專利名稱：：N末端經修飾的glp-1受體調節(jié)劑的制作方法
技術領域：
：本申請披露和要求保護的主題提供了新的人胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)肽受體調節(jié)劑、激動劑或部分激動劑，其展現(xiàn)出與天然肽GLP-1類似或優(yōu)于天然肽GLP-1的生物學特性，且與GLP-1天然序列相比，對溶蛋白性裂解表現(xiàn)出提高的穩(wěn)定性，因此可用于糖尿病的治療和改善。
背景技術：
：GLP-1是在葡萄糖代謝及胃腸分泌和代謝中具有調節(jié)功能的重要胃腸激素。人GLP-1是起源于前胰高血糖素原(preproglucagon)的30個氨基酸的肽，其例如在遠端回腸的L-細胞中及在腦中合成。對前胰高血糖素原進行加工以生成GLP-1(7-36)酰胺和GLP-2，這主要發(fā)生在L-細胞中。GLP-1通常響應于食物攝取而分泌，糖類和脂類尤其刺激GLP-1的分泌。GLP-1已被鑒定為胰島素釋放的強效和高效刺激物。GLP-1降低血漿胰高血糖素濃度，減慢胃排空，刺激胰島素生物合成，以及提高胰島素敏感度(Nauck，1997，Horm.Metab.Res.47:1253-1258)。在患有葡萄糖耐量降低(impairedglucosetolerance)的受試者中，GUM還提高(3-細胞感受和響應于葡萄糖的能力(Byrne,Eur.J.Clin.Invest.,28:72-78,1998)。GLP-1在人中的促胰島素效應增加了葡萄糖代謝速率，這部分是由于提高的胰島素水平，并且部分是由于提高的胰島素敏感度(D，Alessio，Eur.J.Clin.Invest"28:72-78，1994)。GLP畫l的上述藥理學性質使其成為治療II型糖尿病的高度期望的治療劑。此外，最近的研究已表明輸注輕微超生理(supmphysiological)量的GLP-1在正常受試者中顯著提高飽滿感并且減少食物攝取(Flint,A.,Raben，A.，Astrup,A.andHoist,J丄，J.Clin.Invest,101:515-520,1998和Gutswiller,J.P.Goke,B.,Drewe,丄，Hildebrand,P.，Ketterer,S.，Handschin,D.，Winterhaider，R.，22Conen，DandBeglinger，C.Gut44:81-86，1999)。也已報道食物攝取和飽滿感的作用在肥胖受試者中得以保持(Naslund,E.,Barkeling,B.,King,N.,Gutniak,M.,Blundell,J,E.，Holst，J丄，Rossner,S.,andHellstrom,P.M.,Int.J.Obes.RelatMetab.Disord.，23:304-311，1999)。在上文所引用的研究中也猜測GLP-1對胃排空具有顯著的抑制作用。胃排空導致餐后葡萄糖波動(post-prandialglucoseexcursion).已表明除對胰島素分泌的刺激外，GLP-1還刺激轉錄因子胰島-十二指腸同源框-l(IDX-l)的表達，同時刺激p-細胞的再生，由此可作為有效治療和/或預防糖尿病的藥物(Stoffers，D.A.,Kieffer,T.J,Hussain,M.A.,Drucker，D.J"Bonner-Weir，S.，Habener，J.F.andEgan，J.M.Diabetes,40:741-748，2000)。也已表明GLP-1抑制胃酉臾分泌(Wettergren，A.,Schjoldager，B.，Mortensen,RE"Myhre，J.,Christiansen,J.,Holst，J丄，Dig.Dis.Sci.，38:665-673,1993)，這可提供保護作用以對抗胃潰瘍。GLP-1是一種腸降血糖素激素(例如提高膳食所致胰島素分泌的腸內激素)(Holst,J丄，Curr.Med.Chem.，6:1005-1017，1999)。它是編碼胰高血糖素原的胰高血糖素基因的產物。所述基因不但在胰的A-細胞中表達，而且還在腸粘膜的內分泌L-細胞中表達。胰高血糖素原是含有160個氨基酸的肽(蛋白質)。對胰高血糖素原的進一步加工導致以下物質的產生a)胰高血糖素，b)N末端即可能無活性的片段，以及c)通常稱為"主要胰高血糖素原片段，，的大的C末端片段。C末端片段被認為不具有生物活性。盡管此片段存在于胰中并且存在于腸的L-細胞中，但僅在腸中觀察到"主要胰高血糖素原片段，，的裂解產物，所述裂解產生兩種通常稱為GLP-1和GLP-2的高度同源肽。這兩種肽具有重要的生物活性。如此，存在于L-細胞中的GLP-1的氨基酸序列與胰高血糖素原的78-107部分相同。目前，涉及使用GLP-1型分子的治療方法出現(xiàn)了重大的問題，這是因為此類肽的血清半衰期非常短。例如GLP-1(7-37)具有小于5min的血清半衰期。因此，迫切需要具有延長的藥效學分布且具有生物活性的GLP-受體調節(jié)劑、激動劑或拮抗劑。本申請披露和要求保護的主題旨在滿足這種需要和其它需要。本申請披露了作為GLP-1受體調節(jié)劑、激動劑或部分激動劑的新肽，其展現(xiàn)出與天然肽GLP-1類似或優(yōu)于天然肽GLP-1的生物學特性，因而可用于糖尿病和相關病癥的治療和改善。
發(fā)明內容本申請所述合成分離的肽作為期望的GLP-1受體激動劑或部分激動劑而能夠調節(jié)GLP-1受體。這些合成的肽相對于GLP-1表現(xiàn)出相似的體內功效和卓越的藥物動力學性質，包括餐后血糖的降低和血漿胰島素水平的伴隨提高，因此使這些肽成為用于皮下制劑、肺制劑、鼻制劑、口腔制劑或持續(xù)釋放制劑的理想治療候選對象。本申請所述主題的第一個實施方案為經分離的多肽，其包含式I的序列式i其中xaal為包含咪唑環(huán)基團或噻唑環(huán)基團的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如組氨酸或噻唑基丙氨酸；其中所述氨基酸的任何碳原子任選經氫或一個或多個烷基或一個或多個卣素取代；其中所述氨基酸的游離氨基可經羥基或烷氧基代替，或任選經氫、烷基、?；?、苯曱?；⑼榛趸驶?例如曱氧羰基)、芳基氧基羰基、芳烷基氧基羰基、雜環(huán)基氧基羰基、雜芳基烷基氧基羰基、烷基氨曱?；⒎蓟奔柞；?、芳烷基氨曱?；㈦s環(huán)基磺?；?、烷基磺酰基、芳基磺?；?、芳基烷基磺?；㈦s芳基烷基磺?；螂s芳基磺?；〈?；且其中Xaal的氨基任選不存在，使得Xaal為組氨酸的脫氨基酸或噻唑基丙氨酸的脫氨基酸，其中任何碳原子任選經烷基、鹵素或羥基取代；X^為選自以下的天然存在或非天然存在的氨基酸a-氨基-異丁酸(Aib)、D-丙氨酸、L-丙氨酸、N-曱基-L-丙氨酸、N-曱基-D-丙氨酸、L-脯氨酸、(S)-a-曱基-脯氨酸、L-氮雜環(huán)丁烷-:羧酸(Azt)、(S)-a-曱基-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(a-Me-Azt)、L-纈氨酸及(R)-或(S)-異纈氨酸，且其中所述氨基酸的碳原子任選經烷基或卣素中的一個或多個取代；X^為含有包含羧酸基團的氨基酸側鏈的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如天冬氨酸或谷氨酸；且其中所述氨基酸的任何碳原子任選經烷基或卣素中的一個或多個取代；24X^為甘氨酸；Xaas為選自以下的天然存在或非天然存在的氨基酸L-蘇氨酸、L-別蘇氨酸、L-絲氨酸、L-正纈氨酸及L-正亮氨酸；且其中所述氨基酸的任何碳原子任選經烷基或囟素中的一個或多個取代；X^為包含經二取代的a碳的天然存在或非天然存在的氨基酸；其中所述氨基酸的側鏈之一含有芳環(huán)或雜芳環(huán)，例如a-曱基-苯基丙氨酸、a-曱基-2-氟苯基丙氨酸及a-曱基-2,6-二氟苯基丙氨酸，其中所述氨基酸的任何碳原子任選經一個或多個烷基取代；且其中所述氨基酸的任何碳原子任選經一個或多個卣素取代；Xaa7為包含經羥基取代的氨基酸側鏈的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如L-蘇氨酸或L-別蘇氨酸；其中所述氨基酸的任何碳原子任選經烷基或卣素中的一個或多個取代；X礎為選自以下的天然存在或非天然存在的氨基酸L-絲氨酸、L-組氨酸及L-天冬酰胺；其中所述氨基酸的一個或多個碳原子任選經烷基或鹵素中的一個或多個取代；Xaa9為含有包含羧酸基團的氨基酸側鏈的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如L-天冬氨酸或L-谷氨酸；其中所述氨基酸的一個或多個碳原子任選經烷基或卣素中的一個或多個取代；X^o為式II、III或IV的天然存在或非天然存在的氨基酸其中R3、R4及Re各自選自氫、曱基、乙基、烷基、芳基、雜環(huán)基、雜式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>芳基、卣素、羥基、羥基烷基、氰基、氨基、氨基烷基、羧基、羧基烷基、曱氧基、烷氧基、芳基氧基、羧酰胺基團(carboxamide)、經取代的羧酰胺基團、烷基酯基團、芳基酯基團、烷基磺?；胺蓟酋；磺移渲蠿,、X2、X3、X4及Xs各自為C或N,其限制條件為X,、X2、X3、X4及Xs中的至少一個為N;Xaall為式IIa、IIIa或IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸其中所述氨基酸的C末端羰基碳與氮連接形成羧酰胺(NH2)、烷基羧酰胺(NHR,)或二烷基羧酰胺(NR,R2);其中R,及R2各自為烷基或芳基烷基；其中Rh、R4a及R6a各自選自氫、烷基(例如曱基、乙基)、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、卣素、羥基、羥基烷基、氰基、氨基、氨基烷基、羧基、羧基烷基、烷氧基、芳基氧基、羧酰胺基團、經取代的羧酰胺基團、烷基酯基團、芳基酯基團、烷基磺?；胺蓟酋；?；其中R7選自氫、曱基及乙基；且其中X,、X2、X3、X4及X5各自為C或N，其限制條件為X!、X2、X3、X4及Xs中的至少一個為N;其中當X^o為式II的氨基酸時，Xaall不是式IIa的氨基酸。式II的天然存在或非天然存在的氨基酸可還包含多于一個的R3、R4或R6基團。式HI的天然存在或非天然存在的氨基酸可還包含多于一個的R3、R4或R6基團。式IV的天然存在或非天然存在的氨基酸可還包含多于一個式IIIa式IV的R3、R4或R6基團。式V的天然存在或非天然存在的氨基酸可還包含一個或多個R4或Rs基團。式IIa的天然存在或非天然存在的氨基酸可還包含多于一個的R3a、或R6a基團。式IIIa的天然存在或非天然存在的氨基酸可還包含多于一個的R3a、R4a或R6a基團。式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸可還包含多于一個的R3a、R4a或Rfia基團。式I的第一個實施方案中的X^o也可以是式VI的化合物式VI其中R3選自烷基(例如甲基、乙基)及卣素(例如氟、氯)，且R6選自羥基及曱氧基。式I的第一個實施方案中的Xaau也可以是式Via的化合物其中R化為曱氧基；且其中R7選自氫及曱基。在另一個實施方案中，Xaa,選自L-His(L-組氨酸)、D-His、L-N-曱基-His、D-N-曱基-His、L-4-噻唑基-Ala(L-4-噻唑基-丙氨酸)、D-4-噻唑基-Ala、脫氨基-His、脫氨基-噻唑基-Ala、3-(lH-咪唑-4-基)-2-甲基丙?；?、(S)-3-(lH-咪唑-4-基)-2-羥基丙其中R3a選自甲基、乙基及氟;式I的第一個實施方案中的Xs式Via且其中R7選自氫及曱基。,也可以是式Vila的化合物:式Vila?；?L-P-咪唑乳?；?及(S)-或(R)-3-(lH-咪唑-4-基)-2-曱氧基丙酰基(IMeOp)，且其中若存在末端氨基，則所述末端氨基任選經氫、烷基、二烷基、?；?、苯甲酰基、烷基氧基羰基(例如曱氧羰基)、芳基氧基羰基、芳烷基氧基羰基、雜環(huán)基氧基羰基、雜芳基烷基氧基羰基、烷基氨曱?；?、芳基氨曱?；?、芳烷基氨曱酰基、雜環(huán)基磺酰基、烷基磺?；⒎蓟酋；⒎蓟榛酋；?、雜芳基烷基磺?；螂s芳基磺?；〈?；Xaa2選自L-Ala、D畫Ala、N-甲基-L畫Ala、N畫曱基-D-Ala、L-Pro(L-脯氨酸)、(S)-a-曱基-L-Pro、L-氮雜環(huán)丁烷-l羧酸(Azt)、(S)-a-甲基-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(a-Me-Azt)及a-氨基異丁酸(Aib);Xw選自L-Glu(L-谷氨酸)、L-Asp(L-天冬氨酸)及L-Gla(L個羧基谷氨Xaa4為Gly(甘氨酸)；Xw選自L-Thr(L-蘇氨酸)、L-Nle(L-正亮氨酸)、L-Nva(L-正纈氨酸)、L-氨基辛酸(L-Aoc)及L-別蘇氨酸；X^選自L-a-Me-Phe(L-a-甲基-苯基丙氨酸)、L-a-Et-Phe(L-a-乙基-苯基丙氨酸)、L-a-Me-2-氟-Phe、L-a-Me-3-氟-Phe、L-a-Me-2,3-二氟-Phe、L-a-Me-2，6-二氟-Phe及L-a-Me-Phe(五氟)；且Xaa7為L-Thr或L-別蘇氨酸；X^選自L-Ser(L-絲氨酸)、L-His及L-Asn(L-天冬酰胺)；Xaa9為L-Asp;X^o為式H的天然存在或非天然存在的氨基酸；式II的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-[(4，-曱氧基-2，-乙基)-苯基]苯基丙氨酸、4-[(4，-乙氧基-2，-乙基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(4，-甲氧基-2，-曱基)笨基]苯基丙氨酸、4-[(4，-乙氧基-2，-曱基)苯基]苯基丙氨酸、4-(2，-乙基苯基)苯基丙氨酸、4-(2，-甲基苯基)苯基丙氨酸、4-[(3，,5'-二甲基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(3，,4，-二曱氧基)苯基]苯基丙氨酸及4-[(2，-乙基-4，-羥基)苯基]苯基丙氨酸；X^o為式III的天然存在或非天然存在的氨基酸；式III的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-[2，-(4，-甲氧基-6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(4，-曱氧基-6，-曱基)吡啶基]-4-苯基丙氨酸、4-[2，-(6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(6，-甲基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(3，,5，-二曱基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(4，-曱氧基-6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[3，-(4，-甲氧基-6，-曱基)吡咬基]苯基丙氨酸、4-[3，-(2，-乙基)p比啶基]苯基丙氨酸及4-[3，-(6，-曱基)吡啶基)苯基丙氨酸；Xaa,。為式IV的天然存在或非天然存在的氨基酸；、式IV的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-[(4，-曱氧基-2，-乙基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-[(4，-曱氧基-2，-曱基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-甲基苯基)-3-吡啶基丙氤酸、4-[(3，,5，-二甲基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸及4-[(2，-乙基-4，-羥基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸；Xaall為式IIa的天然存在或非天然存在的氨基酸；式IIa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-(2，-曱基笨基)苯基丙氨酸、4-(2，-氟笨基)苯基丙氨酸及4-[(3，,5，-二曱基)苯基]苯基丙氨酸；Xaall為式IIIa的天然存在或非天然存在的氨基酸；式IIIa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-[(6，-曱基)-2，-吡啶基]笨基丙氨酸、4-[(6，-曱基)-3，-吡咬基]苯基丙氨酸、4-[(6，-乙基)-2，-吡啶基)]笨基丙氨酸及4-[(6，-乙基)-3，-吡啶基)]苯基丙氨酸；Xaall為式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸；式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-(2，-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-氟苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-[(3，,5，-二曱基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-(4，-三氟曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸及4-(2，-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸；且其中所述氨基酸的C末端羰基碳與氮連接形成羧酰胺(NH2)、烷基羧酰胺(NHR0或二烷基羧酰胺(NR,R2),其中R,及Rz各自為烷基或芳基烷基。