本發(fā)明屬于基因工程，具體涉及超量表達(dá)bna05cark3基因在調(diào)控油菜育性中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、油菜作為我國(guó)重要的油料作物，是國(guó)產(chǎn)第一大植物油油源和第二大飼用蛋白源，在食用、飼用、觀賞、工業(yè)等領(lǐng)域都具有重要的作用。油菜生育期需水量較大，尤其是萌發(fā)期，土壤有足夠的濕度才能使油菜種子吸收占自身重量60%的水分而萌發(fā)出苗。然而，全球氣候變暖使得多數(shù)地區(qū)干旱發(fā)生的頻率和強(qiáng)度增加，這無(wú)疑給油菜的生產(chǎn)帶來(lái)了一定的氣候風(fēng)險(xiǎn)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)約35%的耕地位于干旱或半干旱地區(qū)，干旱脅迫下土壤濕度較低，若種植油菜，會(huì)使得油菜種子萌發(fā)期缺水，發(fā)苗不齊或不能發(fā)苗，還會(huì)影響油菜花授粉、受精等過(guò)程，從而導(dǎo)致油菜含油量下降，產(chǎn)量和質(zhì)量降低。因此，如何調(diào)控干旱脅迫下油菜的育性對(duì)于擴(kuò)種油菜具有重要的意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、基于上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的之一在于提供超量表達(dá)bna05cark3基因在調(diào)控油菜育性中的應(yīng)用，目的之二在于提供調(diào)控油菜育性的方法。

2、為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的第一個(gè)技術(shù)方案為：

3、超量表達(dá)bna05cark3基因在調(diào)控油菜育性中的應(yīng)用，所述bna05cark3基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

4、調(diào)控油菜育性時(shí)，先利用克隆的bna05cark3基因構(gòu)建超量表達(dá)bna05cark3基因的重組載體，然后將重組載體轉(zhuǎn)化到油菜中進(jìn)行bna05cark3基因的超量表達(dá)。

5、bna05cark3基因克隆方法為：根據(jù)bna05cark3基因序列設(shè)計(jì)特異引物，以油菜cdna為模版進(jìn)行pcr擴(kuò)增。

6、超量表達(dá)bna05cark3基因用的載體可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的可用于植物遺傳轉(zhuǎn)化的載體。

7、優(yōu)選的，超量表達(dá)bna05cark3基因用的載體為pcambia1305.1。

8、將重組載體轉(zhuǎn)化到油菜中的方法為：將重組載體轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌，然后用已轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌的菌液侵染油菜。

9、重組載體轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌用的菌株可以是根癌農(nóng)桿菌株或發(fā)根農(nóng)桿菌株，以及其衍生菌株。

10、優(yōu)選的，重組載體轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌用的菌株為根癌農(nóng)桿菌agl1。

11、本發(fā)明采用的第二個(gè)技術(shù)方案為：

12、調(diào)控油菜育性的方法，包括：

13、利用克隆的bna05cark3基因構(gòu)建超量表達(dá)bna05cark3基因的重組載體，然后將重組載體轉(zhuǎn)化到油菜中。

14、優(yōu)選的，超量表達(dá)bna05cark3基因用的載體為pcambia1305.1。

15、優(yōu)選的，將重組載體轉(zhuǎn)化到油菜中的方法為：將重組載體轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌，然后用已轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌的菌液侵染油菜。

16、優(yōu)選的，重組載體轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌用的菌株為根癌農(nóng)桿菌agl1。

17、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

18、本發(fā)明利用克隆的bna05cark3基因成功構(gòu)建超量表達(dá)bna05cark3基因的重組載體，并通過(guò)農(nóng)桿菌侵染法使bna05cark3基因在油菜中進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化、超量表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)干旱脅迫環(huán)境下油菜種子發(fā)育進(jìn)程，使油菜的花粉活力和千粒重得以提高，以助于干旱環(huán)境下油菜高產(chǎn)研究。

技術(shù)特征：

1.超量表達(dá)bna05cark3基因在調(diào)控油菜育性中的應(yīng)用，其特征在于，所述bna05cark3基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，調(diào)控油菜育性時(shí)，先利用克隆的bna05cark3基因構(gòu)建超量表達(dá)bna05cark3基因的重組載體，然后將重組載體轉(zhuǎn)化到油菜中進(jìn)行bna05cark3基因的超量表達(dá)。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，超量表達(dá)bna05cark3基因用的載體為pcambia1305.1。

4.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述將重組載體轉(zhuǎn)化到受體植物油菜中的方法為：將重組載體轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌，然后用已轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌的菌液侵染油菜。

5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，重組載體轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌用的菌株為根癌農(nóng)桿菌agl1。

6.調(diào)控油菜育性的方法，其特征在于，包括：

7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，超量表達(dá)bna05cark3基因用的載體為pcambia1305.1。

8.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述將重組載體轉(zhuǎn)化到油菜中的方法為：將重組載體轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌，然后用已轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌的菌液侵染油菜。

9.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，重組載體轉(zhuǎn)化為農(nóng)桿菌用的菌株為根癌農(nóng)桿菌agl1。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及超量表達(dá)BnA05CARK3基因在調(diào)控油菜育性中的應(yīng)用。本發(fā)明利用克隆的BnA05CARK3基因成功構(gòu)建超量表達(dá)BnA05CARK3基因的重組載體，并通過(guò)農(nóng)桿菌侵染法使BnA05CARK3基因在油菜中進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化、超量表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)干旱脅迫環(huán)境下油菜發(fā)育進(jìn)程，使油菜的花粉活力和千粒重得以提高，質(zhì)量和產(chǎn)量可達(dá)到野生型油菜正常發(fā)育程度。

技術(shù)研發(fā)人員：楊毅,李小意,李玉飛,趙云,王健美
受保護(hù)的技術(shù)使用者：四川大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2