本發(fā)明屬于制藥領域，涉及苯丙酸酯衍生物及其在降糖和腎臟保護中的應用，具體涉及所述衍生物在制備抗糖尿病及其并發(fā)癥等相關藥物中的用途。

背景技術：

糖尿病是一種由內分泌系統(tǒng)紊亂引起的慢性疾病。預計到2030年全世界罹患糖尿病的人數(shù)將由2013年2.85億增加到5.66億。糖尿病病期作用時間長，以高血糖為特征，容易引起其他器官如眼睛、腎臟、血管、心臟等的損害。其具有患病率高、死亡率高、致殘率高、知曉率低、治療率低、控制率低的“三高三低”現(xiàn)象。糖尿病分為1型糖尿病和2型糖尿病。1型臨床上表現(xiàn)為多飲、多尿、多食和消瘦，2型疲乏無力。1型糖尿病多見于青少年，一般年齡小于30歲，2型糖尿病常見于中老年人，人數(shù)占糖尿病患者的70％以上。

現(xiàn)有的磺脲類、噻唑烷二酮類、α-葡萄糖苷酶抑制劑類、dpp-iv抑制劑類、sglt2抑制劑類等降糖藥物研究主要關注降糖作用，對其降脂作用關注較少，目前亟需開展對糖尿病并發(fā)癥、肥胖型糖尿病等具有治療作用的新型糖尿病治療藥物的研發(fā)。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種苯丙酸酯衍生物及其制備方法和應用。

為達到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術方案：

一種苯丙酸酯衍生物，該苯丙酸酯衍生物的結構如式1所示：

其中，r¹為h、oh、och3、異戊烯基、3-甲基丁-2-烯基或烷基(烷基優(yōu)選5個碳原子以下的烷基)；r²為h、oh、och3、異戊烯基、3-甲基丁-2-烯基或烷基(烷基優(yōu)選5個碳原子以下的烷基)；r選自r³為h、ch3、i-pr、t-bu、cf3或och3。

所述r選自

所述苯丙酸酯衍生物的結構如式ⅳ、式ⅴ、式ⅵ或式ⅶ所示：

上述苯丙酸酯衍生物的制備方法，包括以下步驟：

將苯丙酸或苯丙酸衍生物與1-(鹵代甲基)萘衍生物或2-(鹵代甲基)萘衍生物進行縮合反應，然后依次經萃取、洗滌、干燥、柱層析純化，得到苯丙酸酯衍生物。

所述苯丙酸酯衍生物的制備方法具體包括以下步驟：

1)將原料a溶解于有機溶劑中得溶液i，所述原料a為苯丙酸或苯丙酸衍生物；

2)向溶液i中加入堿后，于1-30℃(一般在室溫即可)攪拌0.5～1h，得溶液ii；

3)向溶液ii中依次加入碘鹽以及原料b，得反應液；加入碘鹽與加入原料b之間間隔10～20min，所述原料b為1-(鹵代甲基)萘衍生物或2-(鹵代甲基)萘衍生物，將反應液升溫至40～80℃后反應3～12小時；

4)反應結束后(可冷卻后再萃取，也可以直接進行萃取)，先用飽和氯化鈉水溶液和乙酸乙酯的混合液萃取，混合液中飽和氯化鈉水溶液:乙酸乙酯的體積比為1:1～2:1(混合液用量以1mmol原料a計算，為9～15ml)，對萃取得到的水相繼續(xù)用乙酸乙酯進行萃取(以1mmol原料a計算，每次2～5ml，2～3次)，然后洗滌該萃取得到的有機相，洗滌后無水硫酸鈉干燥，然后旋轉蒸發(fā)除去溶劑得固體粗產物，所述粗產物通過柱層析純化得到苯丙酸酯衍生物。

