本發(fā)明涉及乳酸菌培養(yǎng),特別是一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法。
背景技術(shù):
1、當(dāng)前的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法面臨多個(gè)技術(shù)難題,特別是在發(fā)酵過程中對(duì)ph值的控制上,對(duì)乳酸菌的生長(zhǎng)、代謝以及最終產(chǎn)量有著至關(guān)重要的影響。
2、傳統(tǒng)方案在發(fā)酵過程中,乳酸菌會(huì)產(chǎn)生大量乳酸,導(dǎo)致發(fā)酵液的ph值迅速下降,如果ph值下降過多,會(huì)抑制乳酸菌的生長(zhǎng)和代謝,最終影響產(chǎn)量和質(zhì)量,在傳統(tǒng)的發(fā)酵過程中,通常依靠人工手動(dòng)監(jiān)測(cè)ph值,并通過添加堿溶液(如naoh)進(jìn)行調(diào)節(jié),手動(dòng)調(diào)節(jié)雖然能夠部分緩解ph波動(dòng),但頻繁的人為干預(yù)不僅增加了操作復(fù)雜度,還容易出現(xiàn)反應(yīng)不及時(shí)或調(diào)節(jié)不精確的情況,手動(dòng)調(diào)節(jié)過程中,ph值會(huì)出現(xiàn)大幅波動(dòng),無法保證始終處于乳酸菌最佳生長(zhǎng)范圍內(nèi),導(dǎo)致發(fā)酵效率下降,最終影響生產(chǎn)的穩(wěn)定性和產(chǎn)量一致性。
3、乳酸菌發(fā)酵的生產(chǎn)效率受多種因素影響,特別是發(fā)酵過程中的ph值、溫度等參數(shù)控制不穩(wěn)定時(shí),乳酸菌的生長(zhǎng)速率會(huì)明顯降低,導(dǎo)致發(fā)酵周期延長(zhǎng),生產(chǎn)效率低下,因此亟需一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法來解決此類問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、鑒于上述現(xiàn)有存在的問題,提出了本發(fā)明。
2、本發(fā)明提供了一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法解決傳統(tǒng)方法主要依靠定期監(jiān)測(cè)發(fā)酵參數(shù),通過手動(dòng)調(diào)節(jié)溫度和ph值來維持發(fā)酵條件,無法做到實(shí)時(shí)精確調(diào)節(jié),發(fā)酵過程中菌體的代謝狀態(tài)經(jīng)常受到波動(dòng)的影響,導(dǎo)致發(fā)酵時(shí)間過長(zhǎng)的問題。
3、為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
4、本發(fā)明提供了一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其包括,
5、步驟s1,進(jìn)行材料準(zhǔn)備,
6、包括大豆蛋白胨3%、酵母浸提粉2%、乙酸鈉0.5%、復(fù)合微量元素液0.1%、復(fù)合維生素液0.05%、胰蛋白酶0.2%、酸溶蛋白(短肽)0.5%、檸檬酸鈉0.2%~0.4%、mg2+水溶性化合物0.02%~0.04%、fe2+水溶性化合物0.01%~0.02%、純水93.64%~94.62%,
7、配制mrs培養(yǎng)基并調(diào)節(jié)ph至初始值為7.0,將培養(yǎng)基在高壓滅菌器中以121℃進(jìn)行15分鐘滅菌;
8、步驟s2,發(fā)酵罐設(shè)置,
9、將滅菌后的培養(yǎng)基在無菌條件下轉(zhuǎn)移到帶溫控和ph控制系統(tǒng)的發(fā)酵罐中;
10、步驟s3,啟動(dòng)ph控制系統(tǒng),校準(zhǔn)ph傳感器;
11、步驟s4,實(shí)時(shí)監(jiān)控調(diào)節(jié),
12、當(dāng)發(fā)酵開始時(shí),ph傳感器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)發(fā)酵罐內(nèi)培養(yǎng)液的ph值,
13、步驟s5,過程維持,
14、發(fā)酵罐內(nèi)維持溫度恒定在37℃,ph控制系統(tǒng)保持ph值在設(shè)定范圍內(nèi),
15、持續(xù)發(fā)酵30小時(shí)后,結(jié)束發(fā)酵,收集培養(yǎng)液;
16、采用ph控制系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了對(duì)發(fā)酵環(huán)境的全自動(dòng)化監(jiān)控與調(diào)節(jié),發(fā)酵過程中,ph值是乳酸菌生長(zhǎng)的關(guān)鍵因素之一,傳統(tǒng)的發(fā)酵方法中ph值波動(dòng)較大,常導(dǎo)致菌體的生長(zhǎng)不穩(wěn)定以及產(chǎn)量和質(zhì)量的波動(dòng),本發(fā)明中,ph傳感器能夠?qū)崟r(shí)、連續(xù)地采集發(fā)酵液的ph值,避免因ph波動(dòng)導(dǎo)致的菌體生長(zhǎng)抑制。
17、進(jìn)一步的,步驟s2中,發(fā)酵罐的溫度調(diào)節(jié)為37℃。
18、進(jìn)一步的,步驟s3中,將ph控制器設(shè)置為6.7±0.1。
19、進(jìn)一步的,步驟s4中,當(dāng)ph值低于預(yù)設(shè)下限值6.6時(shí),ph控制器發(fā)出信號(hào),啟動(dòng)與控制系統(tǒng)連接的泵。
20、進(jìn)一步的,步驟s4中,從儲(chǔ)液桶中自動(dòng)添加20%naoh溶液,泵基于流量控制,添加堿溶液,將ph值恢復(fù)至設(shè)定范圍6.7±0.1。
21、進(jìn)一步的,ph控制系統(tǒng)組件包括:
22、ph傳感器,用于實(shí)時(shí)檢測(cè)發(fā)酵液的ph值,將數(shù)據(jù)傳送至ph控制器,
