專利名稱：多肽衍生物及鈣代謝改善劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及鈣代謝改善劑。更具體地說，本發(fā)明涉及具有抑制骨鈣吸收(抑制鈣與骨分離)、降低血鈣濃度、止痛、抑制胃液分泌等活性的新型多肽衍生物、其酸加成鹽及其復(fù)合物。本發(fā)明還涉及鈣代謝改善劑，它含有至少一種新型多肽衍生物、其酸加成鹽或其復(fù)合物作為活性成分以及蛋白分解酶抑制劑和/或可作藥用的酸。
在化學(xué)領(lǐng)域已普遍知道降鈣素為具有降低血鈣濃度作用的多肽衍生物。它可從人和其它哺乳動(dòng)物的甲狀腺、鳥以及魚和兩棲動(dòng)物的鰓器官中提取得到。自然界中存在各種類型的降鈣素，根據(jù)其不同的種屬來源它們具有不同的組成氨基酸。通過各種自然途徑獲得的這些降鈣素均為多肽，且這些多肽由32個(gè)氨基酸組成，其相同化學(xué)結(jié)構(gòu)在于其第1個(gè)和第7個(gè)氨基酸均為L(zhǎng)-半胱氨酸，且所說的L-半胱氨酸中的巰基形成二硫鍵，其相同之處還在于每種多肽的末端羧基形成脯酰胺(Prolinamide)。
但是，在這些天然降鈣素中存在的二硫鍵據(jù)信在溶液中是非常不穩(wěn)定的。因此，當(dāng)將這些降鈣素作為藥劑用于治療由超常高濃度的血鈣所引起的各種癥狀如高鈣血、Peget氏病及骨質(zhì)疏松癥時(shí)，有可能會(huì)導(dǎo)致降鈣素的生理活性降低，且會(huì)出現(xiàn)由其副產(chǎn)物所引起的抗原性。
由于降鈣素為肽化合物，因此通常在消化道被分解，且由于它們是大分子量化合物，因此也難以從消化器官被吸收。由于這些原因，作為藥物制品的降鈣素只能以肌內(nèi)注射制劑及靜脈注射制劑等注射制劑的形式服用。但是，當(dāng)使用以上注射制劑時(shí)難以在醫(yī)院外進(jìn)行治療。因此，使用降鈣素進(jìn)行治療的病人必須在每次注射給藥時(shí)上醫(yī)院，從而限制了降鈣素為藥用制劑的用途。
近年來，已報(bào)道許多人工合成的降鈣素具有類似于以上所述的天然降鈣素的化學(xué)結(jié)構(gòu)。在這些合成降鈣素中，包括具有基于天然鮭降鈣素的氨基酸順序的多肽，其中上面所述的二硫鍵在這里已被通過純化氨基酸順序中的第一個(gè)半胱氨酸，用低級(jí)亞烷基所取代，同時(shí)用具有特定低級(jí)亞烷基的α-氨基酸取代氨基酸序列中的第七個(gè)半胱氨酸，再將上述α-氨基酸側(cè)鏈上的羧基與氨基酸序列中的第二個(gè)絲氨酸的氨基進(jìn)行閉環(huán)反應(yīng)以形成上述低級(jí)亞烷基鍵。〔見日本專利公開號(hào)51-128993(1976)(對(duì)應(yīng)于美國(guó)專利4，086，221)及日本專利公開號(hào)61-112099(1986)〕。但是，據(jù)報(bào)導(dǎo)，這些天然降鈣素中存在的上述二硫鏈?zhǔn)蔷S持其生理活性所必需的。因此，與相應(yīng)的天然類型降鈣素相比，上述不含二硫鍵的合成多肽的穩(wěn)定性可能得到一定程度的改善，但是，與相應(yīng)天然類型降鈣素所顯示的基本生理活性相比，以上合成多肽的生理活性可能受到一定程度的降低。
本發(fā)明的目的之一就是提供一種新型合成多肽，即新型降鈣素衍生物，它不具有上述二硫鍵，從而避免了其不穩(wěn)定性，而且它還改善了相應(yīng)天然降鈣素的基本生理活性，即降低血鈣濃度、止痛、抑制胃液分泌等。因此，這些合成降鈣素可用作治療高血鈣，止痛、抗?jié)兊鹊挠行巹?br> 本發(fā)明的另一個(gè)目的就是提供制備上述合成多肽的方法。
本發(fā)明的目的之三是提供一種藥用組合物，它含有至少一種由下述通式(1)和(2)所代表的合成多肽衍生物作為活性成分，它還含有蛋白分解抑制劑和/或可作藥用的酸。
本發(fā)明人經(jīng)過深入研究達(dá)到了本發(fā)明的以上目的。其結(jié)果是他們已成功地合成了具有通式(1)和(2)所表示的特定化學(xué)結(jié)構(gòu)式的新型多肽衍生物。而且他們還發(fā)現(xiàn)，這些新型多肽衍生物具有在上述目的中所提到的極好性質(zhì)，以滿足作為藥物的要求，因此，本發(fā)明已經(jīng)完成。
本發(fā)明涉及由通式(1)或通式(2)所代表的多肽衍生物，其酸加成鹽以及其復(fù)合物
其中(A)為低級(jí)亞烷基;(B)為-NHCO-基團(tuán)、-S-基軒、或羥亞苯基;(D)為低級(jí)亞烷基;(E)為纈氨酸殘基、甘氨酸殘基或異亮氨酸殘基;(F)為組氨酸殘基、天冬酰胺殘基、甘氨酸殘基、丙氨酸殘基、絲氨酸殘基、亮氨酸殘基或谷氨酰胺殘基、(G)為精氨酸殘基或谷氨酰胺殘基;l，m，n均為0或1;條件是當(dāng)l為0、(A)為亞甲基時(shí)(D)為亞甲基或亞乙基。
其中(A′)為低級(jí)亞烷基、(B′)為-NHCO-基團(tuán);(D′))為低級(jí)亞烷基;(G′)為組氨酸殘基、天冬氨酸殘基或甘氨酸殘基、(H′)為精氨酸殘基或谷氨酰胺殘基;p和q均為0或1。
在本說明書中，氨基酸、多肽、保護(hù)基團(tuán)及活性基團(tuán)等均按現(xiàn)有技術(shù)中常用的IUPAC(國(guó)際生物化學(xué)聯(lián)合會(huì))的規(guī)則以縮寫或代號(hào)的形式表示。對(duì)于旋光異構(gòu)體的敘述，除非另有特別說明，一般均指異構(gòu)體的L-構(gòu)型(左旋型)，這些縮寫或代號(hào)的例子如下Ala丙氨酸β-Alaβ-丙氨酸Arg精氨酸Asp天冬氨酸Asn天冬酰胺Cys半胱氨酸Gln谷氨酰胺Glu谷氨酸Gly甘氨酸His組氨酸Ile異亮氨酸Leu亮氨酸Lys賴氨酸Pro脯氨酸Thr蘇氨酸Ser絲氨酸Val纈氨酸Tyr酪氨酸
Bzl芐基But叔-丁基基團(tuán)Boc叔-丁氧羰基OBZL芐氧基OsuN-羥琥珀酰亞胺ONp對(duì)-硝基苯氧基Z芐氧羰基cl-Z鄰-氯芐氧羰基Tos對(duì)-甲苯磺?；鵒Et乙氧基DCCN，N′-二環(huán)己基碳二亞胺TFA三氟乙酸DMF二甲基甲酰胺WSCN-乙基-N′-二甲基氨丙基-碳二亞胺THF四氫呋喃HOBT1-羥苯并噻吩HOSuN-羥基琥珀酰亞胺HONBN-羥基-5-降冰片烯-2，3-二碳酰亞胺Acpε-氨基己酸Abuγ-氨基丁酸CpcS-(3-羧基丙基)半胱氨酸CecS-(2-羧乙基)半胱氨酸OcHex環(huán)己氧在cl-Bzl2，6-二氯芐基除此之外，在本說明書中，由通式(1)中的符號(hào)(A)、(B)、和(D)、所定義的基團(tuán)及通式(2)中的符號(hào)(A′)、(B′)和(D′)所定義的基團(tuán)的具體實(shí)例如下對(duì)于低級(jí)亞烷基，具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基如亞甲基、亞乙基、三亞甲基、1-甲基亞乙基、四亞甲基、2-三亞乙基、亞戊基和亞己基等可以作為其實(shí)例。
羥亞苯基是指鄰羥亞苯基，間羥亞苯基和對(duì)羥亞苯基。
由上述通式(1)中
式所代表的優(yōu)選實(shí)例及由上述通式(2)中
式所代表的優(yōu)選實(shí)例可以下列各式的基團(tuán)作為舉例
根據(jù)本發(fā)明，由上述通式(1)所代表的多肽衍生物、其酸加成鹽及其復(fù)合物具有比基于每一通式的特定化學(xué)結(jié)構(gòu)的天然降鈣素更優(yōu)異的降低血鈣濃度活性、止痛活性、抑制胃酸分泌活性及其它藥理活性。除此之外，即使在以溶液狀態(tài)保存的情況下這些多肽衍生物的穩(wěn)定性仍被明顯改善，上述各種藥理活性沒有降低。另外，本發(fā)明的多肽衍生物具有良好的長(zhǎng)效性質(zhì)及吸收性，而且，它們具有抗原性、增加血糖活性、減少體重作用、腸運(yùn)動(dòng)抑制作用以及降低攝食作用等副作用小的性質(zhì)。因此，本發(fā)明的多肽衍生物可用作治療由超常高血鈣水平所引起的各種癥狀如骨eget氏病、骨質(zhì)疏松癥的有效藥劑，止痛劑以及抗?jié)儎?。由于這些性質(zhì)，本發(fā)明的多肽衍生物、其酸加成鹽以及其復(fù)合物是用作上述藥物的非常合適的化合物。
下面接著詳細(xì)介紹由通式(1)和(2)所代表的多肽衍生物的制備方法。
根據(jù)本發(fā)明，由上述通式(1)和(2)代表的多肽衍生物可基本上按照常規(guī)的多肽合成法(如所謂的“分段法”)制備，因此，按照上述氨基酸序列中的化學(xué)結(jié)構(gòu)，將氨基酸與末端氨基酸逐步縮合從而延長(zhǎng)序列中的酰胺鍵(肽鍵)，或通過首先將上述多肽的化學(xué)結(jié)構(gòu)分為幾個(gè)片段，然后合成這些片段，再縮合這些片段就可制備多肽。為此，首先制備與上述化學(xué)結(jié)構(gòu)相對(duì)應(yīng)的多肽鏈，然后將多肽制備過程中形成的特定N-末端氨基酸中的游離官能團(tuán)與第七個(gè)氨基酸或相關(guān)化合物的側(cè)鏈官能團(tuán)結(jié)合，以便通過閉環(huán)制備所需多肽衍生物。
第七氨基酸的相關(guān)化合物中有些為新型化合物，這些新型化合物為按照下述方法從作為起始物質(zhì)的合適被保護(hù)氨基酸或其相應(yīng)的鹵代化合物制備。因此，在堿性化合物存在的情況下將Z-Tyr-OCH3中的羥基或Hcl-H-Cys-OCH3中的巰基在合適溶劑中與其羧基已被保護(hù)的鹵代低級(jí)烷基羧酸反應(yīng)。可用于這一反應(yīng)的堿性化合物包括三乙基胺;金屬氫化物，如氫化鈉、氫化鉀、氫化鋰等;無機(jī)堿性化合物，如碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀等?？墒褂玫娜軇┌u代烴，如二氯甲烷、四氯化碳、氯仿、四氯乙烷等;醚，如二惡烷、THF(四氫呋喃)、二甲氧乙烷等;酮，如丙酮、甲基乙基酮等;乙腈，乙酸乙酯，DMF(二甲基甲酰胺)，二甲基乙酰胺，二甲基亞砜等。所有這些溶劑最好以無水狀態(tài)的形式使用，與上述氨基酸反應(yīng)的鹵代低級(jí)烷基羧酸中的羧基保護(hù)基可以是能夠形成普通酯的任何基團(tuán)。從這些基團(tuán)形成的酯的典型例子有烷基酯(甲基、乙基、丙基、丁基、叔-丁基等)或芐基酯，對(duì)上述反應(yīng)中起始物質(zhì)的數(shù)量比沒有任何特定限制，通常是等摩爾量至5倍摩爾量、優(yōu)選等摩爾量至1.5倍摩爾量的上述羧酸可用于氨基酸。上述反應(yīng)一般在約0-100℃、優(yōu)選室溫-60℃的溫度下進(jìn)行。反應(yīng)一般在30分鐘至120小時(shí)內(nèi)完成。
對(duì)于上面所述的用于合成多肽的方法，在以下文獻(xiàn)中已有具體敘述ThePeptides”〔Vol.(1979)，pp66-100，Chapter2，byJohanH.Jones，TheFormationofPeptideBonds(EditedbyErhardGrossandJohannesMeienhofer，publishedfromAcademicPress，Inc，NewYork，N.Y.，U.S.A.〕;“PEPTIDE-GOHSEI-NO-KISO-TO-JIKKEN〔FundamentalsandExperimentsintheSynthesisofPeptides)，byIrumiya，etal，publishedfromMaruzenPublishingCo.Ltd.，Tokyo，Japan〕。例如，可以用于舉例的例子有疊氮化物法，?；确ǎ狒?，混合酸酐法，DCC(N，N′-二環(huán)己基羰二亞胺)法，活化酯法(如對(duì)-硝基苯基酯法，N-羥琥珀酰亞胺法，氰甲基酯法等)，Woodward-K試劑法，羧基二咪唑法，氧化-還原法和DCC/加成物(如HONB、HOBT和HOSU)法。在實(shí)施上述方法時(shí)，可使用固相合成法或液相合成法。當(dāng)使用固相合成法時(shí)，首先是將C-末端氨基酸(其末端氨基被保護(hù)的氨基酸)通過其羧基與一種不溶性載體偶聯(lián)。對(duì)不溶性載體沒有任何特別限制，它可以選自對(duì)反應(yīng)性羧基具有偶聯(lián)能力的任何物質(zhì)，如鹵代甲基樹脂、苯酚樹脂、叔-烷氧羰基酰肼樹脂、二苯甲基胺樹脂。接著，在除去氨基保護(hù)基之后，按照上述通式(1)和(2)所代表的氨基酸序列，將每一種氨基被保護(hù)的氨基酸通過反應(yīng)性羧基與反應(yīng)性氨基的縮合反應(yīng)(肽鍵形成反應(yīng)和酰胺鍵形成反應(yīng)，以下均簡(jiǎn)稱為“縮合反應(yīng)”)依次與另一種氨基被保護(hù)的氨基酸偶聯(lián)，從而通過逐步法進(jìn)行多肽的合成，將鏈長(zhǎng)延長(zhǎng)至在整個(gè)氨基酸序列的第32至第8位置之內(nèi)的適當(dāng)長(zhǎng)度、然后將如此得到的多肽與對(duì)應(yīng)于本發(fā)明多肽的剩余部分的另一個(gè)多肽偶聯(lián)，這另一個(gè)多肽是通過液相合成法等方法單獨(dú)合成的。再通過除去不溶性載體就得到了由通式(1)或(2)所代表的多肽。按照本發(fā)明，所需的多肽成環(huán)反應(yīng)是通過類似于上述縮合反應(yīng)的酰胺形成反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)的。
在實(shí)施上述各種方法時(shí)，對(duì)于某些具有側(cè)鏈官能團(tuán)的氨基酸，如Arg、Tyr、Glu、Thr、Asp、Lys、His和Ser等，最好是使用常規(guī)的保護(hù)基團(tuán)通過保護(hù)其側(cè)鏈官能團(tuán)而將這些氨基酸保護(hù)起來，然后在上述反應(yīng)完成之后除去所說保護(hù)基。與上述反應(yīng)相關(guān)的官能團(tuán)通常被活化。以上反應(yīng)均是現(xiàn)有技術(shù)中已知的，其中所用的試劑可從已知試劑中適當(dāng)選用。
例如，氨基保護(hù)基有芐氧羰基、叔-丁氧羰基、叔-戊氧羰基、異冰片氧基羰基、對(duì)-甲氧基芐氧羰基、2-氯芐氧羰基、硬石基羰基、三氟乙酰基、鄰苯二?；⒓柞；⑧?硝基苯基亞磺?；⒍交蜢⒒?-芴基甲氧羰基等。
對(duì)于羧基保護(hù)基，任何能夠形成烷基酯(鏈烷酯或環(huán)烷基酯，如甲基、乙基、丙基、丁基、叔-丁基和環(huán)己基酯)、Bzl酯、對(duì)-硝基芐基酯、對(duì)-甲氧基芐基酯、對(duì)-氯芐基酯、二苯甲基酯、芐氧羰基酰、叔-丁氧羰基酰肼及三苯甲基酰肼等的基團(tuán)均可使用。
Arg的胍基保護(hù)基的例子有對(duì)-甲苯磺?；?、硝基、芐氧羰基及戊氧羰基等。
Ser和Thr的羥基可通過酯化法或醚化法加以保護(hù)，但這種保護(hù)并不是必需的。適于酯化羥基的基團(tuán)有低級(jí)鏈烷?；?如乙酰基)、芳?；?如苯甲?；?以及得自羧酸的基團(tuán)(如芐氧羰基、乙氧羰基)等。適于醚化羥基的基團(tuán)有芐基、四氫吡喃、叔-丁基等。
Tyr的羥基保護(hù)基有芐基、2，6-二氯芐基、芐氧羰基、乙?；皩?duì)-甲苯磺酰基等。
Lys的側(cè)鏈氨基保護(hù)基有芐氧羰基、2-氯芐氧羰基、2，6-二氯芐氧羰基、Boc及對(duì)-甲苯磺?；?。
His的亞氨保護(hù)基有對(duì)-甲苯磺酰基及Bzl基團(tuán)等。
Asp和Glu的羧基可通過與芐醇、甲醇、乙醇、叔-丁醇、環(huán)己醇等醇類酯化而被保護(hù)。
活化羧基的例子有相應(yīng)的?；?、酸酐或混合酸酐、疊氮化物、活化酯(戊氯苯酚、對(duì)-硝基苯酚、N-羥琥珀酰亞胺、1-羥苯并三唑及N-羥基-5-降冰片烯-2，3-碳二亞胺的酯)等。
在上述方法，反應(yīng)性氨基與反應(yīng)性羧基的縮合反應(yīng)可在堿性化合物存在的條件下于合適溶劑中進(jìn)行，可以使用的合適堿性化合物有有機(jī)堿性化合物(如三乙基胺、三甲基胺、N，N-二異丙基乙基胺、吡啶、二甲基苯胺、N-甲基嗎啉、1，5-二氮雜二環(huán)(4，3，0)-5-乇烯(DBN)、1，5-二氮雜二環(huán)(5，4，0)-5-十一碳烯(DBU)、1，4-二氮雜二環(huán)-(2，2，2)辛烷(DABCO)等);無機(jī)堿性化合物(如碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鈉等)。已知適用于這類縮合反應(yīng)的任何溶劑，如無水或含水DMF、二甲基亞砜(DMSO)、吡啶、氯仿、二噁烷、二氯甲烷、THF、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮、六甲磷酰胺(HMPA)及其混合溶劑等均可使用。對(duì)于這一反應(yīng)中起始物質(zhì)的數(shù)量比沒有任何特定限制，一般是等摩爾量至5倍摩爾量的一種物質(zhì)對(duì)另一種起始物質(zhì)，優(yōu)選的是等摩爾量至1.5倍摩爾量的一種物質(zhì)對(duì)另一種起始物質(zhì)。反應(yīng)溫度可在該類縮合反應(yīng)通常所使用的溫度范圍之內(nèi)，一般選擇從約-40℃至60℃之內(nèi)的合適溫度，優(yōu)選-20℃-40℃。反應(yīng)通常進(jìn)行幾分鐘至120小時(shí)。
在上述縮合反應(yīng)中，混合酸酐法是在堿性化合物存在的情況下于合適的溶劑中進(jìn)行，其中使用了烷基鹵代羧酸，如氯甲酸甲酯、溴甲酸甲酯、氯甲酸乙酯、溴甲酸乙酯、氯甲酸異丁酯等?？梢允褂玫膲A性化合物有有機(jī)堿性化合物(如三乙胺、三甲胺、N，N′-二異丙基乙胺、吡啶、二甲基苯胺、N-甲基嗎啉、DBN、DBU和DABCO等);無機(jī)堿性化合物(如碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀及碳酸氫鈉)等。任何適用于混合酸酐法的溶劑均可以用作溶劑，例如鹵代烴(如二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷)、芳烴(如苯、甲苯、二甲苯等)、醚(如二乙醚、THF、二甲氧乙烷)、酯(如乙酸甲酯、乙酸乙酯)以及非質(zhì)子傳遞極性溶劑(如DMF、HMPA、DMSO等)。反應(yīng)通常在-20-100℃、優(yōu)選約-20-50℃進(jìn)行，且反應(yīng)通常在幾分鐘-約10小時(shí)、優(yōu)選約幾分鐘-2小時(shí)內(nèi)完成。
上述疊氮化物法的詳細(xì)過程如下首先用甲醇、乙醇、芐醇等醇類活化氨基酸的羧基，然后在合適的溶劑中將所獲得的活化羧基與水合肼反應(yīng)，得到所需疊氮化合物，溶劑可使用二惡烷、DMFDMSO、HMPA、醇或其混合溶劑。水合肼的摩爾用量通常為活化羧基的5-20倍，優(yōu)選5-10倍。該反應(yīng)通常在低于50℃、優(yōu)選-20-30℃的溫度下進(jìn)行，以得到羧基部分被肼取代的化合物(肼衍生物)。進(jìn)而在酸存在的情況下于合適溶劑中將上述肼衍生物與亞硝酸化合物反應(yīng)而制備出羧基部分被疊氮取代的化合物。該反應(yīng)中通常所使用的酸為鹽酸，可使用的亞硝酸化合物有亞硝酸鈉、歪硝酸異戊酯、亞硝酰氯等。該亞硝酸化合物的用量通常為肼化合物的等摩爾量至2倍摩爾量，優(yōu)選等摩爾量至1.5倍摩爾量。該反應(yīng)通常在約-20-0℃、優(yōu)選-20--10℃進(jìn)行，反應(yīng)時(shí)間約幾分鐘至30分鐘。
上述各種縮合反應(yīng)可在合適縮合劑存在的情況下進(jìn)行，縮合劑的例子有碳化二亞胺試劑(如DCC，WSC，Hcl等);N，N′-羰基二咪唑，焦磷酸四乙酯等。該縮合劑的摩爾用量為起始物質(zhì)的1-4倍。使用縮合劑的上述反應(yīng)是在合適的溶劑中進(jìn)行。溶劑的例子有鹵代烴(如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、四氯乙烷等);醚(如二惡烷、THF、二甲氧乙烷);酮(如丙酮、甲基乙基酮);乙腈、乙酸乙酯、DMF、二甲基乙酰胺及DMSO等，且優(yōu)選的是其無水溶劑，反應(yīng)溫度一般約為-10-60℃，優(yōu)選0℃-室溫。反應(yīng)時(shí)間為約幾十分鐘至120小時(shí)。
在上述各個(gè)反應(yīng)步驟及最終反應(yīng)步驟中，當(dāng)必須除去保護(hù)基時(shí)，除去反應(yīng)可按類似于除去保護(hù)基的通常反應(yīng)中所使用的方法進(jìn)行。除去保護(hù)基的方法有使用鈀-炭、鈀黑等催化劑的氫化法;在液氨中使用金屬鈉作為還原劑的還原法在堿性條件下使用哌啶的除去反應(yīng);使用三氟乙酸、鹽酸、氟化氫、甲磺酸、氫溴酸等強(qiáng)酸的酸水解法。
使用上述催化劑進(jìn)行氫化反應(yīng)時(shí)，該反應(yīng)可在1個(gè)大氣氫氣壓及0-40℃的條件下進(jìn)行，催化劑的用量一般在約100mg-1g的范圍內(nèi)，反應(yīng)時(shí)間為約1小時(shí)至數(shù)天。上述酸水解反應(yīng)可在溶劑存在的情況下于-40-60℃、優(yōu)選約-20-20℃進(jìn)行約幾分鐘至幾小時(shí)。其中酸的用量一般要比起始物質(zhì)大大過量。在酸水解過程中，當(dāng)只除去氨基保護(hù)基時(shí)最好使用三氟乙酸或鹽酸作為酸。當(dāng)使用金屬鈉在氨水中進(jìn)行還原反應(yīng)時(shí)，所使用的金屬鈉的量應(yīng)使反應(yīng)混合物在30秒-10分鐘內(nèi)永久保持藍(lán)色，且反應(yīng)溫度一般為約-40～-70℃。
在本發(fā)明中，通過上述縮合反應(yīng)及隨后的獲得多肽的上述制備步驟就可制備出鏈結(jié)構(gòu)的多肽衍生物，在這一過程中重要的是使用類似于縮合反應(yīng)的特定環(huán)化反應(yīng)步驟，從而使在制備上述多肽過程中形成的N-末端氨基酸的游離官能團(tuán)與第7個(gè)氨基酸或其相關(guān)化合物的側(cè)鏈官能團(tuán)發(fā)生閉環(huán)反應(yīng)。
下面的實(shí)施例1演示了制備本發(fā)明多肽衍生物的優(yōu)選實(shí)施。在該實(shí)例中，首先制備被保持的多肽〔Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser-(Bzl)-Thr(Bzl)-NH-CH-COOBzl〕(它對(duì)應(yīng)于從N-末端CH2-CH2COOH計(jì)數(shù)的第1-第7氨基酸序列)，然后通過在無水吡啶中加入TFA-ONp而將該產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成活性酯，再通過用TFA除去BOC基團(tuán)，將所得到的被保護(hù)多肽(THA.H-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-NH-CH-COOBzl)溶于DMF，所得溶液CH2-CH2COONp
滴加至50℃的大量的無水吡啶中。將其在劇烈攪拌條件下放置幾小時(shí)，混合物經(jīng)再次攪拌幾小時(shí)后得到所需環(huán)化被保護(hù)多肽，接著通過片段縮合將氨基酸序列第8至第10位置的肽縮合，得到被保護(hù)的十肽。
另一方面，通過逐步法或片段縮合法合成氨基酸序列中第11-32氨基酸的被保護(hù)多肽。然后將這一多肽與前面制備的被保護(hù)十肽偶聯(lián)，最后除去保護(hù)基團(tuán)。
按如上所述各種方法得到的多肽可按照分離多肽時(shí)所常用的方法如溶劑萃取法、分配法及柱層析法等進(jìn)行分離和純化，從而得到由本發(fā)明的通式(1)和(2)所代表的所需多肽衍生物。
如此獲得的本發(fā)明多肽通常以游離堿或其鹽的形式存在，且具有與相應(yīng)的原始天然多肽相類似的生物活性。因此，它們可用作各種藥用制品?？砂凑粘Ｒ?guī)方法將它們轉(zhuǎn)化成可作藥用的酸加成鹽或其復(fù)合物。用于制備上述酸加成鹽的酸的例子有無機(jī)酸(如鹽酸、氫溴酸、磷酸);有機(jī)酸(甲酸、乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、琥珀酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、水楊酸、低級(jí)烷基磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸)。通過加入某些類型的使多肽具有長(zhǎng)效性質(zhì)的無機(jī)式有機(jī)物質(zhì)可以制備出上述復(fù)合物。用于形成這些復(fù)合物的無機(jī)物包括得自鈣、鎂、鈷、鋅等金屬的無機(jī)化合物，尤其是這些金屬的磷酸鹽、焦磷酸鹽，多磷酸鹽(這些鹽具有輕微的可溶性)、以及其氫氧化物;其它無機(jī)化合物還有堿金屬的多磷酸鹽。所說有機(jī)物質(zhì)的例子有非抗原性白明膠，CMC(羧甲基纖維素)，藻酸的磷酸酯或磺酸酯，葡聚糖，肌醇六磷酸，多聚谷氨酸，魚精蛋白等。
本發(fā)明鈣代謝改善劑很重要的一點(diǎn)就是將通式(1)和(2)所代表的多肽衍生物、其酸加成鹽和其復(fù)合物中至少一種物質(zhì)與蛋白分解酶抑制劑和/或可作藥用的酸結(jié)合使用。蛋白分解酶抑制劑的例子有胰蛋白酶抑制劑〔見LifeSeience，Vol.31，pp2837，(1982);BiochemicalPharmacoloqy，Vol.36，PP1035;(1987);IGAKU-NO-AYUMI(ProgressoftheMedicine)，Vol.138，P.59，(1986)〕。胰凝乳朊酶抑制劑〔JapanesePatentKokai(Laid-open)No.58-225080(1983);TheJournalofBiochemistry，Vol.95，pp319，(1984);Biochemistry;Vol2，pp252(1963);JournaloftheAmericanChemicalSocietyVol.93，pp.2351，(1971);JournalofPharmacyandPharmacology，Vol.32，pp182，(1980);以及TheJournalofAntibiotics，Vol.23pp425(1970)。上述蛋白分解酶抑制劑的具體實(shí)例有抑糜蛋白酶素，亮肽素，抗痛素，大豆胰蛋白酶抑制劑(如由Sigma&Co.公司生產(chǎn)的SBTI等I-S型)，抑肽酶，N-α-對(duì)-甲苯磺?；?L-賴氨酸氯甲基酮，Gabexate甲磺酸鹽，Urinastatin，Nafamostat甲磺酸鹽，F(xiàn)K-448〔4-(4-異丙基哌嗪羰基)苯基-1，2，3，4-四氫-1-萘甲烷磺酸鹽的商標(biāo)，由KOWA公司生產(chǎn)〕。
