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亞胺還原酶或其突變體以及在合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物中的應(yīng)用,合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物的方法

文檔序號(hào):40575175發(fā)布日期:2025-01-03 11:40閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種亞胺還原酶突變體,其特征在于:它是以來源于streptomyces?ipomoeae的亞胺還原酶ir-f7為親本,發(fā)生突變得到的突變體,所述突變體具有如下之一或具有任一序列中至少90%同一性且具有亞胺還原酶活性的氨基酸序列:

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的亞胺還原酶突變體,其特征在于:它是以f7-i124v為親本,發(fā)生突變得到的突變體,所述突變體具有如下序列或具有如下序列至少90%同一性且具有亞胺還原酶活性的氨基酸序列:

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的亞胺還原酶突變體,其特征在于:它是以f7-i124v-p128c為親本,發(fā)生突變得到的突變體,所述突變體具有如下之一或具有任一序列中至少90%同一性且具有亞胺還原酶活性的氨基酸序列:

4.一種dna分子,其特征在于:所述dna分子編碼權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的亞胺還原酶突變體。

5.一種表達(dá)載體,其特征在于:所述表達(dá)載體含有權(quán)利要求4所述的dna分子。

6.一種宿主細(xì)胞,其特征在于:所述宿主細(xì)胞含有權(quán)利要求5所述的表達(dá)載體。

7.亞胺還原酶ir-f7、權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的亞胺還原酶突變體、亞胺還原酶ir-b8或其突變體、權(quán)利要求4所述dna分子、權(quán)利要求5所述表達(dá)載體、或權(quán)利要求6所述宿主細(xì)胞在合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物中的應(yīng)用;所述的亞胺還原酶ir-b8來源于labilithrix?luteola,氨基酸序列如seq?id?no.2所示,所述的多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物的結(jié)構(gòu)式如式i或式ⅱ所示:

8.一種合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物的方法,其特征在于:它是以式?;蚴舰榈孜铮?jīng)亞胺還原酶ir-f7或權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的亞胺還原酶突變體、亞胺還原酶ir-b8或其突變體為生物催化劑,合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物,其合成路線如通式i或通式ⅱ所示:

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物的方法,其特征在于:反應(yīng)體系中含有輔酶、葡萄糖和葡萄糖脫氫酶。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物的方法,其特征在于:所述的輔酶為nadp+鹽。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及亞胺還原酶或其突變體以及在合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物中的應(yīng)用,合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物的方法,屬于酶工程領(lǐng)域。本發(fā)明提供了一種亞胺還原酶IR?F7突變體,它是以氨基酸序列如SEQ?ID?No.1所示的野生型亞胺還原酶IR?F7為親本,發(fā)生突變得到的突變體。本發(fā)明提供了亞胺還原酶IR?F7或其突變體、亞胺還原酶IR?B8或其突變體在合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物中的應(yīng)用。本發(fā)明亞胺還原酶或其突變體,可催化分子內(nèi)的還原胺化,一步合成多并環(huán)手性氮雜環(huán),避免使用昂貴的手性試劑;通過結(jié)合DKR過程,能夠充分利用原料,不需要額外的氨基供體,獲得較好的收率和選擇性;具有更廣的底物適用范圍,在合成多并環(huán)手性氮雜環(huán)化合物的工業(yè)化應(yīng)用上更具潛力。

技術(shù)研發(fā)人員:賈知軍,張國(guó)慶,王鑫,陳鵬,陳慧
受保護(hù)的技術(shù)使用者:四川大學(xué)華西第二醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/2
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