本發(fā)明涉及一種高含量甘露聚糖酵母培養(yǎng)物的生產(chǎn)方法，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

酵母培養(yǎng)物通常是指釀酒酵母菌在特定工藝和營養(yǎng)條件下經(jīng)過充分發(fā)酵獲得的復(fù)合培養(yǎng)物，該培養(yǎng)物主要有三部分組成：酵母菌體、酵母代謝產(chǎn)物、變性的營養(yǎng)基質(zhì)，這些組分中富含甘露聚糖、葡聚糖、氨基酸、B族維生素、核酸等有效成分和部分未知功能因子。作為功能型飼料原料，酵母培養(yǎng)物具有顯著的抗病、增產(chǎn)的功效，可以向動(dòng)物消化道內(nèi)微生物提供營養(yǎng)物質(zhì)，從而激發(fā)它們的代謝活性和穩(wěn)定體內(nèi)微生態(tài)環(huán)境，與抗生素類添加劑相比，具有綠色天然、無毒副作用以及適口性好、營養(yǎng)豐富等優(yōu)點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖領(lǐng)域。

酵母培養(yǎng)物的功能及其機(jī)制主要為：改善胃腸道菌群落結(jié)構(gòu)，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能；補(bǔ)充營養(yǎng)，改善消化功能，提高機(jī)體免疫力及抗病力。

甘露聚糖是酵母培養(yǎng)物的關(guān)鍵功能因子，它能顯著增加動(dòng)物體液免疫和細(xì)胞免疫能力，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，結(jié)合吸附外源性病原菌，選擇性吸附細(xì)菌毒素，并具有抗輻射、抗氧化、抗腫瘤等活性功能。鑒于此，2013年12月19日農(nóng)業(yè)部發(fā)布第2038號(hào)公告，將“釀酒酵母培養(yǎng)物”從《飼料添加劑品種目錄》轉(zhuǎn)入《飼料原料目錄》，并將甘露聚糖作為該產(chǎn)品強(qiáng)制性標(biāo)識(shí)要求指標(biāo)，甘露聚糖對釀酒酵母培養(yǎng)物的重要性可見一斑。

甘露聚糖位于酵母細(xì)胞壁外側(cè)，酵母細(xì)胞壁是典型的三明治結(jié)構(gòu)，中間夾層是由蛋白質(zhì)組成，兩側(cè)分別是由甘露聚糖和β-葡聚糖以及小部分幾丁質(zhì)、磷脂和纖維類物質(zhì)致密締結(jié)成立體空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，酵母甘露聚糖約占酵母干重的10-20％。酵母甘露聚糖的含量受外部環(huán)境的顯著影響，劉紅芝等在研究中發(fā)現(xiàn)甘露聚糖含量受到酵母培養(yǎng)營養(yǎng)因素的制約；倪靖岳等在研究中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)條件顯著影響甘露聚糖的含量。

雖然甘露聚糖是酵母培養(yǎng)物的關(guān)鍵功能因子，但是酵母培養(yǎng)物生產(chǎn)技術(shù)相關(guān)文獻(xiàn)中卻鮮有報(bào)道，當(dāng)前酵母培養(yǎng)物的技術(shù)研發(fā)主要集中于廉價(jià)底物的選擇上，歸根結(jié)底主要是為了降低成本、變廢為寶，如中國專利(申請?zhí)枺?01410076270.0)報(bào)道了以黃酒糟為基質(zhì)進(jìn)行酵母培養(yǎng)物的制備；而中國專利(申請?zhí)枺?01510319359.X)報(bào)道了以白酒糟為基質(zhì)進(jìn)行濕態(tài)酵母培養(yǎng)物的移動(dòng)發(fā)酵；此外，中國專利(申請?zhí)枺?01510578518.8)報(bào)道了以混合糟渣為原料進(jìn)行酵母培養(yǎng)物的發(fā)酵生產(chǎn)。