23、ph控制器,用于根據(jù)ph傳感器的輸入數(shù)據(jù),判斷ph值是否在設(shè)定范圍內(nèi),并決定是否啟動(dòng)泵添加酸或堿,采用pid控制算法在ph控制中的進(jìn)一步提高控制的靈活性和精度,pid控制能夠動(dòng)態(tài)調(diào)整泵的操作,通過計(jì)算ph的誤差值,添加naoh溶液,將ph值保持在預(yù)設(shè)范圍內(nèi),使發(fā)酵罐內(nèi)的ph值始終處于乳酸菌適宜范圍,減少人為誤差,并且能夠在ph值發(fā)生微小變化時(shí)迅速做出反應(yīng),有效地提升了乳酸菌的生長(zhǎng)速率和發(fā)酵效率。
24、進(jìn)一步的,ph控制系統(tǒng)組件還包括:
25、泵和儲(chǔ)液桶,與ph控制器相連,根據(jù)需要添加酸或堿溶液,保持ph穩(wěn)定。
26、進(jìn)一步的,ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)過程中,ph監(jiān)控與調(diào)節(jié)方式包括:
27、在發(fā)酵過程中,ph傳感器不斷采集發(fā)酵液的ph值,采用卡爾曼濾波消除噪聲,將處理后的數(shù)據(jù)實(shí)時(shí)傳輸至控制器,
28、控制器根據(jù)傳感器傳遞的ph值信息,采用pid控制算法做出調(diào)節(jié)判斷。
29、進(jìn)一步的,ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)過程中,ph監(jiān)控與調(diào)節(jié)方式還包括:
30、pid控制算法計(jì)算當(dāng)前ph值與目標(biāo)ph值之間的差值,并通過比例、積分和微分項(xiàng)調(diào)節(jié)控制器輸出,控制泵的啟動(dòng)或停止,ph控制系統(tǒng)與發(fā)酵罐的結(jié)合,提高了整個(gè)發(fā)酵過程的自動(dòng)化程度和可控性,基于對(duì)溫度和ph的聯(lián)合調(diào)控,為乳酸菌的高效生長(zhǎng)提供最佳條件,持續(xù)自動(dòng)調(diào)節(jié),減少了對(duì)人工操作的依賴,提高了生產(chǎn)效率,還降低了操作過程中的污染風(fēng)險(xiǎn)。
31、進(jìn)一步的,ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)過程中,ph監(jiān)控與調(diào)節(jié)方式還包括:
32、泵基于控制器的指令,采用流量控制算法計(jì)算泵輸送的naoh溶液量,根據(jù)ph值的偏差,實(shí)時(shí)調(diào)節(jié)泵的流量。
33、本發(fā)明有益效果為:
34、本發(fā)明,對(duì)乳酸菌培養(yǎng)階段進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),采用ph傳感器和pid控制算法,將發(fā)酵過程中ph值維持在6.7±0.1范圍內(nèi),減少了乳酸的過度積累,避免ph值的大幅波動(dòng),使乳酸菌可以在穩(wěn)定的酸堿環(huán)境中高效生長(zhǎng),大幅提升了發(fā)酵效率和菌體產(chǎn)量。
35、本發(fā)明,提供更有效的ph控制,加快了乳酸菌的生長(zhǎng)速度,并維持高密度的菌體培養(yǎng),發(fā)酵過程中進(jìn)行自動(dòng)調(diào)節(jié),為發(fā)酵環(huán)境提供連續(xù)性和穩(wěn)定性,縮短了發(fā)酵時(shí)間,在相同的發(fā)酵周期內(nèi),乳酸菌的生物量顯著增加,產(chǎn)量提高,提高了整體的生產(chǎn)效率和經(jīng)濟(jì)效益。
36、本發(fā)明,自動(dòng)化ph控制系統(tǒng)能夠持續(xù)監(jiān)控發(fā)酵罐內(nèi)的環(huán)境,并在ph值發(fā)生變化時(shí)自動(dòng)調(diào)整,通過泵注入naoh溶液,保持ph值穩(wěn)定,減少了人為操作的必要性,降低了人為誤差的風(fēng)險(xiǎn)。
37、本發(fā)明,集成ph控制和溫度控制系統(tǒng),顯著提升發(fā)酵過程的可控性,溫度和ph聯(lián)合調(diào)控使乳酸菌能夠在更適宜的環(huán)境下生長(zhǎng)。
1.一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于:包括,
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于,步驟s2中,發(fā)酵罐的溫度調(diào)節(jié)為37℃。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于,步驟s3中,將ph控制器設(shè)置為6.7±0.1。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于,步驟s4中,當(dāng)ph值低于預(yù)設(shè)下限值6.6時(shí),ph控制器發(fā)出信號(hào),啟動(dòng)與控制系統(tǒng)連接的泵。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于,步驟s4中,從儲(chǔ)液桶中自動(dòng)添加20%naoh溶液,泵基于流量控制,添加堿溶液,將ph值恢復(fù)至設(shè)定范圍6.7±0.1。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于,ph控制系統(tǒng)組件包括:
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于,ph控制系統(tǒng)組件還包括:
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于,ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)過程中,ph監(jiān)控與調(diào)節(jié)方式包括:
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于,ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)過程中,ph監(jiān)控與調(diào)節(jié)方式還包括:
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種基于ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)方法,其特征在于,ph控制系統(tǒng)的乳酸菌高密度培養(yǎng)過程中,ph監(jiān)控與調(diào)節(jié)方式還包括: