本發(fā)明涉及污染土壤微生物修復(fù)
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種石油污染土壤微生物修復(fù)劑。
背景技術(shù)：
：動物、植物、微生物都具有降解污染物的能力，但微生物在污染物降解中的作用最大，到目前為止，降解石油中各種烴類的微生物共發(fā)現(xiàn)了約100余屬、200多種，它們分別屬于細菌、放線菌、霉菌、酵母以及藻類，其中細菌和真菌類是土壤中石油生物降解的主要參與者，土壤中常見的石油降解細菌群數(shù)多少由高到低分別為假單孢菌屬、節(jié)核細菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、棒狀桿菌屬、黃桿菌屬、無色桿菌屬、微球菌屬、諾卡氏菌屬和分支桿菌屬，常見的石油降解真菌種群數(shù)多少由高到低分別為木霉屬、青霉屬、曲霉屬、被孢霉屬。目前微生物降解石油降解率一般在50%左右，降解時間一般在60天以上，且對降解環(huán)境要求較為嚴格。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種石油污染土壤微生物修復(fù)劑。本發(fā)明一種石油污染土壤微生物修復(fù)劑，該微生物修復(fù)劑由細菌菌劑、真菌菌劑、載體組成；其中，細菌菌劑由：藍細菌、熱脫硫桿菌門、木醋桿菌、莢膜紅細菌組成；每g細菌菌劑中，藍細菌數(shù)量6x108（個/g）、熱脫硫桿菌門數(shù)量2x106（個/g）、木醋桿菌數(shù)量9x1010（個/g）、莢膜紅細菌數(shù)量5x103（個/g）；真菌菌劑由：AM真菌、子囊菌、大麗輪枝菌組成；每g真菌菌劑中，AM真菌數(shù)量8x1012（個/g）、子囊菌數(shù)量1x107（個/g）、大麗輪枝菌數(shù)量6x1015（個/g）；載體由：藍藻粉、葡萄糖、蛋白粉、大豆油、微量元素預(yù)混料組成；每g載體中，按重量比計：藍藻粉占50-60%、葡萄糖占10-20%、蛋白粉10-20%、大豆油占10-15%、微量元素預(yù)混料占0.2-0.25%；制作時，將載體放入粉碎機中粉碎至300-400目，按1:4的體積比與水混合，以1800-2200r/min球磨混合3-5小時，得到包膜乳液，將固態(tài)細菌菌劑、真菌菌劑按1：2的重量比加入造粒機中造粒，作為包芯，將包膜乳液液化后噴涂于包芯表面，分多次噴涂，每次噴涂形成0.2-0.25mm厚度，每次噴涂結(jié)束在真空度為6-8kpa，溫度為-20~-22℃下冷凍處理10-13分鐘后再進行下一次噴涂，連續(xù)噴涂10次。所得到的微生物修復(fù)劑粒徑在2.8-3mm，在-5~-10℃下保存。本發(fā)明以藍細菌、熱脫硫桿菌門、木醋桿菌、莢膜紅細菌組成的細菌菌劑與由藍藻粉、葡萄糖、蛋白粉、大豆油、微量元素預(yù)混料組成真菌菌劑混合作為微生物修復(fù)劑使用，有較高的修復(fù)效果，修復(fù)菌劑對待修復(fù)環(huán)境依賴性小，只需保證修復(fù)土壤的濕度和ph值，就可實現(xiàn)較好的修復(fù)效果，經(jīng)試驗證明，在35天的降解時間下，降解率可達92.83%，降解速率快，降解時間短，降解過程中生成的中間產(chǎn)物無毒，修復(fù)菌劑外層的包膜材料一方面為包膜中的細菌和真菌提供生長養(yǎng)分，另一方面可將石油污染物從土壤顆粒上洗脫下來，有利于細菌和真菌的降解，相對于直接將細菌和真菌投入土壤中降解，包膜后的降解率可提高22%以上，得到的微生物修復(fù)劑在-5~-10℃下保存長達12個月，保存期間，細菌與真菌存活率高達99.94%。