釀酒酵母是兼性菌，可適應(yīng)各種培養(yǎng)環(huán)境，但在不同環(huán)境中其底物轉(zhuǎn)化和產(chǎn)物代謝途徑不盡相同，為了使酵母培養(yǎng)物經(jīng)過充分發(fā)酵，發(fā)酵過程通常融合液態(tài)-固態(tài)發(fā)酵、好氧-厭氧發(fā)酵等多種培養(yǎng)模式。如何在多種培養(yǎng)模式融合的發(fā)酵過程中，通過調(diào)控工藝參數(shù)來提高甘露聚糖含量對于酵母培養(yǎng)物的生產(chǎn)技術(shù)創(chuàng)新具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是提供一種高含量甘露聚糖酵母培養(yǎng)物的生產(chǎn)方法，使用該工藝生產(chǎn)的酵母培養(yǎng)物中甘露聚糖含量達(dá)到4.0～4.5％，水溶性蛋白達(dá)到7％～9％。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

一種高含量甘露聚糖酵母培養(yǎng)物的生產(chǎn)方法，包括以下步驟：

步驟a、釀酒酵母種子液的制備：挑取斜面保藏的釀酒酵母菌種1～2環(huán)，接種至種子培養(yǎng)基中，于搖床振蕩培養(yǎng)，得到釀酒酵母種子液；

步驟b、釀酒酵母液態(tài)高密度培養(yǎng)：將釀酒酵母種子液接種至裝有液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的反應(yīng)罐中于中溫、弱酸環(huán)境下培養(yǎng)；

步驟c、高含量甘露聚糖釀酒酵母低溫和雙氧水脅迫培養(yǎng)：降低反應(yīng)罐的反應(yīng)溫度，同時(shí)將15％～25％質(zhì)量濃度的雙氧水勻速流加至反應(yīng)罐內(nèi)，至反應(yīng)罐內(nèi)雙氧水的終濃度達(dá)到6～10mmol/L，然后繼續(xù)培養(yǎng)若干小時(shí)，得到發(fā)酵培養(yǎng)液；

步驟d、釀酒酵母固態(tài)厭氧培養(yǎng)：將發(fā)酵培養(yǎng)液與固態(tài)培養(yǎng)基按照一定重量比混合，得到混合物，然后將混合物轉(zhuǎn)移至固態(tài)發(fā)酵箱于密閉不通氣狀態(tài)下厭氧培養(yǎng)，得到培養(yǎng)物；

步驟e、低溫烘干：將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至干燥裝置中，采用低溫?zé)犸L(fēng)將培養(yǎng)物進(jìn)行烘干，得到干燥酵母培養(yǎng)物；

步驟f、粉碎及包裝：將干燥酵母培養(yǎng)物粉碎、封裝成袋，避光存放于陰涼干燥處。

本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)在于：步驟a中釀酒酵母菌種為CICC1355，釀酒酵母菌種的種子培養(yǎng)基各組份及其重量百分比為：0.5～1％酵母浸膏、0.5～1％蛋白胨、0.5～1％豆粕粉、蔗糖1～2％，其余為純化水。

本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)在于：步驟a中搖床振蕩培養(yǎng)的溫度為30～32℃、振蕩轉(zhuǎn)速為200～250rpm、振蕩培養(yǎng)時(shí)間為16～18h。

本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)在于：所述步驟b中釀酒酵母的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基各組份及其重量百分比為：0.5～1％蛋白胨，1.5～2％豆粕粉、1～1.5％玉米粉、糖蜜2～4％，其余為純化水。

本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)在于：步驟b中反應(yīng)罐內(nèi)反應(yīng)溫度為30～32℃、pH為5.0～6.0、攪拌轉(zhuǎn)速為150～250rpm、通氣速率為0.5～1.0vvm、培養(yǎng)時(shí)間為18～20h。

