本實(shí)用新型涉及細(xì)胞清洗裝置技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種活細(xì)胞清洗裝置。

背景技術(shù)：

細(xì)胞生物學(xué)是現(xiàn)代生物學(xué)的重要組成部分，在基礎(chǔ)研究與應(yīng)用研究中均發(fā)揮著重要的作用。采用細(xì)胞生物學(xué)的方法，研究者可以高效地研究目標(biāo)分子、細(xì)胞的基本功能，以及生物學(xué)機(jī)理，也可以在細(xì)胞中進(jìn)行藥物的有效性與毒性的測(cè)試。因此，細(xì)胞是生命科學(xué)研究以及產(chǎn)品開發(fā)過程中的重要材料。

細(xì)胞的體外培養(yǎng)是細(xì)胞生物學(xué)研究的基礎(chǔ)，細(xì)胞培養(yǎng)的本質(zhì)就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆。通過細(xì)胞培養(yǎng)能夠得到大量的細(xì)胞或其代謝產(chǎn)物。因?yàn)樯锂a(chǎn)品都是從細(xì)胞得來，所以可以說細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物技術(shù)中最核心、最基礎(chǔ)的技術(shù)。由于體外培養(yǎng)的細(xì)胞，沒有免疫系統(tǒng)的保護(hù)，在與外界發(fā)生物質(zhì)交換的時(shí)候，易受各種微生物的污染，如細(xì)菌、霉菌、真菌、支原體、黑膠蟲、原蟲等。當(dāng)出現(xiàn)污染時(shí)，細(xì)胞與微生物之間就會(huì)存在競(jìng)爭(zhēng)，這些微生物的代謝遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于培養(yǎng)的細(xì)胞，細(xì)胞會(huì)處于弱勢(shì)，其生長(zhǎng)和代謝都會(huì)受到很大的影響，最終會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的死亡。所以，細(xì)胞一旦出現(xiàn)污染而得不到控制，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)就會(huì)前功盡棄，造成巨大的時(shí)間和資金損失。

為了防止污染，細(xì)胞培養(yǎng)用的所有試劑和材料，都需要經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌消毒。并且，在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中，往往會(huì)在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加一定的抗生素，如最常見的青霉素和鏈霉素，以防止可能出現(xiàn)的污染。但是，如果實(shí)驗(yàn)環(huán)境達(dá)不到要求，飄散在空氣中的微生物很有可能會(huì)污染細(xì)胞。培養(yǎng)基中的預(yù)先添加的抗生素，也只能對(duì)很少種類的微生物有抑制效果，如革蘭氏陽性細(xì)菌和鏈霉菌，對(duì)大多數(shù)的無明顯作用。因此，傳統(tǒng)的方法對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的生物污染并無有效的解決辦法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本實(shí)用新型提供一種活細(xì)胞清洗裝置，能夠?qū)ε囵B(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行持續(xù)性的長(zhǎng)時(shí)間清洗，從而達(dá)到去除細(xì)胞中的污染物的目的，并且不會(huì)對(duì)細(xì)胞的活性造成影響。

本實(shí)用新型通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種活細(xì)胞清洗裝置，包括用于儲(chǔ)存細(xì)胞清洗液的儲(chǔ)存瓶，前后開口的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，收集瓶，和真空泵，上述儲(chǔ)存瓶出口處設(shè)有用于調(diào)節(jié)流速的調(diào)節(jié)閥、瓶口處設(shè)有通氣管，上述儲(chǔ)存瓶和上述細(xì)胞培養(yǎng)瓶之間通過第一導(dǎo)管連接，上述細(xì)胞培養(yǎng)瓶和上述收集瓶之間通過第二導(dǎo)管連接，上述收集瓶和上述真空泵之間通過第三導(dǎo)管連接。