與通式(1)和/或(2)所代表的多肽衍生物一起使用的可作藥用的酸包括常用的有機(jī)酸、無機(jī)酸及其鹽。無機(jī)酸的具體實(shí)例有鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸等;有機(jī)酸的實(shí)例有甲酸、乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、琥珀酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、水楊酸，低級(jí)烷基磺酸、苯基磺酸、甲苯磺酸、抗壞血酸、酸性氨基酸、脂肪酸等;鹽的實(shí)例有乳酸鈉、乳酸鉀、檸檬酸鈉、檸檬酸鉀、酒石酸鈉、水楊酸鈉、抗壞血酸鈉。酸性氨基酸的例子有谷氨酸、焦谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸等。不飽和脂肪酸的例子有油酸、亞油酸、花生四烯酸等。在這些酸中，一般使用有機(jī)酸，特定的固態(tài)有機(jī)酸較好，弱酸性有機(jī)酸最好。
上述蛋白分解酶抑制劑及可作藥用的酸與由通式(1)或(2)所代表的多肽衍生物的數(shù)量比沒有特別限制，它可在很寬的范圍內(nèi)選擇，一般來說，所使用的蛋白分解酶掏劑的重量份(或摩爾)為通式(1)或(2)所示的多肽衍生物的重量份500-1×106倍，優(yōu)選1，500-3×105倍。與此類似，所使用的可作藥用的酸的重量份一般為通式(1)或(2)所示多肽衍生物重量份的1，000-1×106倍，優(yōu)選5，000-2×105倍。
通過與蛋白分解酶抑制劑和可作藥用酸結(jié)合使用可顯著增加通式(1)或(2)所示多肽衍生物的可吸收性，尤其是腸內(nèi)可吸收性，從而進(jìn)一步改善降低血鈣逍度的活性。當(dāng)?shù)鞍追纸饷敢种苿┖涂勺魉幱盟嶂械囊环N或兩種與通式(1)或(2)所示的多肽衍生物結(jié)合使用時(shí)可明顯看到由通式(1)和(2)所示多肽衍生物引起的腸內(nèi)吸收促進(jìn)作用，且當(dāng)三種成分(即蛋白分解酶抑制劑、可作藥用的酸以及由通式(1)和/或(2)所所的多肽衍生物)結(jié)合使用時(shí)可以看到協(xié)同作用。
制備本發(fā)明的鈣代謝改善劑，是將通式(1)和/或(2)所示的多肽衍生物與蛋白分解酶抑制劑和可作藥用的酸中至少一種配制成含有以上各個(gè)成分的單一制劑，然后服用這種單一制劑;或者是將這些成分單獨(dú)配制成單一藥劑，然后服用分別含有一種成分的各個(gè)藥劑。在每一種情況下，均可使用常規(guī)稀釋劑或賦形劑(如填料、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、表面活性劑、潤(rùn)滑劑等)來制備上述藥用制品。根據(jù)治療的目的，藥劑的類型可在很寬的范圍內(nèi)選擇，藥用組合物的例子有片劑、丸劑、粉末、液體、懸浮液、乳化液、顆粒、膠囊、栓劑、鼻滴液、口腔粘膜吸收劑(如錠劑，頰、舌下片劑，可咀嚼片劑，以及滴液)、眼睛洗液及軟膏等。
為了將該藥物制劑加工成片劑，可使用該領(lǐng)域廣泛使用的載體，例如，賦形劑，如乳糖、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸鈣、高嶺土、結(jié)晶纖維素、硅酸等，粘合劑如水、乙醇、丙醇、簡(jiǎn)單糖漿、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明膠溶液、羧基甲基纖維素、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀聚乙烯吡咯烷酮等，崩解劑如干燥的淀粉、藻酸鈉、瓊脂粉末、昆布粉末、碳酸氫鈉、碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯、十二烷基硫酸鈉、硬脂酸單甘油酯、淀粉、乳糖等，崩解抑制劑如蔗糖、硬脂精、椰子黃油、氫化油等，吸收促進(jìn)劑如季銨堿、十二烷基硫酸鈉等，潤(rùn)濕劑，如甘油、淀粉等;吸收劑如淀粉、乳糖、高嶺土、膨潤(rùn)土、膠體硅酸等，潤(rùn)滑劑如純化的滑石、硬脂酸鹽、硼酸粉末、聚乙二醇等。在制備片劑時(shí)，可用常規(guī)的包衣材料再將片劑包衣，以制成糖衣片劑、明膠膜包衣片劑、用腸包衣材料包衣的片劑、用膜包衣的片劑或雙層片劑和多層片劑。
為了將該藥物制劑加工成丸劑，也可使用該領(lǐng)域已知的并已廣泛使用的載體，例如，賦形劑如葡萄糖、乳糖、淀粉、椰子黃油、氫化植物油、高嶺土、滑石等，粘合劑如粉末狀阿拉伯樹膠、粉未狀西黃蓍膠、明膠、乙醇等，崩解劑如昆布(laminalia)、瓊脂等。
為了將該藥物制劑加工成栓劑，也可使用該領(lǐng)域已知的并廣泛使用的載體，例如，聚乙二醇、椰子黃油、高級(jí)醇、高級(jí)醇的酯、明膠、半合成的甘油酯等。
為了將該藥物制劑加工成膠囊劑，可將活性組分(本發(fā)明的多肽衍生物和蛋白酶抑制劑以及藥用酸)與上述載體混合，將由此獲得的混合物填入固狀明膠膠囊內(nèi)或軟質(zhì)膠囊內(nèi)以制成膠囊劑。
為了加工成注射制劑，要對(duì)這些活性組分的溶液、乳液或懸浮液進(jìn)行消毒并最好使之等滲到血液中。在制造這些制劑時(shí)可使用稀釋劑，如水、乙醇、聚乙二醇、聚丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、聚氧化的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯等。在這些情況下，為了使所需的制劑等滲到血液中，可往制劑中加入適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油、另外還可加入常規(guī)的溶解劑、緩沖劑、止痛劑等。除上述之外，也可往所述的注射制劑中加入著色劑、防腐劑、香料、調(diào)味劑、增甜劑以及其它藥物。
為了加工成糊劑，乳膏和膠體，也可使用該領(lǐng)域內(nèi)已知的并已廣泛使用的稀釋劑，例如，白凡士林、石蠟、甘油、纖維素衍生物、聚乙二醇、硅酮、皂粘土等。
為了加工成滴鼻制劑和口粘膜吸收型制劑，可通過常規(guī)方法，使用合適的粘合劑、稀釋劑、推進(jìn)劑等制成粉末型、氣溶膠型和液態(tài)型制劑，從而通過噴霧和噴灑的形式給藥。在制備上述粉末型產(chǎn)品時(shí)，宜使用吸水材料，如纖維素、淀粉、聚丙烯酸酯等。在制備上述氣溶膠型產(chǎn)品時(shí)，宜使用水、二元醇、非離子表面活性劑等。在制備上述噴灑推進(jìn)劑型產(chǎn)品時(shí)，可使用液化的石油氣、二氧化碳?xì)狻⒎图?jí)烷作為推進(jìn)劑。
本發(fā)明的鈣代謝改善劑中的活性組分的含量沒有特殊的限制且可在較寬的范圍內(nèi)選擇，用通式(1)或(2)表示的多肽衍生物在藥物制劑中的含量通常為1ug至1mg，在藥物制劑中蛋白酶抑制劑和藥用酸的含量約為100mg至2g。
對(duì)上述藥物制劑的給藥方式?jīng)]有特殊的限制，可根據(jù)制劑形式、患者年齡、性別和其它狀況、癥狀的程度等進(jìn)行選擇，例如片劑、丸劑、液體、懸浮液、乳液、顆粒劑和膠囊劑可口服，注射制劑可簡(jiǎn)單地靜脈給藥或與注射輸液如葡萄糖溶液和氨基酸溶液混合，如果需要，注射制劑可簡(jiǎn)單地肌內(nèi)、皮內(nèi)、表皮下和腹膜內(nèi)給藥，栓劑可直腸內(nèi)給藥，滴鼻劑可通過吸入鼻腔內(nèi)的方法給藥，口腔粘膜吸收型制劑可施用于口腔粘膜。
上述藥物制劑的劑量可根據(jù)使用方式、患者的年齡、性別和其它狀況、癥狀的程度適當(dāng)?shù)丶右赃x擇。通式(1)或(2)代表的多肽衍生物的通常給藥量約為20ng到20ug/千克體重/天，這些藥物制劑每天可分別地給藥1-4次。
本發(fā)明可提供含降鈣素衍生物(多鈦衍生物)的藥物制劑，特別是可提供含新的降鈣素衍生物的鈣代謝改善劑，該改善劑具有極好的抑制骨鈣吸收、降低血液中鈣的濃度的活性，此外，該改善劑作為止痛劑也具有極好的活性，且對(duì)抑制胃液的分泌具有活性作用。這些藥理活性起作用時(shí)僅有很小的副作用。除上述敘述外，本發(fā)明的多肽衍生物甚至在處于溶液狀況也是穩(wěn)定的，以致于它們對(duì)于腸內(nèi)(小腸和直腸)給藥具有良好的吸收能力。另外，多肽衍生物對(duì)鼻的粘膜和嘴的粘膜具有良好的吸收能力。
本發(fā)明的多肽衍生物具有幾個(gè)極好的特性，即(1)在水中的高溶解度，(2)良好的吸收能力，(3)良好的長(zhǎng)效性，(4)良好的穩(wěn)定性，(5)強(qiáng)的藥理活性，(6)低毒性，(7)低抗原劑和(8)低的抑制食欲活性。因此，鑒于上述極好特性，本發(fā)明的多肽衍生物可用于多種藥物應(yīng)用。
為了更詳細(xì)地說明本發(fā)明，下面將制備本發(fā)明的多肽衍生物所用原料的制備例稱之為參考實(shí)施例，而將制備本發(fā)明的多肽衍生物的實(shí)例稱之為實(shí)施例。
另外，下面還要敘述本發(fā)明的多肽衍生物的藥理試驗(yàn)。
在各個(gè)實(shí)施例中，按照下述步驟進(jìn)行氨基酸分析將6N鹽酸(往其中加入苯酚)加到試驗(yàn)化合物中，在110℃水解試驗(yàn)化合物24小時(shí)或48小時(shí)，真空干燥反應(yīng)混合物，用氨基酸分析儀分析得到的殘余物。
參考實(shí)施例1Boc-Thr(Bzl)-Glu-OBzl的制備在冰冷卻下2.83gH-Glu-OBzl溶于40ml乙腈的溶液中加入3.3ml三乙胺和5.00gBoc-Thr(Bzl)-OSu.在室溫下攪拌混合物過夜。減壓濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于50ml乙酸乙酯中并用30ml水洗滌得到的溶液二次。用無水硫酸鎂干燥乙酸乙酯層。蒸餾除去溶劑并干燥乙酸乙酯層，從而獲得5.50g(產(chǎn)率87.2%)上述標(biāo)題化合物，為粉末狀產(chǎn)品。
參考實(shí)施例2Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl.H2O的制備在冰冷卻下將5.50gBoc-Thr(Bzl)-Glu-OBzl溶于15mlTFA中，在室溫下攪拌混合物30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，在氫氧化鈉上對(duì)殘余物進(jìn)行真空干燥。
將得到的產(chǎn)物溶于50ml乙腈中，然后在冰冷卻下用三乙胺中和。往其中加入4.20gBoc-Ser(Bzl)-OSu并在室溫下攪拌混合物過夜。減壓濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于50ml乙酸乙酯。乙酸乙酯層用20ml1N鹽酸洗滌二次，再用20ml水洗滌二次。然后減壓濃縮乙酸乙酯層。用正己烷洗滌殘余物，獲得6.90g(產(chǎn)率91.6%)上述標(biāo)題化合物，為粉末狀產(chǎn)品。
元素分析(C38H47N3O10.H2O)理論值(%)C63.06，H6.82，N5.81實(shí)測(cè)值(%)C63.33，H0.60N5.80氨基酸分析Thr0.98(1)Ser0.93(1)Glu1.09(1)參考實(shí)施例3Boc-Asn-Leu-OEt的制備將5.00gH-Leu-OEt.HCl，5.95gBoc-Asn-OH和4.11gHOBT.HO懸浮于100mlTHF中。在冰冷卻下往該懸浮液中加入4.70mlWSC，在室溫下攪拌混合物7小時(shí)。往反應(yīng)混合物中加入100ml乙酸乙酯和200ml水以進(jìn)行萃取。乙酸乙酯層依次用50ml飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌三次，用50ml飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，用50ml1N鹽酸洗滌三次，最后用飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，用無水硫酸鎂干燥和減壓濃縮。用異丙醚固化殘余物，獲得7.00g(產(chǎn)率72.9%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)155-157℃。
參考實(shí)施例4Boc-Ser(Bzl)-Asn-leu-OEt的制備在冰冷卻下將6.90gBoc-Asn-Leu-OEt溶于25mlTFA中，在室溫下攪拌混合物30分鐘，減壓濃縮反應(yīng)混合物，用異丙醚和正己烷混合殘余物。潷析分離得到的沉淀，在氫氧化鈉上減壓干燥。
將得到的產(chǎn)物溶于50mlTHF中，在冰冷卻下往其中加入5.18ml三乙胺和7.30gBoc-Ser(Bzl)-OSu。在室溫下攪拌混合物5小時(shí)，將反應(yīng)混合物與100ml乙酸乙酯和50ml水混合以進(jìn)行萃取。用50ml水洗滌乙酸乙酯層三次，然后減壓濃縮。將殘余物與異丙醚混合，過濾收集得到的沉淀并干燥，獲得8.20g(產(chǎn)率80.6%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)149-151℃。
參考實(shí)施例5Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt的制備在冰冷卻下將3.00gBoc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt溶于10mlTFA中，在室溫下攪拌混合物30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物與異丙醚混合，過濾收集得到的沉淀，并在氫氧化鈉上減壓干燥。
將得到的產(chǎn)物溶于50mlTHF中，然后在冰冷卻下用三乙胺中和。往其中加入1.50gBoc-Gly-OSu。在室溫下攪拌混合物過夜，然后減壓濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物溶于50ml乙酸乙酯中，得到的溶液用20ml1N鹽酸洗滌二次，再用飽和的氯化鈉水溶液洗滌二次，用無水硫酸鎂干燥并減壓濃縮，用異丙醚洗滌殘余物，獲得2.90g(產(chǎn)率87.7%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)165-167℃。
參考實(shí)施例6
Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Lu-NHNH2的制備將2.80g Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt溶于30ml甲醇中，往其中加入2.25ml NH2NH2H2O。在室溫下靜置混合物2天，過濾收集得到的沉淀并用甲醇洗滌，獲得2.16g(產(chǎn)率79.0%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)221-224℃。
參考實(shí)施例7Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl的制備在冰冷卻下將0.56g Boc-Ser(Bzl)-Glu-OBzl.H2O溶于5ml TFA中，在室溫下攪拌溶液30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物。在氫氧化鈉上減壓干燥殘余物。
在-15℃和攪拌下，依次將0.73ml 4N鹽酸/二惡烷和0.18ml亞硝酸異戊酯加到0.78g Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-N3H3溶于10ml DMF的溶液中以形成疊氮化物。然后加入三乙胺以進(jìn)行中和。
將TFA處理獲得的上述產(chǎn)物溶于10mlDMF中，在冰冷卻下用三乙胺中和。往其中加入上述疊氮化合物，在4℃靜置混合物一夜。減壓濃縮反應(yīng)混合物，用水混合殘余物以固化，過濾收集得到的沉淀，用甲醇重結(jié)晶，得到1.10g(產(chǎn)率79.4%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)194-196℃。
的制備將1.00gBoc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl溶于10ml無水吡啶中，往其中加入1.00gTFA-ONp，將混合物在40℃靜置8小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)混合物，用異丙醚固化殘余物。過濾收集得到的沉淀，用異丙醚洗滌并干燥，在冰冷卻下將產(chǎn)物溶于8mlTFA，在室溫下攪拌溶液30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，在氫氧化鈉上減壓干燥殘余物。
將上述TFA處理過和產(chǎn)物溶于15mlDMF。在室溫和攪拌下將該溶液滴入700ml無水吡啶中，歷時(shí)30分鐘，在50℃攪拌混合物5小時(shí)，減壓濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物與50ml乙酸乙酯混合，得到的混合物用30ml1N鹽酸洗滌三次，30ml飽和的氯化鈉水溶液三次，用無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮以除去乙酸乙酯，將殘余物與甲醇-乙酸乙酯混合，過濾除去不溶物，濃縮濾液。將殘余物與異丙醚混合，過濾收集得到的沉淀，用異丙醚和少量乙酸乙酯洗滌獲得0.46g(產(chǎn)率50.7%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)203-207℃。
參考實(shí)施例9
1/2 H2O溶于100ml甲醇，往其中加入2.00ml NH2NH2H2O，在室溫下靜置混合物2天，減壓濃縮反應(yīng)混合物，用異丙醚洗滌殘余物。過濾收集不溶物，然后將不溶物懸浮在甲醇-乙酸乙酯混合物中。減壓濃縮懸浮液，濾出上不溶物并干燥，獲得1.98(產(chǎn)率65.2%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)230-233℃。
參考實(shí)施例10Boc-Leu-Gly-OEt的制備在冰冷卻下將9.10gWSC逐步加入到12.47gBoc-Leu-OH.HO，6.98gHcl.H-Gly-OEt和6.76gHOBT溶于二氯甲烷形成的100ml溶液中，在室溫下攪拌混合物42小時(shí)。用100ml1N鹽酸混合反應(yīng)混合物，過濾除去生成的沉淀，得到的濾液依次用100ml1N鹽酸洗滌、二份100ml飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌和100ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥并減壓濃縮。往殘余物中加入石油醚以使殘余物結(jié)晶，用乙酸乙酯-石油醚對(duì)得到的晶體進(jìn)行重結(jié)晶，獲得8.68g(產(chǎn)率56.6%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)79.5-82.5℃。
參考實(shí)施例11Boc-Val-Leu-Gly-OEt的制備在冰冷卻下將7.66gBoc-Leu-Gly-OEt溶于30mlTFA中，在室溫下攪拌溶液30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，用石油醚洗滌殘余物，在氫氧化鈉上減壓干燥，將得到的產(chǎn)物溶于60mlDMF中并在冰冷卻下用三乙胺調(diào)節(jié)pH至6。往其中加入5.43gBoc-Val-OH、3.38gHOBT和4.79mlWSC，在室溫下攪拌混合物20小時(shí)，將200ml水加入反應(yīng)混合物中，用二份70ml的乙酸乙酯萃取得到的反應(yīng)混合物，合并二份有機(jī)層，用1N鹽酸、飽和的碳酸氫鈉水溶液和飽和的氯化鈉水溶液各洗滌二次，然后用無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮得到的溶液以除去乙酸乙酯，用石油醚混合殘余物以使殘余物節(jié)晶，用乙醚-石油醚對(duì)得到的晶體進(jìn)行二次重結(jié)晶，獲得8.03g(產(chǎn)率79.2%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)69-73.5℃。
參考實(shí)施例12Boc-Val-leu-Gly-OH的制備將7.3gBoc-Val-leu-Gly-OEt溶于50ml乙醇中，在冰冷卻下往其中加入20ml1N氫氧化鈉水溶液，攪拌混合物1小時(shí)。用1N鹽酸調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物的pH值至7并減壓濃縮，用乙醚洗滌殘余物，在冰冷卻下用1N鹽酸調(diào)節(jié)含水層的pH值至2，并用60ml乙酸乙酯萃取三次。合并有機(jī)層，用飽和的氯化鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮得到的溶液以除去乙酸乙酯。用石油醚混合殘余物以使殘余物結(jié)晶，從而獲得5.33g(產(chǎn)率78.4%)上述標(biāo)題化合物。
熔點(diǎn)99-118℃氨基酸分析Val0.95(1)Leu0.95(1)Gly1.10(1)參考實(shí)施例13Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-Val-Leu-Gly-OH的制備在冰冷卻下將2.20gBoc-Val-Leu-Gly-OH溶于10mlTFA中，在室溫下攪拌溶液30分鐘，減壓濃縮反應(yīng)混合物，在氫氧化鈉上減壓濃縮殘余物。
在-15℃和攪拌下依次將1.00ml 4N鹽酸/二惡烷和0.40ml亞硝酸異戊酯加入1.90g
溶于20ml DMF的溶液中，以形成疊氮化合物，然后加入三乙胺以進(jìn)行中和。
在冰冷卻下將上述TFA處理過的產(chǎn)物溶于40mlDMF中，然后用三乙胺中和。往其中加入上述疊氮化合物，在冰冷卻下攪拌混合物過夜，減壓濃縮反應(yīng)混合物。用0.5W鹽酸混合殘余物，過濾收集得到的沉淀，并依次用水和熱甲醇洗滌，以獲得1.78g(產(chǎn)率74.2%)上述標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)244-250℃。
參考實(shí)施例14Boc-Ser(Bzl)-Gly-OH的制備在冰冷卻下往含6.80gH-Gly-OH和9.20g碳酸氫鈉的水溶液中加入含27.5gBoc-Ser(Bzl)-Osu的120mlTHF溶液中并在室溫下攪拌混合物過夜。
減壓濃縮反應(yīng)混合物，用乙醚(50ml，二次)洗滌得到的殘余物。然后在冰冷卻下通過加入1N，鹽酸來調(diào)節(jié)含水層的pH值至2，用乙酸乙酯(150ml，三次)萃取，用100ml飽和的氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)層。合并乙酸乙酯層，用無水硫酸鎂干燥，然后減壓濃縮，干燥得到的油狀殘余物，得到25.10g(產(chǎn)率101.7%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，為油狀物。
參考實(shí)施例15Boc-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)Pro-NH2的制備在冰冷卻下通過加入50ml THF以溶解25.5g Boc-Thr(Bzl)-Pro-NH2[參照日本專利公開No.61.112099(1986)]，然后在室溫下攪拌所得溶液30分鐘，減壓濃縮反應(yīng)混合物，往由此得到的殘余物中加入乙醚，過濾收集由此形成的沉淀，在氫氧化鈉上減壓干燥。
將上述生成的產(chǎn)物溶于150mlTHF中，在冰冷卻下用三乙胺中和，然后往其中加入25.00gBoc-Ser(Bzl)-Gly-OH、9.60gHOBT和14.20mlWSC，調(diào)節(jié)pH值至7。在冰冷卻下攪拌整個(gè)混合物2小時(shí)，然后在室溫下攪拌過夜。
減壓濃縮反應(yīng)混合物，用500ml乙酸乙酯萃取由此得到的殘余物。分別用1N鹽酸(200ml，二次)，飽和碳酸氫鈉水溶液(150ml，5次)和飽和氯化鈉水溶液(200ml)洗滌乙酸乙酯，然后用無水硫酸鎂干燥。減壓蒸除乙酸乙酯，然后通過加入乙醚-正己烷以固化得到的殘余物，獲得30.60g(產(chǎn)率75.9%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，熔點(diǎn)56-65℃。
氨基酸分析Thr1.01(1)Ser0.96(1)Gly1.02(1)Pro1.01(1)參考實(shí)施例16Boc-Thr(Bzl)-Gly-OH的制備使用5.40gH-Gly-Oh和22.40gBoc-Thr(Bzl)-Osu，重復(fù)與參考實(shí)施例14相同的步驟，獲得19.60g(產(chǎn)率97.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)63-66℃參考實(shí)施例17Boc-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用30.00g Boc-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和19.60g Boc-Thr(Bzl)-Gly-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得32.36g(產(chǎn)率77.7%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)83-88℃參考實(shí)施例18Boc-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備在冰冷卻下通過加入70ml TFA以溶解27.00g Boc-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2，在室溫下攪拌得到的溶液30分鐘，減壓濃縮反應(yīng)混合物，往由此得到的殘余物中加入乙醚，過濾收集由此形成的沉淀，在氫氧化鈉上減壓干燥。
