本發(fā)明涉及一種制備三唑基[1,5-a]吡嗪-3-甲酰酯的方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、6-甲基-4,5,6,7-四氫-[1,2,3]三唑基[1,5-a]吡嗪-3-羧酸甲酯（如下所示結(jié)構(gòu)）是制備hbv抑制劑的關(guān)鍵中間體，其質(zhì)量和收率直接關(guān)系后續(xù)工藝的可行性，

2、。

3、例如wo2018011163報道了利用點(diǎn)擊反應(yīng)構(gòu)成三氮唑并[1,5-a]吡嗪結(jié)構(gòu)，經(jīng)過系列反應(yīng)以獲得3-碘-6-甲基-4,5,6,7-四氫-[1,2,3]三唑基[1,5-a]吡嗪，

4、。

5、然而，將該方法應(yīng)用于(s)-n5-(3,4-二氟苯基)-6-甲基-n3-((r)-1,1,1-三氟丙-2-基)-6,7-二氫-[1,2,3]三氮唑并[1,5-a]吡嗪-3,5(4h)-二甲酰胺制備時（流程如下，詳見wo2019020070），在點(diǎn)擊反應(yīng)構(gòu)成三氮唑并[1,5-a]吡嗪結(jié)構(gòu)時，總是會產(chǎn)生6-位甲基異位產(chǎn)物，尤其當(dāng)放大至公斤級別時，點(diǎn)擊反應(yīng)不利于工藝放大生產(chǎn)，同時也制約了終產(chǎn)品的質(zhì)量和收率，

6、。

7、。

8、鑒于甲基異位產(chǎn)物會直接影響該步工藝收率以及關(guān)系到后續(xù)產(chǎn)品質(zhì)量，為此急需要開發(fā)新的制備方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本公開（the?disclosure）提供了制備式f化合物或其可藥用鹽的方法，，包括式b化合物與疊氮化物反應(yīng)以形成式c化合物的步驟，所述疊氮化物選自疊氮基三甲基硅烷、疊氮磷酸二苯酯或疊氮化鈉，，其中r1各自獨(dú)立選自c1-6烷基；r2選自c1-6烷基；r3為氫或氨基保護(hù)基，所述氨基保護(hù)基優(yōu)選叔-丁氧基羰基、烯丙氧基羰基、9-芴基甲基氧基羰基或芐基氧基羰基。

2、在一些實(shí)施方案中，式c化合物中r1選自氫或c1-6烷基，包括但不限于甲基、乙基、丙基或異丙基。

3、在一些實(shí)施方案中，式c或式f化合物中r2選自甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基或環(huán)戊基。

4、在一些實(shí)施方案中，式c或式f化合物中r3選自氫、叔-丁氧基羰基或芐基氧基羰基。

5、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括式e化合物轉(zhuǎn)化為式f化合物的步驟，，其中r2、r3如前述定義。

6、另一方面，本公開式f化合物是含有1個手性中心的手性分子，有2個構(gòu)型異構(gòu)體，。

7、在一些實(shí)施方案中，所述方法包括式e-b化合物轉(zhuǎn)化為式f-b化合物的步驟，。具體反應(yīng)條件或操作可參照wo2019020070a，并將相關(guān)內(nèi)容引入以示說明。

8、在一些實(shí)施方案中，所述方法中疊氮化合物所用量為式b化合物摩爾量的1~3倍，包括1倍、1.5倍、2倍、2.5倍、3倍或任意兩數(shù)值之間任意數(shù)值。在一些實(shí)施方案中，所述方法中疊氮化合物所用量為式b化合物摩爾量的1.5-2.5倍。在一些實(shí)施方案中，所述方法中疊氮化合物所用量為式b化合物摩爾量的2倍。

9、在一些實(shí)施方案中，所述方法包括式b化合物與疊氮化物反應(yīng)以形成式c化合物，式c化合物水解以形成式d化合物以及式d化合物轉(zhuǎn)為式e化合物的步驟，

10、。

11、進(jìn)一步地，在一些實(shí)施方案中，所述方法還包括式a化合物轉(zhuǎn)化為式b化合物的步驟，。

12、當(dāng)式f化合物中r3為氨基保護(hù)基時，所述方法還包括脫保護(hù)基的步驟，如下所示：，p為氨基保護(hù)基，所述氨基保護(hù)基包括叔-丁氧基羰基、烯丙氧基羰基、9-芴基甲基氧基羰基或芐基氧基羰基。脫除保護(hù)方法根據(jù)保護(hù)基的類型調(diào)整反應(yīng)條件。參見文獻(xiàn)（“protective?groups?in?organic?synthesis”，5th?ed.?t.?w.greene&p.?g.?m.?wuts）中所述，并將相關(guān)內(nèi)容引入本公開以示說明。在一些實(shí)施方案中，p為boc保護(hù)基，脫boc保護(hù)基為酸性條件，如鹽酸/二氧六環(huán)。在一些實(shí)施方案中，p為cbz保護(hù)基，采用pd/c催化氫化的方式脫除cbz保護(hù)基。

