本發(fā)明涉及生物化工及生物提取領(lǐng)域。更具體地，涉及一種丁香羅勒中精油的分離提取方法。

背景技術(shù)：

丁香羅勒為一年生直立草本植物，通常被作為醫(yī)療用品和香料而大量種植。它可用于治療細(xì)菌感染、腹瀉或作為調(diào)味劑，并具有抗真菌、抗誘變、抗菌、免疫調(diào)節(jié)及控制平滑肌收縮等功效。由于羅勒在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中的廣泛應(yīng)用及其醫(yī)療效果，近年對(duì)其成分、作用和作用機(jī)理的研究越來(lái)越多。

羅勒精油具有止痛、鎮(zhèn)定功效，能快速治療牙痛、消化問(wèn)題、肌肉疼痛、氣喘、鼻竇炎等疾病。另外，羅勒精油還具防腐和抑菌的能力，具有較高食用安全性，它是開發(fā)天然防腐保鮮劑的重要原料。目前果蔬采后病害導(dǎo)致的巨大損失已成為全球性的問(wèn)題，在發(fā)達(dá)國(guó)家約有10％-20％的新鮮果品由于采后病害導(dǎo)致腐爛損失。而在缺乏貯運(yùn)冷藏設(shè)備的發(fā)展中國(guó)家，腐爛損失率則更高達(dá)40％～50％。而控制果蔬采后病害的主要手段是冷藏結(jié)合化學(xué)殺菌劑，但化學(xué)殺菌劑對(duì)人類健康和環(huán)境的危害己成為全世界關(guān)心的問(wèn)題。羅勒精油作為天然防腐保鮮劑的重要原料具有重要的價(jià)值。利用傳統(tǒng)溶劑提取法提取羅勒精油，不但提取時(shí)間長(zhǎng)，而且提取效率低，因此，需要提供一種能提高提取效率，縮短提取時(shí)間，有效降低成本的羅勒精油提取分離方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種丁香羅勒中精油的分離提取方法，該方法提高了提取效率，縮短了提取時(shí)間，有效降低了成本。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：

一種丁香羅勒中精油的分離提取方法，包括以下步驟：

(1)取丁香羅勒的地上部分，洗凈，晾干，粉碎后的丁香羅勒粉末，將丁香羅勒粉末與硅藻土按質(zhì)量比1：(1-3)混勻，得混合樣品；

(2)將步驟(1)的混合樣品中加入2-4倍量的氯仿，提取，過(guò)濾，得到濾液和殘留物；

(3)將步驟(2)得到的殘留物轉(zhuǎn)移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進(jìn)行加速溶劑萃取，得到提取液，并進(jìn)行過(guò)濾得到濾液；

(4)將步驟(2)和(3)得到的濾液加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2-3小時(shí)；

(5)將步驟(4)中不溶于水的部分分離出來(lái)，減壓濃縮，即得。

優(yōu)選的，步驟(1)中所述丁香羅勒粉末與硅藻土按質(zhì)量比1：(1-2)混勻。

優(yōu)選的，步驟(2)中所述提取的條件為提取溫度為40-50℃，提取時(shí)間為30-50min。

優(yōu)選的，步驟(3)中所述加速溶劑萃取的參數(shù)為：提取溶劑：體積比為(2-1):1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度60-150℃，提取壓力1000-3000psi，提取次數(shù)3-5次，提取時(shí)間5-30min，吹洗體積10-100％萃取池體積、吹洗時(shí)間80-300s；

更優(yōu)選的，提取溶劑：體積比為2:1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度60-80℃，提取壓力1000-3000psi，提取次數(shù)3-5次，提取時(shí)間5-20min，吹洗體積50-100％萃取池體積，吹洗時(shí)間150-300s。

本發(fā)明的有益效果如下：

本發(fā)明丁香羅勒中精油的分離提取方法，丁香羅勒精油的提取率較高，能達(dá)到22％以上，高于傳統(tǒng)的提取方法，且提取充分，原料及試劑利用率較高；另外，本發(fā)明方法有效提高了生產(chǎn)效率，操作簡(jiǎn)單易行，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明，下面結(jié)合優(yōu)選實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，下面所具體描述的內(nèi)容是說(shuō)明性的而非限制性的，不應(yīng)以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。

