專利名稱：從生姜中分離制備6-姜酚單體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于輕工技術(shù)領(lǐng)域，涉及生姜的深加工技術(shù)，具體為從生姜中分離制備高 純度6-姜酚單體的方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代科學(xué)研究表明生姜具有抗血小板凝集、升壓強心、降血脂和抗動脈粥樣硬 化、保護胃黏膜和抗胃潰瘍、保肝利膽、消炎、抗氧化、抗缺氧、鎮(zhèn)咳、防暈止吐、抗腫瘤、對中 樞神經(jīng)抑制等多種功效。姜辣素是生姜中辣味物質(zhì)的總稱，主要由姜酚類、姜烯酚類和姜酮 類組成，具有較高的藥用和保健功能。6-姜酚作為姜辣素中的主要組分，是生姜中的主要藥 物活性功能因子。 現(xiàn)有關(guān)于6_姜酚的分離主要采用硅膠柱層析，半制備型和制備型高效液相色譜， 其局限性是分離效果差，回收率低，純度低或制備量少。其次，柱層析，半制備型和制備型高
效液相色譜再生使用相對困難，分離得到e-姜酚單體成本較高，難以發(fā)展成為制備量大的
分離技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種制備成本低于現(xiàn)有技術(shù)，可以較大批量從生姜中分離制 備高純度6-姜酚單體的經(jīng)濟高效的方法。 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案采用乙醇浸提生姜，得到生姜乙醇 提取物；采用大孔吸附樹脂分離得到粗6-姜酚，以高速逆流色譜儀為分離設(shè)備純化粗 6_姜酚，其溶劑系統(tǒng)由常溫常壓下處于液態(tài)的石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水組成，體積比為
i : 1.6 2 : 1 3 : 1.6 3。上相做固定相，下相做流動相。 本發(fā)明方案用下述步驟加以進一步敘述 1.采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70 100%的乙醇水溶液浸提原料生姜3小時，將浸提液減壓 濃縮，直至乙醇被去除，得到濃縮提取液； 2.將濃縮提取液用等體積的乙酸乙酯萃取兩次，萃取液減壓濃縮、真空干燥，得到 生姜乙酸乙酯相； 3.大孔吸附樹脂分離生姜乙酸乙酯相得到粗6-姜酚；
4.采用逆流色譜方法純化粗6-姜酚； 5.收集逆流色譜分離的目標(biāo)組分并進行減壓濃縮，直至固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)達到 40%以上，再采用冷凍干燥，得到油狀6-姜酚單體。
以上步驟(1)采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%的乙醇提取。 以上步驟(1)和步驟(2)中減壓濃縮過程的真空度低于0. 09Mpa，溫度為50
60°C ;步驟(4)中減壓濃縮過程的真空度低于0. 02Mpa，溫度為50 60°C 。 以上步驟(4)中冷凍干燥的真空度低于50Pa，溫度低于_35°C 。 以上步驟(4)采用的逆流色譜方法其溶劑系統(tǒng)由常溫常壓下處于液態(tài)的石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水組成，石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水的體積比為i : 1.6 2 : l
3 : 1. 6 3。 以上步驟(4)所使用的逆流色譜儀為高速逆流色譜儀HSCCC。 以上步驟(4)采用逆流色譜儀分離粗6-姜酚的具體過程為配制溶劑系統(tǒng)，充分
搖勻后靜置，待分層后，將上下相分開；用泵將溶劑系統(tǒng)的上相注入逆流色譜儀的色譜柱；
取溶劑系統(tǒng)的下相溶解粗6-姜酚制備逆流色譜分離樣品溶液；開啟逆流色譜儀，注入逆流
色譜分離樣品溶液，然后注入流動相，用紫外-可見檢測器檢測逆流色譜流出液，根據(jù)所得
的色譜圖收集目標(biāo)組分。 步驟(3)中的大孔吸附樹脂型號為D4020。 本發(fā)明的優(yōu)點是分離效果好、效率高，6-姜酚單體產(chǎn)品的純度達到98%以上， 6_姜酚單體制備成本遠(yuǎn)低于現(xiàn)有技術(shù)，是一種經(jīng)濟、高效的從生姜中分離制備高純度6-姜 酚單體的方法。


圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
具體實施例方式
