專利名稱：：(r,r)-非諾特羅和(r,r)-或(r,s)-非諾特羅類似物的制備及其在治療充血性心力衰竭中...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本公幵涉及藥物組合物領(lǐng)域，并且特別涉及(R,R)-非諾特羅和(R,R)-或(R，S)-非諾特羅類似物的制備及其在治療充血性心力衰竭中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：非諾特羅，5-[l-羥基-2[[2-(4-羥基苯基)-l-甲基乙基]-氨基]乙基]-l，2-苯二醇，是(52-腎上腺素能受體激動(dòng)劑，其傳統(tǒng)地用于治療肺病癥例如哮喘。該藥物具有兩個(gè)手性(不對(duì)稱)碳，其各自可獨(dú)立地以R或S構(gòu)型布置，從而該藥物以不同的已知的立體異構(gòu)體形式(R，R)、(R,S)、(S，R)或(S,S)存在。非諾特羅的市售形式為(R，R)-和(S，S)-化合物的外消旋混合物。非諾特羅已知作為激動(dòng)劑與p2-腎上腺素能受體結(jié)合并激活p2-腎上腺素能受體。這一活性導(dǎo)致其在治療哮喘中具有臨床應(yīng)用，因?yàn)檫@一激動(dòng)劑的活性使收縮氣道舒張。非諾特羅的另外的治療學(xué)應(yīng)用仍有待進(jìn)行徹底探索。包括非諾特羅在內(nèi)的這類藥物的藥理學(xué)研究已經(jīng)表明對(duì)映體中僅一種負(fù)責(zé)產(chǎn)生支氣管舒張作用。例如，研究己顯示外消旋的(士)-非諾特羅的主要的支氣管舒張活性在于非諾特羅的(R，R)-異構(gòu)體。另外，非活性的對(duì)映體可能與副作用有關(guān)在最近變得明顯。例如，非對(duì)映體(S,S)-非諾特羅已顯示導(dǎo)致不良副作用或與(32-腎上腺素能受體激動(dòng)劑治療有關(guān)的耐受性的發(fā)展因此提供在治療諸如哮喘、慢性阻塞性肺病或充血性心力衰竭的病癥中是有效的但是具有減少的副作用例如超敏性和耐藥性(耐受性)的-1卩-諾特羅組合物是有禾lj的。發(fā)明概述本公開(kāi)涉及的是發(fā)現(xiàn)了在結(jié)合f32-腎上腺素能受體方面是高度有效的非諾特羅類似物。這些類似物的示例性的化學(xué)結(jié)構(gòu)在本公開(kāi)的通篇中被提供。例如，這種化合物由以下通式表示OR其中RpR3獨(dú)立地是氫，?；檠趸驶?，氨基羰基(氨甲?；?或其組合；R4是氫或低級(jí)烷基；115是低級(jí)垸基，其中X、Y1、Y2和y3獨(dú)立地是氫，-OR,NR7R8;R6獨(dú)立地是氫，低級(jí)烷基，?；?，烷氧基羰基或氨基羰基；和R7和Rs獨(dú)立地是氫，低級(jí)烷基，垸氧基羰基，?；虬被驶?。還提供了包含(R，R)-非諾特羅和非諾特羅類似物的藥物組合物以及使用(R,R)-非諾特羅和非諾特羅類似物的用法。例如，公開(kāi)的(R,R)-非諾特羅和(R,R)-或(R,S)-非諾特羅類似物(例如(R，R)-甲氧基非諾特羅，(R，R)-萘基非諾特羅和(R,S)-萘基非諾特羅)有效用在治療心臟的病癥或肺病癥方面。上述和其它的特征和優(yōu)點(diǎn)從以下若干實(shí)施方案的詳細(xì)說(shuō)明中將變得明顯，繼續(xù)參考附圖進(jìn)行說(shuō)明。圖1表示(S,S)-和(R，R)-非諾特羅的色譜分離。圖2A提供了(R,R)-和(S，S)-非諾特羅的紫外光譜。圖2B說(shuō)明了(R,R)-和(S，S)-非諾特羅的圓二色譜。圖3提供了通過(guò)添加(R,R)-非諾特羅到流動(dòng)緩沖液中生成的-(土)-非諾特羅的前沿(frontal)色譜洗脫曲線。圖4A是包括通過(guò)使用(土)-非諾特羅、(R，R)-非諾特羅或(S，S)-非諾特羅治療新分離的大鼠心室肌細(xì)胞產(chǎn)生的劑量-應(yīng)答曲線的圖表。圖4B是包括通過(guò)使用(土)-非諾特羅、(R，R)-非諾特羅或(S,S)-非諾特羅進(jìn)行治療在新分離的大鼠心室肌細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的T5o。/。松弛的劑量-應(yīng)答曲線的圖表。圖5說(shuō)明非諾特羅和非諾特羅類似物(化合物2-7)的立體異構(gòu)體的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖6說(shuō)明化合物47-51的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖7說(shuō)明非諾特羅和非諾特羅類似物對(duì)單個(gè)心室肌細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞收縮的影響。圖8是說(shuō)明在給藥(5mg/mL)后(R,R)-非諾特羅、(R，R)-甲氧基非諾特羅和(R,S)-萘基非諾特羅的時(shí)間依賴性平均血漿濃度的曲線。若干實(shí)施方案的詳細(xì)說(shuō)明本公開(kāi)提供了與P2-腎上腺素能受體結(jié)合的非諾特羅類似物，其活性可與非諾特羅相比或比非諾特羅具有更大活性的。在一個(gè)實(shí)施方案，光學(xué)活性非諾特羅類似物實(shí)質(zhì)上從外消旋混合物中純化。例如，光學(xué)活性非諾特羅類似物經(jīng)過(guò)純化以占組合物的大于90%，通常大于95%。這些類似物可用于治療先前已用(士)-非諾特羅進(jìn)行治療的肺病癥例如哮喘和慢性阻塞性肺病。具有與(士)-非諾特羅相等效力到更高效力的本公開(kāi)的非諾特羅類似物的使用可減少先前使用(士)-非諾特羅時(shí)所觀察到的副作用。例如，使用更低濃度的非諾特羅類似物以獲得治療學(xué)有效應(yīng)答預(yù)計(jì)降低使用市售的(土)-非諾特羅時(shí)所觀察到的副作用例如超敏性和耐藥性(耐受性)。另夕卜，類似物的純化除去了雜質(zhì)，諸如可引起這些副作用的非活性的對(duì)映體。本公開(kāi)還表明(R，R)-非諾特羅是市售的(土)-非諾特羅的有效成分。特別考慮了(R,R)-非諾特羅以及公開(kāi)的(R,R)-和(R,S)-非諾特羅類似物可用于治療心臟病癥例如充血性心力衰竭。使用大體上光學(xué)純的(R,R)-非諾特羅或(R，R)-或(R，S)-非諾特羅類似物用于治療充血性心力衰竭預(yù)計(jì)降低由生理學(xué)活性較差形式的藥物引起的副作用的發(fā)生率。II.縮寫(xiě)和術(shù)語(yǔ)AR:腎上腺素能受體CD:圓二色性CoMFA:比較分子場(chǎng)分析HPLC:高效液相色譜法IAM-PC:固定化人工膜色譜載體ICYP:[1251]氰基吲哚洛爾UV:紫外線除非另有說(shuō)明，否則本文使用的全部的專業(yè)術(shù)語(yǔ)和科技術(shù)語(yǔ)具有本公開(kāi)主題所屬領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員通常已知的含義。化學(xué)術(shù)語(yǔ)中常用術(shù)語(yǔ)的定義可參見(jiàn)TheMcGraw-HillDictionaryofChemicalTerms,1985禾QTheCondensedChemicalDictionary,1981。本文使用的單數(shù)術(shù)語(yǔ)"一"、"一種"和"所述"包括復(fù)數(shù)所指，除非上下文清楚地指出并非如此。類似地，措辭"或"意在包括"和"，除非上下文清楚地指出并非如此。另外，本文使用的術(shù)語(yǔ)"包括"是指"包含"，因此，"A或B"是指包含A，包含B，或包含A和B。除非另有說(shuō)明，否則無(wú)論是否用措辭"約"或"大約"來(lái)闡述，任何數(shù)值是指近似殖。本文描述的材料、方法和實(shí)施例僅僅是示例性的，并非用于限制性目的。任何分子量值或分子質(zhì)量值是近似的并且僅為了描述目的被提供。除非另有說(shuō)明，否則本發(fā)明的方法和技術(shù)一般根據(jù)本領(lǐng)域公知的和在本說(shuō)明書(shū)通篇中所引述和討論的各種一般的和更具體的參考文獻(xiàn)中描述的常規(guī)方法實(shí)施。例如，參見(jiàn)Loudon,OrganicChemistry,FourthEdition,NewYork:OxfordUniversityPress,2002,pp.360-361,1084-1085;Smith禾卩March,March'sAdvancedOrganicChemistry:Reactions,Mechanisms,andStructure,FifthEdition,Wiley-Interscience,2001;或Vogel,ATextbookofPracticalOrganicChemistry,IncludingQualitativeOrganicAnalysis,FourthEdition,NewYork:Longman,1978。為了幫助評(píng)述本文公開(kāi)的各種實(shí)施方案，以下提供了專業(yè)術(shù)語(yǔ)的說(shuō)明酰基式RC(O)-的基團(tuán)，其中R是有機(jī)基。?；趸哂薪Y(jié)構(gòu)-OC(O)R的基團(tuán)，其中R可為任選被取代的烷基或任選被取代的芳基。"低級(jí)?；趸?是其中R包含1-10個(gè)(如l-6個(gè))碳原子的那些基團(tuán)。垸氧基具有結(jié)構(gòu)-O-R的基團(tuán)(或取代基)，其中R是被取代的或未被取代的烷基。甲氧基(-OCH3)是示例性的烷氧基。在被取代的烷氧基中，R是被非干擾性取代基取代的烷基。"硫代垸氧基"是指-S-R，其中R是被取代的或未被取代的垸基。"鹵代烷氧基"是指基團(tuán)-OR，其中R是鹵代烷基。垸氧基羰基式-C(O)OR的基團(tuán)，其中R可為任選被取代的烷基或任選被取代的芳基。"低級(jí)垸氧基羰基"是其中R包含l-10個(gè)(如1-6個(gè))碳原子的那些基團(tuán)。垸基非環(huán)的、飽和的、支鏈的或直鏈的烴基，除非另有說(shuō)明，否則其包含1-15個(gè)碳原子；例如，包含1-10個(gè)、l-6個(gè)或l-4個(gè)碳原子。該術(shù)語(yǔ)包括例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、異丁基、叔丁基、戊基、庚基、辛基、壬基、癸基或十二烷基的基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)"低級(jí)烷基"是指包含l-10個(gè)碳原子的烷基。除非清楚地指出是"未被取代的烷基"，否則"烷基"可以是未被取代的或被取代的。烷基可被一個(gè)或多個(gè)取代基取代(例如，對(duì)于烷基鏈中的每個(gè)亞甲基具有最多兩個(gè)取代基)。示例性的烷基取代基包括例如氨基、酰胺、磺酰胺、鹵素、氰基、羧基、羥基、巰基、三氟甲基、垸基、烷氧基(例如甲氧基)、烷硫基、硫代烷氧基、芳基烷基、雜芳基、垸基氨基、二垸基氨基、垸基硫烷基(sulfano)、酮基、或其它官能度。氨基羰基(氨甲酰基)式-OCN(R)R'-的基團(tuán)，其中R和R'彼此獨(dú)立地是氫或低級(jí)烷基。哮喘哮喘是一種呼吸系統(tǒng)疾病，其中氣道通常響應(yīng)一種或多種"誘因"而收縮、發(fā)炎、并襯滿過(guò)量的粘液，所述誘因?yàn)橹T如暴露于環(huán)境刺激物(或過(guò)敏原)、冷空氣、運(yùn)動(dòng)或情志過(guò)極(emotionalstress)。這一氣道變窄引起諸如哮鳴音、呼吸淺短、胸悶和咳嗽的癥狀。該病癥是其中氣道對(duì)各種刺激發(fā)展為增加的應(yīng)答的慢性或復(fù)發(fā)性炎性病況，以支氣管超應(yīng)答、炎癥、粘液生成增加和間歇性氣道阻塞為特征。氨甲酸酯式-OC(O)N(R)-的基團(tuán)，其中R是H或脂族基，如低級(jí)烷基或芳焼基。心臟病癥或疾病通常，心臟病癥/疾病是一類牽涉心臟和/或血管(動(dòng)脈和靜脈)的病癥/疾病。在具體的實(shí)施例中，心臟病癥/疾病包括充血性心力衰竭。慢性阻塞性肺病一組呼吸道疾病，包括慢性支氣管炎、氣腫和支氣管擴(kuò)張，其特征在于不完全可逆的氣流阻塞或受限。氣流受限通常是進(jìn)行性的并且與肺對(duì)毒性粒子或氣體的異常炎性響應(yīng)有關(guān)。充血性心力衰竭其中心臟不能維持身體組織內(nèi)的足夠的血液循環(huán)或不能泵出通過(guò)靜脈返回心臟的靜脈血的心力衰竭。衍生物通過(guò)一個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)而與其它化學(xué)物質(zhì)區(qū)別開(kāi)的化學(xué)物質(zhì)。優(yōu)選地，衍生物(例如非諾特羅類似物)保持了其所衍生而來(lái)的分子(諸如非諾特羅)的生物活性。異構(gòu)體具有相同分子式但是在其原子的鍵合性質(zhì)或鍵合順序或其原子空間排列方面有區(qū)別的化合物被稱作"異構(gòu)體"。在其原子空間排列方面不同的異構(gòu)體被稱作"立體異構(gòu)體"。彼此為非鏡象的立體異構(gòu)體被稱作"非對(duì)映體"，彼此為不重疊鏡像的那些被稱作"對(duì)映體"。當(dāng)化合物具有不對(duì)稱中心時(shí)，例如，如果碳原子與四個(gè)不同基團(tuán)鍵合時(shí)，可能存在一對(duì)對(duì)映體。對(duì)映體可以其不對(duì)稱中心的絕對(duì)構(gòu)型為特征并且通過(guò)Cahn和Prelog的R和S-順序規(guī)則進(jìn)行描述，或通過(guò)其中分子使偏振光平面旋轉(zhuǎn)并被指定為右旋或左旋(即，分別為(+)或(-)異構(gòu)體)的方式進(jìn)行描述。手性化合物可以單獨(dú)的對(duì)映體存在或作為對(duì)映體的混合物存在。包含相等比例的對(duì)映體的混合物被稱作"外消旋混合物"。本文描述的化合物可具有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心；因此這種化合物可以(R)-或(S)-立體異構(gòu)體或其混合物的形式得到。除非另有說(shuō)明，否則在本說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中對(duì)具體化合物的說(shuō)明或命名意在包括其單獨(dú)的對(duì)映體和混合物、外消旋物等。確定立體化學(xué)的方法和分離立體異構(gòu)體的方法是本領(lǐng)域公知的(例如，參見(jiàn)March,AdvancedOrganicChemistry,4thedition,NewYork:JohnWileyandSons,1992,Chapter4)。任選"任選的"或"任選地"是指隨后描述的事件或環(huán)境可能不必發(fā)生，并且該描述包括其中所述事件或環(huán)境發(fā)生的情況和其中所述事件或環(huán)境不發(fā)生的情況?？伤幱幂d體用于本公開(kāi)中的可藥用載體(媒介物)是常規(guī)的。Remington'sPharmaceuticalSciences,E.W.Martin,MackPublishingCo.,Eastern,PA，19thEdition(1995)描述了適于一種或多種治療學(xué)化合物或分子諸如一種或多種核酸分子、蛋白質(zhì)或與這些蛋白質(zhì)結(jié)合的抗體和其它藥劑的藥物遞送的組合物和制劑。通常，載體的性質(zhì)根據(jù)所用的具體給藥方式的不同而異。例如，非腸道制劑通常包括注射液，該注射液包括藥學(xué)和生理學(xué)可接受的液體諸如水，生理鹽水，平衡鹽液，含水葡萄糖，甘油等作為媒介物。對(duì)于固體組合物(例如粉劑，丸劑，片劑或膠囊形式)，常規(guī)的無(wú)毒的固體載體可包括例如藥物級(jí)的甘露醇、乳糖、淀粉或硬脂酸鎂。除了生物學(xué)中性載體之外，待給藥的藥物組合物可包含少量的無(wú)毒的輔助物質(zhì)，諸如潤(rùn)濕劑或乳化劑，防腐劑，和pH緩沖劑等，例如乙酸鈉或單月桂酸山梨醇酐酯。苯基苯基可是未被取代的或被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自垸基，雜垸基基，脂族基，雜脂族基，硫代烷氧基，鹵基，鹵代烷基(諸如-CF3)，硝基，氰基，-OR(其中R是氫或烷基)，-N(R)R'(其中R和R'彼此獨(dú)立地是氫或垸基)，-COOR(其中R是氫或烷基)或-C(O)N(R')R"(其中R'和R"獨(dú)立地選自氫或烷基)。肺病癥或疾病通常，肺病癥/疾病包括任何與肺有關(guān)的病癥/疾病。在具體實(shí)施例中，肺病癥/疾病包括哮喘和慢性阻塞性肺病。純化的術(shù)語(yǔ)"純化的"不要求絕對(duì)純；而是包括相對(duì)術(shù)語(yǔ)。因此，例如，純化制劑是一種其中所需組分如非諾特羅的(R，R)-對(duì)映體比其在之前環(huán)境如(士)-非諾特羅混合物中更富集的制劑。所需組分如非諾特羅的(R，R)-對(duì)映體，例如樣品當(dāng)按重量計(jì)的至少約70%、80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或99%由所需組分構(gòu)成時(shí)，被認(rèn)為是純的?；衔锏募兌瓤赏ㄟ^(guò)例如高效液相色譜法(HPLC)或其它常規(guī)方法來(lái)測(cè)定。在一實(shí)施例中，特定的非諾特羅類似物對(duì)映體經(jīng)過(guò)純化表現(xiàn)為相對(duì)于純化制劑中存在的另外的對(duì)映體為大于90%，經(jīng)常大于95%。在其它情況下，純化制劑可大體上是同質(zhì)的，其中其它立體異構(gòu)體低于1%。本文描述的化合物可以純化形式獲得，或者通過(guò)本領(lǐng)域已知的包括硅膠和/或氧化鋁色譜法在內(nèi)的任何手段進(jìn)行純化。例如，參見(jiàn)IntroductiontoModernLiquidChromatography,2ndEdition,Snyder禾口Kirkland編，NewYork:JohnWiley禾卩Sons,1979;禾dThinLayerChromatography,Stahl編，NewYork:SpringerVerlag，1969。在一實(shí)施例中，化合物包括純化的非諾特羅或非諾特羅類似物，其純度按重量計(jì)相對(duì)于其它雜質(zhì)占樣品的至少約70%、80%、85%、90%、92°/。、95%、97%、98%或99°/。。在另一個(gè)實(shí)施例中，化合物包括至少兩個(gè)純化的立體異構(gòu)體，各自的純度按重量計(jì)相對(duì)于其它雜質(zhì)占樣品的至少約70%、80%、85%、90%、92%、95°/。、97%、98%或99°/。。例如，化合物可包括大體上純化的(R,R)-非諾特羅類似物和大體上純化的(R,S)-非諾特羅類似物。受試者術(shù)語(yǔ)"受試者"包括人類和獸類受試者，例如人，非人靈長(zhǎng)類，狗、貓、馬、大鼠、小鼠和牛。類似地，術(shù)語(yǔ)哺乳動(dòng)物包括人類和非人類哺乳動(dòng)物。治療關(guān)于疾病，術(shù)語(yǔ)包括(l)預(yù)防疾病，例如，引起可能暴露于或傾向于暴露在疾病下但是尚未經(jīng)歷或顯示疾病癥狀的受試者中的疾病的臨床癥狀不發(fā)展，(2)抑制疾病，例如，阻礙疾病或其臨床癥狀的發(fā)展，或(3)緩解疾病，例如，引起疾病或其臨床癥狀退行。治療有效量特定藥劑的能夠在用該藥劑治療的受試者中實(shí)現(xiàn)所需效果的量。例如，該治療有效量可以是可用于預(yù)防、減少、禾口/或抑制、禾(]/或治療心臟病癥例如充血性心力衰竭的(11,11)-非諾特羅或(11,11)-或(R,S)-非諾特羅類似物的量。理想地，藥劑的治療有效量是足夠預(yù)防、減少、禾口/或抑制、和/或治療受試者的病癥而不引起受試者的顯著的細(xì)胞毒作用的量。藥劑的可用于預(yù)防、減少、和/或抑制、和/或治療受試者的病癥的量根據(jù)被治療的受試者、病癥的嚴(yán)重性和治療組合物的給藥方法的不同而異。III.(R，R)-非諾特羅和非諾特羅類似物A.化學(xué)結(jié)構(gòu)本文公開(kāi)的一些示例性的非諾特羅類似物具有下式結(jié)構(gòu)其中R,-R3獨(dú)立地是氫，?；?，烷氧基羰基，氨基羰基或其組合;R4是氫或低級(jí)烷基；R5是低級(jí)烷基，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中X和Y獨(dú)立地選自氫，低級(jí)-OR6和-NR7Rs;R6是低級(jí)垸基或?；缓蚏7和Rs獨(dú)立地是氫，低級(jí)垸基，垸氧基羰基，?；虬被驶?。繼續(xù)參見(jiàn)上面非諾特羅類似物的通式，Y可為-OH。在一個(gè)實(shí)施方案中，R5是任選地具有1、2或3個(gè)取代基的1-萘基或2-萘基衍生物。這種R5基團(tuán)的實(shí)例由下式表示其中Y1、丫2和丫3獨(dú)立地是氫，低級(jí)-OR6和-NR7R8;R6每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自低級(jí)垸基和?；缓蚏7和Rs獨(dú)立地是氫，低級(jí)垸基，垸氧基羰基，酰基或氨基羰基(氨甲?；?。在具體化合物中，Y1、丫2和^中的至少一個(gè)是-OCH3。特別地，Rs基團(tuán)包括下式表示的那些RfiO其中R6是低級(jí)垸基，諸如甲基、乙基、丙基或異丙基，或?；T如乙?；?。