13、本公開還提供了式c化合物，其中r1、r2如前述定義。在一些實(shí)施方案中，式c化合物為。

14、本公開還提供了式d化合物，其中r2如前述定義。在一些實(shí)施方案中，式d化合物為。

15、另一方面，本公開還提供了制備式i化合物或其可藥用鹽的方法，，所述方法包括前述制備式f化合物的方法的步驟以及式f化合物轉(zhuǎn)化為式i化合物的步驟，。

16、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括式f-2化合物與1,1,1-三氟丙-2-胺反應(yīng)以形成式h化合物的步驟，，其中r2如前述定義。

17、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括式f-2化合物與1,1,1-三氟丙-2-胺反應(yīng)以形成式h化合物以及式h化合物轉(zhuǎn)為式i化合物或其可藥用鹽的步驟，，其中r2如前述定義。

18、在另一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括式f-2化合物轉(zhuǎn)化為式g化合物的步驟，，其中r2如前述定義。具體反應(yīng)條件或操作可參照期刊文獻(xiàn)wo2019020070a，并將相關(guān)內(nèi)容引入以示說明。

19、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括式f-2化合物與n-3,4-二氟苯基氨基甲酸甲酯反應(yīng)以形成式g化合物的步驟。

20、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括式f-2化合物轉(zhuǎn)為式g化合物以及式g化合物與1,1,1-三氟丙-2-胺反應(yīng)以形成式i化合物或其可藥用鹽的步驟，，其中r2如前述定義。具體反應(yīng)條件或操作可參照wo2019020070a，并將相關(guān)內(nèi)容引入以示說明。

21、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括：式b化合物與疊氮化物反應(yīng)以形成式c化合物，式c化合物水解以形成式d化合物，式d化合物與胺化合物反應(yīng)以形成式e化合物，式f化合物轉(zhuǎn)化為式h化合物以及式h化合物轉(zhuǎn)為式i化合物的步驟，

22、。

23、具體反應(yīng)條件或操作可參照wo2019020070a，并將相關(guān)內(nèi)容引入以示說明。

24、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括：式b化合物與疊氮化物反應(yīng)以形成式c化合物，式c化合物水解以形成式d化合物，式d化合物與胺化合物反應(yīng)以形成式e化合物，式f化合物轉(zhuǎn)化為式g化合物以及式g化合物轉(zhuǎn)為式i化合物的步驟，

25、。

26、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法還包括式f-1化合物脫保護(hù)基以形成式f-2化合物的步驟，，p為氨基保護(hù)基，所述氨基保護(hù)基包括叔-丁氧基羰基、烯丙氧基羰基、9-芴基甲基氧基羰基或芐基氧基羰基。脫除保護(hù)基參見文獻(xiàn)（“protective?groups?in?organic?synthesis”，5th?ed.?t.?w.greene&p.?g.?m.?wuts）中所述，并將相關(guān)內(nèi)容引入本公開以示說明。

27、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括：

28、，

29、步驟b）化合物b-1與疊氮基三甲基硅烷反應(yīng)以形成化合物c-1；

30、步驟c）化合物c-1在酸性條件下（如醋酸條件下）水解以形成化合物d-1；

31、步驟d）化合物d-1轉(zhuǎn)化為化合物e-1；

32、步驟e）化合物e-1在ph3p/diad條件下反應(yīng)以形成化合物f-1a；

33、步驟f）化合物f-1a脫保護(hù)氨基保護(hù)基，如在酸性條件下脫除boc，以形成化合物f-2a；

34、步驟g）化合物f-2a與n-3,4-二氟苯基氨基甲酸甲酯反應(yīng)以形成化合物g-1。具體反應(yīng)條件或操作可參照wo2019020070a，并將相關(guān)內(nèi)容引入本公開以示說明。

35、在一些實(shí)施方案中，制備式f化合物或其可藥用鹽的方法包括：

36、，

37、步驟b）化合物b-1與疊氮基三甲基硅烷反應(yīng)以形成化合物c-1；

38、步驟c）化合物c-1在酸性條件下（如醋酸條件下）水解以形成化合物d-1；

39、步驟d）化合物d-1轉(zhuǎn)化為化合物e-1；

40、步驟e）化合物e-1在ph3p/diad條件下反應(yīng)以形成化合物f-1a；

41、步驟f）化合物f-1a脫保護(hù)氨基保護(hù)基，如在酸性條件下脫除boc，以形成化合物f-2a；

42、步驟g）化合物f-2a轉(zhuǎn)化為式i化合物。具體反應(yīng)條件或操作可參照wo2019020070a，并將相關(guān)內(nèi)容引入本公開以示說明。

43、另一方面，本公開“酯基”化合物轉(zhuǎn)為“酰胺”化合物還包括酯基水解至羧酸的步驟。在一些實(shí)施方案，酯基水解的反應(yīng)條件為酸性或lioh。

44、在一些實(shí)施方案中，制備式i化合物或其可藥用鹽的方法包括式g化合物水解（如lioh條件下）以形成式k化合物，式k化合物與1,1,1-三氟丙-2-胺反應(yīng)以形成式i化合物的步驟，。