參考附圖1 :(實施例中的乙醇是指按質(zhì)量分?jǐn)?shù)比例的乙醇水溶液)。 1、采用70% _100%乙醇浸提原料生姜3小時，將乙醇浸提液在真空度低于
0. 09Mpa、溫度為50 6(TC減壓濃縮，直至乙醇被基本去除，得到提取濃縮液。 2、將提取濃縮液溶解于蒸餾水中，用等體積的乙酸乙酯萃取兩次，萃取液在真空
度低于0. 09Mpa，溫度為40 5(TC減壓濃縮減壓濃縮、真空干燥，得到生姜乙酸乙酯相 3 、大孔吸附樹脂分離乙酸乙酯相。 a)將大孔吸附樹脂用95%乙醇浸泡24小時后上柱，用95%乙醇沖洗，直至無色并 澄清，然后用蒸餾水沖洗至無醇味。 b)將溶解在25%乙醇中的生姜乙酸乙酯相上樣吸附。
c)用三倍于柱體積的25%乙醇洗脫，去除水溶性雜質(zhì)。 d)用三倍于柱體積的50%乙醇洗脫，將洗脫液在真空度低于0. 09Mpa、溫度為 50 6(TC減壓濃縮，真空干燥，得到粗6-姜酚。
4、采用逆流色譜方法純化粗6-姜酚。 a)配制溶劑系統(tǒng)，充分搖勻后靜置，待分層后，將上下相分開備用。 b)用泵將上述溶劑系統(tǒng)的上相注入逆流色譜儀的色譜柱，并取上述溶劑系統(tǒng)的部
分下相溶解粗6-姜酚，制備逆流色譜分離樣品溶液。 c)開啟逆流色譜儀，注入上述溶解的粗6-姜酚的樣品溶液及流動相(注入順序可 以是先注入樣品溶液然后注入流動相，也可以先注入流動相預(yù)平衡后再注入樣品溶液)。
d)紫外-可見檢測器檢測逆流色譜流出液，根據(jù)所得的色譜圖收集目標(biāo)組分。
5、收集的目標(biāo)組分進行在真空度低于0. 09Mpa、溫度為50 6(TC減壓濃縮，直至 固形物濃度達到40%以上，再采用冷凍干燥，得到6-姜酚單體。純度在98%以上。
為進一步詳細(xì)說明本發(fā)明步驟4的逆流色譜儀純化過程，以4例分述如下
實施例1 本實施例的溶劑系統(tǒng)按體積比采用常溫常壓下處于液態(tài)的石油醚乙酸乙酯 甲醇水=i : 1.6 : i : i.6，逆流色譜儀為hsccc-d400高速逆流色譜儀，粗6-姜酚中
6_姜酚含量約占68%。 量取石油醚300ml 、乙酸乙酯480ml 、甲醇300ml和水480ml ，置于2000ml分液漏 斗，充分搖勻，靜置分層后，將上下兩相分別裝入試劑瓶。將上相以20ml/min的流速注入高 速逆流色譜的色譜柱。開啟逆流色譜儀至800轉(zhuǎn)/min，然后以2. Oml/min的流速泵入樣品 溶液(溶解有2. Og粗6-姜酚的30ml下相溶液)，待進樣結(jié)束后，再以4. Oml/min的流速注 入流動相洗脫柱內(nèi)的6-姜酚組分，用紫外可見檢測器在254nm下檢測洗出液，根據(jù)檢測器 采集的圖譜收集6-姜酚組分。分離得到6-姜酚黃酮單體1.36g。純度在98%以上。
實施例2 本實施例的溶劑系統(tǒng)按體積比采用常溫常壓下處于液態(tài)的石油醚乙酸乙酯 甲醇水=i : 2 : 1.6 : 2，逆流色譜儀為hsccc-d400高速逆流色譜儀，粗6-姜酚中
6_姜酚含量約占68%。 量取石油醚250ml、乙酸乙酯500ml、甲醇400ml和水500ml，置于2000ml分液漏 斗，充分搖勻，靜置分層后，將上下兩相分別裝入試劑瓶。將上相以20ml/min的流速注入高 速逆流色譜的色譜柱。開啟逆流色譜儀至800轉(zhuǎn)/min，然后以2. Oml/min的流速泵入樣品 溶液(溶解有2. Og粗6-姜酚的30ml下相溶液)，待進樣結(jié)束后，再以4. Oml/min的流速注 入流動相洗脫柱內(nèi)的6-姜酚組分，用紫外可見檢測器在254nm下檢測洗出液，根據(jù)檢測器 采集的圖譜收集6-姜酚組分。分離得到6-姜酚單體1.38g。純度在98%以上。
實施例3 本實施例的溶劑系統(tǒng)按體積比采用常溫常壓下處于液態(tài)的石油醚乙酸乙酯
甲醇水=1 : 2 : 3 : 3，逆流色譜儀為HSCCC-D1200高速逆流色譜儀，粗6-姜酚中6-姜 酚含量約占68%。 量取石油醚800ml、乙酸乙酯1600ml、甲醇2400ml和水2400ml，置于8000ml分液 漏斗，充分搖勻，靜置分層后，將上下兩相分別裝入試劑瓶。將上相以50ml/min的流速注入 高速逆流色譜的色譜柱。開啟逆流色譜儀至900轉(zhuǎn)/min，然后以5. Oml/min的流速泵入樣 品溶液(溶解有10g粗-姜酚的150ml下相溶液)，待進樣結(jié)束后，再以25. Oml/min的流速 注入流動相洗脫柱內(nèi)的6-姜酚組分，用紫外可見檢測器在254nm下檢測洗出液，根據(jù)檢測 器采集的圖譜收集6-姜酚組分。分離得到6-姜酚單體6.67g。純度在98%以上
實施例4 本實施例的溶劑系統(tǒng)按體積比采用常溫常壓下處于液態(tài)的石油醚乙酸乙酯