示例性的Rs基團(tuán)包括:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>在一實(shí)施例中，R4是低級(jí)垸基且R5是:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>或其中X和Y獨(dú)立地選自H，低級(jí)垸基-OR6和-NRR8;R6是低級(jí)烷基；和R7和Rs獨(dú)立地是氫或低級(jí)烷基。在另外的實(shí)施例中，R4選自乙基、正丙基和異丙基且R5具有下式結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>其中X是H，-0116或^117118。例如，R6可為甲基或R7和Rs是氫。在另外的實(shí)施例中，Rs具有下式結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>在另外的實(shí)施方案中，R4選自甲基、乙基、正丙基和異丙基且Rs表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>對(duì)于RrR3的可在體內(nèi)裂解以提供羥基的適當(dāng)基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于?；?，酰基氧基和垸氧基羰基。具有這種可裂解基團(tuán)的化合物被稱作"前體藥物"。本文使用的術(shù)語(yǔ)"前體藥物"是指這樣的化合物，該化合物包括可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化(例如通過(guò)水解)為羥基的取代基。前體藥物的多種形式是本領(lǐng)域的已知，例如，如下討論Bundgaard,(編),DesignofProdrugs,Elsevier(1985);Widder等(編)，MethodsinEnzymology,Vol.4，AcademicPress(1985);Krogsgaard-Larsen等(編)，DesignandApplicationofProdrugs,TextbookofDrugDesignandDevelopment,Chapter5,113191(1991);Bundgaard等'JournalofDrugDeliveryReviews,8:138(1992);Bundgaard，PharmaceuticalSciences,77:285etseq.(1988);以及Higuchi禾口Stella(編)ProdmgsasNovelDrugDeliverySystems,AmericanChemicalSociety(1975)。示例性的(R,R)-化合物具有以下的化學(xué)結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>X禾口RrR3如上定義,另外的示例性的(R,R)-化合物具有以下的化學(xué)結(jié)構(gòu):R2。/XylMWCH31示例性的(R,S)-化合物具有以下的化學(xué)結(jié)構(gòu):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>其中X和R,-R3如上定義,另外的示例性的(R，S)-化合物具有以下的化學(xué)結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>示例性的(S,R)-化合物具有以下的化學(xué)結(jié)構(gòu)QH其中X和R廣R3如上定乂。示例性的(S，S)-化合物具有以下的化學(xué)結(jié)構(gòu):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>其中X和RrR3如上定義。說(shuō)明非諾特羅的各種立體異構(gòu)體的化學(xué)結(jié)構(gòu)的實(shí)例提供如下,〇HGS，i)-非諾特羅CW)-非諾特羅具體的方法實(shí)施方案考慮了使用本文描述的(R,R)-非諾特羅和任何非諾特羅類似物的溶劑合物(例如水合物)，可藥用鹽和/或不同的物理形式。1.溶劑合物、鹽和物理形式"溶劑合物"是指化合物與一個(gè)或多個(gè)溶劑分子的物理結(jié)合物。該物理結(jié)合物包括不同程度的離子鍵和共價(jià)鍵，包括例如共價(jià)加合物和氫鍵合溶劑合物。在某些情況下，溶劑合物能夠分離，例如當(dāng)一個(gè)或多個(gè)溶劑分子被并入結(jié)晶固體的晶格內(nèi)時(shí)。"溶劑合物"包括溶液相和可分離的溶劑合物。典型的溶劑合物包括與乙醇結(jié)合的化合物，與甲醇結(jié)合的化合物等。"水合物"是其中溶劑分子是水的溶劑合物。如果存在若干成鹽基團(tuán)的話，則公開(kāi)的化合物還包括鹽，包括混合鹽和/或內(nèi)鹽。鹽通常是無(wú)毒的可藥用的鹽。鹽可為任何類型(無(wú)機(jī)鹽和無(wú)機(jī)鹽)，如富馬酸鹽，氫溴酸鹽，鹽酸鹽，硫酸鹽和磷酸鹽。在一實(shí)施例中，鹽包括得自元素周期表第VII族中的非金屬(例如鹵素)。例如，化合物可以氫溴酸鹽的形式被提供。成鹽基團(tuán)的另外的實(shí)例包括但不限于羧基，膦酸基或硼酸基，其可與適當(dāng)?shù)膲A形成鹽。這些鹽可包括例如得自元素周期表的第IA、IB、IIA和IIB族的金屬的無(wú)毒的金屬陽(yáng)離子。在一個(gè)實(shí)施方案中，可使用堿金屬陽(yáng)離子例如鋰、鈉或鉀離子，或堿土金屬陽(yáng)離子例如鎂或鈣離子。鹽還可是鋅或銨陽(yáng)離子。還可與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)胺形成鹽，有機(jī)胺為諸如未被取代的或被羥基取代的一-、二-或三-烷基胺，特別是一-、二-或三-烷基胺，或者是與季銨化合物形成的鹽，例如與N-甲基-N-乙基胺，二乙胺，三乙胺，一-、二-或三-(2-羥基-低級(jí)烷基)胺如一-、二-或三-(2-羥基乙基)胺、2-羥基-叔丁基胺或三(羥基甲基)甲基胺，N,N-二-低級(jí)烷基-N-(羥基-低級(jí)烷基)胺如N,N-二甲基-N-(2-羥基乙基)胺或三-(2-羥基乙基)胺或>^-甲基-0-谷氨酰胺或季銨化合物例如四丁銨鹽形成的鹽。本文公開(kāi)的示例性化合物具有至少一個(gè)堿性基團(tuán)，其可與無(wú)機(jī)酸形成酸-堿。堿性基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于氨基或亞氨基?？膳c這些堿性基團(tuán)成鹽的無(wú)機(jī)酸的實(shí)例包括但不限于無(wú)機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸或磷酸。堿性基團(tuán)還可以有機(jī)羧酸、磺酸(sulfonicacids)、磺酸(sulfoacids)或膦酸或被N-取代的氨基磺酸成鹽，例如乙酸、丙酸、羥基乙酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、羥基馬來(lái)酸、甲基馬來(lái)酸、富馬酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、葡糖酸、葡糖二酸、葡糖醛酸、枸櫞酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、水楊酸、4-氨基水楊酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、4,4'-亞甲雙(3-羥基-2-萘酸)、煙酸或異煙酸，并且，另外，與氨基酸例如與a-氨基酸成鹽，還與甲磺酸、乙磺酸、2-羥基甲磺酸、乙垸-l，2-二磺酸，苯二磺酸、4-甲基苯磺酸、萘-2-磺酸、2-或3-磷酸甘油酸、葡糖-6-磷酸或N-環(huán)己基氨基磺酸(具有環(huán)己氨基磺酸的結(jié)構(gòu))成鹽或與其它的酸性有機(jī)化合物例如抗壞血酸成鹽。在本發(fā)明的優(yōu)選方案中，非諾特羅以氫溴酸鹽形式被提供，且示例性的非諾特羅類似物以其富馬酸鹽的形式被提供。用于形成可藥用鹽的另外的平衡離子可參見(jiàn)Remington'sPharmaceuticalSciences,19thEdition,MackPublishingCompany,Easton,PA,1995。在一個(gè)方面，釆用可藥用鹽還可用于調(diào)節(jié)組合物的滲透壓力。在某些實(shí)施方案中，在該方法中使用的化合物以多晶型形式被提供。因此，該化合物可以兩種或更多種物理形式諸如不同的晶形、結(jié)晶、液晶或非晶(無(wú)定形)形式被提供。2.制藥用途任何上述的化合物(例如(R,R)-非諾特羅或非諾特羅類似物或其水合物或可藥用鹽)或其組合計(jì)劃用于制備用于在受試者內(nèi)刺激(32-腎上腺素能受體或用于治療肺和心臟的病癥(如哮喘和充血性心力衰竭)的藥物中。適于這種藥物的制劑，可受益于所述的和其它相關(guān)特征的受試者在本文別處描述。B.合成方法公開(kāi)的非諾特羅類似物可通過(guò)本領(lǐng)域已知的任何方法合成?？梢垣@得許多提供常規(guī)己知的用于合成該公開(kāi)的化合物的化學(xué)合成路線和條件的一般參考文獻(xiàn)。(例如，參見(jiàn)Smith禾卩March,March'sAdvancedOrganicChemistry:Reactions,Mechanisms,andStructure,FifthEdition,Wiley-Interscience，2001;或Vogel，ATextbookofPracticalOrganicChemistry,IncludingQualitativeOrganicAnalysis,FourthEdition,NewYork:Longman,1978)。本文描述的化合物可以本領(lǐng)域任何已知的手段進(jìn)行純化，包括色譜法，諸如HPLC、制備性薄層色譜法、閃柱色譜法和離子交換色譜法。可使用任何適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ?，包括正相和反相以及離子樹(shù)脂。最典型的公開(kāi)的化合物通過(guò)空柱色譜法和制備性色譜法純化。非諾特羅類似物的適當(dāng)?shù)氖纠院铣扇缦绿峁┞肪€I:1-6的4種立體異構(gòu)體的示例性合成包括從(11)-或(5)-3',5'-二芐氧基苯基溴代醇形成的環(huán)氧化物與適當(dāng)?shù)谋黄S基保護(hù)的2-氨基-3-芐基丙垸(l-5)的(R)-或(S)-異構(gòu)體或與N-芐基-2-氨基庚垸(6)的(R)-或(S)-異構(gòu)體的偶聯(lián)。(R，R)-1國(guó)6(S,S)-1-6(R,S)-1-6(S,R)-1-6廣0.5H02CCHCHC02Hxx=《、"、i5飛.OCH3NH2L6/^^CH3_J路線II:使用2-苯乙基胺的(R)-7和(S)-7的示例性合成。所得的化合物可通過(guò)用Pd/C進(jìn)行氫化進(jìn)行脫保護(hù)并純化為富馬酸鹽。BnOBniBnOBn(R,R)-16國(guó)21(S,S)-16隱21(R,S)-16-21(S，R)-16-21H2Pd-C50PC24h廣10,16=11,17,23:12,18:13,19,25:14,20,26=V_15,21,27=BnHN.無(wú)水120PC20h(R)-10-15(S)-10-15富馬酸MeOHAx0.5h(R，R)-22-27(S,S)-22-27(R，S)-22-27(S,R)-22-27OH,Br、>K2C03THF/MeOHRT2hnH2一423Hop8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>路線III描述了在路線II中使用的手性砌塊的示例性合成。(R)-和(S)-3'，5'-二節(jié)氧基苯基-溴代醇對(duì)映體通過(guò)使用硼-二甲硫醚復(fù)合物(BH3SCH3)和(lR,2S)-或(lS,2R)-順式-l-氨基-2-茚滿醇進(jìn)行3,5-二芐氧基-a-溴代苯乙酮的對(duì)映體特異性還原，通過(guò)使用(R)-或(S)-扁桃酸作為抗衡離子進(jìn)行消旋-2-芐基氨基丙烷的對(duì)映體選擇性結(jié)晶來(lái)制備所需的(R)-和(S)-l-芐基氨基丙烷。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>IV.藥物組合物公開(kāi)的(R,R)-非諾特羅和非諾特羅類似物可至少用于治療肺病癥例如哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)和心臟病癥例如充血性心力衰竭。因此，本文還描述了包含至少一種公開(kāi)的非諾特羅化合物或類似物的藥物組合物。藥物組合物的配制是本領(lǐng)域公知的。例如，Remington'sPharmaceuticalSciences,E.W.Martin,MackPublishingCo.,Easton,PA，19thEdition,1995描述了示例性的適用于(R，R)-非諾特羅和公開(kāi)的非諾特羅類似物的藥物遞送的示例性制劑(將其組分)。包括這些化合物中至少一種的藥物組合物被配制用于人醫(yī)學(xué)或獸醫(yī)學(xué)。公開(kāi)的藥物組合物的具體制劑可根據(jù)例如給藥方式(例如經(jīng)口或非腸道)和/或待治療疾病(例如肺病癥或心臟病癥例如充血性心力衰竭)的不同而異。在一些實(shí)施方案中，制劑除包括至少一種活性成分例如非諾特羅化合物之外還包括可藥用的載體。用于所公開(kāi)的方法和組合物的可藥用載體是本領(lǐng)域常見(jiàn)的。藥物載體的性質(zhì)根據(jù)所采用的具體給藥方式的不同而異。例如，非腸道制劑通常包括可注射液體，該液體包括藥學(xué)可接受的和生理學(xué)可接受的液體，例如水、生理鹽水、平衡鹽液、含水葡萄糖、甘油等作為媒介物。對(duì)于固體組合物如粉劑、丸劑、片劑或膠囊形式，可包括常規(guī)的無(wú)毒的固體載體，例如藥物級(jí)的甘露醇、乳糖、淀粉或硬脂酸鎂。除了生物學(xué)中性載體之外，待給藥的藥物組合物可任選地包含少量的無(wú)毒的輔助物質(zhì)或賦形劑，諸如潤(rùn)濕劑或乳化劑、防腐劑和pH緩沖劑等；例如，乙酸鈉或單月桂酸山梨醇酐酯。其它的非限制性賦形劑包括非離子型增溶劑如聚氧乙烯蓖麻油或蛋白質(zhì)如人血清白蛋白或血漿制劑。公開(kāi)的藥物組合物可被配制為可藥用鹽。可藥用鹽是具有所需的游離堿的藥理學(xué)活性的游離堿形式的化合物的無(wú)毒鹽。這些鹽可得自無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸。適當(dāng)?shù)臒o(wú)機(jī)酸的非限制性實(shí)例是鹽酸、硝酸、氫溴酸、硫酸、氫碘酸和磷酸。適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)酸的非限制性實(shí)例是乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、蘋(píng)果酸、馬來(lái)酸、富馬酸、酒石酸、枸櫞酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、水楊酸、甲酸、三氯乙酸、三氟乙酸、葡糖酸、天門冬氨酸、門冬氨酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、萘磺酸等等。其它適當(dāng)?shù)目伤幱名}的列表參見(jiàn)Remington'sPharmaceuticalSciences,19thEdition,MackPublishingCompany,Easton，PA,1995?？伤幱名}還可用于調(diào)節(jié)組合物的滲透壓力。公開(kāi)的藥物組合物的劑型可通過(guò)所選擇的給藥方式進(jìn)行確定。例如，除了可注射液體之外，可采用口服劑型?？诜┬涂蔀橐后w劑型如糖漿劑、溶液劑或懸浮劑，或?yàn)楣腆w劑型如粉劑、丸劑、片劑或膠囊。制備這種劑型的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的和顯而易見(jiàn)的。包括所公開(kāi)化合物的藥物組合物的某些實(shí)施方案可被配制在適于精確劑量的單獨(dú)給藥的單位劑型中?；钚猿煞秩?R，R)-非諾特羅的給藥量將根據(jù)被治療的受試者、病癥的嚴(yán)重性和給藥方式的不同而異，并且是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。在這些范圍內(nèi)，待給藥的制劑包含為了在被治療的受試者中實(shí)現(xiàn)所需效果的量的本文所公開(kāi)的一些提取物或化合物。在具體的實(shí)施例中，對(duì)于口服給藥，組合物以包含約l.O到約50毫克的活性成分、特別是包含約2.0毫克、約2.5毫克、5毫克、約IO毫克、或約50毫克的活性形式的片劑形式被提供，用于對(duì)被治療的受試者進(jìn)行癥狀調(diào)節(jié)。在一個(gè)示例性的口服劑量給藥方案中，包含約1毫克到約50毫克(例如約2毫克到約IO毫克)活性成分的片劑每天給藥2-4次，諸如2次、3次或4次。V.用法本公開(kāi)包括治療包括肺和心臟病癥在內(nèi)的病癥的方法。在一些實(shí)施例中，肺病癥是哮喘或慢性阻塞性肺病。在其它實(shí)施例中，心臟病癥是充血性心力衰竭。公開(kāi)的方法包括給藥處在可藥用載體內(nèi)并以有效治療肺和/或心臟病癥的量的(R,R)-非諾特羅或所公開(kāi)的非諾特羅類似物(和任選的一種或多種其它藥劑)至受試者。可用于所公開(kāi)方法中的給藥途徑包括但不限于經(jīng)口途徑和非腸道途徑，諸如靜脈內(nèi)(iv)，腹膜內(nèi)(ip)，直腸，局部，眼、鼻和透皮途徑。用于這些劑型的制劑如上所述。(R,R)-非諾特羅或所公開(kāi)的非諾特羅類似物的有效量至少隨著特定用法、被治療受試者、病癥的嚴(yán)重性和治療組合物的給藥方式的不同而異。組合物的"治療有效量"是特定化合物的足夠在被治療受試者中實(shí)現(xiàn)所需效果的量。例如，該治療有效量可以是(R，R)-非諾特羅的為預(yù)防、抑制、減少或緩解受試者的肺和/或心臟病癥和/或病癥的一種或多種癥狀所必需的量。理想地，(R，R)-非諾特羅或所公開(kāi)的非諾特羅類似物的治療有效量是足夠預(yù)防、抑制、減少或緩解肺和/或心臟病癥和/或病癥的一種或多種癥狀而不引起顯著的對(duì)寄主細(xì)胞的細(xì)胞毒作用的量。所公開(kāi)的非諾特羅或藥物組合物的治療有效劑量可由本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)決定，目的是實(shí)現(xiàn)所公開(kāi)的可應(yīng)用的化合物在本文實(shí)施例中達(dá)最少高達(dá)EC5o的濃度。劑量范圍的實(shí)例為約0.001到約10毫克/千克體重，經(jīng)口給藥，以單一劑量或分劑量給藥。在具體實(shí)施例中，劑量范圍為約0.005到約5毫克/千克體重，經(jīng)口給藥，以單一劑量或分劑量給藥(假定平均體重為約70千克；對(duì)于體重比平均體重或多或少的人相應(yīng)地調(diào)整該值)。對(duì)于口服給藥，組合物以例如包含約1.0到約50毫克的活性成分、特別是約約2.5毫克、5毫克、約10毫克、或約50毫克的活性成分的片劑形式被提供，用于對(duì)被治療的受試者的劑量根據(jù)癥狀進(jìn)行調(diào)整。在一個(gè)示例性的經(jīng)口劑量給藥方案中，包含約1毫克到約50毫克的活性成分的片劑，每天給藥2-4次，諸如2次、3次或4次。對(duì)于特定受試者的劑量給藥的特定劑量水平和頻率是變化的并且根據(jù)多種因素的不同而異，所述因素包括具體化合物的活性，化合物的代謝穩(wěn)定性和作用時(shí)間，受試者的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食，給藥方式和時(shí)間，排泄速率，藥物組合，以及被治療受試者的病況的嚴(yán)重性。本公開(kāi)的主題進(jìn)一步通過(guò)以下的非限制性實(shí)施例來(lái)說(shuō)明。實(shí)施例實(shí)施例1材料和方法試劑。苯基甲基磺酰氟(PMSF)、芐脒、亮肽素、胃酶抑素A、MgCl2、EDTA、Trizma-鹽酸鹽(Tris-HCl)、(士)-普萘洛爾和最低必需培養(yǎng)基(MEM)從SigmaAldrich(St.Louis,MO)獲得。蛋卵磷脂脂質(zhì)(PC)得自AvantiPolarLipids(Alabaster,AL)。(土)-非諾特羅購(gòu)自SigmaAIdrich，以及[3日-(+)-非諾特羅得自AmershamBiosciences(Boston，MA)。有機(jī)溶劑正己垸、異丙醇和三乙胺以特純HPLC級(jí)溶劑得自CarloErba(Milan，Italy)。胎牛血清和青霉素-鏈霉素購(gòu)自LifeTechnologies(Ga池ersburg,MD)，禾口[!25l]-(土)-碘氰基吲哚洛爾(ICYP)購(gòu)自NENLifeScienceProducts,Inc.(Boston,MA)。(R,R)-非諾特羅和(S，S)-非諾特羅的制備和鑒定。(R，R)-非諾特羅和(S,S)-非諾特羅使用HPLC技術(shù)從(土)-非諾特羅制備，該HPLC技術(shù)使用HPLC柱(25cmX0.46cmi.d.)，該柱包含三-(3,5-二甲基苯基氨甲酸酯)手性固定相(CHIRALPAKADCSP，ChiralTechnologies,WestChester,PA;CHIRALPAK是DaicelChemicalIndustriesLtd.,Exton,PA的商標(biāo))。