專利名稱：治療學化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及苯并咪唑類衍生物和它們在醫(yī)學治療中的應用，特別是用于治療或預防如皰疹病毒引起的病毒感染。本發(fā)明也涉及苯并咪唑類衍生物和含有這些衍生物的藥物配方的制備。
在DNA病毒中，皰疹族病毒是人類中最常見病毒性疾病的病原。該族包括單純皰疹病毒1和2型(HSV)，水痘帶狀皰疹病毒(VZV)，巨細胞病毒(CMV)，EB病毒(EBV)，人類皰疹病毒6型(HHV-6)和人類皰疹病毒7型(HHV-7)。HSV-1和HSV-2是人類最常見感染性病原中的一些。這些病毒的多數(shù)能持續(xù)存在于宿主的神經(jīng)細胞中，一旦感染，這些個體即有感染的臨床癥狀復發(fā)的危險，這可引起身體和心理兩者的痛苦。
HSV感染常以皮膚、口腔和/或生殖器的廣泛而衰弱損害為特點。雖然原發(fā)感染傾向于比在以前曾暴露于此病毒的個體中的感染更嚴重，但原發(fā)感染可為臨床癥狀不顯著的。SHV的眼部感染可導致角膜炎或白內(nèi)障，從而危脅宿主的視力。新生兒中，免疫減弱病人中的感染或感染穿透而進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)可為致死性的。
VZV是一種可引起水痘和帶狀皰疹的皰疹病毒。水痘是在沒有免疫力的宿主中產(chǎn)生的原發(fā)疾病，并且在年幼的兒童中常為以水痘疹和發(fā)熱為特點的輕癥疾病。帶狀皰疹是該疾病的復發(fā)形式，它發(fā)生于以前感染過VZV的成年人中。帶狀皰疹的臨床表現(xiàn)特點為神經(jīng)痛以及單側(cè)和皮膚瘤樣分布的水痘性皮膚疹。感染的擴散可引起麻痹或抽搐。如果腦膜受感染可發(fā)生昏迷。在以移植為目的或為治療惡性腫瘤而接受免疫抑制藥物的病人中VZV是嚴重問題，并且是AIDS病人的一種嚴重并發(fā)癥，因為他們的免疫系統(tǒng)是受損的。
與其他皰疹病毒一樣，CMV感染引起病毒和宿主的終身關(guān)聯(lián)。母親妊娠期感染后發(fā)生的先天性感染可引起臨床后果，如死亡或大的疾病(小頭癥，肝脾腫大，黃疸，智力發(fā)育遲緩)，導致失明，或者為不那么嚴重形式的視網(wǎng)膜炎，不能正常發(fā)育，以及易患胸部和耳部感染。免疫減弱病人中的CMV感染，例如作為惡性腫瘤，移植后免疫抑制藥物治療或人類免疫缺陷病毒感染的結(jié)果，可產(chǎn)生視網(wǎng)膜炎，肺炎，胃腸道疾患和神經(jīng)性疾病。
EBV引起的主要疾病是急性或慢性感染性單核細胞增多癥(腺熱病)。其它EBV或EBV相關(guān)疾病的實例包括經(jīng)常發(fā)生于有先天或獲得性細胞免疫缺陷的人中的淋巴增殖性疾病，發(fā)生于年輕男孩中的X-連鎖淋巴細胞性疾病，EBV相關(guān)的B-細胞腫瘤，何杰金病，鼻咽癌，伯基特淋巴瘤，非何金杰β-細胞淋巴瘤，胸腺瘤和口腔多毛粘膜白斑病。還發(fā)現(xiàn)EBV感染與許多上下呼吸道(包括肺)的上皮細胞衍生腫瘤相關(guān)。
HHV-6已顯示分別為兒童的infantum subitum腎和骨髓移植病人中的腎排異和間質(zhì)性肺炎的致病原，并可與其它疾病如多發(fā)性硬化相關(guān)聯(lián)。還有在骨髓移植病人中抑制干細胞計數(shù)的證據(jù)。HHV-7的疾病病原學未定。
乙型肝炎病毒(HBV)是一種具有世界性廣泛重要的病毒性致病原。該病毒病原學地與原發(fā)性肝細胞腫瘤相關(guān)，并被認為引起全世界肝癌的80％。HBV感染的臨床表現(xiàn)包括頭痛，發(fā)熱，不適、惡心。嘔吐，厭食和腹痛。病毒的復制常被免疫反應控制，在人類中恢復過程持續(xù)數(shù)周或數(shù)月，但感染可更嚴重，導致遷延性慢性肝疾病，如上所述。
PCT專利說明書WO92/07867和WO94/08456號描述了某些抗病毒的多取代的苯并咪唑核苷類似物，包括β-D-呋喃核糖基核糖核苷類似物。PCT專利說明書WO93/18009號描述了某些抗病毒的苯并咪唑類似物，其中糖基被碳環(huán)基取代。
現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)如下所述的某些左旋糖取代的苯并咪唑化合物在治療或預防某些病毒感染中有用。因此 第一方面，本發(fā)明提供了具有式(I)的新化合物及其藥學上可接受的衍生物
其中R代表氫，鹵素原子，-NR1R2，其中R1和R2可相同或不同，它們各自獨立地選自氫，C1-6烷基，氰基C1-6烷基，羥基C1-6烷基，鹵素C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C1-6烷基C3-7環(huán)烷基，C2-6鏈烯基，C3-7環(huán)烷基C1-6烷基，C2-6炔基，芳基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)C1-6烷基，-COC1-6烷基或R1R2與它們所連接的N原子一起形成三，四，五或六元的雜環(huán)。
其他適合的式(I)化合物是具有式(Ia)及其藥學上可接受的衍生物，
其中R代表氫或-NR1R2，這里R1，R2可相同或不同，它們可分別獨立地選自氫，C1-6烷基，氰基C1-6烷基，羥基C1-6烷基，鹵素C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C3-7環(huán)烷基C1-6烷基，C2-6鏈烯基，C2-6炔基，芳基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)C1-6烷基，-COC1-6烷基(假定R1R2不都是氫)或R1R2與它們連接的N原子一起形成三，四，五或六元的雜環(huán)。
式(I)化合物的實例包括下列β端基異構(gòu)體式(Ib)及其藥學上可接受的衍生物，
其中R代表鹵素原子或-NR1R2，其中R1代表氫，R2選自C1-6烷基，羥基C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C1-6烷基C3-7環(huán)烷基，C2-6鏈烯基，C2-6炔基，芳基，芳基烷基；或R1和R2(R1和R2可為相同或不同)，均為C1-6烷基，或R1R2與它們連接的N原子一起形成三，四，五或六元的雜環(huán)。
另外，式(Ib)化合物及其藥物學上可接受的衍生物中R代表鹵素原子或單C1-6烷基氨基，單(C1-6羥基烷基)氨基，二-C1-6烷基氨基，C3-7環(huán)烷基氰基，C1-6烷基-C3-7環(huán)烷基氨基，C2-6鏈烯基氨基，C2-6炔基氨基，芳基氨基，芳基烷基氨基，或式
基團，其中n為2、3、4或5。
上述式(I)化合物的其它實例包括下文描述的實施例1至38。
本文使用的術(shù)語烷基可作為一個基團或一個基團的一部分，意指直鏈或支鏈烷基。這種烷基優(yōu)選具有1-6個碳原子，最優(yōu)選1至4個碳原子的烷基，并且特別地包括甲基、乙基、異丙基、叔丁基。關(guān)于鏈烯基包括E-或Z-型或其混合物的形式，并且當它們含有至少3個碳原子時，可為有支鏈的鏈烯基。術(shù)語鹵素包括氯，溴，氟和碘。術(shù)語鹵素C1-6烷基意指其中有一個或更多個氫被鹵素取代的烷基，并優(yōu)選含有1、2或3個鹵素基團。所述基團的實例包括三氟甲基和氟異丙基。術(shù)語芳基作為一個基團或一個基團的一部分，意指由選自C1-6烷氧基(如甲氧基)，硝基，鹵素(如氯)，氨基，羧酸酯和羥基的一個或多個取代基任意取代的苯基。術(shù)語雜環(huán)意指含有獨立地選自氮，氧和硫的一個或多個(如1至4個)雜原子的飽和或部分飽和的(即，非芳香族的)三、四、五或六元環(huán)。這種基團的實例包括吡咯烷。
本發(fā)明范圍內(nèi)包括式(I)化合物的每一種可能的α和β端基異構(gòu)體以及它們的生理上有功能的衍生物，基本上不含其它端基異構(gòu)體，也就是說只存在少于約5％w/w的其它端基異構(gòu)體，優(yōu)選少于約2％w/w，特別優(yōu)選少于約1％w/w，以及這種α和β端基異構(gòu)體任何比例的混合物。β端基異構(gòu)體形式的式(I)化合物是優(yōu)選的。
優(yōu)選的式(Ib)化合物包括R代表-NR1R2的化合物和其藥學上可接受的衍生物，其中R1代表氫，R2選自C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基和鹵素C1-6烷基。
特別優(yōu)選的式(Ib)化合物包括其中R代表異丙基氨基，異丁基氨基，叔-丁基氨基，環(huán)丙基氨基，環(huán)戊基氨基和2-氟-1-甲基乙基氨基者以及其藥學上可接受的衍生物。
具有β構(gòu)型作為抗病毒劑特別有利的式(I)化合物是2-環(huán)丙基氨基-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑，5，6-二氯-2-((2-氟-1-甲基乙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑和5，6-二氯-2-異丙基氨基-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑及其藥學上可接受的衍生物。
化合物5，6-二氯-2-異丙基氨基-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑已被發(fā)現(xiàn)在CMV感染的治療中特別有用。
包括上述式(Ia)和(Ib)的式(I)化合物以及它們藥學上可接受的衍生物在下文中稱作本發(fā)明的化合物。
“藥學上可接受的衍生物”是指本發(fā)明化合物的任何藥物學上或藥理學上可接受的鹽，酯和這種酯的鹽，或任何一種施用于接受者后能提供(直接或間接地)本發(fā)明化合物或其抗病毒活性代謝物或殘基的化合物。
本發(fā)明化合物優(yōu)選的酯獨立地選自(1)通過2′-，3′-和/或5′-羥基基團酯化獲得的羧酸酯，其中酯基團羧酸部分的非羰基部分選自直鏈或支鏈烷基(例如，n-丙基，t-丁基，或n-丁基)，烷氧基烷基(如，甲氧基甲基)，芳烷基(如，苯甲基)，芳氧基烷基(如，苯氧基甲基)，芳基(如，如由鹵素，C1-4烷基，或C1-4烷氧基或氨基任選取代的的苯基)；(2)磺酸酯，如烷基或芳烷基磺酰(如，甲磺酰)；(3)氨基酸酯(如，L-纈氨酰或L-異亮氨酰)；(4)膦酸酯和(5)單-、二-或三磷酸酯。該磷酸酯可通過C1-20醇或其活性衍生物，或通過2，3-二(C6-24)酰基甘油進一步酯化。
在這些酯中，除非特別指出，否則存在的任何烷基優(yōu)選含1至18個碳原子，特別是1至6個碳原子，更特別優(yōu)選1至4個碳原子。在這種酯中存在的任何環(huán)烷基有利地含3至6個碳原子。在這種酯中存在的任何芳基有利地含一個苯基基團。
本發(fā)明優(yōu)選的羧酸酯包括醋酸酯，丁酸酯和戊酸酯。L-纈氨酰是特別優(yōu)選的氨基酸酯。
提到的任何上述化合物也包括其藥學上可接受的鹽。
藥學上可接受的鹽包括有機羧酸的鹽，這些有機羧酸如抗壞血酸，醋酸，檸檬酸，乳酸，酒石酸，蘋果酸，馬來酸，羥乙基磺酸，乳糖酸，對-氨基苯甲酸和琥珀酸；有機磺酸如甲磺酸，乙磺酸，苯甲磺酸和對甲苯磺酸，無機酸如鹽酸，硫酸，磷酸，氨基磺酸和焦磷酸。
為用于治療，式(I)化合物的鹽應為藥物學上可接受的。然而，非藥學上可接受的酸和堿的鹽也有用途，如，用于制備或純化一種藥學上可接受的化合物。所有的鹽，不管是否衍生自藥學上可接受的酸或鹽，均在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
優(yōu)選的鹽包括從鹽酸，硫酸，醋酸，琥珀酸，檸檬酸和抗壞血酸形成的鹽。
本發(fā)明的另一方面，提供了本發(fā)明化合物用于醫(yī)學治療，特別用于治療或預防病毒感染如皰疹病毒感染。本發(fā)明化合物已顯示具有抗CMV感染的活性，雖然早期研究結(jié)果提示這些化合物也具有抗其它皰疹病毒感染如HSV-1和-2，HHV6和7，VZV，EBV和HBV感染的活性。
按照本發(fā)明，其它可予以治療的病毒性疾病已在前文的介紹中討論。本發(fā)明化合物特別適合治療或預防CMV感染的相關(guān)疾病。按照本發(fā)明，可被治療的CMV疾病的實例已在前文的介紹中討論。
按照另一方面，本發(fā)明提供了用于治療或防止病毒感染的癥狀或影響的一種方法，這種感染發(fā)生于受感染的動物，例如，一種哺乳類動物，包括人類，該方法包含用治療上有效劑量的本發(fā)明化合物治療所述動物。按照本發(fā)明這方面的特別實施方案，該病毒感染是皰疹病毒感染，如CMV，HSV-1，HSV-2，VZV，EBV，HHV6或HHV7。本方面的另一方面包括一種治療或防止HBV感染癥狀和影響的方法。
本發(fā)明進一步提供用于治療動物(如哺乳類，包括人類)中臨床疾病的一種方法，其臨床疾病包括那些已在前文介紹中討論，該方法包含用治療上有效劑量的本發(fā)明化合物治療所述動物。本發(fā)明也包括用于治療或預防任何前述感染或疾病的一種方法。
又一方面，本發(fā)明還提供應用本發(fā)明化合物制造用于治療或預防任何上述病毒感染或疾病的藥物。
上述本發(fā)明化合物及其藥學上可接受的衍生物可與其它治療藥物一起用于治療上述感染或疾病。本發(fā)明的聯(lián)合治療包含服用至少一個式(I)化合物或其藥學上可接受的衍生物和至少一個其它藥學上有活性的成分。這些活性成分或藥學上有活性的藥物可以在相同或不同的藥學配方中同時服用，或以任何次序順序應用。選擇這些活性成分和藥學上有活性藥物的劑量以及用藥的相對時間以獲得所希望的聯(lián)合治療的效果。該聯(lián)合治療最好包括服用一個本發(fā)明化合物和一個下述藥物。
這些其它治療藥物的實例包括治療病毒感染或相關(guān)疾病有效的藥物如(1α，2β，3α)-9-[2，3-二(羥甲基)環(huán)丁基]鳥嘌呤[(-)BHCG，SQ-34514]，oxetanocin-G(3，4-二-(羥甲基)-2-oxetanosyl]鳥嘌呤)，無環(huán)核苷(如，無環(huán)鳥苷，valaciclovir，famciclovir，更昔洛韋，penciclovir)，無環(huán)核苷膦酸酯(如(S)-1-(3-羥基-2-磷酰-甲氧基丙基)胞嘧啶(HPMC)，核糖核苷酸還原酶抑制劑如2-乙酰吡啶5-〔(2-氯苯氨基)硫代羰基〕硫代羰基腙，3′-疊氮-3′-脫氧胸腺嘧啶，其它2′，3′-雙脫氧核苷，如2′，3′-雙脫氧胞苷，2′，3′-雙脫氧腺苷和2′，3′-雙脫氧次黃嘌呤核苷，2′，3′-雙脫氧胸腺嘧啶，蛋白酶抑制劑如N-叔-丁基-脫氫-2-〔-2(R)-羥基-4-苯基-3(S)-[[N-(喹啉基羰基)-L-天冬酰氨基丁基〕-(4aS，8aS)-異喹啉-3(S)-甲酰胺(Ro31-8959)氧雜硫環(huán)戊烷核苷類似物如(-)-順式-1-(2-羥甲基)-1，3，氧雜硫環(huán)戊烷-5-基)胞嘧啶(3TC)或順式-1-(2-羥甲基)-1，3-氧雜硫環(huán)戊烷-5-基)-5-氟胞嘧啶(FTC)，3′-脫氧-3′-氟胸腺嘧啶，5-氯-2′，3′-雙脫氧-3′-氟尿嘧啶，(-)-順式-4-〔2-氨基-6-(環(huán)丙基氨基)-9H-嘌呤-9-基〕-2-環(huán)戊烯-1-甲醇，病毒唑，9-〔4-羥基-2-(羥甲基)丁-1-基〕-胍(H2G)，tat抑制劑如7-氯-5-(2-吡咯基)-3H-1，4-苯并二氮雜-2(H)-酮(Ro5-3335)，或7-氯-1，3-二氫-5-(1H-吡咯-2-基)-3H-1，4-苯并二氮雜-2-胺(Ro24-7429)，干擾素如α-干擾素，腎分泌抑制劑如丙磺舒，核苷轉(zhuǎn)運抑制劑如潘生??；己酮可可堿，N-乙酰半胱氨酸，Procysteine，α-括樓精(α-trichosanthin)，膦酰基甲酸，以及免疫調(diào)節(jié)劑如干擾素II或胸腺素，粒細胞巨噬細胞集落刺激因子，促紅細胞生成素，可溶性CD4和某遺傳工程的衍生物，或非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑如nevirapine(BI-RG-587)，loviride(α-APA)和delavuridine(BHAP)，和膦?；姿?。
更優(yōu)選的所述聯(lián)合治療涉及服用上述藥物之一和上述式(I)中優(yōu)選或特別優(yōu)選的亞組中的一個化合物。最優(yōu)選的所述聯(lián)合治療涉及聯(lián)合使用上面指出的藥物之一以及在此特別指出的式(I)化合物中的一個。
本發(fā)明還包括應用本發(fā)明化合物配制藥物，該藥物用于與至少一種如上文所定義的其它治療藥物同時或順序應用。
本發(fā)明的化合物在本文中也稱為活性成分，可經(jīng)任何合適的途徑給藥用于治療，這些途徑包括口服，經(jīng)直腸，經(jīng)鼻，局部(包括經(jīng)皮，經(jīng)口腔含化和舌下)，經(jīng)陰道和胃腸道外(包括皮下，肌肉內(nèi)，靜脈內(nèi)，皮內(nèi)和玻璃體內(nèi))。應認識到優(yōu)選途徑可因接受者的疾病和年齡，感染的性質(zhì)和所選的活性成分不同而改變。
總的來說，上述各種疾病的合適劑量在每日每公斤體重(接受者，如人)0.01～250mg范圍內(nèi)，優(yōu)選每日每公斤體重0.1～100mg范圍內(nèi)，最優(yōu)選每日每公斤體重0.5～30mg范圍內(nèi)，特別是每日每公斤體重1.0～20mg范圍內(nèi)。(除非特別指出，否則所有活性成分的重量按式(I)的化合物的母體計算對其鹽或酯，其重量應相應增加)。所希望的劑量可在全天以適當間隔以1、2、3、4、5、6或更多分劑量給藥。在一些情況下，所要求的劑量可隔天給予。這些分劑量可以單位劑量形式給藥，例如，每單位劑量形式含10至1000mg或50至500mg，優(yōu)選20至500mg，最優(yōu)選100至400mg活性成分。
理想地，應給予活性成分以獲得活性化合物峰值血漿濃度約0.025至100μM，優(yōu)選約0.1至70μM，最優(yōu)選約0.25至50μM?？赏ㄟ^如靜脈內(nèi)注射活性成分的0.1至5％溶液，最好溶于鹽水中，或通過口服含活性成分為約0.1至約250mg/kg的丸劑，得到上述峰值血漿濃度?？赏ㄟ^連續(xù)輸注以提供約0.01至約5.0mg/kg/小時或通過間斷輸注含約0.4至約15mg/kg活性成分維持希望的血漿水平。
雖然可以單獨服用該活性成分，但優(yōu)選作為藥物制劑使用該活性成分。本發(fā)明的制劑包含至少一種如上所述之活性成分，以及一或多種可接受的載體以及任選的其它治療藥物。每種載體必須是“可接受的”，它是指與制劑的其它成分相容和對病人無害。制劑包括適合口服，經(jīng)直腸，經(jīng)鼻，局部(包括經(jīng)皮，經(jīng)口腔含化和舌下)，經(jīng)陰道或胃腸道外(包括皮下，肌肉內(nèi)，靜脈內(nèi)，皮下和玻璃體內(nèi))施用者。該制劑可方便地制成單位劑量形式，并可通過藥學領(lǐng)域中任何公知的方法制備。這種方法包括將活性成分與由一或多種輔助成分構(gòu)成的載體結(jié)合在一起的步驟。一般來說，該制劑的制備是通過將活性成分與液體載體或精細分配的固體載體或兩者緊密結(jié)合，然后，如果需要的話再使產(chǎn)物形成一定形狀。
本發(fā)明還包括一種上文定義的藥物制劑，其中式(I)化合物或其藥學上可接受的衍生物和至少一種其它治療藥物分別獨立存在并作為一套小藥盒。
適合經(jīng)皮給藥的組合物可制成單個的膏藥以便長時間與接受者的外皮保持密切接觸。這種膏藥可含活性化合物1)在任選的緩沖水溶液或2)溶于和/或分散于粘合劑或3)分散于多聚體中?；钚曰衔锏倪m合濃度是約1％至25％，優(yōu)選約3％至15％。作為一種特殊的可能性，該活性化合物可通過電轉(zhuǎn)運或離子電泳從膏藥上釋放，概述參見藥物研究(Pharmaceutical Research)，3(6)，318(1986)。
適合口服用藥的本發(fā)明的制劑可制成獨立的單位如膠囊劑，扁囊劑或片劑，它們分別含有預定量的活性成分，制成粉或顆粒；制成水相或非水相中的溶液或混懸液；或制成水包油液體乳劑或油包水乳劑。該活性成分也可制成大丸藥，干藥糖劑或糊劑。
片劑可壓制或模制，可任選加入一或多種輔助成分。壓制的片劑可通過在合適的機器中對處于自由流動形式如粉或顆粒的活性成分加壓而制備，可任選與一種粘合劑(如聚乙烯吡咯烷酮，明膠，羥丙基甲基纖維素)潤滑劑，惰性稀釋劑，防腐劑，崩解劑(如淀粉羥基乙酸鈉，交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)，表面活性劑或分散劑混合。模制的片劑可通過在合適的機器中對用惰性液體稀釋劑潤濕的粉狀化合物的混合物進行模壓而制備。該片劑可任選包衣或壓痕，并可制劑以便使其中的活性成分緩慢地或控制地釋放，例如，使用不同比例的羥丙基甲基纖維素以提供期望的釋放曲線。片劑可任選包有腸衣，以便在腸中而不是在胃中釋放。
適合口腔中局部應用的制劑包括糖錠劑、軟錠和漱口水，這些糖錠劑的活性成分包含在矯味劑基質(zhì)(通常為蔗糖和阿拉伯樹膠或黃蓍膠)中；軟錠劑的活性成分包含在惰性成分(如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯樹膠)中；漱口水的活性成分包含合適的液體載體中。
直腸給藥的制劑可與合適的基質(zhì)如可可脂或水楊酸酯配制成栓劑。
適合陰道給藥的制劑可制成陰道栓劑。棉塞。霜劑，凝膠，糊狀的，泡沫劑或噴霧劑型，除活性成分外它們還含有一些本領(lǐng)域中公認為合適的載體。
其中載體為固體的適合直腸給藥的藥物制劑最優(yōu)選制成單位劑量栓劑。合適的載體包括可可脂和其它本領(lǐng)域中通常使用的物質(zhì)。通過將活性組合物與軟化的或融熔的載體混合后在模型中冷模和成形，可方便地形成所述栓劑。
適合胃腸外給藥的制劑包括水和非水的等張滅菌注射溶液劑，它可含有抗氧化劑，緩沖劑，抑菌劑和使該制劑與接受藥物者的血液等張的溶質(zhì)；以及水和非水滅菌混懸液劑，它可包括懸浮劑和增稠劑。該制劑可以單位劑量或多劑量密封于容器(例如安瓿瓶和小玻璃瓶)內(nèi)，并可貯存于冰凍干燥(凍干)狀態(tài)，只需在使用前加入滅菌液體載體，如注射用水?？蓮纳鲜龈黝悳缇勰?，顆粒和片劑制備臨時的注射溶液和混懸液。
優(yōu)選的單位劑量制劑應含一日劑量或單位，一日分劑量，如上文所述，或其適當部分的活性成分。
應理解，除上面特別提到的成分外，本發(fā)明的制劑還可包括本領(lǐng)域中常規(guī)使用的與所涉及制劑類型有關(guān)的其它試劑，如，適合口服給藥的制劑還可包括另外的試劑如甜味劑，增稠劑和矯味劑。
本發(fā)明還包括用于制備上述式(I)化合物及其衍生物的下列方法，該方法包含(A)使式(II)化合物與合適的鹵化劑如N-溴琥珀酰胺反應；或者當L是一個適當?shù)碾x去原子或基團，如鹵素原子如溴或有機基團(如烷基)砜，或有機基團(如烷基或芳烷基)硫酸酯如甲基砜(MeS(O)2)，甲基磺酸酯(MeS(O)2O)或甲苯磺酸酯(4-MePhS(O)2O)基團，并且R3，R4和R5如上所定義時，與式H-NR1R2(其中R1和R2如上所定義)的胺反應，
其中L是氫，R3，R4和R5各自為羥基或被保護的羥基；或者(B)將式(III)化合物與式(IV)化合物反應，其中R如上所定義，
其中R3，R4和R5各自是羥基或被保護的羥基，并且L1是處于α-或β-位合適的離去基團，如鹵素(如氟，氯或溴)，烷基，或芳硫基(如苯硫基)，或芳香或脂肪族的酯基團如苯甲酸酯或醋酸酯。隨后或與此同時，可以任何希望的或需要的次序進行下列步驟之一或多步(i)脫去任何殘留的保護基團；(ii)將式(I)化合物或其被保護的形式轉(zhuǎn)化為另一式(I)化合物或其被保護的形式；(iii)將式(I)化合物或其被保護的形式轉(zhuǎn)化為式(I)的化合物的藥學上可接受的衍生物或其被保護的形式；(iv)將式(I)化合物的藥學上可接受的衍生物或其被保護的形式轉(zhuǎn)化為式(I)化合物或其被保護的形式；(v)將式(I)化合物的藥學上可接受的衍生物或其被保護的形式轉(zhuǎn)化為式(I)化合物的另一種藥學上可接受的衍生物或其被保護的形式；(vi)當需要時，分離式(I)化合物或其被保護的衍生物形式或式(I)化合物的藥學上可接受衍生物的α和β端基異構(gòu)體。
方法(A)可方便地用于制備R是鹵素的式(I)化合物。通過將其中L是氫而R3，R4和R5是被保護的羥基，優(yōu)選為OC(O)CH3的式(II)化合物與鹵化劑反應，可方便地制備所述化合物。鹵化可以常規(guī)方式進行，例如，在質(zhì)子惰性溶劑如THF或優(yōu)選1，4-二噁烷(加熱至60-150℃，優(yōu)選100℃)中使用溴化劑如N-溴丁二酰亞胺(NBS)進行溴化。
其中R為-NR1R2(其中R1和R2按前述定義)的式(I)化合物可有利地從其中L為鹵素原子，如溴或氯原子的式(II)化合物制備。通過與胺H-NR1R2(其中R1和R2如前所定義)反應。該反應在升高的溫度下，如70-80℃，在有機溶劑如乙醇或二甲基亞砜中有利地進行。
可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)化學技術(shù)脫去保護基團。
其中R3，R4和R5各為羥基基團的式(II)化合物，例如，從其中R3，R4和R5各為被保護的羥基基團的相應式(II)化合物制備。常規(guī)的保護基團可用于R3，R4和R5?？梢杂欣貞媚切┤缟鲜雠c式(I)化合物的酯有關(guān)的酯基團。這些保護性基團可通過常規(guī)化學技術(shù)如甲醇中的碳酸鈉或用酶脫去，如使用豬肝酶。另外，R3，R4和R5可包括甲硅烷基保護基團如叔丁基二苯基-，叔丁基二甲基-，三異丙基甲硅烷基基團，它們可使用合適的氟源如HF/吡啶，n-Bu4NF或Et4NF脫去，或環(huán)縮醛或縮酮如苯亞甲基或異亞丙基基團，它們可在酸性條件下，如使用對甲苯磺酸和甲醇脫去。
另外，其中R3，R4和R5為被保護的羥基基團的式(II)化合物可與一種試劑或在某些條件下反應，從而使離去基團L被轉(zhuǎn)化為希望的R基團同時脫去保護性基團。這種試劑的實例包括環(huán)丙胺和其它伯和仲胺，只要這些試劑足夠親核而不位阻。
其中R如前文所定義的式(I)化合物和其中L為如前所定義的式(II)化合物可通過下法制備將式(V)化合物(其中X等價于前文中定義的R或L)與式(IV)化合物(其中R3，R4和R5各為羥基或被保護的羥基基團并且L1如前文所定義)反應而制備，
式(IV)和(V)化合物的反應可使用路易斯酸進行，這些酸如三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯，四氯化錫，或三氟化硼，優(yōu)選前者。該反應常在質(zhì)子惰性溶劑中和升高的溫度下進行，如在乙腈中于15-30℃或在1，2-二氯乙烷中于70-90℃進行。
式(V)化合物在上述步驟中有利地在N1位三甲基甲硅烷基化，以提高可溶性，例如通過用三甲基甲硅烷基氯，六甲基二硅氮烷或，最優(yōu)選N，O-雙三甲基甲硅烷基乙酰胺(BSA)處理。這種甲硅烷基化可在溶劑(優(yōu)選1，2-二氯乙烷或乙腈)中，優(yōu)選在70-80℃進行。在甲硅烷基化反應成后，可在加入式(IV)化合物加入路易斯酸。
式(IV)化合物可通過熟練技術(shù)人員公知的方法制備，例如，以公知的D-核糖衍生物制備方法相似的方法或可從化學文獻(例如，Acton等，J.Am.Chem，Soc，1964，86，5352)中描述的方法制備。式(IV)優(yōu)選化合物是其中R3，R4和R5和L1各自是OC(O)CH3的化合物。該化合物可以按類似于D-核糖的制備方法制備(R.D.Guthrie和S.C.Smith.，化學工業(yè)(Chemitry and Industry)，1968，pp547-548)，隨后有利地用乙醇重結(jié)晶。
其中X是L或-NR1R2基團的式(V)化合物(其中L，R1和R2按前文所定義)，可按照在本文中引入作為參考的PCT專利申請書WO92/07867中描述的方法制備。
另外，其中X為R并且R為-NR1R2基團(這里R1和R2如前所定義)的式(V)化合物可通過下述方法制備將式(VI)化合物與一種或多種能使二胺環(huán)化為苯并咪唑的試劑反應。
典型地，式(I)化合物可與式(VII)的異硫氰酸酯反應，S＝C＝NR1R2(VII)其中R1和R2如前所定義。
該反應可在碳化二亞胺如二環(huán)己基碳二亞胺或1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳二亞胺N-甲-對-甲苯磺酸鹽存在下進行，方便地，在質(zhì)子惰性的芳香族溶劑如甲苯并最優(yōu)選吡啶存在下和升高的溫度，優(yōu)選75-150℃下進行。
其中X為鹵素的式(V)化合物可商購或也可通過將式(VI)化合物在稀酸條件下，在室溫至80℃與甲脒反應而制備。
式(VI)和(VII)化合物可通過技術(shù)人員公知的方法，或可從化學文獻中獲得的方法制備或商購。
本發(fā)明的酯可通過本領(lǐng)域中公知的方法制備，例如可通過用合適的酯化劑，如，合適的?；u或酸酐反應，將式(I)化合物轉(zhuǎn)化為藥學上可接受的酯。
按常規(guī)方法通過與合適的烷化劑反應，可以將式(I)化合物轉(zhuǎn)化為相應的式(I)的藥學上可接受的酯。
式(I)化合物包括其酯，可按常規(guī)方法，例如通過用合適的酸處理，可以將它們轉(zhuǎn)化為其藥學上可接受的鹽。式(I)的酯或酯的鹽可轉(zhuǎn)化為母體化合物，例如，通過水解。
β和α端基異構(gòu)體可通過硅膠層析法，使用單一溶劑或數(shù)種溶劑合用如1∶20甲醇∶二氯甲烷分開并分離為純的形式。
本發(fā)明還包括作為新的中間產(chǎn)物的如前文定義的式(II)化合物。優(yōu)選的式(II)化合物包括其中L是氫或鹵素原子，優(yōu)選氯或溴，并且R3，R4和R5為羥基或被保護的羥基基團，優(yōu)選OC(O)CH3的化合物。
特別優(yōu)選的式(II)化合物是2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑和2-溴-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑。
本發(fā)明還包括式(V)中間產(chǎn)物，其中X是R，并且R是-NR1R2基團，這里R1和R2如前文所定義，但是R1和R2不能都是氫或甲基。
優(yōu)選的式(V)化合物包括2-(環(huán)丙氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑；5，6-二氯-2-(異丙氨基)-1H-苯并咪唑和5，6-二氯-2-(2-氟-1-甲基乙氨基)-1H-苯并咪唑。
下列實施例僅是為了闡述本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。用于藥學實施例的術(shù)語“活性成分”是指式(I)化合物或其藥學上可接受的衍生物。該術(shù)語還包括與一或多種治療藥劑并用的式(I)化合物或其藥學上可接受的衍生物。實施例12-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使2-溴-5，6-二氯苯并咪唑(1.0g，3.8mmol)，N，O-雙(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(Aldrich，0.94mL，3.8mmol)和乙腈(AldrichSure Seal，25mL)混合并在氮氣下回流一小時。將溶液冷卻至室溫并加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(Aldrich，1.5mL，7.6mmol)。15分鐘后，加入固體1，2，3，5-四-O-乙酰基-L-呋喃核糖(1.2g，3.8mmol)(除L-核糖被用作起始物質(zhì)外按照Guthrie和Smith的方法(Chemistty and Industry，1968，pp 547-548)制備)。該溶液在室溫下于氮氣中攪拌18小時，然后倒入10％碳酸氫鈉水溶液(100ml)中并用二氯甲烷(2×150mL)提取。有機層用硫酸鎂(無水)干燥，過濾，并蒸發(fā)。粗殘留物在硅膠柱(5×20cm，230-400目)上純化，用1∶30丙酮∶CH2Cl2洗脫得到2-溴-5，6-二氯-1-(3，4，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.2g，2.2mmol，60％)；m.p.142℃，[a]D20＝(+)87.4(c＝0.5DMF)；UVmax(e)pH＝7.0298nm(7,600)，289(7,400)，254(8,800)；0.1NNaOH298nm(7,600)，289(7,400)，256(7,300)；MS(EI)m/z(相對強度)524(0.15，M+)；1HNMR(DMSO-d6)d8.08(s，1H，Ar-H)，8.01(s，1H，Ar-H)，6.22(d，1H，H-1′，J＝7.1Hz)，5.56(dd，1H，H-2′，J＝7.1Hz，J＝7.2Hz)，5.45(dd，1H，H-3′，J＝7.2Hz，J＝4.5Hz)，4.55-4.47(m，2H，H-4′和5′)，4.37(d，1H，H-5″，J＝9.7Hz)，2.15(s，3H，OAc)，2.14(s，3H，OAc)，2.01(s，3H，OAc).元素分析C18H17N2O7Cl2Br，計算值C，41.25；H，3.27；N，5.34。
測定值C，41.16；H，3.39，N，5.20。
另外，得到少量的α端基異構(gòu)體(2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.11g，0.22mmol，6％)；m.p.＜65℃；[a]20D＝(-)206.8(c＝0.5 DMF)；MS(AP+)m/z(相對強度)；524(0.8，M+)；1HNMR(DMSO-d6)d7.95(s，1H，Ar-H)，7.91(s，1H，Ar-H)，6.66(d，1H，H-1′，J＝4.2Hz)，5.68(t，1H，H-2′，J＝4.6Hz)，5.52(t，1H，H-3′，J＝5.9Hz)，4.87-4.81(m，1H，H-4′)，4.37-4.24(m，2H，H-5′)，2.08(s，3H，OAc)，2.03(s，3H，OAc)，1.51(s，3H，OAc).元素分析C18H17N2O7Cl2Br，計算值C，41.25；H，3.27；N，5.34。
測定值C，41.39；H，3.35，N，5.29。實施例22-溴-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使碳酸鈉(O.28g，2.65mmol)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.39g，2.65mmol)與水(4mL)，甲醇(20mL)和乙醇(20mL)混合并在室溫攪拌1.5小時。加入醋酸(0.3mL，5.3mmol)并將混懸液濃縮為固體。殘留物在硅膠柱(2.5×20cm，230-400目)上純化，用1∶9乙醇∶CH2Cl2洗脫，得到白色無定形固體2-溴-5，6-二氯-1-β-L-呋喃核糖基-1H-苯并咪唑(0.79g，2.0mmol，75％)； m.p.169℃；[a]20D＝(+)105(c＝0.5DMF)；UVImax(e)pH7.0298nm(6,700)，289(6,500)，255(6,900)；0.1NNaOH298nm(6,700)，295(5,400)，256(6,700)；MS(CI)m/z399(M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d8.57(s，1H，Ar-H)，7.96(s，1H，Ar-H)，5.89(d，J＝7.9Hz，H-1)，5.48(d，1H，OH，J＝6.3Hz)，5.42(t，1H，OH，J＝4.5Hz)，5.29(d，1H，OH，J＝4.2Hz)，4.43(明顯的dd，1H，H-2′，J＝13.3Hz，J＝6.1Hz)，4.14(明顯的t，1H，H-3′，J＝4.3Hz)，4.01(明顯的d，1H，H-4′，J＝1.7Hz)，3.77-3.63(m，2H，H-5′).元素分析C12H11N2O4Cl2Br·0.20C2H6O計算值C，36.57；H，3.02；N，6.88。測定值C，36.68；H，2.85，N，7.05。實施例32-(環(huán)丙基氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)丙基胺(5mL)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.10g，0.25mmol)與無水乙醇(5ml)混合并在75℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×14cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.073g產(chǎn)物。此物質(zhì)在另一硅膠柱(2.5cm×10cm，230-400目)上進一步純化，1∶5∶5甲醇∶乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到白色固體(0.051g，0.14mmol，55％)；m.p.228-230℃(分解)；[a]20D＝(-)17.4(c＝0.5乙醇，無水)；Uvlmax(e)pH7.0303nm(10,400)，274(1,700)，259(9,100)；0.1NNaOH304nm(10,700)，295(1,900)，259(8,800)；MS(CI)m/z(相對強度)374(13.2，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d7.6(s，1H，Ar-H)，7.42(s，1H，Ar-H)，5.71(d，1H，J＝7.6Hz，H-1′)，5.65(t，1H，OH，J＝4.3Hz)，5.25-5.21(m，2H，OH)，4.22(明顯的dd，1H，H-2′，J＝13.4Hz，J＝7.6Hz)，4.02(明顯的t，1H，H-3′，J＝7.1Hz)，3.95(s，1H，H-4′)，3.67-3.62(m，2H，H-5′)，2.78-2.74(m，1H，環(huán)丙基-CH)，0.67(d，2H，J＝7.1Hz，環(huán)丙基-CH2)，0.53-0.47(m，2H，環(huán)丙基-CH2).元素分析C15H16N3O4Cl2·0.50C4H8O2·0.15C6H14計算值C，49.98；H，5.18；N，9.77。測定值C，49.86；H，5.18，N，9.80。實施例42-(烯丙基氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使烯丙胺(5mL)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.60g，1.14mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在75℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×20cm，230-400目)上純化，用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.325g，0.87mmol，76％)；m.p.220℃(分解)；[a]20D＝(-)16.0(c＝0.5DMF)；Uvlmax(e)∶pH7.0∶303nm(11,200)，275(2,000)，259(9,900)；0.1NNaOH304nm(11,300)，275(2,000)，259(9,200)；MS(CI)m/z(相對強度)374(100，M+1)；1HNMR(pMSO-d6)d7.66(s，1H，Ar-H)，7.35(s，1H，Ar-H)，5.98-5.85(m，1H，CH＝CH2)，5.76(d，1H，J＝7.6Hz，H-1′)，5.62(t，1H，OH，J＝4.3Hz)，5.28(d，1H，OH，J＝7.6Hz)，5.23(d，1H，OH，J＝4.2Hz)，5.16(d，1H，CH＝CH2，J＝18.6Hz)，5.05(d，1H，CH＝CH2，J＝10.2Hz)，4.30(明顯的dd，1H，H-2′，J＝13.1Hz，J＝7.6Hz)，4.06(明顯的t，1H，H-3′，J＝5.6Hz)，3.97(br.s，1H，H-4′，CH2CH＝CH2)，3.71-3.60(m，2H，H-5′).元素分析C15H17N3O4Cl2·0.30H2O計算值C，47.46；H，4.67；N，11.07。測定值C，47.50；H，4.68；N，11.02。實施例55，6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使異丙基胺(10mL)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.0g，1.9mmol)與無水乙醇(20ml)混合并在75℃攪拌48小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到混有少量較高Rf物質(zhì)的產(chǎn)物。