將上述產(chǎn)物溶于200mlTHF中，并在冰冷卻下，用三乙胺中和，然后往其中加入10.74gBoc-Asn-ONp和4.10gHOBT并保持pH值在7-8，在冰冷卻下攪拌混合物1小時(shí)，然后再在室溫下攪拌過夜，再加入30mlDMF，再攪拌過夜。
減壓濃縮反應(yīng)混合物，往由此得到的殘余物中加入300ml冷水，潷析混合物，再往其中加入300ml水，過濾收集得到的沉淀并干燥，用甲醇-乙醚對(duì)由此獲得的粗產(chǎn)品再進(jìn)行三次再沉淀得到22.26g(產(chǎn)率73.1%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，熔點(diǎn)161-168℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr1.94(2)Ser0.96(1)Gly2.06(2)Pro1.04(1)參考實(shí)施例19
Boc-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用21.00g Boc-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和9.37g Boc-Thr(Bzl)-Osu，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，獲得23.4g(產(chǎn)率93.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)物，熔點(diǎn)110-113℃。
參考實(shí)施例20Boc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bxl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用8.35g Boc-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和3.30g Boc-Arg(Tos)-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得7.60g(產(chǎn)率70.5%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，熔點(diǎn)120-132℃。
氨基酸分析Asp1.04(1)Thr3.00(3)Ser0.97(1)Gly2.00(2)Arg0.97(1)Pro1.03(1)參考實(shí)施例21Boc-Tyr(Cl2-Bzl)Pro-OBzl的制備使用5.00g Boc-Tyr(Cl2-Bzl)-OH和2.89g H-pro-OBzl.HCl，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得6.89g(產(chǎn)率95.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
外觀油狀物。
參考實(shí)施例22Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-OBzl的制備使用6.84gBoc-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-OBzl和4.43g Boc-Thr(Bzl)-OSu，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的方法，獲得5.54g(產(chǎn)率62.1%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，熔點(diǎn)119-121℃。
參考實(shí)施例23Boc-Thr(Bzl)-Tyr-(Cl2-Bzl)-Pro-OH的制備使用5.34g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-OBzl，重復(fù)與參考實(shí)施例12相同的步驟，獲得2.03g(產(chǎn)率42.7%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，熔點(diǎn)72-85℃。
氨基酸分析Thr0.91(1)Tyr1.02(1)Pro1.05(1)參考實(shí)施例24Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用3.00g Boc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.89g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl-Bzl)-Pro-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的方法，獲得3.30g(產(chǎn)率78.2%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，熔點(diǎn)166-167℃。
參考實(shí)施例25Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用3.20g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和666mg Boc-Gln-ONp，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，獲得3.25g(產(chǎn)率95.8%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，熔點(diǎn)148-151℃。
參考實(shí)施例26Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用1.00g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和305mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-OH(參見日本專利公開No.61-112099(1986))，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得1.06g(產(chǎn)率89.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，熔點(diǎn)140-143℃。
參考實(shí)施例27Boc-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用900mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2，180mg Boc-His(Tos)-OH和代替HOBT的79mgHOWB，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得950mg(產(chǎn)率95.1%)上述標(biāo)題產(chǎn)品，熔點(diǎn)133-137℃。
參考實(shí)施例28Boc-Glu(OcHex)-Leu-OBzl的制備使用13.2gBoc-Glu(OcHex)-OH和15.7gH-Leu-OBzl.Tos-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得23.19g(產(chǎn)率108.8%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
外觀油狀物參考實(shí)施例29Boc-Gln-Glu-(OcHex)-Leu-OBzl的制備使用23.19gBoc-Glu(OcHex)-Leu-OBzl和14.7gBoc-Glu-ONp，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，獲得22.42g(產(chǎn)率84.4%由參考實(shí)施例28計(jì)算而得)產(chǎn)品。
熔點(diǎn)128-131℃參考實(shí)施例30Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH的制備將21.0gBoc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OBzl溶于200mlTHF中，在2.00g5%鈀-碳催化劑存在下對(duì)溶液進(jìn)行催化還原，還原反應(yīng)結(jié)束后，過濾除去催化劑，減壓濃縮濾液。往得到的殘余物中加入二乙醚-正己烷進(jìn)行結(jié)晶，獲得17.86g(產(chǎn)率95.5%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)111-114℃參考實(shí)施例31Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH的制備在冰冷卻下將12.00gBoc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH溶于30mlTFA中，并在室溫下攪拌溶液30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，加入乙醚和異丙醚以處理由此得到的殘余物，過濾收集生成的沉淀，在氫氧化鈉上減壓干燥。
將產(chǎn)物溶于THF-DMF(200ml-30ml)中并在冰冷卻下用三乙胺中和，然后往其中加入10.2gBoc-Ser(Bzl)-OSu，調(diào)節(jié)pH值至7-8，攪拌混合物過夜。減壓濃縮反應(yīng)混合物，加入1N鹽酸使pH值調(diào)節(jié)到2，然后用乙酸乙酯(100ml×3次萃取。用飽和氯化鈉水溶液(100ml×3次)洗滌乙酸乙酯層，然后用無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮。加入乙醚使由此得到的殘余物結(jié)晶，用乙酸乙酯-乙醚重結(jié)晶四次，獲得6.97g(產(chǎn)率44.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)149-153℃。
參考實(shí)施例32Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用500mg Boc-His(Tos)-Lys-(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和162mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH以及代替HOBT的39mgHONB，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得543mg(產(chǎn)率89.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)216-221℃參考實(shí)施例33
Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用500mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和96mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-OH以及代替HOBT的33mg HONB，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得489mg(產(chǎn)率88.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)204-213℃參考實(shí)施例34Boc-Lys(Cl-Z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用2.00g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和594mg Boc-Lys(cl-Z)-OSu，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，獲得2.20g(產(chǎn)率97.1%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)125-127℃。
參考實(shí)施例35Boc-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用2.00g Boc-Lys(Cl-Z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和419mg Boc-His(Tos)-OH以及代替HOBT的183mgHONB。重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得2.11g(產(chǎn)率94.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)123-128℃。
參考食施例36Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)pro-NH2的制備使用700mg Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和235mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH以及代替HOBT的58mg HONB，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得800mg(產(chǎn)率93.5%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)210-213℃。
參考實(shí)施例37Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用700mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和139mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH以及代替HOBT的47mgHONB，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得701mg(產(chǎn)率90.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)197-204℃。
參考實(shí)施例38Boc-Thr(Bzl)Pro-OBzl的制備使用8.66Boc-Thr(Bzl)-OH和7.42gHCl.H-Pro-OBzl，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得13.25g(產(chǎn)率95.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
外觀油狀物。
參考實(shí)施例39Boc-Thr(Bzl)-Pro-OH的制備使用13.25gBoc-Thr(Bzl)-Pro-OBzl，重復(fù)與參考實(shí)施例12相同的步驟，獲得9.72g(產(chǎn)率89.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
外觀粉末狀參考實(shí)施例40Boc-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用2.50g Boc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和811mg Boc-Thr(Bzl)-Pro-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的方法，獲得2.42g(產(chǎn)率81.4%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)164-170℃。
參考實(shí)施例41Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH的制備使用2.30g Boc-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和564mg Boc-Gln-ONp，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的方法，獲得2.14g(產(chǎn)率87.1%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
溶點(diǎn)128-142℃。
氨基酸分析Asp1.04(1)
Thr3.39(4)Ser0.94(1)Glu1.00(1)Gly2.14(2)Arg1.00(1)Pro1.97(2)參考實(shí)施例42Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用1.00g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和358mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的方法，獲得1.17g(產(chǎn)率96.4%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)114-124℃氨基酸分析Asp1.04(1)Thr3.95(4)Ser0.97(1)Glu1.02(1)Gly2.07(2)Leu1.09(1)Lys1.07(1)Arg0.96(1)
Pro1.99(2)參考實(shí)施例43Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用1.00g Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和228mg Boc-His(Tos)-OH以及代替HOBT的100mgHONB，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得1.03g(產(chǎn)率91.4%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)125-131℃參考實(shí)施例44Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用850mg Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和234mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH以及代替HOBT的75mgHONB，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得780mg(產(chǎn)率78.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)140-158℃。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr3.98(4)
Ser0.96(1)Glu3.00(3)Gly2.01(2)Leu2.02(2)Lys1.01(1)His1.03(1)Arg0.98(1)Pro1.94(2)參考實(shí)施例45Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-OH的制備使用4.61gBoc-Leu-Ser(Bzl)-OH(日本專利公開No.61-112099(1986)和5.61gBoc-Lys(Cl-z)-OSu，重復(fù)與參考實(shí)施例31相同的步驟，獲得4.92g(產(chǎn)率64.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)品熔點(diǎn)88-92℃參考實(shí)施例46Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用700mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和209mg Boc-Lys(Cl-z)Leu-Ser(Bzl)-OH以及代替HOBT的78mgHONB，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得751mg(產(chǎn)率90.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)171-195《017-(分解)氨基酸分析Asp1.03(1)Thr3.95(4)Ser1.75(2)Glu3.03(3)Leu2.99(3)Lys2.06(2)His1.00(1)Arg0.96(1)Pro1.98(2)參考食施例47Boc-Asn-Lys-(Cl-z)-Leu-OH的制備使用2.00gBoc-Lys(Cl-z)-Leu-OH和1.48gBoc-Asn-ONp，重復(fù)與參考實(shí)施例31相同的步驟，獲得1.76g(產(chǎn)率72.3%)上述標(biāo)題化合物。
熔點(diǎn)160-163℃參考實(shí)施例48Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用500mg Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和200mg Boc-Asn-Lys(Cl-Z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得582mg(產(chǎn)率91.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)117-122℃參考實(shí)施例49Boc-Ser(Bzl)-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用500mg Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和195mgBoc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得561mg(產(chǎn)率89.1%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)206-227℃。(分解)氨基酸分析Asp2.00(2)Thr3.90(4)Ser1.90(2)Glu3.16(3)Gly1.97(2)Leu2.07(2)Lys0.98(1)Arg0.91(1)Pro1.92(2)參考實(shí)施例50Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備使用520mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和117mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，獲得553mg(產(chǎn)率93.5%)標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)198-217℃(分解)氨基酸分析Asp1.95(2)Thr3.72(4)Ser1.85(2)Glu3.11(3)Gly1.93(2)Leu3.11(3)Lys1.99(2)Arg0.91(1)Pro1.85(2)參考食施例51Boc-Thr-(Bzl)-Asp-OEt的制備在冰冷卻下往由2.3gH-Asp-OEt，5.8gBoc-Thr(Bzl)-Osu，20mlTHF和20mlDMF組成的懸浮液中加入2ml三乙胺，攪拌混合物1小時(shí)，然后將反應(yīng)混合物的pH值控制在7左右，在室溫下繼續(xù)反應(yīng)36小時(shí)，減壓濃縮反應(yīng)混合物，加入1N鹽酸對(duì)由此得到的殘余物進(jìn)行酸化，然后用乙酸乙酯(80ml×3次)萃取。得到的有機(jī)層用水，然后再用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥，然后減壓濃縮。用乙醚-石油醚進(jìn)行結(jié)晶和重結(jié)晶，獲得5.59g(產(chǎn)率86.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
參考實(shí)施例52Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制備在冰冷卻下，將20mlTFA加入4.25gBoc-Thr(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt中進(jìn)行溶解，然后在室溫下攪拌溶液30分鐘，減壓濃縮反應(yīng)混合物，然后在氫氧化鈉上減壓干燥獲得的殘余物。將由此獲得的產(chǎn)物溶于20mlTHF中，在冰冷卻條件下加入三乙胺調(diào)節(jié)該溶液的pH至7。然后往其中加入3.29gBoc-Ser(Bzl)-OSu并攪拌混合物20小時(shí)，減壓濃縮反應(yīng)混合物后，加入150ml乙酸乙酯以溶解得到的殘余物。得到的溶液分別用1N鹽酸(50ml×2次)、飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml×2次)和飽和氯化鈉水溶液(50ml×2次)洗滌，用無水硫酸鎂干燥，然后減壓蒸除乙酸乙酯，往得到的殘余物中加入乙醚進(jìn)行結(jié)晶，用乙酸乙酯-石油醚進(jìn)行重結(jié)晶，獲得3.61g(產(chǎn)率57.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