色譜系統(tǒng)組成如下JASCOPU-980溶劑輸送系統(tǒng)，和JASCO⑧MD-910多波長(zhǎng)監(jiān)測(cè)器，其設(shè)定在入二230nm并與電腦工作站連接；JASCO是JASCO，Inc.,Tokyo,Japan的注冊(cè)商標(biāo)。使用具有20樣品回路管的Rheodyne型7125注射器用于注射到0.2-0.3毫克(土)-非諾特羅到色譜系統(tǒng)上。流動(dòng)相是含0.1%三乙胺的正己烷/異丙醇C88/12v/v)，流速是1毫升/分鐘，且系統(tǒng)的溫度使用柱加熱器/冷卻器(型號(hào)7955，JonesChromatographyLtd"UK)保持在25。C。分離的(R,R)-非諾特羅和(S,S)-非諾特羅當(dāng)其各自的峰從色譜柱上被洗脫時(shí)以10毫升記分被收集。收集2毫升中間級(jí)分并丟棄以改善被收集的異構(gòu)體的對(duì)映體純。被拆分的(R，R)-非諾特羅和(S，S)-非諾特羅的立體化學(xué)構(gòu)型使用在JASCOJ-800分光偏振計(jì)獲得的圓二色性(CD)測(cè)量進(jìn)行確定。將(R,R)-非諾特羅和(S,S)-非諾特羅溶解在異丙醇中并使用在室溫下1厘米通路長(zhǎng)度獲得測(cè)量值。固定化卩2-AR前沿色譜法。使用上述技術(shù)制備包含固定化P2-AR的液相色譜柱(Beigid等人，Anal.Chem.，76:7187-7193，2004)?？偠灾?，從HEK293細(xì)胞系獲得細(xì)胞膜，該HEK293細(xì)胞系已被編碼人卩2-AR的cDNA轉(zhuǎn)染。使用根據(jù)microBCA方法測(cè)定的相當(dāng)于5-7毫克總蛋白的小份細(xì)胞小球懸浮液來(lái)構(gòu)建柱。在io毫升緩沖液中制備膜，該緩沖液組成如下包含MgCl2(2mM)的Tris-HCl[50mM，pH7.4]，芐脒(lmM)，亮肽素(0.03mM)，胃酶抑素(0.005mM)和EDTA(lmM)。將180毫克小份的固定化人工膜色譜載體(IAM-PC，12微米粒子大小，300A孔徑大小，得自RegisChemicalCo.，MortonGrove,IL)和80uMPC加入到膜制備物中，并將所得混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，轉(zhuǎn)移到(5厘米長(zhǎng)度)硝化纖維透析膜(MW截?cái)嘀?0,000Da，PierceChemical,Rockford,IL)并置于處在40°C的1L的透滲析緩沖液中24小時(shí)，該透滲析緩沖液組成如下包含EDTA(lmM)的Tris-HCl[50mM,pH7.4]，MgCl2(2mM)，NaCl(300mM)和PMSF(0.2mM)。使用新鮮的緩沖液重復(fù)透滲析步驟兩次。在透滲析之后，將混合物在120xg下離心3分鐘，棄去上清液并收集包含帶有固定化受體的膜的IAM載體小球。將小球再懸浮在2毫升的色譜流動(dòng)緩沖液中，該緩沖液由包含EDTA(lmM)和MgCl2(2mM)的Tris-HCl[10mM，pH7.4]組成，并使用蠕動(dòng)泵以0.3毫升/分鐘的流速將懸浮液泵出HR5/2色譜玻璃柱(AmershamPharmaciaBiotech,Uppsala，Sweden)。裝配末端適配器得到0.4毫升的總凝膠柱床體積。當(dāng)不使用時(shí)將柱在4'C下保存。將包含固定化卩2-AR固定相的柱置于色譜系統(tǒng)中，該色譜系統(tǒng)組成如下HPLC泵(10-AD，ShimadzuInc.,Columbia,MD)、帶有樣品回路管的手控FPLC注射器(AmershamBiotechnology,Uppsala,Sweden),填塞的固定化受體柱和在線放射性流檢測(cè)器(IN/US，Tampa,FL)，所有部件順序地連接。在前沿色譜研究中，連續(xù)地使用5-7毫升的樣品提及直到洗脫曲線顯示平臺(tái)區(qū)域。流動(dòng)緩沖液組成如下包含EDTA(lmM)和MgCl2(2mM)以及0.05nM[3司-(+)-非諾特羅(作為標(biāo)記配體)的Tris-HCl[10mM，pH7.4]。將(R,R)-非諾特羅或(S,S)-非諾特羅以O(shè).l、80.0、240和700nM的連續(xù)濃度加入到流動(dòng)緩沖液中并施加到柱上。在每個(gè)注射試樣之間，固定化受體柱用約80毫升的流動(dòng)緩沖液平衡，不分別添加(R，R)-非諾特羅或(S,S)-非諾特羅。所有的色譜研究在室溫下在0.2毫升/分鐘的流速進(jìn)行。釆用非線性方程(l)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析以測(cè)定結(jié)合部位數(shù)和離解常數(shù)，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>其中Vi是溶質(zhì)的洗脫體積，Vmin是在飽和點(diǎn)的洗脫體積，P是可獲得的結(jié)合部位的數(shù)目，M是標(biāo)志配體的濃度，以及Kd是配體的離解常數(shù)。配體-置換結(jié)合。在用人(32-AR進(jìn)行腺病毒感染24小時(shí)后，在細(xì)胞裂解緩沖液中收獲HEK293細(xì)胞，該緩沖液是包含EGTA[5mM]的Tris-HCl[5mM,pH7.4]，并在冰上均化15次，樣品在30,000xg下離心15分鐘以使細(xì)胞成小球，將膜再懸浮在結(jié)合緩沖液中，該緩沖液是包含NaC1(120mM)、KC1(5.4mM)、CaCl2(1.8mM)、MgCI2(0.8mM)和葡萄糖(5mM)的Tris-HCl[20mM,pH7.4]，并在-80'C下分小份保存。使用飽和量(1-300pM)的^AR特異性配體['"I]氰基吲哚洛爾(ICYP)在5-10pg的膜蛋白上進(jìn)行結(jié)合測(cè)定。關(guān)于競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，5-10嗎的膜蛋白用50|iM的GTP^(不可水解的鳥(niǎo)苷三磷酸)預(yù)先處理，然后與125ICYP(50pM)以及不同濃度的非諾特羅或其異構(gòu)體在250(iL的總體積中溫育。在20)iM普萘洛爾存在的條件下測(cè)定非特異性結(jié)合。反應(yīng)在37"C下的250(iL的結(jié)合緩沖液中進(jìn)行1小時(shí)。結(jié)合反應(yīng)的終止如下進(jìn)行添加用冰冷卻的Tris-HCl[10mM,pH7.4]到膜懸浮液中，然后迅速真空過(guò)濾通過(guò)玻璃纖維纖維過(guò)濾器(WhatmanGF/C)。每個(gè)過(guò)濾器用另外7mL用冰冷卻的Tris-HCl[10mM，pH7.4]洗滌三次。在y粒子計(jì)數(shù)管中測(cè)定濕過(guò)濾器的放射性。所有測(cè)定一式兩份進(jìn)行，并且將受體密度歸一化為膜蛋白的毫克數(shù)。通過(guò)對(duì)飽和結(jié)合等勢(shì)線進(jìn)行Scatchard分析來(lái)測(cè)定ICYP的Ka和最大結(jié)合部位數(shù)(Bmax)。得自競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合研究的數(shù)據(jù)采用GRAPHPADPRISM軟件(GRAPHPADPRISM是GraphPadSoftware,Inc.,SanDiego,CA的注冊(cè)商標(biāo))，用1位點(diǎn)或2位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合曲線進(jìn)行分析。實(shí)施例2(R,R)-非諾特羅和(S，S)-非諾特羅的純化和鑒定本實(shí)施例說(shuō)明了從(士)-非諾特羅拆分出(R，R)-非諾特羅和(S,S)-非諾特羅到高的對(duì)映體純度。釆用實(shí)施例1中所述的色譜分析條件，在AD-CSP上將(土)-非諾特羅分離成其組分對(duì)映體(R,R)-非諾特羅和(S，S)-非諾特羅。如圖1所示，采用對(duì)映體選擇因子(a)1.21和拆分因子(Rs)1.06來(lái)拆分兩種立體異構(gòu)體。因?yàn)橛^察到色譜峰有脫尾，收集和丟棄2毫升中間級(jí)分。采用相同的色譜分析條件分析收集的峰并且數(shù)據(jù)顯示兩個(gè)對(duì)映體都以>97%的立體化學(xué)純度被制得。被分離的級(jí)分絕對(duì)構(gòu)型的歸屬采用其手性光學(xué)(chir叩tical)性質(zhì)完成。兩個(gè)級(jí)分的紫外線(UV)光譜在約280和230都包含相同的最大值，表明兩個(gè)對(duì)映體具有相同的UV發(fā)色團(tuán)。對(duì)于較少的被保留的對(duì)映體級(jí)分而言，圓二色性(CD)光譜在約280和215nm顯示負(fù)CD帶，而該光譜在230和200納米處顯示正值。CD帶的符號(hào)對(duì)于大部分的被保留的非諾特羅級(jí)分而言是相反的，這證實(shí)了兩種級(jí)分的對(duì)映體性質(zhì)。兩種對(duì)映體級(jí)分的最低能量UV和圓二色性譜分別如圖2A和2B所示。較少的被保留的色譜級(jí)分顯示在約280納米處的負(fù)CD帶，而大部分被保留的色譜級(jí)分的圓二色性譜在相同波長(zhǎng)下包含正CD帶(圖2B)。這些結(jié)果指出每個(gè)級(jí)分包含非諾特羅的對(duì)映體之一。最低能量CD帶的符號(hào)通過(guò)釆用對(duì)于手性芐基衍生物的Brewster-Buta/Smith-Fontanasector規(guī)則用于對(duì)分離的非諾特羅對(duì)映體進(jìn)行絕對(duì)構(gòu)型的歸屬(Brewster和Buta,J.Am.Chem.Soc,88:2233-2240，1996)。這一sector規(guī)則用于預(yù)測(cè)與帶有羥基或氨基部分的芐基化合物的JLb電子躍遷有關(guān)的CD帶的符號(hào)，并且已經(jīng)主要被應(yīng)用于包含單個(gè)產(chǎn)生立體異構(gòu)中心的構(gòu)象可變的芳族化合物。在非諾特羅的情況下，存在兩個(gè)產(chǎn)生立體形成中心，然而，據(jù)信觀察到的旋光度主要由芳基甲醇部分來(lái)確定，因?yàn)樵诜辑h(huán)和立體形成中心之間的距離所導(dǎo)致。應(yīng)用這一規(guī)則允許歸屬得出包含在較少被保留的級(jí)分(其在280納米下顯示負(fù)CD帶)中所包含的非諾特羅對(duì)映體的絕對(duì)構(gòu)型為(S,S)，和包含在大部分被保留的級(jí)分(其在280納米下顯示正CD帶)中所包含的非諾特羅對(duì)映體的絕對(duì)構(gòu)型為(R，R)。這一歸屬被單獨(dú)合成的(S,S)-非諾特羅和(R,R)-非諾特羅所證實(shí)。這些研究指出(R,R)-非諾特羅和(S,S)-非諾特羅可從(土)-非諾特羅中被分離達(dá)到高的對(duì)映體純度。實(shí)施例3(R,R)-非諾特羅和(5,5)-非諾特羅與固定化卩2-AR結(jié)合的色譜測(cè)定本實(shí)施例說(shuō)明了(R，R)-非諾特羅負(fù)責(zé)臨床上使用的藥物(土)-非諾特羅的(32-AR結(jié)合。先前已經(jīng)報(bào)告了包含從(32-ARHEK-293細(xì)胞系獲得的固定化膜的液相色譜固定相的制備、表征和應(yīng)用(Beigi等人，Anal.Chem.，76:7187-7193,2004)。例如，Beigi等人(Anal.Chem.，76:7187-7193,2004)闡述了前沿置換色譜法可用于測(cè)定兩種[52AR拮抗劑(S)-普萘洛爾和CGP12177A對(duì)固定化(32-AR的結(jié)合的解離常數(shù)(Kd)。采用CGP12177A作為標(biāo)志配體的Zonal置換色譜法表明了固定化(32-AR保持其對(duì)映體選擇性，因?yàn)榧尤?S)-普萘洛爾到流動(dòng)相比加入(R)-普萘洛爾獲得更大置換(同上)。加入(土)-非諾特羅到流動(dòng)相也顯示在固定化(32-AR中發(fā)生構(gòu)型改變(同上)。已有文獻(xiàn)記載了激動(dòng)劑誘導(dǎo)的P2-AR以及大部分G蛋白偶聯(lián)受體從靜止態(tài)到激活態(tài)的構(gòu)象變化(Ghanoui等人，Proc.Natl.Acad.ScLU.S.A.,98:5997-6002,2001)。現(xiàn)在，固定化卩2-AR柱用包含作為標(biāo)志的[^H]-非諾特羅的流動(dòng)緩沖液平衡，然后開(kāi)始置換研究。據(jù)假設(shè)采用前沿置換色譜法計(jì)算的結(jié)合數(shù)據(jù)反應(yīng)出(R,R)-非諾特羅和(S,S)-非諾特羅對(duì)受體激活態(tài)的結(jié)合。在前沿色譜法中，色譜描圖的最初的平坦部分代表對(duì)于固定化靶標(biāo)具有特異性的標(biāo)志配體的結(jié)合(在該研究中是P2-AR)以及與固定化膜片段上的其它部分的非特異性結(jié)合。特異性結(jié)合部位的飽和導(dǎo)致在表示建立新平衡的平臺(tái)后產(chǎn)生突破前沿。加入第二種化合物到流動(dòng)相中將使色譜描圖向左側(cè)移動(dòng)，如果化合物與標(biāo)志配體競(jìng)爭(zhēng)性與(32-AR結(jié)合。在該移動(dòng)的幅度和標(biāo)記配體濃度之間的關(guān)系可用于計(jì)算置換劑對(duì)靶標(biāo)的結(jié)合親合力和活性結(jié)合部位的數(shù)目。最近己綜述了該方法(Moaddel禾口Wainer,Anal.Chem.Acata，546:97-105，2006)。如圖3(曲線1)所示，向流動(dòng)緩沖液中加入[3司-非諾特羅得到預(yù)期的前沿色譜法描圖。順序地加入濃度增加的(R，R)-非諾特羅到流動(dòng)緩沖液中產(chǎn)生色譜描圖向更小保留體積方向的相應(yīng)偏移(圖3，曲線2-4)。使用等式1分析了(R,R)-非諾特羅的相應(yīng)濃度的幅度和偏移，計(jì)算的離解常數(shù)Kd為472nM并且可用的結(jié)合部位數(shù)[P]為176皮摩爾/柱，r2=0.9999(n=T)。順序地添加濃度增加的(S，S)-非諾特羅到流動(dòng)緩沖液中不發(fā)生色譜描圖向更短保留時(shí)間方向的相應(yīng)偏移。因此，(s,s)-非諾特羅對(duì)固定化P2-AR沒(méi)有顯著的親合性。為了證實(shí)色譜結(jié)果，使用從相同的HEK-293細(xì)胞系獲得的膜(以構(gòu)建固定化卩2-AR柱)進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)的膜結(jié)合研究。數(shù)據(jù)反映了對(duì)于(R,R)-非諾特羅存在單個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，具有的(平均值土SD)Kd=457±55nM(n=4)，對(duì)于(S,S)-非諾特羅，Kd=109,000±10,400nM(n=4)。這些數(shù)據(jù)顯示了在固定化細(xì)胞膜上進(jìn)行的前沿親和色譜法可用于測(cè)定與目標(biāo)受體的配體結(jié)合的對(duì)映體選擇性的幅度。另外，得自前沿親和色譜法和配體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合研究的結(jié)果都表明(R,R)-非諾特羅負(fù)責(zé)臨床上使用的藥物(+)-非諾特羅的p2-AR結(jié)合。實(shí)施例4(R，R)-非諾特羅和(S，S)-非諾特羅對(duì)心肌收縮性的影響本實(shí)施例說(shuō)明了(R,R)-非諾特羅和(S，S)-非諾特羅差別性激活牽涉細(xì)胞收縮性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的卩2-腎上腺素能受體/刺激性雜三聚體G蛋白(AR/Gs)。為了確定是否(R,R)-非諾特羅和(S，S)-非諾特羅差別性激活在細(xì)胞收縮性的調(diào)節(jié)中的(32-AR/GS信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，使用各種濃度的(R，R)-非諾特羅或(S,S)-非諾特羅對(duì)新分離的成年大鼠心肌細(xì)胞進(jìn)行灌注。這些研究使用先前描述的方法進(jìn)行(Zhou等人，Mol.Pharmacol.,200,58:887-894)?？偠灾?，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的酶技術(shù)從2-4月齡的大鼠心臟中分離出單個(gè)的心室肌細(xì)胞。將分離的細(xì)胞再懸浮在HEPES緩沖溶液[20mM,pH7.4]，該緩沖液包含NaCl(137mM)，KC1(5.4mM)，MgCl2(1.2mM)，NaH2PO4(1.0mM)，CaCl2(1.0mM)和葡萄糖(20mM)。在細(xì)胞分離物中在8小時(shí)內(nèi)進(jìn)行所有研究。將細(xì)胞置于倒置顯微鏡(ZeissmodelIM-35,Zeiss,Thornwood,NY)的載物臺(tái)上，以1.8毫升/分鐘的流速灌注HEPES-緩沖液，并在0.5Hz下在23(TC下進(jìn)行電刺激。通過(guò)采用時(shí)間分辨率為3毫秒的光電二極管陣歹U(Model1024SAQ,Reticon，Boston,MA)的光學(xué)邊緣-跟蹤方法監(jiān)控細(xì)胞長(zhǎng)度。在電刺激后通過(guò)測(cè)量細(xì)胞長(zhǎng)度的縮短的百分?jǐn)?shù)測(cè)量細(xì)胞收縮。加入(R,R)-非諾特羅(l(rS到IO'5M),相對(duì)于(士)-非諾特羅，產(chǎn)生顯著提高的正性肌力作用和顯著的劑量-應(yīng)答曲線向上偏移，(圖4A)。著通過(guò)最大收縮應(yīng)答從265±11.6%增加到306±11.8%休止細(xì)胞長(zhǎng)度(pO.05)禾口ECso從-7,0士0.2降低到-7.1±0.2log[M](pO.05)進(jìn)行說(shuō)明。相比之下，(S,S)-非諾特羅只有較小的正性肌力作用(圖4B)。心肌細(xì)胞收縮性研究指出(R,R)-非諾特羅負(fù)責(zé)在心肌細(xì)胞中觀察到的(32-AR激動(dòng)劑活性。實(shí)施例5合成一般過(guò)程所有反應(yīng)采用商品級(jí)的試劑和溶劑進(jìn)行。四氫呋喃(THF)通過(guò)與鈉和二苯甲酮回流進(jìn)行干燥。二氯甲垸通過(guò)與氫化鈣回流進(jìn)行干燥。在Cary50Concentration分光光度計(jì)上記錄紫外光譜。在RudolphResearchAutopolIV上進(jìn)行旋光度觀!l定。在VarianMercuryVMX300-MHz分光光度計(jì)上采用四甲基硅垸作為內(nèi)標(biāo)記錄NMR譜。使用以下縮寫(xiě)報(bào)導(dǎo)NMR峰裂數(shù)S，單峰；d，雙重線；t，三重峰；q，四重峰；p，五重峰；m,多重峰；apt.，明顯；和br，寬峰。低分辨率質(zhì)譜在裝備有電噴射(ESI)和大氣壓力化學(xué)電離(APCI)探針的FinniganLCQDu°LCMS/MS大氣壓力化學(xué)電離(API)四極離子阱MS系統(tǒng)上獲得。分析性HPLC數(shù)據(jù)采用具有PDA檢測(cè)的Waters2690SeparationsModule獲得。方法(a):ThermoHypersilBDS100X4.6mmCI8柱，H20/CH3CN/TFA。方法(b):BrownleePhenylSpheri-5100x4.6mm,水/乙腈/TFA。方法(c):Vydac150x4mmC18柱，H20/異丙醇/TFA。方法(d):CHIRALPAKAD-H250x10mm,95/5/0.05CH3CN/異丙醇/二乙胺。使用Merck硅膠(230-400目)用于開(kāi)放式柱色譜法(opencolumnchromatography)。3'，5'-二節(jié)氧基-a-溴代苯乙酮(46)。將2.4mL(46mmol)的Bi"2在45mL的CHC13中的溶液在1小時(shí)內(nèi)滴加到攪拌的9.66g(29mmol)的3',5'-二節(jié)氧基苯乙酮(45)在40mL的CHC13中的溶液中，所得溶液在良好攪拌下在1小時(shí)內(nèi)回溫到室溫，然后傾入到100mL的冷水中并被轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，在分液漏斗中分離CHCl3級(jí)分，用鹽水溶液洗滌，干燥(Na2S04)，過(guò)濾并濃縮到10.8g，該材料被施加到500g硅膠上，用CHC13洗脫獲得2.65g(22。/。)的化合物46，為白色固體JHNMR(CDCl3)54.39(s,2H)，5.08(s，4H)，6.85(t，1H,J=2.1Hz),7.20(d,2H,J=2.4Hz)，7.31-7.44(m，IOH)。用于將化合物46進(jìn)行對(duì)映體選擇性還原得到3',5'-二芐氧基苯基溴代醇[(R)-8,(S)-8]的一般過(guò)程。