將此產(chǎn)物在chromatotron上再純化，該chromatotron安裝有2mm硅膠轉(zhuǎn)動體，用1∶25甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.43g，1.15mmol，60％)；[a]20D＝(-)22.4(c＝0.5DMF)；Uvlmax(e)pH7.0304nm(9,500)，275(1,800)，260(8,300)；0.1NNaOH304nm(9,900)，275(1,900)，260(8,100)；MS(CI)m/z(相對強度)376(100，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d7.59(s，1H，Ar-H)，7.35(s，1H，Ar-H)，6.90(d，1H，NH，J＝7.8Hz)，5.73(d，1H，H-1′，J＝6.5Hz)，5.62(t，1H，OH，J＝4.2Hz)，5.27-5.23(m，2H，OH)，4.27(明顯的dd，1H，J＝13.4Hz，J＝7.6Hz)，4.11-3.99(m，2H)，3.97(br.s，1H)，3.72-3.61(m，2H，H-5′)，1.18(d，6H，CH(CH3)2，J＝6.6Hz).元素分析C15H19N3O4Cl2·1.00H2O計算值C，45.70；H，5.37；N，10.66。測定值C，45.75；H，4.98，N，10.50。實施例62-(環(huán)戊基氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)戊基胺(5mL)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在70℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶9乙醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.27g，0.68mmol，59％)；m.p.140℃；℃；[a]20D＝(-)24.0(c＝0.5DMF)；UV1max(e)pH7.0305nm(12,700)，276(2,400)，260(10,600)，245(7400)；0.1NNaOH305nm(12,600)，276(2,200)，260(9,900)，247(7,300)；MS(CI)m/z(相對強度)402(100，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d 7.60(s，1H，Ar-H)，7.36(s，1H，Ar-H)，6.91(d，1H，NH，J＝6.8Hz)，5.74(d，1H，H-1′，J＝7.6Hz)，5.61(t，1H，OH，J＝4.2Hz)，5.26(d，1H，OH，J＝8.1Hz)，5.23(d，1H，OH，J＝5.5Hz)，4.30-4.14(m，2H，NHCH，H-2′)，4.05(明顯的t，1H，H-3′，J＝4.9Hz)，3.96(br.s，1H，H-4′)，3.72-3.59(m，2H，H-5′)，1.91(br.s，2H，CH2)，1.66(br.s，2H，CH2)，1.52(br.s，4H，CH2).元素分析C17H21N3O4Cl2·0.20H2O計算值C，50.31；H，5.31；N，10.38。測定值C，50.13；H，5.31，N，10.05。實施例72-(芐氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使芐胺(10mL)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.0g，1.9mmol)與無水乙醇(20ml)混合并在70℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶9乙醇∶二氯甲烷洗脫。粗產(chǎn)物含芐胺。該物質(zhì)在另一硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上進一步純化，用3∶7丙酮∶己烷洗脫，得到含少量雜質(zhì)的產(chǎn)物。使用與第二支柱相同的第三支硅膠柱進行最終純化，得到灰白色固體(0.26g，0.62mmol，32％)；m.p.123℃；[a]20D＝(-)4.6(c＝0.5DMF)；UV1max(e)pH7.0304nm(10,600)，276(1,800)，260(9,600)；0.1NNaOH305nm(10,500)，276(1,500)，260(8,500)；MS(CI)m/z(相對強度)424(100，M+1)；1H NMR(DMSO-d6)d 7.78(t，1H，J＝5.9Hz，NH)，7.68(s，1H，Ar-H)，7.34(s，1H，Ar-H)，7.34-7.18(m，5H，Ar-H)，5.80(d，1H，H-1′，J＝7.6Hz)，5.67(t，1H，OH，J＝4.1Hz)，5.32(d，1H，OH，J＝7.6Hz)，5.25(d，1H，OH，J＝4.6Hz)，4.55(d，2H，PhCH2，J＝5.7Hz)，4.34(明顯的dd，1H，H-2′，J＝13.1Hz，J＝7.4Hz)，4.08(明顯的t，1H，H-3′，J＝3.8Hz)，4.00(br.s，1H，H-4′)，3.73-3.61(m，2H，H-5′).元素分析C19H19N3O4Cl2·0.10H2O計算值C，53.56；H，4.54；N，9.86。測定值C，53.23；H，4.62，N，9.71。實施例82-氮雜環(huán)丁烷-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑氮雜環(huán)丁烷(1g)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在75℃攪拌72小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.35g，0.93mmol，82％)；m.p.244 245℃；[a]20D＝(+)69.6(c＝0.5DMF)；UVlmax(e)pH7.0305nm(9,900)，275(1,500)，260(9,800)；0.1NNaOH305nm(9,800)，276(1,600)，260(7,800)；MS(CI)m/z(相對強度)376(100，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d8.60(s，1H，Ar-H)，7.49(s，1H，Ar-H)，5.43(d，1H，H-1′，J＝7.6Hz)，5.33(d，1H，OH，J＝6.6Hz)，5.26(t，1H，OH，J＝4.7Hz)，5.13(d，1H，OH，J＝4.7Hz)，4.35(明顯的dd，1H，H-2′，J＝12.6Hz，J＝6.0Hz)，4.17(t，4H，CH2，J＝7.6Hz)，4.07(明顯的t，1H，H-3′，J＝6.1Hz)，3.88(d，1H，H-4′，J＝2.4Hz)，3.64(br.s，2H，H-5′)，2.39-2.29(m，2H，CH2).元素分析C15H17N3O4Cl2計算值C，48.14；H，4.58；N，11.23。測定值C，48.00；H，4.59，N，11.15。實施例95，6-二氯-2-(炔丙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使炔丙基胺(4mL)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在70℃攪拌4小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶20乙醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.18g粗產(chǎn)物。該物質(zhì)在安裝有2mm轉(zhuǎn)化體的chromatotron上進一步純化，用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到淡黃色固體(0.135g，0.36mmol，32％)；m.p.182-184℃；[a]20D＝(-)9.2(c＝0.5DMF)；UVImax(e)pH7.0300nm(8,900)，272(1,700)，258(8,300)；0.1NNaOH301nm(8,700)，272(1,800)，259(7,500)；MS(CI)m/z(相對強度)372(100，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d7.73(s，1H，Ar-H)，7.58(t，1H，J＝5.5Hz，NH)，7.43(s，1H，Ar-H)，5.75(d，1H，H-1′，J＝5.0Hz)，5.66(t，1H，OH，J＝4.3Hz)，5.29(d，1H，OH，J＝7.6Hz)，5.24(d，1H，OH，J＝4.2Hz)，4.28(明顯的dd，1H，H-2′，J＝13.2Hz，J＝7.4Hz)，4.11-4.04(m，3H，H-3′，CH2)，3.97(br.s，1H，H-4′)，3.73-3.61(m，2H，H-5′)，3.10(s，1H，CH).元素分析C15H15N3O4Cl2·0.75H2O計算值C，46.71；H，4.31；N，10.89。測定值C，46.52；H，4.23，N，10.72。實施例105，6-二氯-2-(n-丙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使丙胺(7ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在70℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶9乙醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.36g，0.96mmol，84％)；m.p.231-233℃；[a]20D＝(-)23.6(c＝0.5DMF)；UV1max(e)pH7.0305nm(9,900)，275(1,500)，260(9,800)；0.1NNaOH305nm(9,800)，276(1,600)，260(7,800)；MS(CI)m/z(相對強度)376(100，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d7.60(s，1H，Ar-H)，7.35(s，1H，Ar-H)，7.15(t，1H，J＝5.4Hz，NH)，5.74(d，1H，H-1′，J＝7.6Hz)，5.66(t，1H，OH，J＝4.0Hz)，5.28(d，1H，OH，J＝7.6Hz)，5.24(d，1H，OH，J＝4.2Hz)，4.34-4.25(m，1H，H-2′)，4.06(表觀t，1H，H-3′，J＝4.7Hz)，4.00(br.s，1H，H-4′)，3.72-3.61(m，2H，H-5′)，3.31-3.24(m，2H，NH2CH2)，1.57(q，2H，J＝7.3Hz，CH2)，0.88(t，3H，J＝7.5Hz，CH3).元素分析C15H19N3O4Cl2·0.25H2O計算值C，47.32；H，5.16；N，11.04。測定值C，47.43；H，5.20，N，10.74。實施例115，6-二氯-2-(異丁基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使異丁基胺(10ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1 H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(50ml)混合并在75℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷(500ml)，然后用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到褐色固體(0.39g，1.0mmol，90％)；m.p.136℃[a]20D＝(-)28.4(c＝0.5DMF)。元素分析C16H21N3O4Cl2計算值∶C，48.13；H，5.55；N，10.52。測定值C，48.08；H，5.57，N，10.41。實施例122-((5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑-2-基)氨基)乙醇使乙醇胺(25ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.62g，1.2mmol)與無水乙醇(50ml)混合并在80℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷(500ml)，然后用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫。獲得的粗產(chǎn)物進一步在硅膠濾墊上純化，用1∶1丙酮∶二氯甲烷，而后用1∶2乙醇∶二氯甲烷洗脫。在裝有2mm轉(zhuǎn)動體的chromatotron上進一步純化，用1∶6乙醇∶乙酸乙酯洗脫，得到純的產(chǎn)物(0.064g，0.17mmol，14％)；[a]20D＝(-)14.2(c＝0.5DMF)。元素分析C14H17N3O5Cl2·0.50H2O計算值C，43.43；H，4.69；N，10.85。測定值C，43.74；H，5.02，N，10.53。實施例135，6-二氯-2-((1-乙基丙基)氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使1-乙基丙基胺(5ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(20ml)混合并在80℃攪拌24小時。濃縮反應混合物并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到含少量雜質(zhì)的產(chǎn)物(0.31g)。該物質(zhì)在裝有2mm轉(zhuǎn)動體的chromatotron上進一步純化，使用1∶2丙酮∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.24g，0.59mmol，52％)；[a]20D＝(-)39.4(c＝0.5DMF)。