本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)在于：步驟c中將反應(yīng)罐內(nèi)反應(yīng)溫度降低至24～26℃，同時(shí)通過蠕動(dòng)泵將雙氧水勻速流加至反應(yīng)罐內(nèi)；繼續(xù)培養(yǎng)時(shí)間為4～6小時(shí)。

本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)在于：步驟d中發(fā)酵培養(yǎng)液與固態(tài)培養(yǎng)基的重量混合比為3:6～3:8，固態(tài)培養(yǎng)基的各組份及其重量百分比為：15～35％豆粕粉、5～10％玉米粉、55～80％小麥麩皮。

本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)在于：步驟d中固態(tài)發(fā)酵箱厭氧培養(yǎng)時(shí)間為24～28小時(shí)，固態(tài)發(fā)酵箱中固態(tài)發(fā)酵室的溫度為30～32℃。

本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)在于：步驟e中低溫?zé)犸L(fēng)的溫度為50℃～70℃，干燥酵母培養(yǎng)物的含水量為13％以下，干燥酵母培養(yǎng)物甘露聚糖含量達(dá)到4～4.5％，水溶性蛋白達(dá)到7％～9％。

本發(fā)明技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)在于：步驟f中使用粉碎機(jī)將干燥酵母培養(yǎng)物粉碎成40～60目粒度，包裝機(jī)進(jìn)行封裝成袋，包裝量為10～50Kg/袋。

由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明取得的技術(shù)進(jìn)步是：

本發(fā)明的目的是提供一種高含量甘露聚糖酵母培養(yǎng)物的生產(chǎn)方法。整個(gè)生產(chǎn)過程采用了液態(tài)好氧-固態(tài)厭氧分階段培養(yǎng)的方式；在液態(tài)好氧發(fā)酵階段后期采用的低溫和雙氧水氧化脅迫培養(yǎng)有利于高含量甘露聚糖釀酒酵母的形成，使用該工藝生產(chǎn)的酵母培養(yǎng)物中甘露聚糖含量達(dá)到4.0～4.5％，水溶性蛋白達(dá)到7％～9％。其中的CICC1355購買于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，屬于《中國微生物菌種總目錄》中的工業(yè)微生物菌種，菌號(hào)CICC 1355中文名稱：釀酒酵母，種名：Saccharomyces，屬名cerevisiae，用途：飼料酵母。

本發(fā)明的原理：首先，前期采用的液態(tài)好氧高密度發(fā)酵方式為后續(xù)階段提供了足夠數(shù)量的微生物細(xì)胞；接著采用的低溫和雙氧水氧化脅迫培養(yǎng)有利于高含量甘露聚糖釀酒酵母的形成；最后階段的固態(tài)厭氧發(fā)酵有利于酵母充分發(fā)酵合成更為豐富的功能性成分。發(fā)酵結(jié)束后，將固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)物進(jìn)行低溫干燥、粉碎，即獲得成品。

步驟a中釀酒酵母菌種的種子培養(yǎng)基各組份及其重量百分比為：0.5～1％酵母浸膏、0.5～1％蛋白胨、0.5～1％豆粕粉、蔗糖1～2％，其余為純化水。配置簡易，營養(yǎng)價(jià)值高；步驟b中釀酒酵母的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基各組份及其重量百分比為：0.5～1％蛋白胨，1.5～2％豆粕粉、1～1.5％玉米粉、糖蜜2～4％，其余為純化水，配置簡易，營養(yǎng)豐富，其中選用的糖蜜，是一種粘稠、黑褐色、呈半流動(dòng)的物體，主要含有蔗糖，蔗糖蜜中泛酸含量較高，達(dá)37mg/kg，此外生物素含量也很可觀。糖蜜是制糖工業(yè)的副產(chǎn)品，組成因制糖原料、加工條件的不同而有差異，其中主要含有大量可發(fā)酵糖(主要是蔗糖)，因而是很好的發(fā)酵原料，可用作酵母、味精、有機(jī)酸等發(fā)酵制品的底物或基料，可用作某些食品的原料和動(dòng)物飼料。

