一種基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于提取工藝技術(shù)領(lǐng)域，公開(kāi)了一種基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法。本發(fā)明方法包括以下步驟：將含水的深度共熔溶劑與槐米，攪拌加熱進(jìn)行萃取，得到萃取液，分離純化，得到蘆丁。本發(fā)明方法利用氯化膽堿和三甘醇混合得到深度共熔溶劑(DESs)進(jìn)行萃取，由于DESs對(duì)天然產(chǎn)物槐米細(xì)胞壁的劇烈破壞，充分釋放了目標(biāo)產(chǎn)物蘆丁，顯著提高了蘆丁在溶劑中的溶解度，萃取效率較使用傳統(tǒng)萃取溶劑顯著提高。本發(fā)明所用深度共熔溶劑制備簡(jiǎn)單，具有不易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性高及熔點(diǎn)低等優(yōu)點(diǎn)，可以在一定程度上降低由于溶劑揮發(fā)造成的大氣的污染和對(duì)生產(chǎn)人員造成的人體傷害。本發(fā)明方法具有操作工藝簡(jiǎn)單，條件溫和，環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于提取工藝技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆 丁的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蘆丁(Rutin)又名蕓香苷，3'，4'，5,7-四羥基黃酮-3-蕓香糖苷，結(jié)構(gòu)式如下：
[0004] 蘆丁是一種天然黃酮類(lèi)化合物，維生素 P的主要組分。槐米原產(chǎn)于我國(guó)北部，華南 及西南地區(qū)亦產(chǎn)。河北省、山西省及北京市產(chǎn)量較豐富，江蘇主產(chǎn)于鎮(zhèn)江、蘇州、南京、徐州 等地。蘆丁具有降低毛細(xì)血管通透性，維持血管正常滲透壓，保持或恢復(fù)毛細(xì)血管正常彈性 的功能以及較強(qiáng)的藥理活性。隨著我國(guó)人口結(jié)構(gòu)趨向老齡化，以蘆丁為原料合成的預(yù)防和 治療心腦血管疾病的藥物如蘆丁片、羥基蘆丁等的需求量逐年增加。
[0005] 傳統(tǒng)的提取工藝如熱醇提取法、熱水提取法、冷堿水浸提法或微波輔助萃取法等 多存在提取效率低、環(huán)境污染大、生產(chǎn)成本高、工藝流程長(zhǎng)、提取純度低、熾灼殘?jiān)叩热?點(diǎn)。深度共熔溶劑可強(qiáng)烈破壞細(xì)胞壁，充分地釋放目標(biāo)產(chǎn)物，顯著提高蘆丁的溶解度，從而 實(shí)現(xiàn)天然產(chǎn)物的高效萃取。本專(zhuān)利擬利用制備的深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁，隨后采 用大孔樹(shù)脂吸附法并依據(jù)蘆丁自身特性對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分離、提純及精制。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種基于深度 共恪溶劑(Deep Eutectic Solvents，DESs)從槐米中萃取蘆丁的方法。
[0007] 本發(fā)明方法中，由于DESs對(duì)天然產(chǎn)物槐米細(xì)胞壁的劇烈破壞，充分釋放了目標(biāo)產(chǎn) 物蘆丁，顯著提高了蘆丁在溶劑中的溶解度，因此可以應(yīng)用DESs高效萃取蘆丁，同時(shí)具備操 作工藝簡(jiǎn)單，條件溫和，環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)。
[0008] 本發(fā)明的目的通過(guò)下述方案實(shí)現(xiàn)：
[0009] 一種基于深度共恪溶劑(Deep Eutectic Solvents，DESs)從槐米中萃取蘆丁的方 法，包括以下步驟:將含水的深度共熔溶劑與槐米，攪拌加熱進(jìn)行萃取，得到萃取液，分離純 化，得到蘆丁。
[0010]所述的深度共熔溶劑為氯化膽堿和三甘醇的共熔混合物（ChCl/triethylene glycol)〇
[0011] 所述深度共熔溶劑中，所述氯化膽堿和三甘醇的摩爾比優(yōu)選為1:3~1:5,更優(yōu)選 為 1:4。
[0012] 所述的深度共熔溶劑通過(guò)將氯化膽堿和三甘醇混合加熱至均一溶液，優(yōu)選加熱至 形成透亮、均一、穩(wěn)定的溶液。
[0013] 所述含水的水量?jī)?yōu)選為反應(yīng)體系10~30% (v/v)，更優(yōu)選為20% (v/v)。
[0014] 所述萃取的條件優(yōu)選為加熱至60~70°C下攪拌15~25min，更優(yōu)選為加熱至65°C 下攪拌20min。
[0015] 所述攪拌的速率優(yōu)選為240rpm。
[001 ?]所述深度共恪溶劑與槐米的固液比優(yōu)選為8~15mL/g，更優(yōu)選為10mL/g。
[0017] 所述槐米優(yōu)選粉碎后再用于萃取，更優(yōu)選晾曬后再粉碎，所述粉碎后優(yōu)選過(guò)60目 篩。
[0018] 所述分離得到萃取液可通過(guò)過(guò)濾或離心等方式進(jìn)行，優(yōu)選使用離心的方式，如在 高速冷凍離心機(jī)中離心。
[0019] 所述分離純化可通過(guò)層析柱實(shí)現(xiàn)，優(yōu)選包括以下步驟:濕法裝柱，將萃取液上樣 后，依次以水、70 %乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，旋蒸濃縮，調(diào)酸，冷卻靜置析出，得到蘆 丁結(jié)晶。
[0020] 所述調(diào)酸指調(diào)節(jié)pH為酸性，優(yōu)選為pH=3.0。
[0021] 所得蘆丁結(jié)晶可通過(guò)重結(jié)晶的方法進(jìn)行純化，包括以下步驟:將結(jié)晶加熱溶解于 堿液中，如石灰水，過(guò)濾后，濾液調(diào)酸，冷卻靜置，重新結(jié)晶，過(guò)濾，洗滌，得到精制蘆丁。
[0022] 本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，具有如下的優(yōu)點(diǎn)及有益效果：
[0023] (1)本發(fā)明使用氯化膽堿和三甘醇混合得到深度共熔溶劑進(jìn)行萃取，蘆丁萃取效 率較使用傳統(tǒng)萃取溶劑顯著提高。