所述有機溶劑選自非質子性有機溶劑(用量以1mmol原料a計算，為1～2ml)，優(yōu)選含有n的沸點高于水的有機溶劑，例如dmf(二甲基甲酰胺)、dmso(二甲基亞砜)、n-甲基吡咯烷酮(優(yōu)選的原因，1)無活潑h；2)溶劑極性相對較大)；所述堿選自碳酸鹽或碳酸氫鹽；所述碘鹽選自碘化銫、碘化鉀、碘化鈉或碘化鋰。

所述苯丙酸衍生物的結構如式2所示：

其中，r¹為h、oh、och3、異戊烯基、3-甲基丁-2-烯基或烷基(烷基優(yōu)選5個碳原子以下的烷基)，r²為h、oh、och3、異戊烯基、3-甲基丁-2-烯基或烷基(烷基優(yōu)選5個碳原子以下的烷基)；

所述1-(鹵代甲基)萘衍生物或2-(鹵代甲基)萘衍生物的結構如式3所示：

其中，r³為h、ch3、i-pr、t-bu、cf3或och3，x為cl、br或i，并且ch2x-有α和β(即1位和2位)兩種不同的取代基位置，即1-(鹵代甲基)萘衍生物結構為或2-(鹵代甲基)萘衍生物結構為

按物質的量比例計，所述原料a與堿的用量比例為1:1～1:3，原料a與碘鹽的用量比例為1:1～1:4，原料a與原料b的用量比例為1:1～1:3。

所述洗滌的具體步驟為：依次用飽和硫酸銅水溶液(以1mmol原料a計算，每次2.5～10ml，3～6次，去除dmf、dmso、n-甲基吡咯烷酮等)和飽和氯化鈉水溶液(以1mmol原料a計算，每次1.5～6ml，1～2次)對萃取得到的有機相進行洗滌，或者，在未使用含有n的沸點高于水的有機溶劑時，僅使用飽和氯化鈉水溶液(以1mmol原料a計算，每次2～6ml，1～2次)對萃取得到的有機相進行洗滌，去除殘留的水溶性雜質。

所述柱層析中，按照石油醚:乙酸乙酯的體積比＝10:1～2:1進行梯度洗脫，柱層析具體條件為：

柱層析硅膠型號是100～300目；用量為固體粗產物質量的10～100倍；所述粗產物中加入兩倍(質量比)的柱層析硅膠，攪拌均勻后裝柱；

梯度洗脫為：

梯度i,石油醚:乙酸乙酯＝10:1(體積比)，總體積(單位：毫升)為固體粗產物質量(單位：克)的10～20倍；

梯度ii,石油醚:乙酸乙酯＝5:1(體積比)，總體積(單位：毫升)為固體粗產物質量(單位：克)的4～15倍；

梯度iii,石油醚:乙酸乙酯＝2:1(體積比)，總體積(單位：毫升)為固體粗產物質量(單位：克)的5～10倍；

每試管收集4～5ml，tlc(gf254)鑒定同一色譜峰后，收集、合并，-0.08mpa，40℃旋轉蒸發(fā)除去溶劑。

所述總體積對固體粗產物質量的倍數(shù)因制備的苯丙酸酯衍生物具體結構的不同而不同，從而形成上述倍數(shù)范圍。

上述苯丙酸酯衍生物在制備防治糖尿病的藥物、用于輔助治療糖尿病并發(fā)癥的藥物及降糖藥物中的應用。

上述苯丙酸酯衍生物在制備降脂藥物中的應用。

上述苯丙酸酯衍生物在制備防治肥胖型糖尿病及高血脂型糖尿病的藥物中的應用。

本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在：

本發(fā)明所述苯丙酸酯衍生物的合成方法簡單，合成原料易得，通過糖尿病模型動物的體內實驗，驗證了該苯丙酸酯衍生物的顯著的降糖活性，總膽固醇、甘油三脂等生化指標檢測初步證明了該苯丙酸酯衍生物的降脂作用。藥代動力學實驗初步證實了其良好的藥代動力學性質。該苯丙酸酯衍生物可作為藥物活性成分制備抗糖尿病、改善脂代謝及輔助治療糖尿病并發(fā)癥的藥物。

