉降到池塘底部淤泥中。這種相對封閉的半靜態(tài)養(yǎng)殖環(huán)境，其自凈能力相對薄弱。隨著養(yǎng)殖期的增長，池塘底部有機(jī)物、營養(yǎng)物質(zhì)等大量積累，導(dǎo)致養(yǎng)殖池塘底部缺氧，氨氮、亞硝酸鹽、硫化物等有害物質(zhì)含量急劇上升，進(jìn)而整體水質(zhì)惡化，滋生細(xì)菌病原體，這已經(jīng)成為我國水產(chǎn)養(yǎng)殖發(fā)展過程中必須面對的關(guān)鍵性問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明目的在于提供一種改良養(yǎng)殖池塘底泥環(huán)境復(fù)合菌劑及其制作方法和用途。
[0004]本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
[0005]本發(fā)明的改良養(yǎng)殖池塘底泥環(huán)境復(fù)合菌劑是由菌粉1、菌粉2和菌粉3組成，所述的菌粉I是嗜熱紫色光合細(xì)菌Thermochromatium tepidum ATCC 43061菌粉劑；所述的菌粉2是脫氮硫桿菌Th1alkalivibr1 denitrificans DSM13742菌粉劑；所述的菌粉3是反硝化無色桿菌Achromobacter denitrif icans DSM 30026和木糖氧化無色桿菌反硝化亞種 Achromobacter xylosoxidans subsp.denitrif icans ATCC15173 菌粉劑；菌粉 1、菌粉 2和菌粉3的重量比為1_2:1~2:1-2。
[0006]優(yōu)選:菌粉1、菌粉2和菌粉3的重量比為1:1:1。
[0007]本發(fā)明的改良養(yǎng)殖池塘底泥環(huán)境復(fù)合菌劑的制作方法的具體步驟如下:
[0008]⑴制作菌粉1:
[0009]將對數(shù)生長中期的嗜熱紫色光合細(xì)菌Thermochromatium tepidum ATCC43061菌株培養(yǎng)液1L接入到1000L發(fā)酵罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為:酵母粉3g/L，碳酸氫鈉1.5g/L，乙酸鈉3.5g/L、酸氫二鉀0.8g/L、氯化鈉5.5g/L、六水氯化鎂0.5g/L、氯化銨1.5g/L、乙二胺四乙酸鐵鈉0.8g/L，初始pH7，發(fā)酵溫度48°C、發(fā)酵48h后培養(yǎng)液中菌體密度可達(dá)1.51?2.23X1010CFU/mL ;發(fā)酵液經(jīng)80目過濾器過濾，在濾液中添加濾液重量18%的多孔淀粉、濾液重量15%的麥芽糊精以及濾液重0.15%聚乙烯吡咯酮和0.15%硫脲，經(jīng)噴霧干燥后，添加濾液重量6%磷酸三鈣做填充劑，平板計數(shù)法檢測菌數(shù)，得到活菌數(shù)約為101°?111CFU/g的嗜熱紫色光合細(xì)菌Thermochromatium tepidum ATCC 43061菌粉劑；
[0010]⑵制作菌粉2:
[0011]將對數(shù)生長中期的脫氮硫桿菌Th1alkalivibr1 denitrif icans DSM13742 菌株培養(yǎng)液1L接入到1000L發(fā)酵罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為:五水硫代硫酸鈉5.5g/L、硝酸鉀3g/L、磷酸二氫鉀1.5g/L、碳酸氫鈉2g/L、六水氯化鎂0.8g/L、七水硫酸鐵0.02g/L，初始PH6.9，發(fā)酵溫度29.5°C、發(fā)酵48h后培養(yǎng)液中菌體密度可達(dá)1.72?2.31 X 1010CFU/mL ;發(fā)酵液經(jīng)80目過濾器過濾，在濾液中添加濾液重量18%的多孔淀粉、濾液重量15%的麥芽糊精以及濾液重0.15%聚乙烯吡咯酮和0.15%硫脲，經(jīng)噴霧干燥后，添加濾液重量6%磷酸三鈣做填充劑，平板計數(shù)法檢測菌數(shù)，得到活菌數(shù)約為6.51?8.94X 1010CFU/g的脫氮硫桿菌 Th1alkalivibr1 denitrif icans DSM13742 菌粉劑；