在另一個方面，Xaal為選自以下的氨基酸L-His、D-His、L-N-曱基-His、D-N-曱基-His、L-4-噻唑基-Ala、D-4-噻唑基-Ala、脫氨基-His、脫氨基-噻唑基-Ala、3-(lH-咪唑-4-基)-2-曱基丙酰基、(S)-3-(lH-咪唑-4-基)-2-羥基丙?；?L-P-咪唑乳?；?及(S)-或(R)-3-(lH-咪唑-4-基)-2-甲氧基丙?；?IMeOp);其中若存在末端氨基，則所迷末端氨基任選經氫、烷基、酰基、苯曱?；?、烷基氧基羰基(例如曱氧羰基)、芳基氧基羰基、芳烷基氧基羰基、雜環(huán)基氧基羰基、雜芳基烷基氧基羰基、烷基氨曱?；?、芳基氨曱?；?、芳烷基氨曱?；㈦s環(huán)基磺?；?、烷基磺?；?、芳基磺?；?、芳基烷基磺?；㈦s芳基烷基磺?；螂s芳基磺?；〈?；Xaa2為選自以下的氨基酸L-丙氨酸、D-丙氨酸、N-甲基-L-丙氨酸、N-曱基-D-丙氨酸、L-脯氨酸、(S)-a-曱基-L-脯氨酸、L-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(Azt)、(S)-a-甲基-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(a-Me-Azt)及a-氨基異丁酸(Aib);Xaa3為選自L-Glu、L-Asp及L-Gla的氨基酸；Xaa4為GIy;Xaas為選自L-Thr、L-Nle、L-Nva、L-Aoc及L-別蘇氨酸的氨基酸；Xaa6為選自L-a-Me-Phe、L畫a-Et-Phe、L-a-Me-2-氟-Phe、L-a-Me-3-氟-Phe、L-a-Me-2,3畫二氟-Phe、L-a-Me-2,6-二氟-Phe及L-a-Me-Phe(五氟)的氨基酸；X^為選自L-Thr及L-別蘇氨酸的氨基酸；X^為選自L-Ser、L-His及L-Asn的氨基酸；Xaa9為L-Asp;X犯,。為選自式I1、III、IV及V的氨基酸的天然存在或非天然存在的氨基酸；其中式II為選自以下的氨基酸4-[(2，-乙基-4，-羥基)苯基]苯基丙氨酸、4_[(4，_曱氧基_2，_乙基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(4，-曱氧基-2，-曱基)苯基]苯基丙氨酸、4-(2，-乙基苯基)苯基丙氨酸、4-(2，-甲基苯基)苯基丙氨酸、4-[(3，,5，-二曱基)苯基]苯基丙氨酸及4-[(3，，4，-二曱氧基)苯基]苯基丙氨酸；其中式III為選自以下的氨基酸4-[2，-(4，-曱氧基-6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(4，-甲氧基-6，-曱基)吡啶基]-4-苯基丙氨酸、4-[2，-(6，-乙基戶比啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(6，-甲基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(3，,5，-二曱基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(4，-曱氧基-6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[3，-(4，-甲氧基-6，-甲基)p比啶基]苯基丙氨酸、4-[3，-(2，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸及4-[3，-(6，-曱基)吡啶基)苯基丙氨酸；其中式IV為選自以下的氨基酸4-[(2，-乙基-4，-羥基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-[(4，-曱氧基-2，-乙基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-[(4，-曱氧基-2，-甲基)笨基]-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-乙基笨基)-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸及4-[(3，,5，-二曱基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸；且為選自式IIa、IIIa及IVa的氨基酸的天然存在或非天然存在的氨基酸；其中式na為選自以下的氨基酸4-(2，-甲基苯基)苯基丙氨酸、4-(2，-氟苯基)苯基丙氨酸及4-[(3，，5，-二曱基)苯基]苯基丙氨酸；其中式IIIa為選自以下的氨基酸4-[2，-(6，-曱基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(6，_曱基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸及4-[3，-(6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸；其中式IVa為選自以下的氨基酸4-(2，-甲基束基)-3-吡咬基丙氨酸、4-(2，-氟苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-[(3，，5，-二甲基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-(4，-三氟曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸及4-(2，-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸；其中當Xaa,o為式II的氨基酸時，不是式IIa的氨基酸；其中C末端羰基碳與氮連接形成羧酰胺(NH2)、烷基羧酰胺(NHR,)或二烷基羧酰胺(NR,R2)，其中R,及R2各自為烷基或芳基烷基；且其中Xaal0及Xaal,不同時為式II的氨基酸。其它實施方案包括含有任何以下序列的經分離的多肽SE(3IDNo.Xaa2Xaa3XM4Xaa5Xaa6Xaj7Xaali"NH2J'HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-Me)4-(2'-吡啶基)笨基丙氨酸-NH22HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(3',5'-二甲基)4-(2'-吡啶基)笨基丙氨酸-NHz3HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-OBu)4-(2'-吡啶基)笨基丙氨酸-NH2HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-Me)4-(4'-吡啶基)笨基丙氨酸-NH25HAibEGTL懇a-Me陽Phe(2隱氟)TsDBip(2'-CI)4-(4'-吡啶基)笨基丙氨酸-NH26HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-甲氡基-5'-異丙基)4-(4'-吡啶基)苯基丙氨酸-NHz7HAibEGTL陽a-Me-Phe(2-氟)TsD4-(2'-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸Bip(2'-Me)-NH28HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsD4-[(2'-乙基-4'-曱氧基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸Bip(2'-Me)-NH29HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-甲基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NK'l()HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-甲基苯基)-3-吡。定基丙氨酸-NHzn脫氨基-HisAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et陽4'-OMe)4-(2'-甲基笨基)-3-。比咬基丙氨酸-NH212脫氨基-HisAibEGTL隱a-Me-Phe(2,6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-甲基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH213HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsD4-(2'-乙基笨基)-3-吡梵基丙氨酸4-(2'-甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NHj31<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>SEQIDNo.XM5Xaa6Xaa7Xaa9XMll-NH258HAibEGTL陽a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-(2'-乙基苯基)-3-吡°定基丙氨酸4-[3'-(2'-CI-6'-CF3)。比啶基]苯基丙氨酸-NH259HAibEGTL-ot-Me-Phe(2，6陽二氟)TsD4-(2'-乙基笨基)-3--比。定基丙氨酸4-[3'-(2'-CN-6'-Me)吡咬基]苯基丙氨酸->260HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡啶基]苯基丙氨酸Bip(2'-CI)-NH261HAibEGTL-a德-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡啶基]苯基丙氨酸Bip(3'-Cl-4'-F)-NH262HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡啶基]苯基丙氨酸Bip(3',5'-二曱基)-叫63HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡啶基]笨基丙氨酸Bip(2'-Me-4'-0Me)-NH264HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡啶基]苯基丙氨酸Bip(2'-Me陽3'-F)-NH265HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡啶基]苯基丙氨酸Bip(2'-F)-NH266HAibEG丁L-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[(4'-Me-6'-OMe)-3-吡啶基]苯基丙氨酸Bip(2'-CI)-NH267HAibEGTL-a陽Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[(4'-Me-6'-OMe)-3-'比啶基]苯基丙氨酸Bip(3',4'-二甲氧基)-NH268HAibEGTL-a-Me-Phe(2，6-二氟)TsD4-[(4'-Me.6'-OMe)-3陽吡啶基]苯基丙氨酸4-(2'-吡咬基)笨基丙氨酸-NH269HAibEGTL-a-Me-Phe(2，6-二氟)丁sD4-[(4'-Me-6'-OMe)-3-吡啶基]笨基丙氨酸Bip(2'-Me-4'-0Me)-NH270HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6陽二氟)TsD4-[(4'-Me-6'-OMe)-3-吡啶基]苯基丙氨酸4-(2'-甲基苯基)-3-吡啶基丙71HAibEGTL-a-Me陽Phe(2,6-二氟)TsDBip(2'-Et)4-(2'-乙基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH272HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-曱基)吡啶基]笨基丙氨酸4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸柳273HAibEGTL-ct-Me陽Phe(2,6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(4'-吡啶基)-笨基丙氨酸-NH274HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3'-變啉)笨基丙氨酸-NHziHAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3'-(2'-甲氧基)吡啶基)笨基丙氨酸-NH276HAibEGTL-a佳-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-笨基-3-吡啶基丙氨酸-NH277HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'陽OMe)4-(3'.5'-二甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NHj78HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-[(3'-氯-4'-氟)笨基]-3-吡啶基丙氨酸-NHj79HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3',4'-二曱氡基)苯基i-3-吡咬基丙氨酸-NH280HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-[(2'-乙基-4'-甲氧基)笨基)]-3-吡啶基丙氨酸-NH234<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>其它實施方案包括含有以下結構的經分離的多肽:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>SEQIDNO:157s其它實施方案包括含有序列Thr-Ser-Asp-Bip(2，-Et-4，-OH)-吡啶基丙氨酸(SEQIDNO:177)或Thr-Ser-Asp-Bip(2，-Et-4，-OH)吡咬基丙氨酸(SEQIDNO:179)的多肽，其中所述多肽結合并活化GLP-1受體。上述肽可還包含處于從氨基末端殘基起第二個殘基處的脯氨酸(例如a-曱基脯氨酸)、經取代的吡啶基丙氨酸(例如4-(2，-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸)及氨基末端的氨基曱酸酯。上述序列SEQIDNO:177或179可分別處于包含所述序列的肽的第七個、第八個、第九個及第十個殘基處。上述肽可還包含處于第2位的脯氨酸(例如a-曱基脯氨酸)。包含序列SEQIDNO:177的示范性肽為SEQIDNO:158的肽。包含序列SEQIDNO:179的示范性肽為SEQIDNO:157的肽。另一個實施方案為藥物組合物，其包含式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:l-179中至少一種的肽。另一個實施方案涉及藥物組合，其包含式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:l-179中任何一種的肽及至少一種選自以下的治療劑抗糖尿病劑、抗肥胖劑、抗高血壓劑、抗動脈粥樣硬化劑及降脂質劑。另一個實施方案涉及包含式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:l-179中任何一種的肽的藥物組合，其中抗糖尿病劑選自雙胍類、磺酰脲類、葡糖香酶抑制劑、PPARy激動劑、PPARa/y雙重激動劑、aP2抑制劑、DPP4抑制劑、SGLT-2抑制劑、胰島素增敏劑、人胰高血糖素樣肽-l(GLP-l)、GPR119調節(jié)劑、胰島素及美格列奈(meglitinide)。41另一個實施方案涉及包含式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:1-179中任何一種的肽的藥物組合，其中抗糖尿病劑選自二甲雙胍(metformin)、格列本脲(glyburide)、才各列美脲(glimepiride)、才各列處脲(glipyride)、格列吡。秦(glipizide)、氯磺丙脲(chlorpropamide)、格列齊特(gliclazide)、阿卡波糖(acarbose)、米格列醇(miglitol)、吡格列酮(pioglitazone)、曲格列酮(troglitazone)、羅格列酮(rosiglitazone)、莫格他峻(muraglitazar)、胰島素、Gl-262570、伊格列酮(isaglitazone)、JTT-501、NN-2344、L895645、YM-440、R-l19702、AJ9677、瑞格列奈(repaglinide)、那格列奈(nateglinide)、KADI129、AR-H039242、GW-409544、KRP297、AC2993、LY315902及NVP-DPP-728A。