元素分析C17H23N3O4Cl2計算值C，50.50；H，5.73；N，10.39。測定值C，50.44；H，5.88，N，10.14。實施例142-(環(huán)己基氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)己基胺(5ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(20ml)混合并在80℃攪拌24小時。濃縮反應混合物并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到含少量雜質(zhì)的產(chǎn)物(0.38g)。該物質(zhì)在裝有2mm轉(zhuǎn)動體的chromatotron上進一步純化，用1∶2丙酮∶二氯甲烷洗脫，得到除了0.25g稍微不純的物質(zhì)外，還有白色固體的純產(chǎn)物(0.059g，0.14mmol，12％)；[a]20D＝(-)24.0(c=0.5DMF)。元素分析C18H23N3O4Cl2·0.30H2O計算值C，51.27；H，5.64；N，9.96。測定值C，51.18；H，5.68，N，9.88。實施例152-苯氨基-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使芐胺(5ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(35ml)混合，并在80℃攪拌14天。濃縮反應混合物并在80℃于高真空下蒸餾去除苯胺。棕色殘留物溶于甲醇(50ml)并加入K2CO3。將該溶液攪拌18小時。過濾該溶液濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.024g，0.06mmol，5％)。MS(AP+)m/z(相對強度)410(19.39，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d9.09(s，1H，NH)，7.83(s，1H，Ar-H)，7.78(d，1H，Ar-H，J＝7.9Hz)，7.58(s，2H，Ar-H)，7.31(t，2H，Ar-H，J＝7.9Hz)，6.99(t，1H，Ar-H，J＝7.5Hz)，5.95(d，1H，H-1′，J＝7.8Hz)，5.86(t，1H，OH，J＝4.4Hz)，5.38(d，1H，OH，J＝7.6Hz)，5.30(d，1H，OH，J＝4.2Hz)，4.33(明顯的dd，1H，H-4′，J＝13.4Hz，J＝7.8Hz)，4.11(明顯的t，1H，H-2′，J＝4.8Hz)，4.05(s，1H，H-4′)，3.79-3.71(m，2H，H-5′).實施例165，6-二氯-2-(正戊氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使正戊胺(5ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.55g含一些雜質(zhì)的產(chǎn)物。該物質(zhì)在另一硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上再純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷再洗脫，得到灰白色固體(0.40g，0.99mmol，87％)m.p.102-103℃；[a]20D=(-)22.0(c＝0.5DMF)。元素分析C17H23N3O4Cl2計算值C，50.50；H，5.73；N，10.40。測定值C，50.25；H，5.85，N，10.26。實施例172-((5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑-2-基)氨基)乙腈，使鹽酸氨基乙腈(1.2g，13mmol)，三乙胺(5ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(40ml)混合并在80℃攪拌3天。濃縮反應混合物，殘余物用乙酸乙酯(150mL)稀釋，并用10％碳酸氫鈉溶液(25mL)提取，然后用水(2×25ml)提取。將乙酸乙酯層干燥(Na2SO4)、傾析和濃縮為棕色的油狀物(0.67g)并在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫。離柱的兩種主要產(chǎn)物是2-溴-5，6-二氯-1-(5-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.32g)和2-溴-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.14g)。還分離到一種較低Rf物質(zhì)(0.19g)并在裝有2mm轉(zhuǎn)動體的chromatotron上進一步純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.024g，0.06mmol，5％)；MS(AP-)m/z(相對強度)371(80，M-2)；1HNMR(DMSO-d6)d7.87(t，1H，NH，J＝5.9Hz)，7.83(s，1H，Ar-H)，7.52(s，1H，Ar-H)，5.74(d，1H，H-1′，J＝7.6Hz)，5.68(t，1H，OH，J＝4.1Hz)，5.32(d，1H，OH，J＝7.1Hz)，5.23(d，1H，OH，J＝4.2Hz)，4.37(d，2H，CH2CN，J＝5.3Hz)，4.28(明顯的dd，1H，H-4′，J＝13.0Hz，J＝7.2Hz)，4.07(明顯的t，1H，H-3′，J＝3.5Hz)，3.98(s，1H，H-3′)，3.73-3.63(m，2H，H-5′).元素分析C14H14N4O4Cl2·0.30CH4O·0.15CH2Cl2計算值C，43.88；H，3.95；N，14.16。測定值C，43.81；H，3.90，N，14.21。實施例182-(正丁基氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使正丁胺(5ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌18小時。濃縮反應混合物并在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上純化，用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫。獲得粗產(chǎn)物(0.73g)并在裝有2mm轉(zhuǎn)動體的chromatotron上進一步純化，用1∶2丙酮∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.20g，0.51mmol，45％)；m.p.220-222℃；[a]20D＝(-)17.2(c＝0.5DMF)。元素分析C16H21N3O4Cl2·1/10H2O·1/2C3H6O計算值∶C，49.91；H，5.79；N，9.98。測定值C，49.75；H，5.90，N，10.16。實施例192-(仲-丁基氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使仲-丁胺(3ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌18小時。濃縮反應混合物并在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫。獲得粗產(chǎn)物(0.37g)并在裝有2mm轉(zhuǎn)動體的chromatotron上進一步純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體，它是一種非對映體的混合物(0.21g，0.55mmol，48％)；m.p.121-122℃；[a]20D＝(-)23.8(c＝0.5DMF)。元素分析C16H21N3O4Cl2·7/10H2O計算值C，47.70；H，5.60；N，10.43。測定值C，47.76；H，5.51，N，10.16。實施例202-(環(huán)丁基氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)丁基胺(3ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌24小時。濃縮反應混合物并在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上純化，用2∶1乙酸乙酯∶己烷洗脫。獲得粗產(chǎn)物(0.42g)并在裝有2mm轉(zhuǎn)動體的chromatotron上經(jīng)多次循環(huán)進一步純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(0.26g，0.67mmol，59％)；m.p.220-221℃；[a]20D＝(-)22.4(c＝0.5DMF)。元素分析C16H19N3O4Cl2計算值C，49.50；H，4.93；N，10.82。測定值C，49.22；H，4.90，N，10.61。實施例212-(環(huán)庚基氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)庚基胺(2ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.4g，1.0mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌24小時。濃縮反應混合物并在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上純化，用1∶20∶20甲醇∶乙酸乙酯∶己烷洗脫。得到灰白色固體(0.13g，0.3mmol，30％)；m.p.137-138℃；[a]20D＝(-)21.6(c=0.5 DMF)。元素分析C16H19N3O4Cl2·11/10H2O計算值C，50.70；H，6.09；N，9.33。測定值C，50.91；H，5.91，N，9.13。實施例225，6-二氯-2-((2-(1-吡咯烷基)乙基)氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使1-(2-氨基乙基)吡咯烷(1.9mL，13.5mmol)，三乙胺(2ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌18小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫。主要離柱產(chǎn)物溶于去離子水，中和并提取到二氯甲烷中，得到灰白色固體(0.26g，0.6mmol，53％)；m.p.123-124℃；[a]20D＝(-)20.4(c＝0.5DMF)。元素分析C18H24N4O4Cl2·3/2H2O·1/2C4H8O2計算值C，47.82；H，6.22；N，11.15。測定值C，47.79，H，6.06，N，10.97。實施例232-((環(huán)丙基甲基)氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使鹽酸(氨基甲基)環(huán)丙烷(1.6g，15mmol)，三乙胺(2ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.55g，1.05mmol)與無水乙醇(10ml)混合并在80℃攪拌6小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫。主要離柱產(chǎn)物在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上再純化，用1∶10∶10甲醇∶乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到灰白色固體(0.30g，0.77mmol，74％)；m.p.229-230℃；[a]20D=(-.24.8(c＝0.5DMF)。元素分析C16H19N3O4Cl2計算值C，49.50；H，4.93；N，10.83。測定值C，49.30；H，5.02，N，10.66。實施例242-(叔-丁基氨基)-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使2-(叔-丁基氨基)-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑在甲醇(40ml)和乙醇(40ml)中的溶液與碳酸鈉(0.61g，5.8mmol)在水(10ml)中的溶液混合。該溶液在室溫攪拌5小時，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上去除甲醇和乙醇。然后用乙酸乙酯(150ml)和飽和NaCl(20ml)提取該溶液。濃縮有機相并在硅膠柱(2.5cm×14cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(1.25g，3.2mmol，83％)m.p.118-120℃；[a]20D＝(-)30.2(c＝0.5DMF)。元素分析C16H21N3O4Cl2·2/5H2O·2/5CH4O計算值C，48.01；H，5.75；N，10.24。測定值C，48.20；H，5.73，N，10.05。實施例252-(叔-丁基氨基)-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使無水1，2-二氯乙烷(15ml)，2-(叔-丁基氨基)-5，6-二氯苯并咪唑(1.5g，5.84mmol和N，O-雙三甲基甲硅烷基乙酰胺(2.2mL，8.8mmol)混合并在80℃攪拌30分鐘。