溶點(diǎn)90-92℃參考實(shí)施例53Boc-Acp-Asn-Leu-OEt的制備使用4.00gBoc-Asn-Leu-OEt和3.40gBoc-Acp-Osu，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，獲得4.98g(產(chǎn)率95.5%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)145-146℃參考實(shí)施例54Boc-Acp-Asn-Leu-NH-NH2的制備使用4.90gBoc-Acp-Asn-Leu-OEt，重復(fù)與參考實(shí)施例6相同的步驟，獲得4.26g(產(chǎn)率86.2%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)200-202℃參考實(shí)施例55Boc-Acp-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制備使用2.66gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt和220gBoc-Acp-Asn-Leu-NHNH，重復(fù)與參考實(shí)施例7相同的步驟，獲得3.22g(產(chǎn)率78.5%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)200-203℃參考實(shí)施例56
的制備使用3.00gBoc-Acp-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt，重復(fù)與參考實(shí)施例8相同的步驟，獲得700mg(產(chǎn)率26.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)228-231℃參考實(shí)施例57
的制備使用650mgAcp-Asn-Leu-Ser(Bzk)-Thr(Bzl)-Asp-OEt，重復(fù)與參考實(shí)施例9相同的步驟，獲得400mg(產(chǎn)率62.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)品。
熔點(diǎn)212-218℃參考實(shí)施例58
的制備通過采用350mg
324mg Boc-Val-Leu-Gly-OH，重復(fù)參考實(shí)施例13的步驟，可以獲得320mg(產(chǎn)率70.0%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)235-240℃(分解)參考實(shí)施例59Boc-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備方法通過采用2.5g Boc-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和921mg Boc-Gln-ONp;重復(fù)參考實(shí)施例18的步驟，可以獲得2.59g(產(chǎn)率94.1%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)200-204℃。
參考實(shí)施例60Boc-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl-Pro-NH2的制備方法通過采用2.48g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.14g Boc-Thr(Bzl)-Pro-OH，重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得2.72g(產(chǎn)率90.4%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)185-190℃參考實(shí)施例61Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備方法通過采用2.65gBoc-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和907mg Boc-Gln-ONp重復(fù)參考實(shí)施例18的步驟，可以獲得274g(產(chǎn)率95.5%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)195-200℃參考實(shí)施例62Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備方法通過采用206mg Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和320mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得730mg(產(chǎn)率84.0%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)216-220℃參考實(shí)施例63Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備方法通過采用712mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和204mg Boc-His(Tos)-OH以及57mg用來替代HOBT的HOSu生復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得759mg(產(chǎn)率94.0%)上述目的化合物。
熔點(diǎn)200-216℃(分解)氨基酸分析
Asp1.02(1)Thr3.87(4)Ser0.92(1)Glu2.06(2)Gly2.04(2)Leu1.01(1)Lys0.99(1)His1.05(1)Pro2.05(2)參考實(shí)施例64Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備方法通過采用715mg Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和244mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH以及51ml用于替代HOBT的HOSu重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得720mg(產(chǎn)率85.0%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)190-205℃(分解)。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr3.95(4)Ser0.94(1)Glu3.93(4)Gly2.05(2)
Leu1.96(2)Lys1.01(1)His1.00(1)Pro2.06(2)參考實(shí)施例65Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備方法通過采用684mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和251mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-OH以及41mg用于替代HOBT的HOSu重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得617mg(產(chǎn)率74.9%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)220-228℃(分解)參考實(shí)施例66Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gln-Thr(Bzl)-Pro-NH的制備方法通過采用1.41gBoc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和781mgBoc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得1.79g(產(chǎn)率98.0%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)212-220℃。
參考實(shí)施例67
Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備方法通過采用1.81g Boc-Asn-Lys-(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和666mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得1.96g(產(chǎn)率90.5%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)219-227℃。
參考實(shí)施例68Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備方法通過采用869mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Prp-NH2和339mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得967mg(產(chǎn)率91.5%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)241-245℃(分解)。
參考實(shí)施例69制備 Boc-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
首先通過采用2.00gBoc-Lys(Cl-z)-Leu-OH和1.10gBoc-Gly-OSu重復(fù)參考實(shí)施例31的步驟，可以獲得1.69g(產(chǎn)率76.0%)Boc-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-OH。
表觀粉狀物質(zhì)氨基酸分析Gly0.94(1)Leu1.04(1)Lys1.03(1)隨后，采用500mgBoc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和198mg上述Boc-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得575mg(產(chǎn)率92.6%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)127-131℃。
參考實(shí)施例70制備 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2通過采用520mgBoc-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和212mgBoc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得652mg(產(chǎn)率99.0%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)183-217℃(分解)氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.86(4)Ser1.87(2)Glu3.07(3)Gly3.05(3)Leu2.04(2)Lys1.00(1)Arg0.92(1)Pro1.96(2)參考實(shí)施例71制備 Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助620mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和141mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，可以獲得680mg(產(chǎn)率96.3%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)198-208℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr3.83(4)Ser1.85(2)
Glu3.11(3)Gly3.08(3)Leu3.07(3)Lys1.99(2)Arg0.91(1)Pro1.91(2)參考實(shí)施例72Boc-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制備方法將2ml三乙胺在冰冷卻條件下加至由2.3gH-Asp-OEt、5.8gBoc-Thr(Bzl)-Osu于20mlTHF和20mlDMF中形成的懸浮液中并且將該混合物攪拌1小時(shí)，從而將該反應(yīng)混合物的pH值調(diào)節(jié)至7左右，反應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行36小時(shí)。在減壓下濃縮該反應(yīng)混合物并且通過添加1N-鹽酸酸化如此形成的殘余物，隨后用乙酸乙酯(80ml×3次)萃取。先用水然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)層，并且用無水硫酸鎂進(jìn)行干燥。在減壓下濃縮乙酸乙酯萃取液，經(jīng)過在乙醚-石油醚中對(duì)所形成的殘余物進(jìn)行結(jié)晶與重結(jié)晶處理可以獲得5.5g(產(chǎn)率86.6%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)93-95℃。
參考實(shí)施例73Boc-ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制備方法在冰冷卻條件下，通過添加20mlTFA將4.5gBoc-Thr(Bzl)-Asp-OEt溶解，在室溫下將其攪拌30分鐘。在減壓下濃縮該反應(yīng)混合物，在減壓下用氫氧化鈉干燥所獲得的殘余物。將上述產(chǎn)物溶于20mlTHF，在冰冷卻條件下用三乙胺調(diào)節(jié)其pH值。隨后加入3.29gBoc-Ser(Bzl)-OSu并且攪拌20小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，通過添加150ml乙酸乙酯溶解如此獲得的殘余物，隨后分別用1N-鹽酸(50ml×2次)、飽和碳酸氫鈉水溶液(15ml×2次)和飽和氯化鈉水溶液(50ml×2次)洗滌該溶液，用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮乙酸乙酯萃取液并且通過添加乙醚與石油醚使如此獲得的殘余物結(jié)晶，然后使其在乙酸乙酯-石油醚中重結(jié)晶。獲得3.61g(產(chǎn)率57.3%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)90-92℃。
參考實(shí)施例74Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt的制備方法在冰冷卻條件下，通過添加20mlTFA溶解4.41gBoc-Ser(Bzl)-Asn-Lru-OEt并且將其在室溫下攪拌30分鐘。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，將乙醚加至如此得到的殘余物并且過濾收集沉淀的產(chǎn)物，在減壓下用氫氧化鈉干燥。將上述產(chǎn)物溶于100mlTHF和21mlDMF的混合物中，然后在冰冷卻條件下通過添加三乙胺將該混合物的pH值調(diào)至7左右。隨后向其中加入2.75gBoc-β-Ala-OSu并且在室溫下將全部混合物攪拌過夜。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，向所形成的殘余物中添加200ml水，過濾收集所形成的沉淀并且分別二次將其置于甲醇中使其重結(jié)晶。借助上述步驟獲得3.41g(產(chǎn)率68.6%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)190-192℃。
參考實(shí)施例75Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-NHNH2的制備方法將3g Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt溶于20ml甲醇，隨后向該溶液中添加2.4ml NH2NH2.H2O并且將該混合物攪拌過夜，此后向該反應(yīng)混合物中添加20ml DMF并且溶解所形成的沉淀，將其攪拌過夜。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，向如此形成的殘余物中添加15ml水，過濾收集所形成的沉淀并且用乙醇對(duì)其進(jìn)行二次重結(jié)晶處理。獲得1.72g(產(chǎn)率58.7%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)241-245℃。
參考實(shí)施例76Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制備方法在冰冷卻條件下，通過添加30mlTFA溶解6.6gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt并且在室溫下將該溶液攪拌30分鐘。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，通過添加石油醚處理所形成的殘余物并且過濾收集所形成的沉淀物，隨后在減壓下用氫氧化鈉進(jìn)行干燥。
另外，將7.0g Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-NHNH2溶于30ml DMF中，隨后在-15℃到-20℃的冷卻下與攪拌條件下向其中添加7.2ml4N-鹽酸/二惡烷，隨后加入2ml亞硝酸異戊酯以便形成其疊氮化合物，并且通過添加三乙胺將其中和。
將經(jīng)過TFA處理的上述產(chǎn)物溶于20mlDMF并且在冰冷卻條件下用20mlDMF進(jìn)行中和。然后向其中添加上述疊氮化合物，并且將該混合物的pH值保持在7-8，在4℃下將該混合物攪拌20小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，向如此形成的殘余物中添加30ml0.5N鹽酸并且過濾收集所形成的沉淀物，用甲醇對(duì)其進(jìn)行二次重結(jié)晶處理。獲得10.46g(產(chǎn)率90.4%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)236-245℃(分解)。
參考實(shí)施例77
的制備方法將4.3gBoc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt溶于45ml無水吡啶之中，向該溶液中添加3.66gTFA-ONP并且在40℃下將該混合物放置4小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，將乙醚加至所獲得的殘余物中。隨后通過在冰冷卻條件下添加50mlTFA溶解沉淀物，在室溫下將其攪拌45分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，將乙酸乙酯加至如此形成的殘余物中，并且過濾收集所形成的結(jié)晶，用氫氧化鈉干燥。
將經(jīng)過TFA處理的上述產(chǎn)物溶于50mlDMF之中，隨后在攪拌條件下向其中滴加800ml被加熱至50℃的無水吡啶，歷時(shí)6小時(shí)。滴加完畢，在室溫下將該反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后進(jìn)行減壓濃縮。向如此獲得的殘余物中添加100ml水并且過濾收集如此形成的沉淀物，通過加熱將其溶解于乙醇之中，隨后將該溶液放置在室溫下使其冷卻，并濾除溶液中形成的沉淀物。將乙酸乙酯加至濾液中并且過濾收集所形成的沉淀物。獲得1.9g(產(chǎn)率49.5%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)230-233℃。
參考實(shí)施例78
的制備方法將1.89g
溶于50ml甲醇與15ml DMF的混合物中，隨后加入1.7ml NH NH HO并且在室溫下將該混合物攪拌過夜。向該反應(yīng)混合物中添加200ml水并且過濾收集所形成的沉淀物。充分干燥沉淀物并且將其懸浮于甲醇-乙酸乙酯之中，隨后在減壓下濃縮并且過濾收集所形成的沉淀物。獲得620mg(產(chǎn)率34.4%)目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)235-238℃。
參考實(shí)施例79
的制備方法在冰冷卻條件下，通過添加5mlTFA溶解440mgBoc-Val-Leu-Gly-OH，在室溫下將該溶液攪拌30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，通過添加乙醚處理如此獲得的殘余物，過濾收集如此形成的沉淀物并且在減壓條件下用氫氧化鈉干燥。
另外，將550mg
溶于20mlDMF，然后在冷卻至-15℃至-20℃與攪拌條件下向其中依次加入0.43ml 4N鹽酸/二惡烷、0.11ml亞硝酸異戊酯以便形成其疊氮化合物。
并且將該混合物的pH值保持在7-8，在4℃下將該混合物攪拌4小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，向如此形成的殘余物中添加30ml0.5N鹽酸并且過濾收集所形成的沉淀物，經(jīng)過依次用乙醇、乙酸乙酯洗滌得到580mg(產(chǎn)率83.8%)上術(shù)目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)228-248℃(分解)。
氨基酸分析Asp2.07(2)β-Ala0.85(1)Thr1.06(1)Ser2.02(2)Gly1.07(1)Val0.92(1)Leu2.00(2)參考實(shí)施例80HCl.H-Cpc(OBut)-OCH3的制備方法在冰冷卻條件下將12，1ml三乙胺加至30ml含有7.42HCl.H-Cys-OCH3和11.58g BrCH2(CH2)2COO But的DMF溶液中，在室溫下將該混合物攪拌2天。將該反應(yīng)混合物倒入100ml冰水之中，隨后用乙酸乙酯(50ml×3次)萃取，合并有機(jī)層并且分別用50ml水和50ml飽和氯化鈉水溶液(二次)洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥并且進(jìn)行減壓濃縮。將20ml 4N鹽酸/二惡烷在冰冷卻條件下加至如此獲得的殘余物中，減壓濃縮該混合物并且通過加入乙醚使所產(chǎn)生的殘余物結(jié)晶并自乙酸乙酯-乙醚中重結(jié)晶。得到9.30g(產(chǎn)率68.5%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)90-93℃。
參考實(shí)施例81Boc-Thr(Bzl)-Cpc(OBut)-OCH3的制備方法通過采用1.30gHCl.H-Cpc(OBut)-OCH和1.85gBoc-Thr(Bzl)-OSu以及550mgHOBT重復(fù)參考實(shí)施例18的步驟，可以獲得1.92g(產(chǎn)率81.5%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)53-55℃。
參考實(shí)施例82Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-OCH3的制備方法通過采用1.85g Boc-Thr(Bzl)-Cpc(OBut)-OCH3和1.30g Boc-Ser(Bzl)-OSu重復(fù)參考實(shí)施例18的步驟，可以獲得1.46g(產(chǎn)率60.2%)上述目的產(chǎn)物。
表觀油狀物質(zhì)。
參考實(shí)施例83Boc-Sre(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-OCH的制備方法通過采用1.46gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-CH和1.36gBoc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-NHNH重復(fù)參考實(shí)施例7的步驟，可以獲得1.66g(產(chǎn)率73.6%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)183-186℃。
參考實(shí)施例84Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-OCH3的制備方法通過采用950mgBoc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-OCH3重復(fù)參考實(shí)施例8的步驟，可以獲得450mg(產(chǎn)率55.9%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)158-161℃。
參考實(shí)施例85
熔點(diǎn)208-213℃。
參考實(shí)施例86
通過采用380mg
NHNH2和301mg Boc-Val-Leu-Gly-OH重復(fù)參考實(shí)施例13的步驟，可以獲得371mg(產(chǎn)率77.5%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)246-256℃。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr1.01(1)Ser1.92(2)Gly1.00(1)Val0.96(1)Leu2.07(2)Cpc1.00(1)
參考食實(shí)施例87HCl.H-Cec(OBut)-OCH3的制備方法將8.58g HCl.H-Cys-OCH3和11.78g Br-CH2CH2COOBut溶于30ml DMF，在冰冷卻條件下將14.7ml三乙胺加至該溶液中，在室溫下將該反應(yīng)混合物攪拌48小時(shí)。將100ml冰水加至該反應(yīng)混合物中并且用乙酸乙酸萃取(50ml×3次)。合并乙酸乙酯層并且分別用水(50ml×1次)和飽和氯化鈉水溶液(50ml×二次)洗滌，隨后用無水硫酸鎂干燥并且進(jìn)行減壓濃縮。在冰冷卻條件下將20ml 4N鹽酸/二惡烷加至如此形成的殘余物中，隨后減壓濃縮，該混合物，通過添加乙醚使如此形成的殘余物結(jié)晶并且使其在乙酸乙酯-乙醚中重結(jié)晶，得到11.4g(產(chǎn)率76.0%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)65-67℃。