具體實施方式以下結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明進行說明：實施例1、一種石油污染土壤微生物修復(fù)劑，該微生物修復(fù)劑由細菌菌劑、真菌菌劑、載體組成；其中，細菌菌劑由：藍細菌、熱脫硫桿菌門、木醋桿菌、莢膜紅細菌組成；每g細菌菌劑中，藍細菌數(shù)量6x108（個/g）、熱脫硫桿菌門數(shù)量2x106（個/g）、木醋桿菌數(shù)量9x1010（個/g）、莢膜紅細菌數(shù)量5x103（個/g）；真菌菌劑由：AM真菌、子囊菌、大麗輪枝菌組成；每g真菌菌劑中，AM真菌數(shù)量8x1012（個/g）、子囊菌數(shù)量1x107（個/g）、大麗輪枝菌數(shù)量6x1015（個/g）；載體由：藍藻粉、葡萄糖、蛋白粉、大豆油、微量元素預(yù)混料組成；每g載體中，按重量比計：藍藻粉占50%、葡萄糖占20%、蛋白粉14.75%、大豆油占15%、微量元素預(yù)混料占0.25%；制作時，將載體放入粉碎機中粉碎至300目，按1:4的體積比與水混合，以1800r/min球磨混合3小時，得到包膜乳液，將固態(tài)細菌菌劑、真菌菌劑按1：2的重量比加入造粒機中造粒，作為包芯，將包膜乳液液化后噴涂于包芯表面，分多次噴涂，每次噴涂形成0.2mm厚度，每次噴涂結(jié)束在真空度為6kpa，溫度為-20℃下冷凍處理10分鐘后再進行下一次噴涂，連續(xù)噴涂10次。所得到的微生物修復(fù)劑粒徑在2.8-3mm，在-5~-10℃下保存。人工配置的原油污染土壤，土壤采集于淮南市，原油由大慶油田提供，配置得到5.2%的原油污染土壤；土壤中的含油量按紫外分光光計法測定。按1:0.01的重量比將土壤樣品與本發(fā)明生物修復(fù)劑混合，調(diào)節(jié)土壤PH至6.5，每隔7天加一次水，保持土壤濕度在65-70%；每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4944.0732.1520.8317.628.553.793.763.76降解過程未見有毒副物產(chǎn)生。在實施例1的基礎(chǔ)上取消細菌菌劑作為對照組，按同樣的修復(fù)方法測定修復(fù)效果。每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4950.3348.6745.2240.9338.5436.7136.4636.46在實施例1的基礎(chǔ)上取消真菌菌劑作為對照組，按同樣的修復(fù)方法測定修復(fù)效果。每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4950.0748.5645.1540.6838.2236.5936.4236.42在實施例1的基礎(chǔ)上取消載體包膜作為對照組，按同樣的修復(fù)方法測定修復(fù)效果。每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4948.5337.7725.1822.6420.3916.6116.4216.42實施例2、一種石油污染土壤微生物修復(fù)劑，該微生物修復(fù)劑由細菌菌劑、真菌菌劑、載體組成；其中，細菌菌劑由：藍細菌、熱脫硫桿菌門、木醋桿菌、莢膜紅細菌組成；每g細菌菌劑中，藍細菌數(shù)量6x108（個/g）、熱脫硫桿菌門數(shù)量2x106（個/g）、木醋桿菌數(shù)量9x1010（個/g）、莢膜紅細菌數(shù)量5x103（個/g）；真菌菌劑由：AM真菌、子囊菌、大麗輪枝菌組成；每g真菌菌劑中，AM真菌數(shù)量8x1012（個/g）、子囊菌數(shù)量1x107（個/g）、大麗輪枝菌數(shù)量6x1015（個/g）；載體由：藍藻粉、葡萄糖、蛋白粉、大豆油、微量元素預(yù)混料組成；每g載體中，按重量比計：藍藻粉占55%、葡萄糖占15%、蛋白粉17.78%、大豆油占12%、微量元素預(yù)混料占0.22%；制作時，將載體放入粉碎機中粉碎至350目，按1:4的體積比與水混合，以2000r/min球磨混合4小時，得到包膜乳液，將固態(tài)細菌菌劑、真菌菌劑按1：2的重量比加入造粒機中造粒，作為包芯，將包膜乳液液化后噴涂于包芯表面，分多次噴涂，每次噴涂形成0.22mm厚度，每次噴涂結(jié)束在真空度為7kpa，溫度為-21℃下冷凍處理12分鐘后再進行下一次噴涂，連續(xù)噴涂10次。所得到的微生物修復(fù)劑粒徑在2.8-3mm，在-5~-10℃下保存。人工配置的原油污染土壤，土壤采集于淮南市，原油由大慶油田提供，配置得到5.2%的原油污染土壤；土壤中的含油量按紫外分光光計法測定。