加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(1.1ml，5.84mmol)，該溶液在80℃攪拌45分鐘。加入固體1，2，3，4-四-O-乙?；?L-呋喃核糖苷(L-TAR)(2.0g，6.42mmol)并在80℃繼續(xù)攪拌3小時。在此時再加入L-TAR(0.5g，1.6mmol)。1小時后用冷的飽和碳酸氫鈉(40mL)終止反應，然后用二氯甲烷(2×150mL)提取。將合并的有機相干燥(硫酸鈉)，傾析并濃縮，得到4.0g金黃色固體。該物質(zhì)在硅膠柱(5cm×16cm，230-400目)上純化，用1∶30甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(2.21g，4.3mmol，73％)；[a]20D＝(-)28.4(c=0.5DMF)。元素分析C22H27N3O7Cl2·1CH4O計算值C，50.37；H，5.70；N，7.66。測定值C，50.74；H，5.41，N，7.28。實施例262-(叔-丁基氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑使4，5-二氯苯二胺(8.0g，54.2mmol)(Aldrich，Milwaukee，WI)與叔-丁基異硫氰酸酯(6.3mL，49.7mmol)Aldich，Milwaukee，WI在無水吡啶(100ml)中混合。該溶液在氮氣下于80℃加熱1小時。1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對-甲苯磺酸鹽(24.9g，58.8mmol)(Fluka Chemika)與無水吡啶(90mL)一起加入。該溶液在90℃加熱2.5小時。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除吡啶，殘留物溶于乙酸乙酯(300μM)并用水(4×100ml)提取。乙酸乙酯層用脫色碳處理并通過硅膠濾墊(4×8cm，230-400目)，用乙酸乙酯洗滌。粗粗產(chǎn)物在硅膠柱(5×16cm，230-400目)上純化，用(1∶4)乙酸乙酯∶己烷洗脫。粗級分在另一相同柱上再純化，用(1∶3)乙酸乙酯∶己烷洗脫。將來自兩個柱的純級分合并，得到褐色固體(3.13g，12.1mmol，27％)；m.p.219-221℃；MS(API+)m/z(相對強度)258(100，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d10.31(s，1H，NH)，7.31(s，2H，Ar-H)，6.61(s，1H，NH)，1.38(s，9H，叔丁基)。元素分析C11H13N3Cl2計算值C，51.18；H，5.08；N，16.28。測定值C，51.11；H，5.12；N，16.18。實施例272-氨基-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使2-氨基-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(1.0g，2.2mmol)在甲醇(17ml)和乙醇(17ml)中的溶液與碳酸鈉(0.25g，2.4mmol)在水(4ml)中的溶液混合。該溶液在室溫攪拌64小時，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上去除甲醇和乙醇。再在用乙酸乙酯(2×100ml)與飽和NaCl(20ml)之間提取該溶液。濃縮有機相并在硅膠柱(2.5cm×14cm，230-400目)上純化，用1∶10甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到白色固體(4.1g，1.24mmol，57％)m.p.110-112℃；[a]20D＝(-)4.2(c＝0.5DMF)。元素分析C12H13N3O4Cl2·3/5H2O·2/5CH4O計算值C，41.63；H，4.45；N，11.74。測定值C，41.47；H，4.27，N，11.58。實施例282-氨基-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使無水1，2-二氯乙烷(100ml)，2-氨基-5，6-二氯-苯并咪唑(10g，49.5mmol)(按Homer和Henry J.Med.Chem.1968，11，946-949的方法合成)和N，O-三甲基甲硅烷基乙酰胺(18.3mL，74.2mmol)混合并在80℃攪拌30分鐘。所有固體被溶解。將三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(9.3mL，48.3mmol)；加入并使溶液在80℃攪拌20分鐘。在3小時內(nèi)將固體1，2，3，4-四-O-乙?；?L-呋喃核糖苷(L-TAR)(17.3g，54.4mmol)分4份加入，同時繼續(xù)在80℃攪拌。最后一次加入后45分鐘，用冷的飽和碳酸氫鈉(100mL)終止反應，然后用二氯甲烷(200mL)提取。將合并的有機相干燥(硫酸鈉)，傾析并濃縮得到24.8g稠的紅色油狀物。該物質(zhì)在在硅膠柱(5cm×20cm，230-400目)上純化，用1∶40甲醇∶二氯甲烷洗脫。NMR顯示經(jīng)柱層析的高Rf產(chǎn)物含三甲基甲硅烷基基團。這些級分與氟化四丁銨的THF溶液反應24小時，然后通過硅膠濾墊過濾，用1∶10甲醇∶二氯甲烷洗滌。
將所有含級分的產(chǎn)物合并并在硅膠柱(5cm×14cm，230-400目)上純化，用1∶1丙酮∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(3.4g，7.4mmol，15％)；[a]20D＝(+)48.0(c＝0.5DMF)。元素分析C18H19N3O7Cl2·1/4CH2Cl2·1/2C3H6O計算值C，46.46；H，4.44，N，8.23。測定值C，46.59；H，4.35，N，8.07。實施例295，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-2-((2，2，2-三氟乙基)氨基)-1H-苯并咪唑使三乙胺(2ml)，2，2，2-三氟乙胺(2mL)和2-溴-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.4g，1.0mmol)與DMSO(10ml)混合并在封閉管中，于80℃攪拌17天。反應混合物在水(30mL)和二氯甲烷(3×100mL)間提取。濃縮有機相并在裝有2mm轉(zhuǎn)動體的chromatotron上經(jīng)多次循環(huán)純化，用1∶4丙酮∶二氯甲烷，隨后用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體(0.02g，0.05mmol，5％)；MS(API+)；m/z(相對強度)416(100，M+)。元素分析C14H14N3O4FCl2·1/2CH2O·4/5CH4O計算值C，39.42；H，4.13；N，9.25。測定值C，39.34；H，3.95，N，9.08。實施例305，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.43g，0.96mmol)在甲醇(10ml)和乙醇(10m1)中的溶液與碳酸鈉(0.15g，1.4mmol)在水(2.5ml)中的溶液混合。該溶液在室溫攪拌24小時。然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上去除甲醇和乙醇。隨后在乙酸乙酯(4×100ml)和飽和NaCl(20mL)之間提取該溶液。濃縮有機相，得到分析純的白色固體(0.27g，0.85mmol，88％)m.p.209-210℃；[a]20D＝(+)63(c＝0.5DMF)。元素分析C12H12N2O4Cl2·2/5H2O·1/10C4H8O2計算值C，44.44；H，4.09；N，8.36。測定值C，44.49；H，3.91，N，8.14。實施例315，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使無水乙腈(20mL)，5，6-二氯-苯并咪唑(FMS-DottikonAG)(0.59g，3.1mmol)和N，O-雙三甲基甲硅烷基乙酰胺(0.77mL，3.1mmol)混合并在80℃攪拌30分鐘。溶解所有固體。加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(0.75mL，3.9mmol)，該溶液在室溫下攪拌15分鐘，在這段時間里形成大量固體。加入固體1，2，3，4-四-O-乙酰基-L-呋喃核糖苷，(L-TAR)，(1.0g，3.1mmol)，然后將溶液加溫至80℃。所有固體溶解。1.5小時后將反應混合物用冷的飽和碳酸氫鈉(10mL)終止反應，然后用二氯甲烷(100ml)提取。干燥有機相(用硫酸鈉)，傾析并濃縮，得到1.7g黃色油狀物。將該物質(zhì)在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上純化，用1∶40甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到1.37g部分純的產(chǎn)物。經(jīng)過另一硅膠柱(2.5cm×16cm，230-400目)上純化，得到純的白色固體產(chǎn)物(0.8g，1.78mmol，57％)，[a]20D=(+)46.8(c＝0.5DMF)。元素分析C18H18N2O7Cl2計算值C，48.56；H，4.07，N，6.29。測定值C，48.45；H，4.11，N，6.19。實施例322-乙酰氨基-5，6-二氯-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使2-乙酰氨基-5，6-二氯-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.35g，0.75mmol)在甲醇(8ml)和乙醇(8ml)中的溶液與碳酸鈉(0.12g，1.1mmol)在水(2ml)中的溶液混合。該溶液在室溫攪拌24小時，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上去除甲醇和乙醇。該溶液再在乙酸乙酯(2×150ml)與飽和NaCl(20ml)之間提取。濃縮有機相并通過裝有2mm轉(zhuǎn)動體的chromatotron多次循環(huán)而純化，用1∶10甲醇∶二氯乙烷洗脫，得到白色固體(0.067g，0.18mmol，23％)；該物質(zhì)經(jīng)1HNMR，MS和HPLC鑒定，經(jīng)1HNMR鑒定，它含約7％2-氨基-5，6-二氯-β-L-呋喃核糖基-1H-苯并咪唑。HPLC顯示有兩種少量(～5％)雜質(zhì)。實施例335，6-二氯-2-(甲氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使鹽酸甲胺(3.0g，45mmol)，三乙胺(3ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙酰基-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.6g，1.1mmol)與無水乙醇(25ml)混合并在80℃攪拌24小時。反應混合物在飽和碳酸氫鈉(50mL)和乙酸乙酯(150mL)之間分離。用硫酸鈉干燥有機層，濃縮并吸收到硅膠(15g)上。將其干燥并裝填在硅膠柱(55cm×10cm，230-400目)上純化，用1∶10甲醇∶二氯甲烷洗脫。離柱的主要產(chǎn)物為白色固體(0.22g，0.62mmol，54％)m.p.238-240℃；[a]20D＝(-)15.2(c＝0.5DMF)。元素分析C13H15N3O4Cl2·1/2CH4O計算值C，44.52；H，4.70；N，11.54。測定值C，44.43；H，4.58，N，11.36。實施例345，6-二氯-2-(乙氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使鹽酸乙胺(3.7g，46mmol)，三乙胺(7ml)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.60g，1.1mmol)與無水乙醇(20ml)混合并在80℃攪拌24小時。反應混合物在飽和碳酸氫鈉(2×50mL)和乙酸乙酯(200mL)之間分離。有機相用硫酸鈉干燥，濃縮，并在硅膠柱(2.5cm×18cm，230-400目)上純化，用1∶20甲醇∶二氯甲烷洗脫。離柱的主要產(chǎn)物是白色固體(0.30g，0.96mmol，87％)m.p.155-157℃；[a]20D＝(-)20.6(c＝0.5DMF)。元素分析C14H17N3O4Cl2·1/2H2O計算值C，45.30；H，4.89；N，11.32。測定值C，45.44；H，4.78，N，11.18。實施例352-環(huán)丙基氨基-5，6-二氯-1-(α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使環(huán)丙基胺(10mL)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.60g，1.1mmol)(作為合成β端基異構(gòu)體的次要產(chǎn)物獲得，見實施例1)與無水乙醇(50mL)混合并在80℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5×16cm，230-400目)上純化，用1∶9甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.25g粗產(chǎn)物。