專利名稱：一種5′-肌苷酸二鈉的一步提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及屬于5'-肌苷酸二鈉提取技術(shù)，特別是涉及一種5'-肌苷酸二鈉的一步提取方法。
背景技術(shù)：
5'-肌苷酸二鈉，別名肌苷酸鈉(以下簡稱IMP)，性狀為無色至白色的結(jié)晶，或白色結(jié)晶性粉末。味鮮，鮮味閾值為0. 025g/100ml，鮮味強度低于鳥苷酸鈉，但二者有明顯協(xié)同作用，當(dāng)二者以1 :1混合與0. 8%谷氨酸鈉并用，其鮮味比一般味精高出40 100倍，且風(fēng)味更好。溶于水，水溶液穩(wěn)定，呈中性，在酸性溶液中易分解，失去呈味力。中國專利CN1539846A提到的5'-核苷酸二鈉的制備工藝中，磷酰反應(yīng)結(jié)束后采用冰鹽水進行水解，水解液靜止分層，分離水層和有機層，將水層在冷卻下用50%Na0H溶液調(diào)節(jié)PH彡13，于0°C結(jié)晶過濾除去磷酸鈉，溶液用濃鹽酸中和至pH=8 9，減壓濃縮后冷卻到0 5°C，過濾得到IMP的粗品，再用水重結(jié)晶，得到IMP成品。該方法由于溶液減壓濃縮冷卻抽濾，產(chǎn)品中含有大量無機鹽，純度不高，需要多次重結(jié)晶來提高濃度。工藝復(fù)雜、收率低、生產(chǎn)成本高。中國專利CN1616475A中提出5'-胞苷-磷酸的制備工藝中，磷?；磻?yīng)結(jié)束，再經(jīng)水解、蒸餾后，將水相調(diào)到pH=3 4冷凍結(jié)晶，產(chǎn)品經(jīng)過二次結(jié)晶后純度雖然可以達到 98%以上，但該方法工藝復(fù)雜，收率很低。KR9500259提出采用控制關(guān)鍵點滲析結(jié)晶鳥苷-磷酸，起始溶液pH控制在8. 4 8. 6，通過添加甲酸或乙醇提高溶液過飽和度，在晶核即將產(chǎn)生時改變流加形式和速度得到 5'-鳥苷酸鈉晶體。該方法結(jié)晶過程不易控制，消耗多余的有機溶劑，增加了成本和后處理難度。中國專利CN1861624A中提到了一種5'-核苷-磷酸鈉鹽的結(jié)晶方法，該方法在pH 值為5. 0 9. 0和質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為5 30%濃度的5'-核苷-磷酸水溶液中，加入溶質(zhì)質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為110%的無機鈉鹽和起始5'-核苷-磷酸水溶液體積0. 5 10倍的溶析劑來結(jié)晶析出5'-核苷-磷酸鈉鹽晶體。該方法在工業(yè)大生產(chǎn)中產(chǎn)生大量的無機鈉鹽，耗用作為溶析劑的有機溶劑，增加了成本，達不到節(jié)能環(huán)保的目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為解決上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種簡便的5'-肌苷酸二鈉的一步提取方法，其操作工藝簡化，設(shè)備投入減少，溶劑消耗降低，具有節(jié)能環(huán)保的優(yōu)點。本發(fā)明解決技術(shù)問題所采取的技術(shù)方案是一種5'-肌苷酸二鈉的一步提取方法，提取過程為在肌苷與磷酸三乙酯(以下簡稱TEP)磷?；磻?yīng)后降溫，進行低溫?zé)o鹽水解；低溫?zé)o鹽水解終止后，在-10°C 5°C之間，滴加質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液，HpH 回調(diào)至5.0左右且料液出現(xiàn)濁點，即有5'-肌苷酸二鈉乳狀微晶析出；繼續(xù)滴加質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液，當(dāng)pH上升到8. 0 8. 5時養(yǎng)晶；然后快速進行晶體抽濾；將5'-肌苷酸二鈉結(jié)晶濾餅用相同體積的體積百分含量為80% 85%且溫度為0°C 5°C的乙醇洗滌2 3次；減壓烘干，得到5'-肌苷酸二鈉產(chǎn)品。在上述提取過程中，當(dāng)?shù)渭淤|(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液，使pH回調(diào)至5. 0左右且料液出現(xiàn)濁點時，可以添加5'-肌苷酸二鈉母晶。作為一種優(yōu)選，所述的養(yǎng)晶是在-5 °C 0 V間維持30 60分鐘。作為一種優(yōu)選，所述的晶體抽濾在保持磷酸三乙酯不分層的條件下進行，溫度控制在與結(jié)晶溫度一致，即-10°c 5°C。在本發(fā)明中，低溫?zé)o鹽水解保證了一次提取成品合格率，結(jié)晶溫度控制在-10°C 5°C之間。結(jié)晶溫度影響所需結(jié)晶粉體晶體的粗細，溫度低于_5°C結(jié)晶所得粉體細，相反結(jié)晶溫度高，則結(jié)晶晶體呈現(xiàn)較粗的現(xiàn)象?；卣{(diào)PH5. 0左右時料液出現(xiàn)濁點，低溫條件下養(yǎng)晶，晶體抽濾得到的濾液即時檢測PH應(yīng)大于7. 0，最佳pH7. 0 8. 0之間。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明一種5'-肌苷酸二鈉的一步提取方法，在水解結(jié)束后， 省去了無機鹽和溶析劑的加入，簡化了工藝流程，節(jié)約了生產(chǎn)成本，提高了產(chǎn)品收率。與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點。1.節(jié)約了 NaCl鹽和乙醇的用量，結(jié)晶過程中不使用鹽析和溶析劑，直接控制pH 值在溶液中一步析出大部分IMP結(jié)晶，減少了工藝環(huán)節(jié)，達到節(jié)約成本的目的。2.減少了重結(jié)晶的次數(shù)，一次性結(jié)晶析出的IMP晶體晶形完整，用體積百分含量為80% 85%的冷乙醇可以洗去附著的TEP溶劑和少量的無機鹽，提高了成品的純度，省去了重結(jié)晶的步驟，進一步提高了結(jié)晶收率。
