專利名稱：用于醫(yī)療的雙環(huán)脒衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及雙環(huán)脒衍生物，它們的制備方法，含有它們的組合物及其在醫(yī)療中的應用。
已知某些脒衍生物可在醫(yī)療中采用。在美國專利3669974(USVPharmzceutical Corp.)和英國專利申請2226562(Boots)中記述了N-苯基脒衍生物可用于治療糖尿病，在國際專利申請WO 92/04054(University of Oregon)中記述了N’N”-二取代脒可用于治療高血壓，抑郁和產生幻覺的狀態(tài)。在比利時專利717740和英國專利1180629(均為Delalande)中記敘了某些脒和對稱的二脒作為抗過敏劑在治療發(fā)炎和高血壓中的應用。在德國專利申請DE-OS-2321330(Bayer)中也記敘了脒衍生物作為除草劑的用途。
例如在國際專利申請WO 94/12163(Abbott)，WO 93/13066和WO 94/12165(均為Wellcome)和歐洲專利申請446699(MerrellDow)，547558和558468(均為Washington University)中記敘了氧化氮合成酶抑制劑在治病中的應用。在申請的優(yōu)先權日以后，公開的6個文獻WO 95/00505，WO 95/09619，WO 95/09621(均為Wellcome)，WO 95/10266(Otsuka)，WO 95/11231和WO95/11014(均為Searle)中也記敘了氧化氮合成酶抑制劑在醫(yī)療中的應用。
申請人在前面已記敘了作為氧化氮合成酶抑制劑的胍衍生物和脒衍生物在治療特別是神經變性疾病方面的應用(WO 94/21621，WO95/05363)。第二個文獻是在申請的優(yōu)先權日以后公開的。
我們現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了具有有用藥理活性的一組新的雙環(huán)脒衍生物。
本發(fā)明第一方面提供了通式I化合物及其可藥用鹽
其中D表示含有1-4個選自O，N或S的雜原子的5元芳雜環(huán)，該環(huán)在碳原子上可被鹵素，三氟甲基，C1-6烷基，硝基或氰基任選取代，并且通過碳原子與式I化合物的其余部分相連；A表示N(X)或CH(-(CH2)m-NXY)；U表示NH，O或CH2；V表示(CH2)a；W表示(CH2)b；a和b獨立地表示整數(shù)0-3，條件是a+b是在1-3范圍內；X和Y獨立地表示氫，C1-6烷基或基團-(CH2)nQ，或-NXY表示哌啶基，吡咯烷基，嗎啉基或四氫異喹啉基；Q表示被一或多個選自C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6全氟烷基，鹵素，硝基或氰基的取代基任選取代的聯(lián)苯基或苯基；m表示整數(shù)0-5；n表示整數(shù)0-6；或鏈U-V-A-W定義如上，只是不飽和的除外，或鏈U-V-A-W表示在碳原子上被-(CH2)m-NXY取代的-NH-CH2-CH2-O-，其中m，X和Y的定義如上。
優(yōu)選的式I化合物及其可藥用鹽由式IA表示
其中T表示被-(CH2)m-NXY取代的C3-5飽和或不飽和亞烷基鏈；被-(CH2)m-NXY取代的-O-(CH2)2-NH-；或-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-；X和Y獨立地表示氫，C1-6烷基或基團-(CH2)nQ，或-NXY表示哌啶基，吡咯烷基，嗎啉基或四氫異喹啉基；Q表示被C1-6烷基，C1-6烷氧基，三氟甲基，鹵素，硝基或氰基任選取代的苯基；和U，m，n，a，b和D的定義如上，只是T表示-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-和X表示-(CH2)nQ，n表示0-5的整數(shù)除外。
我們認為D優(yōu)選表示含有-個選自O，N或S的雜原子的5元芳雜環(huán)，該芳雜環(huán)在碳原子上任選被鹵素取代。我們認為D特別優(yōu)選表示噻吩基，呋喃基或吡咯基，特別是噻吩基或呋喃基，更特別是噻吩基和最特別是2-噻吩基。
我們認為T優(yōu)選表示被-(CH2)m-NXY取代的C3-5飽和或不飽和亞烷基鏈，特別是被-(CH2)m-NXY取代的C3-5飽和亞烷基鏈，尤其是被-(CH2)m-NXY取代的C3-4飽和亞烷基鏈。
當T表示被-(CH2)m-NXY取代的C3-5飽和或不飽和亞烷基鏈，或被-(CH2)m-NXY取代的-O-(CH2)2-NH-時，X和Y優(yōu)選獨立地表示氫，C1-6烷基或基團-(CH2)nQ。我們認為X和Y特別優(yōu)選表示氫，甲基，乙基或基團-(CH2)nQ，和特別是X和Y其中一個表示氫和另一個表示氫或基團-(CH2)nQ。
我們認為m優(yōu)選表示0或1，特別是0。
當T表示-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-時，我們認為優(yōu)選U表示CH2。
當T表示-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-時，我們認為a+b優(yōu)選表示1或2。
當T表示-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-時，我們認為X優(yōu)選表示氫，C1-6烷基或基團-(CH2)nQ。
當X和/或Y表示-(CH2)nQ時，我們認為n優(yōu)選表示0，1或2，特別是1。
我們認為Q優(yōu)選表示被C1-6烷基或鹵素任選取代的苯基，而我們認為Q特別優(yōu)選表示未取代的苯基。
根據(jù)本發(fā)明，我們進一步提供了制備式I化合物及其可藥用鹽的方法，該方法包括(a)通過相應的式II化合物
其中U，V，A和W的定義如上，與式III化合物反應制備式I化合物，
其中D的定義如上和L是離去基團；(b)通過相應的式IV化合物
其中U，V，A和W的定義如上和HA是酸，與式V化合物反應制備式I化合物，
其中D的定義如上；(c)通過其中X是氫的相應的式I化合物與式VI化合物的反應，R9-LVI其中R9表示C1-6烷基或基團-(CH2)nQ，L是離去基團，制備其中A表示N(X)和X表示C1-6烷基或基團-(CH2)nQ的式I化合物；(d)通過其中X和Y中一個或兩個表示氫的相應的式I化合物與式VI化合物反應，制備其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)以及X和Y中至少一個表示C1-6烷基或基團-(CH2)nQ的式I化合物；(e)通過還原相應的式VII化合物，
其中U，V，W，X，Y和D的定義如上，制備其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)和m表示1-5整數(shù)的式I化合物；(f)通過還原相應的式VIII化合物，
其中U，V，W，m和D定義如上，制備其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)和X和Y均為氫的式I化合物；(g)通過還原相應的式IX化合物，
其中U，V，W，D和Y的定義如上，制備其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)，X表示氫和m表示1-5整數(shù)的式I化合物；(h)通過還原相應的式X化合物，
其中Q，m，U，V，W和D的定義如上，制備式I化合物，其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)和，X和Y其中之一表示氫，和另一個表示-(CH2)nQ，其中n表示1-6的整數(shù)；(i)通過還原相應的式XI化合物，
其中Q，m，U，V，W和D的定義如上，制備式I化合物，其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)和，X和Y其中之一表示氫，和另一個表示-(CH2)nQ，其中n表示1-6的整數(shù)；或(j)通過還原相應的式XII化合物，
其中U，V，W，D和Y的定義如上，制備其中A表示CH(-NXY)和X表示氫的式I化合物。
并且如果需要將所得的式I化合物或其另一種鹽，轉化為可藥用鹽，或者反過來也是這樣。
在方法(a)中，反應是在室溫和溶劑的回流溫度之間的溫度下，在合適的溶劑中攪拌反應混合物進行，合適的溶劑如低級烷醇如乙醇，異丙醇或叔丁醇，反應時間特別取決于溶劑和離去基團的性質，可達到48小時，但典型的是在1-5小時。L所示的合適的離去基團包括硫烷基，磺?；?，三氟碳磺酰基，鹵素，烷基和芳基醇以及甲苯磺?；?；其它在‘Advanced Organic Chemistry’，J.March(1985)第三版，McGraw-Hill，P315中記載的離去基團是本領域公知的。
在方法(b)中，反應優(yōu)選是在合適的溶劑存在下回流兩種化合物的混合物進行的，反應溫度應足夠高以使縮合反應容易進行，但又不能高到使形成的脒分解，反應溫度在室溫至約250℃間變化，而反應優(yōu)選是在約100℃-200℃下進行，我們發(fā)現(xiàn)鄰二氯苯是特別合適的溶劑并且加入4-二甲基氨基吡啶作為催化劑時采用。冷卻時形成兩層，傾析溶劑，通過加入堿水溶液處理反應。或者，當反應物可在溶劑中溶解時，真空蒸除溶劑并通過加入水處理反應混合物。酸HA可是有機酸或無機酸，例如氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、磺酸、硝酸、磷酸、乙酸、乳酸、琥珀酸、富馬酸、蘋果酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸或甲磺酸。
在方法(c)中，反應在標準條件下進行，例如通過在室溫堿性條件下惰性溶劑中使兩種化合物反應至多12小時進行，我們發(fā)現(xiàn)在與式VI化合物反應之前用NaH處理胺是需要的，我們認為L優(yōu)選表示鹵化物，優(yōu)選溴。
方法(d)可在與方法(c)所述類似的條件下進行。
在方法(c)中還原是在惰性溶劑如THF中用乙硼烷處理進行的。其余雖然較不優(yōu)選但也是合適的試劑包括氫化鋁鋰和用于催化氫化的試劑例如H2于鈀/炭上，在這些反應中采用的反應條件的進一步詳細的內容可參考J.March“Advanced Organic Chemistry”P1099，這里包括所引用的參考文獻。
在方法(f)中還原反應可在一系列條件下進行，如J.March“Advanced Organic Chemistry”P1103-1104所述，這些條件包括采用Zn，Sn或Fe金屬，AlH3-AlCl3，硫化物和其它物質催化氫化，我們認為反應在鈀和炭催化劑存在下在大氣壓下氫化3-6小時進行。
在方法(g)，(i)和(j)中，還原反應是在標準條件下用硼氫化鈉或氰基硼氫化鈉處理化合物進行。
在方法(h)中反應是在與方法(e)所述類似的反應條件下進行的。
式I化合物的鹽是由其游離堿或鹽，對映體，互變異構體或被保護衍生物與一當量或多當量的合適的酸反應形成的。所述反應可在其中鹽是不溶的溶劑或介質中，或在其中鹽可溶解的溶劑中進行，例如水，二噁烷、乙醇，四氫呋喃或二乙醚或這些溶劑的混合物，這些溶劑可通過蒸發(fā)或冷凍干燥除去，該反應是一個置換過程或該反應可在離子交換樹脂上進行。
通式II化合物可通過還原相應的式XIII化合物制備
其中U，V，A和W的定義如上。
還原反應可在與方法(f)所述的類似的反應條件下進行。
某些式II化合物或者是已知的或者可通過每人公知的常規(guī)方法制備；其它式II化合物可由已知的化合物，采用簡單的取代基通過與方法(c)-(j)所述的類似的方法制備。例如，通過與上述方法(j)所述類似方法，我們發(fā)現(xiàn)通過還原相應的亞胺制備其中A表示CH(-NXY)和X表示氫的式XIII化合物是很方便的，其中亞胺是通過式NH2Y與硝酸酯化的雙環(huán)酮反應形成的。
式IV化合物可通過與制備式II化合物所述的類似的方法制備，用堿處理可將式IV化合物轉化為相應的式II化合物。用質子酸HA處理可將式II化合物轉化為相應的式IV化合物，質子酸如上所述。
式III化合物或者是已知的或者可通過已知的方法制備，例如其中L表示硫烷基的式III化合物可通過用烷基碘化物處理相應的式XIV硫羰胺進行制備
其中D的定義如上。
