一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種產(chǎn)孢培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。
【背景技術】
[0002]目前，應用發(fā)酵技術生產(chǎn)木霉孢子已有大量研宄，液體發(fā)酵和固體發(fā)酵是常用的兩種生產(chǎn)方法，為了滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中作物病害的防治要求，提高木霉孢子的產(chǎn)量是一個非常關鍵指標，它直接影響到木霉制劑對作物病害防治效果的好壞，關系到該木霉菌株的生產(chǎn)應用價值。目前，木霉孢子產(chǎn)量不高是制約木霉制劑在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)推廣應用的重要因素。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明是要解決目前制約真菌木霉制劑生產(chǎn)應用的重要因素產(chǎn)孢量低的問題，提供一種真菌木霉高效產(chǎn)孢的固體培養(yǎng)基。
[0004]本發(fā)明木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基由培養(yǎng)基質、礦質元素和滅菌水組成，所述培養(yǎng)基質由玉米碎粒、稻殼和麥麩組成，所述礦質元素為MgSO4，礦質元素與培養(yǎng)基質的質量比為I: 80?133，培養(yǎng)基質的質量與滅菌水的體積比為2.86?6.67g: lmL。
[0005]所述培養(yǎng)基質中玉米碎粒、稻殼和麥麩的質量比為2: 3:1。
[0006]利用上述木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基培養(yǎng)木霉的方法為:在三角瓶中裝入木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，裝入的培養(yǎng)基的體積為三角瓶容積的8%，然后向培養(yǎng)基中接種木霉菌液，接種量為35%，木霉菌液濃度為16孢子/mL，培養(yǎng)溫度為28°C，培養(yǎng)時間為120?170h。
[0007]所述木霉菌為綠色木霉。
[0008]本發(fā)明的有益效果:
[0009]1、本發(fā)明的培養(yǎng)基成分簡單，成本低，制備方法簡易；本發(fā)明培養(yǎng)基用于綠色木霉尚效廣抱。
[0010]2、使用本發(fā)明的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法可以顯著提高綠色木霉M1M2的產(chǎn)孢量，可達到6.5X108?1.8X109cfu/g。使用玉米、稻殼和麥麩三種配料的單一物質產(chǎn)孢量約為
1.5X108?4.lX108cfu/go本發(fā)明將三種配料按比例混合后，產(chǎn)孢量比原單一物質產(chǎn)孢量相比提高了 333.3%?339%，產(chǎn)生了預料不到的技術效果。
【具體實施方式】
[0011]本發(fā)明技術方案不局限于以下所列舉【具體實施方式】，還包括各【具體實施方式】間的任意組合。
[0012]【具體實施方式】一:本實施方式木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基由培養(yǎng)基質、礦質元素和滅菌水組成，所述培養(yǎng)基質由玉米碎粒、稻殼和麥麩組成，所述礦質元素為MgSO4,礦質元素與培養(yǎng)基質的質量比為1: 80?133，培養(yǎng)基質的質量與滅菌水的體積比為2.86?6.67g:1mL0
[0013]所述木霉菌為綠色木霉(Trichoderma viride)MlM2，該菌株已于申請日前在中文文獻《生防綠色木霉M1M2的生物學特性及抑菌研宄》(黑龍江農(nóng)業(yè)科學，2014年04期)中公開，可由文章作者處獲得。
[0014]【具體實施方式】二:本實施方式與【具體實施方式】一不同的是:所述培養(yǎng)基質中玉米碎粒、稻殼和麥麩的質量比為2: 3:1。其它與【具體實施方式】一相同。
[0015]【具體實施方式】三:本實施方式與【具體實施方式】一或二不同的是:所述礦質元素與培養(yǎng)基質的質量比為1: 90?120。其它與【具體實施方式】一或二相同。
[0016]【具體實施方式】四:本實施方式與【具體實施方式】一或二不同的是:所述礦質元素與培養(yǎng)基質的質量比為1: 100?110。其它與【具體實施方式】一或二相同。
[0017]【具體實施方式】五:本實施方式與【具體實施方式】一至四之一不同的是:所述培養(yǎng)基質的質量與滅菌水的體積比為3?6g: lmL。其它與【具體實施方式】一至四之一相同。
[0018]【具體實施方式】六:本實施方式與【具體實施方式】一至四之一不同的是:所述培養(yǎng)基質的質量與滅菌水的體積比為4?5g: lmL。其它與【具體實施方式】一至四之一相同。
[0019]【具體實施方式】七:本實施方式與【具體實施方式】一至六之一不同的是:所述培養(yǎng)基在121°C高壓蒸汽下滅菌，滅菌時間為30min。其它與【具體實施方式】一至六之一相同。
[0020]【具體實施方式】八:本實施方式與【具體實施方式】一至七之一不同的是:所述玉米碎粒、稻殼和麥麩取自農(nóng)產(chǎn)品加工下腳料，玉米碎粒、稻殼和麥麩使用前需進行粉碎，然后過40目篩，備用。其它與【具體實施方式】一至七之一相同。
[0021]【具體實施方式】九:本實施方式利用木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基培養(yǎng)木霉的方法為:在三角瓶中裝入木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，裝入的培養(yǎng)基的體積為三角瓶容積的8 %，然后向培養(yǎng)基中接種木霉菌液，接種量為35%，木霉菌液濃度為16個孢子/mL，培養(yǎng)溫度為28°C，培養(yǎng)時間為120?170h。
[0022]【具體實施方式】十:本實施方式與【具體實施方式】九不同的是:所述培養(yǎng)時間為130?160h。其它與【具體實施方式】九相同。