本發(fā)明在現(xiàn)有合成工藝基礎上，優(yōu)化了合成路線和工藝參數(shù)條件、提高了產率，產物容易分離純化，同時擴展了底物的適用范圍，對多種官能團取代的底物均具有較好的適用性。

具體實施方式

下面結合實施例對本發(fā)明作詳細說明。

本發(fā)明合成、篩選了一系列苯丙酸酯衍生物，同時生物活性數(shù)據表明，該類化合物有非常好的體內降糖作用和理想的藥代動力學性質，為其提供新的應用，特別是在醫(yī)藥學方面的應用，具有十分重要的意義。

本發(fā)明所述一系列苯丙酸酯衍生物是以苯丙酸(或苯丙酸衍生物)和1或2-(鹵代甲基)萘衍生物通過縮合反應得到。

該苯丙酸酯衍生物的結構如式i所示：

其中，r¹、r²為h、oh、och3、異戊烯基、3-甲基丁-2-烯基或烷基；r³為h、ch3、i-pr、t-bu、cf3或och3，并且有α和β(即1位和2位)兩種不同的取代基位置。

本發(fā)明采用正常小鼠的ogtt實驗和stz誘導的ii型大鼠糖尿病模型，評價所述苯丙酸酯衍生物對糖尿病模型體內糖代謝的影響，相對于其他評價模型，能夠更加真實的反映糖尿病人的糖代謝環(huán)境；同時，藥代動力學實驗數(shù)據表明，部分化合物有非常好的成藥性。生化測試數(shù)據表明部分化合物亦有明顯的降脂活性，因此該類苯丙酸酯衍生物特別適用于肥胖型糖尿病的進一步研究。

(一)合成實例

實例1二氫咖啡酸-2-萘甲酯(簡稱pn1，如式ii所示)的合成

1)稱取1.10mmol的二氫咖啡酸，溶于1.5mldmso中，加入1.32mmol的na2co3室溫下攪拌0.5h后，依次加入1.10mmol的碘化鉀和1.20mmol的2-(氯甲基)萘。將反應混合物在60℃下攪拌6h(tlc檢測反應結束)。

2)反應結束后冷卻至室溫，加入飽和氯化鈉溶液5ml和乙酸乙酯5ml，混勻后靜置分層；水相用乙酸乙酯萃取兩次(3ml×2次)，合并有機相，然后用飽和硫酸銅溶液洗滌(3ml×4次)，以及飽和氯化鈉溶液洗滌(2ml×2次)，無水硫酸鈉干燥，然后旋轉蒸發(fā)(-0.08mpa，45℃)除去溶劑得固體粗產物。

3)所述粗產物通過柱層析純化，柱層析(所述總體積對固體粗產物質量的倍數(shù)：梯度i為20倍，梯度ii為5倍，梯度iii為5倍)后得二氫咖啡酸-2-萘甲酯(pn1220.4mg,產率65％)。結構鑒定數(shù)據如下：lc-ms:323.1(m+1⁺)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.85(s,2h),8.01-7.90(m,3h),7.61-7.51(m,3h),7.48(t,j＝7.6hz,1h),6.73-6.64(m,2h),6.52(dd,j＝8.2,2.0hz,1h),5.56(s,2h),2.71(d,j＝7.4hz,2h),2.61(d,j＝7.4hz,2h)。

實例2對羥基苯丙酸-1-萘甲酯(簡稱pn2，如式ⅲ所示)的合成

1)稱取1.10mmol的對羥基苯基丙酸，溶于1.5ml丙酮中，加入2.2mmol的nahco3室溫下攪拌1h后，依次加入2.2mmol的碘化鋰和2.2mmol的1-(溴甲基)萘。將反應混合物在40℃下攪拌12h(tlc檢測反應結束)。

