一種提取南酸棗苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥有效成分提取領(lǐng)域，涉及一種提取南酸棗苷的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 南酸賽苷（Choerospondin)是一種黃酮苷類化合物，主要從漆樹科 (Anacardiaceae)南酸賽 Choerospondias axillaris(Roxb.)Burtt et Hill 樹皮中分離 得到。藥理研宄表明，南酸棗苷具有抗菌作用。對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌及 硝酸鹽陰性桿菌均有抑制作用；還具有醛糖還原酶抑制作用。南酸棗苷分子式為C 21H22Oltl, 分子量為434. 4,結(jié)構(gòu)式為：
[0003] 目前對南酸棗苷的研宄較少，通過文獻(xiàn)檢索，國內(nèi)尚未見南酸棗苷用于制備抗菌 藥物或保健品。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種提取南酸棗苷的方法。
[0005] 本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 南酸棗苷的結(jié)構(gòu)分析：MSm/z :668 (43)，607 (74)，432 (9)，389 (16)，371 (60)，301 (9)， 250(12)，236(50)，207(60)，196(21)，193 (35)，166 (65)。
[0006] 南酸棗苷的制備方法，其特征在于包括以下步驟： (1) 以南酸棗樹皮為原料，粉碎，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑進(jìn)行超臨界 CO2萃?。?(2) 萃取物采用中性氧化鎂柱層析進(jìn)行純化，石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，收集洗 脫液減壓濃縮、低溫干燥得到粗品； (3) 粗品采用制備型高效液相色譜分離得到南酸棗苷。
[0007] 步驟（1)中所述CO2流量為2. 5-4. Oml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的 10-16%〇
[0008] 步驟（2)中所述中性氧化鎂為200-300目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5_7bar， 柱徑高比為1:10-12,石油醚-甲醇體積比為20:1-1:1。
[0009] 步驟（3)中所述制備型高效液相色譜中流動(dòng)相為35%的乙腈溶液，檢測波長為 254nm〇
[0010] 所述南酸棗苷在制備抗菌藥物、抗菌前體或先導(dǎo)化合物方面的用途，所述菌為：金 黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌。
[0011] 本發(fā)明用于制備抗菌藥物時(shí)，其口服或非口服給藥均是安全有效的?？诜o藥可 以制成任何常規(guī)劑型，如：散劑、顆粒、膠囊、片、口崩片、滴丸、軟膠囊等；非口服給藥，可制 成各種常規(guī)劑型，如注射液等。
[0012] 本發(fā)明用于制備抗菌藥物時(shí)，在其口服配方中添加腸吸收促進(jìn)劑，包含中鏈脂肪 酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。
[0013] 本發(fā)明用于制備抗菌藥物時(shí)，其輔料及制備方法可選用任何藥學(xué)可接受的形式。
[0014]
【具體實(shí)施方式】
[0015] 下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
[0016] 實(shí)施例1 : 取南酸棗樹皮Ikg粉碎成粗粉，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑進(jìn)行超臨界 CO2萃取，CO 2流量為3. 5ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的12%，萃取物采用中性 氧化鎂柱層析進(jìn)行純化，中性氧化鎂為200目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為6. 5bar，柱徑 高比為1:12,石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，石油醚-甲醇體積比為20:1-1:1收集洗脫 液減壓濃縮、低溫干燥得到粗品，用甲醇溶解，注入制備型高效液相色譜儀，35%乙腈溶液為 流動(dòng)相，紫外在線檢測，檢測波長為254nm，收集高濃度流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、低溫干燥即得 南酸棗苷，含量為97. 1%。
[0017] 實(shí)施例2: 取南酸棗樹皮Ikg粉碎成粗粉，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑進(jìn)行超臨界 CO2萃取，CO 2流量為3. 0ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的15%，萃取物采用中性 氧化鎂柱層析進(jìn)行純化，中性氧化鎂為200目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為6bar，柱徑高 比為1:12,石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，石油醚-甲醇體積比為20:1-1:1收集洗脫液 減壓濃縮、低溫干燥得到粗品，用甲醇溶解，注入制備型高效液相色譜儀，35%乙腈溶液為流 動(dòng)相，紫外在線檢測，檢測波長為254nm，收集高濃度流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、低溫干燥即得南 酸棗苷，含量為96. 5%。
[0018] 實(shí)施例3: 取南酸棗樹皮Ikg粉碎成粗粉，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑進(jìn)行超臨界 CO2萃取，CO 2流量為4. 0ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的16%，萃取物采用中性 氧化鎂柱層析進(jìn)行純化，中性氧化鎂為200目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為7bar，柱徑高 比為1:12,石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，石油醚-甲醇體積比為20:1-1:1收集洗脫液 減壓濃縮、低溫干燥得到粗品，用甲醇溶解，注入制備型高效液相色譜儀，35%乙腈溶液為流 動(dòng)相，紫外在線檢測，檢測波長為254nm，收集高濃度流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、低溫干燥即得南 酸棗苷，含量為96. 8%。