[0024] (2)本發(fā)明所用深度共熔溶劑制備簡(jiǎn)單，而且不易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性高及熔點(diǎn)低等優(yōu) 點(diǎn)，可以在一定程度上降低由于溶劑揮發(fā)造成的大氣的污染和對(duì)生產(chǎn)人員造成的人體傷 害。
[0025] (3)本發(fā)明實(shí)施工藝簡(jiǎn)便易行，操作復(fù)雜度低，可以保證蘆丁穩(wěn)定的生產(chǎn)率。
【附圖說(shuō)明】
[0026]圖1為本發(fā)明實(shí)施例得到的蘆丁核磁共振氫譜圖。
[0027]圖2為本發(fā)明實(shí)施例純化蘆丁的HPLC譜圖，其中，峰值a為蘆丁，峰值b和峰值c為雜 質(zhì)。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限 于此，對(duì)于未特別注明的工藝參數(shù)，可參照常規(guī)技術(shù)進(jìn)行。
[0029] 下列實(shí)施例中使用的試劑均可從商業(yè)渠道購(gòu)買(mǎi)得到。
[0030] 實(shí)施例1
[0031] (1)深度共熔溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。將純度為99%的氯化膽堿 (ChCl)在50°C真空干燥箱內(nèi)干燥48h后，按照1:4的摩爾比與三甘醇(triethylene glycol) 混合，盛放在50mL事先放有磁子的圓底燒瓶中，塞上塞子，封孔膜封口，放置在100°C油浴鍋 內(nèi)，5 00r pm轉(zhuǎn)速下攪拌加熱約2~4 h，直至形成穩(wěn)定、均一、透亮的溶液。冷卻至室溫，在7 0 °C 的真空干燥箱內(nèi)干燥48h后轉(zhuǎn)移至干燥器內(nèi)密封保存。
[0032] (2)槐米預(yù)處理。將所購(gòu)槐米晾曬48h，中藥粉碎機(jī)磨碎打粉，過(guò)60目篩?；泵准?xì)粉 裝袋室溫干燥器內(nèi)保存。
[0033] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比10mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系20%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于55°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min?；旌衔锸褂门_(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為255mg/g。
[0034] (4)蘆丁的分離提純。將10mL萃取液以3BV/h的速率上樣，以500mL去離子水以3BV/ h的速率洗脫，再以70%的乙醇溶液以4.5BV/h的速率洗脫，并收集乙醇洗脫液，將洗脫液旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)至10mL，用稀鹽酸調(diào)至pH=3.0。將濃縮液放置在4°C環(huán)境中，靜置18h，使蘆丁充分結(jié) 晶析出，過(guò)濾并冷水洗滌后得粗品蘆丁。粗品蘆丁以石灰水加熱溶解，砂芯漏斗過(guò)濾，濾液 滴加酸液保溫，冷卻靜置，使其重新結(jié)晶析出沉淀，過(guò)濾，冷水洗滌，凍干，得到精制蘆丁，核 磁共振氫譜圖見(jiàn)圖1，HPLC譜圖見(jiàn)圖2。
[0035] 實(shí)施例2
[0036] (1)深度共熔溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。將純度為99%的氯化膽堿 (ChCl)在50°C真空干燥箱內(nèi)干燥48h后，按照1:3的摩爾比與三甘醇(triethylene glycol) 混合，盛放在50mL事先放有磁子的圓底燒瓶中，塞上塞子，封孔膜封口，放置在100°C油浴鍋 內(nèi)，5 00r pm轉(zhuǎn)速下攪拌加熱約2~4 h，直至形成穩(wěn)定、均一、透亮的溶液。冷卻至室溫，在7 0 °C 的真空干燥箱內(nèi)干燥48h后轉(zhuǎn)移至干燥器內(nèi)密封保存。
[0037] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例1。
[0038] (3)蘆丁的萃取。同實(shí)施例1。在此條件下萃取的蘆丁量為245mg/g。
[0039] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例1。
[0040] 實(shí)施例3
[0041 ] (1)深度共恪溶劑(〇1<：1/1：1^61:11716116 817(3〇1)的制備。將純度為99%的氯化膽堿 (ChCl)在50°C真空干燥箱內(nèi)干燥48h后，按照1:5的摩爾比與三甘醇(triethylene glycol) 混合，盛放在50mL事先放有磁子的圓底燒瓶中，塞上塞子，封孔膜封口，放置在100°C油浴鍋 內(nèi)，5 00r pm轉(zhuǎn)速下攪拌加熱約2~4 h，直至形成穩(wěn)定、均一、透亮的溶液。冷卻至室溫，在7 0 °C 的真空干燥箱內(nèi)干燥48h后轉(zhuǎn)移至干燥器內(nèi)密封保存。
[0042] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例1。
[0043] (3)蘆丁的萃取。同實(shí)施例1。在此條件下萃取的蘆丁量為244mg/g。
[0044] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例1。
[0045] 實(shí)施例4
[0046] (1)深度共恪溶劑(〇1<：1/1：1^61:11716116 817(3〇1)的制備。將純度為99%的氯化膽堿 (ChCl)在50°C真空干燥箱內(nèi)干燥48h后，按照1:4的摩爾比與三甘醇(triethylene glycol) 混合，盛放在50mL事先放有磁子的圓底燒瓶中，塞上塞子，封孔膜封口，放置在100°C油浴鍋 內(nèi)，5 00r pm轉(zhuǎn)速下攪拌加熱約2~4 h，直至形成穩(wěn)定、均一、透亮的溶液。冷卻至室溫，在7 0 °C 的真空干燥箱內(nèi)干燥48h后轉(zhuǎn)移至干燥器內(nèi)密封保存。
[0047] (2)槐米預(yù)處理。將所購(gòu)槐米晾曬48h，中藥粉碎機(jī)磨碎打粉，過(guò)60目篩?；泵准?xì)粉 裝袋室溫干燥器內(nèi)保存。