該物質(zhì)在裝有1mm硅膠轉(zhuǎn)動體的chromatotron上多次循環(huán)而進一步純化，用1∶15甲醇∶二氯乙烷洗脫，得到白色固體(0.060g，0.14mmol，14％)；m.p.140-141 ℃；[a]20D＝(-)51.8(c＝0.5DMF)；UV1max(e)pH7.0303nm(10,600)，274(1,700)；0.1N NaOH304nm(10,800)，275(2,400)；MS(CI)m/z(相對強度)374(29.7，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d7.48(s，1H，Ar-H)，7.38(s，1H，Ar-H)，7.08(br.s，1H，NH)，5.86(d，1H，H-1′，J＝3.4Hz)，5.50(d，1H，OH，J＝4.5Hz)，5.22(d，1H，OH，J＝7.1Hz)，4.84(t，1H，OH，J＝5.7Hz)，4.15(dd，1H，H-2′，J＝7.9Hz，J＝4Hz)，4.10(dd，1H，H-3′，J＝7.3Hz，J＝4.5Hz)，4.05-4.01(m，1H，H-4′)，3.66-3.61(m，1H，H-5′)，3.47-3.41(m，1H，H-5″)，2.74-2.71(dd，1H，環(huán)丙基-CH，J＝6.7Hz，J＝3.3Hz)，0.69(d，2H，J＝6.9Hz，環(huán)丙基-CH2)，0.51-0.45(m，2H，環(huán)丙基-CH2)。元素分析C15H17N3O4Cl2·0.60CH4O·0.2CH2Cl2計算值C，46.24；H，4.86；N，10.24。測定值C，46.13；H，4.83，N，10.28。實施例365，6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使異丙基胺(10mL)和2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙酰基-α-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.60g，1.1mmol)(作為β端基異構(gòu)體合成的次要產(chǎn)物獲得)與無水乙醇(10mL)混合并在80℃攪拌24小時。將反應混合物濃縮并在硅膠柱(2.5×18cm，230-400目)上純化，用1∶15甲醇∶二氯甲烷洗脫，得到0.39g粗產(chǎn)物。該物質(zhì)在裝有1mm硅膠轉(zhuǎn)動體的chromatotron上進一步純化，用1∶2丙酮∶二氯乙烷洗脫，得到白色固體(0.29g，0.78mmol，68％)；m.p.131-133℃；[a]20D＝(-)41.4(c＝0.5DMF)；UV1max(e)pH7.0304nm(11,000)，276(2,000)；0.1NNaOH306nm(11,500)，277(2,500)；MS(CI)m/z(相對強度′)376(34.8，M+1)；1HNMR(DMSO-d6)d7.46(s，1H，Ar-H)，7.31(s，1H，Ar-H)，6.63(d，1H，NH，J＝7.4Hz)，5.94(d，1H，H-1′，J＝3.4Hz)，5.53(d，1H，OH，J＝4.4Hz)，5.22(d，1H，OH，J＝7.1Hz)，4.86(t，1H，OH，J＝5.7Hz)，4.15(dd，1H，H-2′，J＝7.7Hz，J＝4.0Hz)，4.10(dd，1H，H-3′，J＝7.3Hz，J＝4.3Hz)，4.05-3.94(m，2H，異丙基CH，H-4′)，3.69-3.63(m，1H，H-5′)，3.49-3.41(m，1H，H-5″)，1.19(d，3H，J＝6.5Hz異丙基-CH3)，1.18(m，3H，異丙基-CH3)。元素分析C15H17N3O4Cl2·0.4CH2Cl2計算值C，45.09；H，4.86；N，10.24。測定值C，45.10；H，4.97，N，10.00。實施例375，6-二氯-2-((2-氟-1-甲基乙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使碳酸鈉(0.032g，0.30mmol)和5，6-二氯-2-(2-氟異丙基氨基)-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.10g，0.20mmol)與水(1mL)，甲醇(2.5mL)和乙醇(2.5mL)混合并在室溫攪拌3小時。濃縮該溶液以去除大部分甲醇和乙醇，并隨后與乙酸乙酯(75ml)混合。該溶液用飽和NaCl(2×5ml)提取。有機相用Na2SO4干燥，傾析并濃縮。殘留物在裝有1mm硅膠轉(zhuǎn)動體的chromatotron上純化，用1∶10甲醇∶CH2Cl2洗脫，得到白色固體(0.066g，0.17mmol，84％)；[a]20D＝(-)24.8(c＝0.5DMF)；MS(AP+)m/z(相對強度)394(98，M+)；1HNMR(DMSO-d6)d7.64(s，1H，Ar-H)，7.37(s，1H，Ar-H)，7.13(d，0.5H，NH，J＝7.9Hz)，7.07(d，0.5H，NH，J＝7.6Hz)，5.76(d，1H，J＝7.9Hz，H-1′)，5.69(m，1H，OH)，5.31-5.23(m，2H，OH)，4.51-4.45(m，1H，CH2F)，4.35-4.32(m，1H，CH2F)，4.29-4.17(m，2H，H-2′and H-3′)，4.06-3.97(m，1H，NHCH)，3.97(br.s，1H，H-4′)，3.70-3.31(m，2H，H-5′)，1.22-1.18(m，3H，CH(CH3)).元素分析C15H18N3O4Cl2F·0.4H2O計算值C，44.88；H，4.72；N，10.47。測定值C，44.98；H，4.76，N，10.46。實施例385，6-二氯-2-((2-氟-1-甲基乙基氨基)-1-(2，3，5-三-O-乙?；?-β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑使氟代丙酮(5g)和5，6-二氯-2-氨基-1-(2，3，5-三-O-乙?；?(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(0.38g，0.82mmol)與對甲苯磺酸(0.050g，0.26mmol)混合并在裝有迪安-斯達克榻分水器的燒瓶中回流攪拌。4小時后加入氰基硼氫化鈉(0.16g，2.4mmol)并繼續(xù)回流6小時。該溶液用乙酸乙酯(200ml)稀釋并用飽和NaCl(2×50ml)和水(50ml)洗滌。將有機相干燥(Na2SO4)傾析和濃縮。粗產(chǎn)物在硅膠柱(230-400目，2.5×18cm)上純化，用1∶25甲醇∶CH2Cl2洗脫，得到0.19g粗產(chǎn)物。該物質(zhì)在chromatotron(2mm轉(zhuǎn)動體)上進一步純化，用1∶1乙酸乙酯∶己烷洗脫，得到淡黃色固體(0.10g，0.20mmol，24％)；MS(API+；m/z(相對強度)520(62.63，M+)；1HNMR(DMSO-d6)d7.66(s，1H，Ar-H)，7.51(s，1H，Ar-H)，7.30(d，1H，NH，J＝7.6Hz)，6.25(d，1H，H-1′，J＝7.5Hz)，5.31-5.23(m，1H，H-2′)，5.48-5.44(m，1H，H-3′)，4.634.26(m，6H，CH2F，CH，H-4′and 5′)，2.21(s，3H，OAc)，2.19(s，3H，OAc)，2.02(s，3H，OAc)，1.24(d，3H，CH(CH3)，J＝7.5Hz).元素分析C21H24N3O7Cl2F計算值C，48.47；H，4.65；N，8.08。測定值C，48.60；H，4.73，N，7.94。實施例395，6-二氯-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑使5，6-二氯-1，2-苯二胺(0.61g，3.4mmol)和異丙基異硫氰酸酯(0.39g，3.8mmol)在無水吡啶(10ml)中混合，加熱至80℃并保持15分鐘。然后加入二環(huán)己基碳化二亞胺(1.06g，5.14mmol)并將產(chǎn)生的混合物在100℃攪拌5小時。加入甲苯(30ml)并將混合物通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。留下棕色的殘留物。該產(chǎn)物通過硅膠層析進一步純化，用6.5∶3∶0.5乙酸乙酯/己烷/三乙胺洗脫，得到粘性的固體，該固體用乙腈重結(jié)晶，得到0.46g(60％)褐色固體；m.p.218-220℃。元素分析C10H11Cl2N3計算值C，49.20；H，4.54；N，17.21。測定值C，49.31；H，4.54，N，17.33。通法I用1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對-甲苯磺酸鹽作為脫硫劑合成2-(烷基氨基)-1H-苯并咪唑使合適的1，2-苯二胺與合適的異硫氰酸鹽(1.0-1.25mmol/mmol二胺)和無水吡啶(3-5mL/mmol二胺)混合。得到的混合物加熱至80℃并保持30分鐘，然后一次加入固體1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對-甲苯磺酸鹽(1.1-1.35mmol/mmol二胺)。得到的混合物在80-90℃攪拌3-20小時，之后讓其冷卻至室溫。該步驟的其余部分與上述相同，只是產(chǎn)物通過硅膠層析或用乙腈或用1，4-二噁烷重結(jié)晶純化。5，6-二氯-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑按通法I，應用5，6-二氯-1，2-苯二胺(200.0g，1.13mol)，異丙基異硫氰酸酯(122.0g，1，21mol)，1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對甲苯磺酸鹽(622.0g，1.47mol)和吡啶(4L)。產(chǎn)物用乙腈重結(jié)晶，得到184g(67％)棕色固體。分析數(shù)據(jù)與上面報告的一致。2-(環(huán)丙基氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑按通法I，應用4，5-二氯-1，2-苯二胺(6.04g，34.1mmol)、環(huán)丙基異硫氰酸酯(3.69g，37.2mmol)，1-環(huán)己基-3-(2-嗎啉代乙基)碳化二亞胺N-甲-對-甲苯磺酸鹽(20.1g，47.4mmol)和吡啶(135ml)。產(chǎn)物用乙腈重結(jié)晶，得到5.82g(70％)黃色固體；m.p.223-225℃。元素分析C10H9Cl2N3計算值C，49.61；H，3.75；N，17.36。測定值C，49.53；H，3.78，N，17.12。通法II2-(烷基氨基)-1H-苯并咪唑與1，2，3，5-三-O-乙?；?L-呋喃核糖的偶合使合適的2-(烷基氨基)-1H-苯并咪唑與1，2-二氯乙烷(2-3mL/mmol苯并咪唑)和N，O-雙(三甲基甲硅烷基)，乙酰胺(1-1.25mmol/mmol苯并咪唑)混合，將得到的混合物加熱至80℃并保持30分鐘。加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(0.5-0.7mmol/mmol苯并咪唑)并將混合物在80℃再攪拌15分鐘，隨后一次加入固體1，2，3，5-四-O-乙酰基-L-呋喃核糖(1-1.25mmol/mmol苯并咪唑)。得到的混合物在80℃攪拌2-20小時，之后將其冷卻至室溫。然后用5％碳酸氫鈉水溶液(10mL/mmol苯并咪唑)和二氯甲烷(3-5ml/mmol苯并咪唑)稀釋并將兩相混合物在室溫攪拌30分鐘。收集有機層并將水層再用另外一份二氯甲烷(3-5ml/mmol苯并咪唑)反提取，合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減壓下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器去除溶劑。該產(chǎn)物通過硅膠層析進一步純化。5，6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑按通法II，應用5，6-二氯-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑(25.0g，102mmol)，N，O-雙(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(25.9mL，21.3g，105mmol，103相當量)，1，2-二氯乙烷(300ml)。三乙基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(12.8mL，14.7g66.2mmol，0.65相當量)和1，2，3，5-三-O-乙?；?L-呋喃核糖(34.1g，107mmol，1.05相當量)經(jīng)硅膠層析用35∶1二氯甲烷/甲醇洗脫，得到39.6g(77％)黃色泡沫狀物。MS(CI)m/z 501(M+1)。通法III2-(烷基氨基)-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑的脫保護將適當?shù)?-(烷基氨基)-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑溶于乙醇(4-5mL/mmol三乙酸酯)中。在另外的燒瓶中放入碳酸鈉(1.0-1.3mmol/mmol三乙酸酯)、水(1-2mL/mmol三乙酸酯)和甲醇(3ml/mmol三乙酸酯)。在室溫下一次性地將碳酸鈉懸液加到三乙-醋酸酯的乙醇溶液中。