另一個實施方案涉及包含式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:l-179中任何一種的肽的藥物組合，其中抗肥胖劑選自CB-l拮抗劑(或反向激動劑)、MCHR-1拮抗劑、DGAT抑制劑、卩-3腎上腺素能激動劑、脂肪酶抑制劑、5-羥色胺(及多巴胺)再攝取抑制劑(reuptakeinhibitor)、曱狀腺受體(3化合物(thyroidreceptorbetacompound)及厭食劑(anorecticagent)。另一個實施方案涉及包含式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:l-179中任何一種的肽的藥物組合，其中抗肥胖劑選自奧利司他(orlistat)、ATL-962、AJ9677、L750355、CP331648、acomplia、MK-0364、SLV-319、西布曲明(sibutramine)、才乇p比酯(topiramate)、axokine、右S走苯丙胺(dcxamphetamine)、芬特明(phentermine)、苯丙醇胺(phenylpropanolamine)及馬p引口朱(mazindol)。另一個實施方案涉及包含式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:l-179中任何一種的肽的藥物組合，其中降脂質劑選自MTP抑制劑、膽固醇酯轉移蛋白、HMGCoA還原酶抑制劑、角鯊烯合成酶抑制劑、苯乙酸(fibricacid)衍生物、LDL受體活性上調劑、脂氧化酶(lipoxygenase)抑制劑及ACAT抑制劑。另一個實施方案涉及包含式I的經分離的多肽或舍有SEQIDNO:l-H9中任何一種的肽的藥物組合，其中降脂質劑選自普伐他汀(pravastatin)、洛^U也汀(lovastatin)、辛4戈^f也汀(simvastatin)、阿^M戈4也汀(atorvastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、尼伐他汀(nisvastatin)、維沙他汀(visastatin)、非諾貝特(fenofibrate)、吉非貝齊(gemfibrozil)、氯貝丁酯(clofibrate)、阿伐麥布(avasimibe)、TS-962、MD-700、CP-529414及LY295427。42另一個實施方案涉及治療或延緩以下疾病的進,艮或發(fā)作的方法糖尿病(diabetes)、糖尿病視網膜病(diabeticretinopathy),斗唐尿病神經病(diabeticneuropathy)、糖尿病腎病(diabeticnephropathy)、創(chuàng)傷愈合(woundhealing)、胰島素抵抗(insulinresistance)、高血糖癥(hyperglycemia)、高胰島素血癥(hyperinsuiinemia)、X綜合征(SyndromeX)、糖尿病并發(fā)癥(diabeticcomplication)、游離脂肪酸或甘油血液水平提高(elevatedbloodlevelsoffreefattyacidsorglycerol)、高月旨血癥(hyperlipidemia)、月巴胖癥(obesity)、高甘油三酉旨血癥(hypertriglyceridemia)、動脈粥樣硬化(atherosclerosis)或高血壓(hypertension),所述方法包括向需要治療的哺乳動物物種給藥治療有效量的式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:1-179中任何一種的肽。另一個實施方案涉及治療或延緩以下疾病的進展或發(fā)作的方法糖尿病、糖尿病視網膜病、糖尿病神經病、糖尿病腎病、創(chuàng)傷愈合、胰島素抵抗、高血糖癥、高胰島素血癥、X綜合征、糖尿病并發(fā)癥、游離脂肪酸或甘油血液水平提高、高脂血癥、肥胖癥、高甘油三酯血癥、動脈粥樣硬化或高血壓，所述方法包括同時或先后給藥治療有效量的一種或多種選自以下的治療劑及式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:1-179中任何一種的肽抗糖尿病劑、抗肥胖劑、抗高血壓劑、抗動脈粥樣硬化劑及降脂質劑。另一個實施方案涉及治療或延緩以下疾病的進展或發(fā)作的方法糖尿病、糖尿病視網膜病、糖尿病神經病、糖尿病腎病、創(chuàng)傷愈合、胰島素4氐抗、高血糖癥、高胰島素血癥、X綜合征、糖尿病并發(fā)癥、游離脂肪酸或甘油血液水平提高、高脂血癥、肥胖癥、高甘油三酯血癥、動脈粥樣硬化或高血壓，所述方法包括向需要治療的哺乳動物物種給藥治療有效量的上述藥物組合中的任何一種。本申請所述主題的另一個方面為所披露的肽作為放射性標記(radiolabel)在配體結合測定開發(fā)中的用途。例如，可使用放射性同位素125I來制備SEQIDNO:164的肽，且所得放射性標記的肽可用于開發(fā)結合測定?？商鎿Q地且出于相同的目的，可使用本領域技術人員已知的方法進行催化氚化來將SEQIDNO:164的肽轉化成放射性標記形式的SEQIDNO:158的肽。圖1顯示了在對ob/ob小鼠進行的ipGTT(腹膜內葡萄糖耐量試驗)中皮下注射化合物I對血糖的作用。圖2顯示了在對ob/ob小鼠進行的ipGTT中皮下注射化合物I對血漿胰島素的作用。圖3顯示了在對ob/ob小鼠進行的ipGTT中皮下注射SEQIDNO:9的化合物對血糖的作用。圖4顯示了在對ob/ob小鼠進行的ipGTT中皮下注射SEQIDNO:9的化合物對血漿胰島素的作用。圖5顯示了在對ob/ob小鼠進行的ipGTT中皮下注射SEQIDNO:118的化合物對血糖的作用。圖6顯示了在對ob/ob小鼠進行的ipGTT中皮下注射SEQIDNO:151的化合物對血糖的作用。圖7顯示了在對ob/ob小鼠進行的ipGTT中皮下注射SEQIDNO:151的化合物對血漿胰島素的作用。圖8顯示了在對ob/ob小鼠進行的ipGTT中皮下注射SEQIDNO:158的化合物對血糖的作用。圖9顯示了在對ob/ob小鼠進行的ipGTT中皮下注射SEQIDNO:158的化合物對血漿胰島素的作用。具體實施例方式本申請所述合成分離的肽作為期望的GLP-1受體激動劑或部分激動劑而能夠調節(jié)GLP-1受體。這些合成的肽相對于GLP-1表現(xiàn)出相似的體內功效和卓越的藥物動力學性質，包括餐后血糖的降低和血漿胰島素水平的伴隨提高，因此使它們成為用于皮下制劑、肺制劑、鼻制劑、口腔制劑或持續(xù)釋放制劑的理想治療候選對象。本申請描述和要求保護的主題包括經分離的多肽，其包含式I的序列Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaaio_Xaai)式I其中xaal為包含咪唑環(huán)基團或噻唑環(huán)基團的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如組氨酸或噻唑基丙氨酸；其中所述氨基酸的任何碳原子任選經氫、44一個或多個烷基或一個或多個卣素取代；其中所述氨基酸的游離氨基任選經氫、羥基、烷基、?；⒈郊柞；?、烷氧基、烷基氧基羰基(例如曱氧羰基)、芳基氧基羰基、芳烷基氧基羰基、雜環(huán)基氧基羰基、雜芳基烷基氧基羰基、烷基氨曱酰基、芳基氨曱酰基、芳烷基氨曱?；?、雜環(huán)基磺?；?、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳基烷基磺酰基、雜芳基烷基磺?；螂s芳基磺酰基取代；且其中Xaal的氨基任選不存在，使得Xw為組氨酸的脫氨基酸或噻唑基丙氨酸的脫氨基酸，其中任何碳原子任選經烷基、卣素或羥基取代；Xw為選自以下的天然存在或非天然存在的氨基酸a-氨基-異丁酸、L-丙氨酸、D-丙氨酸、N-曱基-L-丙氨酸、N-曱基-D-丙氨酸、L-脯氨酸、(S)-a-甲基-脯氨酸、L-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(Azt)、L-a-曱基-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(a-Me-Azt)、L-纈氨酸及(R)-或(S)-異纈氨酸，且其中所述氨基酸的碳原子任選經烷基或卣素中的一個或多個取代；Xaa3為含有包含羧酸基團的氨基酸側鏈的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如天冬氨酸或谷氨酸；且其中所述氨基酸的任何碳原子任選經烷基或卣素中的一個或多個取代；X^為甘氨酸；X^為選自以下的天然存在或非天然存在的氨基酸L-蘇氨酸、L-別蘇氨酸、L-絲氨酸、L-正領氨酸及L-正亮氨酸；且其中所述氨基酸的任何碳原子任選經烷基或卣素中的一個或多個取代；X^為包含經二取代的a碳的天然存在或非天然存在的氨基酸；其中所述氨基酸的側鏈之一含有芳環(huán)或雜芳環(huán)，例如a-曱基-苯基丙氨酸、a-曱基-2-氟笨基丙氨酸或a-曱基-2,6-二氟苯基丙氨酸，其中所述氨基酸的任何碳原子任選經一個或多個烷基取代；且其中所述氨基酸的任何碳原子任選經一個或多個卣素取代；Xaa7為包含經羥基取代的氨基酸側鏈的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如L-蘇氨酸或L-別蘇氨酸；其中所述氨基酸的任何碳原子任選經烷基或卣素中的一個或多個取代；X^為選自以下的天然存在或非天然存在的氨基酸L-絲氨酸、L-組氨酸及L-天冬酰胺；其中所述氨基酸的一個或多個碳原子任選經烷基或鹵素中的一個或多個取代；45Xaa9為含有包含羧酸基團的氨基酸側鏈的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如L-天冬氨酸或L-谷氨酸；其中所述氨基酸的一個或多個碳原子任選經烷基或卣素中的一個或多個取代；Xaa,o為式II、III或IV的天然存在或非天然存在的氨基酸其中R3、R4及R6各自選自氬、烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、鹵素、羥基、羥基烷基、氰基、氨基、氨基烷基、烷氧基、芳基氧基、羧基、羧基烷基、羧酰胺基團、經取代的羧酰胺基團、烷基酯基團、芳基酯基團、烷基磺酰基及芳基磺?；磺移渲蠿,、X2、X3、X4及Xs各自為C或N，其限制條件為X,、X2、X3、X4及Xs中的一個為N;Xaall為式IIa、IIIa或IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸式IV46O式IIa式IIIa其中所述氨基酸的C末端羰基碳與氮連接形成羧酰胺(NH2)、烷基羧酰胺(NHR,)或二烷基羧酰胺(NR!R2);其中R,及R2各自為烷基或芳基烷基；其中Rh、R4a及R6a各自選自氫、烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、鹵素、羥基、羥基烷基、氰基、氨基、氨基烷基、烷氧基、芳基氧基、羧基、羧基烷基、羧酰胺基團、經取代的羧酰胺基團、烷基酯基團、芳基酯基團、烷基磺?；胺蓟酋；?；其中R7選自氫、曱基及乙基；且其中X,、X2、X3、X4及Xs各自為C或N，其限制條件為X,、X2、X3、X^及X5中的一個為N;其中當Xa滿為式II的氨基酸時，X^不是式IIa的氨基酸。優(yōu)選的實施方案為包含序列Thr-Ser-Asp-Bip(2，-Et-4，-OH)J比啶基丙氨酸(SEQIDNO:177)或Thr誦Ser-Asp-Bip(2，-Et-4,-OH)-p比啶基丙氨酸(SEQIDNO:179)的多肽，其中所述多肽結合并活化GLP-1受體。上述肽可還包含處于從氨基末端殘基起第二個殘基處的脯氨酸(例如a-曱基脯氨酸)、經取代的吡啶基丙氨酸(例如4-(2，-甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸)及氨基末端的氨基曱酸酯。優(yōu)選的肽包括SEQIDNO:157及158的肽，且這些肽可包括在藥物組合物及藥物組合中。除非在特定的實例中另有限制，本申請所提供的定義適用于但不限于47本說明書通篇所使用的術語。氨基酸和肽化學領域的技術人員知道氨基酸包括以下通式所表示的化合物其中R和R，如本申請所描述。除非另有說明，本申請單獨使用或作為另一個基團的部分來使用的術語"氨基酸"包括但不限于與稱為"a"碳的同一個碳相連的氨基和羧基，其中R和/或R，可以是天然或非天然的側鏈，包括氫。"a"碳的絕對"S"構型通常稱為"L"或"天然"構型。在R和R，取代基都等于氫的情況下，所述氨基酸為甘氨酸，并且不是手性的。除非另有說明，本申請單獨使用或作為另一個基團的部分來使用的術語"氨基醇"包括但不限于天然或非天然的氨基酸，其中羧基被代替(還原)為甲醇，例如纈氨醇(valinol)、甘氨醇(glycinol)、丙氨醇(alaninol)、芳基丙氨醇和雜芳基丙氨醇。除非另有說明，本申請單獨使用或作為另一個基團的部分來使用的術語"烷基"包括但不限于在正鏈中含有1至40個碳優(yōu)選1至20個碳更優(yōu)選1至8個碳的直鏈和支鏈烴，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、異己基、庚基、4,4-二曱基戊基、辛基、2,2，4-三曱基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基友它們的各種支鏈異構體等。此外，本申請所定義的烷基可任選在任何可用的碳原子上被一個或多個通常與所述鏈相連的官能團取代，以形成諸如三氟曱基、3-羥基己基、2-羧基丙基、2-氟乙基、羧基曱基、氰基丁基等那樣的烷基，所述官能團例如為但不限于烷基、芳基、烯基、炔基、羥基、芳基烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烷氧基、芳基烷基氧基、雜芳基氧基、雜芳基烷基氧基、烷?；?、鹵素、羥基、硫代、硝基、氰基、羧基、羰基()、氨甲酰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基酰氨基、雜芳基酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、膦?；?phosphonic)、次膦?；?phosphinic)、磺?；?sulfonic),亞磺酰氨基、卣代芳基、CF3、OCHF2、OCF3、芳基氧基、雜芳H;N一:—RR'R一fNH:R'L-或S-a-lL&酸(如果R=H)D-或R-a-氛基酸(如果R=H)48基、環(huán)烷基烷氧基烷基、環(huán)雜烷基等。除非另有說明，本申請單獨使用或作為另一個基團的部分來使用的術語"烯基，，包括但不限于在正鏈中含有2至40個碳及一個或多個雙鍵優(yōu)選2至20個碳及一至三個雙鍵更優(yōu)選2至8個碳及一至兩個雙鍵的直鏈和支鏈烴，如以上就"烷基"所描述，任何碳可任選被取代。除非另有說明，本申請單獨使用或作為另一個基團的部分來使用的術語"炔基，，包括但不限于在正鏈中含有2至40個碳及一個或多個巻鍵優(yōu)選2至20個碳及一至三個畚鍵更優(yōu)選2至8個碳及一至兩個畚鍵的直鏈和直鏈烴，如以上就"烷基"所描述，任何碳可任選被取代。除非另有說明，本申請單獨使用或作為另一個基團的部分來使用的術語"環(huán)烷基"包括但不限于含有1至3個環(huán)(附加或稠合)的飽和或部分不飽和(含有1或2個雙鍵)的環(huán)烴，包括單環(huán)烷基、二環(huán)烷基和三環(huán)烷基，含有總共3至30個成環(huán)碳原子，優(yōu)選4至7個碳形成一個環(huán)；所述環(huán)烷基可與就芳基所描述的1個芳族環(huán)稠合，所述環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)癸基、環(huán)十二烷基、環(huán)己烯基、任何所述基團可任選在任何可用的碳原子上被一個或多個選自以下的基團取代氫、卣素、卣代烷基、烷基、卣代烷基、烷氧基、由代烷氧基、蜂基、三氟曱基、三氟曱氧基、炔基、環(huán)烷基烷基、芴基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基氧基、芳基氧基烷基、芳基烷氧基、芳基硫基、芳基偶氮基、雜芳基烷基、雜芳基烯基、雜芳基雜芳基、雜芳基氧基、羥基、硝基、氧代、氰基、羧基、羰基()、氨曱酰基、氨基、取代的氨基(其中所述氨基包括1或2個取代基，所述取代基為烷基、芳基或在定義中提及的任何其它芳基化合物)、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、膦酰基、次膦酰基、磺?；喕酋０被?、巰基、烷基硫基、芳基硫基、雜芳基硫基、芳基硫基烷基、烷氧基芳基硫基、烷基羰基、芳基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、芳基亞磺?；⒎蓟鶃喕酋；榛⒎蓟酋；被蚍蓟酋０被驶蛞陨狭谐龅娜魏瓮榛〈?。本申請單獨使用或作為另一個基團的部分來使用的術語"芳基，，表示但不限于在環(huán)部分中含有6至10個碳(例如苯基或萘基)的單環(huán)和二環(huán)芳族基團，并且可任選包括l至3個與"芳基"稠合的其它環(huán)(例如芳基、環(huán)烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán))，以及可任選在任何可用的碳原子上被一個或多個選自以下的基團取代氫、烷基、卣素、囟代烷基、烷氧基、卣代烷氧基、烯基、三氟曱基、三氟曱氧基、炔基、環(huán)烷基烷基、芴基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基氧基、芳基氧基烷基、芳基烷氧基、芳基硫基、芳基偶氮基、雜芳基烷基、雜芳基烯基、雜芳基氧基、雜芳基烷基氧基、雜芳基烷基氧基烷基、羥基、硝基、氧代、氰基、氨基、取代的氨基(其中所述氨基包括1或2個取代基，所述取代基為烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、雜芳基或芳基或在定義中提及的任何其它芳基化合物)、巰基、烷基硫基、芳基硫基、雜芳基硫基、芳基硫基烷基、烷氧基芳基硫基、烷基羰基、芳基羰基、烷基氨基羰基、環(huán)烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、雜芳基氨基羰基、雜芳基烷基氨基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、芳基亞磺?