[0012]⑶制作菌粉3:
[0013]分別將對數(shù)生長中期的反硝化無色桿菌Achromobacter denitrif icansDSM30026菌株和木糖氧化無色桿菌反硝化亞種Achromobacter xylosoxidans subsp.denitrificans ATCC 15173菌株的培養(yǎng)液各5L接入到1000L發(fā)酵罐中共培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為:氯化銨1.5g/L、磷酸氫二鉀1.5g/L、氯化鈉0.8g/L、氯化鉀0.5g/L、七水硫酸鎂0.5g/L、硫酸鐵0.002g/L、氯化鈣0.015g/L，微量元素混合溶液lmL，組成為:硼酸55mg/L、七水硫酸猛40mg/L、七水硫酸鋅40mg/L、五水硫酸銅42mg/L、四水鉬酸錢35mg/L、六水硝酸鈷28mg/L ;初始pH7，發(fā)酵溫度26°C、發(fā)酵48h后，培養(yǎng)液中菌體密度維持在
1.52 ?1.85X1010CFU/mL,其中 Achromobacter denitrificans DSM 30026 在 7.97 ?9.14X 109CFU/g 和 Achromobacter xylosoxidans subsp.denitrificans ATCC 15173 在
8.23?9.36X 109CFU/g，發(fā)酵液經(jīng)80目過濾器過濾，在濾液中添加濾液重量18%的多孔淀粉、濾液重量15%的麥芽糊精以及濾液重0.15%聚乙烯吡咯酮和0.15%硫脲，經(jīng)噴霧干燥后，添加濾液重量6%磷酸三鈣做填充劑，平板計數(shù)法檢測菌數(shù)，菌粉中反硝化無色桿菌Achromobacter denitrificans DSM 30026 在 5.64 ?6.85 X 10lclCFU/g 和木糖氧化無色桿菌反硝化亞種Achromobacter xylosoxidans subsp.denitrificans ATCC 15173在6.32 ?
7.16X1010CFU/g ；
[0014](4)制作復(fù)合菌劑:
[0015]將菌粉1、菌粉2和菌粉3按配比混合，并經(jīng)真空包裝即成為改良養(yǎng)殖魚塘底泥環(huán)境復(fù)合菌劑。
[0016]步驟(I)中，所述的嗜熱紫色光合細(xì)菌Thermochromatium tepidum ATCC43061菌株來自于美國典型微生物菌種保藏中心，菌種編號ATCC 43061。
[0017]步驟(2)中，所述的脫氮硫桿菌Th1alkalivibr1 denitrificans DSM13742 菌株來自于德國微生物菌種保藏中心，菌種編號DSMl3742。
[0018]步驟(3)中，所述的反硝化無色桿菌Achromobacter denitrificans DSM 30026菌株來自于德國微生物菌種保藏中心，菌種編號DSM 30026 ;所述的木糖氧化無色桿菌反硝化亞種Achromobacter xylosoxidans subsp.denitrificans ATCC 15173菌株來自于美國典型微生物菌種保藏中心，菌種編號ATCC 15173。
[0019]本發(fā)明的復(fù)合菌劑可用于改良養(yǎng)殖池塘底泥環(huán)境，用法為:全塘直接均勻拋灑，
