一種南瓜葉多糖與多肽及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提取領域，尤其涉及一種南瓜葉多糖和多肽及其制備方法。
【背景技術】
[0002]南瓜(Cucurbita moschata Duch)又名麥瓜、倭瓜、金冬瓜等，屬葫蘆科南瓜屬一年生草本植物，是我國的傳統(tǒng)蔬菜之一，南瓜是我國重要的經(jīng)濟作物，年產(chǎn)量達410萬t，位居世界第一。南瓜果莖葉花的資源量非常巨大，國內(nèi)外對南瓜果的營養(yǎng)成分和保健作用進行了大量的研宄和報道，但對南瓜莖葉花的研宄報道卻很少目前，南瓜莖葉花除了很少量被食用外，大部分資源被丟棄。
[0003]國內(nèi)外對南瓜葉的營養(yǎng)保健和開發(fā)利用還處于起步階段。如對南瓜葉黃酮、多酚和蛋白質(zhì)的提取和活性有少量報道。南瓜干葉蛋白質(zhì)含量高達30%以上，氨基酸種類全，營養(yǎng)價值高。但是由于南瓜葉纖維含量高，一般的堿水加熱法提取率很低。多糖在南瓜葉中含量較高，但是至今未見研宄報道，利用南瓜葉蛋白質(zhì)制備南瓜葉多肽也未見研宄。
[0004]多糖能降血脂、降血糖、抗?jié)?、抗癌防癌、清除自由基等。現(xiàn)已采用多糖制造出了治療糖尿病、抗艾滋病病毒的新藥，具有顯著的療效；近年來還發(fā)現(xiàn)，多糖的糖鏈在動物細胞分裂、分化、生長和抗衰老方面有決定性作用，多糖已然顯示出愈發(fā)廣泛的應用前景。多肽是直接從植物中提取或者經(jīng)蛋白質(zhì)水解而得，它是十分重要的生物活性成分，其吸收機制優(yōu)于氨基酸，并具有氨基酸不可比擬的生理功能。生物活性肽比游離氨基酸的滲透壓低，吸收率高，食后不會引起腹瀉等不良反應；生物活性肽又具較低抗原性，不會引起過敏反應。此外由于生物活性肽結構的多樣性和復雜性決定了其在細胞生理和調(diào)節(jié)代謝功能有活性作用，大量的研宄證實了這些多肽還具有潛在的降血壓、降血脂、抗氧化、抗病毒、抑菌、促進生長、鎮(zhèn)靜、降低膽固醇、促進礦物質(zhì)吸收、改善物質(zhì)代謝、增強機體免疫能力等功能，這些功能是原蛋白質(zhì)和其組成單一氨基酸所不具備的。
[0005]目前多糖的一般制備工藝為提取脫蛋白濃縮干燥。多糖的提取方法以傳統(tǒng)溶劑加熱提取法為主，此外，超聲波輔助提取、微波輔助提取、酶解提取法也日益為人們重視。脫蛋白法以傳統(tǒng)的Sevage法為主，需使用大量有毒溶劑氯仿和正丁醇，將蛋白質(zhì)破壞。近年來應用各種蛋白酶水解蛋白的方法漸成趨勢。在提取、脫蛋白、濃縮、干燥各環(huán)節(jié)中，高溫和有機溶劑的使用導致活性成分易被破壞、耗能高。由于含有高分子成分，經(jīng)常會出現(xiàn)二次不溶于水的現(xiàn)象，妨礙了人體對多糖的有效吸收。
[0006]在此背景下，引入新的酶和膜技術，提高酶解提取的效率，避免高溫、避免有機溶劑的大量使用，是技術發(fā)展的方向和市場的迫切需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了解決上述問題，本發(fā)明的主要目的在于提供一種南瓜葉多糖與多肽，以南瓜葉為原料，通過酶解、膜技術得到南瓜葉多糖，同時得到南瓜葉多肽，所得多糖和多肽易溶于水、分子量適中，具有一定抗氧化活性，并且此發(fā)明在實現(xiàn)過程中具有投資少、工藝流程短、無污染的特點。