在氬氣氛下，將0.06mL(0.316mmo1，10mol%)的在乙醚中的5.0M硼-二甲硫醚復(fù)合物(BH3SCH3)—次性加入到25mg(0.16mmol,5mol%)的適當(dāng)?shù)捻樖?l-氨基-2-茚滿醇在3mL的無(wú)水THF中的溶液中，該材料在氬氣氛下在30分鐘內(nèi)被加入到1.3g(3.16mmol)的3',5'-二芐氧基-a-溴代苯乙酮在20mL的無(wú)水THF中的溶液中，同時(shí)以每次0.05mL加入0.45mL的5.0M硼-的二甲硫醚復(fù)合物。所得溶液在氬氣氛下攪拌2小時(shí)，然后用3mL甲醇淬滅，控制氣體放出。真空除去溶劑，將所得殘余物集聚在30mLCHCb中并用25mL的0.2M硫酸洗滌，然后用20mL鹽水洗滌，然后干燥(Na2S04)，過(guò)濾并蒸發(fā)。(R)-(-)-3',5'-二芐氧基苯基溴代醇[R-8]。使用(爪,23)-(+)-順式-1-氨基-2-茚滿醇作為對(duì)映體選擇性還原催化劑制備，得到1.02g(78%)的(R)-8，為白色細(xì)粉末。'HNMR(CDCl3)53.44(dd，1H，J=9.0,10.5Hz),3.55(dd,1H，J=3.3，10.5Hz),4.79(dd,1H，J=3.3，8.7Hz)，4.97(s,4H),6.51(t,1H,J=2.4Hz),6.57(d,2H，J=1.8Hz)，7.21-7.38(m，10H);[a]D=-12.1。(c=1.0MeOH)。(S)-(+)-3'，5'-二芐氧基苯基溴代醇[(S)-8]。使用(lS，2R)-(-)-順式小氨基-2-茚滿醇作為對(duì)映體選擇性還原催化劑制備，得到1.07g(82%)的(S)-8，為白色細(xì)粉末。iHNMR(CDCb)53.43(dd,1H,J=9.0,10.5Hz),3.55(dd,1H，J=3.3,10.5Hz)，4.78(dd,1H,J=3.3,8.7Hz)，4.96(s,4H),6.50(t，1H,J=2.4Hz),6.57(d,2H,J=1.8Hz),7.21-7.39(m，10H);[a]D=十11.8。(c=0.90MeOH)。4-芐氧基苯乙酮(34)。向10.0g(41.3mmol)的4-芐氧基苯基乙酸(31)中加入20mL的乙酸酐和20mL的吡啶，其在攪拌下在氬氣氛下加熱回流6小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶解在CHC13(50mL)中，并用1NNaOH(2X50mL)洗滌，干燥有機(jī)層(MgS04)，過(guò)濾并蒸發(fā)得到11.8g的琥珀色油狀物。在設(shè)置在17(TC的油浴中進(jìn)行0.1mmHg的真空蒸餾，然后進(jìn)行用8/2的CH2Cl2-己烷洗脫的硅膠色譜法，得到2.68g(27%)。'HNMR(CDC13)S2.14(s，3H)，3.63(s,2H)，5.05(s,2H)，6.94(d，2H,J=8.7Hz),7.10(d,2H,J=8.7Hz),7.26-7.47(m,5H)。苯乙酮(35)。將20.4g(0.15mol)的苯基乙酸、乙酸酐(70mL)和吡啶(70mL)的溶液在攪拌下在氬氣氛下加熱回流6小時(shí)，蒸發(fā)溶劑并將殘余物溶于CHC13(100mL)中，用1NNaOH(2X100mL)洗滌并干燥有機(jī)層(MgS04)，過(guò)濾并蒸發(fā)得到20.4g。在設(shè)置在160'C的油浴中進(jìn)行0.1mmHg的真空蒸餾，然后進(jìn)行用1/1的己烷/CH2Cl2洗脫的硅膠色譜法，得到5.5g(27%)。'HNMR(CDC13)52.15(s，3H),3.70(s,2H),7.20-7.36(m，5H)。1-萘-1-基-丙烷-2-酮(36》將37.2g(20mmol)的萘甲酸(33)、乙酸酐(IOOmL)和吡啶(lOOmL)的溶液在攪拌下在氬氣氛下加熱回流6小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶解在CHCl3(200mL)中，用1NNaOH(2X150mL)洗滌并干燥有機(jī)層(MgS04)，過(guò)濾并蒸發(fā)得到34.6g。在設(shè)置在170。C的油浴中進(jìn)行0.5mmHg的真空蒸餾，然后進(jìn)行用1/1的己垸化112(:12洗脫的硅膠色譜法，得到9.7g(26%)。&NMR(CDC13)52.11(s,3H),4.12(s，2H),7唇7.53(m,4H),7.81(d,1H，J=8.4Hz),7.87-7.90(m，2H)。制備2-芐基氨基丙烷(37-39,42，43)的一般過(guò)程。向冷卻到0°C的在CH2Cl2(c-0.5M)中的適當(dāng)?shù)耐?1eq)中加入冰醋酸(leq)，然后力口入芐基胺(l叫)和NaBH(Ac0)3(1.4eq)，將反應(yīng)混合物回溫到室溫并在氬氣氛下攪拌20小時(shí)，將反應(yīng)混合物冷卻(冰浴)，滴加10%NaOH(5eq)，然后提取到CH2Cb中，用鹽水洗滌，然后將產(chǎn)物干燥(Na2S04)，過(guò)濾并蒸發(fā)。1-(4-芐氧基)-2-芐基氨基丙垸(37)。從4-芐氧基-苯乙酮(34;2.0g,8.3mmol)制備，得到2.61g(95%)，為黃褐色固體。&NMR(CDC13)51.10(d，3H，J=6.3Hz)，2.50-2.58(m,1H)，2.68-2.77(m,1H),2.82-2.89(m,1H)，3.75(dd，2H,J=12Hz,J=30Hz)，5.05(s，2H)，6.90(d,2H,J=8.7Hz)，7.04(d，2H，J=8.7Hz)，7.17-7.42(m,10H);MS(APCI+)m/z(rel):332(100)。1-苯基-2-芐基氨基丙垸(38)。從苯乙酮(35;5.5g，41mmol)制備，得到8.4g(91°/o)，為黃褐色固體。&NMR(CDC13)51.09(d,3H，J=6.3Hz),2.61-2.81(m,2H)，2.92(m，1H),3.80(dd,2H),7.14-7.30(m,10H);MS(APCI+)m/z(rel):226(100)。1-(1'-萘基)-2-芐基氨基丙垸(39)。從l-萘-l-基-丙垸-2-酮(36;5.0g,27.1mmol)帝U備，得到7.0g(94%)，為黃褐色固體。'HNMR(CDC13)51.14(d，3H,J=6.0Hz)，3.02-3.18(m，2H),3.27(m，1H),3.80(dd，2H,J=13.2，43.8Hz)，7.13-7.23(m,5H)，7.31-7.48(m,4H)，7.73(d,1H，J=7.8Hz),7.83墨7.86(m，1H)，7.96-7.99(m,1H);MS(APCI+)m/z(rel):276(100)。1-(4'-甲氧基苯基)-2-芐基氨基丙垸(42)。從4-甲氧基苯乙酮(40;2.75g，13.1mmol)制備，得到2.31g(97%)。'HNMR(CDC13)S1.10(d,3H,J=6.3Hz)，2.56-2.75(m,2H),2.卯(m，1H)，3.79(s，1H),3.79(m,2H，J=13.2Hz),6.82(d,2H,J=8.7Hz)，7.07(d,2H，J=8.7Hz),7.18-7.32(m，5H);MS(APCI+)m/z(rel):256(100)。1國(guó)(4'-硝基苯基)-2-芐基氨基丙垸(43)。從4-硝基苯乙酮(41;4.95g，28mmol)制備，得到7.32g(98%)，為琥珀色油狀物。'HNMR(CDC13)S1.60(d，3H,J=6.3Hz),2.73國(guó)2.85(m,1H),3.00-3.12(m，2H),3.86(dd，2H,J=26Hz,J=60Hz),7.23-7.40(m,5H)，7.30(d，2H,J=9.0Hz)，8.14(d,2H，J=8.7Hz).MS(APCI+)m/z(rel):271(100)。2-芐基氨基丙垸[(R)-10-14，(S)-10-14]的對(duì)映體分離的一般過(guò)程。將適當(dāng)?shù)耐庀?-芐基氨基丙垸(1eq)與適當(dāng)?shù)墓鈱W(xué)活性的扁桃酸(leq)在甲醇(c:0.5M)中合并并回流直到溶液變均勻，然后冷卻到室溫，晶體被過(guò)濾、收集、結(jié)晶，并從甲醇(c^0.3M)中重結(jié)晶兩次，得到光學(xué)活性的2-芐基氨基丙垸扁桃酸鹽，通過(guò)在10%K2C03和CHCl3之間分配扁桃酸鹽將鹽轉(zhuǎn)化為游離胺，用于收集NMR和旋光數(shù)據(jù)，干燥有機(jī)提取物(Na2S04)并蒸發(fā)。(R)-(-H-(4'-芐氧基)-2-芐基氨基丙烷[(R)-IO]。將2.13g(6.42mmol)的l-(4-芐氧基)-2-芐基氨基丙垸(37)與972mg(6.42mmol)的(R)-(-)-扁桃酸反應(yīng)，在后處理后得到295mg(28%，基于對(duì)映體豐度)的游離胺。'HNMR(CDCb)S1.12(d,3H,J=6.3Hz),2.58-2,78(m，2H),2.82-2.91(m，1H)，3.75(dd，2H,J=12Hz，J=30Hz)),5.07(s,2H)，6.93(d,2H,J-8.7Hz),7.10(d,2H,J=8.7Hz),7.21-7.42(m，■);MS(APCI+)m/z(rel):332(100);[a]D=-19.1。(c=1.4,MeOH)。(S)-(+H-(4'-芐氧基)-2-芐基氨基丙烷[(S)-10]。將從(R)-10的分離時(shí)所得的洗液濃縮并在50mL氯仿和50mL的10°/。的K2C03的水溶液中分配，有機(jī)物用鹽水洗滌，干燥(Na2S04)，過(guò)濾并蒸發(fā)達(dá)到1.70g(5.1mmol)，有機(jī)物與782mg(5.1mmol)的(S)-(+)-扁桃酸(如前所述)回流并結(jié)晶3次，獲得670mg的(S)-胺，(S)-扁桃酸鹽。(S)-胺，(S)-扁桃酸鹽在醚中研磨，然后在30mL氯仿和20mL10%的K2C03的水溶液中分配，有機(jī)分離物用鹽水洗滌，然后干燥(Na2S04)，過(guò)濾并蒸發(fā)，得到366mg的游離胺(33%，基于對(duì)映體豐度)。'HNMR(CDC13)S1.10(d,3H,J=6.3Hz)，2.58-2.78(m，2H)，2.82-2.91(m,1H),3.76(dd,2H,J=12,30Hz),5.06(s，2H)，6.93(d,2H，J=8.7Hz),7.09(d,2H,J=8.7Hz)，7.21-7.42(m,10H);MS(APCI+)m/z(rel):332(100);[a]D=十19.2。(c=1.5MeOH)。(R)+)小(4'-甲氧基苯基)-2-芐基氨基丙垸[(R)-ll]。將3.02g(l1.8mmol)的l-(4'-甲氧基苯基)-2-芐基氨基丙烷(42)的樣品與1.8g(11.8mmol)的(R)-(+)-扁桃酸反應(yīng)，在后處理后得到530mg(35%，基于對(duì)映體豐度)的游離胺。&NMR(CDC13)S1.10(d,3H,J=6.3Hz),2.57-2.76(m,2H),2.88-2.94(m，1H),3.79(s,3H)，3.72-3.88(m,2H),6.82(d，2H,J=8.7Hz)，7.07(d，2H,J=8.4Hz),7.15-7.3l(m,5H);MS(APCI+)m/z(rel):256(100);[a]D=-30.4。(c=1,25MeOH)。(S)-(+)-l-(4'-甲氧基苯基)-2-芐基氨基丙烷[(S)-ll]。將3.36g(13.2mmol)的外消旋物l-(4'-甲氧基苯基)-2-芐基氨基丙烷(42)的樣品與2.0g(13.2mmol)的(R)-(-)-扁桃酸反應(yīng)，在后處理后得到740mg(44%，基于對(duì)映體豐度)的游離胺。！HNMR,(CDC13)S1.10(d,3H,J=6.2Hz),2.55陽(yáng)2.76(m，2H),2.88陽(yáng)2,95(m,1H)，3.73-3.88(m，2H)，3.79(s,3H)，6.80(d,2H，J=8.7Hz),7.08(d，2H,J=8.4Hz),7.15-7.30(m,5H);MS(APCI+)m/z(rel):256(100);[ct]D=+30.5°(c=1.1MeOH)。(R)-(-)-H4'-硝基苯基)-2-芐基氨基丙烷[(R)-12]。將2.0g(7.3mmol)的l-(4'-硝基苯基)-2-芐基氨基丙垸(43)的樣品與1.13g(7.3mmol)的(S)-(+)-扁桃酸反應(yīng)，在后處理后得到486mg(49Q/Q,基于對(duì)映體豐度)的游離胺。'HNMR(CDC13)S1.60(d，3H,J=6.3Hz)，2.73-2.85(m,1H),3.00-3.12(m，2H),3.86(dd，2H，J=26Hz,J=60Hz),7.23-7.40(m，5H),7.30(d，2H，J=9.0Hz)，8.14(d,2H,J=8.7Hz);MS(APCI+)m/z(rel):271(100);[a]D=-9.3°(c=1.0MeOH)。(S)-(+)-l-(4'-硝基苯基)-2-芐基氨基丙烷[(S)-12]。將2.0g(7.3mmol)的l-(4'-硝基苯基)-2-芐基氨基丙烷(43)的樣品與1.13g(7.3mmol)的(R)-(-)-扁桃酸反應(yīng)，在后處理后得到640mg(65%，基于對(duì)映體豐度)的游離胺。NMR(CDC13)S1.60(d,3H,J=6.3Hz)，2.73-2.85(m,1H),3.00-3.12(m,2H)，3.86(dd，2H，J=26，60Hz)，7.23-7.40(m,5H)，7.30(d，2H,J=9.0Hz),8.14(d,2H,J=8.7Hz);MS(APCI+)m/z(rel):271(100);[a]D=+8.2。(c=1.0MeOH)。(R)-(-)-l-苯基-2-芐基氨基丙垸[(R)-13]。將2.62g(11.6mmol)的l-苯基-2-芐基氨基丙垸(38)的樣品與1.77g(11.6mmol)的(S)-(+)-扁桃酸反應(yīng)，在后處理后得到747mg(57%，基于對(duì)映體豐度)的游離胺。NMR(CDC13)S1.13(d,3H,J=6.0Hz)，2.62-2.84(m，2H)，2.92-2.99(m,1H)，3.81(dd，2H，J=13.2，34.5Hz)7.14-7.29(m，10H);MS(APCI+)m/z(rel):226(100);[a〗D=-24.5°(c=1.10MeOH)。(S)-(+)-l-苯基-2-芐基氨基丙垸[(S)-13]。將5.0g(22.2mmol)的外消旋的l-苯基-2-芐基氨基丙烷(38)的樣品與3.4g(22.2mmol)的(R)-(-)-扁桃酸反應(yīng)，在后處理后得到2.15g(86。/a，基于對(duì)映體豐度)的游離胺。HNMR(CDC13)S11l(d，3H,J=6.0Hz)，2.62-2.84(m，2H)，2.92-2.99(m，1H),3.81(dd，2H，J=13.2，34.5Hz),7.14-7.29(m,5H);MS(APCI+)m/z(rel):226(100);[a]D=十18.2。(c=0.85MeOH)。(R)-(-)-l-(l'-萘基)-2-芐基氨基丙烷[(R)-14]。將從(S)-14的分離中回收的洗液濃縮并在40mL三氯甲垸和40mL10%的K2C03的水溶液之間分配，有機(jī)分離物用20mL鹽水洗滌，然后干燥(Na2S04)，得到1.16g(4.2mmol)的游離胺，其與640mg(4.2mmol)的(S)-(+)-扁桃酸反應(yīng)，得到588mg(46%，基于對(duì)映體豐度)的游離胺。'HNMR(CDC13)S1.07(d，3H，J=6.0Hz),3.02-3.18(m,2H),3.27(m,1H),3.74(dd，2H，J=13.2,30.9Hz)，7.13-7.23(m,5H),7.31-7.48(m,4H),7.73(d，1H，J=7.8Hz),7.83墨7.86(m，1H),7.96-7.99(m，1H);MS(APCI+)m/z(rel):276(100);[a]D=-5.8。(c=1.0MeOH)。(S)-(+)-l-(l'-萘基)-2-芐基氨基丙烷[(S)-14]。將2.6g(9.4mmol)的l-(l'-萘基)-2-芐基氨基丙垸(39)的樣品與1.44g(9.4mmol)的(R)-(-)-扁桃酸反應(yīng)，在后處理后得到420mg(21%，基于對(duì)映體豐度)的游離胺。HNMR(CDC13)51.07(d,3H,J=6.0Hz)，3.02隱3.18(m,2H)，3.27(m，1H)，3.74(dd,2H，J=13.2,30.9Hz),7.13-7.23(m，5H)，7.31-7.48(m,4H),7.73(d,1H，J=7.8Hz)，7.83隱7.86(m,1H),7.96-7.99(m，1H);MS(APCI+)m/z(rd):276(100);[a]D=+6.3°(c=1.0MeOH)。(R)-(-)-2-芐基氨基庚垸[(R)-I5]。將0.65mL(4.4mmol)W(R)-(-)-2-氨基庚烷(R-44)的樣品、0.44mL(4.4mmol)的苯甲醛和0.1mL的HOAc在40mL的CH2Cl2中合并，然后冷卻到0'C，向反應(yīng)混合物中一次性加入2.75mg(13mmol)的三乙酰氧基硼氫化鈉，其在室溫下在氬氣氛下攪拌28小時(shí)，反應(yīng)混合物用30mLCH2Cl2稀釋，在冰浴中冷卻并加入80mL的5。/。NaOH(在水中)，分離級(jí)分，有機(jī)物經(jīng)干燥(Na2S04)和蒸發(fā)，得到638mg(71。/。)的(R)-15。HNMR(CDC13)S0.88(m,3H),1.08(d,3HJ=6.6Hz),1.20-1.39(m,6H)，1.41-1.67(m，2H)，3.62-3.77(m,1H)，3.75(p,2H,J=12Hz),7.17-7.41(m，5H);MS(APCI+)m/z(rel):206(100);[ot]D=十6.9。(c=1.0，MeOH)。(S)-(+)-2-芐基氨基庚垸[(S)-15]。將0.15mL(lmmol)的(S)-(+)-2-氨基庚烷((S)-44)的樣品、0.1mL(lmmol)的苯甲醛和0.1mL的HOAc在10mL的CH2Cl2中合并，并冷卻到(TC，然后一次性加入650mg(3mmol)的三乙酰氧基硼氫化鈉，反應(yīng)混合物在室溫下在氬氣氛下攪拌28小時(shí)，混合物用10mL的二氯甲烷稀釋，在冰浴中冷卻并加入20mL的5。/。NaOH(在水中)，分離級(jí)分，有機(jī)物經(jīng)干燥(Na2S04)和蒸發(fā)，得到154mg(70%)。NMR(CDC13)S0.88(m,3H)，1.08(d,3HJ=6.6Hz),1.19-1.37(m,6H),1.41隱1.67(m,2H),3.62-3.77(m，1H)，3.75(p，2H,J=12Hz)，7.17-7.41(m,5H);MS(APCI+)m/z(rel):206(100);[a〗D=十7.8。(c=1,0,MeOH)。非諾特羅類似物的制備，過(guò)程A。為了形成環(huán)氧化物，將適當(dāng)?shù)?'，5'-二芐氧基苯基溴代醇((R)-8)或(S)-8(1eq)與K2C03(1.4eq)在1:1的THF/MeOH(c=0.3M)中合并并在室溫下在氬氣氛下攪拌2小時(shí)，除去溶劑，殘余物在甲苯和水之間分配，分離甲苯級(jí)分，干燥(N32S04)，過(guò)濾并蒸發(fā)。將殘余物用適當(dāng)?shù)挠坞x芐基胺(R)-或(S)-10-15，28(0.95eq)在足夠量的甲苯中溶解，并再次真空蒸發(fā)以除去痕量的水，所得的無(wú)色的殘余物在氬氣氛下被加熱到12(TC達(dá)20小時(shí)，冷卻并通過(guò)'HNMR和質(zhì)譜學(xué)檢測(cè)以確認(rèn)連接。在加熱下將殘余物溶于EtOH(c=0.07M)中并轉(zhuǎn)移到Parr燒瓶中，在燒瓶中在50psi的氫氣下使用10%(wt)Pd/C(10mg催化劑/65mg溴代醇)進(jìn)行氫化24小時(shí)，通過(guò)質(zhì)譜學(xué)證實(shí)完成脫芐基化。將混合物過(guò)濾通過(guò)硅藻土，濾餅用異丙醇漂洗，將濾液濃縮，將殘余物溶于1:1的異丙醇/EtOH(c-0.2M)中，并與0.5eq的富馬酸回流30分鐘，將反應(yīng)冷卻并除去溶劑，粗物質(zhì)通過(guò)開(kāi)放式柱色譜儀或制備型色譜法純化。(R，R)-1和(S,S)-1的柱分離，過(guò)程B。將75mg的非諾特羅HBr的樣品溶于1.5mL的95/5/0.05CH3CN/異丙醇/HNEt2中并注射100pL到CHIRALPAKAD-H10X250mm5fim半制備柱中，該半制備柱釆用Waters2690SeparationsModule,PDA設(shè)置在280nm。洗脫溶劑為95/5/0.05的CH3CN/異丙醇/HNEt2，5mL/min。(S,S)和(R，R)異構(gòu)體的保留時(shí)間分別是4.8分鐘和7.8分鐘。(R，R)-(-)-非諾特羅[(R,R)-l]。根據(jù)過(guò)程B獲得，蒸發(fā)后收集，得至U40mg。'HNMR(CD3OD)51.05(d,3H,J=6.3Hz),2.49(q,1H,J=6.9Hz):2.62-2.74(m，2H)，2.80-2.91(m,2H)，4.55(dd,1H,J=5.1,J=3.3Hz),6.16(t,1H,J=2.4Hz),6.27(d，2H，J=2.1Hz),6.68(d,2H，J=8.4Hz),6.94(d,2H,J=8.4Hz);13CNMR(CD3CN)520.3,43.2，55.1，55.2，72.4,102.2,105.4,116.0，131.3，131.8，147.4，156.2,159.0;UV(MeOH)人max279nm(s2,760),225(12,900)，204(32,600);MS(APCI+)m/z(rel):304(100，M+H);[a]D=-29.0°(濃度=0.2%MeOH);HPLC:(a)0.1%二乙胺在1120中，0.50mL/min,254nm,tR2.90min，990/^;(d)tR7.8min,>99%純。