低溫和雙氧水氧化脅迫培養(yǎng)有利于高含量甘露聚糖釀酒酵母的形成，液態(tài)好氧-固態(tài)厭氧分階段多模式培養(yǎng)的方式有利于酵母充分發(fā)酵合成更為豐富的功能性成分。本發(fā)明的工藝穩(wěn)定性好，無霉菌污染，產(chǎn)品安全；營養(yǎng)價(jià)值高；工藝簡單、成本低、易于操作、質(zhì)量穩(wěn)定，生產(chǎn)過程環(huán)保，無環(huán)境污染，參數(shù)易于控制，發(fā)酵效率和發(fā)酵質(zhì)量高。

具體實(shí)施方式

一種高含量甘露聚糖酵母培養(yǎng)物的生產(chǎn)方法，包括以下步驟：

步驟a、釀酒酵母種子液的制備：挑取斜面保藏的釀酒酵母菌種1～2環(huán)，接種至種子培養(yǎng)基中，于搖床振蕩培養(yǎng)，得到釀酒酵母種子液；

步驟b、釀酒酵母液態(tài)高密度培養(yǎng)：將釀酒酵母種子液接種至裝有液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的反應(yīng)罐中于中溫、弱酸環(huán)境下培養(yǎng)；

步驟c、高含量甘露聚糖釀酒酵母低溫和雙氧水脅迫培養(yǎng)：降低反應(yīng)罐的反應(yīng)溫度，同時(shí)將15％～25％質(zhì)量濃度的雙氧水勻速流加至反應(yīng)罐內(nèi)，至反應(yīng)罐內(nèi)雙氧水的終濃度達(dá)到6～10mmol/L，然后繼續(xù)培養(yǎng)若干小時(shí)，得到發(fā)酵培養(yǎng)液；

步驟d、釀酒酵母固態(tài)厭氧培養(yǎng)：將發(fā)酵培養(yǎng)液與固態(tài)培養(yǎng)基按照一定重量比混合，得到混合物，然后將混合物轉(zhuǎn)移至固態(tài)發(fā)酵箱于密閉不通氣狀態(tài)下厭氧培養(yǎng)，得到培養(yǎng)物；

步驟e、低溫烘干：將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至干燥裝置中，采用低溫?zé)犸L(fēng)將培養(yǎng)物進(jìn)行烘干，得到干燥酵母培養(yǎng)物；

步驟f、粉碎及包裝：將干燥酵母培養(yǎng)物粉碎、封裝成袋，避光存放于陰涼干燥處。

步驟a中釀酒酵母菌種為CICC1355，釀酒酵母菌種的種子培養(yǎng)基各組份及其重量百分比為：0.5～1％酵母浸膏、0.5～1％蛋白胨、0.5～1％豆粕粉、蔗糖1～2％，其余為純化水。

步驟a中搖床振蕩培養(yǎng)的溫度為30～32℃、振蕩轉(zhuǎn)速為200～250rpm、振蕩培養(yǎng)時(shí)間為16～18h。

所述步驟b中釀酒酵母的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基各組份及其重量百分比為：0.5～1％蛋白胨，1.5～2％豆粕粉、1～1.5％玉米粉、糖蜜2～4％，其余為純化水。

步驟b中反應(yīng)罐內(nèi)反應(yīng)溫度為30～32℃、pH為5.0～6.0、攪拌轉(zhuǎn)速為150～250rpm、通氣速率為0.5～1.0vvm、培養(yǎng)時(shí)間為18～20h。

步驟c中將反應(yīng)罐內(nèi)反應(yīng)溫度降低至24～26℃，同時(shí)通過蠕動(dòng)泵將雙氧水勻速流加至反應(yīng)罐內(nèi)；繼續(xù)培養(yǎng)時(shí)間為4～6小時(shí)。