；⒎蓟鶃喕酋；榛?、芳基磺?；被蚍蓟酋０被驶蛞陨狭谐龅娜魏瓮榛〈?。本申請單獨使用或者作為另一個基團的部分來使用的術語"芳基烷基"包括但不限于具有一個芳基取代基的如上定義的烷基，例如芐基、苯乙基或萘基丙基，其中所述芳基和/或烷基可任選如上定義被取代。本申請單獨使用或作為另一個基團的部分來使用的術語"烷氧基"、"芳基氧基"、"雜芳基氧基"、"芳基烷基氧基"或"雜芳基烷基氧基，，包括但不限于通過氧原子連接的如上定義的烷基或芳基。本申請所使用的術語"雜環(huán)"、"雜環(huán)基，，或"雜環(huán)的"表示但不限于未取代或取代的穩(wěn)定的4-、5-、6-或7-元單環(huán)環(huán)系，其可以是飽和或不飽和的，以及由碳原子和一至四個選自氮、硫、氧和/或SO或S02基團的雜原子組成，其中氮和硫雜原子可任選被氧化，以及氮雜原子可任選被季銨化?？稍诖俪煞€(wěn)定結構形成的任何雜原子或碳原子上連接雜環(huán)。所述雜環(huán)基團的實例包括但不限于四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、氧代吡咯烷基、氧代哌嗪基、氧代哌啶基和噁二唑基。雜環(huán)基團可任選被一個或多個官能團(例如就"烷基"或"芳基"所描述的官能團)取代。本申請單獨或作為另一個基團的部分來使用的術語"雜環(huán)烷基"表示但不限于具有雜環(huán)烷基取代基的如上定義的烷基，其中所述"雜環(huán)"和/或烷基可任選如上定義來取代。本申請所使用的術語"雜芳基"表示但不限于含有一個或多個選自氮、硫、氧和/或SO或S02基團的雜原子的5-、6-或7-元芳族雜環(huán)。所述環(huán)可與另一個芳基環(huán)或雜芳基環(huán)稠合。并且包括可能的N-氧化物。所述雜芳基的實例包括但不限于呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、異噁唑基、。惡唑基、咪唑基等。雜芳基可任選被一個或多個通常與所述鏈相連的官能團(例如就"烷基"或"芳基"所描述的官能團)取代。本申請單獨使用或作為另一個基團的部分來使用的術語"雜芳基烷基，，表示但不限于具有雜芳基取代基的如上定義的烷基，其中所述雜芳基和/或烷基可任選如上定義來取代。術語"受體調節(jié)劑，，表示作用于GLP-1受體以改變GLP-1受體調節(jié)下游信號傳導事件的能力的化合物。受體調節(jié)劑的實例包括標準藥理學教科書(例長口E.M.RossandT.RKenakininGoodmanandGilman，sThePharmacologicalBasisofTherapeutics,10thedition(2001)McGrawHill,Chapter2,pp.31-43)中所定義的激動劑、拮抗劑、部分激動劑、反向激動劑、變構拮抗劑和變構增效劑。比々貝二的含義。術語"糖尿病和相關疾病或相關病癥，，表示但不限于II型糖尿病、I型糖尿病、葡萄糖耐量降低、肥胖癥、高血糖癥、X綜合征、代謝障礙綜合征、糖尿病并發(fā)癥以及高胰島素血癥。本申請所使用的術語"調脂"劑或"降脂，，劑表示但不限于具有以下機制的藥物降低LDL和/或提高HDL和/或降低甘油三酯和/或降低總膽固醇和/或治療脂質紊亂的其它已知機制。本申請所述治療劑的給藥方法包括但不限于給藥治療有效量的所述治療劑。本申請所使用的術語"治療有效量，，表示但不限于治療劑的量，其通過給藥本申請描述的GLP-1受體調節(jié)劑來治療或預防可治療的病癥。所述量足以顯示出可檢測的治療作用或預防作用或改善作用。所述作用可包括例如但不限于對本申請所列病癥的治療作用或預防作用。用于受試者的精確有效量取決于受試者的大小和健康、所治療病癥的性質和程度、治療醫(yī)生的建議以及選擇用于給藥的療法或療法的組合。因而，預先說明確切的有效量是沒有用的。如所提供的表格及附圖顯示的那樣，本申請披露及要求權利的肽在降糖效力模型(Ob/Ob小鼠模型)中在接觸足夠的情況下展示出卓越的功效及卓越的藥動學(通過對狗進行皮下注射來測量)。SEQIDNO:133化合物/SEQIDNO:對ob/ob小鼠的效力在ipGTT期間在ob/ob小鼠體內的曝露/劑量(nMxh/nmol/kg)在狗體內的膝露*(以67fig/kg進行皮下注射)化合物IED50=50nmol/kg2289nMxh9ED50=5nmol/kg18452nMxhmED50=2.5nmol/kg4.44020nMxh151ED5tHnniol/kg161566nMxh158ED5o=2nmol/kg111467nMxh*化合物I及SEQIDNO:118的化合物在丙二醇/pH7.4磷酸鹽緩沖液(l:l)中給藥；SEQIDNO:9、151及158的化合物在0.2MTris緩沖液(pH8.0)SEQIDNO:139SEQ.IDNO:151中給藥。表2化合物/SEQID對ob/ob小鼠的效力腹膜內葡萄糖耐量試驗中皮下注射化合物后在狗體內的曝露***(以No.的血糖AUC的減少百分數(shù)*67ng/kg進行皮下注射)化合物1-15%(p=0.247,NS")(10隨l/kg)89nMxh-68%(p<0.000)(10nmol/kg)1230nMxh118-70%(p<0.001)(10隱l/kg)4020nMxh130-72%(p<0.0001)(10nmol/kg)541nMxh-54%(p<0.0001)(10nmol/kg)940nMxh40-73%(p<0.00))(10,1/kg)283nMxh120-68%(p<0.0001)(10nmol/kg)1116nMxh139-63%(p<0.01)(10nmol/kg)訓nMxh119-61%(p<0.0001)(5睡l/kg)1257nMxh150-38%(p<0.05)(10nmol/kg)979nMxh承AUO曲線下面積。就每只動物而言，使用空腹血漿葡萄糖值作為基線來計算AUC值。相對于同一研究中載體處置組的AUC來計算AUC的變化百分數(shù)。通過以下方法來確定所給出的p值利用方差分析(ANOVA)來與載體處置組進行比較，隨后進行Fisher因果檢驗(Fisher，spost-hoctest)。"NS-在統(tǒng)計學上沒有顯著性。"W合藥載體為丙二醇/pH7.4磷酸鹽緩沖液(1:1)。表3a及3b為在表達人或小鼠GLP-1受體的CHO細胞中刺激cAMP合成的效力及功效。表3a.人GLP-1受體EC5Q平均值(nM)E,平均值(M)Hill平均值SEQIDNO:158的化合物0.018±0細跳8±6.71.5n=10SEQ1DN0:157的化合物0.02699.41.9n=lSEQIDNO:164的化合物0.01097.21.5n=lSEQIDN0:I73(或174)的化合物*0.01895.62.6n=lSEQ1DN0:174(或173)的化合物*0.024103.72.7n=lSEQ1DN0:175(或176)的化合物*0.030105.32.8n=lSEQ1DN0:176(或175)的化合物*0.03095.83.1n=lGLP-10.010±0.002108.5±5.81.6」n=10表3b.小鼠GLP-1受體ECs。平均值(nM)E咖平均值(V。)Hill平均值SEQIDNO:158的化合物0.191±0.058跳9±7.21.5n=10SEQIDNO:157的化合物0.046106.42.9n=lSEQIDNO:164的化合物0.055103.02.7n=lSEQIDNO:I73(或174)的化合物*0.11499.71.4n=lSEQ1DN0:174(或173)的化合物*0.273105.02.1n=lSEQIDNO:175(或176)的化合物*0細100.22.7n=lSEQIDNO:176(或175)的化合物*0.126104.71.9n=lGLP-10.041±0.015106.4±14.51.9」n=10*就表3a及3b而言，SEQIDNO:173及SEQIDNO:174的化合物及SEQIDNCi:175及SEQIDNO:176的化合物被制備成非對映異構體的混合物，且通過HPLC分離為異構體A及B(實施例31)。3-(lH-咪唑-4-基)-2-曱氧基丙54酰基(IMeOp)Xaa,基團的絕對構型尚未確定。本申請所描述的肽及其類似物可通過化學合成利用各種固相技術來制備，所述固相技術參見例如G.BaranyandR.B.Memfield，"ThePeptides:Analysis,Synthesis,Biology";Volume2-"SpecialMethodsinPeptideSynthesis,PartA，，，pp.3-284,E.GrossandJ.Meienhofer，Eds.，AcademicPress,NewYork,1980和J.M.StewartandJ.D.Young,"Solid-PhasePeptideSynthesis",2ndEd.，PierceChemicalCo.，Rockford,IL，1984。本發(fā)明所使用的期望策略基于Fmoc(9-芴基曱氧羰基)基團用于a-氨基的臨時保護同時叔丁基用于氨基酸側鏈的臨時保護(參見例如E.AthertonandR.C.Sheppard，"TheFluorenylmethoxycarbonylAminoProtectingGroup",in"ThePeptides:Analysis:Synthesis,Biology";Volume9-"SpecialMethodsinPeptideSynthesis,PartC"，pp.1-38，S.UndenfriendandJ.Meienhofer,Eds.,AcademicPress,SanDiego，1987)。本發(fā)明的肽可在不溶性聚合物載體(support)(也稱為"樹脂，，)上從所述肽的C末端開始以逐步的方式來合成。通過酰胺鍵或酯鍵的形成來將所述肽的C末端氨基酸懸掛(append)在樹脂上，由此開始合成。這使最終釋放的所得到的肽分別為C末端酰胺或羧酸?？商鎿Q地，在存在C末端氨基醇的情況下，可如本申請描述的那樣，使C末端殘基與2-曱氧基-4-烷氧基芐醇樹脂(SASRINtm，BachemBioscience,Inc.,KingofPrussia,PA)相連，且在完成肽序列組裝后，以THF中的UBH4釋放所得到的肽(參見J.M.StewartandJ.D.Young,同上，p.92)。合成所使用的C末端氨基酸和所有其它氨基酸都需要使它們的a-氨基和側鏈官能團(如果存在)有差別地被保護，從而可在合成過程中選擇性地除去a-氨基保護基。氨基酸的偶聯(lián)通過以下方法來進行活化其羧基使之成為活性酯，以及使其與懸掛在樹脂上的N末端氨基酸的解阻的(unblocked)(x-氨基反應。重復上述順序的氨基脫保護和偶聯(lián)，直到組裝出整個肽序列。然后從樹脂釋放肽，同時進行側鏈官能團的脫保護，這通常在合適清除劑的存在下進行，以限制副反應。所得到的肽最后通過反相HPLC來純化。所需要的作為前體的肽基-樹脂向最終肽的合成利用市售的交聯(lián)聚苯乙》希聚合^7才對月旨(Novabiochem,SanDiego,CA和AppliedBiosystems，F(xiàn)osterCity，CA)。對于C末端羧酰胺，優(yōu)選的固體載體為4-(2'，4，-二曱氧基苯基-Fmoc-氨基曱基)-苯氧基乙?；?對曱基二苯曱胺樹脂(Rink酰胺MBHA樹脂)、9-Fmoc-氨基-卩占噸-3-基氧基-Merrifield樹脂(Sieber酰胺樹脂)和4-(9-Fmoc)氨基曱基-3,5-二曱氧基苯氧基)戊?；?氨基曱基-Merrifidd樹脂(PAL樹脂)。第一氨基酸和隨后氨基酸的偶聯(lián)可利用HOBT或HOAT活性酯來實現(xiàn)，所述HOBT或HOAT活性酯分別從DIC/HOBT、HBTU/HOBT、BOP或PyBOP來制備，或從DIC/HOAT或HATU/HOAT來制備。對于受保護的肽片段，優(yōu)選的固體載體為2-氯三苯曱基氯樹脂和9-Fmoc-氨基-0占噸-3-基氧基-Merrifield樹脂(Sieber酰胺樹脂)。將第一氨基酸加載到2-氯三苯曱基氯樹脂上，這通過以下方法來最好地實現(xiàn)使受Fmoc保護的氨基酸與樹脂在二氯甲烷和D正A中反應。如果需要，可加入少量DMF以促進氨基酸的溶解。本申請所述肽類似物的合成可利用肽合成儀來進行，所述肽合成儀例如為AdvancedChemtechMultiplePeptideSynthesizer(MPS396)或AppliedBiosystemsInc.肽合成儀(ABI433a)。如果使用MPS396，那么可同時合成至多96個肽。如果使用ABI433a合成儀，那么可連續(xù)合成不同的肽。在兩種情況下都利用本申請所描述的Fmoc/叔丁基保護策略來進行逐步的固相肽合成。以兩種方法中的一種將X^o位及Xaan位的非天然非市售氨基酸引入到肽鏈中。在第一種方法中，使用適當?shù)挠袡C合成程序在溶液中制備經Boc或Fmoc保護的非天然氨基酸。隨后，將所得衍生物用于肽的逐步合成中?？商鎿Q地，使用合成有機化學程序，直接將所需非天然氨基酸構建于樹脂上。當需要在Xaa6位或任何其它Xaa位引入非天然的非市售的氨基酸時，在溶液中合成所需的經Fmoc保護的非天然氨基酸。隨后，將上述衍生物用于逐步固相肽合成中。以下顯示了有用的Fmoc-氨基酸衍生物。在固相合成中使用的經正交保護的M酸的實例56Fmoc—NH'But,OButFmoc—NH-OHFmoc—NHFmoc一NH"—But-OHFmoc匿Asp(Bu')Fmoc-Glu(Bijt)Fmoc匿Se「(B^Fmoc.Th卜(But)在固相合成中使用的經保護的氨基酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage57</formula>Fmoc匿Aib-a-氨基異丁酸-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage57</formula>Fmoc-Nle-正亮氨酸-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage57</formula>Fmoc-L-NV3-正纈氨酸-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage57</formula>式IV各種肽的肽基-樹脂前體可利用任何標準操作來裂解或脫保護(參見例如D.S,Kingetal,Int,J.PeptideProteinRes.36，1990，255-266)。在期望的方<formula>formulaseeoriginaldocumentpage57</formula>法中，在水的存在下使用TFA以及TIS作為清除劑。通常，將肽基-樹脂在室溫在TFA/水/TIS(94:3:3，v:v:v;lmL/100mg肽基-樹脂)中攪拌2-6小時。然后過濾掉用過的樹脂，并且對TFA溶液進行濃縮或減壓干燥。所得到的粗肽用Et20沉淀和洗滌，或直接再溶于DMSO或50%乙酸水溶液中，以通過制備性HPLC來純化。可利用制備性HPLC(例如在WatersModel4000或ShimadzuModelLC-8A液相色譜上)進行純化來得到具有期望純度的肽。將粗肽的溶液注射到YMCS5ODS(20xl00mm)柱中，并且用線性梯度的MeCN水溶液(MeCN和水都用0.1。/。TFA緩沖)洗脫，流速為14-20mL/min,洗脫液通過在220nm的IJV吸收來監(jiān)測。純化的肽的結構可通過電噴霧MS分析來確證。在本申請的實施例及其它地方使用以下縮寫Ph-苯基i-Bi^異丁基i-PF異丙基Me-曱基Et-乙基Pr二正丙基Bi^正丁基t-Bu二7k丁基Trt二三苯曱基TMS二三曱基硅基TIS二三異丙基曱硅烷Et20^乙醚HOAc或AcOH-乙酸MeCN或AcCN^乙腈DMF二N，N-二曱基曱酰胺EtOAc二乙酸乙酯TFA^三氟乙酸TFE-a，a，a-三氟乙面孚EbNH-二乙胺NMIVNN-曱基嗎啉NMP=N-曱基吡咯烷酮DOV^二氯甲烷n-BuLi二正丁基鋰Pd/C4巴/碳PtO^氧化鉑TEA二三乙胺min:分鐘h或&=小時L:升mL或m卜毫升g二克mg:毫克mol:摩爾mmol-毫摩爾meq^毫當量rt或RT^室溫sat或sat，d-飽禾口的aq尸水溶液mp-溶點Bip-聯(lián)苯基丙氨酸LiBHr硼氫化鋰Mg—美BOP試劑-苯并三唑-l-基氧基-三(二曱基氨基)-鎮(zhèn)六氟磷酸鹽(Castro試PyBOP試劑=苯并三唑-1-基氧基-三吡咯烷基鎮(zhèn)六氟磷酸鹽HBTl^2-(lH-苯并三唑-l-基)-l,l,3，3-四曱基鑠六氟磷酸鹽HATLNO-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-l，l，3，3-四曱基銀六氟磷酸鹽HCTU二2-(6-氯-lH-苯并三唑-l-基)-l,l，3,3-四曱基銀六氟磷酸鹽TFFH=W曱基-氟曱脒錨六氟磷酸鹽DMAP-4-(二曱基氨基)吡啶DIEA二二異丙基乙胺EDA03-乙基-3，-(二甲基氨基)丙基-碳二亞胺鹽酸鹽(或l-[(3-(二曱基)氨基)丙基])-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)Fmoc或FM(X^芴基曱氧羰基Boc或BOC二叔丁氧羰基Cbz:千氧羰基HOBT或HOBT,H20-l-羥基苯并三唑水合物Cl-HOBt-6-氯-苯并三唑HOAT^l-羥基-7-氮雜苯并三唑丁0>薄層色譜HPLC二高效液相色語LC/MS=高效液相色譜/質譜MS或MassSpec二質譜NMR^核》茲共振Sc或SO皮下IP或ip-腹膜內GTT:葡萄糖耐量試驗肽化學領域的技術人員應該知道，氨基酸存在D與L異構體，且本申請披露及要求權利的主題(包括在序列表中提供的主題)包括使用在本申請所述肽的合成中所引入氨基酸的一種異構體或異構體的混合物。