本發(fā)明屬于中藥提取、分離，尤其涉及馬齒莧中一種二氫異喹啉類生物堿化合物及其提取分離方法與用途。

背景技術(shù)：

1、馬齒莧來源于馬齒莧科植物馬齒莧portulaca?oleracea?l.的干燥地上部分。馬齒莧作為我國傳統(tǒng)中藥已經(jīng)有數(shù)千年的用藥歷史，分布廣泛，資源豐富，具有非常強(qiáng)的適應(yīng)性和頑強(qiáng)的生命力。2020版《中華人民共和國藥典》中收載馬齒莧的干燥地上部分入藥，味酸、寒，歸肝、大腸經(jīng)，具有清熱解毒、涼血止血、止痢的功效，用于熱毒血痢、癰腫疔瘡、濕疹、丹毒、蛇蟲咬傷、便血、痔血、崩漏下血。

2、馬齒莧中含有多種化學(xué)成分，主要包括：生物堿類、黃酮類、有機(jī)酸類、萜類、香豆素類、多糖類、氨基酸類和礦物質(zhì)類等。其中，馬齒莧中生物堿類化合物種類較多，如尿嘧啶、腺嘌呤、去甲腎上腺素、多巴胺、腺苷、n,n-二環(huán)己基脲、馬齒莧酰胺、尿囊素、n-反式-阿魏?；野?、對羥基苯乙胺、oleracein?a-e、oleraindole?a-g、oleraisoindole、portulaceramide?a等。馬齒莧中所含化學(xué)成分與其多樣的藥理作用密切相關(guān)，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，馬齒莧具有抗氧化、神經(jīng)保護(hù)、抗炎、抗菌、抗腫瘤、降血糖、保肝及增強(qiáng)免疫力等作用。馬齒莧中化學(xué)成分種類繁多，藥理活性多樣，對馬齒莧中化合物的開發(fā)和分離可為馬齒莧的深入研究提供基礎(chǔ)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對上述問題，本發(fā)明提供從馬齒莧中提取一種二氫異喹啉類生物堿化合物，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的二氫異喹啉類生物堿具有抗炎活性、抗膽堿酯酶活性和抗氧化活性，同時提供一種針對本發(fā)明化合物的簡便、快速、環(huán)保、純度高的提取分離方法。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種二氫異喹啉類生物堿化合物，分子式為c10h11no3，根據(jù)結(jié)構(gòu)命名為6,7-dihydroxy-3,4-dihydroisoquinoline-2(1h)-carbaldehyde，化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：

3、

4、本發(fā)明還提供二氫異喹啉類生物堿化合物6,7-dihydroxy-3,4-dihydroisoquinoline-2(1h)-carbaldehyde的提取分離方法，包括以下步驟：

5、步驟1：取馬齒莧干燥藥材，采用水煎煮提取，將提取液濃縮，放涼至室溫，得藥液備用。

6、步驟2：將步驟1中濃縮液上大孔樹脂，用水和不同濃度乙醇進(jìn)行洗脫，減壓回收30％乙醇部分至浸膏，得濃縮物備用。

7、步驟3：將步驟2中濃縮物經(jīng)ods柱(octadecylsilyl，十八烷基硅烷鍵合硅膠填料)分離，采用甲醇-水梯度洗脫，經(jīng)薄層色譜檢測，顯色，將30％甲醇洗脫部分合并蒸干，得濃縮物備用。

8、步驟4：將步驟3中所得濃縮物再經(jīng)ods柱層析分離，采用甲醇-水梯度洗脫，經(jīng)薄層色譜進(jìn)行檢測，顯色，將50％甲醇洗脫部分合并蒸干，得濃縮物備用。

9、步驟5：將步驟4中所得濃縮物通過hplc(高效液相)分離制備，以乙腈-0.1％甲酸(體積百分?jǐn)?shù))為流動相進(jìn)行等度洗脫，最終得到本發(fā)明所述的二氫異喹啉類生物堿化合物6,7-dihydroxy-3,4-dihydroisoquinoline-2(1h)-carbaldehyde。