步驟d中發(fā)酵培養(yǎng)液與固態(tài)培養(yǎng)基的重量混合比為3:6～3:8，固態(tài)培養(yǎng)基的各組份及其重量百分比為：15～35％豆粕粉、5～10％玉米粉、55～80％小麥麩皮。

步驟d中固態(tài)發(fā)酵箱厭氧培養(yǎng)時(shí)間為24～28小時(shí)，固態(tài)發(fā)酵箱中固態(tài)發(fā)酵室的溫度為30～32℃。

步驟e中低溫?zé)犸L(fēng)的溫度為50℃～70℃，干燥酵母培養(yǎng)物的含水量為13％以下，干燥酵母培養(yǎng)物甘露聚糖含量達(dá)到4～4.5％，水溶性蛋白達(dá)到7％～9％。

步驟f中使用粉碎機(jī)將干燥酵母培養(yǎng)物粉碎成40～60目粒度，包裝機(jī)進(jìn)行封裝成袋，包裝量為10～50Kg/袋。

下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明：

實(shí)施例一：

一種高含量甘露聚糖酵母培養(yǎng)物的生產(chǎn)方法，包括以下步驟：

步驟a、酵母種子液的制備：挑取斜面保藏的釀酒酵母(CICC1355)菌種2環(huán)，接種至種子培養(yǎng)基中，30℃、200rpm搖床振蕩培養(yǎng)18h。

步驟b、釀酒酵母液態(tài)高密度培養(yǎng)：將種子培養(yǎng)液接種至裝有液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的1000升反應(yīng)罐中，罐內(nèi)溫度30℃、控制pH在5.0～6.0范圍內(nèi)，攪拌轉(zhuǎn)速200rpm，通氣速率1.0vvm培養(yǎng)20h。

步驟c、高含量甘露聚糖釀酒酵母低溫和雙氧水脅迫培養(yǎng)：將步驟b發(fā)酵系統(tǒng)的溫度降低至24℃，同時(shí)通過蠕動(dòng)泵將20％質(zhì)量濃度的雙氧水勻速流加至反應(yīng)罐內(nèi)，至雙氧水終濃度達(dá)到8mmol/L，繼續(xù)培養(yǎng)6小時(shí)。

步驟d、釀酒酵母固態(tài)厭氧培養(yǎng)：步驟c完成后的發(fā)酵培養(yǎng)液與以豆粕和麩皮為主的固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基以3:7重量比混合，轉(zhuǎn)移至固態(tài)發(fā)酵箱，固態(tài)發(fā)酵室溫控制在30℃，發(fā)酵箱密閉不通氣狀態(tài)下厭氧培養(yǎng)28小時(shí)。

步驟e、低溫烘干：步驟d獲得的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至干燥裝置中，采用50℃熱風(fēng)將培養(yǎng)物含水量降至13％以下。

步驟f、粉碎及包裝：使用粉碎機(jī)將步驟e獲得干燥酵母培養(yǎng)物粉碎成40目粒度，包裝機(jī)封裝成袋，包裝量為10～50Kg/袋，避光存放于陰涼干燥處。

步驟a中釀酒酵母的種子培養(yǎng)基成分以重量百分比計(jì)為：0.5％酵母浸膏，0.5％蛋白胨，1％豆粕粉、蔗糖2％，其余為純化水。

步驟b中釀酒酵母的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基成分以重量百分比計(jì)為：0.5％蛋白胨，1.5％豆粕粉，1～1.5％玉米粉、糖蜜4％，其余為純化水。

步驟d中固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基成分以重量百分比為：15％豆粕粉、10％玉米粉、75％小麥麩皮。