參考實(shí)施例88Boc-Thr(Bzl)-Cec(OBut)-OCH3的制備方法通過采用7.22g Boc-Thr(Bzl)-OSu和7.7g HCl.H-Cec(OBut)-OCH3重復(fù)參考實(shí)施例18步驟，可以獲得9.31g(產(chǎn)率71.9%)上述目的產(chǎn)物。
表觀油狀物質(zhì)參考實(shí)施例89Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-OCH的制備方法通過采用9.05gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec(OBut)-OCH和6.28gBoc-Ser(Bzl)-OSu重復(fù)參考實(shí)施例18的步驟，可以獲得10.2g(產(chǎn)率92.5%)上述目的產(chǎn)物。
表觀油狀物質(zhì)。
參考實(shí)施例90Boc-Abu-Asn-Leu-OEt的制備方法通過采用6.23gBoc-Abu-Asn-Leu-OEt重復(fù)參考實(shí)施例6的步驟，可以獲得4.47g(產(chǎn)率74.0%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)205-208℃。
參考實(shí)施例92Boc-Abu-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-OCH3的制備方法通過采用2.63g Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-OCH3和2.00g Boc-Abu-Asn-Leu-NHNH2重復(fù)參考實(shí)施例7的步驟，可以獲得2.75g(產(chǎn)率67.9%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)194-198℃。
參考實(shí)施例93
的制備方法通過采用2.50g Boc-Abu-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-OCH3重復(fù)參考實(shí)施例8的步驟，可以得到1.04g(產(chǎn)率47.1%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)222-226℃。
參考實(shí)施例94Abu-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-NHNH2的制備方法通過采用950mg
重復(fù)參考實(shí)施例9的步驟，可以獲得641mg(產(chǎn)率66.8%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)205-220℃。
氨基酸分析Asp1.02(1)Thr1.00(1)Ser0.94(1)Leu1.06(1)Abu1.21(1)Cec0.98(1)參考實(shí)施例95
的制備方法通過采用508mg Boc-Val-Leu-Gly-OH和550mg
重復(fù)參考實(shí)施例13的步驟，可以獲得504mg(產(chǎn)率70.2%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)242-249℃(分解)。
參考實(shí)施例96Z-Tyr(CH2COOBzl)-OCH3的制備方法在冰冷卻條件下，將692mg氫化鈉(濃度60%)加至25ml含有5.70g Z-Tyr-OCH3的DMF溶液中并且將該混合物攪拌30分鐘，隨后向其中加入3.96g溴代乙酸芐酯并且在50℃下將全部混合物攪拌1小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物并且用100ml乙酸乙酯萃取如此形成的殘余物。分別用水和飽和氯化鈉水溶液洗滌乙酸乙酯層，然后用無水硫酸鈉干燥并且進(jìn)行減壓濃縮。采用石+醚-氯仿(1∶4)作為洗脫劑對(duì)如此獲得的殘余物進(jìn)行硅膠柱層析分離，得到6.00g(產(chǎn)率72.6%)上述目的產(chǎn)物。
表觀油狀物質(zhì)。
NMR(CDCl3)δ7.32(5H，s，
)7.31(5H，s，
)7.00(2H，d，J＝9Hz，
)6.77(2H，d，J＝9Hz，
)5.21(2H，
)5.07(2H，
)4.70-4.55(3H，m，NH-CH-CO，-OCH2-COO-)3.67(3H，s，-OCH3)3.02(2H，d，J＝6Hz，
)參考實(shí)施例97Boc-Thr(Bzl)-Tyr(CH2CooH)-OCH3的制備方法將12ml 1N鹽酸和300mg10%鈀/炭加至50ml含有5.80g Z-Tyr(CH2COOBzl)-OCH3的THF溶液中，該混合物在氫氣流中被催化還原。待反應(yīng)完畢，濾除10%鈀/炭，將濾液減壓濃縮至干燥。
通過采用如此形成的殘余物和4.92gBoc-Thr(Bzl)-OSu重復(fù)參考實(shí)施例72的步驟，可以獲得5.00g(產(chǎn)率75.7%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)101-106℃。
參考實(shí)施例98Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Tyr(CH2-COOH)-OCH3的制備方法。
通過采用4.90g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(CH2COOH)-OCH3和4.23 Boc-Ser(Bzl)-OSu重復(fù)參考實(shí)施例18的步驟，可以茆4.51g(產(chǎn)率69.5%)上述目的產(chǎn)物。
表觀油狀物質(zhì)。
參考實(shí)施例99Boc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Tyr(CH2COOH)-OCH3的制備方法通過采用2.50g Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Tyr(CH2COOH)-OCH3和2.23g Boc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-NHNH2重復(fù)參考實(shí)施例7的步驟，可以得到2.49g(產(chǎn)率63.8%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)186-190℃。
參考實(shí)施例100
的制備方法通過采用2.43g Boc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Tyr(CH2COOH)-OCH3重復(fù)參考實(shí)施例8和9的步驟，可以獲得950mg(產(chǎn)率43.8%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)202-208℃。
參考實(shí)施例101
通過采用450mg
和349mg Boc-Val-Leu-Gly-OH重復(fù)參考實(shí)施例13的步驟，得到430mg(產(chǎn)率75.6%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)229-232℃(分解)。
參考實(shí)施例102Z-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3的制備方法通過添加15mlTFA溶解5.00gZ-Lys(Boc)-OCH并且在室溫下將該溶液攪拌30分鐘。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，將石油醚加至如此形成的殘余物中并且通過潷析分離所形成的油狀產(chǎn)物，在減壓下用氫氧化鈉干燥。
在冰冷卻條件下將上述產(chǎn)物溶于40ml吡啶之中，將3.08g琥珀酸酐加至該溶液中，隨后在室溫下將全部混合物攪抖18小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，用100ml乙酸乙酯萃取如此形成的殘余物，然后依次用1N鹽酸、飽和氯化鈉水溶液將乙酸乙酯相洗滌三次并且用無水硫酸鈉干燥，進(jìn)行減壓濃縮。將如此產(chǎn)生的殘余物溶于氯仿，然后將該溶液加至硅膠柱中并且用200ml氯仿、再用400ml3%甲醇/氯仿洗提以便將其純化，得到3.63g(產(chǎn)率71.9%)上述油狀目的產(chǎn)物。
NMR(CDCl3)δ7.72-7.33(6H，m，CH2C6H5，OCONH or CONH)6.34-6.07(1H，bs，OCONHorCONH)5.10(2H，s，CH2C6H5)4，41-4，15(1H，m，NHCHCO)3.71(3H，s，OCH3)3.25-3.13(2H，m，NHCH2-)2.76-2.34(4H，m，COCH2CH2CO)1.89-1.15(6H，m，NHCH2(CH2)3)參考實(shí)施例103Boc-Trh(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3的制備方法將3.60g Z-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3溶于30ml甲醇之中，將100mg 5%-鈀/炭和9.13ml 1N鹽酸加至該溶液中，該混合物在氫氣流中被催化還原。待反應(yīng)完畢，濾除催化劑，減壓濃縮濾液，在減壓條件下用氫氧化鈉干燥如此形成的殘余物。然后將如此獲得的殘余物溶于30ml THF和5ml水的混合物中并且在冰冷卻條件下通過添加三乙胺將該混合物的pH值調(diào)至6-7。向該混合物中添加4.08g Boc-Thr(Bzl)-OSu，然后通過添加N-甲基嗎啉將該混合物的pH值調(diào)節(jié)至7-8，在冰冷卻條件下將其攪拌1小時(shí)，隨后在室溫下將其攪拌18小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物并且用50ml乙酸乙酯萃取如此形成的殘余物。用1N鹽酸，再用飽和氯化鈉水溶液分三次洗滌乙酸乙酯層，然后用無水硫酸鈉干燥，在減壓下進(jìn)行濃縮。將如此獲得的殘余物溶解于氯仿之中并且加至硅膠柱中，用200ml氯仿、再用500ml2%甲醇/氯仿洗提，得到含有目的產(chǎn)物的餾份，然后進(jìn)行減壓濃縮并且通過添加乙醚使如此獲得的殘余物結(jié)晶。得到960mg(產(chǎn)率19.1%)上述目的產(chǎn)物。
溶點(diǎn)60-63℃。
參考實(shí)施例104Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3·1/2H2O的制備方法通過添加2ml TFA溶解900mg Boc-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3，在室溫下將溶液攪拌30分鐘。減壓濃縮該反應(yīng)混合物，在減壓條件下用氫氧化鈉干燥如此形成的殘余物。向該殘余物中添加30mlTHF，在冰冷卻條件下將該溶液的pH值調(diào)至6-7。向該溶液中添加768mgBoc-Ser(Bzl)-OSu，通過添加N-甲基嗎啉將該混合物的pH值調(diào)至7-8，然后在冰冷卻條件下將其攪拌1小時(shí)，再于室溫下將其攪拌40小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)混合物，用30ml乙酸乙酯萃取如此獲得的殘余物，分別用1N鹽酸、飽和氯化鈉水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液二次、用水三次洗滌乙酸乙酯層，然后進(jìn)行減壓濃縮。將乙醇加到如此獲得的殘余物中并且再次進(jìn)行減壓濃縮，通過添加乙醚使如此形成的殘余物結(jié)晶并且使其在甲醇-乙醚中重結(jié)晶。獲得810mg(產(chǎn)率67.4%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)81-83℃。
參考實(shí)施例105Boc-Asn-Leu-NHNH2的制備方法通過采用3.00gBoc-Asn-Leu-OEt重復(fù)參考實(shí)施例6的步驟，可以獲得2.45g(產(chǎn)率81.7%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)219-221℃。
參考實(shí)施例106Bco-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3的制務(wù)備方法借助3.60g Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3和2.21g Boc-Asn-Leu-NHNH2重復(fù)參考實(shí)施例7的步驟，可以得到3.37g(產(chǎn)率71.4%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)206-209℃。
參考實(shí)施例107
的制備方法借助3.27g Boc-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2-COOH)-OCH3重復(fù)參考實(shí)施例8的步驟，得到1.00g(產(chǎn)率34.9%)上述產(chǎn)物。
溶點(diǎn)115-117℃。
參考實(shí)施例108
的制備方法借助850mg
重復(fù)參考實(shí)施例9的步驟，得到630mg(產(chǎn)率73.8%)上述目的產(chǎn)物。
溶點(diǎn)170-183℃。
氨基酸分析Asp1.01(1)Thr0.99(1)Ser0.93(1)Leu1.07(1)Lys0.85(1)參考實(shí)施例109
的制備方法通過采用580mg
和535mg Boc-Val-Leu-Gly-OH重復(fù)參考實(shí)施例13的步驟，得到540mg(產(chǎn)率71.7%)上述產(chǎn)物。
熔點(diǎn)245-249℃(分解)。
參考實(shí)施例110Boc-Leu-Gly-OH的制備方法將2.63gH-Gly-OH和3.50g碳酸氫鈉懸浮于50ml水中，在冰冷卻條件下向該懸浮液中添加50ml含有10.0gBoc-Leu-OSu的二惡烷溶液并且攪拌30分鐘，然后在室溫下繼續(xù)將該混合物攪拌15小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)混合物并且用乙酸乙酯(70ml)萃取如此獲得的殘余物。用1N鹽酸和飽和氯化鈉水溶液洗滌乙酸乙酯層，然后用無水硫酸鎂干燥并且進(jìn)行減壓濃縮。所獲得的殘余物經(jīng)過用乙酸乙酯-正己烷重結(jié)晶處理后，形成6.65g(產(chǎn)率75.7%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)115-123℃。
參考實(shí)施例111Boc-Gly-Leu-Gly-OH的制備方法通過采用6.41gBoc-Leu-Gly-OH和6.04gBoc-Gly-OSu重復(fù)參考實(shí)施例31的步驟，獲得4.67g(產(chǎn)率61.4%)上述目的產(chǎn)物。
溶點(diǎn)67-70℃。
參考實(shí)施例112
的制備方法借助550mg
和280mg H-Gly-Leu-Gly-OH重復(fù)參考實(shí)施例13的步驟，獲得310mg(產(chǎn)率46.2%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)208-211℃。
參考實(shí)施例113Boc-lle-Leu-Gly-OEt的制備方法借助2.00g Boc-Leu-Gly-OEt和1.67g Boc-lle-OH.1/2H2O重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，獲得1.99g(產(chǎn)率73.3%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)123-124℃。
參考實(shí)施例114Boc-Ile-Leu-Gly-OH的制備方法借助1.89gBoc-Ile-Leu-Gly-OEt重復(fù)參考實(shí)施例12的步驟，獲得1.53g(產(chǎn)率86.6%)上述目的產(chǎn)物。
表觀油狀物質(zhì)。
氨基酸分析Gly1.07(1)Ile0.96(1)Leu0.97(1)參考實(shí)施例115
-OH的制備方法借助600g Boc-Ile-Leu-Gly-OH和500mg
重復(fù)參考實(shí)施例13的步驟，獲得580mg(產(chǎn)率90.9%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)243-247℃。
參考實(shí)施例116
Boc-Ala-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制備方法借助700mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和83mg Boc-Ala-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，獲得664mg(產(chǎn)率91.4%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)135-140℃。
制備 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助650mg Boc-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和310mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，獲得842mg(產(chǎn)率98.5%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)212-226℃。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr3.87(4)Ser2.05(2)Glu3.59(3)Gly2.04(2)
Ala1.00(1)Leu2.20(2)Lys1.00(1)Arg1.01(1)Pro2.00(2)參考實(shí)施例118制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助800mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu-(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和210mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，獲得839mg(產(chǎn)率90.8%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)215-217℃(分解)。
參考實(shí)施例119制備 Boc-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助700mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和215mg Boc-Ser(Bzl)-OSu重復(fù)參考實(shí)施例18的步驟，得到722mg(產(chǎn)率94.3%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)168-177℃。
參考實(shí)施例120制備 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助700mg Boc-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(TOS)-Thr-(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和318mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，獲得902mg(產(chǎn)率99.1%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)214-223℃分解。
氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.79(4)Ser2.73(3)Glu3.21(3)Gly2.00(2)Leu2.04(2)Lys0.99(1)Arg1.00(1)Pro1.95(2)參考實(shí)施例121制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
借助850mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和214mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，獲得862mg(產(chǎn)率88.2%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)222-225℃。
參考實(shí)施例122制備 Boc-Leu-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助700mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和180mg Boc-Leu-Osu重復(fù)參考實(shí)施例18的步驟，得到714mg(產(chǎn)率96.2%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)178-184℃。
參考實(shí)施例123制備 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Crl-(OcHex)-Leu-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助670mgBoc-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和314mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，得到811mg(產(chǎn)率92.3%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)223-236℃(分解)。
氨基酸分析Asp1.02(1)Thr3.84(4)Ser1.89(2)Glu3.33(3)Gly2.04(2)Leu3.16(3)Lys1.00(1)Arg1.03(1)Pro2.00(2)參考實(shí)施例124制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助250mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和193mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，得到763mg(產(chǎn)率88.0%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)220-234℃(分解)。
氨基酸分析Asp1.02(1)Thr3.74(4)
Ser1.76(2)Glu3.23(3)Gly2.02(2)Leu4.02(4)Lys1.95(2)Arg1.01(1)Pro1.98(2)參考實(shí)施例125制備 Boc-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助700mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和161mg Boc-Gln-ONp重復(fù)參考實(shí)施例18的步驟，得到697mg(產(chǎn)率93.2%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)128-133℃。
參考實(shí)施例126制備 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助650mgBoc-Glu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和302mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，得到786mg(產(chǎn)率92.6%)上述目的產(chǎn)物。
溶點(diǎn)210-219℃(分解)。
參考實(shí)施例127制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助750mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和192mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，得到783mg(產(chǎn)率90.6%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)217-228℃(分解)。
氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.73(4)Ser1.93(2)Glu4.62(4)Gly2.01(2)Leu3.28(3)Lys2.05(2)Arg1.01(1)Pro1.99(2)
參考實(shí)施例128制備 Boc-Ala-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助650mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和74mg Boc-Ala-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，得到616mg(產(chǎn)率91.6%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)217-223℃。