進(jìn)一步地，還包括用于給細(xì)胞加熱的溫控裝置。

進(jìn)一步地，上述溫控裝置是溫控?zé)崤_(tái)。

進(jìn)一步地，上述溫控?zé)崤_(tái)調(diào)節(jié)臺(tái)面溫度范圍為30℃～42℃。

進(jìn)一步地，在上述通氣管上設(shè)有過濾器，上述過濾器上設(shè)有多個(gè)過濾孔。

進(jìn)一步地，上述過濾孔的孔徑為0.22μm。

進(jìn)一步地，在上述第三導(dǎo)管上設(shè)有過濾器，上述過濾器上設(shè)有多個(gè)過濾孔。

進(jìn)一步地，上述過濾孔的孔徑為0.22μm。

進(jìn)一步地，上述真空泵為微型臺(tái)式真空泵。

進(jìn)一步地，上述微型臺(tái)式真空泵能夠產(chǎn)生的最大負(fù)壓大于0.05兆帕。

本實(shí)用新型通過采用清洗液對(duì)細(xì)胞進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的持續(xù)清洗，去除細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染，使得珍貴的細(xì)胞資源得以挽救。此外，由于該裝置采用自動(dòng)化過程，無需人為操作，可大大節(jié)省人力。而且，在清洗的過程中，細(xì)胞置于熱臺(tái)之上，能夠提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的熱量，所以對(duì)細(xì)胞的活性無影響。并且，清洗液置于過濾器之間，清洗液通過過濾或高溫滅菌可重復(fù)利用，可以大大節(jié)省試劑消耗。

附圖說明

圖1為本實(shí)用新型一種實(shí)施方案的活細(xì)胞清洗裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。

附圖標(biāo)記說明：

1：儲(chǔ)存瓶；

2：調(diào)節(jié)閥；

3：通氣管；

4：第一導(dǎo)管；

5：細(xì)胞培養(yǎng)瓶；

6：溫控?zé)崤_(tái)；

7：第二導(dǎo)管；

8：收集瓶；

9：第三導(dǎo)管；

10：真空泵。

具體實(shí)施方式

為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本實(shí)用新型，并不用于限定本實(shí)用新型。

參見圖1，本實(shí)用新型的實(shí)施例提供了一種活細(xì)胞清洗裝置，用于去除培養(yǎng)細(xì)胞中常見的生物污染，其包括：用于儲(chǔ)存細(xì)胞清洗液的儲(chǔ)存瓶1以及儲(chǔ)存瓶1出口處用于調(diào)節(jié)流速的調(diào)節(jié)閥2和瓶口處的通氣管3，前后開口的細(xì)胞培養(yǎng)瓶5，儲(chǔ)存瓶1和細(xì)胞培養(yǎng)瓶5之間通過第一導(dǎo)管4連接；還包括用于給細(xì)胞加熱的溫控?zé)崤_(tái)6(溫控裝置的一種具體形式)，收集瓶8，細(xì)胞培養(yǎng)瓶5和收集瓶8之間通過第二導(dǎo)管7連接，以及真空泵10，收集瓶8和真空泵10之間通過第三導(dǎo)管9連接。

開始細(xì)胞清洗之前，所有用到的器具，包括儲(chǔ)存瓶1、細(xì)胞培養(yǎng)瓶5、收集瓶8、調(diào)節(jié)閥2、通氣管3、第一導(dǎo)管4和第三導(dǎo)管9都需經(jīng)滅菌處理，保證實(shí)驗(yàn)器具潔凈無菌。細(xì)胞以20％～40％的匯合度接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶5，待細(xì)胞貼壁后，將細(xì)胞培養(yǎng)瓶5從培養(yǎng)箱中取出，置于超凈工作臺(tái)的溫控?zé)崤_(tái)6上，將細(xì)胞培養(yǎng)瓶5的兩個(gè)開口分別通過第一導(dǎo)管4和第二導(dǎo)管7連接于儲(chǔ)存瓶1和收集瓶8。儲(chǔ)存瓶1中注入一定量的清洗液，清洗液可為PBS或細(xì)胞培養(yǎng)基及其它，調(diào)節(jié)閥2處于關(guān)閉狀態(tài)。收集瓶8通過第三導(dǎo)管9與真空泵10相連，并將真空泵10與電源相連接。

