一種丙烯酸樹脂降解菌及其篩選富集方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于微生物篩選技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種丙烯酸樹脂降解菌及其篩選富集方法。
【背景技術(shù)】
[0002]丙烯酸樹脂是一種重要的化工原料，廣泛應(yīng)用于油漆、涂料、皮革、紡織、印刷等工業(yè)。目前，我國(guó)丙烯酸樹脂的總產(chǎn)量約120萬t，按照每生產(chǎn)It丙烯酸產(chǎn)生的廢水為1.2t計(jì)算，每年我國(guó)丙烯酸及其酯類廢水總量在140萬t左右。丙烯酸廢水組分復(fù)雜、污染物濃度高、環(huán)境危害性強(qiáng)，這使得丙烯酸及其酯類廢水的處理十分困難。
[0003]當(dāng)前，丙烯酸及其酯類廢水的主要處理方法是焚燒法，具有技術(shù)成熟，占地面積小、處理效率高、可以回收焚燒過程中產(chǎn)生的熱量等優(yōu)點(diǎn)，但是焚燒法不可避免的存在費(fèi)用較高，且具有二次污染的問題，因此人們開發(fā)并研宄了一些新的方法。催化濕式氧化法處理丙烯酸樹脂具有去除效率高、能耗低、二次污染小的優(yōu)點(diǎn)，是較為清潔的處理技術(shù)。但是，也不可避免的存在運(yùn)行成本高、控制難度大以及重金屬催化劑的選用帶來的潛在的重金屬污染問題；超臨界水氧化法處理丙烯酸及其酯類廢水具有反應(yīng)時(shí)間短、污染物去除徹底、占地面積小、清潔環(huán)保等優(yōu)勢(shì)，是一種值得進(jìn)一步開發(fā)利用的物化處理技術(shù)。但是高濃度溶解氧、高溫高壓帶來的設(shè)備腐蝕和無機(jī)鹽鹽沉積是該技術(shù)面臨的主要問題；纖維吸附法、Fenton氧化法、光電子波分解法降解丙烯酸及其酯類廢水均具有反應(yīng)條件溫和、反應(yīng)速度較快、去除效率較高的特點(diǎn)，但是由于目前深入研宄較少，且處理成本較高，尚未能應(yīng)用到實(shí)際工程處理領(lǐng)域。利用生物法處理丙烯酸及其酯類廢水具有能耗低、反應(yīng)條件溫和且效率較高，厭氧過程還可以回收沼氣，更加符合國(guó)家節(jié)能減排、可持續(xù)發(fā)展的戰(zhàn)略路線。研宄具有專屬適應(yīng)性微生物的篩選馴化培養(yǎng)，對(duì)于提高生物反應(yīng)系統(tǒng)的耐受性和穩(wěn)定性，提高降解效率具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的首要目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)與不足，提供一種丙烯酸樹脂降解菌。
[0005]本發(fā)明的另一目的在于提供所述的丙烯酸樹脂降解菌的篩選富集方法，該方法有效的提高了丙烯酸及其酯類廢水的降解效率。
[0006]本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種丙烯酸樹脂降解菌，該菌株為纖維纖維微菌(cellulosimicrobium cellulans)XR002，保藏起始日期為2015年I月4日，保藏編號(hào)為CGMCC N0.10274 ;保藏單位為中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC);保藏單位地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)。
[0007]所述的丙烯酸樹脂降解菌的篩選富集方法，包括如下步驟:
[0008](I)制備菌液:將汽車涂裝廢水排污口污泥加入無菌水中，汽車涂裝廢水排污口污泥的濃度為0.08g/mL，搖床避光培養(yǎng)24h，得到菌懸液；在滅菌后的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中接種菌懸液，菌懸液的接種量為無機(jī)鹽培養(yǎng)基體積的5%，搖床避光培養(yǎng)7d，得到菌液；
[0009](2)制備丙烯酸樹脂降解菌系:將葡萄糖加入步驟(I)的菌液中，按菌液體積的5%接種丙烯酸廢水，搖床避光進(jìn)行傳代培養(yǎng)，得到丙烯酸樹脂降解菌系培養(yǎng)液；每次傳代培養(yǎng)時(shí)菌液中葡萄糖的量均比上一代減少1/5，丙烯酸廢水的量均比上一代增加，每次增加量為菌液體積的5%，每次傳代培養(yǎng)7d，傳代培養(yǎng)多五代，最后一代培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基中不再添加葡萄糖；
