本發(fā)明涉及癌癥檢測領域，特別涉及從尿液中早診前列腺癌檢測試劑盒。

背景技術：

1、前列腺癌是指發(fā)生在前列腺的上皮性惡性腫瘤，是男性最常見的惡性腫瘤之一，嚴重危害患者的生命健康和生活質量。前列腺癌的潛伏期比較長，進展緩慢，但由于在早期沒有明顯的癥狀，容易被患者忽視，據(jù)統(tǒng)計，約70%的前列腺癌患者在確診時已處于晚期，這在很大程度上歸因于早期檢測的困難。前列腺癌患者的死亡率高，其中一個重要原因是對于早期前列腺癌患者的檢測準確率低，參見吳漢潮,?張雄偉,?王強.?前列腺癌診斷方法研究進展.?中外醫(yī)學研究.?2021,?19(07):188-190。

2、前列腺特異抗原（psa）目前常用于從血漿中篩查前列腺癌，是臨床上篩查前列腺癌的金標準。psa檢測雖然敏感度較高，但特異性較低。前列腺炎、良性前列腺增生等非惡性疾病也可導致psa水平升高，造成假陽性結果，參見william?j.?catalona,?paula?c.southwick,?kevin?m.?slawin,?et?al.,?comparison?of?percent?free?psa,?psadensity,?and?age-specific?psa?cutoffs?for?prostate?cancer?detection?andstaging.?urology.?2000,?56(2):255-260。因此當篩查出psa升高，經常需要進行前列腺穿刺活檢以確認是否為前列腺癌。穿刺活檢是一種有創(chuàng)的檢測方法，對患者的身體傷害較大，并且穿刺活檢存在假陰性和過度診斷等局限性。研究表明，初次穿刺活檢的假陰性率可高達30%，這意味著許多患者可能需要進行多次穿刺才能確診，參見陳銳,?謝立平,?周利群,?等.?中國前列腺癌聯(lián)盟成員醫(yī)院前列腺穿刺活檢現(xiàn)狀的調查報告，中華泌尿外科雜志.?2015,?36:?342-?345。鑒于此，需要提出一種能夠降低患者身體損傷風險，靈敏度和特異性更高的檢測方法，用于實現(xiàn)前列腺癌早期篩查的準確性。

3、分子標志物，特別是基因甲基化標志物，因其高度特異性和穩(wěn)定性，近年來在前列腺癌早期診斷中展現(xiàn)出巨大潛力。例如gstp1基因、hox家族基因、rassf家族基因等被發(fā)現(xiàn)能用于前列腺癌早期診斷，參見louise?katrine?larsen,?guro?elisabeth?lind,?perguldberg,?et?al.,?dna-methylation-based?detection?of?urological?cancer?inurine:?overview?of?biomarkers?and?considerations?on?biomarker?design,?sourceof?dna,?and?detection?technologies.?international?journal?of?molecularsciences.?2019,?20(11):?2657，和ravindran?ragavi,?panneerselvam?muthukumaran,srividhya?nandagopal,?et?al.,?epigenetics?regulation?of?prostate?cancer:biomarker?and?therapeutic?potential.?urologic?oncology:?seminars?and?originalinvestigations.?2023,41(8):?340-353。前列腺細胞不容易進入到尿道中，而直腸按摩20秒后的尿液中可以更好檢出甲基化基因。相比于血漿樣本和穿刺活檢，尿液具有無創(chuàng)和可重復性的優(yōu)點。

技術實現(xiàn)思路

1、為了解決上述問題，本發(fā)明中提供一種從尿液中早診前列腺癌檢測試劑盒，所述試劑盒用于檢測位于人gstp1基因啟動子區(qū)域cpg島dna序列區(qū)段甲基化片段，所述甲基化片段具體基因組定位為（hg38）chr11:?67583458?-67584482?strand=+，所述甲基化片段包括以下四個組中的至少一個：第一組，chr11:67583460-67583479?strand=+，chr11:67583533-67583551?strand=+，chr11:67583503-67583523?strand=+；第二組，chr11:67583619-67583636?strand=+，chr11:67583681-67583697?strand=+，chr11:67583660-67583677?strand=+，第三組，chr11:67583737-67583759?strand=+，chr11:67583794-67583810?strand=+，chr11:67583763-67583781?strand=+；和，第四組，cchr11:67584231-67584249?strand=+，chr11:67584315-67584338?strand=+，chr11:67584266-67584288strand=+。

2、在一種實施方式中，所述試劑盒是重亞硫酸鹽轉化熒光定量pcr試劑盒、重亞硫酸鹽轉化測序試劑盒、甲基化芯片測序試劑盒中的至少一種。

3、在一種實施方式中，所述試劑盒是用于檢測以下三個片段的試劑盒：第一組，chr11:67583460-67583479?strand=+，chr11:67583533-67583551?strand=+，chr11:67583503-67583523?strand=+；第二組，chr11:67583619-67583636?strand=+，chr11:67583681-67583697?strand=+，chr11:67583660-67583677?strand=+，和，第四組，cchr11:67584231-67584249?strand=+，chr11:67584315-67584338?strand=+，chr11:67584266-67584288?strand=+。

4、在一種實施方式中，所述試劑盒是熒光定量pcr試劑盒，所述試劑盒包括以下引物和探針：

5、。

6、本發(fā)明開發(fā)一種從尿液中早診前列腺癌檢測試劑盒，通過gstp1基因啟動子區(qū)域cpg島的特定片段甲基化的聯(lián)合檢測，特別是第一組，chr11:67583460-67583479?strand=+，chr11:67583533-67583551?strand=+，chr11:67583503-67583523?strand=+；第二組，chr11:67583619-67583636?strand=+，chr11:67583681-67583697?strand=+，chr11:67583660-67583677?strand=+，和，第四組，cchr11:67584231-67584249?strand=+，chr11:67584315-67584338?strand=+，chr11:67584266-67584288?strand=+的三個組的聯(lián)合檢測，該聯(lián)合檢測的靈敏度和特異性綜合性能為最優(yōu)，靈敏度為：91.67%，特異性為：92.54%；這樣大大提高了檢測的靈敏度和診斷準確性，從而可以不需要進行血漿樣本和穿刺活，減少不必要的侵入性檢查，實現(xiàn)前列腺癌的早期無創(chuàng)診斷；另外由于本發(fā)明聯(lián)合檢測具有高靈敏度和高特異性結果，本發(fā)明可以使用尿液檢測，尿液檢測具有無創(chuàng)和可重復性的優(yōu)點，從而提高診檢測的便捷性，降低了檢測的成本。