[0008]本發(fā)明的另一目的在于提供一種南瓜葉多糖與多肽的制備方法。
[0009]本發(fā)明的目的及解決其技術問題是采用以下技術方案來實現(xiàn)的。依據(jù)本發(fā)明提出的南瓜葉多糖與多肽，其制備原料為南瓜葉片。
[0010]本發(fā)明的目的及解決其技術問題還可采用以下技術措施進一步實現(xiàn)。
[0011]較優(yōu)地，前述的南瓜葉多糖與多肽，其包括以下含量的成分:南瓜葉多糖:總糖含量彡85%，水分< 6.0% ;南瓜葉多肽:多肽含量彡70%，水分< 6.0%。
[0012]較優(yōu)地，前述的南瓜葉多糖和多肽，其制備方法包括以下步驟:
[0013]a.前處理階段:將采摘于每年南瓜結果后至10月份的新鮮南瓜葉經(jīng)過去雜處理后，進行干燥處理；將干燥的南瓜葉用機械進行適當粉碎后，置于干燥陰涼處備用；
[0014]b.提取階段:將步驟a中南瓜葉粉，與1:5?1:15的水混合，經(jīng)組織破碎機勻漿l-3min后，再以料液比1:20?1:60，超聲波功率200-600W，加酶量纖維素酶量2000?4500U/g南瓜葉干粉(酶活200U/mg以上)，木糖酶300?1200U/g南瓜葉干粉(酶活60U/mg以上)，pH值4.5-6.5、在40?60°C條件下酶解提取0.5?Ih ;其中，纖維素酶量比木糖酶量倍數(shù)為2?10。
[0015]c.過濾除雜階段:將步驟b中提取得到的混合液經(jīng)兩種不同截留分子量的超濾膜過濾除雜脫色，第一次所用膜截留分子量15000?25000，得南瓜葉多糖提取液；第二次所用膜截留分子量7500?8500，第二次超濾截留液作為制備南瓜葉多肽的原料，加酶量木瓜蛋白酶60?200U/g，其南瓜葉干粉酶活20U/mg以上，胃蛋白酶40?120U/g南瓜葉干粉酶活100U/mg以上，pH值4.5-7.0，在40?60°C條件下酶解提取2?6h，得蛋白酶解液；其中，木瓜蛋白酶量比胃蛋白酶量倍數(shù)為1.5?6。
[0016]d.濃縮干燥階段:將步驟c中多糖提取液和蛋白酶解液，分別經(jīng)過納濾膜進行濃縮，其中膜的截留分子量為150?250，出口壓力0.2?0.3Mpa，濃縮液密度為1.10?
1.15g/mL。濃縮液再經(jīng)真空冷凍干燥得南瓜葉多糖和南瓜葉多肽，真空冷凍干燥條件是液體降溫至-20?-40°C，干燥室真空為0.08?0.1MPa,物料厚度5?15mm，加熱板溫度20?35°C，冷阱溫度-30?_60°C，經(jīng)過冷凍干燥后，得到南瓜葉多糖和南瓜葉多肽。
[0017]本發(fā)明的目的及解決其技術問題還采用以下技術方案來實現(xiàn)。依據(jù)本發(fā)明提出的前述的一種南瓜葉多糖與多肽的制備方法，其包括以下步驟:
[0018]a.前處理階段:將南瓜葉經(jīng)過去雜處理后，進行干燥處理；將干燥的南瓜葉用機械進行適當粉碎后，置于干燥陰涼處備用；
[0019]b.提取階段:將步驟a中南瓜葉粉，與一定量的水混合，經(jīng)組織破碎機勻漿后，在一定料液比，一定溫度條件下，加入一定量纖維素酶、木糖酶提取一定的時間；
[0020]c.過濾除雜階段:將步驟b中提取得到的混合液經(jīng)兩種不同截留分子量的超濾膜過濾除雜脫色，得南瓜葉多糖提取液；第二次超濾截留液作為制備南瓜葉多肽的原料，加入一定量木瓜蛋白酶和胃蛋白酶，在一定料液比，一定溫度條件下，酶解一定時間，得蛋白酶解液；
[0021]d.濃縮干燥階段:將步驟c中南瓜葉多糖提取液經(jīng)納濾膜濃縮，冷凍干燥得南瓜葉多糖；蛋白酶解液經(jīng)納濾膜濃縮，冷凍干燥得南瓜葉多肽。