(S，S)-(+)-非諾特羅[(S，S)-l]。根據(jù)過(guò)程B獲得，蒸發(fā)后得到35mg。、HNMR(CD3OD)S1.05(d,3H,J=6.6Hz),2.49(q，1H，J=7.2Hz)，2.62-2.76(m,2H)，2.80國(guó)2.94(m,2H),4.55(dd,1H，J=4.8,J=3.3Hz),6.16(t,1H，J=2.1Hz),6.27(d，2H,J=2.4Hz)，6.68(d，2H,J=8.4Hz)，6.94(d，2H，J=8.4Hz);13C(CD3CN)S20.3，43.2,55.0,55.2，72.4，102.2,105.4,116.0,131.3,131.8,147.4，156.2,159.0;UV(MeOH)Xmax279nm(e2,680)，224(12,700),204(32,800);MS(APCI+)m/z(rel):304(100,M+H);[a]D=十28.5。(濃度=0.20%MeOH);HPLC:(a)0.1%二乙胺，在H20中，0.50mL/min，254nm，tR2.72min,〉99。/。純;(d)tR4.8min,>99%純。(R，S)-(-)-非諾特羅富馬酸鹽[(R，S)-l]。根據(jù)過(guò)程A從(R)-8禾口(S)-IO制備，得到168mg(64%)。'HNMR(CD3OD)5l'22(d，3H，J=6.6Hz),2.64(dd，1H，J=9.9Hz,J=13.2Hz)，3.01-3.51(m,4H),4.79(dd，1H，J=3.0Hz,J=9.9Hz)，6.23(t，1H，J=2.4Hz)，6.36(d,2H,J=2.1Hz),6.75(s,1H),6.76(d,2H，J=8.4Hz),7.05(d,2H,J=8.1Hz);13CNMR(CD3OD)516.2，39.1，52.5,57.4,70,4,103.4,105.3，116.7，127.8,131.4,135.2，144.6，157.7，160.0，168.2;UV(MeOH)入max278nm(s2,520)，205(27,900);MS(ESI+)m/z(rel):304(100,M+H);[a]o;7.5。(濃度=0.75%MeOH);HPLC:(a)70/30/0.05.1.00mL/min,282nm,tR1.35min，>99%純;(b)50/50/0.05.1.0ml，0.50mL/min，254nm，tR2.72min，〉99。/o純;(d)tR4.8min，1.00mL/min，280■，tR2.10min,97.5%純。(S,R)-(+)-非諾特羅富馬酸鹽[(S,R)-l]。根據(jù)過(guò)程A從(S)-8禾口(R)-10制備，得到104mg(39%)。NMR(CD3OD)51.22(d,3H,J=6.6Hz),2.64(dd,1H,J=9.9Hz,J=13.5Hz)，3.47-3.04(m,4H)，4.80(dd,1H,J=2.7,J=9.6Hz),6.23(t,1H，J=2.4Hz),6.36(d,2H,J=2.1Hz)，6.75(s,1H)，6.76(d，2H，J=8.4Hz),7.05(d,2H,J=8.4Hz);13CNMR(CD3OD)S16.2，39.1，52.5,57.4,70.4，103.4，105.3，116.7，127.8，131.4，135.2，144.6,157.7，159.9，168.2;UV(MeO雖max278nm(s2，640),202(36,600);MS(ESI+)m/z(rel):304(100,M+H),413(10);[a]D=十6.4。(濃度=0.50%MeOH);HPLC:(a)70/30/0.05，1.00mL/min,282nm，tR1.35min，95.9%純;(b)50/50/0.05，1.0mL/min,280nm，tR2.06min，99%純。(R，R)-(-)-l-對(duì)-甲氧基苯基-2-((3-3',5'-二羥基-苯基-(3-氧基)乙基氨基-丙烷富馬酸鹽[(R,R)-2]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8禾口(R)-ll制備，得到172mg(38。/o)。'HNMR(CD30D)S1.08(d,3H,J=6.3Hz),3.05-2.56(m，5H)，4.57(dd.IH,J=8.4,5,4Hz)，6.16(m,IH)，6.26(d，2H,J=2.7Hz),6.81(d,2H，J=8.7Hz)，7.03(d，2HJ=8.7Hz);13CNMR(CD3OD)S18.8,42.3,54.5，55.6,56.0，72.6，103.0,105.4,115.0,131.1，131.2,131.3，146.2,159.8,159.9;UV(MeOH)Xmax277nm(s3，590),224(17,700),207(29,500);MS(ESI+)m/z(rel):318(100，M+H);[a〗D=-24.9。(c=0.8MeOH);HPLC:(a)70/30/0.05,1.0mL/min，282nm，tR1.54min,96.5%純;(b)50/50/0.05,2.0mL/min,276nm,tR1.51min,95.9%純。(S,S)-(+)-l-對(duì)-甲氧基苯基-2-(P-3'，5'-二羥基-苯基-P-氧基)乙基氨基-丙烷富馬酸鹽[(S，S)-2]。根據(jù)過(guò)程A，從(S)-8和(S)-11制備，得到318mg(53%)0'HNMR(CD3OD)S1.15(d,3H,J=6.0Hz),2.58-3.22(m，5H)，3.77(s，3H),4.68(dd,1H,J=4.8,8.4Hz),6.18(t,1H，J=2.1Hz)，6.3l(d，2H,J=2.1Hz),2.23(s,0.5H，富馬酸鹽)，6.84(d,2H,J=8.7Hz)，7.10(d,2H,J=9.0Hz);13CNMR(CD3OD)516.1,39.9,52.4，54.5,55.3，70.4,101.9,104.2,114.0,129.2,130.1,144.4，158.7，158.9;UV(MeOH從max277nm(s2,100)，224(11,00),205(22,700);MS(ESI+)m/z(rel):318(100,M+H);[a]D=十28.6。(c=0.95MeOH);HPLC:(a)70/30/0.05，1.0mL/min，282nm,制備1.67min,96.00/0純;(b)50/50/0.05，2.0mL/min,276nm,制備1.51min，97.1%純。(R,S)-(-)-l-對(duì)-甲氧基苯基-2-(卩-3',5'-二羥基-苯基-(3-氧基)乙基氨基丙烷富馬酸鹽[(R,S)-2]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8和(S)-11制備，得到160mg(38%)。！HNMR(CD3OD)S1.20(d，3H，J=6.6Hz),2.62-2.7l(m,1H),2.98國(guó)3.20(m,3H)，3.30-3.42(m，2H)，4.73-4.81(m,1H),6.21(m，2H)，3.35(m，2H)，6.71(s,0.5H,富馬酸鹽)，6.56-6.89(m,2H),7.11-7.19(m,2H);13CNMR(CD3OD)S15.6，38.5,51.8，54.5，55.9，69.7,102.1,104.1，114.1,128.5，130.2，136.0，143.8,158.8,159.1;UV(MeOH)Xmax277nm(s4,100)，224(21,400),203(50,600);MS(ESI+)m/z(rel):318(100,M+H);[a]D=-7.2°(c=1.5MeOH);HPLC:(a)70/30/0.05,1.00mL/min,282nm,tR1.40min，99，;(b)50/50/0.05,2.0mL/min，276nm,tR1.51min,96.1%純。(S,R)-(+)-l-對(duì)-甲氧基苯基-2-((3-3',5'-二羥基苯基-卩-氧基)乙基氨基丙垸富馬酸鹽[(S,R)-2]。根據(jù)過(guò)程A，從(S)-8和(R)-ll制備，得到200mg(51%)。'HNMR(CD3OD)51.12(d,3H,J=6.0Hz),2.58-3.13(m,5H)，3.77(s,3H)，4.62(dd,1H，J=3.6，9.0Hz),6.15(m,IH)，6.30(d,2H,J=1.8Hz)，6.85(d,2H，J=8.7Hz)，7.1l(d，2H,J=8.7Hz);13CNMR(CD3OD)S18.2,41.4，54.1，55.7,56.5,64.7,103,0,105.3,115.1，130.7，131.3，145.9，159.8,160.0;UV(MeOH)Xmax277nm(s3，150),224(3,310)，205(30,600);MS(ESI+)m/z(rel):318(100，M+H);[a]D=十14.1。(c=0.95MeOH);HPLC:(a)70/30/0.05,1.00mL/min，282nm，制備1.42min,97.7%純;(b)50/50/0.05,2.0mL/min，276nm，制備1.52min,97.8%純。",11)-(-)-5-{2-[2-(4-氨基苯基)-1-甲基乙基氨基]-1-羥基乙基}-1，3-苯二醇富馬酸鹽[(R,R)-3]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8和(R)-12制備，得到88mg(42%)。lHNMR(CD3OD)S1.23(m，3H)，2.70-3.24(m,4H)，3.54(m，1H),4.84(dd,IH,J=3.3,9.6Hz)，6.23(t，1H,J=2.4Hz),6.38(d,2H，J=2.1Hz),6.75(s，2H，富馬酸鹽)，7.35(dd，4H，J=8.1,21.0Hz);13C(CD3OD)S15.5,39.6，52.7，56.6,70.3,103.4，105.3,123.8,132.0,132.1,135.2,137.5，144.7，160.0，168.1;UV(MeOH)Xmax284nm(s1，520)，206(21,700);MS(ESI+)m/z(rel):303(100,M+H);-1-羥基乙基}-1,3-苯二醇富馬酸鹽[(5,5)-3]。根據(jù)過(guò)程A，從(S)-8和(S)-12制備，得到56mg(25%)0!HNMR(CD3OD)51.23(m，3H)，2.62-3.27(m,4H)，3.55(m，1H)，4.74-4.88(m,1H),6.22(t,1H,J=1.8Hz)，6.37(d,2H,J=2.4Hz)，6.75(s,2H,富馬酸鹽)，7.32(dd,4H,J=8.7,25.8Hz);13CNMR(CD3OD)515.5，39.6，52.5，56.7，70.7,103.4,105.3,123.3，131.8,132.0,135,2，136.9,144.7,160.0，168.1;UV(MeOH)Xmax284nm(s1，720),207(28,400);MS(ESI+)m/z(rel):303(100,M+H)，329(20);[a]D=+11.1°(濃度=0.50%MeOH);HPLC:(a)證0/0.05，0.7mL/min,276nm,制備2.01min,〈99。/。純;(b)50/50/0.05，1.0mL/min,282nm,制備2.50min，99.4%純。(11，3)-(-)-5-{2-[2-(4-氨基苯基)小甲基乙基氨基]-1-羥基乙基}-1，3-苯二醇富馬酸鹽[(R，S)-3]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8和(S)-12制備，得到72mg(35%)。'HNMR(CD3OD)S1.23(m,3H),2.73-3.24(m,4H)，3.51(m,1H),4.80(dd,1H,J=2.7，9.6Hz)，6.22(t,1H，J=2.1Hz)，6.36(d,2H，J=2.4Hz),6.75(s，2H,富馬酸鹽)，7.32(dd,4H,J=8.4，25.2Hz);"CNMR(CD3OD)S16.1,39.12,5.16，56.9，70.4，103.4，105.3,123.4，132.0，132.0，135.2，136.8，144.6，160"168.10;UV(MeOH)Xmax284nm(s1,620)，205(27,200);MS(ESI+)m/z(rel):303(100,M+H),134(14);[cc]D=-7.5°(濃度=0.50%MeOH);HPLC:(a)80/20/0.05，0.7mL/min,276nm，tR2.08min,95.0。/o純;(b)50/50/0.05,1.0mL/min，282nm,tR2.51min,97.4%純。(8,11)-(+)-5-{2-[2-(4-氨基苯基)-1-甲基乙基氨基]-1-羥基乙基}-1,3-苯二醇富馬酸鹽[(S，R)-3]。根據(jù)過(guò)程A，從(S)-8和(R)-12制備，得到93mg(42%)。NMR(CD3OD)S1.23(d,3H，J=6.3Hz),2.70-3.78(m,4H),3.42-3.62(m,1H)，4.80(dd，1H,J=3.0，9.9Hz),6.22(t,1H,J=2.1Hz)，6.37(d，2H,J=2.1Hz)，6.75(s,2H，富馬酸鹽)，7.33(dd，4H,J=8.4，26.7Hz);13CNMR(CD3OD)516.2，39.1,52.6,56.9,70.5,103.4，105.3,123.5,132.1,133.7，135.2,137.1，144.7,160.0，168.1UV(MeOH)Xmax284nm(s8，230)，207(100,000);MS(ESI+)m/z(rel):303(100，M+H),134(18);[CC]D^+11.4。(濃度0.50o/oMeOH);HPLC:(a)70/30/0.05,1.00mL/min，280nm,tR1.45min，99%純;0)50/50/0.05,1.0mL/min，282nm，tR2.63min，95.33%純。(R，RH-)-5-[l-羥基-2-(l-甲基-2-苯基乙基氨基)乙基]-l，3-苯二醇富馬酸鹽[(R,R)-4]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8和(R)-13制備，得到92mg(26%)。^NMR(CD3OD)S1.22(m,3H),2.68-3.28(m,2H),3.10-3.28(m,2H)，3.53(br-m，1H),4.75國(guó)4.80(m,1H),6.24(t,1H,J=2.4Hz),6.38(d,2H，J=2.1Hz),6.75(s，1H，富馬酸鹽)，7.22國(guó)7.33(m，5H);13CNMR(CD3OD)S15.5，40.3,56.9,70.2，103.4，105.3，128.3，129.9,130.3，135.2,137.3，144.6，144.6,159.9,168.1;UV(MeOH)Xmax277nm(￡926)，204(18,700);MS(APCI+)m/z288(100,M+H);[a]D=-21.2°(濃度=0.85%MeOH);HPLC:(a)50/50/0.05，1.00mL/min,282nm;制備1.73min;99%純;(b)50/50/0.05,2.0mL/min,276nm，制備1.46min,97.5%純。(S,S)-(+)-5-[l-羥基-2-(l-甲基-2-苯基乙基氨基)乙基]-l,3-苯二醇富馬酸鹽[(S，S)-4]。根據(jù)過(guò)程A，從(S)-8和(S)-13制備，得到184mg(51%)。'HNMR(CD30D)SL21(m,3H)，2.70-3.13(m,2H),3.15-3.23(m,2H)，3.54(br-m，1H),4.79-4.86(m,1H),6.24(t，1H,J=2.1Hz),6.39(t,2H,J=2.7Hz)，6.76(s,1H,富馬酸鹽)，7.22-7.32(m,5H);13CNMR(CD3OD)515.5,40.3,56.9，70.2，103.4,105.3,128.3，129.9，130.3,135.1,137,3,144.6，144.6，159.9,168.1UV(MeOH)Xmax278nm(s1,510),207(26,600);MS(APCI+)m/z288(100,M+H);[a]D=+19.3。(濃度=0.90%MeOH);HPLC:(a)50/50/0.05，1.00mL/min，282nm,制備1.49min;98.4%純;(b)50/50/0.05，2.0mL/min，276nm,制備1.35min,99%純。(R，S)-(-)-5-[l-羥基-2-(l-甲基-2-苯基乙基氨基)乙基]-l，3-苯二醇富馬酸鹽[(R,S)-4]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8和(S)-13制備，得到170mg(45%)。'HNMR(CD3OD)S1.22(m,3H)，2.68-3.28(m,2H),3.13-3,28(m，2H),3.53(br-m,1H)，4.76-4.80(m，1H),6.23(t,1H,J=2.1Hz)，6.37(t,2H,J=3.0Hz)，6.75(s，1H，富馬酸鹽)，7.24-7.37(m,5H);13CNMR(CD3OD)516.3,24.2,39.8,57.2,70.5，103.4,105.3,128.4,130.0，130.4,135.2,137.4，144.6，160.1UV(MeOH)人max278nm(s1,110),205(31,000);MS(APCI+)m/z(rel):288(100，M+H);[a]r^-6.9。(濃度0.85%MeOH);HPLC:(a)50/50/0.05,1.00mL/min，282nm,制備1.53min,99%純;(b)50/50/0.05,2.0mL/min，276nm,制備1.46min,98.5%純。(S,R)-(+)-5-[l-羥基-2-(l-甲基-2-苯基乙基氨基)乙基]-l,3-苯二醇富馬酸鹽[(S,R)-4]。根據(jù)過(guò)程A，從(S)-8和(R)-13制備，得到212mg(59%)。'HNMR(CD3OD)S1.22(m，3H)，2.72(dd,1HJ=10.2，13.2Hz)，3.11(dd,1H,J=10.2，12.6Hz),3.18-3.27(m，2H),3.48-3.61(m,1H)，4.83(dd,1H,J=3.3,9.9Hz),6.22(t，1H,J=2.4Hz)，6.36(d，2H,J=2.4Hz)，6.75(s，1H，富馬酸鹽)，7.24-7.37(m,5H);13CNMR(CD3OD)S16.3,24.2,39.8，57.2,70.5，103.4，105.3，128.4,130.0，130.4,135.2,137.4,144.6,160.1;UV(MeOH)人max278nm(￡1，680)，206(35,500);MS(APCI+)m/z(rel):288(100，M+H),270(19，M陽(yáng)OH);[a]D=+9.1。(濃度=1.1%,MeOH);HPLC:(a)50/50/0.05，1.00mL/min,282nm,制備1.51min，99%純;(1))50/50/0.05，2.0mL/min，276nm,制備1.43min，99%純。(R,R)-(-)-5-(l-羥基-2-[l-甲基-2-(l-萘基)乙基氨基]乙基》-l,3-苯二醇富馬酸鹽[(R，R)-5]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8和(R)-14制備，得到135mg(46%)。NMR(CD3OD)51.18隱1.23(m,3H),3.16-3.34(m,lH,2H)，3.69匿3.74(m,2H)，4.78-4.80(m,1H)，6.23(t,1H,J=2.4Hz),6.38(m,2H)，7.41-7.61(m，4H)，7,83(d，1H,J=7.5Hz),7.90(d，1H,J=7.8Hz),8.10(m，1H);13CNMR(CD3OD)S16.2，37.2，54.5,56.1，70.3,103.4，105.3，124.3，126.5,127.0,127.7，129.3，130.1，133.2，135.2,135.6，144.7，160.1,168.2;UV(MeOH)Xmax282nm(s5,860),224(50，卯0)，208(35,500);MS(APCI+)m/z(rel):338(100，M+H)，169(15，片段)；[a]D=陽(yáng)20,4(濃度=0.50%MeOH);HPLC:(a)60層0.05,1.00mL/min，282nm,制備2.08min,95.7。/。純;(b)50/50/0.05，1.5mL/min，282nm，制備2.20min,99%純。(S，S)-(+)-5-U-羥基-2-[l-甲基-2-(l-萘基)乙基氨基]乙基)-l,3-苯二醇富馬酸鹽[(S,S)-5]。根據(jù)過(guò)程A，從(S)-8和(S)-14制備，得到118mg(40%)。'HNMR(CD3OD)S1.13-1.17(m,3H),3.14-3.26(m,1H,2H)，3.61-3.76(m,2H)，4.44-4.75(m,1H)，6.18(t，1H，J=2.4Hz),6.33(m，2H)，7.36-7.52(m,4H),7.77(dd,1H，J=1.8,7.5Hz),7.84(d,1H，J=8,1Hz)，8.04(t，1H，J=8.4Hz);13CNMR(CD3OD)S16.1，37.1，54.4，56.0，70.3，103.3,105.3，124.3，126.5,127.0,127.7,129.2,130.0，133.2，135.2，135.7，144.5，160.0,168.1;UV(MeOH)Xmax282nm(s6，210),223(56,400),208(42,700);MS(APCI+)m/z(rel):338(100，M+H)，169(8,片段)；[a]D=+20.0°(濃度=1.1%MeOH);HPLC:(a)60/橋.05，1.00mL/min，282nm，制備2.35min，98.9。