裝置連接完成之后，打開溫控?zé)崤_(tái)6，調(diào)節(jié)溫度至36.5℃～37.5℃。緩緩打開調(diào)節(jié)閥2，并打開真空泵10的電源。調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)閥2，使清洗液的流速控制在1～5mL/min。根據(jù)細(xì)胞中污染的程度，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行2h以上的持續(xù)清洗。清洗結(jié)束后，用封口膜將細(xì)胞培養(yǎng)瓶5的兩個(gè)開口封嚴(yán)，并將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。后續(xù)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行觀察，若再次發(fā)現(xiàn)污染，則對(duì)細(xì)胞進(jìn)行第二輪清洗，步驟如上所述。

為節(jié)省清洗過程中清洗液(如細(xì)胞培養(yǎng)基)的使用，取出收集瓶8，將其中的收集液進(jìn)行過濾，即可將過濾液作為清洗液重新使用。

為避免空氣中的污染物進(jìn)一步地污染清洗液或收集液，在儲(chǔ)存瓶1瓶口處的通氣管3設(shè)有過濾器，同時(shí)真空泵10的第三導(dǎo)管9上設(shè)有過濾器。過濾器上設(shè)有多個(gè)過濾孔，過濾孔的孔徑為0.22μm。0.22μm的孔徑，即可允許空氣進(jìn)入儲(chǔ)存瓶1，途經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)瓶5和收集瓶8，最終經(jīng)真空泵10抽出，也可以避免空氣中的污染物進(jìn)入裝置中。當(dāng)然，本實(shí)用新型還可以采用其他結(jié)構(gòu)的過濾器實(shí)現(xiàn)上述功能，其不以本實(shí)施例為限。

作為本實(shí)用新型的一種實(shí)施方式，采用自動(dòng)化設(shè)計(jì)，能夠持續(xù)地長(zhǎng)時(shí)間對(duì)細(xì)胞進(jìn)行清洗。溫控?zé)崤_(tái)6能夠精確地調(diào)節(jié)溫度，提供細(xì)胞生長(zhǎng)代謝所需要的熱量。真空泵10可以采用微型臺(tái)式真空泵，能夠產(chǎn)生的最大負(fù)壓大于0.05兆帕，功率連續(xù)可調(diào)，保證清洗液及時(shí)被抽出。因此，自動(dòng)化的設(shè)計(jì)大大地節(jié)省了人力。

本實(shí)施例所提供的活細(xì)胞清洗裝置使用時(shí)包括以下步驟：將細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶5，待細(xì)胞貼壁后取出培養(yǎng)瓶置于溫控?zé)崤_(tái)6上，并打開溫控?zé)崤_(tái)6的開關(guān)，調(diào)節(jié)溫度至36.5℃～37.5℃；在儲(chǔ)存瓶1中加入適量清洗液，按照?qǐng)D1連接好各個(gè)部件；打開調(diào)節(jié)閥2，使清洗液緩緩流入細(xì)胞培養(yǎng)瓶5，流速控制在1～5mL/min；打開真空泵10，調(diào)節(jié)功率，保持清洗液穩(wěn)定沒過細(xì)胞1～3mm；細(xì)胞持續(xù)清洗2h以上；清洗結(jié)束后，關(guān)掉真空泵10和調(diào)節(jié)閥2，拆下各個(gè)部件，用封口膜封閉細(xì)胞培養(yǎng)瓶5的兩個(gè)開口。以上步驟可完成對(duì)被細(xì)菌、霉菌、黑膠蟲等微生物污染的貼壁細(xì)胞的清洗。

以上內(nèi)容是結(jié)合具體的實(shí)施方式對(duì)本實(shí)用新型所作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本實(shí)用新型的具體實(shí)施只局限于這些說明。對(duì)于本實(shí)用新型所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本實(shí)用新型構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。