所得到的溶液在室溫攪拌18小時?；旌衔镌儆靡宜嵋阴?25mL/mmol三乙酸酯)稀釋。收集有機層并用飽和鹽水(100mL/mmol三乙酸酯)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑。產(chǎn)物通過硅膠層析進一步純化。5，6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑按通法III，應用5，6-二氯-2-(異丙基氨基)-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑(7.50g，14.93mmol)、碳酸鈉(1.72g，16.23mmol)、水(29mL)，甲醇(100mL)和乙醇(100mL)。產(chǎn)物通過硅膠層析純化，用55∶45二氯甲烷/甲醇洗脫，得到4.72g(84％)白色泡沫狀物。分析數(shù)據(jù)與指定的結(jié)構(gòu)一致。實施例40人巨細胞病毒(HCMV)測定法HCMV株系A(chǔ)D169在96孔培養(yǎng)板中的單層人胚胎肺細胞(MRC5細胞)上生長。以約每細胞0.01個感染性病毒顆粒的比率感染細胞后，以6個不同濃度，每個3孔，將被測試化合物加至選擇的孔中。相同濃度的化合物也加至含單層未感染細胞的孔以分析化合物毒性。將培養(yǎng)板溫育5天。通過顯微鏡檢查估測最低毒性劑量。抗病毒作用的IC50通過使用印跡和定量特異性DNA雜交測定每孔中的HCMV DNA進行估測，類似于Gadler的方法。(Antimicrob.Agents Chemother.1983，24，370-374)。實施例 HCMVMRC5toxIC50CC50實施例3 0.06-0.23μM30μM實施例4 0.91-2.5μM 100μM實施例5 0.03-0.05μM100μM實施例10 1.1-1.3μM 100μM實施例8 41μM 100μM實施例12 3.5-5.8μM 100μM實施例34 0.75-0.85μM100μM實施例41片劑將各成分和聚乙烯吡咯烷酮溶液通過濕法制成顆粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓片，將下列配方A和B制成片劑。配方Amg/片mg/片(a)活性成分 250 250(b)乳糖B.P. 210 26(c)聚乙烯吡咯烷酮 15 9(d)淀粉羥基乙酸鈉 2012(e)硬脂酸鎂5 3500 300配方Bmg/片 mg/片(a)活性成分250 250(b)乳糖150-(c)Avicel pH1016026(d)聚乙烯吡咯烷酮B.P. 159(e)淀粉羥基乙酸鈉 2012(f)硬脂酸鎂53500 300配方Cmg/片活性成分 100乳糖 200淀粉 50聚乙烯吡咯烷酮 5硬脂酸鎂 4359通過混合后的各成分直接壓片，將下列配方D和E制成片劑。用于配方E中的乳糖是直接壓制型(Dairy Crest-“Zeparox”)。配方Dmg/片活性成分 250預膠凝化淀粉NF15 150400配方Emg/片活性成分 250乳糖 150Avicel 100500配方F(控釋制劑)成分(如下)的聚乙烯吡咯烷酮溶液按濕法制成顆粒，隨后加入硬脂酸鎂并壓片將下列配方制成片劑。
mg/片(a)活性成分 500(b)羥丙基甲基纖維素 112(Methocel K4M Premium)(c)乳糖B.P. 53(d)聚乙烯吡咯烷酮B.P.C. 28(e)硬脂酸鎂 7700實施例42膠囊劑配方A通過將上面實施例1配方D中的成分混合，并裝入兩節(jié)的硬明膠膠囊而制成。配方B(下文)以類似方法制備。配方Bmg/片(a)活性成分 250(b)乳糖B.P. 143(c)淀粉羥基乙酸鈉25(d)硬脂酸鎂 2420配方Cmg/片(a)活性成分 250(b)Macrogol 4000 BP 350600通過融熔macrogol 4000 BP，活性成分分散在融熔物中，并將融熔物裝入兩節(jié)的硬明膠膠囊而制成膠囊劑。配萬Dmg/片活性成分 250卵磷脂100花生油100450通過活性成分分散在卵磷脂和花生油中，并將分散體裝入軟的彈性明膠膠囊中而制成膠囊劑。配方E(控釋膠囊)用擠壓機擠壓成分a，b或c，然后使擠壓物成球形和干燥而制成下列控釋膠囊劑。干燥的小丸隨后用控釋膜(d)包衣并裝入兩節(jié)硬明膠膠囊。
mg/片(a)活性成分 250(b)微晶纖維素 125(c)乳糖BP 125(d)乙基纖維素 13513實施例43注射劑配方A活性成分 0.200g鹽酸溶液，0.1M 適量至pH4.0～7.0氫氧化鈉溶液，0.1M 適量至pH4.0～7.0無菌水 適量至10ml活性成分溶于大部分水(35-40℃)中并且按需要用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至4.0和7.0間。用水加至一定體積，通過滅菌微孔濾器濾入滅菌的10mL琥珀色玻璃小瓶(類型1)并無菌密封和外蓋封閉。配方B活性成分 0.125g滅菌，無熱原，pH7磷酸鹽緩沖液 適量至25mL實施例44肌肉內(nèi)注射劑活性成分 0.20g苯甲醇 0.10gGlycofurol 1.45g注射用水 適量至3.00ml將活性成分溶于glycofurol。然后加入苯甲醇并溶解，加水至3ml。該混合物隨后通過滅菌微孔濾器過濾并密封入滅菌的3ml琥珀色玻璃小瓶(類型1)中。實施例45糖漿劑活性成分 0.2500g山梨醇溶液 1.5000g甘油 2.0000g苯甲酸鈉 0.0050g芳香劑，桃17.42.3169 0.0125ml純化水適量至5.0000ml將活性成分溶于甘油和大部分純化水的混合物中。然后將苯甲酸鈉的水溶液加至該溶液中，隨后加入山梨醇溶液并最后加入芳香劑。用純化水補足溶液體積并混合均勻。實施例46栓劑mg/栓劑活性成分(631m)*250硬脂肪，BP(Witepsol H15-Dynamit Nobel)17702020*該活性成分作為粉末使用，其中至少90％的顆粒直徑為631m或更小。
將1/5Witepsol H15于最高45℃的有蒸氣套的鍋中融熔?；钚猿煞纸?jīng)1001m篩過篩，并使用裝有切割頭的silvrson在攪拌混合下加至融化的基質(zhì)中，直至獲得均勻的分布?；旌衔锉３钟?5℃，將剩下的WitepsolH15加至混懸液中并攪拌以保證均勻混合。使整個混懸液通過2501m不銹鋼濾網(wǎng)，同時在連續(xù)攪拌下冷卻至40℃。在38～40℃，將2.02g混合物裝入合適的2ml塑料模子中。使栓劑在室溫下冷卻。實施例47陰道栓劑mg/陰道栓活性成分(631m) 250無水葡萄糖 380馬鈴薯淀粉 363硬脂酸鎂 71000將上述成分直接混合，并將得到的混合物直接壓制制備陰道栓劑。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物及其藥學上可接受的衍生物，
其中R代表氫，鹵素原子，-NR1R2，這里R1和R2可相同或不同，各自獨立地選自氫，C1-6烷基，氰基C1-6烷基，羥基C1-6烷基，鹵素C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基，C1-6烷基C3-7環(huán)烷基，C2-6鏈烯基，C3-7環(huán)烷基C1-6烷基，C2-6炔基，芳基，芳基C1-6烷基，雜環(huán)C1-6烷基，-COC1-6烷基或R1R2與它們所連接的N原子一起形成三，四，五或六元的雜環(huán)。
2.按照權(quán)利要求1的化合物，為β-端基異構(gòu)體的形式。
3.按照權(quán)利要求1的化合物，為α-端基異構(gòu)體的形式。
4.按照權(quán)利要求1所述式(Ib)化合物及其藥學上可接受的衍生物，
其中R代表鹵素原子或-NR1R2，這里R1代表氫，而R2選自C1-6烷基，C1-6羥基烷基，C3-7環(huán)烷基，C1-6烷基C3-7環(huán)烷基，C2-6鏈烯基，C2-6炔基，芳基，芳基烷基；或R1和R2可相同或不同，可均為C1-6烷基，或R1R2與它們所連的N原子一起形成三，四，五或六元的環(huán)。
5.按照權(quán)利要求1至4任意一項的化合物及其藥學上可接受的衍生物，其中R代表-NR1R2，這里R1代表氫，R2選自C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基和鹵素C1-6烷基。
6.按照權(quán)利要求1至5任意一項的化合物及其藥學上可接受的衍生物，其中R代表異丙氨基，異丁基氨基，仲-丁基氨基，環(huán)丙基氨基，環(huán)戊基氨基或2-氟-1-甲基乙基氨基。
7.按照權(quán)利要求1所述化合物及其藥學上可接受的衍生物，它們系選自5，6-二氯-2-異丙基氨基-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑，2-環(huán)丙基氨基-5，6-二氯-1-(β-L-呋喃核糖基)-1 H-苯并咪唑和5，6-二氯-2-((2-氟-1-甲基-乙基氨基)-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑的化合物。
8. 5，6-二氯-2-異丙基氨基-1-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑。
9.按照權(quán)利要求1至8中任何一項所述化合物的藥學上可接受的衍生物。
10.按照權(quán)利要求9所述為鹽形式的衍生物。
11.按照權(quán)利要求9所述為酯形式的衍生物。
12.按照權(quán)利要求10的衍生物，其中鹽系選自有機羧酸，有機磺酸和無機酸的鹽。
13.按照權(quán)利要求11的衍生物，其中酯系選自羧酸，磺酸，氨基酸，磷酸和單-、二-或三-磷酸酯。
14.一種藥物制劑，它包含如權(quán)利要求1-13任何一項定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的衍生物，以及所用的藥學上可接受的載體。
15.用于治療的按照權(quán)利要求1至13任意一項的化合物或按照權(quán)利要求14的制劑。
16.應用按照權(quán)利要求1至13任意一項的化合物制備用于治療或預防病毒感染的藥物。
17.按照權(quán)利要求16的應用，其中病毒感染為皰疹病毒感染。
18.按照權(quán)利要求17的應用，其中皰疹病毒感染是選自單純皰疹病毒1，單純皰疹病毒2，水痘帶狀皰疹病毒，巨細胞病毒，EB病毒，人類皰疹病毒6型和人類皰疹病毒7型的感染。
19.應用按照權(quán)利要求1至13的任意一項化合物制備的藥物，它可與至少一種治療或預防病毒感染的其它治療劑同時或順序用藥。
20.用于治療或防止被感染動物中病毒感染的癥狀或作用的方法，它包含用治療學有效劑量的按照權(quán)利要求1至13任意一項的化合物治療所述動物。
21.按照權(quán)利要求20的方法，其中病毒感染為皰疹病毒感染。
22.按照權(quán)利要求21的方法，其中皰疹病毒感染系選自單純皰疹病毒1型，單純皰疹病毒2型，水痘帶狀皰疹病毒，巨細胞病毒，EB病毒，人類皰疹病毒6型和人類皰疹病毒7型。
23.用于制備按照權(quán)利要求1至13任意一項定義的式(I)化合物的方法，該方法包含(A)用式(II)化合物與合適的鹵化劑反應；
當其中L為氫且R3，R4和R5各為羥基或被保護羥基基團，或當L為合適的離去原子或基團且R3，R4和R5如上所定義時，與式H-NR1R2(其中R1和R2如權(quán)利要求1中所定義)的胺反應；或(B)用式(III)化合物與式(IV)化合物反應，
其中R如權(quán)利要求1中所定義，
其中R3，R4和R5各為羥基或被保護的羥基基團，并且L1是α-或β-位合適的離去基團；并且隨后或與此同時還可以任何希望的或需要的次序再進行下列一步或多步反應，(i)脫去任何殘留的保護基；(ii)將式(I)化合物或其被保護的形式轉(zhuǎn)化為其他式(I)化合物或其被保護的形式；(iii)將式(I)化合物或其被保護的形式轉(zhuǎn)化為式(I)化合物的藥學上可接受的衍生物或其被保護的形式；(iv)將式(I)化合物的藥學上可接受的衍生物或其被保護的形式轉(zhuǎn)化為式(I)化合物或其被保護的形式；(v)將式(I)化合物的藥學上可接受的衍生物或其被保護形式轉(zhuǎn)化為式(I)化合物的另一種藥學上可接受的衍生物或其被保護形式；(vi)當需要時，將式(I)化合物或其被保護的衍生物，或式(I)化合物的藥學上可接受衍生物的α和β端基異構(gòu)體分開。
24.式(II)化合物，
其中L是氫或合適的離去原子或基團，且R3，R4和R5各為羥基或被保護的羥基基團。
25.按照權(quán)利要求24的化合物，其中L是氫或鹵素原子且R3，R4和R5各是羥基或被保護的羥基基團，優(yōu)選OC(O)CH3。
26. 2-溴-5，6-二氯-1-(2，3，5-三-O-乙?；?β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑。
27. 2-溴-5，6-二氯-(β-L-呋喃核糖基)-1H-苯并咪唑。
28.按照式(V)化合物，
其中X是-NR1R2，這里R1和R2如權(quán)利要求1中所定義，前提是R1和R2不都是氫或甲基。
29.按照權(quán)利要求28的化合物，它選自2-(環(huán)丙基氨基)-5，6-二氯-1H-苯并咪唑；5，6-二氯-2-(異丙基氨基)-1H-苯并咪唑；和5，6-二氯-(2-氟-1-甲基-乙基氨基)-1H-苯并咪唑。
全文摘要
本發(fā)明涉及苯并咪唑類衍生物和它們在醫(yī)學治療中的應用，特別是用于治療或預防如由皰疹病毒引起的病毒感染。本發(fā)明還涉及苯并咪唑類衍生物和含有它們的藥物制劑的制備。
文檔編號C07D235/30GK1159194SQ95194960
公開日1997年9月10日 申請日期1995年7月6日 優(yōu)先權(quán)日1994年7月7日
發(fā)明者S·D·張伯倫, G·W·科斯扎爾卡 申請人:惠爾康基金會集團公司