[0048] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比10mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系1〇%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于65°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min?；旌衔锸褂门_(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為246mg/g。
[0049] (4)蘆丁的分離提純。將10mL萃取液以3BV/h的速率上樣，以500mL去離子水以3BV/ h的速率洗脫，再以70%的乙醇溶液以4.5BV/h的速率洗脫，并收集乙醇洗脫液，將洗脫液旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)至10mL，用稀鹽酸調(diào)至pH=3.0。將濃縮液放置在4°C環(huán)境中，靜置18h，使蘆丁充分結(jié) 晶析出，過(guò)濾并冷水洗滌后得粗品蘆丁。粗品蘆丁以石灰水加熱溶解，砂芯漏斗過(guò)濾，濾液 滴加酸液保溫，冷卻靜置，使其重新結(jié)晶析出沉淀，過(guò)濾，冷水洗滌，凍干，得到精制蘆丁。
[0050] 實(shí)施例5
[0051] (1)深度共恪溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。同實(shí)施例4。
[0052] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例4。
[0053] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比10mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系20%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于65°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min?；旌衔锸褂门_(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為263mg/g。
[0054] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例4。
[0055] 實(shí)施例6
[0056] (1)深度共恪溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。同實(shí)施例4
[0057] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例4。
[0058] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比10mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系30%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于55°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min。混合物使用臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為253mg/g。
[0059] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例4。
[0060] 實(shí)施例7
[0061 ] (1)深度共恪溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。將純度為99%的氯化膽堿 (ChCl)在50°C真空干燥箱內(nèi)干燥48h后，按照1:4的摩爾比與三甘醇(triethylene glycol) 混合，盛放在50mL事先放有磁子的圓底燒瓶中，塞上塞子，封孔膜封口，放置在100°C油浴鍋 內(nèi)，5 00r pm轉(zhuǎn)速下攪拌加熱約2~4 h，直至形成穩(wěn)定、均一、透亮的溶液。冷卻至室溫，在7 0 °C 的真空干燥箱內(nèi)干燥48h后轉(zhuǎn)移至干燥器內(nèi)密封保存。
[0062] (2)槐米預(yù)處理。將所購(gòu)槐米晾曬48h，中藥粉碎機(jī)磨碎打粉，過(guò)60目篩?；泵准?xì)粉 裝袋室溫干燥器內(nèi)保存。
[0063] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比10mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系20%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于60°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min。混合物使用臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為242mg/g。
[0064] (4)蘆丁的分離提純。將10mL萃取液以3BV/h的速率上樣，以500mL去離子水以3BV/ h的速率洗脫，再以70%的乙醇溶液以4.5BV/h的速率洗脫，并收集乙醇洗脫液，將洗脫液旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)至10mL，用稀鹽酸調(diào)至pH=3.0。將濃縮液放置在4°C環(huán)境中，靜置18h，使蘆丁充分結(jié) 晶析出，過(guò)濾并冷水洗滌后得粗品蘆丁。粗品蘆丁以石灰水加熱溶解，砂芯漏斗過(guò)濾，濾液 滴加酸液保溫，冷卻靜置，使其重新結(jié)晶析出沉淀，過(guò)濾，冷水洗滌，凍干，得到精制蘆丁。
[0065] 實(shí)施例8
[0066] (1)深度共恪溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。同實(shí)施例7。
[0067] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例7。
[0068] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比10mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系20%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于65°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min?；旌衔锸褂门_(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為257mg/g。