參考實(shí)施例129制備 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助580mg Boc-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和229mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcGex)-Leu-OH重復(fù)參考實(shí)施例15的步驟，獲得754mg(產(chǎn)率101%)上述目的產(chǎn)物。
熔點(diǎn)237-141℃(分解)
參考實(shí)施例130制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用720mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和174mgBoc-Lys(cl-z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到619mg(產(chǎn)率75.1%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)207-238℃(分解)氨基酸分析Asp1.04(1)Thr3.94(4)Ser1.72(2)Glu4.23(4)Gly2.03(2)Ala0.95(1)Leu2.72(3)Lys1.66(2)Pro2.04(2)
參考實(shí)施例131制備 Boc-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用650mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和154mgBoc-Ser(Bzl)-OSu，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，得到648mg(產(chǎn)率92.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)214-220℃(分解)參考實(shí)施例132制備 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用600mg Boc-Ser(Bzl)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和209mgBoc-Ser(Bzl)-Glu(OcHex)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到759mg(產(chǎn)率99.5%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)228-236℃(分解)參考實(shí)施例133制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用720mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和155mgBoc-Lus(cl-z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到762mg(產(chǎn)率92.8%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)211-232℃(分解)氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.81(4)Ser2.84(3)Glu4.25(4)Gly1.97(2)Leu3.13(3)Lys1.99(2)Pro2.01(2)
參考實(shí)施例134制備 Boc-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2在冰冷卻條件下，將10.35gBoc-Val-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2溶于30mlTFA，室溫下攪拌該溶液30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，加入乙醚處理所得殘余物，過濾收集所沉淀的產(chǎn)物，減壓下用氫氧化鈉干燥，將該產(chǎn)物溶于100mlTHF，在冰冷卻條件下，用三乙胺中和該溶液，然后，向該溶液中加入5.36gBoc-Asp(OcHex)-OH，2.30gHOBT和3.10mlWSC，然后在冰冷卻條件下攪拌混合物2小時(shí)，接著在室溫下攪拌過夜。減壓濃縮反應(yīng)混合物，用300ml氯仿萃取所得殘余物。用1N鹽酸(100ml×2)、飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml×2)和飽和氯化鈉水溶液(100ml×2)依次洗滌氯仿層，然后用無水硫酸鎂干燥并減壓濃縮。加入乙醚使所得殘余物結(jié)晶，過濾所形成的結(jié)晶，得到11.05g(產(chǎn)率83.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)228-230℃。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr0.99(1)Gly2.01(2)Ala1.00(1)Val1.00(1)Pro1.01(1)
參考實(shí)施例135制備 Boc-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用10.00gBoc-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和5.50gBoc-Thr(Bzl)-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到10.29g(產(chǎn)率84.5%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)168-171℃。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr1.95(2)Gly2.03(2)Ala1.00(1)Val1.01(1)Pro1.02(1)參考實(shí)施例136制備 Boc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用10.00gBoc-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和5.79gBoc-Arg(Tos)-OH·CH3COOC2H5·1/5HO，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到11.55g(產(chǎn)率89.7%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)221-226℃。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr1.96(2)Gly1.99(2)Ala0.98(1)Val1.04(1)Arg1.01(1)Pro1.03(1)參考實(shí)施例137制備 Boc-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.00gBoc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和878mgBoc-Thr(Bzl)-Pro-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到2.00(產(chǎn)率82.8%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)199-201℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr2.96(3)Gly2.00(2)Ala0.99(1)Val1.00(1)Arg1.01(1)Pro2.04(2)參考實(shí)施例138制備 Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2將1.95gBoc-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2溶于6mlTFA，室溫下攪拌該溶液30分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，加入乙醚處理所得殘余物。過濾收集所沉淀的產(chǎn)物產(chǎn)并減壓下用氫氧化鈉干燥。加10mlDMF使上述產(chǎn)物溶解，然后在冰冷卻條件下用三乙胺中和，隨后加入639mgBoc-Gln-ONp和235mgHOBT，用N-甲基嗎啉維持混合物的PH并于室溫下攪拌18小時(shí)。加入60ml水處理反應(yīng)混合物，過濾收集所形成的沉淀，干燥后，用熱乙酸乙酯洗滌，得到2.02g(產(chǎn)率96.5%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)185-189℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr2.91(3)Glu1.03(1)Gly2.01(2)Ala1.00(1)Val1.00(1)Arg1.01(1)Pro2.03(2)參考實(shí)施例139制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.97gBoc-Gln-Thr(Bzl)-ProArg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和863mgBoc-Lys(cl-Z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到2.31g(產(chǎn)率95.7%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)177-182℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr2.96(3)Glu1.03(1)Gly2.03(2)Ala1.02(1)Val1.01(1)Leu0.99(1)Lys0.97(1)Arg0.98(1)Pro2.01(2)參考實(shí)施例140制備 Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.26g Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2，和626mgBoc-His(Tos)-OH和用HOSU代替HOBT，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到2.55g(產(chǎn)率99.7%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)168-175℃。
氨基酸分析
Asp1.02(1)Thr2.93(3)Glu1.03(1)Gly2.00(2)Ala1.04(1)Val1.02(1)Leu0.98(1)Lys0.93(1)His1.02(1)Arg1.01(1)Pro2.02(2)參考實(shí)施例141制備 Boc-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Glu-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.50g Boc-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和493mgBoc-Leu-Osu，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，得到2.31g(產(chǎn)率88.2%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)176-178℃。
氨基酸分析
Asp1.04(1)Thr3.04(3)Glu1.07(1)Gly2.07(2)Ala1.02(1)Val1.04(1)Leu1.78(2)Lys0.95(1)His0.87(1)Arg1.05(1)Pro2.08(2)參考實(shí)施例142制備 Boc-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.26g Boc-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和424mgBoc-Glu(OcHex)-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到2.33g(產(chǎn)率95.7%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)174-177℃。
氨基酸分析Asp1.07(1)Thr3.11(3)Glu1.86(2)Gly2.08(2)Ala1.04(1)Val1.06(1)Leu1.81(2)Lys0.96(1)His0.87(1)Arg1.06(1)Pro2.07(2)參考實(shí)施例143制備 Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.28g Boc-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和446mgBoc-Gln-ONp，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，得到2.19g(產(chǎn)率91.4%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)178-180℃。
氨基酸分析Asp1.08(1)Thr3.14(3)Glu2.70(3)Gly2.10(2)Ala1.06(1)Val1.07(1)Leu1.83(2)Lys0.97(1)His0.87(1)Arg1.08(1)Pro2.09(2)參考實(shí)施例144制備 Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.14g Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和393mgBoc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到1.30g(產(chǎn)率91.4%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)189-193℃。
氨基酸分析Asp1.07(1)Thr3.09(3)Ser0.75(1)Glu2.73(3)Gly2.13(2)Ala1.10(1)Val1.05(1)Leu2.79(3)Lys1.92(2)His0.79(1)Arg1.03(1)Pro2.08(2)參考實(shí)施例145制備 Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.00gBoc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和427mgBoc-Asn-Lys(cl-Z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到1.22g(產(chǎn)率94.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)168-173℃參考實(shí)施例146制備 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用800mg Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和301mgBoc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到965mg(產(chǎn)率95.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)236-243℃(分解)參考實(shí)施例147制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用850mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和197mgBoc-Lys(cl-Z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到871mg(產(chǎn)率90.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)230-245℃(分解)氨基酸分析Asp1.99(2)Thr2.90(3)Ser0.94(1)Glu3.10(3)Gly1.97(2)Ala1.00(1)Val1.00(1)Leu3.10(3)Lys2.03(2)Arg0.96(1)Pro2.02(2)參考實(shí)施例148制備 Boc-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用3.51gBoc-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.66gBoc-Gln-ONp，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，得到3.41g(產(chǎn)率87.9%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)192-195℃(分解)
參考實(shí)施例149制備 Boc-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用3.08gBoc-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和1.52gBoc-Thr-(Bzl)-Pro-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到3.21g(產(chǎn)率85.4%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)190-193℃(分解)參考實(shí)施例150制備 Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用3.15g Boc-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.16gBoc-Gln-ONp，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，得到3.07g(產(chǎn)率89.8%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)173-178℃。
參考實(shí)施例151制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
使用2.02g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和982mgBoc-Lys-(cl-z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到2.41g(產(chǎn)率95.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)204-209℃。
參考實(shí)施例152制備 Boc-Leu-His-Lys(cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.36g Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和639mgBoc-Leu-His-OH以及用HOSU，代替HOBT，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到2.46g(產(chǎn)率91.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)209-215℃。(分解)參考實(shí)施例153制備 Boc-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
使用1.82g Boc-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和498mgBoc-Glu(OcHex)-Osu，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，得到1.87g(產(chǎn)率95.9%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)209-217℃。(分解)參考實(shí)施例154制備 Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.87g Boc-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和404mgBoc-Gln-ONp，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，得到1.77g(產(chǎn)率90.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)200-217℃。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr2.96(3)Glu3.87(4)Gly2.02(2)Ala1.00(1)
Val1.01(1)Leu2.06(2)Lys1.03(1)His0.94(1)Pro2.08(2)參考實(shí)施例155制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用501mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和198mgBoc-Lys(cl-Z)-Leu-Ser(BZL)-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到554mg(產(chǎn)率92.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)230-241℃。(分解)氨基酸分析Asp1.02(1)Thr2.93(3)Ser0.78(1)Glu3.86(4)Gly2.01(2)Ala1.01(1)
Val1.01(1)Leu3.08(3)Lys2.12(2)His0.89(1)Pro2.07(2)參考實(shí)施例156制備 Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.55g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.21gBoc-Asn-Lys(cl-z)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到2.75g(產(chǎn)率81.5%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)207-214℃。
參考實(shí)施例157制備 Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
使用2.65g Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和887mgBoc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到3.09g(產(chǎn)率96.6%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)224-241℃。(分解)氨基酸分析Asp1.99(2)Thr2.90(3)Glu4.06(4)Gly1.99(2)Ala1.01(1)Val1.00(1)Leu2.04(2)Lys1.03(1)Pro1.98(2)
參考實(shí)施例158制備 Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.00g Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和336mgBoc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到1.08g(產(chǎn)率88.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)235-249℃(分解)氨基酸分析Asp2.01(2)Thr2.93(3)Ser0.84(1)Glu4.08(4)Gly2.00(2)Ala1.00(1)Val1.01(1)Leu3.01(3)Lys2.03(2)Pro1.92(2)
參考實(shí)施例159制備 Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用9.00gBoc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和5.67gBoc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl-Bzl)-Pro-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到12.28g(產(chǎn)率94.7%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)195-198℃。