/o純;(b)50/50/0.05，1,5mL/min，282nm，制備2.26min，97.20/0純。(R,S)-(-)-5-(l-羥基-2-[l-甲基-2-(l-萘基)乙基氨基]乙基H，3-苯二醇富馬酸鹽[(R,S)-5]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8和(S)-14制備，得到114mg(39%)。'HNMR(CD3OD)51.08-1.1l(m，3H),3.02-3.24(m,1H，2H),3.54-3.68(m,2H)，4.45-4.75(m,1H),6.11(t,1H,J=1.8Hz),6.26(m,2H),6.63(s,2H富馬酸鹽)，7.28墨7.48(m,4H),7.70(d，1H，J=7.5Hz)，7.77(d，1H，J=7.8Hz),7.97(t，1H,J=7.8Hz);13CNMR(CD3OD)S16.0,37.1，52.5,56.0,70.4，103.4，105.3，124.4,126.5,127.0,127.6,129.2,130.1,133.1，135.2,135.5,144.7,159.9,168.2;UV(MeOH)Xmax281nm(s12,600),224(61,900),204(47,200);MS(APCI+)m/z(rel):338(100，M+H),190(15，片段)；[a]D=-11.3。(濃度=0.85%MeOH);HPLC:(a)60/40/0.05，1.00mL/min,282nm,tR2.30min，98.6%純;(1>)50/50/0.05,1.5mL/min，282nm,tR2.36min，99%純。(S，R)-(+)-5-U-羥基-2-[l-甲基-2-(l-萘基)乙基氨基]乙基)-l，3-苯二醇富馬酸鹽[(S，R)-5]。根據(jù)過(guò)程A,從(S)-8和(R)-14制備，得到123mg(42%)。^NMR(CD3OD)S1.18-1.22(m，3H)，3.10-3.28(m,1H，2H),3.69-3.78(m，2H)，4.45-4.75(m,1H)，6.23(t，1H,J=2.1Hz)，6.39(m，2H)，6.73(s,2H富馬酸鹽)，7.39-7.59(m，4H),7.80(d,1H,J=7.5Hz)，7.88(d,1H,J=7.8Hz),8.01(t,1H,J=9.0Hz);13CNMR(CD3OD)S16.4，37.4,52.5,56.2，70.6,103.4,105.3,124.4，126.5,127.0,129.3，130.1,133.1,133.4，135.6，136.3,144.8，160.0，171.4;UV(MeOH)Xmax282nm(e7，740)，224(70,900)，206(55,800);MS(ESI+)m/z(rel):338(100，M+H);[a]D=+15.5(濃度=1.0%MeOH)HPLC:(a)60/40/0.05,1.0mL/min,282nm,tR1.95，95.7%純;(1))50/50/0.05，1.5mL/min,282nm,tR2.29min，95.7%純。(R，R)-(-)-5-[l-羥基-2-(l-甲基己基氨基)乙基]-l，3-苯二醇富馬酸鹽[(R，R)-6]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8和(R)-15制備，得到45mg(29%)。'HNMR(CD3OD)S0.920(t,3H，J=6.9Hz)，1.30(d,3H，J=6.9Hz),1.29國(guó)1.64(m，8H)，3.01-3.18(m,2H),3.14-3.30(m，1H),4.80(dd,1H，J=3.3,9.6Hz),6.22(t，1H，J=2.1Hz)，6.36(d,2H,J=2.4Hz),6.75(s,IH,富馬酸鹽)；l3CNMR(CD3OD)S14.3,16.0，23.5，26.2，32.6,34.2，52.1,55.7，70.2，103.3，105.3，135.2,144.7,160.0，168.0;UV(MeOH)imax278nm(s931),203nm(20，100);MS(ESI+)m/z(rel):268(100，M+H);[a]D=-8.8，度=1.1%MeOH);HPLC:(c)70/30/0.1，1.0mL/min，276nm,tR2.18min，96.60/0純;0)50/50/0.05，1.0mL/min,279nm,tR2.06min，98.9%純。(S,S)-(+)-5-[l-羥基-2-(l-甲基己基氨基)乙基]-l,3-苯二醇富馬酸鹽[(S，S)-6]。根據(jù)過(guò)程A，從(S)-8和(S)-15制備，得到96mg(43。/。)。'HNMR(CD3OD)S0.923(t，3H，J=6.6Hz);1.3l(d，3H，J=6.6Hz)，1.26-1.84(m,8H),2.01-3.18(m,2H),3.14-3.30(m,1H),4.81(dd，1H,J=3.3，9.6Hz),6.23(t,1H,J=2.4Hz)，6.39(d，2H,J=2.1Hz),6.76(s,1H,富馬酸鹽)13CNMR(CD3OD)514.2,16.0，23.4,26.3，32.6,34.1，52.1，55.8，70.2,103.4,105.3，135.2,144.7,159.9，168.2;UV(MeOH從max278nm(s1，340)，203(28,800);MS(APCI+)m/z(rel):268(100，M+H);[a]D=+10.8。(濃度=0.50%MeOH);HPLC:(c)70/30/0.1,1.0mL/min,276nm，tR2.16min,97.0%純;(1)50/50/0.05,1.0mL/min,279nm,tR2.11min，99%純。(R，S)-(-)-5-[l-羥基-2-(l-甲基己基氨基)乙基]-l,3-苯二醇富馬酸鹽[(R,S)-6]。根據(jù)過(guò)程A，從(R)-8和(S)-15制備，得到83mg(38%)。NMR(CD3OD)S0.924(m,3H);1.32(d,3H,J=6.6Hz),1.26-1.84(m,8H),2.98-3.20(m，2H)，3.32-3.22(m，1H),4.78(dd,1H,J=3.0,9.9Hz),6.23(t，1H，J=2.1Hz)，6.37(d，2H,J=1.8Hz),6.76(s，1H,富馬酸鹽)；13CNMR(CD3OD)S14.2,16.4，23.4,26.2,32.6,33.5，52.2，56.0,70.4,103.4,105.3，135.2,144.7,160.0，168.1;UV(MeOH)Xmax276nm(e2,770)，203(35,900);MS(APCI+)m/z(rel):268(100，M+H);[a〗i^-15.9。(濃度=0.70%MeOH);HPLC:(c)70/30/0.1,1.0mL/min,276nm,tR2.16min,97.0%純;(1)50/50/0.05，1.0mL/min,279nm，tR2.07min,96.2%純。(S，R)-(+)-5-[l-羥基-2-(l-甲基己基氨基)乙基]-l,3-苯二醇富馬酸鹽[(S，R)-6]。根據(jù)過(guò)程A，從(S)-8和(R)-15制備，得到81mg(38%)。'HNMR(CD3OD)S0.920(t,3H，J=6.3Hz),1.32(d,3H,J=6.9Hz)，1.30-1.77(m,8H),2.99-3.17(m，2H),3.23-3.26(m，1H)，4.76(dd，1H，J=3.0,9.6Hz),6.22(t，1H，J=2.4Hz)，6.36(d，2H,J=2.1Hz),6.75(s,1H,富馬酸鹽)；13CNMR(CD3OD)S14.2，16.5,23.5,26.2，32.6，39.5,52.2,56.0,70.4，103.4，105.3,135.2,144.7,160.0，168.0;UV(MeOH)入max278nm(s1,440),204(29,900);MS(APCI+)m/z(rel):268(100,M+H);[a〗D=+12.7°(濃度=1.0%MeOH);HPLC:(c)70/30/0.1,1.0mL/min,276nm,tR2.16min,99%純;0)50/50/0.05,1.0mL/min,279nm,tR2.02min，95.7%純。(R)-(-)-5-(l-羥基-2-苯乙基氨基乙基)-l，3-苯二醇富馬酸鹽[(R)-7]。從(R)-8和28制備，得到37mg(15%)。'HNMR(CD3OD)52.94-3.23(m，6H),4.73(dd,1H，J=3.3,9.9Hz),6.15(t，1H，J=2.4Hz),6.29(d,2H，J=1.8Hz)，7.19-7.28(m,5H),6.69(s，1H);UV(MeOH)Xmax278nm(e1，360)，205(32,600);MS(APCI+)m/z(rel):274(100,M+H);。從(S)-8和28制備，得至U51mg(17%)。&NMR(CD3OD)52.87-3.21(m，6H)，4.68(dd,1H,J=3.6,9.9Hz)，6.10(t，1H,J=2.4Hz),6.24(d,2H,J=2.1Hz)，6.63(s,1H),7.12-7.21(m,5H);UV(MeOH)Xmax278nm(s1,280),204(33,700);MS(APCI+)m/z(rel):274(100,M+H);[a]D=+14.64°(濃度=1,1%MeOH);HPLC:(a)80/20/0.05,1.00mL/min,282nm，tR1.47min,98.60/0純;(1))50/50/0.05，1.0mL/min，272nm，tR2.74min，98.8%純。(R，R)-(-)-乙基非諾特羅。0.5H〇CHCCHCOH<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>'HNMR:(300MHz，CD3OD):S0.950(t，3H，J=7.5Hz),1.67(m，2H)，2.83-3.18(m,4H),3.33-3.40(m,1H),3.37(s,4H),4.82(m,1H)，6.24(d,1H，J=2.1Hz),6.37(d，2H,J=1.8Hz),6.73(s,2H，fum)，6.76(d，2H，J=8.4Hz)，7.05(d,2H,J=8.7Hz)ppm.CMR:13C(75MHz，CD3OD):S9.43，23.28，36.56,52.29，62.16,70.02，103.4，105.3，116.7，127.8，131.3,136.5，144.6,157.6，159.9，172.3ppm.UV:(甲醇)，Xmax(s):206nm(22,500),223(12,300)，278(2,460).MS:(ICQDUOESI正離子質(zhì)譜)M/z(rel):318(100,M+H).HPLC1:柱VarianSunfireC18100x4.6;70/30/0.1水/乙腈/TFA;1.0mL/min;檢測(cè):278nm;2.76min(富馬酸鹽，6.99%),3.57mm(90.11%);純度97.1%.HPLC2:柱ChiralpakIA250x10;90/10/0.05乙腈/甲醇/TFA;2.0mL/min;檢測(cè)278nm;5.26(RR異構(gòu)體，92.37%),7.11min(富馬酸鹽，5.02%);純度97.5%.比旋度[a]f-15.6(游離胺，0.5%MeOH)。(R，S)-(-)-乙基非諾特羅。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>力NMR:(300MHz,CD3OD):S0.972(t,3H，J=7.5Hz),L70(p,2H,J=6.9Hz))，2.86-3.22(m,4H)，3.32-3.37(m,IH),3.34(s,4H)，4,82(m，IH),6.25(t，1H，J=2.1Hz),6.36(d,2H,J=1.8Hz),6.74(s，2H,fum),6.77(d，2H,J=8.4Hz)，7.08(d,2H,J=8.7Hz)ppm.CMR:13C(75MHz,CD3OD):S9.820，24.16，36.48,52.30，62.32,69.92,103.3,105.3,116.8，127.7，131.3,136.1,144.4，157.6,159.8，171.3ppm.UV:(甲醇)，Xmax(e):204nm(26,900),224(11,500)，278(2,320).MS:(LCQDUOESI正離子質(zhì)譜)M/z(rel):318(100，M+H).HPLC1:柱VarianSunfireCI8100x4.6;70/30/0.1水/乙腈/TFA;1.0mL/min;檢測(cè)278nm;2.79min(富馬酸鹽,3.34%),3.56min(96.11°/。)；純度99.5%HPLC2:柱ChiralpakIA250x10;90/10/0.05乙腈/甲醇/TFA;2.0mL/min;檢測(cè):278nm;5.88(RS異構(gòu)體，97.08%)，7.12min(富馬酸鹽，2.92%);Purity>99%.比旋度:[a]f-7.2(游離胺，0.5%MeOH)。C22H25NO4*0.5C4H4O4NMR:(300MHz,CD3OD):S1.22(t,3H,J=6.6Hz),3.09-3.21(m,3H)，3.59-3.69(m,2H),3.99(s，3H)，4.74-4.83(m,1H),6.23(t,1H,J=2.4Hz)，6.37(dd，2H，J=2.4,5.7Hz)，6.74(s，IH)，6.86(d，1H，J=7.8Hz),7.32(d,1H，J=7.8Hz),7.48(t,1H,J=6.9Hz)，7.56(t,1H,J=6.9Hz),8.02(dd,1H,J=8.4,12.0Hz),8.27(d，1H,J=8.7Hz)ppm.CMR:13C(75MHz,CD3OD):S15.78，36.66,52.39,55.96，70.20，103.4，104.5,105.3,123.8,124.3,124.9,126.2,127.4,128.1，129.5，133.8,135.2,144.6,156.6,160.0,168.3ppm.UV:(甲醇),人max(s):298nm(4,970),286(9,920),234(22,600)，210(42,500).MS:(ICQDUOESI正離子質(zhì)譜)M/z(rel):368(100,M+H).比旋度[a]D;28.8(游離胺；0.5%MeOH)。C22H25NO4.0.5C4H4O40.5H〇2CCH=CHC〇2H0.5H〇？CCH=CHC〇H'H菌R:(300MHz,CD3OD):51.20(t，3H，J=6.6Hz)，3.07-3.21(m,3H)，3.52-3.75(m，2H)，3.97(s，3H)，4.69隱4.83(m,IH)，6.24(t,1H，J=2.1Hz),6.39(dd,2H,J=2.4,5.4Hz),6.74(s，IH)，6.84(d，1H,J=7.8Hz),7.3l(d，1H,J=8.1Hz),7.48(t,1H,J=6.9Hz),7.56(t,1H,J=6.9Hz)，8.01(dd，1H，J=8.4，13.5Hz)，8.27(d，1H,J=7.8Hz)ppm.CMR:13C(75MHz,CD3OD):S15.77，36.64，52.37，55.94,70.46，103.4，104.5,105.3，123.8,124.3,124.9,126.2，127.4,128,1，129.4，133.8,135.5，144.7，156.6,160.0，169.0ppm.UV:(甲醇)，Xmax(s):298nm(5,430),286(5,710),233(25,100),210(43,200).MS:(ICQDUOESI正離子質(zhì)譜)M/z(rel):368(100，M+H)。比旋度CGP-12177(1.4nM的最終濃度)的孔中加入0.8毫升的組織勻漿。在25'C下2小時(shí)后，通過(guò)快速過(guò)濾終止培養(yǎng)。通過(guò)10pM普萘洛爾測(cè)定非特異性結(jié)合。用編碼人(32-AR的cDNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的HEK293細(xì)胞(由Dr.BrianKobilka,StanfordMedicalCenter,PaloAlto，CA提供)在先前所述的Dulbecco改進(jìn)的Eagle培養(yǎng)基(DMEM)中生長(zhǎng)，該培養(yǎng)基包含10%牛血清(FBS)，0.05。/。青霉素-鏈霉素和400ng/mlG418(Pauwels等人，Biochem.Pharmacol.42:1683-1689,1991)。細(xì)胞從150X25mm板上刮下并在500xg下離心5分鐘。用Polytron將小珠在50mMTris-HCl，pH7.7中勻化，在27，000xg下離心，并再懸浮在相同的緩沖液中。重復(fù)后一過(guò)程，并將小球再懸浮在25mM的包含120mMNaCl，5.4mMKCl，1.8mMCaCl2，0.8mMMgCh和5mM葡萄糖的Tris-HCl(pH7.4)中。結(jié)合試驗(yàn)包含在l.O毫升體積中的0.3nM[3H]CGP-12177。通過(guò)l)iM普萘洛爾測(cè)定非特異性結(jié)合。根據(jù)上述方法，用Ki值表示的結(jié)合親合性如下測(cè)定采用從用編碼人p2-AR的cDNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的HEK293細(xì)胞系獲得的膜(Pauwels等若，Biochem.Pharmacol.42:1683-1689，1991)，使用[3H〗CGP-2177作為標(biāo)記配體。使用GraphPadPrism⑧軟件計(jì)算每個(gè)供試化合物的所得的IC50值和Hill系數(shù)，并使用Cheng-Prusoff變換計(jì)算Ki(BiochemPharmacol22:3099-3108,1973):Ki=IC50/(l+L/Kd)+Eqn.1.其中L是[3H]CGP-12177的濃度，禾卩Kd是[3H]CGP-12177的結(jié)合親合性。每個(gè)供試化合物實(shí)驗(yàn)三次?；衔?-4和6的立體異構(gòu)體對(duì)p2-AR的相對(duì)結(jié)合親合性是R,R>R,S〉S,R-S，S(圖5;下表1)。這一立體選擇性與先前報(bào)導(dǎo)的福莫特羅立體異構(gòu)體的功效(Trofast等人，Chiralty3:443-450，1991)和采用異丙腎上腺素衍生物PTFAM化合物48的結(jié)合研究的結(jié)果(圖6)是一致的(Eimerl等人，Biochem.Pharmacol.36:3523-3527，1987)。關(guān)于化合物5，未發(fā)現(xiàn)在R，R和R,S異構(gòu)體的Ki值之間具有顯著差異，因此，順序是R,R=R,S>S，R>S，S。(R)-7的Ki值大于(S)-7的Ki值，這與在立體形成中心包含卩-OH部分的R-構(gòu)型的確立的對(duì)(32-AR的對(duì)映體選擇性結(jié)合優(yōu)先性是一致的，參見(jiàn)(Eimerl等人，Biochem.Pharmacol.36:3523-3527，1987;Wieland等人，Proc.Natl.Acad.ScLUSA93:9276-9281，1996;Kikkawa等人，Mol.Pharmacol.53:128-134,1998;和Zuurmond等人，Mol.Pharmacol.56:909-916，1999).表l.在該研究中合成的化合物對(duì)P2-AR的換算成Ki士SEM(nM)的結(jié)合親合性，n二3。非諾特羅異構(gòu)體的Pr和(32-腎上腺素能結(jié)合親合性的比較。<table>tableseeoriginaldocumentpage68</column></row><table>當(dāng)僅僅比較R,R異構(gòu)體時(shí)，(R，R)-5在供試化合物中具有最高的相對(duì)親合性，盡管在(R，R)-5和(R,R)-1之間的差異未達(dá)到統(tǒng)計(jì)顯著性，見(jiàn)表1。具有亞微摩爾親合性的唯一的其它(R，R)立體異構(gòu)體是(R，R)-2，其顯著低于(R，R)-5(p=0.0051)禾口(R,R)-1(p=0.0291)的結(jié)合親合性，盡管(R，R)-2的平均Ki值比(R，R)-1只大23%。將對(duì)-OH部分變換成甲基醚的最小效果與先前的得自Schirrmacher等人的數(shù)據(jù)是一致的(Bioorg.Med.Chem.Lett.13:2687-92，2003)。在先前的研究中，消旋物-1被轉(zhuǎn)化成廣F]-氟乙氧基醚時(shí)不發(fā)生體外活性的顯著喪失，并且得出結(jié)論在實(shí)驗(yàn)測(cè)量的精確范圍內(nèi)，衍生化不改變消旋物-1對(duì)p2-AR的結(jié)合親合性。用Ki值表示的對(duì)卩rAR的結(jié)合親合性采用大鼠皮質(zhì)膜進(jìn)行，使用[3H]-CGP-12177作為標(biāo)記物配體(Beer等人，Biochem.Pharmacol.37:1145-1151，1988.)。(R，R)-5的計(jì)算的Ki值為3,349nM并且所有其余的供試化合物的結(jié)合親合性M0,000nM，見(jiàn)表l。與得自卩2-AR結(jié)合研究的數(shù)據(jù)不同，關(guān)于化合物的立體化學(xué)沒(méi)有明顯趨勢(shì)?；衔飳?duì)(32-AR和prAR的相對(duì)選擇性釆用Ki(VKiP2的比測(cè)定，見(jiàn)表1。