I?1.5米水深每畝用1200克，水深、老化池塘和污染嚴(yán)重的池塘用1500?2000克，每10天施用一次，有殺菌作用的化學(xué)藥品和抗生素藥物在使用該復(fù)合菌劑前五天、后五天內(nèi)均不能使用。
[0020]本發(fā)明的積極效果如下:
[0021]本發(fā)明通過從健康養(yǎng)殖池塘底泥中篩選分離多種高效降污活菌菌種，組成改良養(yǎng)殖池塘底泥復(fù)合菌劑，本發(fā)明的復(fù)合菌劑可深入滲透到池塘底部，能快速高效降解池塘底部沉積的殘餌、排泄物、動植物尸體及有機(jī)碎肩，顯著降低池底氨氮、亞硝酸鹽及硫化物等有害物質(zhì)，進(jìn)而達(dá)到改善養(yǎng)殖池塘底泥環(huán)境、凈化水質(zhì)的目的。
【具體實施方式】
[0022]下面的實施例是對本發(fā)明的進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0023]本發(fā)明提供了一種改良養(yǎng)殖魚塘底泥環(huán)境復(fù)合菌劑及其制作方法。該微生物菌劑包括菌粉1、菌粉2和菌粉3，其制作方法為:
[0024]制作菌粉1:將對數(shù)生長中期的嗜熱紫色光合細(xì)菌ATCC 43061菌株(Thermochromatium tepidum ATCC 43061，購買自美國典型微生物菌種保藏中心)培養(yǎng)液1L接入到1000L發(fā)酵罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為:酵母粉3(g/L，下文未特殊說明的均為g/L)，碳酸氫鈉1.5，乙酸鈉3.5、酸氫二鉀0.8、氯化鈉5.5、六水氯化鎂0.5、氯化錢1.5、乙二胺四乙酸鐵鈉0.8，初始pH7，發(fā)酵溫度48°C、發(fā)酵48h后培養(yǎng)液中菌體密度可達(dá)1.51?
2.23X1010CFU/mL ;發(fā)酵液經(jīng)80目過濾器過濾，在濾液中添加濾液重量18%的多孔淀粉、濾液重量15%的麥芽糊精以及濾液重0.15%聚乙烯吡咯酮和0.15%硫脲，經(jīng)噴霧干燥后，添加濾液重量6%磷酸三鈣做填充劑，平板計數(shù)法檢測菌數(shù)，得到活菌數(shù)約為101°?111CFU/g的嗜熱紫色光合細(xì)菌Thermochromatium tepidum ATCC 43061菌粉劑。
[0025]制作菌粉2:將對數(shù)生長中期的脫氮硫桿菌DSM13742菌株(Th1alkalivibr1denitrificans DSM13742，購買自德國微生物菌種保藏中心)培養(yǎng)液1L接入到1000L發(fā)酵罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為:五水硫代硫酸鈉5.5(g/L，下文未特殊說明的均為g/L)、硝酸鉀3、磷酸二氫鉀1.5、碳酸氫鈉2、六水氯化鎂0.8、七水硫酸鐵0.02，初始pH6.9，發(fā)酵溫度29.5°C、發(fā)酵48h后培養(yǎng)液中菌體密度可達(dá)1.72?2.31 X 1010CFU/mL ;發(fā)酵液經(jīng)80目過濾器過濾，在濾液中添加濾液重量18%的多孔淀粉、濾液重量15%的麥芽糊精以及濾液重0.15%聚乙烯吡咯酮和0.15%硫脲，經(jīng)噴霧干燥后，添加濾液重量6%磷酸三鈣做填充劑，平板計數(shù)法檢測菌數(shù)，得到活菌數(shù)約為6.51?8.94X1010CFU/g的脫氮硫桿菌Th1alkalivibr1 denitrificans DSM13742 菌粉劑。
[0026]制作菌粉3:分別將對數(shù)生長中期的反硝化無色桿菌DSM 30026菌株(Achromobacter denitrificans DSM 30026，購買自德國微生物菌種保藏中心)和木糖氧化無色桿菌反硝化亞種 ATCC