式VII，VIII，IX，X，XI和XII可通過與制備式I化合物所述的類似的方法制備，這樣的化合物很容易從具有簡單取代基的化合物，通過常規(guī)方法如形成酰胺(VII，X)或形成亞胺(IX，XI，XII)制備，形成酰胺是通過胺與羧酸或其活性衍生物反應進行的，形成亞胺是通過胺與醛的反應進行的。
式V，VI，XIII和XIV化合物或這是已知的或者通過每人公知的常規(guī)方法制備。
需要采用在標準課本“Protective Groups in OrganicSynthesis”，第二版(1991)，Green和Wuts描述的保護基對胺或其它活性基團進行保護對本領域熟練技術人員而言是顯而易見的，可提及的胺保護基包括C2-7烷氧羰基，例如叔丁氧基羰基，C8-13基烷氧羰基例如芐氧羰基或優(yōu)選的是三氟乙酸酯基，通常用含水的堿，酸或用氫氣處理可脫保護。
通過標準技術可從反應混合物中分離本發(fā)明化合物和中間體。
術語“C1-6烷基”包括含1-6個碳原子的直鏈、支鏈、飽和、不飽和、脂族和環(huán)烷基。
式I化合物可以互變異構體，非對映異構體或對映異構體的形式存在，所有的形式均包括在本發(fā)明的范圍內，采用常規(guī)技術如分級結晶或HPIC，可通過分離化合物的外消旋物分離各種光學異構體，或者在不產生消旋的反應條件下，通過合適光學活性的起始原料的反應制備單一的非對映異構體。
中間體化合物也可以非對映異構體形式存在并且可以用作為純化的非對映異構體，對映異構體，外消旋物或它們的混合物。
在動物體內式I化合物具有有用的藥理活性，特別是，它們具有有用的氧化氮合成酶抑制活性，因此預測它們可用于治療或預防人類的和氧化氮的合成或超合成有關的疾病或癥狀；這些疾病或癥狀例如缺氧如心博停止和休克，神經變性性疾病包括神經變性和/或神經壞死，如氧不足，低血糖、癲癇和外傷(如脊柱和腦損傷)，高壓氧驚厥和毒性，癡呆如早老性癡呆，阿爾茨海默氏病和AIDS-有關的癡呆，舞蹈病，帕金森氏病，圖雷特氏病，杭廷頓氏病，肌萎縮性(脊髓)側索硬化，科爾薩科夫氏病。與腦血管病有關的癡愚，睡眠障礙，精神分裂癥，抑郁，孤獨癖，季節(jié)影響的疾病，jet-lag、抑郁或其它與月經前綜合癥(PMS)，焦慮和膿毒性休克有關的癥狀。在預防和逆轉對鴉片制劑和二氮雜的耐受性，治療藥物成癮、減輕疼痛和治療偏頭痛以及其它血管性頭痛方面通式I化合物也顯示活性。本發(fā)明化合物也顯示出有用的免疫抑制活性，可用于治療或預防發(fā)炎，神經元炎癥，可逆通道堵塞疾病包括氣喘和成年人呼吸窘迫綜合癥(ARDS)，可用于治療胃腸蠕動疾病，癌，誘導分娩，減少胃腸道分泌和增強骨髓肌的收縮力。
式I化合物可特別用于治療神經變性疾病，偏頭痛或預防和逆轉對鴉片制劑和二氮雜的耐受性，或用于治療藥物成癮和特別用于治療神經變性疾病。
因此本發(fā)明另一方面提供了用作藥物的式I化合物或其可藥用鹽。
本發(fā)明另一個特征是提供了式I化合物或其可藥用鹽在制備治療或預防上述疾病或癥狀的制劑方面的用途。
本發(fā)明也提供了治療或預防上述疾病或癥狀的方法，該方法包括向患有或容易患有上述疾病或癥狀的人施用治療有效量的式I化合物或其可藥用鹽。
對于上述的治療，劑量當然是根據(jù)所采用的化合物，施用途徑和所需要的治療而變化。但是，總的來說，給人施用時化合物的日劑量在1mg和2000mg(以固體劑型測定)范圍時可以獲得滿意的效果。
式I化合物或其可藥用鹽可單獨使用，或以適于腸道或非腸道施用的合適的醫(yī)療制劑形式使用。
本發(fā)明提供了優(yōu)選含有少于80％，和更優(yōu)選含有少于50％式I化合物或其可藥用鹽與可藥用載體或稀釋劑混合的藥物制劑。
適用的稀釋劑和載體是本領域熟練技術人員公知的。
氧化氮合成酶有一系列同型，和根據(jù)Bredt和Snyder，Proc.Natl.Acad.Sci(1990)87，682-685Frstermann等，Eur.J.Pharm，(1992)，225，161-165所述的步驟，篩選對于氧化氮合成酶活性的式I化合物或其可藥用鹽氧化氮合成酶將3H-L-精氨酸轉化為3H-L-烏氨酸，它可通過陽離子交換色譜分離和通過閃爍計數(shù)定量。篩選A(A) 篩選神經元氧化氮合成酶活性從大鼠海馬或小腦中分離酶。分離出雄性Sprague-Dawley大鼠(250-275g)的小腦或海馬，接著CO2麻醉動物并處死。在含有1mMEDTA緩沖液的50mM Tris-HCl中(pH7.2，于25℃) 均化并在20,000g離心15分鐘制備小腦或海馬上清液。通過Dowex AG-50W-X8鈉型色譜，接著通過氫型柱色譜從上清液中除去殘余的L-精氨酸并進一步在1000g離心30秒。
進行試驗時，在22℃下將25μl最后的上清液加到各個含有25μlL-精氨酸溶液(濃度為18μM1H-L-精氨酸，96nM3H-L-精氨酸)和或者含有25μL試驗緩沖液(50mM HEPES，1mMEDTA，1.5mM CaCl2，pH7.4)或25μL溶于緩沖液的試驗化合物的12個試驗試管中。向各個試驗試管中加入75μL完全的試驗緩沖液(50mM HEPES，1mM EDTA，1.5mM CaCl2，mM DTT，100μM NADPH，10μg/ml鈣調蛋白，pH7.4)以引發(fā)反應，10分鐘后通過加入2mL終止緩沖液(20mM HEPES，2mM EDTA，pH5.5)使反應停止。
在Dowex AG-50W-X8 200-400目篩柱上通過色譜法從標記的L-精氨酸中分離標記的L-瓜氨酸。將各1 mL最終反應物加到各個1mL柱上，并將洗脫液與兩次1mL蒸餾水洗液和16mL閃爍混合液(cocktail)合并。然后通過閃爍計數(shù)給L-瓜氨酸定量。
在采用小腦上清液的典型的試驗中，對空白試劑而言，樣品的基礎活性增加20,000dpm/mL，空白試劑的活性為7,000dpm/mL。在試驗中測定在濃度1μM時對氧化氮合成酶的抑制為60％的參考標準，即N-硝基-L-精氨酸以確定反應步驟。篩選B(B) 篩選巨噬細胞氧化氮合成酶活性酶是在誘導后，從培養(yǎng)的鼠巨噬細胞系J774A-1制備(從ImperialCancer Research Fund試驗室獲得)。在補充有10％牛胎兒血清，4mML-谷胺酰胺和抗體(100單位/mL盤尼西林G，100μg/mL鏈霉素和0.25μg/mL兩性霉素B)的Dullbecco’S Modified Eagles Medium(DMEM)中培養(yǎng)J774A-1。細胞通常在保持于37℃的含35mL介質225cm2燒瓶中和在含有5％CO2的濕潤氣氛中生長。
氧化氮合成酶是通過細胞對干擾素-γ(IFNγ)和脂多糖類(LPS)的應答而產生的。移去融合培養(yǎng)燒瓶中的介質并用含有1μg/mL LPS和10單位/mL IFNγ的25mL(每只燒瓶)新鮮介質代替。在培養(yǎng)基中17-20小時后，從燒瓶表面將細胞層刮入培養(yǎng)基中完成細胞的收集。通過離心收集細胞(1000g 10分鐘)并向所得的細胞丸中加入含有50mMTris-HCl(pH7.5 20℃)，10％(v/v)丙三醇，0.1％(V/V)Triton-X-100，0.1μM二硫蘇糖醇和含有亮肽酶素(2μg/mL)蛋白酶抑制劑混合液，大豆胰旦白酶抑制劑(10μg/mL)，抑肽酶(5μg/mL)以及苯基甲基磺?；?50μg/mL)的溶液以制備溶胞產物。
進行試驗時，將25μL底物混合液(50mM Tris-HCl (pH7.5，20℃)，400μM NADPH，20μM黃素腺嘌呤二核苷，20μM黃素單核苷，4μM四氫生物蝶呤，12μM L-精氨酸和0.025μCi L-〔3H〕精氨酸)加到含有25μL試驗化合物的50mM Tris-HCl溶液的96孔濾板(0.45μM孔徑)上。加入50μL細胞溶胞產物(如上所述制備)使反應開始，并在室溫孵育1小時后通過加入50μL 3mM硝基精氨酸和21mM EDTA水溶液使反應中止。
采用Dowex AG-50W從標記的L-精氨酸中分離出標記的L-瓜氨酸。通過Dowex 50W(Na+型)的150μL 25％含水漿液加到試驗物中，之后將所有物質濾入96孔板中，采取70μL濾液，并將其加到含有固體閃爍劑的96孔板的各孔中。使樣品干燥后通過閃爍計數(shù)給L-瓜氨酸的定量。
在典型的試驗中，與試劑對照，基礎活性由300dpm/70μL樣品升高到1900dpm。作為標準測定其IC50(50％抑制濃度)是10μM的氨基胍以確定試驗步驟。篩選C(C)篩選內皮的氧化氮合成酶活性根據(jù)Pollock等(1991)Proc.Nat.Acad.Sci.，88，10480-10484所述的步驟，從人的臍靜脈內皮細胞(HUVECs)分離出酶。從Clonetics Corp(San Diego，CA，USA)購買HUVECs并培養(yǎng)融合。可保持細胞35-40(代)而沒有氧化氮合成酶產率的明顯損失。當細胞達到融合時，將它們懸浮于Dulbecco’s磷酸鹽緩沖液鹽水中，在800rpm離心10分鐘，在冰冷的50mM Tris-HCl，1mM EDTA，10％丙三醇，1mM苯甲基磺?；铮琾H4.2的2μM亮肽酶素中均化所得的細胞丸。接著，在34,000rpm離心60分鐘后，在也含有20mM CHAPS的均化緩沖液中溶解所得的丸。冰上孵育30分鐘后，在34,000rpm將所得懸浮液離心30分鐘。使用前在-80℃保存得到的上清液。
進行試驗時，在22℃下將25μL最終上清液加到各個含有25μL L-精氨酸溶液(濃度12μM的1H-L-精氨酸，64nM3H-L-精氨酸)和或者含有25μL試驗緩沖液(50mM HEPES，1mM EDTA，1.5mM CaCl2，pH7.4)或25μL溶于緩沖液的試驗化合物的12個試驗試管中。向各個試驗試管中加入25μL完全試驗緩沖液(50mMHEPES，1mM EDTA，1.5mMCaCl2，1mM DTT，100μMNADPH，10μg/ml鈣調蛋白，12μM四氫生物喋呤，pH7.4)以引發(fā)反應，10分鐘后通過加入2ml終止緩沖液(20mM HEPES，20mMEDTA，pH5.5)使反應停止。
在Dowex AG-50W-X8 200-400目篩柱上通過色譜法從標記的L-精氨酸中分離標記的L-瓜氨酸。將各1mL最終反應物加到各1mL柱上，并將洗脫液與兩次1mL蒸餾水洗液和16mL閃爍混合液合并。然后通過閃爍計數(shù)給L-瓜氨酸定量。
在典型試驗中，對空白試劑而言，樣品的基礎活性增加5,000dpm/mL，空白試劑的活性為1500dpm/mL。在試驗中測定參考標準，即濃度1μM時對氧化氮合成酶的抑制為70-90％的N-硝基-L-精氨酸，以確定反應步驟。
可在體外試驗中測定化合物以確定穿透腦的程度。篩選D(D) 體外測定神經元氧化氮合成酶活性。
以溶于0.9％鹽水的10mg/kg試驗化合物的量或單獨施用作為對照的鹽水，給雄性Sprague-Dawley大鼠(250-275g)靜脈施用。施用后在預定的時間內(典型的2-24小時)殺死動物。移出小腦，如篩選A所述制備上清液和測定氧化氮合成酶活性。
在進一步的確認試驗中，使小腦上清液的一部分通過2’-5’-ADPSepharose柱(它可與氧化氮合成酶結合)并隨后用NADPH洗脫。根據(jù)篩選A所述測定洗脫液的氧化氮合成酶活性。
可穿透大鼠腦和抑制神經元氧化氮合成酶的化合物，可同時降低上清液制品和2’-5’-ADP Sepharose柱上洗脫液的氧化氮合成酶活性。
在篩選氧化氮合成酶抑制活性時，化合物的活性是以IC50(在試驗中抑制酶作用50％的藥物濃度)表示的。根據(jù)1、10和100μM濃度的化合物溶液初估一下試驗化合物的IC50值。采用更合適的濃度對10μM時抑制酶作用至少50％的化合物再進行試驗以確定IC50值。
在前面篩選A中(即對抗氧化氮合成酶的神經元同型的活性的篩選)，實施例1化合物的IC50低于10μM，標志著化合物顯示了預計的有用治療活性。在篩選B和C中(即對抗氧化氮合成酶的巨噬細胞和內皮細胞同型活性的篩選)，實施例1化合物的IC50值10倍多于篩選A中得到活性，標志著化合物顯示了需要的選擇性。
在篩選A中也對實施例2-9，10(a)-(f)，11-13和19-24化合物進行測試和也得到了低于10μM的IC50值。因此，預計這些化合物也會表現(xiàn)有用的治療活性。
與從前已知的和上述提及的用于治療領域的化合物相比，通式1化合物及其可藥用鹽的優(yōu)點是毒性較低、更有效，選擇性更高，作用時間更長，更廣譜活性，更強有力，產生副作用更少，更容易吸收，或具有其它有用的藥理性能。