2)反應結束后冷卻至室溫，加入飽和氯化鈉溶液10ml和乙酸乙酯5ml，混勻后靜置分層；水相用乙酸乙酯萃取兩次(3ml×2次)，合并有機相，飽和氯化鈉溶液洗滌(2ml×2次)，無水硫酸鈉干燥，然后旋轉蒸發(fā)(-0.08mpa，45℃)除去溶劑得固體粗產物。

3)所述粗產物通過柱層析純化，柱層析(所述總體積對固體粗產物質量的倍數(shù)：梯度i為20倍，梯度ii為5倍，梯度iii為5倍)后得對羥基苯丙酸-1-萘甲酯(pn2229.6mg,產率68％)。結構鑒定數(shù)據如下：lc-ms:307.1(m+1⁺)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.22(s,1h),7.91(dd,j＝8.9,4.0hz,3h),7.83(s,1h),7.53(p,j＝4.9hz,2h),7.43(d,j＝8.4hz,1h),7.01(d,j＝8.1hz,2h),6.65(d,j＝8.0hz,2h),5.24(s,2h),2.78(t,j＝7.4hz,2h),2.66(t,j＝7.4hz,2h)。

實例3二氫咖啡酸-1-萘-(5-異丙基)-甲酯(簡稱pn3，如式ⅳ所示)的合成

1)稱取1.10mmol的二氫咖啡酸，溶于1.5mldmf中，加入3.3mmol的khco3室溫下攪拌1h后，依次加入3.3mmol的碘化鈉和1.20mmol的1-(氯甲基)-(5-異丙基)-萘。將反應混合物在80℃下攪拌3h(tlc檢測反應結束)。

2)反應結束后冷卻至室溫，加入飽和氯化鈉溶液5ml和乙酸乙酯5ml，混勻后靜置分層；水相用乙酸乙酯萃取兩次(3ml×2次)，合并有機相，然后用飽和硫酸銅溶液洗滌(4ml×4次)，以及飽和氯化鈉溶液洗滌(2ml×2次)，無水硫酸鈉干燥，然后旋轉蒸發(fā)(-0.08mpa，45℃)除去溶劑得固體粗產物。

3)所述粗產物通過柱層析純化，柱層析(所述總體積對固體粗產物質量的倍數(shù)：梯度i為20倍，梯度ii為10倍，梯度iii為5倍)后得二氫咖啡酸-1-萘-(5-異丙基)-甲酯(pn3180.6mg,產率45％)。結構鑒定數(shù)據如下：lc-ms:365.2(m+1⁺)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.94(s,1h),8.88(s,1h),7.92(m,3h),7.80(s,1h),7.54(m,1h),7.45(d,j＝8.3hz,1h),6.66(m,2h),6.53(d,j＝8.3,1h),5.53(s,2h),3.19(m,1h),2.72(d,j＝7.4hz,2h),2.60(d,j＝7.4hz,2h),1.36(d,j＝8.0hz,6h)。

實例43-(3-甲氧基-4-羥基苯基)-丙酸-2-萘-(5-甲基)-甲酯(簡稱pn4，如式ⅴ所示)的合成

1)稱取1.10mmol的3-(3-甲氧基-4-羥基苯基)-丙酸，溶于2mldmso中，加入1.1mmol的li2co3室溫下攪拌1h后，依次加入4.4mmol的碘化銫和2.2mmol的2-(氯甲基)-(5-甲基)-萘。將反應混合物在60℃下攪拌10h(tlc檢測反應結束)。

2)反應結束后冷卻至室溫，加入飽和氯化鈉溶液5ml和乙酸乙酯8ml，混勻后靜置分層；水相用乙酸乙酯萃取兩次(3ml×2次)，合并有機相，然后用飽和硫酸銅溶液洗滌(3ml×3次)，以及飽和氯化鈉溶液洗滌(2ml×2次)，無水硫酸鈉干燥，然后旋轉蒸發(fā)(-0.08mpa，45℃)除去溶劑得固體粗產物。