特別感興趣的是具有對(duì)P2-AR為亞微摩爾親合性的四種化合物(R,R)-1、(R，R)-2、(R，R)-和(R，S)-5的比，四種化合物分別為46、43、14和46。(R,R)-1和(R,R)-2的結(jié)果與先前報(bào)導(dǎo)的關(guān)于PrAR-選擇性激動(dòng)齊U(R，R)-TA-2005(化合物49)的Ki(3!/KiP2比為53是一致的，見(jiàn)圖6。觀察到的(R,R)-5的卩2-AR選擇性發(fā)生喪失是意想不到的，因?yàn)橛?R，S)-5顯示的選擇性相對(duì)于(R,R)-5增加3倍。使用47的立體異構(gòu)體的先前的研究表明，(R，R)-異構(gòu)體和(R,S)-異構(gòu)體二者對(duì)(32-AR相對(duì)于對(duì)p,-AR都具有高度選擇性，(R，R)-異構(gòu)體的選擇性大于(R,S)-異構(gòu)體的選擇性(Trofast等人，Chirality3:443-450,1991)。該情形對(duì)于化合物1和2是如此的，但是對(duì)于5是相反的。還令人感興趣的是注意到(S，R)-5具有相似的選擇性(19倍)并且其對(duì)p2-AR的親合性僅僅是(R,R)-5的七分之一，分別為1783nM和241nM。這些研究顯示(R，R)-或(R,S)-萘基非諾特羅類似物比任何非諾特羅的同工型對(duì)(32-腎上腺素能受體都具有更高的結(jié)合親合性。(R,R)-甲氧基非諾特羅類似物對(duì)(32-腎上腺素能受體的Ki與(R,R)-非諾特羅相似。因此，這些類似物是卩2-腎上腺素能受體激動(dòng)劑的可行的候選物，并且可能用于治療目前用市售的(土)-非諾特羅治療的病癥。實(shí)施例7使用非諾特羅類似物進(jìn)行心肌收縮性研究本實(shí)施例說(shuō)明了對(duì)(32-AR具有亞微摩爾親合性的化合物以及(R,S)-1禾口(S,S)-1的藥理學(xué)活性。在這些研究中，在暴露于單劑量的供試化合物之前和之后，在單個(gè)心室肌細(xì)胞內(nèi)測(cè)量通過(guò)電起搏誘導(dǎo)的細(xì)胞長(zhǎng)度縮短所索引的收縮幅度。對(duì)激動(dòng)劑的收縮應(yīng)答用基礎(chǔ)收縮性的百分?jǐn)?shù)表示，并且激動(dòng)劑針對(duì)(32-腎上腺素能受體的特異性通過(guò)ICI118,551(10—7mol/L;TocrisCooksonLtd.，Bristol,U.K.)，一種選擇性p2-AR拮抗劑的抑制作用來(lái)測(cè)定。除了(S，S)-1之外，所有的供試化合物產(chǎn)生顯著的收縮應(yīng)答，該應(yīng)答被ICI118,551所阻斷，而(S,S)-1沒(méi)有觀察到藥理學(xué)效果，見(jiàn)圖7。這些結(jié)果與先前研究的結(jié)果是一致的(Beigi等人，Chirality，18:822-827,2006)并且觀察到對(duì)于在p2-AR處的激動(dòng)劑活性R-構(gòu)型在包含P-OH部分的立體形成中心處是優(yōu)選的，參見(jiàn)(Eimerl等人，Biochem.Pharmacol.36:3523-3527，1987;Wieland等人，Proc.Natl.Acad.ScLUSA93:9276-9281，1996;Kikkawa等人，Mol.Pharmacol.53:128-134,1998;禾口Zuurmond等人，Mol.Pharmacol.56:909-916,1999)。感興趣的是注意到最大效果由O.lpM的(R,R)-5禾口(R,S)-5引發(fā)，而其它活性化合物需要0.5pM的濃度。另外，盡管由結(jié)合數(shù)據(jù)顯示了(R，R)-5和(R，S)-5具有等效活性，但是(R，S)-1的觀察活性是意想不到的，因?yàn)?7(Trofast等人，Chiralty3:443-450,1991)禾口48(Eimerl等人Biochem.Pharmacol.36:3523-3527,1987)的立體異構(gòu)體的先前研究指出(R,R)-異構(gòu)體的激動(dòng)劑活性顯著大于相應(yīng)的(R，S)-異構(gòu)體的活性。實(shí)施例8比較分子場(chǎng)分析本實(shí)施例說(shuō)明了采用比較分子場(chǎng)分析(CoMFA)來(lái)分析公開(kāi)的化合物。采用比較分子場(chǎng)分析來(lái)分析所公開(kāi)的化合物，該分析是3DQSAR技術(shù)，其適用于分析在選定的靶標(biāo)處立體異構(gòu)體和/或?qū)τ丑w的相對(duì)活性。如SYBYL7.2.(TRIPOSInc.,St.Louis,MO)中的實(shí)施進(jìn)行CoMFA。所有衍生物的分子模型在HyperChemv.6.03(HyperCubeInc.,Gainesville,FL)中使用ModelBuild程序制備以確保骨架的相同構(gòu)象。將模型提取到SYBYL中并計(jì)算局部原子電荷(Gasteiger-Huckel型)。采用在非諾特羅分子的核心內(nèi)的兩個(gè)不對(duì)稱碳原子的普通結(jié)構(gòu)校準(zhǔn)配體模型(-C、CH2-NH-C、CH2-)。兩種類型的分子場(chǎng)(空間和靜電)在圍繞每個(gè)結(jié)構(gòu)的網(wǎng)格(2A間隔)點(diǎn)陣中被取樣。在靜電計(jì)算中使用距離依賴性介電常數(shù)，并且設(shè)定了空間能量和靜電能量二者的能量截止值為30千卡/摩爾。獲得了適用于從四個(gè)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著意義的組分提取到的所得數(shù)據(jù)庫(kù)的局部最小二乘方相關(guān)方程以及以下的驗(yàn)證參數(shù)用于最佳方案R2=0.920，F(xiàn)(4，21)=60.380，標(biāo)準(zhǔn)估計(jì)誤差=0.223，交叉驗(yàn)證(離去一<formula>formulaseeoriginaldocumentpage72</formula>。通常，靜電場(chǎng)占已說(shuō)明的變化的48.1%，且空間場(chǎng)占51.9%。得到的3DQSAR模型顯示了與試驗(yàn)數(shù)數(shù)據(jù)的良好數(shù)理統(tǒng)計(jì)關(guān)聯(lián)，R2=0.920和F=60.380，和由交叉驗(yàn)證的112值((52)=0.847和標(biāo)準(zhǔn)預(yù)測(cè)誤差(SEP^0.309所顯示的良好預(yù)測(cè)能力，見(jiàn)表2。表2.通過(guò)CoMFA模型預(yù)測(cè)的pK,<table>tableseeoriginaldocumentpage72</column></row><table>在第一階段，使用該模型來(lái)識(shí)別負(fù)責(zé)在立體異構(gòu)體之間進(jìn)行辨別的區(qū)域。CoMFA程序產(chǎn)生緊密位于每個(gè)手性中心附近的一些不同的不對(duì)稱區(qū)域。第一手性中心(攜帶P羥基)被分子后方的正電性區(qū)域包圍。正電性區(qū)域可與氫鍵形成有關(guān)并指明假受體的有利供體性質(zhì)或不利受體性質(zhì)。在這種情況下，正電性場(chǎng)的位置表明模型(在手性中心處為S構(gòu)型)的平面后方的P-OH部分的取向會(huì)阻止與受體的H鍵形成。正電性區(qū)域與第一手性中心后方的空間不利區(qū)域密切有關(guān)。這另外表明了該模型顯示對(duì)R構(gòu)型中的(5-羥基具有優(yōu)先選擇性。在此中心對(duì)R構(gòu)型的優(yōu)先選擇與先前的模型和試驗(yàn)數(shù)據(jù)是一致的，這表明R構(gòu)型有利于在(3-AR受體處的功能活性(參見(jiàn)，Eimerl等人，Biochem.Pharmacol.36:3523-3527，1987;Wieland等人，Proc.Natl.Acad.ScLUSA93:9276-9281,1996;Kikkawa等人，Mol.Pharmacol,53:128-134,1998;禾口Zimrmond等人，Mol.Pharmacol.56:909-916，1999)。CoMFA模型還顯示第二手性中心的效果。優(yōu)選構(gòu)型可來(lái)自結(jié)合數(shù)據(jù)，在該結(jié)合數(shù)據(jù)中，對(duì)于化合物l-4和6而言，(R,R)-異構(gòu)體相對(duì)于其各自的(R，S)-異構(gòu)體具有更高的親合性，而(R,R)-5和(R,S)-5的Ki值是相等的，見(jiàn)表l。因此，在該模型中，更具活性的異構(gòu)體是具有在分子的向外指向CoMFA模型圖的平面的氨基烷基部分上的立體形成中心上的甲基部分的那些。這通過(guò)在分子的第二手性中心后方的空間不利區(qū)域來(lái)描述，并表明在該位置對(duì)R構(gòu)型是優(yōu)先選擇的。在該研究中，非諾特羅分子僅有氨基烷基部分發(fā)生改變，并因此關(guān)鍵的CoMFA區(qū)域與分子的這一方面有關(guān)。在得到的分析中，所有四'個(gè)相互作用區(qū)域在芳族部分的附近被識(shí)別并且所有這些可用于產(chǎn)生關(guān)于被研究的衍生物的結(jié)合作用的方式的假說(shuō)。在模型中，較大的包含接近-OH或OCH3取代基的區(qū)域的正電性區(qū)域代表假受體對(duì)這些部分的H鍵合供體性質(zhì)。這些相互作用負(fù)責(zé)了O-衍生物化合物1和2相對(duì)于化合物3和4具有相對(duì)更高的結(jié)合親合性，在后兩種化合物中對(duì)位氨基取代基在實(shí)驗(yàn)條件下應(yīng)當(dāng)帶正電荷。較大的負(fù)電性區(qū)域和另一個(gè)正電性區(qū)域，二者都平行位于芳族系統(tǒng)的兩側(cè)上，很可能代表在|32-AR和富電子的芳族部分諸如萘基環(huán)之間的7wr或7t-氫鍵合相互作用。這與化合物1、2和5相對(duì)于在該研究中被檢測(cè)的其它化合物而言具有增加的親合性是一致的。這一相互作用的功能通過(guò)以下觀察結(jié)果被暗示(R,R)-5和(R,S)-5的Ki值等于(R，R)-1禾口(R，R)-2，見(jiàn)表I。兩個(gè)空間區(qū)域位于接近靜電區(qū)域并且在各自區(qū)域內(nèi)一個(gè)有利于體容度且另一個(gè)不利于體容度。這表明了分子的氨基垸基部分的結(jié)合也在空間上受限制。激動(dòng)劑和拮抗劑對(duì)卩rAR的結(jié)合已經(jīng)采用定位誘變和制作分子模型技術(shù)來(lái)研究(Eimerl等人，Biochem.Pharmacol.36:3523-3527,1987;Wieland等人，Proc.Natl.Acad.ScLUSA93:9276-9281,1996;Kikkawa等人，Mol.Pharmacol.53:128-134，1998;Z匿mond等人'Mol.Pharmacol.56:卯9-916,1999;Kontoyianni等人，J.Med.Chem.39:4406-4420,1996;Furse等人，J.Med.Chem.46:4450-4462,2003;禾口Swaminath等人，J.Biol.Chem.279:686-691,2004)。一般認(rèn)為激動(dòng)劑的"兒茶酚"部分的結(jié)合發(fā)生在由被稱作TM3、TM5和TM6的跨膜(TM)螺旋產(chǎn)生的結(jié)合區(qū)域內(nèi)。該結(jié)合過(guò)程是產(chǎn)生導(dǎo)致G蛋白活化的構(gòu)象變化的順序事件(Furse等人，J.Med.Chem.46:4450-4462,2003)。在該過(guò)程中的關(guān)鍵方面是激動(dòng)劑手性碳上的羥基部分與TM6中Asn-293殘基的相互作用，并且對(duì)于這一相互作用而言，在手性碳處R-構(gòu)型是優(yōu)選的(Eimerl等人，Biochem.Pharmacol.36:3523-3527,1987;Kikkawa等人，Mol,Pharmacol.53:128-134，1998;和Swaminath等人，J.Biol.Chem.279:686-691,2004)。因?yàn)榉侵Z特羅分子的"兒茶酚"部分在該研究中不發(fā)生改變，因此允許在CoMFA模型中在第一立體形成中心處的R-構(gòu)型在大部分穩(wěn)定的復(fù)合物中被優(yōu)選。(32-AR激動(dòng)劑的結(jié)合和功能研究中大多數(shù)采用小分子N-垸基取代基諸如甲基、異丙基和叔丁基進(jìn)行，參見(jiàn)(Kontoyianni等人，J.Med.Chem.39:4406-4420,1996)。然而，盡管這些化合物在p2-AR處具有活性，但是它們不具有亞型選擇性。這通過(guò)化合物49、50和51的Ki(3,/Kip2的比來(lái)說(shuō)明，三個(gè)比分別是53、1.7和1.3(Kikkawa,等人，Mol.Pharmacol.53:128-134,1998))。對(duì)甲氧基苯基部分的除去不僅降低選擇性，而且降低親合性，因?yàn)楦髯缘?amp;幻值是12nM、170nM和6300nM。(Kikkawa,等人，Mol.Pharmacol.53:128-134，1998).氨基院基取代基在^-AR選擇性中所起到的作用已經(jīng)采用定位誘變和制作分子模型技術(shù)進(jìn)行研究(Kikkawa，等人，Mol.Pharmacol.53:128-134,1998);Furse等人，J.Med.Chem.46:4450-4462，2003;禾口Swaminath等人，J.Biol.Chem.279:686-691,2004)。使用(R,R)-49作為模型配體，Kikkawa,等人，確定了在化合物49的對(duì)甲氧基氧與位于TM7的胞外末端內(nèi)的酪氨酸308(Y308)的羥基之間的氫鍵形成是p2-AR選擇性的來(lái)源(Mol.Pharmacol.53:128-134,1998)。Furse和Lybrand開(kāi)發(fā)了(32-AR的新形成(denovo)模型并使用該亞型研究了一些配體的分子復(fù)合物(激動(dòng)劑和拮抗劑)(J.Med.Chem.46:4450-4462,2003)。在被研究的結(jié)構(gòu)中，(R,R)-49與化合物2具有相同的氨基垸基取代基。(R，R)-49/p2-AR復(fù)合物的研究揭示了(R,R)-49的對(duì)甲氧基氧與Y308的羥基形成氫鍵，這支持了Kikkawa等人提出的模型(Mol.Pharmacol.53:128-134，1998)。在該模型中鍵合的兩個(gè)氧原子之間的距離為3.22A。然而，配體的甲氧基部分也位于與三種其它極性殘基TM6中的組氨酸296(H296)，TM3中的色氨酸109(W109)和TM7中的天門冬酰胺312(N312)緊密相鄰，因此每個(gè)可與(R,R)-49的氨基垸基部分上的芳基相互作用。在Furse和Lybrand模型中，在配體的氧原子與H296的氫原子之間的距離是5.88A，并且H296被推薦為是用于與(R，R)-49的甲氧基相互作用的可供選擇的氫鍵供體。因?yàn)閅308和H296被發(fā)現(xiàn)僅存在于卩2-AR，在(3,-AR中發(fā)現(xiàn)的相應(yīng)殘基分別是F359和K347，H296和Y308的相互作用已被提議作為J3,/p2選擇性的來(lái)源(Furse等人，J.Med.Chem.46:4450-4462，2003)。因?yàn)橄惹瓣P(guān)于^/P2選擇性的研究采用(R,R)-49，在本研究中合成的化合物的(R,R)-立體異構(gòu)體的亞型選擇性與(R，R)-49的亞型選擇性進(jìn)行了比較。得自這一研究的數(shù)據(jù)暗示了在Y308和/或H296之間的氫鍵形成，并且激動(dòng)劑的對(duì)位取代基上的氧原子牽涉f32-AR選擇性。相互作用可能發(fā)生于(R,R)-1禾口(R，R)-2，并且這些化合物的Ki卩i/Ki卩2的比分別為43和46，其可與測(cè)定的(R,R)-49的Kif5,/Ki(32的比為53相比?；衔?、4、6和7的K^/Kip2的比〈10并反映出以下事實(shí)它們不能與Y308或H296形成氫鍵。氫鍵相互作用還通過(guò)識(shí)別了圍繞-OH或0CH3取代基的附近區(qū)域的較大的正電性區(qū)域的CoMFA模型被暗示，表示假受體的氫鍵供體性質(zhì)。得自該研究的數(shù)據(jù)還暗示了化合物氨基垸基部分上的芳族部分促進(jìn)了Ki和亞型選擇性，即使芳族部分不能與受體形成氫鍵。這通過(guò)比較化合物1-5的(R，R)-異構(gòu)體的〈3，000nM的Kip2與(R,R)-6的為9,000nM的Ki(32，以及化合物1-5的KipJKi^的比>9，而化合物6不顯示亞型選擇性來(lái)證明，見(jiàn)表1。用于解釋該數(shù)據(jù)的一種可能的機(jī)制是Tt-鍵形成。芳香環(huán)得到兀-電子云可以擔(dān)當(dāng)氫鍵合受體，盡管已經(jīng)估計(jì)相互作用將是正常氫鍵的約一半強(qiáng)度(levitt和PerutzJ.Mol.Biol.201:751-754，1998)。(R，R)-5相對(duì)于(R,R)-3和(R,R)-4或(R)-7具有更高的親合性和亞型選擇性與在萘基環(huán)中相對(duì)于其它芳香環(huán)具有更大的71電子分布是一致的。CoMFA模型還識(shí)別了較大的負(fù)電性區(qū)域和另外的正電性區(qū)域，二者都與芳族系統(tǒng)平行定位，這很可能與p2-AR和富芳族部分諸如萘基環(huán)之間的n-TC或兀-氫鍵相互作用有關(guān)。使用由Furse和Lybrand開(kāi)發(fā)的模型，采用(R,R)-49作為相互作用配體，Y308、H296、W109和N312被稱作可能的兀-7l和/或7T-氫鍵相互作用的來(lái)源。在P2-AR模型中，在(R，R)-49上的對(duì)甲氧基部分與W109和N312之間的估計(jì)距離分別為4.80埃和3.45埃。因?yàn)閃109和N312全部以總的卩-AR亞型被保留，由CoMFA模型暗示的相互作用可代表(R，R)-l、(R,R)-2和(R,R)-5相對(duì)于其它的(R,R)-異構(gòu)體具有增加的親合性的原因，但是沒(méi)有觀察到^/卩2選擇性。得自該研究的數(shù)據(jù)和所得的CoMFA模型指明供試化合物與P2-AR的結(jié)合過(guò)程包括激動(dòng)劑氨基垸基部分上的手性中心與受體上的空間受限位點(diǎn)相互作用?？臻g受限位點(diǎn)的存在已經(jīng)由先前在開(kāi)發(fā)激動(dòng)劑和拮抗劑與P2-AR的復(fù)合物的3D模型中的數(shù)據(jù)所暗示(Kobilka,Mol.Pha:rn.65:1060-1062,2004)。例如，(R，R)-49和在氨基烷基部分上的立體形成中心上具有比甲基更大的取代基的類似化合物被暗示產(chǎn)生顯著的空間相互作用，這不利地影響配體-受體復(fù)合物。激動(dòng)劑與(32-AR的結(jié)合已被描述為是多步相互關(guān)連的方法，其中在激動(dòng)劑和受體之間的順序相互作用產(chǎn)生相應(yīng)的構(gòu)象變化(Kobilka,Mol.Pharm.65:1060-1062,2004)。CoMFA模型反映出最終的激動(dòng)劑/J32-AR復(fù)合物，并且為了辨別空間受限位點(diǎn)的效果，有必要考慮與該位點(diǎn)的相互作用對(duì)結(jié)合過(guò)程的結(jié)果有影響的效果。本發(fā)明的CoMFA模型的詳細(xì)說(shuō)明由Jozwiak等人公開(kāi)，(J,Med.Chem"50(12):2903-2915，2007),其全文并入本文作為參考。如果假定激動(dòng)劑的"兒茶酚"與由TM3、TM5和TM6產(chǎn)生的結(jié)合面積(第一結(jié)合面積)的相互作用，然后這些相互作用將激動(dòng)劑的氨基垸基部分的定位相對(duì)于空間受限位點(diǎn)進(jìn)行固定，并甚至也許產(chǎn)生該部位。在CoMFA模型中，在該位點(diǎn)處的空間限制迫使氨基烷基部分的手性中心處的甲基部分指出模型的平面。由于圍繞N-原子的自由轉(zhuǎn)動(dòng)，在帶有甲基部分的手性中心出的構(gòu)型不可能影響分子的使得與空間受限位點(diǎn)的相互作用最小化的能力。然而，在最低能量構(gòu)象中，例如具有指出CoMFA模型平面的甲基中，氨基垸基部分的其余片段相對(duì)于第二結(jié)合區(qū)域的取向受立體化學(xué)的影響。實(shí)際上，R和S構(gòu)型將產(chǎn)生與第二結(jié)合區(qū)域成鏡象關(guān)系。該位點(diǎn)在圖5中進(jìn)行說(shuō)明，在圖5中，(R，R)-5和(R,S)-5的兒茶酚(第一手性中心)和甲基部分已經(jīng)彼此覆蓋。闡明(32-AR選擇性來(lái)源的研究主要采用(R,R)-49并且一個(gè)先前的關(guān)于亞型選擇性的手征性的效果的研究報(bào)道說(shuō)(R,R)-47比(R，S)-47具有更高的p2-AR選擇性(Trofast等人，Chiralty3:443-450,1991)。因此，觀察到的(R,R)-5和(R,S)-5在卩2-AR處的相等的親合性和功能活性以及(R，S)-5的P2-AR選擇性增加3倍是意想不到的結(jié)果。這些結(jié)果的一個(gè)可能的解釋是(R,S)-5的萘基部分不與由Y308和H296定義的位點(diǎn)相互作用以及朝向并結(jié)合于(52-AR上的另外的位點(diǎn)。