45、在一些實(shí)施方案中，制備式i化合物或其可藥用鹽的方法包括化合物g-1水解（如lioh條件下）以形成化合物k-1，化合物k-1與1,1,1-三氟丙-2-胺反應(yīng)以形成式i化合物的步驟，。

46、本公開還提供了一種藥物組合物，其含有有效治療量的由前述方法制備獲得式i化合物或其可藥用鹽以及一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。

47、另一方面，本公開還提供了前述方法制備獲得式i化合物或其可藥用鹽或前述藥物組合物在制備治療病毒性感染疾病的藥物中用途，所述病毒優(yōu)選乙型肝炎病毒、流感病毒、皰疹病毒和艾滋病毒，所述疾病優(yōu)選乙型肝炎、流感、皰疹和艾滋病。

48、本公開所述方法還包括后處理操作，如過濾、萃取、濃縮、柱層析或手型分離中的一步或多步以獲得純的目標(biāo)產(chǎn)物。

49、另一方面，本公開所述點(diǎn)擊反應(yīng)需要在無水、無氧條件下進(jìn)行。所用溶劑的處理方式可參見《溶劑手冊》(第四版)-程能林編著。

50、本公開所述可藥用鹽為式i化合物與酸成鹽的產(chǎn)物，所述酸選自但不限于鹽酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、蘋果酸或草酸等。

51、本公開所述鹽為相應(yīng)化合物與酸成鹽的產(chǎn)物，所述酸選自但不限于鹽酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、磷酸或草酸等。

52、本發(fā)明所使用的術(shù)語，除有相反的表述外，具有如下的含義：

53、本公開“以形成”和“轉(zhuǎn)化為”并不特指兩個底物間的轉(zhuǎn)化反應(yīng)為單步驟的，可為兩個底物間的單步驟或多步驟的反應(yīng)。如中間體含有氨基保護(hù)基，所述中間體經(jīng)過一步脫氨基保護(hù)劑，隨后再與相應(yīng)底物反應(yīng)以獲得相應(yīng)目標(biāo)產(chǎn)物。

54、“烷基”指飽和的脂族烴基團(tuán)，包括包括1至6個碳原子。非限制性實(shí)施例包括但不限甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基或環(huán)戊基等。

55、diad：偶氮二羧酸二異丙酯。

56、ph3p：三苯膦。

57、lioh：氫氧化鋰。

58、“氨基保護(hù)基”是本領(lǐng)域已知的適當(dāng)?shù)挠糜诎被Ｗo(hù)的基團(tuán)，參見文獻(xiàn)（“protective?groups?in?organic?synthesis”，5thed.?t.?w.?greene&p.?g.?m.?wuts）中的羥基保護(hù)基團(tuán)。作為示例，包括但不限于氨基甲酸酯保護(hù)基，比如叔-丁氧基羰基(boc)、烯丙氧基羰基(al?loc)、9-芴基甲基氧基羰基(fmoc)和芐基氧基羰基(cbz)。

59、本公開中所述“有效治療量”包含足以改善或預(yù)防醫(yī)學(xué)病癥的癥狀或病癥的量。有效量還意指足以允許或促進(jìn)診斷的量。用于特定患者或獸醫(yī)學(xué)受試者的有效量可依據(jù)以下因素而變化：如待治療的病癥、患者的總體健康情況、給藥的方法途徑和劑量以及副作用嚴(yán)重性。有效量可以是避免顯著副作用或毒性作用的最大劑量或給藥方案。

60、本公開中所述的“賦形劑”包括但不限于任何已經(jīng)被美國食品和藥物管理局批準(zhǔn)對于人類或家畜動物使用可接受的任何助劑、載體、助流劑、甜味劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、增香劑、表面活性劑、潤濕劑、分散劑、助懸劑、穩(wěn)定劑、等滲劑或乳化劑。

61、化合物的結(jié)構(gòu)是通過核磁共振(nmr)或/和質(zhì)譜(ms)來確定的。nmr位移(d)以10-6(ppm)的單位給出。nmr的測定是用bruker?avance-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞砜(dmso- d 6)，氘代氯仿(cdcl3)，氘代甲醇(cd3od)，內(nèi)標(biāo)為四甲基硅烷(tms)。

62、hplc的測定可使用安捷倫agilent?1200高壓液相色譜儀(evo?c18?4.6*250mm,5um，色譜柱或xtimate?c18?2.1*30mm色譜柱)。

63、手性hplc分析測定使用chiralpak?if?150*4.6mm,?5um色譜柱或lux?amylose-2150*4.6mm,5um色譜柱。

64、薄層層析硅膠板使用煙臺黃海hsgf254或青島gf254硅膠板，薄層色譜法(tlc)使用的硅膠板采用的規(guī)格是0.15mm～0.2mm，薄層層析分離純化產(chǎn)品采用的規(guī)格是0.4?mm～0.5?mm。

65、快速柱純化系統(tǒng)使用combiflash?rf150?(teledyne?isco)或者isolara?one（biotage）。