3)所述粗產物通過柱層析純化，柱層析(所述總體積對固體粗產物質量的倍數(shù)：梯度i為15倍，梯度ii為10倍，梯度iii為10倍)后得3-(3-甲氧基-4-羥基苯基)-丙酸-2-萘-(5-甲基)-甲酯(pn4201mg,產率52％)。結構鑒定數(shù)據如下：lc-ms:351.2(m+1⁺)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.10(s,1h),8.03-7.93(m,3h),7.64-7.53(m,2h),7.46(t,j＝7.6hz,1h),6.84(d,j＝2hz,1h),6.65(m,2h),5.25(s,2h),3.83(s,3h),2.90(d,j＝7.4hz,2h),2.69(d,j＝7.4hz,2h),2.53(s,3h)。

實例53-(4-羥基-3,5-二異戊烯基苯基)-丙酸-1-萘-(5-三氟甲基)-甲酯(簡稱pn5，如式ⅵ所示)的合成

1)稱取1.10mmol的3-(4-羥基-3,5-二異戊烯基苯基)-丙酸，溶于2mln-甲基吡咯烷酮中，加入1.8mmol的cs2co3室溫下攪拌1h后，依次加入1.20mmol的碘化銫和3.20mmol的1-(氯甲基)-(5-三氟甲基)-萘。將反應混合物在60℃下攪拌8h(tlc檢測反應結束)。

2)反應結束后冷卻至室溫，加入飽和氯化鈉溶液5ml和乙酸乙酯5ml，混勻后靜置分層；水相用乙酸乙酯萃取兩次(3ml×2次)，合并有機相，然后用飽和硫酸銅溶液洗滌(3ml×4次)，以及飽和氯化鈉溶液洗滌(2ml×2次)，無水硫酸鈉干燥，然后旋轉蒸發(fā)(-0.08mpa，45℃)除去溶劑得固體粗產物。

3)所述粗產物通過柱層析純化，柱層析(所述總體積對固體粗產物質量的倍數(shù)：梯度i為20倍，梯度ii為10倍，梯度iii為5倍)后得3-(4-羥基-3,5-二異戊烯基苯基)-丙酸-1-萘-(5-三氟甲基)-甲酯(pn5400mg,產率71％)。結構鑒定數(shù)據如下：lc-ms:511.2(m+1⁺)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.06(s,1h),8.03-7.98(m,2h),7.69-7.49(m,3h),7.43(t,j＝7.6hz,1h),6.83-6.73(m,2h),5.55(s,2h),5.29-5.34(m,2h),3.21(d,j＝7.2hz,4h),2.92(d,j＝7.4hz,2h),2.71(d,j＝7.4hz,2h),1.79(s,6h),1.77(s,6h)。

實例63-(4-羥基-3-異戊烯基苯基)丙酸-1-萘-(5-甲氧基)-甲酯(簡稱pn6，如式ⅶ所示)的合成

1)稱取1.10mmol的3-(4-羥基-3-異戊烯基苯基)丙酸，溶于1.5mldmso中，加入1.32mmol的khco3室溫下攪拌1h后，依次加入1.20mmol的碘化銫和2.60mmol的1-(氯甲基)-(5-甲氧基)-萘。將反應混合物在50℃下攪拌5h(tlc檢測反應結束)。

2)反應結束后冷卻至室溫，加入飽和氯化鈉溶液5ml和乙酸乙酯10ml，混勻后靜置分層；水相用乙酸乙酯萃取兩次(3ml×2次)，合并有機相，然后用飽和硫酸銅溶液洗滌(3ml×4次)，以及飽和氯化鈉溶液洗滌(2ml×2次)，無水硫酸鈉干燥，然后旋轉蒸發(fā)(-0.08mpa，45℃)除去溶劑得固體粗產物。