通式I化合物及其可藥用鹽也具有對氧化氮合成酶的神經元同型的選擇性更高的優(yōu)點，因此表現(xiàn)為與抑制其它同型有關的有用的治療活性，同時付作用低。
本發(fā)明通過下面的實施例說明實施例1N-((2-苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒(carboximidamide)二草酸鹽(a) 5-硝基-2-二氫茚酮根據(jù)Heusler，Schieffer Ber.，(1989)32，33所述的方法制備化合物。(b) 5-硝基-2-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚將5-硝基-2-二氫茚酮(1.48g，8.36mmol)，芐基胺(4.40ml，41.8mmol)，乙酸(15.0ml)，4分子篩(20ml)，THF(15ml)和甲醇(15ml)加到燒瓶中并冷卻到0℃，然后在5分鐘期間內分批加入氰基硼氫化鈉(1.05g，16.7mmol)。攪拌混合物14小時，通過硅藻土過濾并濃縮成為漿狀物。用2N氫氧化鈉將混合物調至堿性并用乙醚(3×50ml)提取，用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥，過濾并通過硅膠色譜純化(3％甲醇/二氯甲烷)得到5-硝基-2-(苯基甲基)-氨基-1，2-二氫化茚(1.18g，53％)；M.S.(M+H)+＝269(c)2-(5-硝基-1，2-二氫化茚基)-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺向攪拌下的5-硝基-2-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚(1.18g，4.40mmol)和三乙胺(0.61ml，4.4mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中滴加入三氟乙酸酐(0.63ml，4.40mmol)。攪拌1分鐘后將溶劑傾入到水中并用二氯甲烷(3×20ml)提取。用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥并通過硅膠短塞過濾(20％乙酸乙酯/己烷)得到2-(5-硝基-1，2-二氫化茚基)-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺(1.17g，73％)；M.S.(M+H)+＝365。(d)2-(5-氨基-1，2-二氫化茚基)-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺向攪拌下的2-(5-硝基-1，2-二氫化茚基)-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺(1.17g，3.21mmol)的四氫呋喃/甲醇(100ml，1∶1)溶液中加入催化量的10％Pd/C。在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到2-(5-氨基-1，2-二氫化茚基)-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個步驟(f)。(e)S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺氫碘酸鹽用碘甲烷(13.4g)處理2-噻吩硫代甲酰胺(MaybridgeChemical)(11.1g)的丙酮(60ml)溶液，在22℃6小時之后，通過過濾收集所得的黃色固體，用丙酮(2×25ml)洗滌并干燥得到18.45gS-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽。m.p.195℃(分解)。(f)N-((2-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽向2-(5-氨基-1，2-二氫化茚基)-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺(1.0g，3.0mmol)的異丙醇(6ml)/DMF(0.5ml)溶液中加入S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(0.85g，3.0mmol)。攪拌混合物14小時，用甲醇(6ml)和2N氫氧化鈉(6ml)稀釋并在50℃加熱0.5小時。將混合物傾入到水中并用乙酸乙酯(3×30ml)提取，用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥，過濾并通過硅膠色譜純化(20％甲醇/二氯甲烷)得到標題化合物，為游離堿。用IPA/草酸處理得到N-((2-苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽，為白色固體(0.47g，30％)；m.p.130-135℃。實施例2N-((2-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒(a)7-硝基-3，4-二氫-2(1H)-萘酮根據(jù)J.Med.Chem.(1989)32，2128所述的方法制備化合物。(b)7-硝基-2-((苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘將7-硝基-3，4-二氫-2(1H)-萘酮(1.50g，7.85mmol)，芐基胺(4.30ml，39.3mmol)，乙酸(15.0ml)，4分子篩(20ml)和THF(15ml)和甲醇(15ml)加到燒瓶中并冷卻到0℃，然后在5分鐘期間內分批加入氰基硼氫化鈉(1.05g，16.7mmol)。攪拌混合物14小時，通過硅藻土過濾并濃縮成為漿狀物。用2N氫氧化鈉將混合物調至堿性并用乙醚(3×50ml)提取，用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥，過濾并通過硅膠色譜純化(3％甲醇/二氯甲烷)得到7-硝基-2-((苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘(2.10g，95％)；M.S.(M+H)+＝283(c)2-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺向攪拌下的7-硝基-2-((苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘(2.10g，7.45mmol)和三乙胺(1.07ml，7.45mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中滴加入三氟乙酸酐(1.05ml，7.45mmol)。攪拌1分鐘后將溶劑傾入到水中并用二氯甲烷(3×20ml)提取。用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥并通過硅膠短塞過濾(20％乙酸乙酯/己烷)得到2-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺；(2.55g，90％)；M.S.(M+H)+＝379。(d)2-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺向攪拌下的2-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺(2.55g，6.75mmol)的四氫呋喃/甲醇(100ml1∶1)溶液中加入催化量的10％Pd/C。在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到2-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個步驟。(e)N-((2-(苯基甲基)氨基)-1，2；3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒向2-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺(2.11g，6.07mmol)的異丙醇(10ml)溶液中加入S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(1.72g，6.07mmol)。攪拌混合物14小時，用甲醇(6ml)和2N氫氧化鈉(6ml)稀釋并在50℃加熱0.5小時。將混合物傾入到水中并用乙酸乙酯(3×30ml)提取，用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到固體，將其重結晶(二氯甲烷/己烷)得到N-((2-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒，為白色固體(0.66g，30％)；m.p.119-120℃。實施例3N-((2-氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽(a)7-硝基-2-氨基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽將7-硝基-1-四氫萘酮(1.50g，7.85mmol)，乙酸銨(6.05ml，78.5mmol)，乙酸(8.0ml)，4分子篩(20ml)和THF(15ml)和甲醇(15ml)加到燒瓶中并冷卻到0℃，然后在5分鐘期間內分批加入氰基硼氫化鈉(0.99g，15.7mmol)。攪拌混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮成為漿狀物。用2N氫氧化鈉將混合物調至堿性并用乙醚(3×50ml)提取，用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。以鹽酸鹽形式分離得到化合物7-硝基-2-氨基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽；(1.00g，56％)；m.p.大于300℃。(b)2-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫化萘基)-N-三氟乙酰胺向攪拌下的7-硝基-2-氨基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(1.00g，4.39mmol)和三乙胺(1.22ml，8.77mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中滴加入三氟乙酸酐(0.62ml，4.39mmol)。攪拌1分鐘后將溶劑傾到入水中并用二氯甲烷(3×20ml)提取。用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥并通過硅膠短塞過濾(20％乙酸乙酯/己烷)得到2-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫化萘基)-N-三氟乙酰胺(0.78g，62％)；M.S.(M+H)+＝289。(c)2-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-三氟乙酰胺向攪拌下的2-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-三氟乙酰胺(0.76g，2.21mmol)的四氫呋喃/甲醇(100ml 1∶1)溶液中加入催化量的10％Pd/C。在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到2-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-三氟乙酰胺，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個反應。(d)N-((2-氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒向2-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-三氟乙酰胺(0.70g，2.71mmol)的異丙醇(10ml)溶液加入S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(0.77g，2.71mmol)。