[0069] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例7。
[0070] 實(shí)施例9
[0071] (1)深度共恪溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。同實(shí)施例7。
[0072] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例7。
[0073] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比10mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系20%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于70°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min。混合物使用臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為240mg/g。
[0074] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例7。
[0075] 實(shí)施例10
[0076] (1)深度共熔溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。將純度為99%的氯化膽堿 (ChCl)在50°C真空干燥箱內(nèi)干燥48h后，按照1:4的摩爾比與三甘醇(triethylene glycol) 混合，盛放在50mL事先放有磁子的圓底燒瓶中，塞上塞子，封孔膜封口，放置在100°C油浴鍋 內(nèi)，5 00r pm轉(zhuǎn)速下攪拌加熱約2~4 h，直至形成穩(wěn)定、均一、透亮的溶液。冷卻至室溫，在7 0 °C 的真空干燥箱內(nèi)干燥48h后轉(zhuǎn)移至干燥器內(nèi)密封保存。
[0077] (2)槐米預(yù)處理。將所購(gòu)槐米晾曬48h，中藥粉碎機(jī)磨碎打粉，過(guò)60目篩。槐米細(xì)粉 裝袋室溫干燥器內(nèi)保存。
[0078] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比10mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系20%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于65°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱15min?；旌衔锸褂门_(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為240mg/g。
[0079] (4)蘆丁的分離提純。將10mL萃取液以3BV/h的速率上樣，以500mL去離子水以3BV/ h的速率洗脫，再以70%的乙醇溶液以4.5BV/h的速率洗脫，并收集乙醇洗脫液，將洗脫液旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)至10mL，用稀鹽酸調(diào)至pH=3.0。將濃縮液放置在4°C環(huán)境中，靜置18h，使蘆丁充分結(jié) 晶析出，過(guò)濾并冷水洗滌后得粗品蘆丁。粗品蘆丁以石灰水加熱溶解，砂芯漏斗過(guò)濾，濾液 滴加酸液保溫，冷卻靜置，使其重新結(jié)晶析出沉淀，過(guò)濾，冷水洗滌，凍干，得到精制蘆丁。
[0080] 實(shí)施例11
[0081] (1)深度共恪溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。同實(shí)施例10。
[0082] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例10。
[0083] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比1 OmL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系20%的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于65°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min?；旌衔锸褂门_(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為245mg/g。
[0084] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例10。
[0085] 實(shí)施例12
[0086] (1)深度共恪溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。同實(shí)施例10。
[0087] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例10。
[0088] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比1 OmL/ g加入步驟（1)制備的DE S，加入 20 % (v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于65 °C恒溫水浴鍋、240rpm 速下磁子攪拌加熱25min?；旌衔锸褂门_(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離固體顆 粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為238mg/g。
[0089] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例10。
[0090] 實(shí)施例13