[0019] 實(shí)施例5: 取南酸棗樹皮Ikg粉碎成粗粉，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑進(jìn)行超臨界 CO2萃取，CO 2流量為2. 5ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的10%，萃取物采用中性 氧化鎂柱層析進(jìn)行純化，中性氧化鎂為300目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5bar，柱徑高 比為1:10,石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，石油醚-甲醇體積比為20:1-1:1收集洗脫液 減壓濃縮、低溫干燥得到粗品，用甲醇溶解，注入制備型高效液相色譜儀，35%乙腈溶液為流 動(dòng)相，紫外在線檢測，檢測波長為254nm，收集高濃度流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮、低溫干燥即得南 酸棗苷，含量為96. 5%。
[0020] 為了更好的理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用紫丹參甲素的藥理實(shí)驗(yàn)及藥理來說明其 在制藥和保健品中的用途。
[0021] 實(shí)施例6: 1、受試提取物：南酸棗苷提取物 (1)性狀：無色結(jié)晶，味苦。
[0022] (2)規(guī)格：含南酸棗苷彡90%。
[0023] (3)溶劑：乙醇或甲醇。
[0024] (4)儲(chǔ)存條件：4°C，密封保存。
[0025] 2、抗菌作用 (1)實(shí)驗(yàn)材料：供試菌種，金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌由南京大學(xué)生命科 學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供，LS-Sll全自動(dòng)立式電熱壓力蒸汽滅菌器，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療 設(shè)備廠；GZX-9246MBE電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠。
[0026] (2)試驗(yàn)方法和結(jié)果： MIC測定：從生長良好的培養(yǎng)基中，用無菌環(huán)取2-3個(gè)菌落的細(xì)菌團(tuán)塊加入到Iml無菌 水中，混勻后加入到液體培養(yǎng)基中備用。菌液濃度約為1.0 X l〇5/ml。取紫外線消毒后的96 孔板，沒空加入190 μ 1菌液，然后每孔加入10 μ 1藥液，樣品終極濃度分別為0. 125、0. 25、 0. 5、0. 75、1. 0、I. 5、2. 0、2. 5mg/ml，每一濃度做3個(gè)復(fù)孔，設(shè)對照組3個(gè)復(fù)孔，未加藥液。細(xì) 菌37°C培養(yǎng)18-24小時(shí)，以濁度為指標(biāo)檢查試管中有無細(xì)菌生長，已不顯示濁度，肉眼觀察 未見菌體生長的藥物濃度為MIC。結(jié)果如表1。
[0027] 衷1 南酸車符的抗茴賣騎結(jié)里
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 結(jié)構(gòu)式如下所示的南酸棗苷在制備抗菌藥物中的應(yīng)用。2. 如權(quán)利要求1所述南酸棗苷的制備方法，其特征在于包括以下步驟： (1) 以南酸棗樹皮為原料，粉碎，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑進(jìn)行超臨界 C02萃取； (2) 萃取物采用中性氧化鎂柱層析進(jìn)行純化，石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，收集洗 脫液減壓濃縮、低溫干燥得到粗品； (3) 粗品采用制備型高效液相色譜分離得到南酸棗苷。3. 如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（1)中所述C0 2流量為2. 5-4.Oml/ g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的10-16%。4. 如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（2)中所述中性氧化鎂為200-300 目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5-7bar，柱徑高比為1:10-12,石油醚-甲醇體積比為 20:1-1:1。5. 如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（3)中所述制備型高效液相色譜中 流動(dòng)相為35%的乙腈溶液，檢測波長為254nm。6. 如權(quán)利要求1所述南酸棗苷的應(yīng)用，其特征在于在制備抗菌藥物、抗菌前體或先導(dǎo) 化合物方面的用途。7. 如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其中所述菌為：金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿 菌。8. 包含權(quán)利要求1所述南酸棗苷和藥學(xué)上可接受載體的藥物組合物。
【專利摘要】本發(fā)明一種南酸棗苷的制備方法及其在抗菌藥物中的應(yīng)用。以南酸棗樹皮為原料，粉碎，加入超臨界萃取釜中，乙酸乙酯為夾帶劑進(jìn)行超臨界CO2萃?。惠腿∥锊捎弥行匝趸V柱層析進(jìn)行純化，石油醚-甲醇混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮、低溫干燥；制備型高效液相色譜分離得到南酸棗苷。藥理實(shí)驗(yàn)表明，南酸棗苷對多種細(xì)菌具有一定的抗菌活性。
【IPC分類】C07H15/26, C07H1/08, A61P31/04, A61K31/7048
【公開號】CN104910220
【申請?zhí)枴緾N201510264217
【發(fā)明人】劉東鋒, 楊成東
【申請人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年9月16日
【申請日】2015年5月22日