攪拌混合物14小時，用甲醇(6ml)和2N氫氧化鈉(6ml)稀釋并在50℃加熱0.5小時。將混合物傾入到水中并用乙酸乙酯(3×30ml)提取，用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮和通過硅膠色譜純化(20％甲醇/二氯甲烷)得到N-((2-氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒(0.37g，32％)；大于210℃分解。實施例4N-((1-氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽(a)7-硝基-1-氨基-1，2，3，4-四氫化萘按制備7-硝基-2-氨基-1，2，3，4-四氫化萘的方法制備7-硝基-1-氨基-1，2，3，4-四氫化鈉，所得化合物可以鹽酸鹽形式分離(0.30g，12％)；m.p.大于300℃。(b)1-(7-硝基(1，2，3，4-四氫化萘基)-N-三氟乙酰胺按制備2-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫化萘基)-N-三氟乙酰胺所述的方法制備1-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫化萘基)-N-三氟乙酰胺(0.35g，95％)；M.S.(M+H)+＝289。(c)1-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫萘基))-N-三氟乙酰胺按制備2-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫化萘基)-N-三氟乙酰胺所述的方法制備1-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫化萘基)-N-三氟乙酰胺，可直接用于下一反應。(d)N-((1-氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽按制備N-(2-氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒二氫溴酸鹽所述的方法制備N-((1-氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽，除了它是以草酸鹽形式分離的(0.18g，33％)；大于155℃分解。實施例5N-(2-氨基)-1，2，-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽(a)5-硝基-2-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽在0℃向2-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(19.11g，0.112mmol)中加入硫酸(60ml)，接著加入硝酸鉀(11.84g，0.117mmol)，使混合物溫熱到室溫，另外攪拌2小時，然后傾入冰/50％氫氧化鈉(共500ml)中。用乙醚(3×200ml)提取混合物并用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物，將所得的油狀物轉化為鹽酸鹽。用異丙醇/甲醇重結晶得到5-硝基-2-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(14.58g，60％)；m.p.大于300℃。(b)2-(5-硝基-1，2-二氫化茚)-N-三氟乙酰胺向攪拌下的5-硝基-2-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(1.00g，5.89mmol)和三乙胺(0.82ml，5.89mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中滴加入三氟乙酸酐(0.83ml，5.89mmol)。攪拌1分鐘后將溶劑傾入到水中并用二氯甲烷(3×20ml)提取。用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥并通過硅膠短塞過濾(20％乙酸乙酯/己烷)得到2-(5-硝基-1，2-二氫化茚基)-N-三氟乙酰胺(1.51g，93％)；m.p.153-154℃。(c)2-(5-氨基-1，2-二氫化茚基)-N-三氟乙酰胺向攪拌下的2-(5-硝基-1，2-二氫化茚基)-N-三氟乙酰胺(0.58g，2.25mmol)的四氫呋喃/甲醇(100ml 1∶1)溶液中加入催化量的10％Pd/C。在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到2-(5-氨基-1，2-二氫化茚基)-N-三氟乙酰胺，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個步驟。(d)N-(2-氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽向2-(5-氨基-1，2-二氫化茚基)-N-三氟乙酰胺(0.52g，2.25mmol)的異丙醇(6ml)/DMF(0.5ml)溶液中加入S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(0.64g，2.25mmol)。攪拌混合物14小時，用甲醇(6ml)和2N氫氧化鈉(6ml)稀釋并在50℃加熱0.5小時。將混合物傾入到水中并用乙酸乙酯(3×30ml)提取，用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮和通過硅膠色譜純化(20％甲醇/二氯甲烷)得到標題化合物，為游離堿。用IPA/草酸處理得到N-((2-氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽，為白色固體(0.60g，50％)；m.p.70℃(分解)。實施例6N-((2-(甲基)(苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒二氫溴酸鹽(a)5-硝基-2-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽向5-硝基-2-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(3.00g，14.00mmol)的DMF(60ml)溶液中加入三乙胺(4.07ml，29.40mmol)，接著加入芐基溴(1.74ml，14.68mmol)。使混合物溫熱到室溫，攪拌1小時，傾入到水(200ml)中并用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，通過小的硅膠短塞過濾和縮小體積形成漿狀物。上述小標題化合物以鹽酸鹽形式分離得到(2.29g，54％)；m.p.266℃(分解)。(b)5-硝基-2-(甲基)(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽向5-硝基-2-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(2.29g，7.52mmol)的DMF(100ml)溶液中加入碳酸鉀(92.60g，18.80mmol)，接著加入甲基碘化物(0.47ml，7.52mmol)。使混合物溫熱到室溫，攪拌16小時，傾入到水(400ml)中并用乙酸乙酯(3×100ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，通過小的硅膠短塞過濾和縮小體積形成漿狀物。上述標題化合物以鹽酸鹽形式分離得到(1.08g，45％)；m.p.280℃(分解)。(c)5-氨基-2-(甲基)(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚二鹽酸鹽向5-硝基-2-(甲基)(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(1.08g，3.39mmol)的85％乙酸/水溶液中加入鋅粉(3.0g)，攪拌所得的混合物1分鐘，通過硅藻土過濾并濃縮。用2N氫氧化鈉中和濃縮物并用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，并縮小體積形成漿狀物。用IPA/HCl處理所得的油狀物，濃縮并立即用于下一個步驟。(d)N-((2-(甲基)苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒二氫溴酸鹽向5-氨基-2-(甲基)(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚二鹽酸鹽的DMF(10ml)溶液中加入S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(0.98g，3.45mmol)和吡啶(0.27ml，3.29mmol)。攪拌混合物14小時，傾入到水/2N氫氧化鈉中并用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并通過硅膠色譜純化(10％甲醇/二氯甲烷)得到標題化合物，為游離堿，用IPA/HBr處理得到N-((2-(甲基)苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒二氫溴酸鹽，為白色固體(0.43g，25％)；m.p.196-200℃。實施例7N-((1-氨基)-1，2-二氫化茚-6-基)-2-噻吩甲脒二鹽酸鹽(a)6-硝基-1-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽在0℃將1-氨基-1，2-二氫化茚(10.0g，75.08mmol)加到濃硫酸(40ml)中，使混合物溫熱到室溫以利于溶解然后冷卻到0℃。然后分批加入硝酸鉀(7.60g，75.08mmol)，并在室溫攪拌混合物1小時，然后傾入到冰/50％氫氧化鈉中，用氯仿(3×100ml)提取水溶液。用水洗滌合并的提取物，用炭脫色，并用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物，用IPA/HCl處理得到副-標題化合物(6.90g，43％)；m.p.280℃(分解)。(b)6-氨基-1-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽向6-硝基-1-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(1.00g，4.66mmol)的甲醇(100ml)溶液中加入催化量的10％Pd/C。在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到6-氨基-1-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個步驟。(c)N-((1-氨基)-1，2-二氫化茚-6-基)-2-噻吩甲脒二鹽酸鹽向6-氨基-1-氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(0.74g，4.01mmol)的DMF/IPA(4ml，1∶1)溶液中加入S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(1.26g，4.41mmol)。在50℃加熱混合物，攪拌16小時，然后傾入水/2N氫氧化鈉中并用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。用IPA/HCl處理得到N-((1-氨基)-1，2-二氫化茚-6-基)-2-噻吩甲脒二鹽酸鹽，為白色固體(0.79g，60％)；m.p.大于200℃(分解)。