一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法，用于解決目前牛樟芝中多糖抗氧化活性低的缺陷。本發(fā)明的一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法利用水浸法提取牛樟芝菌絲體中的多糖。本發(fā)明的有益效果是：通過本方法所制備的牛樟芝多糖具有明顯的抗氧化活性，該方法簡單方便，適用于進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)，具有很高的商業(yè)價(jià)值。
【專利說明】一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]牛樟芝(Antrodia)又名樟芝,是臺(tái)灣特有的珍貴藥用真菌。據(jù)報(bào)道，牛樟芝含有多種生物活性物質(zhì)，如樟芝多糖、三萜類等。其中，牛樟芝中最主要的保健功能因子之一是牛樟芝多糖，牛樟芝多糖具有提高免疫力、抑制癌細(xì)胞、改善心血管循環(huán)系統(tǒng)、防止動(dòng)脈硬化等功效作用，已引起了廣泛關(guān)注。雖然牛樟芝多糖具有多種保健功效，但目前因其抗氧化活性低而限制了其應(yīng)用。而目前采取的各種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法中，多糖清除OH-自由基的能力最高只能達(dá)到17%，清除超氧自由基的清除率也只有50-70%。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法。
[0004]本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法，包括如下步驟:
[0005]I)將牛樟芝發(fā)酵液經(jīng)篩過濾，得牛樟芝菌絲體；
[0006]2)在牛樟芝菌絲體中加1-3倍量蒸餾水，并于多功能機(jī)粉碎勻漿，得混合物；
[0007]3)將混合物在120°C水浴浸提處理2小時(shí)，離心10-15分鐘后，取上清液；
[0008]4)將上清液于60?65°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加4倍量無水乙醇，然后于0_4°C靜置10-12小時(shí)，離心得沉淀物；
[0009]5)將沉淀物加蒸餾水溶解后，加氯仿異戊醇劇烈震蕩去除蛋白沉淀，得到脫蛋白的提取液；
[0010]6)將脫蛋白的提取液經(jīng)步驟5)多次處理，直至無蛋白產(chǎn)生，得脫蛋白上清液；
[0011]7)將脫蛋白上清液加3-5倍量無水乙醇后，于0-4°C靜置10-12小時(shí)，離心所得沉淀物加蒸餾水溶解，于3-4°C透析2天，再加3-5倍量無水乙醇，0-4°C靜置10-12小時(shí)，離心后將沉淀冷凍干燥，得牛樟芝多糖。
[0012]所述步驟5)中氯仿異戊醇中的氯仿與異戊醇比例為4:1。
[0013]本發(fā)明的有益效果是:通過本方法所制備的牛樟芝多糖具有明顯的抗氧化活性，該方法簡單方便，適用于進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)，具有很高的商業(yè)價(jià)值。

【具體實(shí)施方式】
[0014]實(shí)施例一
[0015]本實(shí)施例中的一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法包括如下步驟:
[0016]I)將牛樟芝發(fā)酵液經(jīng)40目篩過濾，得牛樟芝菌絲體；
[0017]2)在牛樟芝菌絲體中加等量蒸餾水，并于多功能機(jī)粉碎勻漿，得混合物；
[0018]3)將混合物在120°C水浴浸提處理2小時(shí)，離心10分鐘后，取上清液；
[0019]4)將上清液于60°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加4倍量無水乙醇，然后于(TC靜置10小時(shí)，離心得沉淀物；
[0020]5)將沉淀物加等量蒸餾水溶解后，加等量氯仿異戊醇(氯仿:異戊醇=4:1)劇烈震蕩去除蛋白沉淀，得到脫蛋白的提取液；
[0021]6)將脫蛋白的提取液經(jīng)步驟5)多次處理，直至無蛋白產(chǎn)生，得脫蛋白上清液；
[0022]7)將脫蛋白上清液加3倍量無水乙醇后，于0°C靜置10小時(shí)，離心所得沉淀物加等量蒸餾水溶解，于4°C透析2天，再加3倍量無水乙醇，(TC靜置10小時(shí)，離心后將沉淀冷凍干燥，得牛樟芝多糖。
[0023]抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，利用本實(shí)施例種方法所得牛樟芝菌絲體多糖清除OH-自由基的能力為20.4%。而在超氧自由基的清除能力方面，當(dāng)牛樟芝菌絲體多糖的濃度達(dá)4g/L時(shí)，超氧自由基的清除率達(dá)到82.1%。
[0024]實(shí)施例二
[0025]本實(shí)施例中的一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法包括如下步驟:
[0026]I)將牛樟芝發(fā)酵液經(jīng)40目篩過濾，得牛樟芝菌絲體；
[0027]2)在牛樟芝菌絲體中加3倍量蒸餾水，并于多功能機(jī)粉碎勻漿，得混合物；
