(一)本發(fā)明涉及一種勞倫斯河口假單胞菌(pseudomonas?laurentiana)yx05及其在降解3-氯丙酸等有機(jī)污染物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

0、(二)背景技術(shù)

1、3-氯丙酸又名β-氯丙酸，是一種重要的有機(jī)合成原料，白色結(jié)晶性粉末，溶于水、乙醇、乙醚、氯仿，是農(nóng)藥、醫(yī)藥及染料中間體，可用于合成β-丙酸丁酯，用于抗癲痛藥的生產(chǎn)，還用于制農(nóng)藥吡氟禾草靈，以及作合成試劑，如用于合成絲綢染料中間體3-氯丙酰氯等。3-氯丙酸的合成方法主要有丙烯腈加成氯化水解法、丙酸光照氯化法、丙烯醛氯化加成氧化法、3-氯丙醇氧化法和丙烯酸氯化加成法等。

2、鹵代脂肪族化合物廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)和工業(yè)中。這些化合物大量生產(chǎn)，由于其廣泛用作除草劑、殺菌劑、殺蟲(chóng)劑、溶劑等，因此是一類(lèi)重要的環(huán)境污染物。3-氯丙酸雖屬于低毒類(lèi)，但易被人體吸入、經(jīng)皮膚吸收，對(duì)皮膚、粘膜和眼睛有刺激作用。3-氯丙酸遇明火、高熱、氧化劑能燃燒，并放出有毒氣體，具有腐蝕性。

3、3-氯丙酸的降解方法主要包括生物降解、化學(xué)降解和物理降解。生物降解是利用微生物(如細(xì)菌、真菌)來(lái)降解3-氯丙酸。一些微生物能夠代謝此類(lèi)化合物，將其轉(zhuǎn)化為無(wú)害物質(zhì)，但目前還未見(jiàn)有高效降解菌降解3-氯丙酸的報(bào)道。利用土著微生物群處理3-氯丙酸，不僅處理速率較慢，長(zhǎng)達(dá)數(shù)周甚至數(shù)月，而且降解效果不徹底；化學(xué)降解是采用氧化劑進(jìn)行化學(xué)氧化或者通過(guò)水解反應(yīng)降解3-氯丙酸，此方法存在的缺陷是需要嚴(yán)格控制反應(yīng)條件，設(shè)備要求高，操作復(fù)雜，成本較高；物理降解是通過(guò)熱解、蒸發(fā)或吸附等物理方法去除3-氯丙酸，該方法存在的缺陷是效率較低，不能完全降解污染物，導(dǎo)致殘留物存在。

4、因此研究環(huán)境中3-氯丙酸的高效降解對(duì)人類(lèi)健康和生態(tài)環(huán)境至關(guān)重要，通過(guò)文獻(xiàn)檢索，未發(fā)現(xiàn)有關(guān)勞倫斯河口假單胞菌以3-氯丙酸為唯一碳源來(lái)實(shí)現(xiàn)高效降解的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

0、(三)
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

1、本發(fā)明目的是提供一種勞倫斯河口假單胞菌yx05及其在降解有機(jī)污染物中的應(yīng)用，能以3-氯丙酸等有機(jī)污染物為唯一碳源實(shí)現(xiàn)高效降解，降解能力強(qiáng)，并且生長(zhǎng)環(huán)境溫和，易擴(kuò)大培養(yǎng)。該降解菌的發(fā)現(xiàn)對(duì)于工業(yè)廢水廢氣中鹵代脂肪族類(lèi)污染物的高效凈化具有重要意義。

2、本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

3、本發(fā)明提供一株3-氯丙酸等有機(jī)污染物降解菌——?jiǎng)趥愃购涌诩賳伟?pseudomonas?laurentiana)yx05，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)：cctcc?no:m?20241960，保藏日期：2024年09月11日，地址：中國(guó)，武漢，武漢大學(xué)，430072。

4、本發(fā)明勞倫斯河口假單胞菌yx05的基本特征為：菌落表面光滑不透明，呈乳白色或淡黃色；中央凸起，邊緣整齊，易挑取，鏡下為短桿狀，無(wú)芽孢；菌苔沿劃線生長(zhǎng)；革蘭氏染色陰性。

5、本發(fā)明還提供一種所述勞倫斯河口假單胞菌yx05在降解有機(jī)污染物中的應(yīng)用，所述的應(yīng)用是將勞倫斯河口假單胞菌yx05經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)獲得的靜息細(xì)胞加入ph＝4-9、含有機(jī)污染物的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液中，在25-35℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)有機(jī)污染物的降解。

6、進(jìn)一步，所述有機(jī)污染物為3-氯丙酸。

7、進(jìn)一步，所述無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液中，靜息細(xì)胞加入量以菌體干重計(jì)為30-100mg/l，優(yōu)選50mg/l。