實施例8N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-6-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽(a)6-硝基-1-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽向6-硝基-1-氨基-1，2-二氫化氫化茚鹽酸鹽(1.90g，8.85mmol)的DMF(30ml)溶液中加入三乙胺(2.50ml，18.06mmol)，接著加入芐基溴(1.07ml，9.03mmol)，使混合物溫熱到室溫，攪拌1小時，傾入到水(100ml)中并用乙酸乙酯(3×70ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，通過小的硅膠短塞過濾和縮小體積形成漿狀物。以鹽酸鹽形式分離得到上述標題化合物(1.34g，50％)；m.p.234-235℃。(b)6-氨基-1-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽向6-硝基-1-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(1.34g，4.40mmol)的甲醇(100ml)溶液中加入催化量10％Pd/C。在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到6-氨基-1-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個反應。(c)N-((1-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚-6-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽向6-氨基-1-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(1.21g，4.40mmol)的DMF(20ml)溶液中S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(1.38g，4.84mmol)。在50℃加熱混合物，攪拌16小時，然后傾入水/2N氫氧化鈉中并用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。用IPA/草酸處理得到N-((1-(苯基甲基)氨基-1，2-二氫化茚-6-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽，為白色固體(1.06g，46％)；m.p.大于120℃(分解)。實施例9N-((2-(3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒(a)2-((3-氯苯基)羰基)氨基-6-硝基-1，2-二氫化茚0℃下向2-氨基-6-硝基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(1.5g，7.0mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入三乙胺(2.1ml，15.0mmol)，接著加入3-氯苯甲酰氯(1.0ml，7.5mmol)。立即將混合物傾入到水中并分離各層，用二氯甲烷(2×20ml)提取水層并用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物，TLC證明其為同一物質并立即用于下一個步驟M.S.(M+H)+＝317。(b)2-((3-氯苯基)甲基)氨基-6-硝基-1，2-二氫化茚向2-((3-氯苯基)羰基)氨基-6-硝基-1，2-二氫化茚(2.2g，7.0mmol)的THF(75ml)溶液中滴加入BH3·THF(1.0M，35ml，35mmol)。回流混合物12小時，冷卻到0℃，用4N鹽酸驟冷(60ml)并回流1小時。蒸發(fā)所得的溶液至油狀物，用50％氫氧化鈉調至堿性并用二氯甲烷(3×20ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。用IPA/HCl處理得到2-((3-氯苯基)甲基)氨基-6-硝基-1,2-二氫化茚(2.1g，88％，兩步)；m.p.234-237℃(c)2-((3-氯苯基)甲基)氨基-6-氨基-1，2-二氫化茚向2-((3-氯苯基)甲基)氨基-6-硝基-1，2-二氫化茚鹽酸鹽(2.1g，6.13mmol)的85％乙酸/水溶液(40ml)中加入鋅粉(1.6g，24.5mmol)。攪拌混合物5分鐘，通過硅藻土過濾并蒸發(fā)得到油狀物。將所得的油狀物傾入到堿水中并用氯仿(3×20ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。用IPA/HCl處理得到2-((3-氯苯基)甲基)氨基-6-氨基-1，2-二氫化茚(1.5g，70％)；m.p.大于270℃。(d)N-((2-((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒在室溫攪拌2-((3-氯苯基)甲基)氨基-6-氨基-1，2-二氫化茚二鹽酸鹽(1.5g，4.2mmol)，S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(1.3g，4.6mmol)和吡啶(0.34ml，4.2mmol)的DMF(10ml)溶液24小時，將混合物傾入到水中，用2N氫氧化鈉調至堿性并用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾，濃縮并通過硅膠色譜純化(12％甲醇/二氯甲烷)得到無色油狀物。用IPA/HCl處理得到N-((2-(3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)2-噻吩甲脒(0.75g，40％)；m.p.297-299℃。實施例10根據(jù)實施例9的方法可以制備下述化合物(a)N-((2-((2-甲基苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；m.p.183℃。(b)N-((2-(3-甲基苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；m.p.195℃。(c)N-((2-(4-甲基苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；m.p.182℃。(d)N-((2-(乙基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；m.p.236-238℃。(e)N-((2-(((4-苯基)苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；m.p.182℃。(f)N-((2-(((4-己基)苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；m.p.125℃。(g)N-((2-((3-溴苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；m.p.182℃。實施例11N-((2-((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒(a)7-硝基-2-(((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘將7-硝基-3，4-二氫-2(1H)-萘酮(1.50g，7.85mmol)，3-氯芐基胺(4.70ml，39.3mmol)，乙酸(6.0ml)，4分子篩(20ml)和THF(15ml)和甲醇(15ml)加到燒瓶中并冷卻到0℃，然后在5分鐘期間內分批加入氰基硼氫化鈉(0.99g，15.7mmol)。攪拌混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮成為漿狀物。用2N氫氧化鈉將混合物調至堿性并用乙醚(3×50ml)提取，用水洗滌合并的提取物，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮并通過硅膠色譜純化(3％甲醇/二氯甲烷)。用IPA/HCl處理所得的油狀物得到7-硝基-2-(((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(1.34g，50％)；M.S.(M+H)+＝317。(b)7-氨基-2-(((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘向7-硝基-2-(((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(1.34g，3.80mmol)的85％乙酸/水溶液(75ml)中加入鋅粉(2.48g，38.0mmol)。攪拌混合物5分鐘，通過硅藻土過濾并蒸發(fā)得到油狀物。將所得的油狀物傾入到堿水中并用氯仿(3×20ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。用IPA/HCl處理得到7-氨基-2-(((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(1.4g，90％)；M.S.(M+H)+＝288。(c)N-((2-((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒在室溫攪拌7-氨基-2-(((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(1.32g，3.70mmol)，S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(1.3g，4.6mmol)和吡啶(0.30ml，3.7mmol)的DMF(15ml)溶液24小時，將混合物傾入到水中，用2N氫氧化鈉調至堿性用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。用IPA/草酸處理得到N-((2-((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒二草酸鹽(0.71g，33％)；分解大于100℃。實施例12N-((2-(苯基甲基(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒(a)7-硝基-2-((苯基甲基)(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘向攪拌下的7-硝基-2-((苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘(1.5g，5.4mmol)的DMF(30ml)溶液中加入碳酸鉀(1.5g，10.8mmol)，接著加入甲基碘化物(0.36ml，5.8mmol)。攪拌混合物24小時，傾入到水中并用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。用IPA/HCl處理得到7-硝基-2-((苯基甲基)(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(0.89g，50％)；M.S.(M+H)+＝297(b)7-氨基-2-((苯基甲基)(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘向7-硝基-2-((苯基甲基)(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(0.89g，2.7mmol)的85％乙酸/水溶液中加入鋅粉(3.5g，54.0mmol)，攪拌所得的混合物5分鐘，通過硅藻土過濾并蒸發(fā)得到油狀物。將所得的油狀物傾入堿水中并用氯仿(3×30ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮到油狀物。用IPA/HCl處理所得的油狀物得到7-氨基-2-((苯基甲基)(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘(0.81g，88％)；M.S.(M+H)+＝267。