[0028]3)將混合物在120°C水浴浸提處理2小時(shí)，離心15分鐘后，取上清液；
[0029]4)將上清液于65°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加4倍量無水乙醇，然后于4°C靜置12小時(shí)，離心得沉淀物；
[0030]5)將沉淀物加等量蒸餾水溶解后，加等量氯仿異戊醇(氯仿:異戊醇=4:1)劇烈震蕩去除蛋白沉淀，得到脫蛋白的提取液；
[0031]6)將脫蛋白的提取液經(jīng)步驟5)多次處理，直至無蛋白產(chǎn)生，得脫蛋白上清液；
[0032]7)將脫蛋白上清液加5倍量無水乙醇后，于4°C靜置12小時(shí)，離心所得沉淀物加等量蒸餾水溶解，于4°C透析2天，再加5倍量無水乙醇，4°C靜置12小時(shí)，離心后將沉淀冷凍干燥，得牛樟芝多糖。
[0033]抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，利用本實(shí)施例種方法所得牛樟芝菌絲體多糖的清除OH-自由基的能力為30.5%。而在超氧自由基的清除能力方面，當(dāng)牛樟芝菌絲體多糖的濃度達(dá)2g/L時(shí)，超氧自由基的清除率達(dá)到90.8%。
[0034]實(shí)施例三
[0035]本實(shí)施例中的一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法包括如下步驟:
[0036]I)將牛樟芝發(fā)酵液經(jīng)40目篩過濾，得牛樟芝菌絲體；
[0037]2)在牛樟芝菌絲體中加2倍量蒸餾水，并于多功能機(jī)粉碎勻漿，得混合物；
[0038]3)將混合物在120°C水浴浸提處理2小時(shí)，離心10分鐘后，取上清液；
[0039]4)將上清液于63°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加4倍量無水乙醇，然后于4°C靜置10小時(shí)，離心得沉淀物；
[0040]5)將沉淀物加等量蒸餾水溶解后，加等量氯仿異戊醇(氯仿:異戊醇=4:1)劇烈震蕩去除蛋白沉淀，得到脫蛋白的提取液；
[0041]6)將脫蛋白的提取液經(jīng)步驟5)多次處理，直至無蛋白產(chǎn)生，得脫蛋白上清液；
[0042]7)將脫蛋白上清液加4倍量無水乙醇后，于4°C靜置10小時(shí)，離心所得沉淀物加等量蒸餾水溶解，于4°C透析2天，再加4倍量無水乙醇，4°C靜置10小時(shí)，離心后將沉淀冷凍干燥，得牛樟芝多糖。
[0043]抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，利用本實(shí)施例方法所得牛樟芝菌絲體多糖清除OH-自由基的能力為26.2%。而在超氧自由基的清除能力方面，當(dāng)牛樟芝菌絲體多糖的濃度達(dá)3g/L時(shí)，超氧自由基的清除率達(dá)到84.8%。
[0044]采用本發(fā)明所述的方法，與現(xiàn)有技術(shù)相比，能夠?qū)⑴Ｕ林ザ嗵乔宄齇H-自由基的能力從17%提高到20%以上，將牛樟芝多糖清除超氧自由基的清除率從50-70%提高到80-95%，極大提高了牛樟芝多糖的抗氧化活性。
[0045]以上對本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)說明，但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，不能被認(rèn)為用于限定本發(fā)明的實(shí)施范圍。凡依本發(fā)明申請范圍所作的均等變化與改進(jìn)等，均應(yīng)仍歸屬于本發(fā)明的專利涵蓋范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法，其特征在于包括如下步驟: 1)將牛樟芝發(fā)酵液經(jīng)篩過濾，得牛樟芝菌絲體； 2)在牛樟芝菌絲體中加1-3倍量蒸餾水，并于多功能機(jī)粉碎勻漿，得混合物； 3)將混合物在1201水浴浸提處理2小時(shí)，離心10-15分鐘后，取上清液； 4)將上清液于60?651下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，加4倍量無水乙醇，然后于0-41靜置10-12小時(shí)，離心得沉淀物； 5)將沉淀物加蒸餾水溶解后，加氯仿異戊醇劇烈震蕩去除蛋白沉淀，得到脫蛋白的提取液； 6)將脫蛋白的提取液經(jīng)步驟5)多次處理，直至無蛋白產(chǎn)生，得脫蛋白上清液； 7)將脫蛋白上清液加3-5倍量無水乙醇后，于0-41靜置10-12小時(shí)，離心所得沉淀物加蒸餾水溶解，于3-4【透析2天，再加3-5倍量無水乙醇，0-4【靜置10-12小時(shí)，離心后將沉淀冷凍干燥，得牛樟芝多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高牛樟芝多糖抗氧化活性的方法，其特征在于:所述步驟5)中氯仿異戊醇中的氯仿與異戊醇比例為4:1。
【文檔編號】C08B37/00GK104448026SQ201410850342
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月31日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月31日
【發(fā)明者】季延濱, 李濤 申請人:三生源生物科技（天津）有限公司