8、進(jìn)一步，所述無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液中有機(jī)污染物的初始濃度為50-250mg/l。

9、進(jìn)一步，所述無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液組成為：k2hpo4·3h2o?0.942g/l、kh2po4?0.234g/l、nano3?1.7g/l、(nh4)2so4?1.208g/l、mgso4?0.120g/l、ca(no3)2?0.012g/l、fe(no3)3·9h2o0.040g/l，微量元素母液5ml/l，溶劑為去離子水，ph?7.0；其中微量元素母液組成：cuso4·5h2o?0.02g/l、feso4·7h2o?1.0g/l、mnso4·4h2o?0.1g/l、namoo4·2h2o?0.02g/l、cocl2·6h2o?0.02g/l、h3bo3?0.014g/l、znso4·7h2o?0.10g/l，溶劑為去離子水。

10、進(jìn)一步，所述勞倫斯河口假單胞菌yx05的靜息細(xì)胞按如下步驟制備：

11、(1)斜面培養(yǎng)：

12、將勞倫斯河口假單胞菌yx05接種于斜面lb固體培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)24～36h，獲得斜面菌體；所述lb固體培養(yǎng)基終濃度組成為：nacl?10g/l、胰蛋白胨10g/l、酵母粉5g/l，瓊脂18～20g/l，溶劑為去離子水，ph值自然；

13、(2)擴(kuò)大培養(yǎng)

14、用接種環(huán)挑取步驟(1)獲得的斜面菌體接種至lb液體培養(yǎng)基中，30℃培養(yǎng)24～36h，獲得od600＝0.1～0.2的菌液，離心，收集濕菌體，無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液洗滌，獲得勞倫斯河口假單胞菌yx05的靜息細(xì)胞；所述lb液體培養(yǎng)基終濃度組成為：nacl?10g/l、蛋白胨10g/l、酵母粉5g/l，溶劑為去離子水，ph值自然。

15、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果主要體現(xiàn)在：

16、本發(fā)明提供的勞倫斯河口假單胞菌yx05取自污水廠污泥，對(duì)于3-氯丙酸等有機(jī)污染物具有高效的降解效果，可以較為完全地把污染物轉(zhuǎn)化為co2、h2o等無(wú)害物質(zhì)，因而在工業(yè)廢氣廢水的生物凈化中具有廣闊的應(yīng)用前景。

17、本發(fā)明所述的勞倫斯河口假單胞菌yx05能將3-氯丙酸完全降解為無(wú)機(jī)物(co2、h2o)和細(xì)胞生物質(zhì)，實(shí)現(xiàn)完全礦化，且對(duì)于200mg/l以內(nèi)的3-氯丙酸的去除率較高。

技術(shù)特征：

1.勞倫斯河口假單胞菌(pseudomonas?laurentiana)yx05，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)：cctcc?no:m?20241960，保藏日期：2024年09月11日，地址：中國(guó)，武漢，武漢大學(xué)，430072。

2.一種權(quán)利要求1所述勞倫斯河口假單胞菌yx05在降解有機(jī)污染物中的應(yīng)用。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的應(yīng)用是將勞倫斯河口假單胞菌yx05經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)獲得的靜息細(xì)胞加入ph＝4-9、含有機(jī)污染物的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液中，在25-35℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)有機(jī)污染物的降解。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述有機(jī)污染物為3-氯丙酸。

5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液中，靜息細(xì)胞加入量以菌體干重計(jì)為30-100mg/l。

6.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液中有機(jī)污染物的初始濃度為50-250mg/l。

7.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液組成為：k2hpo4·3h2o0.942g/l、kh2po4?0.234g/l、nano3?1.7g/l、(nh4)2so4?1.208g/l、mgso4?0.120g/l、ca(no3)2?0.012g/l、fe(no3)3·9h2o?0.040g/l，微量元素母液5ml/l，溶劑為去離子水，ph7.0；其中微量元素母液組成：cuso4·5h2o?0.02g/l、feso4·7h2o?1.0g/l、mnso4·4h2o0.1g/l、namoo4·2h2o?0.02g/l、cocl2·6h2o?0.02g/l、h3bo3?0.014g/l、znso4·7h2o0.10g/l，溶劑為去離子水。

8.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述靜息細(xì)胞按如下步驟制備：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種勞倫斯河口假單胞菌YX05及其在降解有機(jī)污染物中的應(yīng)用，本發(fā)明提供的勞倫斯河口假單胞菌YX05取自污水廠污泥，對(duì)于3?氯丙酸等有機(jī)污染物具有高效的降解效果，可以較為完全地把污染物轉(zhuǎn)化為CO2、H2O等無(wú)害物質(zhì)，因而在工業(yè)廢氣廢水的生物凈化中具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：成卓韋,楊笑,陳建孟,王家德,陸朝陽(yáng)
受保護(hù)的技術(shù)使用者：浙江工業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30