3)所述粗產物通過柱層析純化，柱層析(所述總體積對固體粗產物質量的倍數(shù)：梯度i為15倍，梯度ii為15倍，梯度iii為5倍)后得3-(4-羥基-3-異戊烯基苯基)丙酸-1-萘-(5-甲氧基)-甲酯(pn6187.1mg,產率42％)。結構鑒定數(shù)據如下：lc-ms:405.2(m+1⁺)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.19(s,1h),7.75-7.54(m,2h),7.20-7.09(m,2h),6.92-6.82(m,2h),6.83-6.73(m,2h),6.64(s,1h),5.51(s,2h),5.32(m,1h),3.80(s,3h),3.21(d,j＝7.2hz,2h),2.91(d,j＝7.4hz,2h),2.70(d,j＝7.4hz,2h),1.79(s,3h),1.77(s,3h)。

(二)正常小鼠的口服葡萄糖耐量試驗

測定方法參考文獻報道的標準方法，簡述為：實驗前雌雄各半的c57bl/6小鼠禁食12h，以2g/kg(濃度為0.4g/ml)體重量的葡萄糖劑量灌胃，葡萄糖灌胃前30min給藥(灌胃給藥)。用血糖儀分別在葡萄糖灌胃后0、0.5、1、1.5、2h測定血糖(bg)。每組實驗動物7只，共56只。

給藥方式

(1)空白組：與其他組等體積生理鹽水(20ml/kg)；

(2)pn組(給藥苯丙酸酯衍生物組，pn1-pn6摩爾濃度相同，生理鹽水溶解，少量dmso助溶)：按照20μmol/kg灌胃給藥；

(3)陽性組：二甲雙胍溶解于超純水中，終濃度是10g/l，按照20μmol/kg灌胃給藥；

尾靜脈采血，逸動型羅氏血糖儀測定；每組實驗數(shù)據取平均值。

測試結果及數(shù)據分析(結果見表1)表明：(1)相較于空白組，pn組均可不同程度的降低血糖；(2)與陽性組相比，上述實例所制備的苯丙酸酯衍生物的降糖能力略低于或接近二甲雙胍，其中pn5和pn6的降糖能力與二甲雙胍非常接近。

因此對于正常小鼠模型，所制備的苯丙酸酯衍生物具有明顯的降糖能力。

表1.正常小鼠的口服葡萄糖耐量實驗結果

(三)stz誘導大鼠的糖尿病模型及藥物的降糖作用

模型構建及藥物篩選方法參考文獻報道的標準方法，簡述為：取sd鼠，抽簽法分為模型組和正常對照組。模型組禁食不禁水12h后左下腹腔注射stz40mg/kg(0.01mol/l，ph4.2枸櫞酸緩沖液為溶劑)，1次/d，連續(xù)5d。正常對照組禁食不禁水12h后腹腔注射等體積量枸櫞酸緩沖液，1次/d，連續(xù)5d。最后一次注射后1周內，每天斷尾取血測量血糖。連續(xù)3d血糖>16.7mmol/l者為糖尿病大鼠，第4天進行藥物篩選實驗。

藥物篩選實驗：取建模成功的大鼠，禁食12h，以2g/kg(濃度為0.4g/ml)體重量的葡萄糖劑量灌胃，同時灌胃給藥。用血糖儀分別在給藥后0、0.5、1、1.5、2h測定血糖(bg)；用藥時曲線下面積(auc)來反映糖耐量。

給藥方式

(1)空白對照組(簡稱空白組)：與其他組等體積的生理鹽水(20ml/kg)；這個組與正常對照組不同，空白對照組也是模型動物，但不給藥，只給生理鹽水。

(2)苯丙酸酯衍生物實驗組(簡稱pn組，pn2-pn5濃度相同)：衍生物按照20μmol/kg灌胃給藥；

(3)陽性對照藥物組(簡稱陽性組)：二甲雙胍溶解于超純水中，終濃度是10g/l，按照20μmol/kg灌胃給藥；

每組實驗動物5只，血糖測定及數(shù)據處理方法同(二)。

測試結果及數(shù)據分析(結果見表2)表明：stz誘導的sd大鼠糖尿病模型中pn5和pn6的降糖能力略高于二甲雙胍，其對體內血糖的調節(jié)更加平緩，有利于進一步的抗糖尿病藥物臨床前研究。