[0091] (1)深度共熔溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。將純度為99%的氯化膽堿 (ChCl)在50°C真空干燥箱內(nèi)干燥48h后，按照1:4的摩爾比與三甘醇(triethylene glycol) 混合，盛放在50mL事先放有磁子的圓底燒瓶中，塞上塞子，封孔膜封口，放置在100°C油浴鍋 內(nèi)，5 00r pm轉(zhuǎn)速下攪拌加熱約2~4 h，直至形成穩(wěn)定、均一、透亮的溶液。冷卻至室溫，在7 0 °C 的真空干燥箱內(nèi)干燥48h后轉(zhuǎn)移至干燥器內(nèi)密封保存。
[0092] (2)槐米預(yù)處理。將所購(gòu)槐米晾曬48h，中藥粉碎機(jī)磨碎打粉，過(guò)60目篩。槐米細(xì)粉 裝袋室溫干燥器內(nèi)保存。
[0093] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比8mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反應(yīng) 體系20% (v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于65°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min。混合物使用臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為275mg/g。
[0094] (4)蘆丁的分離提純。將10mL萃取液以3BV/h的速率上樣，以500mL去離子水以3BV/ h的速率洗脫，再以70%的乙醇溶液以4.5BV/h的速率洗脫，并收集乙醇洗脫液，將洗脫液旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)至10mL，用稀鹽酸調(diào)至pH=3.0。將濃縮液放置在4°C環(huán)境中，靜置18h，使蘆丁充分結(jié) 晶析出，過(guò)濾并冷水洗滌后得粗品蘆丁。粗品蘆丁以石灰水加熱溶解，砂芯漏斗過(guò)濾，濾液 滴加酸液保溫，冷卻靜置，使其重新結(jié)晶析出沉淀，過(guò)濾，冷水洗滌，凍干，得到精制蘆丁。
[0095] 實(shí)施例14
[0096] (1)深度共恪溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。同實(shí)施例13。
[0097] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例13。
[0098] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比10mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系20%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于65°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min?；旌衔锸褂门_(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為278mg/g。
[0099] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例13。
[0100] 實(shí)施例15
[0101] (1)深度共恪溶劑(ChCl/triethylene glycol)的制備。同實(shí)施例13。
[0102] (2)槐米預(yù)處理。同實(shí)施例13。
[0103] (3)蘆丁的萃取。稱(chēng)量槐米細(xì)粉，以固液比15mL/g加入步驟（1)制備的DES，加入反 應(yīng)體系20%(v/v)的水并攪拌均勻。蓋上塞子，封口膜封口。將圓底燒瓶于65°C恒溫水浴鍋、 240rpm速下磁子攪拌加熱20min?；旌衔锸褂门_(tái)式高速冷凍離心機(jī)12000g下離心10min分離 固體顆粒，得到萃取液。在此條件下萃取的蘆丁量為278mg/g。
[0104] (4)蘆丁的分離提純。同實(shí)施例13。
[0105] 上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的 限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化， 均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于包括以下步驟:將含 水的深度共熔溶劑與槐米，攪拌加熱進(jìn)行萃取，得到萃取液，分離純化，得到蘆丁。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于:所 述的深度共熔溶劑為氯化膽堿和三甘醇的共熔混合物。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于:所 述深度共熔溶劑中，所述氯化膽堿和三甘醇的摩爾比為1:3~1:5。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于:所 述深度共熔溶劑中，所述氯化膽堿和三甘醇的摩爾比為1:4。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于:所 述深度共熔溶劑通過(guò)將氯化膽堿和三甘醇混合加熱至均一溶液。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于:所 述含水的水量為反應(yīng)體系10~30v/v%。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于:所 述含水的水量為反應(yīng)體系20v/v%。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于:所 述萃取的條件為加熱至60~70 °C下攪拌15~25min。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于:所 述深度共熔溶劑與槐米的固液比為8~15mL/g。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于深度共熔溶劑從槐米中萃取蘆丁的方法，其特征在于： 所述萃取的條件為加熱至65°C下攪拌20min;所述深度共恪溶劑與槐米的固液比為10mL/g。
【文檔編號(hào)】C07H1/08GK106046082SQ201610486997
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年6月24日
【發(fā)明人】婁文勇, 趙冰怡, 宗敏華, 陳慶生, 華洋林, 楊繼國(guó)
【申請(qǐng)人】華南理工大學(xué)