按1:0.01的重量比將土壤樣品與本發(fā)明生物修復(fù)劑混合，調(diào)節(jié)土壤PH至6.5，每隔7天加一次水，保持土壤濕度在65-70%；每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4943.4930.8725.6114.038.243.182.662.66降解過程未見有毒副物產(chǎn)生。在實施例2的基礎(chǔ)上取消細菌菌劑作為對照組，按同樣的修復(fù)方法測定修復(fù)效果。每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4950.3148.6545.2040.8738.5236.6836.4336.43在實施例2的基礎(chǔ)上取消真菌菌劑作為對照組，按同樣的修復(fù)方法測定修復(fù)效果。每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4950.0548.5245.1340.6238.0736.5136.4036.40在實施例2的基礎(chǔ)上取消載體包膜作為對照組，按同樣的修復(fù)方法測定修復(fù)效果。每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4948.5037.7125.1322.5520.3016.5716.3816.38實施例3、一種石油污染土壤微生物修復(fù)劑，該微生物修復(fù)劑由細菌菌劑、真菌菌劑、載體組成；其中，細菌菌劑由：藍細菌、熱脫硫桿菌門、木醋桿菌、莢膜紅細菌組成；每g細菌菌劑中，藍細菌數(shù)量6x108（個/g）、熱脫硫桿菌門數(shù)量2x106（個/g）、木醋桿菌數(shù)量9x1010（個/g）、莢膜紅細菌數(shù)量5x103（個/g）；真菌菌劑由：AM真菌、子囊菌、大麗輪枝菌組成；每g真菌菌劑中，AM真菌數(shù)量8x1012（個/g）、子囊菌數(shù)量1x107（個/g）、大麗輪枝菌數(shù)量6x1015（個/g）；載體由：藍藻粉、葡萄糖、蛋白粉、大豆油、微量元素預(yù)混料組成；每g載體中，按重量比計：藍藻粉占60%、葡萄糖占10%、蛋白粉19.8%、大豆油占10%、微量元素預(yù)混料占0.2%；制作時，將載體放入粉碎機中粉碎至400目，按1:4的體積比與水混合，以2200r/min球磨混合5小時，得到包膜乳液，將固態(tài)細菌菌劑、真菌菌劑按1：2的重量比加入造粒機中造粒，作為包芯，將包膜乳液液化后噴涂于包芯表面，分多次噴涂，每次噴涂形成0.25mm厚度，每次噴涂結(jié)束在真空度為8kpa，溫度為-22℃下冷凍處理13分鐘后再進行下一次噴涂，連續(xù)噴涂10次。所得到的微生物修復(fù)劑粒徑在2.8-3mm，在-5~-10℃下保存。人工配置的原油污染土壤，土壤采集于淮南市，原油由大慶油田提供，配置得到5.2%的原油污染土壤；土壤中的含油量按紫外分光光計法測定。按1:0.01的重量比將土壤樣品與本發(fā)明生物修復(fù)劑混合，調(diào)節(jié)土壤PH至6.5，每隔7天加一次水，保持土壤濕度在65-70%；每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4940.4730.1120.3911.725.352.062.042.04降解過程未見有毒副物產(chǎn)生。在實施例3的基礎(chǔ)上取消細菌菌劑作為對照組，按同樣的修復(fù)方法測定修復(fù)效果。每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4950.2948.5645.1740.8238.3436.5936.3636.36在實施例3的基礎(chǔ)上取消真菌菌劑作為對照組，按同樣的修復(fù)方法測定修復(fù)效果。每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4949.9348.2244.8640.1537.6236.0835.7935.79在實施例3的基礎(chǔ)上取消載體包膜作為對照組，按同樣的修復(fù)方法測定修復(fù)效果。每隔5天測定一次土壤中原油殘余量，結(jié)果如下表：天數(shù)0510152025303540原油殘余量（g/kg）52.4948.4437.0124.6622.0720.2816.3516.0916.09當(dāng)前第1頁1 2 3