(c)N-((2-(苯基甲基)(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒攪拌7-氨基-2-((苯基甲基)(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘二鹽酸鹽(0.81g，2.4mmol)，S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(0.74g，2.6mmol)和吡啶(0.19ml，2.4mmol)的DMF(15ml)溶液24小時。將混合物傾入到水中并用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾，濃縮和通過硅膠純化(15％甲醇/二氯甲烷)。濃縮餾份得到固體，用乙酸乙酯/己烷重結晶得到N-((2-(苯基甲基)(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒(0.14g，16％)；m.p.176-78℃。實施例13N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒(a)7-硝基-1-((苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘混合7-硝基-1-四氫萘酮(2.0g，10.5mmol)，芐基胺(1.2ml，10.5mmol)和異丙氧基鈦(3.9ml，13.1mmol)并攪拌1小時。用無水乙醇(12ml)稀釋混合物，用氰基硼氫化鈉(0.44g，7.0mmol)處理并攪拌20小時。過濾固體并用乙醇洗滌。濃縮乙醇并且剩余的油狀物可立即用于下一個步驟M.S.(M+H)+＝283。(b)1-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫化萘))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺向攪拌下的7-硝基-1-((苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘(2.96g，10.50mmol)和三乙胺(1.46ml，10.50mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中滴加入三氟乙酸酐(1.46ml，10.50mmol)。攪拌1分鐘后，將溶劑傾入水中并用二氯甲烷(3×20ml)提取，用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥和通過硅膠短塞過濾(20％乙酸乙酯/己烷)得到1-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫化萘)-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺(1.90g，48％，兩步)；M.S.(M+H)+＝379。(c)1-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫化萘))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺向攪拌下的1-(7-硝基-(1，2，3，4-四氫化萘))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺(1.91g，5.05mmol)的四氫呋喃/甲醇溶液(100ml，1∶1)中加入催化量10％Pd/C。在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到1-(7-氨基-(1，2，3，4-四氫化萘))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個步驟。(d)N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒向1-(7-氨基(1，2，3，4-四氫化萘))-N-(苯基甲基)三氟乙酰胺(1.76g，5.05mmol)的異丙醇(1.44g，5.05mmol)溶液中加入S-甲基-2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(1.44g，5.05mmol)。攪拌混合物14小時，用甲醇(6m1)和2N氫氧化鈉(6ml)稀釋并在50℃加熱0.5小時。將混合物傾入水中并用乙酸乙酯(3×30ml)提取，用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。用IPA/HBr處理得到N-((2-苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒二氫溴酸鹽，為白色固體(0.53g，20％)；m.p.260-262℃。實施例14N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2，-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒(a)6-乙酰氨基-(1-((苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚混合6-乙酰氨基-1-茚酮(5.0g，27.6mm0l)，芐基胺(3.1ml，27.9mmol)和異丙氧基鈦(10.2ml，34.5mmol)并攪拌1小時。用無水乙醇(30ml)稀釋混合物，用氰基硼氫化鈉(1.2g，19.3mmol)處理并攪拌20小時。過濾固體并用乙醇洗滌。濃縮乙醇并且將剩余的油狀物溶于乙酸乙酯和用1N HCl(3×50ml)提取，用2N氫氧化鈉中和水層和用乙酸乙酯(3×100ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物，它可立即用于下一個步驟。(b)6-氨基-(1-((苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚在4N HCl回流6-乙酰氨基-(1-((苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚20分鐘，冷卻并用乙酸乙酯(3×50ml)提取。用2N氫氧化鈉中和水層并用乙酸乙酯(3×100ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。將所得的油狀物溶于IPA中并用IPA/HCl處理得到二鹽酸鹽；(2.0g，24％，兩步)；m.p.大于250℃分解。(c)N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2，-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒向6-氨基-(1-((苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚二鹽酸鹽(2.0g，6.4mmol)的DMF(20ml)溶液加入S-甲基-2-噻吩硫甲酰亞胺鹽酸鹽(2.2g，7.7mmol)和吡啶(0.57ml，7.1mmol)。在50℃攪拌混合物20小時，傾入堿水中并用乙酸乙酯(3×100ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾，濃縮并通過硅膠色譜純化(6％甲醇/二氯甲烷)。濃縮殘留物得到油狀物，將其溶于甲醇中，用IPA/HCl處理和有乙醚研制。通過過濾收集固體和用乙醚洗滌(1.1g，40％)；m.p.大于180℃分解。實施例15根據(jù)實施例14的方法可以制備下述化合物N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-6-基)-2-噻吩甲脒；m.p.大于200℃分解。實施例16N-((2-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-呋喃甲脒(a)2-((苯基)羰基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘向2-氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘(2.8g，14.5mmol)的THF(50ml)和10％碳酸鉀(100ml)溶液中加入苯甲酰氯(1.7ml，15.3mmol)。加完后用水稀釋混合物至體積為250ml。通過過濾收集固體，用水洗滌并真空干燥(4.2g，98％)。mp194-198℃。(b)2-((苯基)甲基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽向2-((苯基)羰基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘(4.2g，14.1mmol)的無水THF(100ml)溶液中加入硼烷-THF(49.3ml，1MTHF，49.3mmol)。回流混合物5小時，冷卻到0℃并通過滴加入4N鹽酸驟冷。再回流混合物1小時，真空濃縮并過濾固體(用水洗滌)和真空干燥(3.5g，78％)，m.p.大于300℃。(c)2-((苯基)甲基)氨基-7-氨基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽向攪拌下的2-((苯基)甲基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(2.0g，6.3mmol)的甲醇(100ml)溶液中加入催化量的10％Pd/C，在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到油狀物，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個步驟。(d)N-((2-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-呋喃甲脒向2-((苯基)甲基)氨基-7-氨基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(1.8g，6.3mmol)的DMF(20ml)溶液中加入S-甲基-2-呋喃硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(2.0g，7.5mmol)。在45℃攪拌混合物2小時，傾入堿水中并用乙酸乙酯(3×100ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。將所得的油狀物溶于甲醇中，用IPA/HCl處理和用乙醚研制，通過過濾收集固體和用乙醚洗滌(2.2g，84％)，m.p.大于195℃分解。實施例17和18的手性中間體化合物的制備拆分2-氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘將溶于200ml丙酮的2-氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘(30mg，156mmol)加到亦溶于200ml丙酮的二苯甲?；?D-酒石酸(58.7g，164mmol)中。過濾所形成的厚膏狀物并用丙酮洗滌。在3L水/乙醇/乙腈(1∶1∶1)中回流膏狀物，然后乘熱過濾。通過過濾收集到的固體用上述混合物(3X)重結晶通過手性毛細管電泳證實得到單一異構體(5.25g，6％)，m.p.240-242℃。