合成式IVa的氨基酸的通用程序可通過幾種方法來制備經保護的式IVa的氨基酸。例如(流程A)，可通過標準文獻方法經由鈀介導的催化來使碘溴-雜環(huán)i(其中XfN)與硼酸偶聯(lián)，從而提供芳基雜環(huán)溴化物ii，通過將其鋰化及與酰化劑(諸如二曱基曱酰胺)反應來提供醛iii。通過硼氫化鈉或類似試劑將醛還原成醇iv,且通過在48%氪淡酸中使iv長時間回流來制備相應的溴化物v。按照()，I)onnell(TetrahedronLetters398775(1998))的方法，使用手性催化劑以v使2-(二苯基亞曱基氨基)乙酸叔丁酯發(fā)生烷基化，產生手性酯vi，此后用強無水酸使其脫保護并用Fmoc-Cl處理，提供主要為一種手性形式的Fmoc叔60丁酯vii。由常用有機溶劑中使vii重結晶，提供對映異構體過量〉95。/。的viii。使用強無水來酸除去酯，提供式IVa的化合物。可替換地，式IVa的化合物可通過以下方法來制備對甲基雜環(huán)ix進行自由基誘導的溴化(流程B)，得到溴曱基雜環(huán)x。如本申請描述的那樣，通過O，Donnell的方法對x進行烷基化，然后進行類似的重結晶，產生高度對映異構體過量的手性酯xiii。如流程A中描述的那樣進行硼酸偶聯(lián)，產生式IVa的化合物。流程Aa)R3aR6aC6H3B(OH)2,Pd(Pli3P)4，曱苯/100/。Na，CO3b)s-BuLi,DMF/甲苯c)NaBK4/MeOHd)48%HBr,回流e)PhC=NCH2C02tBu，手性催化刑.2-叔丁基亞氨基-2-二乙氨基-!,3-二曱基-全氫-，3.2-二氮雜磷雜環(huán)己烯/丁邵f)i.15°,。檸檬酸ii.FmocCl,Na2C03/THF-H20g)重結晶h)TFA流程B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>式IVaa)NBS,AIBN/CCI4b)}^=忖012<:02氾11,手性催化劑，2-叔丁基亞氨基-2-二乙氨基-1,3-二甲基-全氬-1,312-二氮雜磷雜環(huán)己烯/THFc)i.15%檸檬酸ii.FmocCl,Na，C03層-H，Od)重結晶e)R3aR6aC6H3B(OH)2,Pd(Ph3PW曱笨-100/。Na2CO3t，fFA可通過用NBS處理，由羥基雜環(huán)xiv制備化合物ix(流程C)t流程C<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>合成中間體ix的可選擇方法使用vx即3-碘-丙氨酸曱酯及i通過鋅-銅偶聯(lián)來合成(流程D)。流程D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>a)Zn-Cu(Ph3P)2PdCl2-笨，DMA芳基嘧啶基曱基溴化物xxiii(X2和X3=N且X,和X^CR4a)可由芳基曱腈xv來制備(流程E)。流程E<formula>formulaseeoriginaldocumentpage63</formula>由xv通過用鹽酸羥胺處理所述腈來制備羥基。密啶xvi。對xvi進行氫化，得到嘧口定xvii。使xvii與烯醇亞甲基丙二酸酉旨(enolmethylenemalonate)縮合，產生嘧咬xix,用磷酰氯使xix氯化，得到xx。經由催化氫化來脫卣，產生xxi，然后用DiBAl還原，提供醇xxii。用磷酰溴處理所述醇，得到不穩(wěn)定淡化物xxiii,其必須立即如方案A中那樣來使用，提供經保護的氨基酸vi。通過Kapadia，J.Org.Chem.661卯3(2001)的方法由。惡唑烷xxiv制備式IVa的化合物(R產Me)(流程F)。因此，使用二(三曱基硅基)氨基鉀(potassiumhexamethyldisilazide)或其它強堿以v使xxiv發(fā)生烷基化來提供xxv。用強酸對xxv進行水解，隨后對所述胺進行保護(用Fmoc-Cl或Fmoc-OSu等)，得到式IVa型化合物。流程Fi、R3,丫」J、，，、/、XXIV、oXXV-X3x2么式IVa63以下實施例說明了本申請描述和要求保護的發(fā)明的各種方法及具體實施方案。本領域技術人員應該理解的是，這些實施例不會限制本發(fā)明的范圍，而是用于引導本領域技術人員實施本發(fā)明的實施方案。本申請披露的內容及權利要求書預期并涵蓋其它實施方案。實施例1肽的同時固相肽合成使用以下手動程序以分批模式制備含有X^o位及Xaan位的氨基酸的二肽基樹脂，隨后在MPS-396肽合成儀上利用自動同時合成方案來連續(xù)延長肽鏈。在上述通用實驗方法及實施例10-19中描述了在手動偶聯(lián)中^f吏用的經N-a-Fmoc保護的聯(lián)苯基丙氨酸或苯基-雜芳基-丙氨酸衍生物的合成。通過用DMF(4xl0mL/g,5min)洗滌，使量足以合成若干肽類似物的9-Fmoc-氨基卩占噸-3-基氧基-Merrifield樹脂(Sieber酰胺樹脂；載量為0.5至0.7mmol/g)溶脹。隨后，以DMF中的20%哌啶處理兩次(各自分別5min及15min),由此除去Fmoc基團(10mL/g)。用DMF(4xl0mL/g)及NMP(4xl0mL/g)洗滌樹脂。將Fmoc-L-4-(2，-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-OH(HCl鹽)(U當量)(或由式IVa表示的任何其它氨基酸)、PyBOP(l.l當量)及DIEA(3.3當量)在NMP中的0.5M溶液添加至樹脂中。隨后，振蕩或渦漩樹脂16-24小時。使用定性茚三酮測試來監(jiān)測偶聯(lián)完成。抽干樹脂，用NMP(3xl0mL/g)及DMF(3xl0mL/g)洗滌，并用DCM中的10%乙酸酐處理90min(10mL/g)。在DCM洗滌(4xl0mL/g)后，接著進行DIC/HOAt介導的第二次手動偶聯(lián)循環(huán)，以用DMF中的20%哌啶除去Fmoc基團為起始，且在偶聯(lián)步驟中使用如式II所表示的經Fmoc保護的聯(lián)苯基丙氨酸類似物。此合成流程產生所需經Fmoc保護的二肽基-Sieber酰胺樹脂。隨后，將合成一組經設計的類似物所需的上述二肽基-樹脂以下列方式用于每回合多達96種肽的自動MPS合成中。將二肽基-樹脂于二氯曱烷/DMF(60:40)中的懸浮液加載到AdvancedChemTechMPS396合成儀的96孔反應器中，體積相當于每反應器孔0.01-0.025mmol(20-50mg)樹脂。將反應器置于儀器上并抽干。接著，用DMF(0.5-1.0mL，3x2min)洗滌各孔，且如預先編程的序列合成表所確定的那樣，使各孔經歷組裝各個肽序列所需次數(shù)的自動偶聯(lián)循環(huán)。以下描述了用于96種化合物的典型0.025mmol/孔同時合成的詳細逐步合成方案。此方案適于在各個回合中同時合；通用合成方案描述于流程1中。流程lGLP-1受體調節(jié)劑肽類似物的自動合成Fmoc-Sieber酰胺樹脂,人1)哌啶/DMF(除去Fmoc)2).當量？111;-(3)-4-(2'-曱基苯基》3-吡"錄丙氨酸/PyBOP/DIEA/NMP(16h);3)(a)重復步驟1;(b)2-4當量Fmoc-(S)-Bip(2'-Et-4'-OMe)/DIC/HOAt/NMP(16hr);4)(a)重復步驟1;(b)5當量Fmoc-Xaag/DIC/HOBt(2hr);5)重復步驟4使用Fmoc-Xaa8;6)重復步驟4使用Fmoc-Xaa7;7)(a)重復步驟1;(b)XaVHOAt/DIC(6hi)8)(a)重復步驟1;(b)10當量Fmoc-Xaa5/HOAtyDIC(4hr);(c)10%Ac2OZDCM(30min)[對未反應的胺進行封端的步驟];9)重復步驟；(b)]0當量Fmoc-Xaa4/HOAt/DIC(2hr);10)重復步驟9使用Fmoc-Xaa3;1)重復步艱1;(b)5當量Fmoc-Xaa2/HOAt/DIC(16hr);12)重復步驟11使用Fmoc-Xaaj/HOAt/DIC;13)(a)重復步驟1;(b)用NMP和DCM洗滌；(c)真空干燥；14)TFA/水/三異丙基曱硅坑(2hr);15)RP-HPLC純化在合成開始前，視需要制備以下試劑溶液并將其置于儀器上DMF中的1.5M(15。/。)哌啶、NMP中的0.5MDIEA、NMP中的0.36MDIC和DMF中的1M(10。/。)乙酸酐。將所需經Fmoc保護的氨基酸制備成于0.36MHOAt/NMP中的0.36M溶液，且將其置于32位氨基酸架(32-positionaminoacidrack)中的適當4立置。通過用DMF中的20。/。哌啶處理(1.0mL;lx5min;lxl5min),使上文所制備的經Fmoc保護的二肽基-樹脂脫保護。接著，用NMP(8xl.0mL)洗滌樹脂。通過將適當Fmoc-氨基酸(0.075mmo1,3.0當量)、HCTU(0.075mmo1,3.0Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7陽Xaa8-Xaa9-Xaal0-Xaal1當量)及DIEA(0.1Smmo1，6.0當量)在NMP(lmL)中的溶液手動添加至所有孔中來偶聯(lián)下一個氨基酸(通常為Fmoc-Asp(OtBu)-OH或視需要經適當正交保護的另一種Fmoc-氨基酸)。使偶聯(lián)進行3h。此后，以氮氣壓力(3-5psi(磅/平方英寸))抽干反應器并用NMP(4xl.0mL)洗滌各孔。下一次偶聯(lián)循環(huán)以如上所述除去Fmoc基團為起始，且涉及如在此位置期望的序列取代所需要的那樣，偶聯(lián)Fmoc-Ser(tBu)-OH或另一種Fmoc-氨基酸。以與關于Fmoc-Asp(OtBu)-OH所述相同的方式進行偶聯(lián)。以相同的方式進行下一個偶聯(lián)步驟，視需要將Fmoc-Thr(tBu)-OH或任何其它所選擇的Fmoc-氨基酸引入到此序列中。如下偶聯(lián)下一個Fmoc-氨基酸(例如Fmoc-a-曱基-Phe-OH或其類似物)在以常用方式進行Fmoc脫保護后，手動添加Fmoc-氨基酸(l-5當量)、HOAt(l-5當量)及DIC(l-5當量)在NMP(1.0mL)中的溶液且使偶聯(lián)進行16-24小時。在此情況下不重復進行偶聯(lián)。在進行常用的偶聯(lián)后洗滌后，如本申請描述的那樣用乙酸酐對肽基-樹脂進行封端(cap)。下一個偶聯(lián)步驟涉及在此位置進行的序列代替所需要的Fmoc-Thr(tBu)-OH或取代類似物。如關于Fmoc-Asp(OtBu)-OH及其類似物的初始MPS偶聯(lián)所描述的那樣進行偶聯(lián)，但使用10當量Fmoc-Thr(tBu)-OH或取代類似物，并使偶聯(lián)進行16hr,且所使用的偶聯(lián)試劑為NMP中的DIC/HOAt。在進行常用的偶聯(lián)后洗滌后，以DCM中的10%乙酸酐對肽基-樹脂進行封端(lxlmLx60min)。使用與關于偶聯(lián)Fmoc-Asp(OtBu)-OH所述相同的偶聯(lián)方案，并將其重復用于接下來的三個氨基酸殘基。如以上所述的Fmoc-Thr(tBu)-OH殘基那樣，偶聯(lián)Fmoc-His(Trt)-OH以便完成所需肽類似物的序列組裝。為了偶聯(lián)某些序列位置所需的市售及非市售的非天然的氨基酸，使用與上文關于第6位(XJ的新穎氨基酸所述類似的單一偶聯(lián)方案。最后如上文所述，用DMF中的20%哌啶除去Fmoc基團，且用DMF(4xl.0mL)及DCM(4xl.0mL)洗滌肽基-樹脂。接著，通過歷時10-15min施加恒定的氮氣壓力(5psi)，在反應器區(qū)域對肽基-樹脂進行干燥。裂解/脫保護如下通過用TFA裂解混合物進行處理，使所需肽從其各自的肽基-樹脂裂解/脫保護。將TFA/DCM/三異丙基曱硅烷(70:28:2)(1.0mL)溶液添加至反66應器區(qū)域的每一孔中，隨后渦漩10min。將此步驟再重復兩次，且通過正壓將孔中的TFA溶液收集到位于在反應器底部的匹配96-小瓶區(qū)域(matching96-vialblock)的預稱瓶重的小瓶中。封蓋小瓶且再輕柔渦旋90min。打開小瓶且在SpeedVacTM(Savant)中濃縮至約0.2mL的體積。接著，通過添加二異丙基醚(3mL)并進行簡短渦凝來使粗肽沉淀。通過離心使沉淀物聚集，并蓬掉上清液。在SpeedVacTM(Savant)中干燥小瓶，得到粗肽，產率通常〉100%(20-40mg)。將粗肽直接溶解于2mL0.6。/。的氫氧化銨中，通過如下的制備性HPLC進行純化。粗肽的制備性HPLC純化IIPLC。將粗肽的溶液各自注入YMCS5ODS(20xl00mm)色語柱中，且使用線性梯度的水中的MeCN(二者經0.1%TFA緩沖)來洗脫。所使用的典型梯度為歷時15min從0.1。/。TFA/水中的20。/。(0.1。/。TFA/MeCN)變成0.1。/。TFA/水中的50%(0.1%TFA/MeCN)，流速為14mL/min，且在220nm對洗脫液進行UV檢測。通常在10-llmin后，洗脫的所需產物與雜質良好分離，且通常以單一的10-15mL餾分將其收集于餾分收集器上。通過對所需肽的HPLC餾分進行凍千，得到呈無定形白色粉末的所需肽。對經純化的肽進行HPLC分析在如上所述通過制備性HPLC進行純化后，在由以下器件組成的ShimadzuLC-10AD或LC-10AT分析性HPLC系統(tǒng)上通過分析性RP-HPLC對各肽進行分析SCL-10A系統(tǒng)控制器、SIL-10A自動注射器、SPD10AV或SPD-M6AUV/VIS檢測器或SPD-M10A二極管陣列4企測器。使用YMCODSS3(4.6x50mm)色譜柱，并使用以下梯度中的一種進行洗脫歷時8min從A中的10%B變成A中的70%B，2.5mL/min(方法A);歷時8min從A中的5%B變成A中的80%B,2.5mL/min(方法B);歷時8min從A中的5%B變成A中的70%B,2.5mL/min(方法C);歷時8min從A中的25%B變成A中的75%B,2.5mL/min(方法D);歷時8min從A中的20%B變成A中的75%B，2.5mL/min(方法E);歷時8min從A中的15%B變成A中的70%B,2.5mL/min(方法F);歷時8min從A中的10%B變成A中的卯。/oB,2.5mL/min(方法G);歷時8min從A中的20%B變成A中的65%B,2.5mL/min(方法H);歷時8min從A中的5%B變成A中的90%B，2.0mL/min(方法I);歷時8min從A中的5%B變成A中的90%B,2.5mL/min(方法J);歷時8min從A中的20%B變成A中的80%B，2.5mL/min(方法K);歷時8min從A中的10%B變成A中的100%B,2.5mL/min(方法L);歷時8min從A中的10°/。B變成A中的75%B，2.5mL/min(方法M)。流動相A:0.ly。TFA/水；流動相B:0.1%TFA/AcCN。純度通常>90%。通過質鐠進行表征通過流動注射模式或LC/MS模式的電噴霧質譜(ES-MS)來表征各肽。在所有分析中使用陽離子電噴霧模式及陰離子電噴霧模式的FinniganSSQ7000單一四極質語儀(ThermoFinnigan,SanJose,CA)。掃描時間為1.0秒，得到質量范圍為300至2200amu的全掃描數(shù)據(jù)。以單位分辨率操作四極。對于流動注射分析，使質譜儀與Waters616HPLC泵(WatersCorp.,Milford,MA)接口并裝備有HTSPAL自動取樣器(CTCAnalytics,Zwingen,Switzerland)。將樣品注入含有50:50水:AcCN及0.1%氬氧化銨的流動相中。用于分析的流速為0.42mL/min且注射體積為6^1。將ThermoSeparationsConstametric3500液相色i普(ThermoSeparationProducts,SanJose,CA)及HTSPAL自動取樣器用于LC/MS分析。使用LunaC18,5微米色譜柱，2x30mm(Phenomenex，Torrance,CA)達成色譜分離。用于分析的流速為1.0mL/min并對柱洗脫液進行分份，從而使進入電噴霧界面的流速為40(^1/min。執(zhí)行以下線性梯度歷時4min從A中的0%B變成A中的100%B，其中流動相A為98:2水:AcCN及10mM乙酸銨且流動相B為10:90水:AcCN及10mM乙酸銨。在220nm監(jiān)測UV響應。將樣品溶解于200^150:50H2O:MeCN(0.05%TFA)t。注射體積為5^1。在所有情況下，實驗測量的分子量與經計算的單同位素分子量相差不超過0.5道爾頓(Dalton)。實施例2A.合成N-酰基化肽類似物的通用程序(流程2)以如本申請所述那樣制備的經保護的肽基-樹脂中間體(l)(0.015mmo1)為起始，合成N-酰基化肽類似物，這顯示在流程2中。使用本申請所述的程序除去Fmoc基團，且使用本申請所述通用方法中描述的偶聯(lián)方案來使所得樹脂中間體2與相關經Fmoc保護的氨基酸或羧酸發(fā)生偶聯(lián)。在可使用適當酸酐的情況下，使用NMP中的5當量酸酐來進行N-酰基化。對所得N-68?；念愃莆?3)進行裂解/脫保護并通過制備性HPLC(使用本申請所述通用方法)加以純化。流程2合成1位殘基經取代/經衍生化的肽類似物Fmoc—HN'>!~Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaal0-Xaall-SieberBU^樹脂O1除去Fmoc-基團哌啶/DMF—DCM洗滌H,N'~Xaa2-Xaa3-Xaa4陽Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-XaalO-Xaall-Sieber酰胺樹脂o21.Fmoc-AA/羧酸，DIC,HOAt,NMP;或(R-CO)20,NMP2.