本發(fā)明屬于生物制藥領(lǐng)域，具體涉及一種提高蛋白聚合物產(chǎn)量的mscs培養(yǎng)工藝。

背景技術(shù)：

1、間充質(zhì)干細(xì)胞(mscs)經(jīng)輻照刺激產(chǎn)生的蛋白聚合物，具有多種活性，特別是具有良好的神經(jīng)修復(fù)功能，對神經(jīng)退行性疾病具有良好的治療作用。在cn2024109443259公開了蛋白聚合物的實驗室制備方法。然而實驗室的制備方法產(chǎn)量極低，成本高昂。

2、蛋白聚合物是由mscs經(jīng)輻照刺激培養(yǎng)后產(chǎn)生的，mscs數(shù)量的增加，有利于得到更多的蛋白聚合物。然而mscs對培養(yǎng)條件較為敏感，如何優(yōu)化培養(yǎng)條件，得到更多的mscs，依然是一種具有挑戰(zhàn)性的工作。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的至少一個不足，提供一種提高蛋白聚合物產(chǎn)量的mscs培養(yǎng)工藝。

2、本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

3、一種提高蛋白聚合物產(chǎn)量的mscs培養(yǎng)工藝，包括如下步驟：

4、間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)蘇、接種；

5、將接種后的間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)入添加有微載體的培養(yǎng)容器中旋轉(zhuǎn)或搖動培養(yǎng)，培養(yǎng)60～108h后無菌轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)袋中；

6、對培養(yǎng)袋轉(zhuǎn)進(jìn)行輻照刺激；

7、刺激完成后，將間充質(zhì)干細(xì)胞裂解，分離純化得到蛋白聚合物。

8、在一些mscs培養(yǎng)工藝的實例中，所述充質(zhì)干細(xì)胞的接種密度為(1.5～5.0)e+5cells/ml或5e+3～5e+4cells/cm2。

9、在一些mscs培養(yǎng)工藝的實例中，所述微載體的用量為2～5g/l。

10、在一些mscs培養(yǎng)工藝的實例中，所述微載體的用量為2～4g/l。

11、在一些mscs培養(yǎng)工藝的實例中，所述旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速在20～30h內(nèi)由40～60rpm逐步提高至70～90rpm。

12、在一些mscs培養(yǎng)工藝的實例中，所述微載體的用量為2～4g/l，所述旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速在24h內(nèi)由40～60rpm逐步提高至70～82rpm。

13、在一些mscs培養(yǎng)工藝的實例中，使用的培養(yǎng)容器為攪拌式反應(yīng)器。

14、在一些mscs培養(yǎng)工藝的實例中，間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)蘇時使用的培養(yǎng)基為完全mscs培養(yǎng)基。

15、在一些mscs培養(yǎng)工藝的實例中，輻照刺激培養(yǎng)時使用的培養(yǎng)基為無血清mscs培養(yǎng)基。

16、在一些mscs培養(yǎng)工藝的實例中，所述間充質(zhì)干細(xì)胞選自臍帶來源人間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞、人胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞。

17、以上特征在不相沖突的情況下，可以任意組合。

18、本發(fā)明的有益效果是：

19、本發(fā)明一些實例的mscs培養(yǎng)工藝，可以獲得更多的mscs，可以純化得到更多的蛋白聚合物。

技術(shù)特征：

1.一種提高蛋白聚合物產(chǎn)量的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述充質(zhì)干細(xì)胞的接種密度為(1.5～5.0)e+5cells/ml或5e+3～5e+4cells/cm2。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述微載體的用量為2～5g/l。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述微載體的用量為2～4g/l。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速在20～30h內(nèi)由40～60rpm逐步提高至70～90rpm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一項所述的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述微載體的用量為2～4g/l，所述旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速在24h內(nèi)由40～60rpm逐步提高至70～82rpm。

7.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一項所述的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，使用的培養(yǎng)容器為攪拌式反應(yīng)器。

8.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一項所述的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)蘇時使用的培養(yǎng)基為完全mscs培養(yǎng)基。

9.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一項所述的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，輻照刺激培養(yǎng)時使用的培養(yǎng)基為無血清mscs培養(yǎng)基。

10.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一項所述的mscs培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述間充質(zhì)干細(xì)胞選自臍帶來源人間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞、人胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物制藥領(lǐng)域，公開了一種提高蛋白聚合物產(chǎn)量的MSCs培養(yǎng)工藝，包括將間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)蘇、接種，轉(zhuǎn)入添加有微載體的培養(yǎng)容器中旋轉(zhuǎn)或搖動培養(yǎng)，培養(yǎng)后無菌轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)袋中；對培養(yǎng)袋轉(zhuǎn)進(jìn)行輻照刺激；刺激完成后，將間充質(zhì)干細(xì)胞裂解，分離純化得到蛋白聚合物。本發(fā)明一些實例的MSCs培養(yǎng)工藝，可以獲得更多的MSCs，可以純化得到更多的蛋白聚合物。

技術(shù)研發(fā)人員：王宇,李付鸞
受保護(hù)的技術(shù)使用者：北京達(dá)爾文細(xì)胞生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9