實(shí)施例1

(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎并與硅藻土按質(zhì)量比1:1混合，研磨均勻，得混合樣品；

(2)將步驟(1)的混合樣品中加入2倍量的氯仿，放置在超聲儀中進(jìn)行提取，提取溫度為40℃，提取時(shí)間為30分鐘，過(guò)濾，得到濾液和殘留物；

(3)將步驟(2)的殘留物轉(zhuǎn)移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進(jìn)行加速溶劑萃取，得到提取液，并進(jìn)行過(guò)濾得到濾液；其中，設(shè)定加速溶劑萃取的參數(shù)為：提取溶劑：體積比為2:1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度60℃、提取壓力1000psi，提取次數(shù)3次，提取時(shí)間5min、吹洗體積10％萃取池體積，吹洗時(shí)間80s；

(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2小時(shí)；

(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來(lái)，放置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。

實(shí)施例2

(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎并與硅藻土按質(zhì)量比1：3混合，研磨均勻，得混合樣品；

(2)將步驟(1)的混合樣品中加入4倍量的氯仿，放置在超聲儀中進(jìn)行提取，提取溫度為50℃，提取時(shí)間為50min，過(guò)濾，得到濾液和殘留物；

(3)將步驟(2)的殘留物轉(zhuǎn)移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進(jìn)行加速溶劑萃取，得到提取液，并進(jìn)行過(guò)濾得到濾液；其中，設(shè)定加速溶劑萃取的參數(shù)為：提取溶劑：體積比為1:1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度150℃，提取壓力3000psi，提取次數(shù)5次，提取時(shí)間30min，吹洗體積100％萃取池體積，吹洗時(shí)間300s；

(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取3小時(shí)；

(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來(lái)，放置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。

實(shí)施例3

(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎并與硅藻土按質(zhì)量比1：2混合，研磨均勻，得混合樣品；

(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進(jìn)行提取，提取溫度為45℃，提取時(shí)間為40min，過(guò)濾，得到濾液和殘留物；

(3)將步驟(2)的殘留物轉(zhuǎn)移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進(jìn)行加速溶劑萃取，得到提取液，并進(jìn)行過(guò)濾得到濾液；其中，設(shè)定加速溶劑萃取的參數(shù)為：提取溶劑：體積比為2:1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度100℃，提取壓力2000psi，提取次數(shù)4次，提取時(shí)間20min，吹洗體積50％萃取池體積，吹洗時(shí)間150s；

(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時(shí)；

(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來(lái)，放置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。

實(shí)施例4

(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎并與硅藻土按質(zhì)量比1：1混合，研磨均勻，得混合樣品；

(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進(jìn)行提取，提取溫度為45℃，提取時(shí)間為40min，過(guò)濾，得到濾液和殘留物；

(3)將步驟(2)的殘留物轉(zhuǎn)移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進(jìn)行加速溶劑萃取，得到提取液，并進(jìn)行過(guò)濾得到濾液；其中，設(shè)定加速溶劑萃取的參數(shù)為：提取溶劑：體積比為1：1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度80℃，提取壓力2000psi，提取次數(shù)4次，提取時(shí)間15min，吹洗體積60％萃取池體積，吹洗時(shí)間200s；

(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時(shí)；

(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來(lái)，放置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。

試驗(yàn)例1丁香羅勒粉與硅藻土的質(zhì)量比對(duì)丁香羅勒中精油提取率的影響

按照以下步驟進(jìn)行精油的分離提取

(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎得到丁香羅勒粉，將并與硅藻土進(jìn)行混合，研磨均勻，得混合樣品；其中，設(shè)置丁香羅勒粉與硅藻土質(zhì)量比分別為3:1，2:1，1:1，1:2，1:3，1:4，1:5；

(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進(jìn)行提取，提取溫度為45℃，提取時(shí)間為40min，過(guò)濾，得到濾液和殘留物；