這一相互作用還傳遞或參與亞型選擇性以及增加的結(jié)合親合性和激動(dòng)劑活性。因?yàn)橄惹暗?J2-AR選擇性模型僅使用(R,R)-異構(gòu)體，有可能忽視該位點(diǎn)。數(shù)據(jù)的另一個(gè)解釋由Sokolov和Zefkov推薦的"搖擺四面體(rockingtetrahedron)"手性識(shí)別機(jī)制來(lái)啟發(fā)(DokladyAkademiiNaukSSSR319:1382-1383，1991)。在這一分子手性識(shí)別手段中，對(duì)映體配體通過(guò)兩種結(jié)合相互作用固定到手性選擇器上。該相互作用必須是非當(dāng)量以及是有方向性的，以便只有一種取向是可能的。被系留的對(duì)映體仍具有構(gòu)象活動(dòng)性并且手性中心上的其余部分將清除重疊的然而并非相同的空間體積。手性選擇器與這些空間體積的相互作用發(fā)生在什么位置和達(dá)到什么程度，確定了該方法的對(duì)映體選擇性。如果手性選擇器的手征性使得相互作用垂直于配體平面，未觀察到對(duì)映體選擇性。隨著與垂直方向的差異增加，相對(duì)于R或S構(gòu)型的對(duì)映體選擇性也隨之增加。關(guān)于(R，R)-5禾Q(R，S)-5，與CoMFA模型的空間受限位點(diǎn)的第一結(jié)合區(qū)域的相互作用不是兩種非當(dāng)量的和有方向性的相互作用，這使得第二手性中心上的其余構(gòu)件位于相對(duì)于第二結(jié)合區(qū)域是相同的雖然是鏡象的取向下。正如以上的討論，化合物5的1-萘基部分與Y308和H296的相互作用被認(rèn)為是觀察到的p2-AR選擇性的來(lái)源。如果1-萘基環(huán)清除重疊的然而并非相同的空間體積時(shí)，則觀察到的Ki&值和亞型選擇性表明以下含義l)Kip2-AR值代表1-萘基部分與Y308和H296之間的Ti-氫鍵合和7Wi相互作用、以及與其它殘基諸如W109和N312的另外的非PrAR特異性相互作用的總和；2)相對(duì)于(R,R)-5，由(R，S)-5清除的空間體積增加了Y308和H296與萘基部分的tt電子云的相互作用的概率；禾PI3灘對(duì)于(R,S)-5，由(R,R)-5清除的空間體積增加了與非(52-AR特異性位部位的相互作用的概率。在第二手性中心處的構(gòu)型的效果以及構(gòu)象基手性選擇性還通過(guò)(R,R)-3、(R,S)-3和(R)-7的親合性和亞型選擇性來(lái)說(shuō)明，見(jiàn)表l。在第二手性碳處的手征性從R向S的反轉(zhuǎn)降低了(R,S)-3/(32-AR復(fù)合物相對(duì)于(R，R)-3/卩2-AR復(fù)合物的Ki(32值降低約3倍，盡管在它們的Ki(3,值之間沒(méi)有顯著差異。觀察到的(R，R)-3相對(duì)于(R,S)-3，9相對(duì)于4，分別具有增加的亞型選擇性本質(zhì)上反映了Ki(32值的差異，這可反映出使氨基烷基鏈的芳族部分與包括第二結(jié)合區(qū)域的正電性和負(fù)電性區(qū)域接觸所需的增加的構(gòu)象能或這種相互作用發(fā)生時(shí)的可能性降低。除去第二手性中心上的甲基部分并從而在該部位的手征性((R)-7)具有相似的效果，因?yàn)樵谠撐恢檬终餍詮腞轉(zhuǎn)化成S。(R)-7的Kip2值比(R,S)-3的高32%，因此在(32-AR選擇性方面沒(méi)有差異，見(jiàn)表l。這些結(jié)果暗示了化合物3，在第二手性部位處的R構(gòu)型的主要效果是將氨基烷基鏈指向第二結(jié)合區(qū)域，這增加了與該部位的相互作用的可能性并降低了完成這一相互作用所需的構(gòu)象能?；衔?和5之間的差異是由芳族取代基清除的空間區(qū)域。關(guān)于化合物3，苯基環(huán)產(chǎn)生較小的更線性的區(qū)域，而對(duì)于化合物5，1-萘基環(huán)系統(tǒng)產(chǎn)生相對(duì)更大的和更寬的區(qū)域。這些差異可用于指導(dǎo)其它衍生物的合成。在一實(shí)施例重，(R，R)-2和(R，S)-5被選擇作為可能的候選物用于開(kāi)發(fā)新型的選擇性卩2-AR激動(dòng)劑。這些化合物相對(duì)于市售的消旋物-1具有增加的和延長(zhǎng)的系統(tǒng)暴露，因?yàn)槠浞肿邮杷?、代謝模式和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白相互作用的改變所導(dǎo)致。本發(fā)明的實(shí)施例提供了藥效基團(tuán)模型，其可被用作結(jié)構(gòu)指導(dǎo)，用來(lái)設(shè)計(jì)具有[32-AR選擇性的新化合物，該化合物可經(jīng)過(guò)測(cè)試用于治療包括充血性心力衰竭在內(nèi)的所需病況。實(shí)施例9(R，R)-非諾特羅、(R,R)-甲氧基非諾特羅和(R,S)-萘基非諾特羅的藥代動(dòng)力學(xué)研究本實(shí)施例說(shuō)明了(R，R)-非諾特羅、(R,R)-甲氧基非諾特羅和(R,S)-萘基非諾特羅被靜脈內(nèi)(IV)濃集給藥到雄性Sprague-Dawley大鼠的血漿濃度。(R,R)-非諾特羅、(R，R)-甲氧基非諾特羅和(R，S)-萘基非諾特羅以5mg/ml的單一劑量靜脈內(nèi)被給藥至頸靜脈插管(JVC)的大鼠內(nèi)(參見(jiàn)表3)。劑量的計(jì)算(mg/kg)基于在治療當(dāng)天測(cè)量的個(gè)體的體重。藥代動(dòng)力學(xué)研究的研究持續(xù)時(shí)間為6小時(shí)。在6小時(shí)內(nèi)在以下九個(gè)時(shí)間點(diǎn)收集血漿樣品在給藥所需劑量之前；在劑量給藥后5.00-5.30分鐘；在劑量給藥后15.00-16.30分鐘；在劑量給藥后30.00-33.00分鐘；在劑量給藥后60-65分鐘；在劑量給藥后120-125分鐘；在劑量給藥后240-245分鐘；在劑量給藥后300-305分鐘；和在劑量給藥后360-365分鐘。從每個(gè)治療組的3只大鼠重收集0-6小時(shí)和6-24小時(shí)的尿。表3.用于測(cè)量(R,R)-非諾特羅、(R,R)-甲氧基非諾特羅和(R,S)-萘基非諾特羅的血漿濃度研究條件。<table>tableseeoriginaldocumentpage81</column></row><table>(R，R)-非諾特羅、(R，R)-甲氧基非諾特羅和(R，S)-萘基非諾特羅在靜脈內(nèi)給藥至大鼠(5mg/kg)之后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)根據(jù)雙隔室開(kāi)放模型進(jìn)行分析(見(jiàn)表4)。遵循雙隔室模型藥代動(dòng)力學(xué)的藥物沒(méi)有迅速地在整個(gè)體內(nèi)達(dá)到平衡，如對(duì)單隔室模型所假設(shè)的那樣。在雙隔室模型中，藥物分布在兩個(gè)隔室內(nèi)，即中央隔室和組織或外周隔室內(nèi)。中央隔室代表血液、細(xì)胞外液和高度灌注組織。藥物迅速地和均勻地分布在中央隔室內(nèi)。第二隔室，稱作組織隔室或外周隔室，包含其中藥物平衡更緩慢的組織。藥物在兩個(gè)隔室之間的轉(zhuǎn)移被認(rèn)為通過(guò)一級(jí)過(guò)程發(fā)生。在下表4中使用了以下縮寫(xiě)與分布階段有關(guān)的cc-宏觀速率常數(shù)；與消除階段有關(guān)的(3-宏觀速率常數(shù)；分別與a相和p相有關(guān)的A,B-零時(shí)間截距；曲線下的AUC面積；Tl/2(K10)-與速率常數(shù)KIO有關(guān)的半衰期；K10-消除速率-藥物從中央隔室離開(kāi)系統(tǒng)的速率；K12-藥物從中央隔室進(jìn)入組織隔室的速率；K21-藥物從組織隔室進(jìn)入中央隔室的速率；VI-中央隔室的分布體積；V2-組織隔室的分布體積；VsS-穩(wěn)態(tài)下的分布體積；和CI-清除。表4.(R，R)-非諾特羅、(R,R)-甲氧基非諾特羅和(R,S)-萘基非諾特羅在靜脈內(nèi)給藥至大鼠(5mg/kg)之后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。<table>tableseeoriginaldocumentpage82</column></row><table>表5-7和圖8說(shuō)明了(R，R)-非諾特羅、(R,R)-甲氧基非諾特羅和(R，S)-萘基非諾特羅在IV給藥至大鼠(5mg/kg)之后的個(gè)體血漿濃度。在給藥至大鼠(5mg/kg)后的五分鐘，(R,R)-非諾特羅在血漿中的平均濃度(1.34)ag/ml)顯著低于(R,R)-甲氧基非諾特羅(2.121^g/ml)或(R,S)-萘基非諾特羅(2.11pg/ml)。表5.在靜脈內(nèi)給藥(5mg/kg)后(R，R)-非諾特羅的個(gè)體血漿濃度。<table>tableseeoriginaldocumentpage83</column></row><table>表6.在靜脈內(nèi)給藥(5mg/kg)后(R，R)-甲氧基非諾特羅的個(gè)體血漿濃度。<table>tableseeoriginaldocumentpage83</column></row><table>表7.在靜脈內(nèi)給藥(5mg/kg后(R，S)-萘基非諾特羅的個(gè)體血漿濃度。<table>tableseeoriginaldocumentpage84</column></row><table>上述數(shù)據(jù)表明兩種衍生物，即，(R，R)-甲氧基非諾特羅和(R，S)-萘基非諾特羅，與(R，R)-非諾特羅相比，具有顯著更高的系統(tǒng)暴露(AUC)和更長(zhǎng)的清除，這可產(chǎn)生藥效更長(zhǎng)的藥物。建議更長(zhǎng)的清除時(shí)間可能是乙酯葡醛酸結(jié)合的結(jié)果。實(shí)施例10使用(R,R)-非諾特羅或非諾特羅類似物治療心臟病癥基于本文所公開(kāi)的教導(dǎo)，心臟病癥例如充血性心力衰竭通過(guò)給藥治療有效劑量的(R,R)-非諾特羅或上面公開(kāi)的非諾特羅類似物中的一個(gè)或多個(gè)(參見(jiàn)第III和IV節(jié))進(jìn)行治療。在一實(shí)施例中，鑒定了已被診斷罹患充血性心力衰竭的受試者。在受試者選擇之后，將治療有效劑量的(R,R)-非諾特羅或各自的非諾特羅類似物給藥至受試者。例如，將包括甲氧基基或萘基衍生物在內(nèi)的治療有效劑量的(R，R)非諾特羅類似物給藥至受試者。在另外的實(shí)施例中，將包括萘基衍生物在內(nèi)的治療有效劑量(R,S)-非諾特羅類似物給藥至少受試者。根據(jù)第III.B節(jié)和實(shí)施例5所述制備和純化非諾特羅類似物。(R,R)-非諾特羅或非諾特羅類似物或其藥物組合物用于減少、抑制和/或治療充血性心力衰竭的給藥量根據(jù)被治療的受試者、病癥的嚴(yán)重性和治療組合物的給藥方式(參見(jiàn)章節(jié)V)的不同而異。理論上，藥劑的治療有效量是這樣的量，該量足以預(yù)防、減少和/或抑制和/或治療受試者的心臟病癥(例如充血性心力衰竭)而不在受試者中引起相當(dāng)大的細(xì)胞毒作用。在一實(shí)施例中，(R，R)-非諾特羅，所公開(kāi)的非諾特羅類似物(諸如包括甲氧基基或萘基衍生物的(R，R)-非諾特羅類似物或包括萘基衍生物的(R,S)-非諾特羅類似物)或藥物組合物以約0.001到約10毫克/千克體重以單劑量或分劑量經(jīng)口給藥被提供。在具體的實(shí)施例中，該劑量范圍為約0.005到約5毫克/千克體重，以單劑量或分劑量經(jīng)口給藥(假定平均體重為約70千克；對(duì)于體重比平均體重或多或少的人，該值進(jìn)行相應(yīng)地調(diào)整)。在某些實(shí)施例中，公開(kāi)的非諾特羅化合物或藥物組合物以片劑形式通過(guò)口服給藥被提供，該片劑包含約1.0到約50毫克的活性成分，特別包含約2.0毫克到約IO毫克、更特別包含約2.5毫克、約5毫克、或約IO毫克的活性成分，用于對(duì)被治療的受試者根據(jù)癥狀進(jìn)行劑量調(diào)整。在一個(gè)示例性的口服給藥方案中，包含約1毫克到約50毫克活性成分的片劑在一天內(nèi)分2-4次給藥。例如，包含約1毫克到約10毫克活性成分的片劑每天給藥兩次。實(shí)施例ll使用非諾特羅類似物治療肺病癥根據(jù)本文所公開(kāi)的教導(dǎo)，肺病癥例如哮喘或慢性阻塞性肺病通過(guò)給藥治療有效劑量的上面公開(kāi)的非諾特羅類似物(參見(jiàn)第III-V節(jié))進(jìn)行治療。在一實(shí)施例中，鑒定了已被診斷罹患或顯示與哮喘或慢性阻塞性肺病有關(guān)的癥狀之一的受試者。在受試者選擇后，將治療有效劑量的所需的非諾特羅類似物給藥至受試者。例如，將包括甲氧基或萘基衍生物在內(nèi)的治療有效劑量的(R，R)-非諾特羅類似物給藥至受試者。在另外的實(shí)施例中，將包括萘基衍生物在內(nèi)的治療有效劑量(R,S)-非諾特羅類似物給藥至少受試者。根據(jù)第III.B節(jié)和實(shí)施例5所述制備和純化非諾特羅類似物。非諾特羅類似物的用于預(yù)防、減少、和/或抑制、禾口/或治療肺病癥的給藥量根據(jù)被治療的受試者、病癥的嚴(yán)重性和治療組合物的給藥方法的不同而異。理論上，藥劑的治療有效量是這樣的量，該量足以預(yù)防、減少和/或抑制和/或治療受試者的肺病癥而不在受試者中引起相當(dāng)大的細(xì)胞毒作用。在一實(shí)施例中，(R,R)-非諾特羅，所公開(kāi)的非諾特羅類似物(諸如包括甲氧基或萘基衍生物的(R，R)-非諾特羅類似物或包括萘基衍生物的(R，S)-非諾特羅類似物)或藥物組合物以約0.001到約10毫克/千克體重以單劑量或分劑量經(jīng)口給藥被提供。在具體的實(shí)施例中，該劑量范圍為約0.005到約5毫克/千克體重，以單劑量或分劑量經(jīng)口給藥(假定平均體重為約70千克；對(duì)于體重比平均體重或多或少的人，該值進(jìn)行相應(yīng)地調(diào)整)。在某些實(shí)施例中，公開(kāi)的非諾特羅化合物或藥物組合物以片劑形式通過(guò)口服給藥被提供，該片劑包含約1.0到約50毫克的活性成分，特別包含約2.0毫克到約IO毫克、更特別包含約2.5毫克、約5毫克、或約IO毫克的活性成分，用于對(duì)被治療的受試者根據(jù)癥狀進(jìn)行劑量調(diào)整。在一個(gè)示例性的經(jīng)口劑量給藥方案中，包含約1毫克到約50毫克的活性成分的片劑每天給藥2-4次。例如，包含約1毫克到約10毫克活性成分的片劑每天給藥兩次。鑒于可應(yīng)用與本發(fā)明所公開(kāi)的原則相符的許多可能的實(shí)施方案，可理解被說(shuō)明的實(shí)施方案僅僅是本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施例，并且不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明范圍的限制。本發(fā)明的范圍而是由權(quán)利要求來(lái)定義，因此，本發(fā)明的范圍由權(quán)利要求的范圍和精神實(shí)質(zhì)來(lái)約束。權(quán)利要求1.由下式表示的化合物其中R1-R3獨(dú)立地是氫，?；?，烷氧基羰基或其組合；R4是氫或低級(jí)烷基；R5是低級(jí)烷基，其中Y1、Y2和Y3獨(dú)立地是氫，低級(jí)-OR6和-NR7R8；其中X和Y獨(dú)立地選自H，-OR6和-NR7R8；R6是氫或低級(jí)烷基；和R7和R8獨(dú)立地是氫，低級(jí)烷基，烷氧基羰基，?；虬被驶?。2.權(quán)利要求l的化合物，其中R4是低級(jí)烷基且R5是其中X是H，-OR6或-NR7R:Re是低級(jí)垸基；和R7和Rs獨(dú)立地是氫或低級(jí)垸基。3.權(quán)利要求2的化合物，其中R4選自甲基，乙基，正丙基和異丙基。4.權(quán)利要求3的化合物，其中R4是甲基,權(quán)利要求4的化合物，其中R5由下式表示:5.其中X是H，-OR6或-NR7R8。6.權(quán)利要求5的化合物，其中R6是甲基。7.權(quán)利要求6的化合物，其中化合物是(R,R)-化合物,8.權(quán)利要求l的化合物，其中Rs是以下之一:OCH39.權(quán)利要求1的化合物，其中R5是:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>10.權(quán)利要求5的化合物，其中R7和Rg是氫。11.權(quán)利要求4的化合物，其中R5由下式表示:12.權(quán)利要求ll的化合物，其中RpR3是氫,13.權(quán)利要求ll的化合物，其中化合物是(R，R)-化合物。14.權(quán)利要求ll的化合物，其中化合物是(S，S)-化合物。15.藥物組合物，其包含權(quán)利要求2的化合物和至少一種可藥用載體。16.權(quán)利要求15的藥物組合物，其中R4是甲基,17.權(quán)利要求16的藥物組合物，其中R!-R3是氫,18.權(quán)利要求16的藥物組合物，其中Rs由下式表示:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中X是H、-OR(^I-NR7R8。19.權(quán)利要求18的藥物組合物，其中R6是甲基。20.權(quán)利要求19的藥物組合物，其中化合物是(R,R)-化合物21.權(quán)利要求18的藥物組合物，其中R和R8是氫。22.權(quán)利要求17的藥物組合物，其中R5由下式表示:23.權(quán)利要求22的藥物組合物，其中化合物是(R,R)-化合物。24.權(quán)利要求23的藥物組合物，其中化合物是(R，S)-化合物。25.治療受試者的肺病癥或心血管病癥的方法，該方法包括給藥治療有效量的權(quán)利要求2的化合物至罹患肺病癥或心血管病癥的受試者。26.權(quán)利要求25的方法，其中病癥是心血管病癥。27.權(quán)利要求26的方法，其中心血管病癥是充血性心力衰竭。28.權(quán)利要求25的方法，其中病癥是肺病癥。29.權(quán)利要求28的方法，其中肺病癥是哮喘或慢性阻塞性肺病中至少一種。30.治療受試者的肺病癥或心血管病癥的方法，該方法包括給藥治療有效量的權(quán)利要求11的化合物至罹患肺病癥或心血管病癥的受試者。31.權(quán)利要求30的方法，其中病癥是心血管病癥。32.權(quán)利要求31的方法，其中心血管病癥是充血性心力衰竭。33.權(quán)利要求30的方法，其中病癥是肺病癥。34.權(quán)利要求33的方法，其中肺病癥是哮喘或慢性阻塞性肺病中至少一種。35.治療受試者的肺病癥或心血管病癥的方法，該方法包括給藥治療有效量的權(quán)利要求12的化合物至罹患肺病癥或心血管病癥的受試者。36.權(quán)利要求35的方法，其中病癥是心血管病癥。37.權(quán)利要求36的方法，其中心血管病癥是充血性心力衰竭。38.權(quán)利要求35的方法，其中病癥是肺病癥。39.權(quán)利要求38的方法，其中肺病癥是哮喘或慢性阻塞性肺病中至少一種。40.治療受試者的肺病癥或心血管病癥的方法，該方法包括給藥治療有效量的權(quán)利要求15的化合物至罹患肺病癥或心血管病癥的受試者。41.權(quán)利要求40的方法，其中病癥是心血管病癥。42.權(quán)利要求41的方法，其中心血管病癥是充血性心力衰竭。43.權(quán)利要求40的方法，其中病癥是肺病癥。44.權(quán)利要求43的方法，其中肺病癥是哮喘或慢性阻塞性肺病中至少一種。45.治療受試者的肺病癥或心血管病癥的方法，該方法包括給藥治療有效量的權(quán)利要求20的化合物至罹患肺病癥或心血管病癥的受試者。46.權(quán)利要求45的方法，其中病癥是心血管病癥。47.權(quán)利要求46的方法，其中心血管病癥是充血性心力衰竭。48.權(quán)利要求45的方法，其中病癥是肺病癥。49.權(quán)利要求48的方法，其中肺病癥是哮喘或慢性阻塞性肺病中至少一種。50.治療受試者的肺病癥或心血管病癥的方法，該方法包括給藥治療有效量的權(quán)利要求21的藥物組合物至罹患肺病癥或心血管病癥的受試者。51.權(quán)利要求50的方法，其中病癥是心血管病癥。52.權(quán)利要求51的方法，其中心血管病癥是充血性心力衰竭。53.權(quán)利要求50的方法，其中病癥是肺病癥。54.權(quán)利要求53的方法，其中肺病癥是哮喘或慢性阻塞性肺病中至少一種。55.治療受試者的心血管病癥的方法，該方法包括給藥有效量的大體上光學(xué)純的(R，R)-非諾特羅至罹患心血管病癥的受試者。56.權(quán)利要求55的方法，其中心血管病癥是充血性心力衰竭。全文摘要本發(fā)明涉及發(fā)現(xiàn)了高度有效地結(jié)合與β2-腎上腺素能受體的(R，R)-和(R，S)-非諾特羅。提供了這些類似物的示例性化學(xué)結(jié)構(gòu)。還提供了包含本發(fā)明的(R，R)-非諾特羅和非諾特羅類似物的藥物組合物，和使用這種化合物和組合物用于治療心臟病癥例如充血性心力衰竭和肺病癥例如哮喘或慢性阻塞性肺病的方法。文檔編號(hào)C07C215/60GK101528666SQ200780036155公開(kāi)日2009年9月9日申請(qǐng)日期2007年8月10日優(yōu)先權(quán)日2006年8月10日發(fā)明者凱立德·察基爾,發(fā)里德·M·貝基,朱衛(wèi)忠,肖瑞平,艾爾萬(wàn)·W·外納爾,達(dá)拉爾·R·阿貝爾納西申請(qǐng)人:美國(guó)政府健康及人類服務(wù)部