表2.stz誘導的sd大鼠糖尿病模型結果

(四)降脂生化檢測

模型構建及藥物篩選方法參考文獻報道的標準方法，簡述為：取昆明小鼠42只，抽簽法分為模型組(n＝28)和空白對照組(n＝7)。模型組均以高脂高糖飼料飼喂，飼喂量為：小鼠自由取食，一天6g左右，不限飲水。高脂高糖飼料的組分及質量配比如下：豬油18％、蔗糖20％、雞蛋黃3％以及實驗小鼠日常維持型飼料59％。8周喂養(yǎng)后，對各組小鼠禁食12小時，全自動生化分析儀(hitachi7600)測定甘油三脂(tg)、總膽固醇(tc)、高密度脂蛋白(hdl-c)、低密度脂蛋白(ldl-c)。

給藥方式如下：

(1)空白對照組：喂養(yǎng)正常飼料，同時灌胃給藥與其他組等體積生理鹽水(20ml/kg)；

(2)模型對照組：喂養(yǎng)高脂高糖飼料，同時灌胃給藥與其他組等體積生理鹽水(20ml/kg)；

(3)保護組(pn5和pn6組)：喂養(yǎng)高脂高糖飼料，同時灌胃給藥(生理鹽水溶解，5％吐溫80助溶)，劑量20μmol/kg/day，共8周；

(4)陽性組：喂養(yǎng)高脂高糖飼料，阿托伐他汀(lipitor)溶解于超純水中，dmso助溶，終濃度是10mg/ml，同時灌胃給藥，劑量20μmol/kg/day；

表3.降脂模型小鼠的生化檢測結果

測試結果及數(shù)據分析(結果見表3)

(1)相較于模型組，pn5和pn6組對血脂的各項生化指標均有保護作用，可有效降脂；其中，tg的含量可基本降至正常水平；相對于阿托伐他汀，其對tc有更好的正常化效果；

(2)相較于模型組，pn5和pn6組對ldl-c均有非常好的保護作用，可大幅降低ldl-c的含量；同時對hdl-c的保護作用基本相同。

pn1～pn4的降脂效果，劣于pn5和pn6。

本發(fā)明公開的苯丙酸酯衍生物，通過正常小鼠的ogtt及stz誘導的大鼠糖尿病模型，顯示該衍生物有顯著的降糖活性，且能夠劑量依賴的降低糖尿病模型大鼠的血糖，同時對高脂型糖尿病小鼠有一定的保護作用，證實了該衍生物的降糖作用和降脂作用，可制備糖尿病特別是肥胖型糖尿病的相關藥物。

(五)藥代動力學實驗

藥代動力學實驗采用文獻報道的方法，簡述為：取stz建模成功的糖尿病大鼠，灌胃給藥pn6(5mg/kg)；0min、15min、30min、45min、60min、90min、120min、150min取血，150μl血漿加入600μl甲醇除蛋白，spe純化后，uplc-ms/ms檢測樣品中的pn6血藥濃度(mrm掃描模式，離子對405.2-188.1m/z)，兩室模式預測藥代動力學性質(表4)。

表4.pn6的藥代動力學性質(5mg/kg灌胃給藥)

初步的藥代動力學實驗表明，化合物pn6的體內半衰期為19.3h，血漿清除率較低，為17.2l/h/kg，藥代動力學性質理想，成藥性較好。

本發(fā)明所制備的苯丙酸酯衍生物具有顯著的降糖作用，相較于臨床所用降糖藥物，即便其降糖能力總體略低于二甲雙胍，但是，對原有的高血糖現(xiàn)象有一定的緩解作用。本發(fā)明所制備的苯丙酸酯衍生物可作為預防和治療糖尿病藥物的先導化合物。

通過降糖的模型及降脂實驗，初步篩選出了化合物pn6，在實驗條件下降糖的同時，還有一定的降脂作用，且其成藥性較好，可以作為降糖藥物，特別是針對高血脂型糖尿病的先導化合物。