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高表達(dá)人乳鐵蛋白的轉(zhuǎn)基因大豆事件HLAF-3及其檢測(cè)方法和應(yīng)用與流程

文檔序號(hào):40574591發(fā)布日期:2025-01-03 11:39閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種高表達(dá)人乳鐵蛋白的轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3,其特征在于,所述轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3包含外源插入序列,所述外源插入序列以seq?id?no:10所示的核苷酸序列為左側(cè)翼區(qū),以seq?id?no:11所示的核苷酸序列為右側(cè)翼區(qū)。

2.如權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3,其特征在于,所述外源插入序列包含兩個(gè)人乳鐵蛋白基因表達(dá)框和一個(gè)耐草甘膦基因表達(dá)框。

3.一種用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3的核酸序列,其特征在于,所述核酸序列包含seq?id?no:1或其互補(bǔ)序列、和/或seq?id?no:2或其互補(bǔ)序列。

4.如權(quán)利要求3所述的核酸序列,其特征在于,所述核酸序列包含seq?id?no:3-8或其互補(bǔ)序列中的一種或多種。

5.如權(quán)利要求3所述的核酸序列,其特征在于,所述核苷酸序列包含seq?id?no:9或其互補(bǔ)序列。

6.一種用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3的特異性引物對(duì),其特征在于,所述引物對(duì)包含第一引物和不同于第一引物的第二引物;所述第一引物包含seq?id?no:9或其互補(bǔ)序列中至少11個(gè)連續(xù)的核苷酸,所述第二引物包含seq?id?no:9或其互補(bǔ)序列中至少11個(gè)連續(xù)的核苷酸。

7.如權(quán)利要求6所述的特異性引物對(duì),其特征在于,所述第一引物核苷酸序列如seq?idno:13或seq?id?no:15所示,所述第二引物核苷酸序列如seq?id?no:12或seq?id?no:14所示。

8.一種檢測(cè)樣品中權(quán)利要求1所述轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3的dna存在的方法,其特征在于,所述方法包括:

9.一種利用權(quán)利要求1所述轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3生產(chǎn)人乳鐵蛋白的方法,其特征在于,所述方法為:種植含特定區(qū)域核苷酸序列的大豆種子,收獲高表達(dá)人乳鐵蛋白的大豆,分離提取得到人乳鐵蛋白;所述特定區(qū)域核苷酸序列來(lái)自轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3,所述特定區(qū)域核苷酸序列包含seq?id?no:1或其互補(bǔ)序列、和/或seq?id?no:2或其互補(bǔ)序列。

10.一種培育含權(quán)利要求1所述轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3的表達(dá)人乳鐵蛋白大豆植物的方法,其特征在于,所述方法包括:將含有特定區(qū)域核苷酸序列的大豆植株與另一種大豆雜交,產(chǎn)生后代植株并收獲,與不含特定區(qū)域核苷酸序列的大豆相比,收獲后代植株中人乳鐵蛋白含量顯著提高的植株;所述特定區(qū)域核苷酸序列來(lái)自轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3,所述特定區(qū)域核苷酸序列包含seq?id?no:1或其互補(bǔ)序列、和/或seq?id?no:2或其互補(bǔ)序列。

11.一種產(chǎn)自權(quán)利要求1轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞,其特征在于,所述轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞是將所述轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3的特定區(qū)域核酸序列轉(zhuǎn)入植物基因組獲得的,所述特定區(qū)域核酸序列包含seq?id?no:1或其互補(bǔ)序列、和/或seq?id?no:2或其互補(bǔ)序列。

12.一種產(chǎn)自權(quán)利要求1轉(zhuǎn)基因大豆事件hlaf-3的農(nóng)產(chǎn)品或加工品,其特征在于,所述農(nóng)產(chǎn)品或加工品包含特定區(qū)域核苷酸序列,所述特定區(qū)域核苷酸序列包含seq?id?no:1或其互補(bǔ)序列、和/或seq?id?no:2或其互補(bǔ)序列;所述加工品包括但不限于:大豆蛋白、大豆粕、大豆粉、大豆坯片、大豆豆皮、大豆干酪、包含大豆的動(dòng)物飼料、以及使用大豆植物及大豆植物部分生產(chǎn)的燃料產(chǎn)品。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種高表達(dá)人乳鐵蛋白的轉(zhuǎn)基因大豆事件HLAF?3及其檢測(cè)方法和應(yīng)用,所述轉(zhuǎn)基因大豆事件HLAF?3同時(shí)表達(dá)人乳鐵蛋白和CP4EPSPS兩種蛋白,具有很高的乳鐵蛋白含量,遺傳穩(wěn)定且對(duì)農(nóng)藝性狀沒(méi)有明顯不良影響;所述表達(dá)CP4EPSPS蛋白的基因cp4epsps僅作為篩選標(biāo)記使用;本發(fā)明還提供了檢測(cè)所述轉(zhuǎn)基因大豆事件HLAF?3的方法,所述方法可快速準(zhǔn)確檢測(cè)出生物樣品中是否含有轉(zhuǎn)基因大豆事件HLAF?3的DNA分子。

技術(shù)研發(fā)人員:余媛美,林海燕,趙宇
受保護(hù)的技術(shù)使用者:安徽美瑞生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/2
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