具體實施例方式實施例1
用27. 22g肌苷進行磷?；磻?yīng)，轉(zhuǎn)化率96%，結(jié)束后向反應(yīng)液中緩慢加入450ml冰水水解，水解時間30 min，溫度最終為-5°C。用質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液中和，當(dāng)pH 值>5. 0時，料液出現(xiàn)混濁，有晶體析出。繼續(xù)滴加質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液，穩(wěn)定料液PH值=8. 3，養(yǎng)晶30 min0快速抽濾后，濾餅用體積百分含量為85%且溫度為0°C的冷乙醇清洗三次，每次用量200ml。一次結(jié)晶經(jīng)真空干燥后得到晶粉46. 4g，結(jié)晶收率90. 3%， HPLC 效價 99. 4%,水分 23. 2%。實施例2:
用27. 22g肌苷進行磷?；磻?yīng)，反應(yīng)結(jié)束加入450ml冰水，水解20 min，溫度最終為 O0C。用質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液中和至pH=8. 0，再少量滴加質(zhì)量百分含量為40%的 NaOH溶液穩(wěn)定pH值，養(yǎng)晶1小時?？焖俪闉V，濾餅用體積百分含量為80%且溫度為5°C的冷乙醇清洗三次，每次用量200ml。一次結(jié)晶經(jīng)真空干燥后得到晶粉44. 6g，結(jié)晶收率85. 6%， HPLC 效價 98. 0%,水分 24. 5%。實施例3:
用27. 22g肌苷進行磷酰化反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束加入450ml冰水水解1小時，溫度最終為_5°C。用質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液中和至pH=5時，加入少量晶粉(肌苷酸二鈉結(jié)晶)作為晶核，加快晶粉的析出，繼續(xù)用質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH=8. 2， 養(yǎng)晶1小時后(溫度控制彡0°C)，快速抽濾，濾餅用體積百分含量為85%且溫度為2°C的冷乙醇清洗三次，每次用量200ml。一次結(jié)晶經(jīng)真空干燥后得到晶粉47. 5g，結(jié)晶收率90. 7%， HPLC 效價 97. 5%,水分 22. 5%。
權(quán)利要求
1.一種5'-肌苷酸二鈉的一步提取方法，其特征在于，提取過程為在肌苷與磷酸三乙酯磷?；磻?yīng)后降溫，進行低溫?zé)o鹽水解；低溫?zé)o鹽水解終止后，在-10°C 5°C之間，滴加質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液，使pH回調(diào)至5. 0左右且料液出現(xiàn)濁點，即有5'-肌苷酸二鈉乳狀微晶析出；繼續(xù)滴加質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液，當(dāng)pH上升到8. 0 8. 5時養(yǎng)晶；然后快速進行晶體抽濾；將5'-肌苷酸二鈉結(jié)晶濾餅用相同體積的體積百分含量為 80% 85%且溫度為0°C 5°C的乙醇洗滌2 3次；減壓烘干，得到5'-肌苷酸二鈉產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一步提取方法，其特征在于，當(dāng)?shù)渭淤|(zhì)量百分含量為40%的 NaOH溶液，使pH回調(diào)至5. 0左右且料液出現(xiàn)濁點時，添加5'-肌苷酸二鈉母晶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一步提取方法，其特征在于，所述的養(yǎng)晶是在_5°C 0°C間維持30 60分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一步提取方法，其特征在于，所述的晶體抽濾在保持磷酸三乙酯不分層的條件下進行，溫度控制在與結(jié)晶溫度一致，即-10°C 5°C。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種5′-肌苷酸二鈉的一步提取方法在肌苷與磷酸三乙酯(以下簡稱TEP)磷?；磻?yīng)后降溫，進行低溫?zé)o鹽水解；低溫?zé)o鹽水解終止后，在-10℃～5℃之間，滴加質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液，使pH回調(diào)至5.0左右且料液出現(xiàn)濁點，即有5′-肌苷酸二鈉乳狀微晶析出；繼續(xù)滴加質(zhì)量百分含量為40%的NaOH溶液，當(dāng)pH上升到8.0～8.5時養(yǎng)晶；然后快速進行晶體抽濾；將5′-肌苷酸二鈉結(jié)晶濾餅用相同體積的體積百分含量為80%～85%且溫度為0℃～5℃的乙醇洗滌2～3次；減壓烘干，得到5′-肌苷酸二鈉產(chǎn)品。簡化了工藝流程，節(jié)約了生產(chǎn)成本，提高了產(chǎn)品收率。
文檔編號C07H1/00GK102199182SQ20111008829
公開日2011年9月28日 申請日期2011年4月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月10日
發(fā)明者陸建衛(wèi) 申請人:浙江錢江生物化學(xué)股份有限公司