干燥酵母培養(yǎng)物甘露聚糖含量達(dá)到4％，水溶性蛋白達(dá)到7％。

實(shí)施例二

步驟a、釀酒酵母種子液的制備：挑取斜面保藏的釀酒酵母菌種2環(huán)，接種至種子培養(yǎng)基中，32℃、250rpm搖床振蕩培養(yǎng)16h；

步驟b、釀酒酵母液態(tài)高密度培養(yǎng)：將種子培養(yǎng)液接種至裝有液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的反應(yīng)罐中，罐內(nèi)溫度32℃、控制pH在5.0～6.0范圍內(nèi)，攪拌轉(zhuǎn)速150rpm，通氣速率0.75vvm培養(yǎng)18h。

步驟c、高含量甘露聚糖釀酒酵母低溫和雙氧水脅迫培養(yǎng)：將步驟b發(fā)酵系統(tǒng)的溫度降低至26℃，同時(shí)通過蠕動(dòng)泵將15％濃度的雙氧水勻速流加至反應(yīng)罐內(nèi)，至終濃度達(dá)到8mmol/L，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)。

步驟d、釀酒酵母固態(tài)厭氧培養(yǎng)：步驟c完成后的發(fā)酵培養(yǎng)液與以豆粕和麩皮為主的固態(tài)培養(yǎng)基以3:7重量比混合，轉(zhuǎn)移至固態(tài)發(fā)酵箱，固態(tài)發(fā)酵室溫控制在32℃，發(fā)酵箱密閉不通氣狀態(tài)下厭氧培養(yǎng)24小時(shí)。

步驟e、低溫烘干：步驟d獲得的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至干燥裝置中，采用70℃熱風(fēng)將培養(yǎng)物含水量降至13％以下。

步驟f、粉碎及包裝：使用粉碎機(jī)將步驟e獲得干燥酵母培養(yǎng)物粉碎成60目粒度，包裝機(jī)封裝成袋，包裝量為10～50Kg/袋，避光存放于陰涼干燥處。

步驟a中釀酒酵母的種子培養(yǎng)基成分以重量百分比比為：1％酵母浸膏，0.5％蛋白胨，0.5％豆粕粉、蔗糖2％，其余為純化水。

步驟b中釀酒酵母的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基成分以重量百分比比為：1％蛋白胨，2％豆粕粉、1％玉米粉、糖蜜4％，其余為純化水。

步驟d中固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基成分以重量百分比為：20％豆粕粉、10％玉米粉、70％小麥麩皮。

干燥酵母培養(yǎng)物甘露聚糖含量達(dá)到4.2％，水溶性蛋白達(dá)到9％。

實(shí)施例三

步驟a、釀酒酵母種子液的制備：挑取斜面保藏的釀酒酵母菌種2環(huán)，接種至種子培養(yǎng)基中，31℃、230rpm搖床振蕩培養(yǎng)17h；

步驟b、釀酒酵母液態(tài)高密度培養(yǎng)：將種子培養(yǎng)液接種至裝有液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的反應(yīng)罐中，罐內(nèi)溫度31℃、控制pH在5.5，攪拌轉(zhuǎn)速220rpm，通氣速率1.0vvm培養(yǎng)19h。

步驟c、高含量甘露聚糖釀酒酵母低溫和雙氧水脅迫培養(yǎng)：將反應(yīng)罐內(nèi)反應(yīng)溫度降低至25℃，同時(shí)通過蠕動(dòng)泵將20％濃度的雙氧水勻速流加至反應(yīng)罐內(nèi)，至反應(yīng)罐內(nèi)雙氧水的終濃度達(dá)到7.5mmol/L，繼續(xù)培養(yǎng)5小時(shí)。

步驟d、釀酒酵母固態(tài)厭氧培養(yǎng)：步驟c完成后的發(fā)酵培養(yǎng)液與以豆粕和麩皮為主的固態(tài)培養(yǎng)基以3:8重量比混合，轉(zhuǎn)移至固態(tài)發(fā)酵箱，固態(tài)發(fā)酵室溫控制在31℃，發(fā)酵箱密閉不通氣狀態(tài)下厭氧培養(yǎng)26小時(shí)。