參考實(shí)施例160制備 Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用12.00g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和2.65gBoc-Gln-ONp，重復(fù)與實(shí)施例18相同的步驟，得到12.48g(產(chǎn)率97.7%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)185-187℃(分解)參考實(shí)施例161制備 Boc-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用12.25g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和3.54gBoc-Lys-Osu，重復(fù)與參考實(shí)施例18相同的步驟，得到13.01g(產(chǎn)率93.2%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)179-182℃。
參考實(shí)施例162制備 Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用12.80g Boc-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
和3.24gBoc-His(Tos)-OH，以及用910mgHOSU代替HOBT，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到13.05g(產(chǎn)率91.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)171-176℃。
參考實(shí)施例163制備 Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-ALa-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用12.85g Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和4.05gBoc-Gln-Glu(OcHex)Leu-OH，以及用816mgHOSU代替HOBT，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到13.85g(產(chǎn)率92.4%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)177-180℃。
參考實(shí)施例164制備 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
使用13.60g Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和3.63gBoc-Lys(cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-OH，以及用592mgHOSU代替HOBT，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到14.87g(產(chǎn)率92.3%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)190-195℃。
參考實(shí)施例165制備Boc-Ser(Bzl)-Leu-OEt使用7.37gBoc-Ser(Bzl)-OH和5.00gH-Leu-OEt，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到7.53g(產(chǎn)率69.1%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
外觀油狀物。
參考實(shí)施例166制備Boc-Ala-Ser(Bzl)-Leu-OEt使用7.53gBoc-Ser(Bzl)-Leu-OEt和3.50gBoc-Ala-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到7.26g(產(chǎn)率82.9%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)97-97.5℃。
參考實(shí)施例167制備Boc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-OEt使用3.50gBoc-Ala-Ser(Bzl)-Leu-OEt和1.30gBoc-Gly-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例15相同的步驟，得到3.03g(產(chǎn)率77.8%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)134-135℃。
參考實(shí)施例168制備 Boc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-NHNH2使用3.00gBoc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-OEt，重復(fù)與參考實(shí)施例6相同的步驟，得到2.61g(產(chǎn)率89.2%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)195-197℃。
參考實(shí)施例169制備Boc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl使用2.56gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl和2.00gBoc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-NHNH2，重復(fù)與參考實(shí)施例7相同的步驟，得到3.13g(產(chǎn)率76.8%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)209-212℃。
使用3.10gBoc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl，重復(fù)與參考實(shí)施例8相同的步驟，得到2.17g(產(chǎn)率78.2%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)150-154℃。
參考實(shí)施例171制備
復(fù)與參考實(shí)施例9相同的步驟，得到1.90g(產(chǎn)率97.9%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)124-130℃。
參考實(shí)施例172
和1.20gBoc-Val-Leu-Gly-OH，重復(fù)與參考實(shí)施例13相同的步驟，得到1.90g(產(chǎn)率84.0%)上述標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)217-220℃。
實(shí)施例1
將150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2溶于2mlTFA，然后將該溶液在室溫下放置40分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混合物，向所得殘余物中加入乙醚，過濾收集所形成的沉淀，并在減壓下用氫氧化鈉干燥。將干燥的殘余物溶于2mlDMF并在冰冷卻條件下用三乙胺中和該溶液。接著，向該混合物
將混合物的PH調(diào)至PH7，將整個(gè)混合物在冰冷卻條件下攪拌18小時(shí)，再于室溫下攪拌18小時(shí)，將50ml水加到反應(yīng)混合物中，過濾收集所形成的沉淀，干燥，用20ml熱乙酸乙酯洗滌，得到180mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
在冰冷卻條件下，將150mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物與15ml氟化氫和1.5ml茴香醚一起攪拌60分鐘。然后在冰冷卻條件下，減壓蒸發(fā)除去氟化氫，用乙醚洗滌所得殘余物，然后溶于10ml1M乙酸，接著冷干，得到86mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在下列條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到11.6mg標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
柱ODS-120T(21.5mmI.D.×30cm，日本，東京，TOSOh公司生產(chǎn))洗脫方法線型濃度梯度洗脫(40分鐘)洗脫劑0.1%TFA水溶液90%乙腈/0.1%TFA水溶液(80∶20)→(30∶70)速度15ml/分檢測(cè)在UV210nm處氨基酸分析Asp2.00(2)Thr4.76(5)Ser3.62(4)Glu4.10(4)Gly3.98(4)Val1.01(1)Leu5.06(5)Tyr0.98(1)Lys1.99(2)His1.02(1)Arg1.02(1)Pro2.07(2)
實(shí)施例2
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到170mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
取150mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，用氟化氫和茴香醚處理(處理方法同實(shí)施例1)，得到100mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到8.7mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.00(2)Thr4.82(5)Ser3.67(4)Glu4.13(4)Gly3.98(4)Leu4.04(4)Tyr0.98(1)
Lys1.98(2)His1.01(1)Arg1.01(1)Pro2.06(2)Val0.99(1)實(shí)施例3
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到180mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
取150mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理，得到110mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到25.5mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析
Asp2.01(2)Thr4.77(5)Ser3.64(4)Glu4.07(4)Gly3.98(4)Val1.01(1)Leu5.09(5)Lys2.01(2)His0.99(1)Arg0.99(1)Pro2.09(2)實(shí)施例4
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到190mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
取150mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理，得到102mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到17.7mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.97(3)Thr4.75(5)Ser3.68(4)Glu4.13(4)Gly4.04(4)Val0.99(1)Leu5.09(5)Lys1.99(2)Arg1.00(1)Pro2.04(2)實(shí)施例5
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到170mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
取160mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理，得到100mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到8.5mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.83(3)Thr4.77(5)Ser2.81(3)Glu3.10(3)Gly3.02(3)Val0.98(1)Leu5.03(5)Tyr0.98(1)Lys1.99(2)His1.00(1)Arg0.99(1)Pro2.12(2)Acp0.88(1)實(shí)施例6
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和51mg，
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到170mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
取160mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理，得到80mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到7.7mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.78(3)Thr4.84(5)Ser2.81(3)Glu3.09(3)Gly3.00(3)Val0.97(1)Leu4.03(4)Tyr0.97(1)
Lys1.98(2)His1.01(1)Arg1.01(1)Pro2.09(2)Acp0.81(1)實(shí)施例7
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和54mg，
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到160mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理160mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，得到104mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到15.1mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析
Asp2.79(3)Thr4.84(5)Ser2.82(3)Glu3.03(3)Gly3.02(3)Val1.00(1)Leu5.15(5)Lys2.04(2)His0.98(1)Arg0.99(1)Pro1.94(2)Acp0.82(1)實(shí)施例8
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到180mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理150mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，得到100mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到19.3mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.89(5)Ser3.77(4)Glu5.14(5)Gly3.96(4)Val0.94(1)Leu5.03(5)Lys2.02(2)His0.99(1)Pro2.03(2)實(shí)施例9
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到190mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理150mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，得到104mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到13.4mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp3.03(3)Thr4.83(5)Ser3.72(4)Glu5.10(5)Gly3.93(4)Val0.95(1)Leu5.08(5)Lys2.06(2)Pro2.02(2)實(shí)施例10
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到180mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理150mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，得到74mg粉狀物。
取50mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到14.9mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.86(5)Ser3.78(4)Glu4.12(4)Gly4.97(5)Val0.93(1)Leu5.10(5)Lys2.02(2)Arg0.98(1)Pro1.94(2)
實(shí)施例11
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到170mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理150mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，得到105mg粉狀物。
取30mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到11.2mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.99(3)Thr4.86(5)Ser3.78(4)Glu4.11(4)Gly3.01(3)Val0.97(1)Leu4.99(5)
Lys2.02(2)His1.00(1)Pro2.06(2)β-Ala1.00(1)實(shí)施例12
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1相同的步驟，得到170mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物。
按實(shí)施例1的方法，用氟化氫和茴香醚處理150mg被保護(hù)肽的粗產(chǎn)物，得到98mg粉狀物。
取30mg粉狀物，在與實(shí)施例1相同的條件下，用高效液相色譜法進(jìn)行純化和測(cè)定，得到9.6mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析
Asp2.04(2)Thr4.92(5)Ser3.85(4)Glu3.13(3)Gly3.04(3)Val0.97(1)Leu5.05(5)Lys1.97(2)His1.01(1)Arg1.01(1)Pro2.01(2)Cpc0.71(1)實(shí)施例13
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)與實(shí)施例1中的同樣步驟，得到150mg被保護(hù)肽粗產(chǎn)物。
將150mg該保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物按實(shí)施例1所述用氟化氫和苯甲醚處理，得到100mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉狀物，在如實(shí)施例1的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到10.5mg上述產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.02(2)Thr4.85(5)Ser2.78(3)Gly3.02(3)Val0.99(1)Leu5.05(5)Lys2.04(2)His1.00(1)Arg1.00(1)Pro2.04(2)Abu1.22(1)
Cec和Glu不能檢測(cè)出，因?yàn)轱@示它們的峰重疊了。
實(shí)施例14
Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-Asn-Lys-Leu-Gln-Thr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到170mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將150mg該保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物用實(shí)施例1所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到94mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的相同條件下，通過高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到8.1mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Pro2.00(2)Asp3.02(3)Thr4.86(5)Ser3.83(4)
Glu3.15(3)Gly3.03(3)Leu5.05(5)Lys2.05(2)Arg1.00(1)Val和Tyr(CHCOOH)未檢測(cè)到，因?yàn)轱@示它們的峰重疊了。
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和59.0mg，
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到160mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將150mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到96mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的相同條件下，通過高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到7.2mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp3.02(3)Thr4.83(5)Ser2.82(3)Glu4.13(4)Gly3.02(3)Val1.01(1)Leu5.07(5)Lys2.87(3)Pro2.06(2)實(shí)施例16
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到160mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將150mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到81mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到7.2mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.84(5)Ser3.77(4)Glu4.12(4)Gly5.96(6)Leu5.02(5)Lys2.04(2)Arg0.99(1)Pro2.02(2)實(shí)施例17
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，結(jié)果得到160mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將150mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到93mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的相同條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到5.9mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.03(2)Thr4.80(5)Ser3.78(4)Glu4.13(4)Gly4.99(5)Ile1.00(1)Leu5.06(5)Lys2.03(2)Arg0.96(1)Pro1.99(2)實(shí)施例18制備
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到192mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將190mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到138mg粉末狀物質(zhì)。
取50mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的相同條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到6.1mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性成份。
氨基酸分析Asp2.00(2)Thr4.71(5)Ser3.69(4)Glu4.12(4)Gly3.92(4)Ala0.99(1)