[0023]【具體實施方式】十一:本實施方式與【具體實施方式】九不同的是:所述培養(yǎng)時間為140?150h。其它與【具體實施方式】九相同。
[0024]實施例1:
[0025]本實施例木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基由20g培養(yǎng)基質、0.2gMgSOjP 5mL滅菌水組成，所述培養(yǎng)基質中玉米碎粒、稻殼和麥麩的質量比為2: 3:1。
[0026]所述培養(yǎng)基在121°C高壓蒸汽下滅菌，滅菌時間為30min。
[0027]所述玉米碎粒、稻殼和麥麩取自農(nóng)產(chǎn)品加工下腳料，玉米碎粒、稻殼和麥麩使用前需進行粉碎，然后過40目篩，備用。
[0028]利用上述木霉菌高效產(chǎn)孢的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)木霉的方法為:在250mL三角瓶中裝入20g木霉菌高效產(chǎn)孢的固體培養(yǎng)基，然后向培養(yǎng)基中接種木霉菌液，接種量為35 %，木霉菌液濃度為16個孢子/mL。培養(yǎng)溫度為28°C，培養(yǎng)時間為150h。
[0029]所述木霉菌為綠色木霉(Trichoderma viride)MlM2，該菌株已于申請日前在中文文獻《生防綠色木霉M1M2的生物學特性及抑菌研宄》(黑龍江農(nóng)業(yè)科學，2014年04期)中公開，可由文章作者處獲得。
[0030]本實施例的培養(yǎng)基成分簡單，成本低，制備方法簡易；使用本實施例的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法可以顯著提高綠色木霉M1M2的產(chǎn)孢量，可達到1.2X109cfu/g。
【主權項】
1.一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，其特征在于該產(chǎn)孢培養(yǎng)基由培養(yǎng)基質、礦質元素和滅菌水組成，所述培養(yǎng)基質由玉米碎粒、稻殼和麥麩組成，所述礦質元素為MgSO4,礦質元素與培養(yǎng)基質的質量比為1: 80?133，培養(yǎng)基質的質量與滅菌水的體積比為2.86?6.67g:1mL0
2.根據(jù)權利要求1所述的一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，其特征在于所述木霉菌為綠色木霉O
3.根據(jù)權利要求1或2所述的一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基質中玉米碎粒、稻殼和麥麩的質量比為2: 3:1。
4.根據(jù)權利要求3所述的一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，其特征在于所述礦質元素與培養(yǎng)基質的質量比為1: 90?120。
5.根據(jù)權利要求3所述的一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，其特征在于所述礦質元素與培養(yǎng)基質的質量比為1: 100?110。
6.根據(jù)權利要求4所述的一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基質的質量與滅菌水的體積比為3?6g: lmL。
7.根據(jù)權利要求4所述的一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基質的質量與滅菌水的體積比為4?5g: lmL。
8.根據(jù)權利要求6所述的一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基在121°C高壓蒸汽下滅菌，滅菌時間為30min。
9.根據(jù)權利要求8所述的一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，其特征在于所述玉米碎粒、稻殼和麥麩取自農(nóng)產(chǎn)品加工下腳料，玉米碎粒、稻殼和麥麩使用前需進行粉碎，然后過40目篩，備用。
10.利用權利要求1所述的木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基培養(yǎng)木霉的方法，其特征在于該方法為:在三角瓶中裝入木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，裝入的培養(yǎng)基的體積為三角瓶容積的8%，然后向培養(yǎng)基中接種木霉菌液，接種量為35%，木霉菌液濃度為16個孢子/mL，培養(yǎng)溫度為28°C，培養(yǎng)時間為120?170ho
【專利摘要】一種木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，涉及一種產(chǎn)孢培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。本發(fā)明是要解決目前制約真菌木霉制劑生產(chǎn)應用的重要因素產(chǎn)孢量低的問題。該產(chǎn)孢培養(yǎng)基由培養(yǎng)基質、礦質元素和滅菌水組成，所述培養(yǎng)基質由玉米碎粒、稻殼和麥麩組成。培養(yǎng)木霉的方法為：在三角瓶中裝入木霉菌高效產(chǎn)孢培養(yǎng)基，裝入的培養(yǎng)基的體積為三角瓶容積的8％，然后向培養(yǎng)基中接種木霉菌液，接種量為35％，木霉菌液濃度為106個孢子/mL，培養(yǎng)溫度為28℃。本發(fā)明的培養(yǎng)基成分簡單，成本低，制備方法簡易，可以顯著提高綠色木霉M1M2的產(chǎn)孢量，可達到6.5×108～1.8×109cfu/g。本發(fā)明用于綠色木霉高效產(chǎn)孢。
【IPC分類】C12N1-14, C12R1-885
【公開號】CN104830700
【申請?zhí)枴緾N201510226581
【發(fā)明人】王芊, 王春, 曹旭, 孟慶林, 石鳳梅, 馬立功, 劉佳, 李易初, 張勻華, 劉宇, 蘇保華, 羅嬋, 徐充
【申請人】黑龍江省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年5月6日