除去Fmoc3)TFA/H20/三異丙基甲硅烷11HXaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9陽XaalO-Xaal1-NH2O3B.合成肽類似物的N-氨基曱酸酯衍生物的通用程序可由如本申請所述那樣制備的經保護的肽基-樹脂中間體(lX0.015mmol)為起始，合成肽類似物的N-氨基曱酸酯衍生物。使用本申請所述的程序除去Fmoc基團，且使所得樹脂中間體2在適當堿(諸如叔胺)的存在下與相關氯甲酸烷基酯/氯曱酸芳基酯反應，或與一縮二碳酸酯(di-carbonate)或活性碳酸酯(諸如碳酸對硝基苯酯或碳酸苯酯或碳酸羥基琥5白酰亞氨(hydroxy-succinimidylcarbonate))反應。C.合成肽類似物的N-脲衍生物的通用程序可由如本申請所述那樣制備的經保護的肽基-樹脂中間體(1)(0.025mmol)為起始，合成肽類似物(例如11聚體)的N-脲衍生物。使用本申請所述的程序除去Fmoc基團，且使所得樹脂中間體2與相關異氰酸酯(例如像在K.Burgessetal.,J.Am.Chem.Soc.1997，119,1556-1564中那樣制備)反應；可替換地，可使樹脂中間體2與相關氨基曱酰氯反應。類似地，可通過以下方法來制備10聚體肽類似物的N-脲衍生物以經保護的10聚體肽基-樹脂中間體為起始，除去Fmoc,且使所得肽基-樹脂中間體與相關異氰酸酯或氨基甲酰氯反應。D.合成肽類似物的N-磺酰胺的通用程序可由如本申請所述那樣制備的經保護的肽基-樹脂中間體(1)(0.025mmol)為起始，合成肽類似物(例如11聚體)的N-磺酰胺。使用本申請所述的程序除去Fmoc基團，且使所得樹脂中間體2與相關磺酰氯反應。類似地，可通過以下方法來制備10聚體肽類似物的N-磺酰胺以經保護的10聚體肽基-樹脂中間體為起始，除去Fmoc,且使所得肽基-樹脂中間體與相關磺酰氯反應。E.合成肽類似物的N-磺酰胺衍生物的通用程序可由如本申請所述那樣制備的經保護的肽基-樹脂中間體(1)(0.025mmol)為起始，合成肽類似物(例如11聚體)的N-磺酰胺衍生物。使用本申請所述的程序除去Fmoc基團，且使所得樹脂中間體2與相關氨基磺酰氯R4R5N-S02-C1反應，得到磺酰胺中間體(參見例如P.Davernetal.J.Chem.Soc.,PerkinTrans.2,1994(2),381-387)。類似地，可通過以下方法來制備10聚體肽類似物的N-磺酰胺衍生物以經保護的10聚體肽基-樹脂中間體為起始，除去Fmoc,且使所得肽基-樹脂中間體與相關氨基磺酰氯R4R5N-S02-Cl反應。實施例3使用AppliedBiosystemsModel433A肽合成儀來固相合成肽類似物以下為有關使用升級版AppliedBiosystemsModel433A肽合成儀來固相合成典型肽類似物的一般描述。合成儀經升級的硬件及軟件能夠對Fmoc脫保護步驟進行電導率監(jiān)測而對偶聯(lián)進行反饋控制。所述方案允許的合成頭見才莫為0.05至l.Ommol。上文描述了兩個非天然的C末端氨基酸的引入及肽類似物的同時合成。將上述經Fmoc保護的二肽基-樹脂用于此ABI合成中。將經Fmoc保護的二肽基-樹脂(0.1mmol)置于儀器上的適當尺寸容器中，用NMP洗滌6次，并以22。/。哌咬/NMP處理兩次(分別為2min及8min)來脫保護。再進行一次或兩次經監(jiān)測的脫保護步驟，直至監(jiān)測選項的狀態(tài)令人滿意(最后兩次基于電導率的脫保護峰相差<10%)?？偟拿摫Ｗo時間為10-12min。經脫保護的二肽基-樹脂用NMP洗滌6次，隨后與下一個氨基酸偶聯(lián)。通過下一步驟中所使用的實施例來說明所述程序。因此，接下來使用以下方法來偶聯(lián)Fmoc-Asp(OtBu)-OH:將Fmoc-Asp(OtBu)-OH(lmmol，10當量)溶解于2mLNMP中，并通過先后添加DMF(2.2mL)中的0.45MHBTU/HOBt及2MDIEA/NMP(lmL)來進行活化。接著，將經活化的經Fmoc保護的氨基酸的溶液轉移至反應容器中，且使偶聯(lián)進行30至60min，這取決于脫保護步驟的反饋。隨后，樹脂用NMP洗滌6次，且使其再經歷8次如上所述的脫保護/偶聯(lián)循環(huán)，由此完成所需序列的組裝。依次使用的Fmoc-氨基酸為Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-a-曱基-Phe(2-氟)-OH或其類似物、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gy-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Aib-OH及Fmoc-His(Trt)-OH。最后，如上文所述以NMP中的22%哌啶除去Fmoc基團，且肽基-樹脂用NMP及DCM洗滌6次，并在真空中進行干燥。可替換地，使用經修改的偶聯(lián)方案，其中通過先后添加DMF(0.52mL)中的0.5MHOAt及DIC(40pL)來活化經Fmoc保護的氨基酸(0.26mmo1),手動將其轉移至反應容器中并使其偶聯(lián)14-18hr。裂解/脫保護通過用TFA/水/三異丙基曱硅烷(96:2:2)溶液(3.0mL)處理2hr，使所需肽從其各自的肽基-樹脂裂解/脫保護。濾除樹脂，用TFA(1.0mL)漂洗，且將合并的TFA濾液添加至35mLEt20中。通過離心收集所得沉淀物且最后干燥，得到232mg呈白色固體的粗肽產物。通過本申請所述制備性HPLC來純化此粗肽產物。所使用的梯度為歷時40min從0.1。/。TFA/水中的15。/。(0.1。/oTFA/MeCN)變成0.1。/。TFA/水中的45%(0.1%TFA/MeCN)。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到28.4mg(18。/。回收率)純產物。實施例4合成由式II-IV及IIa-IVa表示的處于Xaal0位及Xaa位的聯(lián)苯基丙氨酸類似物在這些類似物中，通過由式II-IV及IIa-IVa表示的經取代的氨基酸類似物(即聯(lián)苯基丙氨酸類似物(Bip類似物)或雜聯(lián)苯基丙氨酸類似物)來表示X^o位及Xaan位的殘基，對于這些類似物而言，用以下兩種方法之一將其引入到肽鏈中。方法A:固相蘇楚基縮合在方法A中，以適于進行隨后固相肽合成來得到目標肽的方式進行固相蘇楚基(Suzuki)縮合，制備所需經修飾的聯(lián)苯基丙氨酸或雜聯(lián)苯基丙氨酸殘基。當通過經修飾的聯(lián)苯基丙氨酸或雜聯(lián)苯基丙氨酸殘基來表示目標肽中Xaall位的氨基酸時，如流程3所示制備所述殘基。在除去Boc即a-氨基保護基后，使用如上所述的多種肽合成方法來繼續(xù)使鏈延長，得到所需肽或其衍生物。當經修飾的聯(lián)苯基丙氨酸或雜聯(lián)苯基丙氨酸類似物處于目標肽的X^o位時，如流程4所示使用固體載體上的適當二肽來制備所需氨基酸。接著，使用含有所需經修飾的聯(lián)苯基丙氨酸或雜聯(lián)苯基丙氨酸衍生物的所得二肽基片段來進行目標肽或其衍生物的合成。當Xaa,o位與X^位均需要新穎的聯(lián)苯基丙氨酸或雜聯(lián)苯基丙氨酸殘基時，如流程6(以下)所示進行兩次連續(xù)的固相蘇楚基反應。制備含有由式n-IV及IIa-IVa表示的處于Xaall位的氨基酸的SynPhaseTMLantern的通用程序(蘇楚基偶聯(lián))流程3FmocHN20%哌^t/DMF2,Boc~Phe(4-l)~OH/DIC/HOBt/DIEA在1:1CH2CL2/DMF中3OCH3=SynPhaseTMLantern,接枝于聚笨乙烯表面Pd(O)催化劑R>B(OH)2水溶液K3P。4DMAB0。CTMS^OTf/2，6-二曱基吡啶/CH2Cl2(1:1:3)或1NHCI在二。惡烷中OCH3OCH3R"B(OHh=芳基硼酸或雜芳基硼酸通用程序ASynPhaseTMLantem(A系列(0.075醒ol/Lantem)或D系歹'J(0-035mmol/Lantern)(Mimotopes)衍生化有N-a畫Boc畫4扁碘苯基丙氨酸殘基，其72直接經由Knorr鍵(Boc-氨基酸-樹脂)或經由氨基酸-Knorr鍵(Boc-二肽基-樹脂)而相連，將所述SynPhaseTMLantern置于具有螺紋蓋的13x100mm玻璃培養(yǎng)管中。對于D系列Lantern,使用以下程序。對于涉及A系列Lantern的反應，使用類似的反應物比例。將芳基硼酸或雜芳基硼酸(0.140mmo1，4當量)溶解于0.30mlN,N-二曱基乙酰胺中。將磷酸鉀(0.280mmo1，8當量，0.14ml的2M水溶液)添加至芳基硼酸或雜芳基硼酸的溶液中，隨后添加含有4.0mg四(三苯基膦)釔(O)催化劑(約10摩爾％，0.0035mmol)的O.lOmlN，N-二曱基乙酰胺溶液。以氮氣流覆蓋所得混合物，且緊密封蓋反應容器，置在軌道振蕩器上，在80。C保持17-20小時。Lantern用3ximlN，N-二曱基乙酰胺及3xlml二氯曱烷洗滌(每次洗滌循環(huán)最少3min),然后對Boc基團進行裂解(參見以下通用程序)。通用程序B遵循通用程序A進行所述反應，但使用不同的催化劑。對于此程序而言，所使用的催化劑為二(三苯基膦)二氯化鈀(II)。對于D系列Lantern級別反應而言，使用約10mol。/。(0.0035mol)的催化劑。裂解Boc基團的程序方法A以下程序適用于D系列Lantern(0.035mmol/Lantern)。對于A系歹寸Lantern(0.075mmol/Lantem)，使用類似的適當比例的程序。用0.5ml由三氟甲磺酸三曱基硅酯、2,6-二曱基吡啶及二氯甲烷(按體積計為1:1:3)組成的試劑溶液對如通用程序A或B所述那樣制備的經Boc保護的Lantern進行處理。在溫和攪拌下以上述試劑處理2次(各1小時)，之后用4xl.0ml二氯曱烷、3xl.0mlN,N-二曱基曱酰胺及3xl.0ml二氯曱烷洗滌樹脂。接著，使Lantern在肽序列合成中經歷隨后的酰基化反應(偶聯(lián)反應)。方法B在室溫及溫和攪拌下用0.5ml無水1,4-二喵'烷中的1NHC1處理如通用程序A或B所述那樣制備的經Boc保護的Lantern。用2xl.0ml1，4-二碌、烷、2x1.OmlN，N-二曱基乙酰胺中的10。/oN，N-二異丙基乙胺(體積:體積)、3x1.OmlN,N-二曱基乙酰胺及3xl.0ml二氯曱烷洗滌Lantern，提供用于隨后酰基化反應(偶聯(lián)反應)步驟的游離氨基-Lantern。實施例673制備含有經修飾的處于Xaa,o位的聯(lián)苯基丙氨酸殘基的Lantern的通用程序如流程4所示，利用上文關于蘇楚基偶聯(lián)所述的通用程序(A或B),以與SynPhaseLantern結合的氨基酸(處于X^位)為起始，得到含有經修飾的處于乂膽10位的Phe的所需二肽基Lantern。流程4OH^FmocHN"(OCH3,么、OCH31.20。/。哌啶/DMF2.Fmoc-氨基酸/DIC/HOBtin1:1DMF/CH2C，23.20X哌啶/DMF4.Boc-氨基酸OH/DIC/HOBt在l:lDMF/CH2CLz中H6~R'=I,BrBoc、耽胺-連接物-Lantem"耽胺-連接物-Lantern"Pd(O)催化劑4當量R5-B(OH)28當量K3PO4DMA,抑。C，17-20hR5"、1.TWIS"OTf/2，6-二甲基吡啶/CH2CI2(1:1:3)X&J(或1NHCI在二碌烷中42.10%DIEA在DMA中oS耽胺-連接物-LanUrnR為在式II-V中描述的側鏈;R5-芳基或雜芳基實施例7制備含有由式H-IV及IIa-IVa表示的處于XaaH)位及XaaH位的氨基酸的Lantern的通用程序如下述流程6所述，利用上文關于Xaan位經修飾的類似物所述的程序(流程l)并連續(xù)兩次進行蘇楚基偶聯(lián)程序，得到含有經修飾的處于Xaa,o位及Xaall位的苯基丙氨酸殘基的二肽基Lantem。實施例8對SynphaseTMLantern上的肽進行酰基化/延長的通用程序用于Fmoc脫保護的程序將D系列SynPhaseTMLantern(每Lantern加載0.035mmol)添加至0.5ml8:2N，N-二曱基曱酰胺/哌啶(體積:體積)中。施加溫和攪拌。lh后，用3xl.0mlN,N-二曱基甲酰胺及3xl.0ml二氯曱烷洗滌Lantern,每次洗滌4吏Lantern浸泡至少3min。用于?；?氨基酸偶聯(lián)的程序(流程5)將側鏈及a-胺經保護的氨基酸(0.105mmol)溶解于0.5ml1:1N,N-二曱基曱酰胺/二氯曱烷中。向此溶液中添加N-羥基苯并三唑(0.105mmo1)、N,N-74二異丙基乙胺(0.315mmol)及N,N，-二異丙基碳二亞胺(0.105mmo1)。使氨基酸溶液靜置10min,此后將含有a-胺經脫保護的肽的D系列Lantern(0.035mmol/Lantem)添加至溶液中。封蓋小瓶，并輕柔攪拌16-20h。接著，用3xl.0mlN,N-二曱基曱酰胺及3xl.0ml二氯曱烷洗滌Lantern,每次洗滌循環(huán)<吏Lantern浸泡3-5min。流程5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage75</formula>流程6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage75</formula>實施例9經由片段縮合來制備肽的通用程序在方法A中，進行固相蘇楚基縮合，制備由式II-IV及IIa-IVa表示的處于Xaa,Q位及Xaan位的所需氨基酸，這描述在實施例7中。自X^。位氨基酸除去Boc即a-胺保護基，之后自載體裂解二肽。接著，使二肽與側鏈經完全保護的9個氨基酸的肽偶聯(lián)(參見下文)。隨后對側鏈進行脫保護并進行純化，得到所需肽產物。在上述程序的變化中即對于固體載體而言，可將引入乂3310位及Xaa位氨基酸的二肽與側鏈經完全保護的9個氨基酸的肽偶聯(lián)，這描述在流程10B中。方法A:溶液相片段縮合在方法A中，進行固相蘇楚基縮合及?；磻?如實施例7中所述)來制備與SynPhaseLantern結合的所需二肽，而N-末端a-胺經Boc保護或經Fmoc保護。在酸性條件下自Lantern載體裂解二肽。在N-末端a-胺經Boc保護的情況下，如流程7所示，進行的酸性裂解同時也實現(xiàn)了a-胺的脫如流程8所示，在酸性條件下對含有經Fmoc保護的N-末端a-胺的二肽進行裂解，且在溶液中使N-末端a-胺脫保護。純化這些二肽，隨后將其用于片段偶聯(lián)序列中。自SynphaseTMLantern裂解二肽的程序程序A(經Boe保護的二肽)(參見流程7)將D系列SynPhaseLantern置于1打蘭(dram)玻璃小瓶中。將1:1TFA/二氯曱烷(0.5ml)溶液添加至小瓶中。封蓋小瓶，并在軌道振蕩器上溫和攪拌(100rpm)2h。將裂解溶液轉移至新小瓶中，并向Lantern中再添加0.5ml1:1TFA/二氯甲烷。再次封蓋該小瓶，并在軌道振蕩器上溫和攪拌(100rpm)2h。將第二次裂解溶液添加至第一次裂解溶液中，且用二氯曱烷漂洗Lamem。將漂洗液添加至裂解溶液中，且蒸發(fā)溶劑，得到二肽，為a-胺的TFA鹽。流程71:1TFA/CH2CI2，10HO_^TFA-、V,叫u"I//AO~^、_,R,o和Rn為在式II-IV和IIa-rVa中描述的側鏈BocV--^連接物+Lantem程序B(經Fmoc保護的二肽)(參見流程8)如上文程序A中所述，自SynPhaseTMLantern裂解經Fmoc保護的二肽。用二氯曱烷漂洗Lantern,且自合并的漂洗液/裂解溶液蒸發(fā)溶劑。向所得殘余物(在1打蘭小瓶中)中添加0.40ml8:2二曱基甲酰胺/哌啶(體積:體積)。封蓋小瓶，且使其反應45min。蒸發(fā)掉剩余的溶劑，且所得產物通過HPLC(使用C-18色譜柱及CH3CN/H20/TFA溶劑系統(tǒng))來純化，蒸發(fā)溶劑后得到二肽，為a-胺的TFA鹽。流程8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage77</formula>:h,重復。人N、N人MH2Fmoc連接物+Lantem1110和R"為在式II-IV和IIa-IVa中描述的側鏈1.8:2DMF/哌咬2."CIIjCN/HzO/TFA溶劑系統(tǒng)進行HPLC純化f10H^O6"固相合成側鏈經保護的9聚體肽C末端羧酸的程序(流程9A)在室溫使Fmoc-L-Ser(tBu)-OH(5當量)、0.5MHOAt/DMF(5當量)及I)IC(5當量)在NMP(5mL)中的溶液與L-Asp(OtBu)-2-氯三苯曱基樹脂(3.0g，2.16mmol)—起渦漩18hr。用NMP洗滌若干次后，通過用1.5M哌梵/DMF處理2次(5min及10min)來除去Fmoc基團。這些偶聯(lián)及脫保護步驟重復七次，組裝所需序列，但對于偶聯(lián)Fmoc-a-Me-Phe(2-R-6-R，，)-OH及Boc-L-His(Trt)-OH而言，分別使用1.1當量及1.5當量Fmoc-a-Me-Phe(2-R-6-R")-OH及Boc-L-His(Trt)-OH，且對于將Fmoc-Thr(tBu)-OH偶聯(lián)至(S)-a-Me-Phe(2-R-6-R")-肽基-樹脂上而言，使用HATU/HOAt及DIEA(4當量)。組裝完成后，用DCM洗滌肽基-樹脂，隨后通過在室溫用DCM/AcOH/TFE(8:l:l，v:v:v)處理lh來將經保護的9聚體肽C末端羧酸自樹脂釋放。濾除樹脂，且蒸發(fā)濾液至干，將其再溶解于AcCN/水(2:l)中并凍干兩次，得到2.777g純度為81%的產物，其無需進一步純化即用于隨后的片段偶聯(lián)步驟中。