甲醇水=1 : 1.8 : 2 : 2. 5，逆流色譜儀為HSCCC-D1200高速逆流色譜儀，粗6-姜酚中 6-姜酚含量約占68%。 量取石油醚1000ml、乙酸乙酯1800ml、甲醇2000ml和水2500ml，置于6000ml分液
漏斗，充分搖勻，靜置分層后，將上下兩相分別裝入試劑瓶。將上相以50ml/min的流速注入 高速逆流色譜的色譜柱。開啟逆流色譜儀至900轉(zhuǎn)/min，然后以5. Oml/min的流速泵入樣 品溶液(溶解有10g粗-姜酚的150ml下相溶液)，待進樣結(jié)束后，再以25. Oml/min的流速 注入流動相洗脫柱內(nèi)的6-姜酚組分，用紫外可見檢測器在254nm下檢測洗出液，根據(jù)檢測器采集的圖譜收集6-姜酚組分。分離得到6-姜酚單體6.60g。純度在98%以上<
權(quán)利要求
從生姜中分離制備6-姜酚單體的方法，其特征在于以下步驟(1)采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70～100％的乙醇水溶液浸提生姜3小時，將浸提液減壓濃縮，直至乙醇被去除，得到濃縮提取液；(2)將濃縮提取液用等體積的乙酸乙酯萃取兩次，萃取液減壓濃縮、真空干燥，得到生姜乙酸乙酯相；(3)大孔吸附樹脂分離生姜乙酸乙酯相得到粗6-姜酚；(4)采用逆流色譜方法純化粗6-姜酚；(5)收集逆流色譜分離的目標(biāo)組分并進行減壓濃縮，直至固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)達到40％以上，再采用冷凍干燥，得到油狀6-姜酚單體。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述從生姜中分離制備6-姜酚單體的方法，其特征在于步驟(1)采 用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%的乙醇提取。
3. 根據(jù)權(quán)利要求l所述從生姜中分離制備6-姜酚單體的方法，其特征在于步驟(1)和 步驟(2)中減壓濃縮過程的真空度低于0. 09Mpa，溫度為50 60°C ;步驟(4)中減壓濃縮 過程的真空度低于0. 02Mpa，溫度為50 60°C 。
4. 根據(jù)權(quán)利要求l所述從生姜中分離制備6-姜酚單體的方法，其特征在于步驟(4)中 冷凍干燥的真空度低于50Pa，溫度低于-35°C。
5. 根據(jù)權(quán)利要求l所述從生姜中分離制備6-姜酚單體的方法，其特征在于步驟(4)采 用的逆流色譜方法其溶劑系統(tǒng)由常溫常壓下處于液態(tài)的石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水組成，石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水的體積比為i : 1.6 2 : 1 3 : 1.6 3。
6. 根據(jù)權(quán)利要求l所述從生姜中分離制備6-姜酚單體的方法，其特征在于步驟(4)所 使用的逆流色譜儀為高速逆流色譜儀HSCCC。
7. 根據(jù)權(quán)利要求l所述從生姜中分離制備6-姜酚單體的方法，其特征在于步驟(4)采 用逆流色譜儀分離粗e-姜酚的具體過程為配制溶劑系統(tǒng)，充分搖勻后靜置，待分層后，將 上下相分開；用泵將溶劑系統(tǒng)的上相注入逆流色譜儀的色譜柱；取溶劑系統(tǒng)的下相溶解粗 6-姜酚制備逆流色譜分離樣品溶液；開啟逆流色譜儀，注入逆流色譜分離樣品溶液，然后 注入流動相，用紫外-可見檢測器檢測逆流色譜流出液，根據(jù)所得的色譜圖收集目標(biāo)組分。
全文摘要
本發(fā)明為一種從生姜中分離制備高純度6-姜酚單體的方法。采用乙醇浸提生姜，得到乙醇提取物；乙酸乙酯萃取乙醇提取物，得到生姜乙酸乙酯相；大孔吸附樹脂分離生姜乙酸乙酯相得到粗6-姜酚，以逆流色譜技術(shù)純化粗6-姜酚中的6-姜酚單體，其溶劑系統(tǒng)由常溫常壓下處于液態(tài)的石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水組成。體積比為1∶1.6～2∶1～3∶1.6～3。本發(fā)明使用高速逆流色譜儀(HSCCC)，有效降低了6-姜酚單體的制備成本。
文檔編號C07C49/255GK101781184SQ20101013060
公開日2010年7月21日 申請日期2010年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月23日
發(fā)明者杜琪珍 申請人:浙江工商大學(xué)