步驟e、低溫烘干：步驟d獲得的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至干燥裝置中，采用60℃熱風(fēng)將培養(yǎng)物含水量降至12％以下。

步驟f、粉碎及包裝：使用粉碎機(jī)將步驟e獲得干燥酵母培養(yǎng)物粉碎成50目粒度，包裝機(jī)封裝成袋，避光存放于陰涼干燥處。

步驟a中釀酒酵母的種子培養(yǎng)基成分以重量百分比為：0.75％酵母浸膏，0.1％蛋白胨，0.75％豆粕粉、蔗糖1％，其余為純化水。

步驟b中釀酒酵母的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基成分以重量百分比為：0.75％蛋白胨，1.75％豆粕粉、1.25％玉米粉、糖蜜3％，其余為純化水。

步驟d中固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基成分以重量百分比為：30％豆粕粉、5％玉米粉、65％小麥麩皮。

干燥酵母培養(yǎng)物甘露聚糖含量達(dá)到4.3％，水溶性蛋白達(dá)到8％。

分別取實(shí)施例一、實(shí)施例二、實(shí)施例三所制備的干燥酵母培養(yǎng)物，按照對照組和實(shí)驗(yàn)組的原則進(jìn)行喂養(yǎng)試驗(yàn)。其中對照組和實(shí)驗(yàn)組采用配對實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，按照年齡、胎次、體型大小、采食量、產(chǎn)奶量和泌乳周期等體況相近的原則，選取泌乳期荷斯坦牛80頭，分成實(shí)驗(yàn)組一、實(shí)驗(yàn)組二、實(shí)驗(yàn)組三和對照組(組間差異不顯著)，每組20頭進(jìn)行飼喂對比實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)組一每天飼喂300克實(shí)施例一所制備干燥酵母培養(yǎng)物，實(shí)驗(yàn)組二每天飼喂300克實(shí)施例二所制備干燥酵母培養(yǎng)物，實(shí)驗(yàn)組三每天飼喂300克實(shí)施例三所制備干燥酵母培養(yǎng)物，對照組不喂食酵母培養(yǎng)物，其余條件相同。喂養(yǎng)一個(gè)月后，進(jìn)行產(chǎn)奶量比較。

由表1可知，實(shí)驗(yàn)前各組平均產(chǎn)奶量無顯著差異。實(shí)驗(yàn)后期，實(shí)驗(yàn)組一、實(shí)驗(yàn)組二和實(shí)驗(yàn)組三產(chǎn)奶量高于對照組1.12～1.14kg/頭﹒天。酵母培養(yǎng)物導(dǎo)致采食量增加，從而提高日產(chǎn)奶量。

表1產(chǎn)奶量比較

表2體細(xì)胞比較

牛奶中的體細(xì)胞不僅能反映出乳的品質(zhì)，還直接反映出奶牛乳房的健康狀況等，如表2所示，通過飼喂高含量甘露聚糖酵母培養(yǎng)物可以有效的減少體細(xì)胞，提高了奶牛機(jī)體免疫力，乳房炎病例發(fā)生率顯著下降，有效降低了牧場因乳房炎和抗生素使用帶來的負(fù)面影響和損失。

通過上述奶牛高含量甘露聚糖酵母培養(yǎng)物飼喂實(shí)驗(yàn)可以看出，最為明顯的改善主要體現(xiàn)在兩方面：第一，泌乳量顯著增加，每頭奶牛每天平均產(chǎn)奶量增加1.14公斤(1～2公斤)，經(jīng)濟(jì)效益顯著；第二，體細(xì)胞顯著下降，乳房炎病例發(fā)生率明顯減少，有效降低了牧場因乳房炎和抗生素使用帶來的負(fù)面影響和損失，奶質(zhì)得以提升，利于飲用者健康。