類似的，可采用如上所述同樣的溶劑系統(tǒng)，采用二苯甲?；?L-酒石酸拆分相反的對映異構體通過手性毛細管電泳證實得到單一異構體(5.3g，6％)m.p.240-242℃。實施例17(+)-N-((2-(苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒(a)(+)-2-((苯基)羰基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘向2-氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘(1.8g，9.39mmol，從二苯甲酰基-D-酒石酸衍生得到)的THF(50ml)和10％碳酸鉀(100ml)溶液中加入苯甲酰氯(1.2ml，10.1mm0l)。加完后用水稀釋混合物至體積為250ml。通過過濾收集固體，用水洗滌并真空干燥(2.8g，100％)。m.p.208-209℃，[α]D＝+21.9°(c0.33DMSO)。(b)(+)-2-((苯基)甲基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽向(+)-2-((苯基)羰基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘(2.8g，9.4mmol)的無水THF(100ml)溶液中加入硼烷-THF(32.8ml，1MTHF，32.8mmol)?；亓骰旌衔?小時，冷卻到0℃并通過滴加入4N鹽酸驟冷。再回流混合物1小時，真空濃縮并過濾固體(用水洗滌)和真空干燥(2.8g，94％)，m.p.大于300℃；[α]D＝+51.0°(c0.33 DMSO)。(c)(+)-2-((苯基)甲基)氨基-7-氨基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽向攪拌下的(+)-2-((苯基)甲基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(2.8g，8.7mmol)的甲醇(100ml)溶液中加入催化量的10％Pd/C。在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到油狀物，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個步驟；[α]D＝+73.3°(c0.87 DMSO)。(d)(+)-N-((2-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒向(+)-2-((苯基)甲基)氨基-7-氨基-1，2，3.4-四氫化萘鹽酸鹽(2.5g，8.7mmol)的DMF(20ml)溶液中加入S-甲基-2-呋喃硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(3.0g，10.4mmol)。在45℃攪拌混合物2小時，傾入堿水中并用乙酸乙酯(3×100ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。將所得的油狀物溶于甲醇中，用IPA/HCl處理和用乙醚研制，通過過濾收集固體和用乙醚洗滌。用IPA/MeOH/Et2O重結晶得到白色固體(2.5g，66％)，m.p.大于260℃分解。[α]D＝+44.5°(c0.62 DMSO)。實施例18(-)-N-((2-(苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒(a)(-)-2-((苯基)羰基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘向2-氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘(1.8g，9.39mmol，從二苯甲酰基-D-酒石酸衍生得到)的THF(50ml)和10％碳酸鉀(100ml)溶液中加入苯甲酰氯(1.2ml，10.1mmol)。加完后用水稀釋混合物至體積為250ml。通過過濾收集固體，用水洗滌并真空干燥(2.8g，100％)。m.p.208-209℃，[α]D＝-24.0°(c0.87DMSO)。(b)(-)-2-((苯基)甲基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽向(-)-2-((苯基)羰基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘(2.8g，9.4mmol)的無水THF(10ml)溶液中加入硼烷-THF(32.8ml，1MTHF，32.8mmol)?；亓骰旌衔?小時，冷卻到0℃并通過滴加入4N鹽酸驟冷。再回流混合物1小時，真空濃縮并過濾固體(用水洗滌)和真空干燥(2.8g，94％)，m.p.大于300℃；[α]D＝-59.4°(c0.39 DMSO)。(c)(-)-2-((苯基)甲基)氨基-7-氨基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽向攪拌下的(-)-2-((苯基)甲基)氨基-7-硝基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(2.8g，8.7mmol)的甲醇(100ml)溶液中加入催化量的10％Pd/C。在50psi氫化混合物1小時，通過硅藻土過濾并濃縮得到油狀物，TLC表明它是同一物質，可立即用于下一個步驟；[α]D＝-74.6°(c0.80 DMSO)。(d)(-)-N-((2-苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒向(-)-2-((苯基)甲基)氨基-7-氨基-1，2，3，4-四氫化萘鹽酸鹽(2.5g，8.7mmol)的DMF(20ml)溶液中加入S-甲基-2-呋喃硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(3.0g，10.4mmol)。在45℃攪拌混合物2小時，傾入堿水中并用乙酸乙酯(3×100ml)提取。用水洗滌合并的提取物，硫酸鎂干燥，過濾并濃縮得到油狀物。將所得的油狀物溶于甲醇中，用IPA/HCl處理和用乙醚研制，通過過濾收集固體和用乙醚洗滌。用IPA/MeOH/Et2O重結晶白色固體(2.5g，66％)，m.p.大于260℃分解。[α]D＝-44.5°(c0.57 DMSO)。實施例19N-(2，3，4，5-四氫-1H-3-苯并吖庚因-7-基)噻吩-2-甲脒(a)2，3，4，5-四氫-1H-3-苯并吖庚因-7-胺單鹽酸鹽向2，3，4，5-四氫-7-硝基-1H-3-苯并吖庚因鹽酸鹽(1.68g，7.35mmol)的乙醇(100ml)溶液中加入5％鈀/炭(0.2g)并將溶液置于帕爾氫化儀器(Paar Hydrogenator Apparatus)中和加壓力45psi氫氣壓。達到理論上應攝取的氫氣量后(2小時)，濾除催化劑并用水(25ml)洗滌。濃縮濾液，加入無水乙醇并蒸發(fā)出所有的水分并形成固體。將所得的固體溶于熱乙醇(50ml)中并通過加入乙醚(75ml)使產物沉淀。收集固體并空氣干燥得到灰色固體(2.43g(94％)，m.p.288-91℃。(b)N-(2，3，4，5-四氫-1H-3-苯并吖庚因-7-基)噻吩-2-甲脒在室溫攪拌2，3，4，5-四氫-1H-3-苯并吖庚因-7-胺單鹽酸鹽(0.60g，3.0mmol)和S-甲基2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(1.1g，3.8mmol)的二甲基甲酰胺(2.0ml)和異丙醇(2.0)的懸浮液20小時。收集反應得到的固體并用異丙醇(5ml)和乙酸乙酯(15ml)洗滌?？諝飧稍锕腆w稱重1.18g，為混合鹽。將固體溶于水中并堿化和在乙酸乙酯中提取。用硫酸鎂干燥溶劑并濃縮得到游離堿，為黃色固體。將其溶于異丙醇(30ml)中和用溴化氫/異丙醇酸化直到溶液呈酸性。通過加入乙酸乙酯(35ml)。收集產物并干燥得到的產物為二氫溴酸鹽(0.70g(54％))，m.p.281-3℃。實施例20N-(1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基)噻吩-2-甲脒(a)1，2，3，4-四氫異喹啉-7-胺單鹽酸鹽該化合物是根據(jù)實施例19步驟(a)的方法，從溶于乙醇(150ml)的7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉鹽酸鹽(3.00g，14.0mmol)和5％鈀/炭(0.3g)制備，分離產物為淺玫瑰色固體(2.43g(94％))，m.p.232-4℃。(b)N-(1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基)噻吩-2-甲脒該化合物是根據(jù)實施例19步驟(b)的方法，從1，2，3，4-四氫異喹啉-7-胺單鹽酸鹽(0.46g)和S-甲基2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(0.85g)的異丙醇(2.0ml)和二甲基甲酰胺(2.0ml)懸浮液制備的，處理后分離得到標題化合物，為游離堿(0.60g(94％))。在甲醇/乙酸乙酯中將其轉化為二草酸鹽得到產物為灰色固體(0.59g(54％))，m.p.199-200℃(分解)。實施例21N-(2-芐基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基)噻吩-2-甲脒(a)2-芐基-7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉單鹽酸鹽向7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉(2.50g，11.6mmol)和碳酸鉀(2.0g)的乙腈(100ml)溶液中加入芐基溴(2.22g，13.0mmol)的乙腈(10ml)溶液，攪拌溶液過夜并通過過濾除去固體。真空蒸除溶劑得到固體，使其在二氯甲烷和水之間分配，干燥(硫酸鎂)，濃縮有機相并將所得的油狀物溶于乙醇(50ml)中。用鹽酸/乙醇將溶液調至酸性。形成的沉淀成為固體加入另外的150ml乙醇和50ml乙醚。收集固體并空氣干燥得到2-芐基-7-硝基-12，3，4-四氫異喹啉鹽酸鹽，為灰色固體(2.78g(79％))，m.p.256-8℃(分解)。(b)2-芐基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-胺鹽酸鹽該化合物是根據(jù)實施例19步驟(a)的方法，從溶于乙醇(100ml)的2-芐基-7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉單鹽酸鹽(2.00g，6.56mmol)和5％鈀/炭(0.2g)制備的，分離產物為黃色固體(1.05g，(78％))，m.p.257-9℃(分解)。(c)N-(2-芐基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基)噻吩-2-甲脒該化合物是根據(jù)實施例19步驟(b)的方法，從2-芐基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-胺單鹽酸鹽(0.50g，1.8mmol)和S-甲基2-噻吩硫代甲酰亞胺鹽酸鹽(0.67g，2.3mmol)的異丙醇(2.0ml)和二甲基甲酰胺(2.0ml)懸浮液制備的，分離標題化合物為黃色固體(0.53g(84％))。在異丙醇中將其轉化為草酸鹽。m/e＝348(M+H)。實施例22N-(1，2，3，4-四氫異喹啉-5-基)噻吩-2-甲脒二草酸鹽該化合物是按與實施例20所述類似的方法制備的，m.p.75℃(分解)。實施例23N-(1，2，3，4-四氫異喹啉-6-基)噻吩-2-甲脒(a)1，2，3，4-四氫異喹啉-6-胺單鹽酸鹽異喹啉-6-胺〔Manska，R.H.F.et.al.，J.Am.Chem.Soc.，72,4997(1950)〕(4.40g，30.5mmol)和氧化鉑(300mg)在乙酸(85ml)和2.5M鹽酸(30ml)溶液置于帕爾氫化儀器中和加壓力45psi氫氣壓16小時。真空除去溶劑并使所得的固體在碳酸鉀水溶液和20％異丙醇/二氯甲烷之間分配。濃縮干燥(硫酸鎂)的有機相并通過硅膠純化所得的油狀物，以2％甲醇/氯仿為洗脫劑，得到3.08g(93％)產物，為油狀固體。將此產物(3.08g，20.8mmol)溶于200ml乙醇中并加入1當量0.1000M鹽酸溶液。除去溶劑得到單鹽酸鹽，為固體，MS149(M+H)。(b)N-(1，2，3，4-四氫異喹啉-6-基)噻吩-2-甲脒該化合物是通過實施例19步驟(b)的方法，從1，2，3，4-四氫異喹啉-6-胺單鹽酸鹽(0.90g，6.2mmol)S-甲基2-噻吩硫代甲酰亞胺氫碘酸鹽(1.80g，6.2mmol)的異丙醇(2.0ml)和二甲基甲酰胺(2.0ml)懸浮液制備的，處理和硅膠色譜純化后分離得到標題化合物，為游離堿(0.74g(57％))，m.p.170-5℃。實施例24N-(異喹啉-7-基)噻吩-2-甲脒(a)7-硝基異喹啉將7-硝基-3，4-二氫異喹啉(3.00g，17.0mmol)和5％鈀/炭(3.0g)的萘烷(75ml)溶液加熱回流3小時，冷卻后過濾溶液并用氯仿(200ml)洗滌催化劑。真空除去溶劑得到7-硝基異喹啉(1.63g)，為褐色固體。MS175(M+H)。(b)異喹啉-7-胺在50psi下帕爾氫化儀器中，以5％鈀/炭(0.2g)作為催化劑將7-硝基異喹啉(1.62g，9.25mmol)的乙醇(150ml)溶液氫化3小時。過濾反應混合物并減壓除去溶劑，用乙醇(3ml)所得的固體重結晶得到異喹啉-7-胺(0.98g)，為褐色固體。MS145(M+H)，NMR(CDCl3)9.02(s，1H)，8.29(d，1H)7.63(d，1H)，7.47(d，1H)，7.13(dd，H)，7.03(d，1H)，4.00(寬，2H)。(c)N-(異喹啉-7-基)噻吩-2-甲脒攪拌異喹啉-7-胺(0.96g，6.7mmol)和S-甲基2-噻吩硫代甲酰亞胺(2.42g，8.36mmol)的異丙醇(4ml)和DMF(4ml)溶液18小時，所得的溶液傾入到稀氫氧化鈉溶液中并用二氯甲烷提取。用硫酸鎂干燥提取物并蒸發(fā)溶劑得到油狀物，靜置使油狀物固化。通過硅膠色譜純化所得的樣品(用氨水溶液飽和的5％甲醇/二氯甲烷)得到1.31g固體，用乙酸乙酯(25ml)重結晶所得的固體得到1.05g標題化合物，為灰色固體，m.p.177.5-8.5℃。