[0022]本發(fā)明的目的及解決其技術問題還可采用以下技術措施進一步實現(xiàn)。
[0023]作為優(yōu)選，前述的一種南瓜葉多糖與多肽的制備方法，步驟a中所述的南瓜葉，是南瓜結果后至10月底前采摘的南瓜葉，無霉變，干枯，發(fā)黃，經(jīng)太陽暴曬或高溫瞬間殺毒干燥；將干燥的南瓜葉用機械進行適當粉碎后，置于干燥陰涼處備用。
[0024]作為優(yōu)選，前述的一種南瓜葉多糖與多肽的制備方法，步驟b中所述的南瓜葉粉，加水至料液比1:5?1:15，勻漿l_3min，再以料液比1:20?1:60，超聲波功率200-600W，加酶量纖維素酶量2000?4500U/g南瓜葉干粉(酶活200U/mg以上)，木糖酶300?1200U/g南瓜葉干粉(酶活60U/mg以上)，pH值4.5-6.5、在40?60°C條件下酶解提取0.5?lh。
[0025]作為優(yōu)選，前述的一種南瓜葉多糖與多肽的制備方法，步驟c中提取的提取液利用超濾膜過濾兩次，第一次所用膜截留分子量20000，第二次所用膜截留分子量8000。
[0026]作為優(yōu)選，前述的一種南瓜葉多糖與多肽的制備方法，步驟c中的第二次超濾截留液加水至料液比1:20?1:60，加酶量木瓜蛋白酶60?200U/g南瓜葉干粉(酶活20U/mg以上)，胃蛋白酶40?120U/g南瓜葉干粉(酶活100U/mg以上)，pH值4.5-7.0，在40?60°C條件下酶解提取2?6h。
[0027]作為優(yōu)選，前述的一種南瓜葉多糖與多肽的制備方法，步驟b中纖維素酶量比木糖酶量倍數(shù)為2?10 ;步驟c中木瓜蛋白酶量比胃蛋白酶量倍數(shù)為1.5?6。
[0028]作為優(yōu)選，前述的一種南瓜葉多糖與多肽的制備方法，步驟d中所述多糖提取液和蛋白酶解液，分別經(jīng)過納濾膜進行濃縮，其中膜的截留分子量為150?250，出口壓力0.2?0.3Mpa，濃縮液密度為1.10?1.15g/mL。濃縮液再經(jīng)真空冷凍干燥得南瓜葉多糖和南瓜葉多肽，真空冷凍干燥條件是液體降溫至-20?-40°C，干燥室真空為0.08?0.1MPa,物料厚度5?15mm，加熱板溫度20?35°C，冷阱溫度_30?_60°C。
[0029]借由上述技術方案，本發(fā)明至少具有下列優(yōu)點及有益效果:
[0030]本發(fā)明利用南瓜葉高效提取南瓜葉多糖和多肽，引入酶解和膜技術進行提取、分離、濃縮、脫色等工序，可提高產(chǎn)品質(zhì)量和得率，所需時間短，提取過程溫度低，避免了高溫加熱對有效成分的破壞，另外，通過本發(fā)明提取出的南瓜葉多糖和多肽，無二次不溶于水的現(xiàn)象。
[0031]本發(fā)明所得南瓜葉多糖和多肽屬于天然保健品制劑，安全無毒，適用于醫(yī)藥及保健品、食品抗氧化劑、飼料添加劑等行業(yè)，實現(xiàn)了南瓜葉資源的綜合利用。
[0032]上述說明僅是本發(fā)明技術方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術手段，而可依照說明書的內(nèi)容予以實施，并且為了讓本發(fā)明的上述和其他目的、特征和優(yōu)點能夠更明顯易懂，以下特舉較佳實施例，并配合附圖，詳細說明如下。
【附圖說明】
[0033]圖1為本發(fā)明一實施例中南瓜葉多糖與多肽的制備方法流程圖。
【具體實施方式】
:
[0034]為了能夠更清楚了解本發(fā)明的