9B)流程9AFmocOo、7c9o--oi)旅咬/DMF(除去Fmoc)U)Fmoc-AA/DICVHOAt/NMP/DMF(4-5當量)iii)重復以上步稞2次，視需要改變Fmoc-AAiv)哌啶/DMFv)Fmoc-(S)-a-Me-Phe(2-R-6-R")-OHDIOHOAt/NMP/DMF(1.1當量)vi)派啶/DMFvii)Fmoc-Thr(tBu)扁OH/HATU/D正A/HOAt/NMP/DMF(4當重)ix)Fmoc-Gly-OH/DIC/HOAt/NMP/DMF(4當量)x)重復步稞viii-ix2次，視需要改變Fmoc-AAxi)Boc-His(TrtK)H/DIC/HOAt/NMP/DMF(1.5當量)x")DCM/HOAc/TFE(8:1:1，v:v:v)vi)旋轉蒸發(fā)/凍千R,丫R",OoX)固相合成側鏈經保護的N-甲氧羰基9聚體肽C末端羧酸的程序(流程如上文所述那樣(流程9A)來制備N-Fmoc側鏈經保護的8聚體肽基-(鄰-Cl)-三苯曱基樹脂(3.5mmo1)。除去Fmoc且以DMF洗滌后，用含0.546MHOAt的DMF(9.8mL，5.33mmol)中的N-a-曱氧羰基-N-im-三苯甲基-L-組氨酸(2.4g,5.33mmol)處理肽基-樹脂(3.5mmo1),隨后添加DMF(10mL)及DIC(0.633mL,5.33mmol)。攪拌72小時后，用DMF(4x50mL)及DCM(2x50mL)洗滌N衍生化的9聚體肽基-樹脂，且通過在室溫用DCM/AcOH/TFE(8:l:l，v:v:v)處理3h將經保護的9聚體肽C末端羧酸自樹脂釋放。濾除樹脂，且蒸發(fā)濾液至干，將其再溶解于AcCN/水(l:1.4)中并凍干兩次，得到4.05g純度為71%的產物，其無需進一步純化即用于隨后的片段偶聯(lián)步驟中。流程9B78<formula>formulaseeoriginaldocumentpage79</formula>i)哌啶/DMF(除去Fmoc)ii)CH30-CO-L-His(Trt)-OH(1.5當量)/HOAt/DIC/DMFiii)DCM/HOAc/TFE(8:1:1，v:v:v)iv)旋轉蒸發(fā)/凍干Xn義an人乂n義JLn義N^TNN、Y^OH'……，"=TTo;H"/0用于溶液相片段偶聯(lián)反應的程序在1打蘭小瓶中以單一化合物的形式且在2ml96孔板中以化合物平行陣列的形式進行這些反應。以下描述(如流程10所示)適用于單一化合物的情況，但與在96孔板中進行的反應完全類似。在1.5ml玻璃小瓶中將二肽的TFA鹽(0.01mmol)溶解于含有0.5%N,N-二異丙基乙胺的0.25mlTHF中。將大孔碳酸酯樹脂(MP-碳酸酯，0.03mmol，ArgonautTechnologies)添加至小瓶中。封蓋小瓶，并在室溫攪拌2h。過濾溶液，并通過蒸發(fā)除去過量溶劑。將含有側鏈經保護的9聚體肽C末端羧酸(0.008mmol)及N-羥基苯并三唑(HOBt，0.008mmol)的0.15ml9:1氯仿/N，N-二曱基曱酰胺溶液添加至含有二肽胺的小瓶中。將二異丙基碳二亞胺(DIC,0.08mmol)添加至0.05ml9:1氯仿/N,N-二曱基曱酰胺溶液中。封蓋小瓶，且在室溫在軌道振蕩器上攪拌反應混合物16h。蒸發(fā)小瓶中剩余的溶劑。用0.40ml97.5:2.5TFA/三異丙基曱硅烷(TFA/TIS)使肽側鏈及N-末端a-胺脫保護，歷時lh。蒸發(fā)掉剩余的溶劑，隨后肽產物通過HPLC(使用CH3CN/H20/TFA溶劑系統(tǒng)且通過檢測所需產物的質量來觸發(fā)洗脫液的收集)79艮R"=H,或FR3，IURe,R3a,和R6a為在式II和IVa中描述的側鏈流程10B9:lCHCiyDMF<formula>formulaseeoriginaldocumentpage81</formula>G人。"^["^/Sieber耽胺樹脂。、'<1CH2d3。MFii、，》kuu—1—1"5-25TFA/TIS2純化義NNA。。,H。/、0HH。/、OHH。-J。、么々N"R，，R4，Rfi，R^和R"為在式n和IVa中描述的側鏈方法B:使用溶液中的蘇楚基偶聯(lián)來合成由式II-IV及IIa-IVa表示的Fmoc-氬基酸類似物下述實施例說明了由式n-IV及IIa-IVa表示的若干Fmoc-氨基酸類似物的合成，隨后如本申請所述那樣將其用于肽及其它肽類似物的固相合成。實施例10合成Fmoc-(S)-2，-乙基-4，-曱氧基-聯(lián)苯基丙氨酸[Fmoc-(S)-Bip(2，畫E"，-OMe)流程11描述了Fmoc-(S)-2，-乙基-4，-曱氧基-聯(lián)苯基丙氨酸的合成。流程11HPh3PCH2BrBrTHF70%Brlo%Pd/cEtOAc1.n~Bu!_i2.B(OB>3BrTHF、0HOOHOH(CF3S02>20BocHN、C02CH3OS02CF3BocHNC02CH3:HOOHPd(O),K2C03甲笨/THF/曰OH/HzOBocHNCOzCH31fJNaO圓eOHTHFBocHNC02H1.HCI/CH2C，22.FmocOSu/NaHCOs/THF/HzOFmocHN、C。2HBoc-L-酪氨酸-O-三氟曱磺酸酯(Boc畫L隱Tyrosine-O國triflate)向在N2下保持在-40。C的25g(85mmol)Boc-L-酪氨酸曱酯及8136.25g(339mmo1,4當量)2,6-二曱基吡啶于200mL無水DCM中的溶液中經30min緩慢添加DCM(100ml)中的47.74mg(169.5誦o1,2當量)三氟甲磺酸酐。在-4(TC將溶液再攪拌2小時。HPLC分析指示反應完成。通過添加20mL水中止反應。分離各層，且有機層用3x200ml1NHC1、200ml飽和Na2C03、200ml水及200mL鹽水洗滌。有機層用硫酸鎂干燥，過濾并真空干燥，得到呈紅色油狀物的粗產物。使其經歷硅膠快速色譜(300g硅膠，梯度為己烷中的0。/。EtOAc至己烷中的50%EtOAc)。真空濃縮含有產物的餾分，得到呈白色固體的所需化合物(27g,產率75%)。2-乙基-4-甲氧基-苯基硼酸方法A將溴化曱基三苯基錛(199.5g,0.465mol)在無水THF(800ml)中的懸浮液凈化10min，并將其冷卻至10。C。經30min緩慢添加正丁基鋰(169ml，0.465mol,2.75M溶液)并攪拌lh。經30min緩慢添加無水THF(300ml)中的2-溴-5-甲氧基苯曱酪(100g,0.465mo1)。添加后，攪拌反應混合物lh。添加石油醚(2L)且再攪拌反應混合物30min。反應混合物用硅膠墊過濾。用乙醚洗滌硅膠墊。在低于30。C的溫度濃縮合并的有機洗滌液，并通過60-120目硅膠色譜(使用100。/。石油醚作為洗脫劑)來純化粗產物。產量92g，90%,為淺黃色液體。將乙酸乙酯(650ml)中的2,2，-聯(lián)吡啶(24.3g,0.15mol)及2-溴-5-曱氧基苯乙烯(65g，0.31mol)冷卻至0°C。凈化;容液，且在氮氣流下添加10%4巴/碌_(16.25g，25%)。在帕爾(Parr)振蕩器中在2kg氫氣壓力下攪拌反應混合物3天。通過HPLC監(jiān)測反應進程。反應混合物用硅藻土過濾并用5。/。硫酸氫鉀溶液洗滌濾液，經硫酸鈉干燥并在低于30。C的溫度濃縮。產量60g，91%,為淺黃色液體。將4-溴-3-乙基苯甲醚(94g,0.437mol)在THF(900ml)中的溶液冷卻至-78X:。在相同溫度逐滴添加正丁基鋰(249m1,0.55mol)。在-78。C持續(xù)攪拌lh。在-78。C緩慢添加硼酸三正丁酯(177ml，0.655mo1)。移開冷卻浴，使反應混合物溫熱至0。C且在0。C用1.5N鹽酸中止。分離有機層。用乙酸乙酯萃取水層，且用鹽水洗滌合并的有機層，然后濃縮。所得到的殘余物在石油醚中攪拌30min。過濾所得到的固體并在真空下干燥。產量65g，82%,為白色固體。方法B(參見流禾呈12)向3-乙基苯酚(50g，0.4mol，純度為98%,Fluka)及K2C03(283g，2.05mol)在無水丙酮(500ml)中的混合物中添加曱基碘(2卯g,2.05mol)。將反應混合物轉移至高壓釜中并在70。C回流過夜。反應混合物用硅藻土墊過濾。用丙酮洗滌硅藻土墊且濃縮合并的濾液及洗滌液。將產物溶解于DCM中，過濾并蒸發(fā)至干。產量50g,90%,為棕色液體。在室溫在黑暗中將AcCN(lL)中的3-乙基苯曱醚(50g,0.3676mol)及N畫溴琥珀酰亞胺(72g,0.4mol)攪拌8h。在低于4(TC的溫度濃縮反應混合物，且將所得到的殘余物再溶解于CC14中并過濾。濃縮濾液且產物通過分餾來純化。產量35g，43%,為淺黃色液體。如方法A中所述，將4-溴-3-乙基苯曱醚轉化成相應的硼酸。出于擴大反應規(guī)模的目的，可使用格氏方法(01^1^^11^110(1)來實現(xiàn)4-澳-3-乙基苯曱醚向2-乙基-4-曱氧基-硼酸的轉化。此方法涉及通過以下方法來形成格氏試劑使4-溴-3-乙基苯曱醚與Mg(l.l當量)在THF中反應，隨后使所得格氏中間體如方法A中所述那樣與硼酸三正丁酯或硼酸三甲酯反應。流程12Fmoc-(S)-2，-乙基-4，-曱氧基-聯(lián)苯基丙氨酸用氮氣將無水曱苯(600ml)中的Boc-L-酪氨酸-0-三氟甲磺酸酯(81g,0.19mol)凈化10min。添加200ml水中的K2C03(36g，0.26mol)，隨后添加2-乙基—4-曱氧基-苯基硼酸(36g，0.2mol)，且使用氮氣將反應混合物凈化10min。添加Pd(PPh3)4(16.18g，0.014mo1)、乙醇(200ml)及THF(400ml)并在攪拌下將反應混合物加熱至IO(TC，保持4h。真空濃縮反應混合物，且將殘余物溶解于DCM(1.0L)中。用10%氫氧化鈉溶液和15%檸檬酸溶液洗滌有機層，經硫酸鈉干燥并濃縮。粗產物通過60-120目硅膠柱色譜(石油醚中的10%乙酸乙酯)來純化。產量50g,65%,為黃色液體。向Boc-(S)-2，-乙基-4，-曱氧基-聯(lián)苯基丙氨酸曱酯(60g,0.146mol)在THF(450ml)及甲醇(85ml)中的混合物中添加85ml水中的氳氧化鈉(24g,830.58mol)。在室溫攪拌反應混合物過夜，濃縮并將殘余物溶解于水(100ml)中，且用乙醚洗滌。使用20%檸檬酸將水層酸化至pH為1且用乙酸乙酯萃取。萃取液用鹽水洗滌，經硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。產量55g，94%,為無色液體。將Boc-(S)-2，-乙基-4'-曱氧基-聯(lián)苯基丙氨酸(55g，0.138mol)溶解于無水DCM(l升)中且在室溫用無水HC1氣體處理6h。過濾所得到的固體產物并在真空下干燥。產量46g,100%。向THF(700ml)中的游離氨基酸鹽酸鹽(30g，0.089mol)中添加NaHC03(29g，0.358mol)的水(240ml)溶液。經30min逐份添加Fmoc-OSu(30g，0.089mol)。在室溫攪拌反應混合物過夜。在真空下除去THF,然后添加水(2.0L)。用乙醚萃取澄清溶液，除去任何雜質。將水溶液酸化至pH為l且用乙酸乙酯萃取。用水及鹽水洗滌有機層，且蒸發(fā)至干。產量37g,80%。實施例11合成Fmoc-(S)-2，-乙基-4，-羥基-聯(lián)苯基丙氨酸的合成。流程13經20min向在-12。C及氬氣下攪拌的4,46g(8.55mmol)(S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(2，-乙基-4，-甲氧基聯(lián)苯-4-基)丙酸|Fmoc-Bip(2，-Et-4，-OMe)-OH]于二氯曱烷(34mL)中的溶液中添加21.4mL1M三溴化硼于二氯曱烷(21.2mmol)中的溶液。攪拌反應混合物，且當形成灰色漿液時，使其在原位溫熱至室溫。3h后，在室溫將反應混合物緩慢添加至300mL經快速攪拌的水中。lh后，用二氯甲烷(每次lOOmL)萃取反應混合物2次。合并有*1萃取液，干燥(MgS04),過濾并蒸發(fā)，得到4.65g棕褐色泡沫狀物。通過反相HPLC(LunaC1830><100mm色譜柱；洗脫劑的梯度為50%至100%(10min)(900:100:1水/AcCN/TFA至100:900:1水/AcCN/TFA);流速為40mL/min;在220nm進行UV檢測)來純化所需產物。部分蒸發(fā)所匯集的餾分，得到膠狀物質，將其自剩余溶液中潷出，用水洗滌，將其再溶解于二氯曱烷中，干燥(MgS04),過濾并蒸發(fā)，得到3.50g呈白色無定形固體的產物，產率81%。HPLC/MS:保留時間5.52min[ZorbaxSBC18(4.6x75mm)色譜柱；梯度為0%至100%(8min)(90:10:0.1水/AcCN/TFA至10:90:0.1水/AcCN/TFA作為洗脫劑)；流速為2.5mL/min;在220nm進行UV檢測];[M+H]+=508。'HNMR(DMSO-d6):512.77(brs,1H)，9.29(s,1H)，7.86(d,J-7.7Hz,1H),7.78(d，J=8,8Hz,1H),7.65(t,J=7.1Hz,2H)，7.38(m，2H)，7.28(m,4H),7.11(d,J=7.7Hz，2H),6.85(d,JN8.2Hz,1H),6.65(d,J=2.2Hz,1H)，6.57(dd,J=2.2,8.3Hz,1H)，4.20(m,5H),3.32(brs,1H)，3.10(dd，JN4.4,13.8Hz,1H),2.90(dd，J=10.5,13.2Hz,1H),2.37(q，J=7.7Hz,2H)，0.91(t,J=7.7Hz，3H)。通過手性HPLC(CHIRALPAKAD,lO(im，50x500mm色譜柱；等度洗脫(正庚烷/AcCN/曱醇/TFA839:80:80:1);流速為60mL/min;在217nm進行UV檢測)進一步純化2.28g上述產物。蒸發(fā)所匯集的餾分，隨后與氯仿(3x20mL)—起再蒸發(fā)，得到2.17g呈灰白色無定形固體的產物，產率95°/。。反相HPLC:保留時間二21.42min[YMCODS-AC183nm(4.6xl50mm)色譜柱；梯度為10%B至100。/。B(30min)(緩沖液A為水中的0.1°/。TFA;緩沖液B為AcCN中的0.1%TFA);流速為lmL/min;在217nm進行UV檢測]。MS分析[M+NH3]+=525.3且[M-H]、506.2。手性HPLC分析>99%對映異構體過量，保留時間42.17min[CHIRALPAK⑧AD，10pm，4.6x250mm色譜柱；等度洗脫(正庚烷/AcCN/曱醇/TFA799:100:100:1);流速為ImL/min;在217nm進行UV檢測]。[a]25D=-12.6(c=1.0,在DMF中)。實施例12合成(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-鄰甲苯基吡啶-3-基)丙酸鹽酸鹽lFmoc-(S)-4-(2，-曱基苯基)-3-吡淀基丙氨酸鹽酸鹽以下流程14描述了(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-鄰曱苯基吡啶-3-基)丙酸鹽酸鹽的合成。流程14Br1.P^C-NCHsCC^tBu^淡化O-烯丙基-N-(9-蒽基甲基)辛可尼丁錨，2-叔丁基亞氨基-2-二乙JJL基-W-二甲基-全氪-13^2-二氮雜磷雜環(huán)己蜂CH2C12,-78DC2.15%檸檬酸3.FmocCl，N^CO;,l:lTHF/H20從CH2Clz/己烷中重結晶且對母波進行分離98%ee5-溴-2-鄰曱苯基吡啶向經氬氣凈化且經抽真空的910mg(3.21mmol)5-溴-2-碘吡啶及436mg(3.21mmo1,1.0當量)2-鄰曱苯基硼酸于8mL曱苯及3.2mL2M碳酸鈉水溶液中的漿液中添加36mg(0.032mmo1,0.01當量)四(三-苯基膦)4巴。用氬氣將反應混合物再凈化并抽真空2次，隨后使其在氬氣下回流15h。冷卻反應混合物，且使其在水與EtOAc之間分配。分離各層，且水層再用EtOAc萃取1次。合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮并真空干燥，得到呈橙色油狀物的粗產物。通過硅膠色譜(7:3CH2CV己烷)進行純化，得到666mg呈黃色油狀物的標題化合物，產率84%。6-鄰甲苯基吡咬-3-甲醛經5min向在-74。C及氬氣下經攪拌的125mg上迷化合物(0.50mmol)在THF(2.0mL)中的溶液中添力。220pL正丁基鋰的己烷溶液(2.5M,0.55mmo1,1.1當量)，不允許使溫度高于-7rC。形成淡綠色溶液，30min后顏色變成深綠色。45min后，添加49.4|xL(0.61mmol，1.2當量)DMF且使反應混合物溫熱至-40。C。14h后，形成亮橙色溶液。用10%檸檬酸中止反應且在室溫迅速攪拌混合物20min。所得鮮黃色溶液用EtOAc萃取兩次。合并有機萃取86液，用MgS04干燥，過濾并濃縮，得到黃色油狀物。所得到的粗混合物通過硅膠色譜(使用乙酸乙酯/二氯曱烷(l:24)作為洗脫劑)(2.5xl0cm色譜柱)來純化，得到白色固體，熔點82-84。C,90.3mg，產率910/0。(6-鄰曱苯基吡啶-3-基)甲醇向0-5。C的1.070g(5.43mmol)6-鄰曱苯基吡啶-3-曱醛于19mL乙醇中的溶液中添加287mg(7.5mmo1,1.4當量)硼氫化鈉。2h后，用飽和碳酸氬鈉溶液淬滅反應混合物，30min后，使其在二氯曱烷與鹽水之間分配。以硫酸鎂干燥有機萃取液并濃縮，得到呈無色油狀物的所述產物，1.08g,產率100%。5-(溴甲基)-2-鄰甲苯基吡啶氫溴酸鹽將4.49g(22.5mmol)(6-鄰曱苯基吡啶-3-基)曱醇于75mL48%氫溴酸中的溶液加熱至回流，保持64h。使反應混合物部分冷卻，且通過真空蒸餾(2托(Torr)且ll(TC)除去過量的氬溴酸，直至在燒瓶中剩余棕褐色固體殘余物。