[0010](3)篩選丙烯酸樹脂降解菌系:往無機(jī)鹽培養(yǎng)基中加入瓊脂，滅菌后，待無機(jī)鹽培養(yǎng)基凝固后加入經(jīng)梯度稀釋的步驟(2)的丙烯酸樹脂降解菌系培養(yǎng)液中并涂布均勻，30°C培養(yǎng)7d，挑取周圍有透明圈的菌落，重復(fù)進(jìn)行接種培養(yǎng)并劃線分離，得到純化的丙烯酸樹脂降解囷系；
[0011](4)對(duì)純化的丙烯酸樹脂降解菌系進(jìn)行復(fù)篩:將步驟(3)純化的丙烯酸樹脂降解菌系接種于LB培養(yǎng)基中，長(zhǎng)出菌落后，制備成濃度為OD_= I的菌液，備用；
[0012]步驟(I)中，
[0013]所述的搖床避光條件為30°C、130r/min ;
[0014]所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基的組分為:NaCl0.5g，NH4NO30.4g，KH2PO4L 0g, K2HPO4L 0g,酵母浸粉0.2g,微量元素液4mL，蒸餾水lOOOmL，調(diào)pH值為7.2 ；
[0015]所述的微量元素液的組成為:MgS042.0g, CuSO40.5g，MnSO40.5g，F(xiàn)eSO4.7H200.5g，CaCl20.5g，蒸飽水 500mLo
[0016]步驟⑵中，
[0017]所述的丙烯酸廢水的濃度為200mg/L ;所述的葡萄糖的重量為無機(jī)鹽培養(yǎng)基重量的 0.5% ；
[0018]所述的搖床避光的條件為于30°C、130r/min培養(yǎng)7天；
[0019]所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基的組分為:NaCl0.5g，NH4NO30.4g，KH2PO4L 0g, K2HPO4L 0g,酵母浸粉0.2g,微量元素液4mL，蒸餾水lOOOmL，調(diào)pH值為7.2 ；
[0020]所述的微量元素液的組成為:MgS042.0g, CuSO40.5g，MnSO40.5g，F(xiàn)eSO4.7H200.5g，CaCl20.5g，蒸飽水 500mLo
[0021]步驟(3)中，
[0022]所述的瓊脂的重量為無機(jī)鹽培養(yǎng)基重量的2% ；
[0023]所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基與步驟(2)的丙烯酸樹脂降解菌系培養(yǎng)液的體積比為100:1 ；
[0024]所述的梯度稀釋為將步驟(2)的丙烯酸樹脂降解菌系培養(yǎng)液按照體積分別稀釋103、104、105倍；
[0025]所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基的組分為:NaCl0.5g，NH4NO30.4g，KH2PO4L 0g, K2HPO4L 0g,酵母浸粉0.2g,微量元素液4mL，蒸餾水lOOOmL，調(diào)pH值為7.2 ；
[0026]所述的微量元素液的組成為:MgS042.0g, CuSO40.5g，MnSO40.5g，F(xiàn)eSO4.7H200.5g，CaCl20.5g，蒸飽水 500mLo
[0027]步驟⑷中，
[0028]所述的LB平板培養(yǎng)基的組成為:蛋白胨2.5g，牛肉膏0.75g，NaCl 1.25g，蒸餾水250mLo
[0029]本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果:本發(fā)明采用生物法處理丙烯酸及其酯類廢水，具有能耗低、反應(yīng)條件溫和且效率較高。本發(fā)明具有專屬適應(yīng)性微生物的篩選馴化培養(yǎng)，降解菌株對(duì)丙烯酸樹脂的降解效率可以達(dá)到90%以上，對(duì)于提高生物反應(yīng)系統(tǒng)的耐受性和穩(wěn)定性、提高降解效率具有重要意義。
【具體實(shí)施方式】
[0030]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0031]實(shí)施例1
[0032](I)菌源的采集與菌懸液的制備:采集某東風(fēng)悅達(dá)起亞汽車油漆廠排污口土壤，將污泥置于4°C冰箱中保存?zhèn)溆胐f20g采集回來的土壤置于250mL無菌水中，30°C振蕩12小時(shí)，得到菌懸液；
[0033](2)取5mL步驟(I)的菌懸液注入盛有10mL無機(jī)鹽培養(yǎng)基的錐形瓶中，放置于