權利要求
1.式I化合物
其中D表示含有1-4個選自O，N或S的雜原子的5元芳雜環(huán)，該環(huán)在碳原子上可被鹵素，三氟甲基，C1-6烷基，硝基或氰基任選取代，并且通過碳原子與式I化合物的其余部分相連；A表示N(X)或CH(-(CH2)m-NXY)；U表示NH，O或CH2；V表示(CH2)a；W表示(CH2)b；a和b獨立地表示整數(shù)0-3，條件是a+b是在1-3范圍內；X和Y獨立地表示氫，C1-6烷基或基團-(CH2)nQ，或-NXY表示哌啶基，吡咯烷基，嗎啉基或四氫異喹啉基；Q表示被一或多個選自C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6全氟烷基，鹵素，硝基或氰基的取代基任選取代的聯(lián)苯基或苯基；m表示整數(shù)0-5；n表示整數(shù)0-6；或鏈U-V-A-W定義如上，只是不飽和的除外，或鏈U-V-A-W表示在碳原子上被-(CH2)m-NXY取代的-NH-CH2-CH2-O-，其中m，X和Y的定義如上，及其可藥用鹽和非對映體。
2.根據(jù)權利要求1的化合物，其中所述化合物具有式IA結構
其中T表示被-(CH2)m-NXY取代的C3-5飽和或不飽和亞烷基鏈；被-(CH2)m-NXY取代的-O-(CH2)2-NH-；或-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-；X和Y獨立地表示氫，C1-6烷基或基團-(CH2)nQ，或-NXY表示哌啶基，吡咯烷基，嗎啉基或四氫異喹啉基；Q表示被一或多個選自C1-6烷基，C1-6烷氧基，三氟甲基，鹵素，硝基或氰基的取代基任選取代的苯基；和U，m，n，a，b和D的定義如上，除外的是T表示-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-和X表示-(CH2)nQ，n是0-5的整數(shù)，及其可藥用鹽和非對映異構體。
3.根據(jù)權利要求2的式I化合物，其中T表示被-(CH2)m-NXY取代的C3-5飽和或不飽和亞烷基鏈；或被-(CH2)m-NXY取代的-O-(CH2)2-NH-；和X和Y獨立地表示氫，C1-6烷基或基團-(CH2)nQ。
4.根據(jù)權利要求2或3的式I化合物，其中T表示被-(CH2)m-NXY取代的C3-5飽和或不飽和亞烷基鏈。
5.根據(jù)權利要求1-4任意一項所述的式I化合物，其中m是0或1。
6.根據(jù)權利要求2所述的式I化合物，其中T表示-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-和X表示氫，C1-6烷基或基團-(CH2)nQ。
7.根據(jù)權利要求2或6的化合物，其中T表示-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-和U表示CH2。
8.根據(jù)權利要求2，6或7的化合物，其中T表示-U-(CH2)a-N(X)-(CH2)b-和a+b是1或2。
9.根據(jù)前面權利要求任意一項所述的化合物，其中n是0，1或2和X和/或Y表示-(CH2)nQ。
10.根據(jù)前面權利要求任意一項所述的化合物，其中X和/或Y表示-(CH2)nQ和Q表示可被C1-6烷基或鹵素任選取代的苯基。
11.根據(jù)前面權利要求任意一項所述的化合物，其中D表示含有一個選自O，N或S雜原子的5元雜環(huán)，該環(huán)在碳原子上可任選被鹵素取代。
12.根據(jù)權利要求11所述的式I化合物，其中D表示噻吩基、吡咯基或呋喃基。
13.根據(jù)權利要求12所述的式I化合物，其中D表示2-噻吩基。
14.下述式I化合物N-((2-(苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒；N-((1-氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-(甲基)(苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((1-氨基)-1，2-二氫化茚-6-基)-2-噻吩甲脒；N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-6-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-((2-甲基苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-((3-甲基苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-((4-甲基苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-乙基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-(((4-苯基)苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-(((4-己基)苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-((3-溴苯基)甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-((3-氯苯基)甲基)氨基)-1，2，3，4，-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-(苯基甲基)(甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒；N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-噻吩甲脒；N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2-二氫化茚-5-基)-2-噻吩甲脒；N-((1-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-6-基)-2-噻吩甲脒；N-((2-(苯基甲基)氨基)-1，2，3，4-四氫化萘-7-基)-2-呋喃甲脒；N-(2，3，4，5-四氫-1H-3-苯并吖庚因-7-基)噻吩-2-甲脒；N-(1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基)噻吩-2-甲脒；N-(2-芐基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基)噻吩-2-甲脒；N-(1，2，3，4-四氫異喹啉-5-基)噻吩-2-甲脒；N-(1，2，3，4-四氫異喹啉-6-基)噻吩-2-甲脒；N-(異喹啉-7-基)噻吩-2-甲脒；或其可藥用鹽或其非對映異構體。
15.根據(jù)前面權利要求任意一項所述的作為藥物應用的化合物。
16.含有前面權利要求1-14任意一項所述的化合物和可藥用稀釋劑或載體的藥物組合物。
17.權利要求1-14任意一項所述的化合物在制備治療或預防與氧化氮合成酶的合成或超合成有關的疾病或癥狀的藥物方面的應用。
18.權利要求1-14任意一項所述的化合物在制備治療或預防神經變性疾病，偏頭痛，或預防和逆轉對鴉片和二氮雜的耐受性或治療藥物成癮的藥物方面的應用。
19.一種治療或預防與氧化氮合成酶的合成或超合成有關的疾病或癥狀的方法，該方法包括向患有或容易患有這種病癥的病人施用治療有效量的權利要求1-14任意一項所述的化合物。
20.治療或預防神經變性疾病，偏頭痛，預防和逆轉對鴉片和二氮雜的耐受性或治療藥物成癮的方法，該方法包括患有或容易患有這種疾病或癥狀的病人施用治療有效量的權利要求1-14任意一項所述的化合物。
21.制備權利要求1所述化合物或其可藥用鹽的方法，該方法包括(a)通過相應的式II化合物
其中U，V，A和W的定義如權利要求1，與式III化合物反應制備式I化合物，
其中D的定義如權利要求1和L是離去基團；(b)通過相應的式IV化合物，
其中U，V，A和W的定義如權利要求1和HA是酸，與式V化合物反應制備式I化合物，
其中D的定義如權利要求1；(c)通過其中X是氫的相應的式I化合物與式VI化合物的反應，R9-L VI其中R9表示C1-6烷基或基團-(CH2)nQ，L是離去基團，制備其中A表示N(X)和X表示C1-6烷基或基團-(CH2)nQ的式I化合物；(d)通過其中X和Y中一個或兩個表示氫的相應的式I化合物與式VI化合物反應，制備其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)以及X和Y中至少一個表示C1-6烷基或基團-(CH2)nQ的式I化合物；(e)通過還原相應的式VII化合物，
其中U，V，W，X，Y和D的定義如權利要求1，制備其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)和m表示1-5整數(shù)的式I化合物；(f)通過還原相應的式VIII化合物，
其中U，V，W，m和D的定義如權利要求1，制備其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)和X和Y均為氫的式I化合物；(g)通過還原相應的式IX化合物，
其中U，V，W，D和Y的定義如權利要求1，制備其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)，X表示氫和m表示1-5整數(shù)的式I化合物；(h)通過還原相應的式X化合物，
其中Q，m，U，V，W和D的定義如權利要求1，制備式I化合物，其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)和，X和Y其中之一表示氫，和另一個表示-(CH2)nQ，其中n表示1-6的整數(shù)；(i)通過還原相應的式XI化合物，
其中Q，m，U，V，W和D的定義如權利要求1，制備式I化合物，其中A表示CH(-(CH2)m-NXY)和，X和Y其中之一表示氫，和另一個表示-(CH2)nQ，n表示1-6的整數(shù)；或(j)通過還原相應的式XII化合物，
其中U，V，W，D和Y的定義如權利要求1，制備其中A表示CH(-NXY)和X表示氫的式I化合物；并且如果需要將所得的式I化合物或其另一種鹽，轉化為可藥用鹽，或者反過來也是這樣。
全文摘要
本發(fā)明提供了式(I)化合物，其中D表示含有1-4個選自O，N或S的雜原子的5元雜芳環(huán)，該環(huán)在碳原子上可被鹵素，三氟甲基，C
文檔編號C07D333/38GK1162310SQ95195570
公開日1997年10月15日 申請日期1996年8月10日 優(yōu)先權日1996年8月10日
發(fā)明者J·E·麥克唐納, W·C·莎士比亞, R·J·默里, J·R·馬茨 申請人:阿斯特拉公司