10、進(jìn)一步地，所述步驟1中水煎煮提取兩次，每次2小時，水用量為藥材的8～16倍。

11、進(jìn)一步地，所述步驟2中大孔樹脂為ab-8大孔樹脂，乙醇和水的體積比為30：70、50：50、70：30和100：0洗脫梯度。

12、進(jìn)一步地，所述步驟3中甲醇和水的體積比為10：0、30：70、50：50、70：30和100：0洗脫梯度；ods粒度為40～70μm。

13、進(jìn)一步地，所述步驟4中，甲醇和水的體積比為10：0、30：70、50：50、70：30和100：0洗脫梯度；ods粒度為40～70μm。

14、進(jìn)一步地，所述步驟3和步驟4中ods預(yù)處理過程為：甲醇浸泡24小時，上柱后，用甲醇洗至滴入水中無混濁，再以初始流動相平衡。

15、進(jìn)一步地，所述步驟5中，乙腈-0.1％甲酸體積比為15：85，化合物保留時間為3.979min。

16、本發(fā)明還提供一種如上所述的從馬齒莧藥材中分離出的6,7-dihydroxy-3,4-dihydroisoquinoline-2(1h)-carbaldehyde在制備抗炎藥物、抗膽堿酯酶藥物和抗氧化藥物中的應(yīng)用。

17、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：

18、本發(fā)明中馬齒莧6,7-dihydroxy-3,4-dihydroisoquinoline-2(1h)-carbaldehyde的分離和藥理活性研究未見馬齒莧中報道；本發(fā)明提供來源于馬齒莧的一種二氫異喹啉類生物堿化合物及一種針對本發(fā)明化合物的提取分離方法，依次采用水煎煮提取、大孔樹脂柱層析、ods柱層析及高效液相色譜儀進(jìn)行分離純化與制備，成功提取分離出一種二氫異喹啉類生物堿化合物，該方法操作步驟僅為五步，操作方法簡便快速，采用水進(jìn)行提取，工藝方法環(huán)保，且經(jīng)該方法分離得到的化合物純度較高，大于90％；此外，經(jīng)研究表明以上化合物具有抗炎活性、抗膽堿酯酶活性和抗氧化活性；因此，本發(fā)明分離出的化合物6,7-dihydroxy-3,4-dihydroisoquinoline-2(1h)-carbaldehyde及其鹽和衍生物可以作為藥物開發(fā)和藥理活性研究的原料。

技術(shù)特征：

1.一種從馬齒莧藥材中分離出的二氫喹啉類生物堿化合物，其特征在于，分子式為：c10h11no3，根據(jù)結(jié)構(gòu)式命名為6,7-dihydroxy-3,4-dihydroisoquinoline-2(1h)-carbaldehyde，化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：

2.一種從馬齒莧藥材中分離出的二氫喹啉類生物堿化合物的提取分離方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述提取分離方法，其特征在于，所述步驟1中水煎煮提取兩次，每次2小時，水用量為藥材的8～16倍。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述提取分離方法，其特征在于，所述步驟2中大孔樹脂為ab-8大孔樹脂，乙醇和水的體積比為30：70、50：50、70：30和100：0梯度洗脫。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述提取分離方法，其特征在于，所述步驟3中甲醇和水的體積比為10：0、30：70、50：50、70：30和100：0梯度洗脫；ods粒度為40～70μm。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取分離方法，其特征在于，所述步驟4中甲醇和水的體積比為10：0、30：70、50：50、70：30和100：0梯度洗脫；ods粒度為40～70μm。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取分離方法，其特征在于，所述步驟5中乙腈-0.1%甲酸體積比為15：85，化合物保留時間為3.979min。

8.一種如權(quán)利要求1所述的從馬齒莧藥材中分離出二氫喹啉類生物堿化合物的用途，其特征在于，所述二氫喹啉類生物堿化合物可用于制備抗炎藥物、抗膽堿酯酶藥物和抗氧化藥物或保健品。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于中藥提取、分離技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及從馬齒莧中提取、分離和鑒別出的一種首分二氫喹啉類生物堿化合物及其提取分離方法。所述的首分化合物二氫喹啉類生物堿，分子式為C<subgt;10</subgt;H<subgt;11</subgt;NO<subgt;3</subgt;，命名為6,7?dihydroxy?3,4?dihydroisoquinoline?2(1H)?carbaldehyde。還提供上述首分化合物的提取分離方法，依次采用水煎煮提取、大孔樹脂柱層析、ODS柱層析及高效液相色譜儀進(jìn)行分離純化與制備。其結(jié)構(gòu)采用質(zhì)譜、氫譜、碳譜及二維核磁波譜解析的方法確定為6,7?dihydroxy?3,4?dihydroisoquinoline?2(1H)?carbaldehyde化合物。該首分化合物具有抗炎活性、抗膽堿酯酶活性和抗氧化活性，本發(fā)明首分化合物及其鹽或衍生物可以作為藥物開發(fā)和藥理活性研究的原料。

技術(shù)研發(fā)人員：蘭秀娟,英錫相,趙櫻黛,張曉倩,劉婧
受保護(hù)的技術(shù)使用者：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6