(3)將步驟(2)的殘留物轉(zhuǎn)移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進(jìn)行加速溶劑萃取，得到提取液，并進(jìn)行過(guò)濾得到濾液；其中，設(shè)定加速溶劑萃取的參數(shù)為：提取溶劑：體積比為1:2的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度80℃，提取壓力2000psi，提取次數(shù)4次，提取時(shí)間15min，吹洗體積60％萃取池體積、吹洗時(shí)間200s；

(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時(shí)；

(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來(lái)，放置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油；

比較不同丁香羅勒粉與硅藻土質(zhì)量比對(duì)精油的提取率的影響，結(jié)果見表1，從表中可以看出，不同丁香羅勒粉與硅藻土質(zhì)量比對(duì)精油提取率有較大的影響：當(dāng)丁香羅勒粉與硅藻土質(zhì)量比為1:(1-3)時(shí)，精油的提取率較高，都達(dá)到了14.4％以上，明顯高于其他組合；當(dāng)丁香羅勒粉與硅藻土質(zhì)量比為1:(1-2)時(shí)，精油的提取率更高，達(dá)到了16％以上。

表1精油提取率的結(jié)果

試驗(yàn)例2提取溶劑對(duì)精油提取率的影響

按照以下步驟進(jìn)行精油的分離提取

(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎得到丁香羅勒粉，將并與硅藻土以質(zhì)量比為1:2進(jìn)行混合，研磨均勻，得混合樣品；

(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進(jìn)行提取，提取溫度為45℃，提取時(shí)間為40min，過(guò)濾，得到濾液和殘留物；

(3)將步驟(2)的殘留物轉(zhuǎn)移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進(jìn)行加速溶劑萃取，得到提取液，并進(jìn)行過(guò)濾得到濾液；其中，設(shè)定加速溶劑萃取的參數(shù)為：提取溫度80℃，提取壓力2000psi，提取次數(shù)4次，提取時(shí)間15min，吹洗體積60％萃取池體積、吹洗時(shí)間200s；其中提取溶劑設(shè)置為丙酮和甲醇、丙酮和乙醇、甲醇和乙醇以體積比為1:2的比例混合后的混合物；

(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時(shí)；

(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來(lái)，放置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。

比較不同提取溶劑對(duì)精油的提取率的影響，結(jié)果見表2，從表中可以看出，不同提取溶劑對(duì)于精油的提取率有顯著性的影響，當(dāng)提取溶劑為丙酮和甲醇時(shí)，精油的提取率最高，達(dá)到了16.8％，明顯高于其他組合。

表2精油提取率的結(jié)果

試驗(yàn)例3提取溶劑中丙酮和甲醇的體積比對(duì)精油提取率的影響

按照以下步驟進(jìn)行精油的分離提取

(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎得到丁香羅勒粉，將并與硅藻土以質(zhì)量比為1:2進(jìn)行混合，研磨均勻，得混合樣品；

(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進(jìn)行提取，提取溫度為45℃，提取時(shí)間為40min，過(guò)濾，得到濾液和殘留物；

(3)將步驟(2)的殘留物轉(zhuǎn)移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進(jìn)行加速溶劑萃取，得到提取液，并進(jìn)行過(guò)濾得到濾液；其中，設(shè)定加速溶劑萃取的參數(shù)為：提取溶劑：丙酮和甲醇，提取溫度80℃，提取壓力2000psi，提取次數(shù)4次，提取時(shí)間15min，吹洗體積60％萃取池體積、吹洗時(shí)間200s；其中丙酮和甲醇的體積比分別為3:1，2:1，1:1，1:2，1:3。

(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時(shí)；

(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來(lái)，放置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。

比較提取溶劑中丙酮和甲醇的體積比對(duì)精油的提取率的影響，結(jié)果見表3，從表中可以看出，不同丙酮和甲醇的體積比對(duì)于精油的提取率有顯著性的影響，當(dāng)丙酮和甲醇的體積比為(1-2):1時(shí)，精油的提取率較高，而當(dāng)其體積比為2:1時(shí)，精油提取率最高，可達(dá)到22.4％，明顯高于其他組合。

表3精油提取率的結(jié)果

顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說(shuō)明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式的限定，對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)，這里無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉，凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。