Val1.00(1)Leu4.96(5)Lys2.04(2)Arg0.99(1)Pro1.97(2)實(shí)施例19
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到196mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將196mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到124mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到7.3mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.10(2)Thr4.82(5)Ser4.60(5)Glu4.11(4)Gly3.98(4)Val1.05(1)Leu4.93(5)Lys2.03(2)Arg1.02(1)Pro2.05(2)實(shí)施例20
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到189mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將150mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到101mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到4.9mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.00(2)Thr4.84(5)Ser3.70(4)Glu4.13(4)Gly3.94(4)Val0.97(1)Leu6.00(6)Lys2.04(2)Arg1.03(1)Pro2.05(2)實(shí)施例21
用150mg
Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到186mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將150mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到107mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到8.8mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.81(5)Ser3.66(4)Glu5.15(5)Gly3.95(4)Val0.99(1)Leu5.01(5)Lys2.05(2)Arg1.01(1)Pro2.02(2)
實(shí)施例22
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到160mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將150mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到106mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到5.2mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.85(5)Ser3.76(4)Glu5.15(5)Gly3.95(4)Ala1.01(1)
Val0.97(1)Leu4.99(5)Lys2.03(2)Pro2.04(2)實(shí)施例23
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到160mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將150mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到104mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到8.1mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.85(5)Ser4.74(5)Glu5.17(5)Gly4.00(4)Val0.96(1)Leu4.99(5)Lys2.02(2)Pro2.01(2)實(shí)施例24
用50mg Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的步驟，得到60mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將60mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到40mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到5.8mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp1.02(1)Thr3.92(4)Ser2.87(3)Glu4.10(4)Gly5.00(5)Ala2.04(2)Val1.96(2)Leu5.00(5)Lys2.02(2)Arg1.00(1)Pro2.06(2)實(shí)施例25
用50mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-ALa-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到50mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將50mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到40mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到6.4mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp1.98(2)Thr3.89(4)Ser2.87(3)Glu4.15(4)Gly4.03(4)Ala2.03(2)Val1.98(2)Leu5.07(5)Lys2.03(2)Arg1.00(1)Pro1.96(2)
實(shí)施例26
用50mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到50mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將50mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到40mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀產(chǎn)物，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到8.7mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr3.86(4)Ser2.83(3)
Glu5.06(5)Gly4.00(4)Ala2.02(2)Val2.02(2)Leu5.02(5)Lys2.03(2)His0.99(1)Pro2.02(2)實(shí)施例27
用50mg Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到50mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將50mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到38mg粉末狀物質(zhì)。
取30mg上面得到的粉末狀產(chǎn)物，在如實(shí)施例1中的同樣條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到6.1mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp1.99(2)Thr3.87(4)Ser2.85(3)Glu5.12(5)Gly4.03(4)ALa2.03(2)Val1.99(2)Leu5.04(5)Lys2.03(2)Pro2.05(2)實(shí)施例28
用50mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到42mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將42mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用實(shí)施例1中所述的氟化氫和苯甲醚處理，得到30mg粉末狀物質(zhì)。
在如實(shí)施例1的同樣條件下，將該30mg粉末物質(zhì)用高效液相色譜進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到7.2mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.90(4)Ser2.85(3)Glu4.10(4)Gly4.01(4)Ala2.03(2)Val2.02(2)Leu4.00(4)Tyr1.00(1)Lys2.02(2)His1.00(1)Arg1.01(1)Pro2.04(2)
實(shí)施例29
用100mg Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OBzl)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(Obzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到123mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將100mg該保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用氟化氫和苯甲醚處理，得到71mg粉末狀物質(zhì)。
取40mg該粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的相同條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到5.9mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr3.87(4)
Ser2.89(3)Glu4.09(4)Gly4.06(4)Ala2.05(2)Val2.00(2)Leu5.05(5)Tyr0.89(1)Lys2.01(2)His0.97(1)Arg0.99(1)Pro2.01(2)實(shí)施例30
用100mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重復(fù)實(shí)施例1中的同樣步驟，得到139mg保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物。
將100mg該保護(hù)的肽的粗產(chǎn)物，用氟化氫和苯甲醚處理，得到78mg粉末狀物質(zhì)。
取40mg該粉末狀物質(zhì)，在如實(shí)施例1中的相同條件下，用高效液相色譜對(duì)其進(jìn)行純化和檢測(cè)，結(jié)果得到8.5mg上述標(biāo)題產(chǎn)物的活性粉末。
氨基酸分析Asp0.98(1)Thr3.88(4)Ser2.88(3)Glu4.10(4)Gly4.06(4)Ala2.04(2)Val2.01(2)Leu5.02(5)Lys2.03(2)His0.98(1)Arg1.00(1)Pro2.03(2)生物活性試驗(yàn)-Ⅰ將上述實(shí)施例得到的每個(gè)多肽衍生物用作試驗(yàn)樣品并用1%乙酸鈉水溶液(含0.1%牛血清白蛋白，PH為5.0)將其稀釋到一適宜濃度，然后以0.2ml/100g體重的劑量靜脈給藥于wister雄性大鼠(體重約180g)。給藥1小時(shí)后，用乙醚麻醉該大鼠，從其腹靜脈的血中取血清樣品。
用生化自化分析儀(COBASBIO，manufacturedbyHoffmann-LaRoehe&Co.，A.G.)，通過OCPC(鄰甲酚酞復(fù)合酮)法的測(cè)熱步驟〔BUNSEKI-KAGAKU-SHIM-PO-SOHSETSU(ReviewofProgressinAnalyticalChemistry)，Vol，17，pp.127-136，(1968)byMasayukiSaitoh;AmericanJournalofClinicalPathology，Vol.45，pp.290-296，(1966)byConnerty，H.V.，和Briggs，A.R.;RINSHOH-BYOHRI(ClinicalPathology)，Vol.17，SupplementolIssue，pp.85(1969)byEtsukoYoshidal〕檢測(cè)每一血清樣品中的鈣濃度。
將給藥的大鼠血清樣品中鈣濃度與末給本發(fā)明試驗(yàn)用多肽衍生物的對(duì)照組大鼠的血清樣品中鈣濃度比較，結(jié)果表明，試驗(yàn)組大鼠血清樣品中的鈣濃度(本發(fā)明試驗(yàn)用多肽衍生物樣品來自各個(gè)實(shí)施例)隨試驗(yàn)樣品劑量的增加而逐漸降低。
試驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠血清樣品中鈣濃度(mg/dl)見下面表1。
表1試驗(yàn)樣品的劑量(ng/kg)試驗(yàn)組對(duì)照組作為試驗(yàn)樣6.2512.525.00品的多肽的實(shí)施例號(hào)血清樣品中的鈣濃度(mg/dl)實(shí)施例19.048.167.6210.68實(shí)施例38.787.817.189.84實(shí)施例48.517.806.749.74實(shí)施例78.657.707.399.69實(shí)施例88.587.947.409.69實(shí)施例108.757.837.449.69實(shí)施例118.928.097.9110.50實(shí)施例129.228.087.6310.43實(shí)施例138.848.287.6610.50實(shí)施例149.057.957.7210.50實(shí)施例158.868.107.6510.43實(shí)施例179.288.067.5910.43實(shí)施例188.977.807.3410.09
實(shí)施例199.247.807.3310.09實(shí)施例208.967.957.2310.09實(shí)施例218.897.907.4910.50實(shí)施例229.378.367.5610.35實(shí)施例238.888.407.3310.35實(shí)施例249.028.007.2010.35實(shí)施例259.317.647.0710.35實(shí)施例269.228.297.6210.30實(shí)施例278.848.297.6210.30實(shí)施例289.118.017.449.99實(shí)施例299.358.577.729.99實(shí)施例309.028.147.319.99從表1中的結(jié)果可清楚地看到，本發(fā)明的任何一種多肽衍生物都具有良好的抵抗血清樣品中鈣濃度的活性。
〔生物活性試驗(yàn)-Ⅲ〕本發(fā)明實(shí)施例得到的每個(gè)多肽衍生物和含包們的鈣代謝改善劑的腸吸收能力如下進(jìn)行試驗(yàn)。
每試驗(yàn)組有3-4只Wister雄性大鼠(平均體重約250g，并空腹)用作試驗(yàn)動(dòng)物。每只大鼠通過腹膜內(nèi)給藥，以40mg/kg的劑量，用戊巴比妥將其麻醉，然后通過大鼠的腹部，以0.5ml/100g的劑量將試驗(yàn)樣品溶液十二指腸內(nèi)給表2作為試驗(yàn)樣品的添加劑(蛋白血清中多肽的實(shí)施例號(hào)分解酶抑制劑+枸椽酸鈣濃度(1，000ng/kg)inhibitor)(50mg/kg)(mg/dl)實(shí)施例3SBTI+枸椽酸8.40(20mg/kg)(50mg/kg)實(shí)施例8抑肽酶7.70(20mg/kg)+″″11Urinastatin8.06(50，000U/kg)+″″12Camostat甲磺酸鹽7.21(20mg/kg)+″″13加貝酯甲磺酸鹽7.48(20mg/kg)+″″15Camostat甲磺酸鹽7.46(20mg/kg)+″″17加貝酯甲磺酸鹽7.28(20mg/kg)+″″18Nafamostat甲磺酸鹽7.37(20mg/kg)+″″21FK-4487.47(20mg/kg)+″″23抑糜朊酶素7.71(20mg/kg)+″″24Nafamostat甲磺酸鹽7.42(20mg/kg)+″″28亮肽素7.54(20mg/kg)+″″30FK-4487.63(20mg/kg)+″″15(不加)+(不加)9.83藥。給藥后1小時(shí)，將大鼠用乙醚麻醉，然后從腹靜脈血中取得血清樣品。
用生化自動(dòng)分析儀(COBASBIO，manufacturedbyHoffmann-LaRoche&Co.，A.G.)，通過OCPC(鄰甲酚酞復(fù)合酮)法的測(cè)熱步驟〔AmericanJournalofClinicalPathologyVol.45，PP.290，(1966)byConnerty，H.V.，和Briggs，A.R.〕檢測(cè)每個(gè)血清樣品中的鈣濃度(mg/dl)。
試驗(yàn)樣品溶液的制備將用作標(biāo)題藥物組合物(用作鈣代謝改善劑)的添加劑的蛋白分解酶抑制劑和枸椽酸溶解或懸浮在蒸餾水中，由此得到的溶液或懸浮液與用1%乙酸鈉水溶液(含0.1%牛血清白蛋白(BAS)，PH為5.0)稀釋到一定濃度的多肽衍生物水溶液相混合，由此得到的混合物用作十二指腸內(nèi)給藥的試驗(yàn)樣品溶劑。
每只試驗(yàn)大鼠(每個(gè)試驗(yàn)組有3-4只大鼠)血清中的鈣濃度平值值(mg/dl)見下面表2。
從表2中數(shù)據(jù)可明顯看到，當(dāng)所述多肽衍生物與蛋白分解酶抑制劑及酸一起合用時(shí)，實(shí)施例所制備的多肽衍生物通過腹內(nèi)給藥可達(dá)到良好的降低血清中鈣濃度的作用。
藥物制劑-1的實(shí)施例將300單位實(shí)施例1制備的化合物與150mg亮肽素混合，往該混合物中加入適當(dāng)量的結(jié)晶纖維素，羧甲基纖維素鈣，羥丙纖維素和硬脂酸鎂，然后將整個(gè)混合物充分混合以使該混合物成為均一的組合物。將所述混合物壓片，然后通過腸包衣法將它們制成腸包衣的片劑。
藥物制劑-2的實(shí)施例將400單位實(shí)施例24制備的化合物與300mg抑糜朊酶素混合，往該混合物中加入適量的結(jié)晶纖維素，羧甲基纖維素鈣和滑石，然后將整個(gè)混合物充分混合從而制成均勻組份的混合物。將所述混合物填充入明膠囊。用腸包衣法將所得到的填充的膠囊制成腸包衣的膠囊。
藥物制劑-3的實(shí)施例將50單位實(shí)施例12制備的化合物與50mg抑肽酶混合，往該混合物中加入適量WitepsolH-15(脂肪酸甘油脂的商標(biāo)名，DynamitNobel公司制造)，從而將該混合物制成栓劑。
藥物制劑-4的實(shí)施例將350單位實(shí)施例25制備的化合物溶于枸椽酸鈉水溶液中，然后加1N鹽酸將該溶液PH調(diào)至7.4，往上述溶液中加入注射用純水，從而制得注射制劑。
藥物制劑-5的實(shí)施例將300單位實(shí)施例20制備的化合物和200mgCamostat甲磺酸鹽溶于乳酸水溶液中，加1N氫氧化鈉水溶液將該溶液的PH調(diào)至7.0，然后往上述溶液中加入適量水，以制備適用于鼻途徑給藥的液體制劑。
權(quán)利要求
1.由通式(1)或(2)代表的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，
在式(1)中，(A)為低級(jí)亞烷基；(B)為-NHCO-，-S-或羥亞苯基；(D)為低級(jí)亞烷基；(E)為纈氨酸殘基，甘氨酸殘基或異亮氨酸殘基；(F)為組氨酸殘基，天冬酰胺殘基，甘氨酸殘基，丙氨酸殘基，絲氨酸殘基，亮氨酸殘基或谷氨酰胺殘基；(G)為精氨酸殘基或谷氨酰胺殘基；l，m和n分別為0或1；其條件是當(dāng)l為0，(A)為亞甲基時(shí)，D為亞甲基或亞乙基；在式(2)中，(A′)為低級(jí)亞烷基；(B′)為-NHCO-；(D′)為低級(jí)亞烷基；(G′)為組氨酸殘基，天冬酰胺殘基或甘氨酸殘基；(H′)為精氨酸殘基或谷氨酰胺殘基；p和q分別為0或1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽衍生物由通式(1)
代表，式中(A)，(B)，(D)，(E)，(F)，(G)，l，m和n均如上所定義。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽衍生物由通式(2)
代表，式中(A′)，(B′)，(D′)，(G′)，(H′)p和q均如上所定義。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽衍生物由通式(3)
代表，式中(A)為低級(jí)亞烷基;(B′)為-NHCO-;(D)為低級(jí)亞烷基;(F′)為組氨酸殘基，天冬酰胺殘基或甘氨酸殘基;(G)為精氨酸殘基或谷氨酰胺殘基;l，m和n分別為0或1。
5.根據(jù)權(quán)利要求2的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽為下面的通式
(實(shí)施例18)
6.根據(jù)權(quán)利要求2的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽衍生物為下面的多肽
(實(shí)施例11)，
(實(shí)施例12)，
(實(shí)施例13)，
(實(shí)施例14)，和
(實(shí)施例15)。
7.根據(jù)權(quán)利要求2的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽衍生物為下面的多肽。
(實(shí)施例17)，
(實(shí)施例19)，
(實(shí)施例20)，
(實(shí)施例21)，
(實(shí)施例22)和
(實(shí)施例23)。
8.根據(jù)權(quán)利要求2的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽衍生物為下式的多肽
(實(shí)施例4)。
9.根據(jù)權(quán)利要求2的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該衍生物為下式的多肽
(實(shí)施例8)。
10.根據(jù)權(quán)利要求2的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽衍生物是下式多肽
(實(shí)施例10)
11.根據(jù)權(quán)利要求2的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽衍生物是下面的多肽
(實(shí)施例3)，
(實(shí)施例7)和
(實(shí)施例9)。
12.根據(jù)權(quán)利要求3的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，其中該多肽衍生物是下面的多肽
(實(shí)施例24)，
(實(shí)施例25)和
(實(shí)施例27)。
13.通式(3)代表的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物，
其中(A′)為低級(jí)亞烷基;(B′)為-NHCO-;(D′)為低級(jí)亞烷基;R為活性羧基或羥基，或-Val-Leu-Gly-R′(R′為活性的羧基或羥基)。
14.制備權(quán)利要求1中的由通式(1)和(2)代表的多肽衍生物的方法，該方法特征在于通過將氨基酸與氨基酸序列中具有上述化學(xué)結(jié)構(gòu)的另一個(gè)未端氨基酸逐步縮合以延長(zhǎng)序列中的酰氨鍵(肽鍵)，從而制備線性多肽，或者首先將上述化學(xué)結(jié)構(gòu)的多肽分成幾個(gè)片段，然后分別合成每一個(gè)片段，再將這些片段縮合來制備多肽，或在所述步驟中，利用環(huán)合反應(yīng)步驟，通過將在上述制備線性多肽步驟中形成的N-未端氨基酸的游離官能基與通式(1)和(2)氨基酸序列中第7個(gè)氨基酸的側(cè)鏈官能基或其相關(guān)化合物的側(cè)鏈功官團(tuán)進(jìn)行縮合。
15.利用權(quán)利要求1中的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物治療高鈣血的藥物組合物。
16.用于改善鈣代謝的藥物組合物，其特征在于其含由通式(1)或(2)代表的至少一種多肽衍生物，其酸加成鹽或其復(fù)合物作為活性成份及蛋白分解酶抑制劑和/或藥用酸。
17.用多肽衍生物，其酸加成鹽或其復(fù)合物治療高鈣血的藥物組合物，該多肽選自下面的多肽
(實(shí)施例4)，
(實(shí)施例8)，
(實(shí)施例10)，和
(實(shí)施例18)。
18.治療高鈣血的方法，其包括服用有效量的由權(quán)利要求1中通式(1)或(2)代表的多肽衍生物，其酸加成鹽或其復(fù)合物。
19.將權(quán)利要求1中通式(1)或(2)代表的多肽衍生物，其酸加成鹽或其復(fù)合物用于制備用來治療高鈣血的藥物組合物。
全文摘要
具有抑制骨鈣吸收，降低血鈣濃度及作為鎮(zhèn)痛藥能抑制胃汁分泌活性的新的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物。改善鈣代謝劑可通過將至少一種新的多肽衍生物，其酸加成鹽和其復(fù)合物與蛋白分解酶抑制劑和/或藥用酸混合來制備。改善鈣代謝劑是治療高血鈣十分有效的藥物及鎮(zhèn)痛劑，抗?jié)儎┑取?br> 文檔編號(hào)C07K7/02GK1047086SQ9010138
公開日1990年11月21日 申請(qǐng)日期1990年3月16日 優(yōu)先權(quán)日1989年3月16日
發(fā)明者藤井節(jié)郎, 山本榮仁, 清水文夫, 稻井正敏, 木下直純, 申村靜夫, 廣橋滿, 坂本貴, 堤一彥, 白板哲彥 申請(qǐng)人:大制藥株式會(huì)社, 株式會(huì)社大制藥工場(chǎng)