使用置于蒸餾裝置與真空泵之間的大KOH顆粒井進行蒸餾。使固體殘余物漿化在乙醚中，過濾并在氮氣流下干燥，得到7.38g產物，產率95%。(2S)-2-(二苯基亞曱基M)-3-(6-鄰甲苯基吡咬-3-基)-丙酸叔丁酯經5min向在-78。C及氬氣下經攪拌的800mg(2.33mmol)5-(溴曱基)-2-鄰曱苯基吡啶氫溴酸鹽、689mg(2.33mmo1,1.0當量)2-(二苯基亞曱基氨基)乙酸叔丁酯及141mg(0.233mmo1，0.1當量)溴化O-烯丙基-N-(9-蒽基曱基)辛可尼丁錯(0-allyl-N-(9-anthracenylmethyl)cinchonidiniumbromide)在14mL二氯曱烷中的混合物中添加1.687mL(5.83mmo1,2.5當量)2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-l,3-二曱基-全氫-l,3，2-二氮雜璘雜環(huán)己烯。在-78。C攪拌反應混合物10h，隨后使其在原位溫熱至室溫?；旌衔镏苯油ㄟ^硅膠色譜(使用乙酸乙酉旨/二氯曱烷(l:4)作為洗脫劑)(5xl0cm色i普柱)來純化，得到棕褐色油狀物，1.10g,產率100%。(2S)-2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)M"lliO-3-(6-鄰曱苯基吡咬-3-基)丙酸叔丁酯向在室溫及氬氣下經攪拌的1.10g(2.33mmol)(2S)-2-(二苯基亞曱基氨基)_3-(6-鄰曱苯基吡啶-3-基)丙酸叔丁酯于9mLTHF中的溶液中添加9mL水中的2.795g(14.54mmo1,6.5當量)檸檬酸。20h后，用水(5mL)稀釋反應混合物且用乙醚(10mL)洗滌兩次。接著，用固體碳酸鈉使水相達到pH為9且用二氯曱烷萃取兩次。87合并二氯曱烷萃取液，用硫酸鈉干燥并濃縮。將所得油狀物溶解于10mLTHF中，且在室溫用7.2mL10°/。碳酸鈉溶液，隨后用703mg(2.56mmo1，1.1當量)9-芴基曱基氧基碳酰氯處理。14h后，反應混合物用二氯曱烷萃取兩次，用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮并通過硅膠色譜(使用乙酸乙酯/二氯甲烷(l:19)作為洗脫劑)(2.5xl0cm色譜柱)來純化，得到1.082g無色油狀物，產率91%。由20mL7:l己烷:二氯甲烷重結晶，得到287mg白色固體。濃縮母液，得到779mg呈無定形白色固體的標題化合物，產率63°/。。手性HPLC分析(4.6x250mmAD色譜柱，38:1:1庚烷:曱醇乙醇作為洗脫劑，流速為lmL/min)指示98%對映異構體過量。(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)絲絲)-3-(6-鄰甲苯基他咬-3-基)丙酸鹽酸鹽在室溫將經填充有氯化鈣的干燥管保護而使之不受大氣影響的1.75g(3.19mmol)(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-鄰曱苯基吡啶-3-基)丙酸叔丁酯于TFA(5.0mL)中的溶液攪拌2小時。在低于40。C的溫度真空濃縮反應混合物，并將所得橙色油狀物溶解于10mL乙醚中，向所述乙醚中添加5mLlMHCl/乙醚溶液。過濾所得白色固體，并用乙醚洗滌，得到1.65g呈白色粉末的所需化合物，產率100%。實施例13合成(2S)-2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)絲絲)-3-(6-溴吡咬-3-基)丙酸鹽酸鹽以下流程15描述了2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-溴吡啶-3-基)丙酸鹽酸鹽的合成。流程15N-溴琥珀酰亞胺A舊N，CCl4回流，1,5h1.Ph2C=NCH2C02Wu，炎化O-蜂丙基-N-(9-蕙基甲*)辛可尼丁鎮(zhèn)2-叔丁基亞氨基-2-二乙基■IL^-lT3-二甲基—全氮-l(32-二氮雜磷雜環(huán)己蜂CH2Cl2，-78°C2.15%檸檬酸3.RnocCI,Na2C03，1:1THF/H20從CHzC，z/己烷中重結晶且對母液進行分離TFA室溫，5hHCI/Et202-溴-5-(溴曱基)吡啶向經攪拌的10.320g(60.0mmol)5-甲基-2-溴吡啶及5.339g(30.0mmo1，0.5當量)經重結晶的N-溴琥珀酰亞胺于150mL四氯化^炭中的漿液中添加200mgAIBN。用氬氣將反應混合物凈化2次并抽真空，隨后使其在氬氣下回流。90min后，將反應混合物冷卻至室溫，過濾并濃縮濾液，得到黃色油狀物。質子NMR表明，混合物含有53。/。(mol)未經反應的5-曱基-2-溴吡啶、43%的標題產物及4%的2-溴-5-(二溴曱基)p比啶。混合物無需進一步純化即迅速用于以下程序中。(S)-2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基氨基)-3-(6-溴吡咬-3_基)丙酸叔丁酯經5min向在-78。C及氬氣下經攪拌的2-澳-5-(溴曱基)。比啶(標稱26.4mmo1)、7.798mg(26.4mmo1，1.0當量)2-(二苯基亞甲基氨基)乙酸叔丁酯及1.60mg(2.64mmo1，0.1當量)溴化0-烯丙基-N-(9-蒽基甲基)辛可尼丁鎮(zhèn)在lOOmL二氯曱烷中的混合物中添加11.46mL(39.6mmo1，1.5當量)2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-l，3-二曱基-全氫-l，3，2-二氮雜磷雜環(huán)己蹄。在-78。C攪拌反應混合物7h，隨后使其在原位溫熱至室溫。接著，濃縮反應混合物，將其再溶解于75mLTHF中且用75mL水中的檸檬酸(22g)加以處理。劇烈攪拌7h后，用乙醚(75mL)萃取混合物2次。合并有機萃取液并用水(25mL)洗滌1次。合并水性萃取液并用固體碳酸鈉使其達到pH為8。無需進一步處理即將水溶液用于下一反應中。(S)-:2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基絲)-3-(6-溴吡咬_3-基)丙酸叔丁酯在室溫將上述水溶液添加至7.545g(27.5mmo1，1.04當量)9-藥基甲基氧基碳酰氯于75mLTHF中的溶液中。14h后，用乙酸乙酯萃取反應混合物兩89次，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮并通過硅膠色譜(使用乙酸乙S旨/二氯曱烷(1:24)作為洗脫劑)(12x25cm色譜柱)加以純化，得到7,25g無色油狀物，產率910/0。由120mL5:l己烷/二氯曱烷重結晶，得到少量白色固體，將其濾除。濃縮母液，得到4.96g呈無定形白色固體的標題化合物，產率62°/0。手性HPLC分析(4.6x250mmAD色譜柱，38:1:1庚烷:曱醇乙醇作為洗脫劑，流速為lmL/min)指示97.2%對映異構體過量。2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基絲)-3-(6-溴吡啶-3-基)丙酸鹽酸鹽在室溫將經填充有氯化鈣的干燥管保護而使之不受大氣影響的1.02g(1.95mmol)(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-溴吡啶-3-基)丙酸叔丁酯于TFA(3.0mL)中的溶液攪拌2小時。在低于35。C的溫度真空濃縮反應混合物，并將所得橙色油狀物溶解于3mL二氯甲烷中，向所述二氯曱烷中添加6mLlMHCl/乙醚溶液。過濾所得白色固體，并用乙醚洗滌，得到845mg呈白色粉末的標題化合物，產率86%。實施例14合成(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基絲)-3-(6-(2-乙基苯基)吡咬-3畫基)丙酸鹽酸鹽[Fmoc-(S)4-(r-乙基苯基)-l吡咬基丙氨酸以下流程16描述了(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-(2-乙基苯基)吡啶-3-基)丙酸鹽酸鹽的合成。流程16<formula>formulaseeoriginaldocumentpage90</formula>(S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基絲)-3-(6-(2-乙基苯基)吡咬-3-基)丙酸叔丁酯向經攪拌的1.75g(3.35mmol)(S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-溴-吡啶-3-基)丙酸叔丁酯及1.005g(6.70mmo1，2當量)2-乙基苯基硼酸于50mL1:1異丙醇/曱苯中的漿液中添加25.0mL2M碳酸鈉水溶液。用氬氣凈化反應混合物2次并抽真空，隨后添加124mg(0.167mmo1,0.05當量)二(三環(huán)己基膦)二氯化鈀(II)，且再次用氬氣凈化混合物并抽真空。在80。C及氬氣下加熱經快速攪拌的混合物。20h后，將反應混合物冷卻至室溫，且部分濃縮，除去異丙醇。使殘余物在乙酸乙酯與水之間分配，且再用乙酸乙酯萃取水相1次。合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到褐色油狀物。通過硅膠色譜(使用乙酸乙酯/二氯曱烷(l:9)作為洗脫劑)(5xl5cm色語柱)來純化，得到1.25g呈無色油狀物的所需化合物，產率77%。(2S)-2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基絲)-3-(6-(2-乙基苯基)吡梵-3-基)丙酸鹽酸鹽在室溫將經填充有氯化鈣的干燥管保護而使之不受大氣影響的L53g(2.79mmol)(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-(2-乙基苯基)p比啶-3-基)丙酸叔丁酯于TFA(5.0mL)中的溶液攪拌2小時。在低于35。C的溫度真空濃縮反應混合物，并將所得橙色油狀物溶解于乙醚中，向所述乙醚中添加6mLlMHCl/乙醚溶液。過濾所得白色固體，并用乙醚洗滌，得到1.38g呈白色粉末的所需產物，產率93%。實施例15合成(2S)-2-(((9H-藥-9-基)曱氧基)絲絲)-3-(6-(2-乙基-4-甲氧基苯基)吡咬-3-基)丙酸鹽酸鹽[Fmoc-(S)-4-[(2，-乙基-4，-申氧基)苯基-3-吡M丙氨酸以下流程17描述了(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-(2-乙基-4-甲氧基苯基)吡啶-3-基)丙酸鹽酸鹽的合成。流程1791-Br-OMeFmocHN，C02(Bu2-乙基~4-甲H^苯基硼酸甲笨/iPrOH/H20Na2CC>3PdCI2(PCy3)2FmocHN^C02但uTFA室溫,5hHa/Et2oFmocHNOMeCC^H(S)-2-(((9H-芴_9_基)曱氧基)羰基絲)_3_(6-(2-乙基4甲氧基苯基)吡咬-3-基)丙酸#又丁酯向經攪拌的613mg(1.17mmol)(S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-溴-吡啶-3-基)丙酸叔丁酯及422mg(2.34mmol，2當量)2_乙基-4-曱氧基苯基硼酸于20mL1:1異丙醇/曱苯中的漿液中添加10.0mL2M碳酸鈉水溶液。用氬氣凈化反應混合物2次并抽真空，隨后添加43.2mg(0.059mmo1,0.05當量)二(三環(huán)己基膦)二氯化鈀(II)且再次用氬氣凈化混合物并抽真空。在80。C及氬氣下加熱經快速攪拌的混合物。9h后，將反應混合物冷卻至室溫，且部分濃縮，除去異丙醇。使殘余物在乙酸乙酯與水之間分配，且再用乙酸乙酯萃取水相l(xiāng)次。合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到褐色油狀物。通過硅膠色譜(使用乙酸乙酯/二氯曱烷(3:17)作為洗脫劑)(5xl5cm色譜柱)來純化，得到401mg呈無色油狀物的預期化合物，產率59%。(2S)-2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基氨基)-3-(6-(2-乙基-4-甲氧基苯基)吡梵-3-基)丙酸鹽酸鹽在室溫將經填充有氯化鈣的干燥管保護而使之不受大氣影響的401mg(0.69mmol)(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-(2-乙基-4-曱氣基苯基)吡啶-3-基)丙酸叔丁酯于TFA(2.0mL)中的溶液攪拌2小時。在低于30。C的溫度真空濃縮反應混合物，并將所得橙色油狀物溶解于乙醚中，向所述乙醚中添加2mLlMHCl/乙醚溶液。過濾所得白色固體，并用乙醚洗滌，得到336mg呈白色粉末的所需產物，產率84%。92實施例16(S):((PH-芴-^基)曱氧基)絲絲)-3-(6_(2-曱基苯基)吡啶各基)丙酸叔丁酯的另一種合成方法以下流程18描述了(S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-(2-曱基苯基)吡啶-3-基)丙酸叔丁酯的另一種合成方法。流程18二\2-曱基苯基硼酸一FmocHNfC02ffiu甲笨/iPrOH/H20FmocHN^"C02氾uNa2C03PdCI2(PCy3)2(S)-2-(((9H-藥-9-基)曱氧基)羰基絲)-3-(6-(2-曱基苯基)吡啶-3-基)丙酸叔丁酯向經攪拌的1.75g(3.35mmol)(S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)—3-(6-溴-吡啶-3-基)丙酸叔丁酯及913mg(6.70mmo1，2當量)2-曱基苯基硼酸于50mL1:1異丙醇/曱苯中的漿液中添加25.0mL2M碳酸鈉水溶液。用氬氣凈化反應混合物2次并抽真空，隨后添加124mg(0.167mmo1，0.05當量)二(三環(huán)己基膦)二氯化鈀(II)且再次用氬氣凈化混合物并抽真空。使經快速攪拌的混合物在80。C及氬氣下加熱。20h后，將反應混合物冷卻至室溫，且部分濃縮，除去異丙醇。使殘余物在乙酸乙酯與水之間分配，且再用乙酸乙酯萃取水相1次。合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到褐色油狀物。通過硅膠色語(使用乙酸乙酯/二氯曱烷(l:9)作為洗脫劑)(5xl5cm色譜柱)來純化，得到1.81g呈無色油狀物的所需化合物，產率90%。實施例17合成(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)絲絲)-3-(6-(2-乙基苯基)歧溱-3-基)丙酸叔丁酯Fmoc-(S)-4-(2，-乙基苯基)-2，3-歧溱基丙氨酸l以下流程19描述了(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-(2-乙基笨基)噠。秦-3-基)丙酸叔丁酯的合成。流程19-BrPOBr3N-澳琥珀酰亞胺A舊N，CCI4曰波，1.5hBr、二NBr1.Ph2C-NCH2C02tBu,澳化O-烯丙基-N-(9-蒽基甲基)辛可尼丁鋱，2-叔丁基亞氨基-2-二乙^^基-l^-二甲基-全氫-1^2-二氮雜礴雜環(huán)己蜂CH2CI2，-78eC2.15%檸檬酸3.FmocCl,Na2C03,1:1THF/H20從CHiCl2/己坑中重結晶且對母液進行分離、,0A、，C02tBu2-乙基苯基硼酸甲笨/iPrOH/H20Na2C03PdCI2(PCy3)2-Br40%,RnocHN^C02fflu3-溴-6-曱基噠嗪攪拌2.20g3-甲基噠。秦-6-醇(20.0mmol)及13.06g磷酰溴(45.6mmo1,2.3當量)的混合物并將其加熱至130攝氏度(油浴)，保持50min。在水浴中冷卻固體反應混合物并添加約20g石爭水。在水浴中冷卻所得溶液，并添加50%KOH，進行中和。收集所得固體，用水洗滌且經空氣干燥15h。通過硅膠色譜(使用乙醚/二氯曱烷(3:17)作為洗脫劑)(5xl5cm色譜柱)來純化，得到1.37g呈淡黃色固體的標題化合物，產率39%。3-溴-6-(溴曱基)吡啶向1.00g(5.78mmol)3-溴-6-曱基噠。秦及1.03g(5.79mmo1，1.0當量)經重結晶的N-溴琥珀酰亞胺于20mL四氯化碳中的溶液中添加95mgAIBN。用氬氣將反應混合物凈化2次并抽真空，隨后使其在氬氣下回流。3h后，將反應混合物冷卻至室溫，過濾并濃縮濾液，得到黃色油狀物?；旌衔镏苯油ㄟ^硅膠色譜(使用己烷/二氯曱烷(l:9)作為洗脫劑)(5xl2cm色譜柱)來純化，得到444mg無色油狀物，產率30%。(S)-2-(((9H-芴_9_基)曱氧基)餘氨基)_3-(6-溴噠嗪-3-基)丙酸叔丁酯經5min向在-78。C及氬氣下經攪拌的374mg(1.48mmol)3-溴-6-(溴曱基)噠嗪、439mg(l,48mmol，1.0當量)1(二苯基亞甲基氨基)乙酸叔丁酯及112mg(0.186mmo1，0.12當量)溴化0-烯丙基-N-(9-蒽基曱基)辛可尼丁i貧于4mL二氯曱烷中的混合物中添加0.645mL(2.23mmo1,1.5當量)2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-l,3-二曱基-全氫-l,3,2-二氮雜磷雜環(huán)己烯。在-78。C攪拌反應混合物lh,隨后使其在原位溫熱至-4(TC。16h后，混合物直接通過硅94膠色譜(使用乙酸乙西旨/二氯曱烷(l:9)作為洗脫劑)(5xl0cm色語柱)來純化，得到540mg黃色油狀物，產率78%。向在室溫及氬氣下經攪拌的上述產物于lOmLTHF中的溶液中添加10mL15%檸檬酸水溶液。16h后，用水(5mL)稀釋反應混合物且用乙醚(10mL)洗滌兩次。接著，用固體碳酸鈉使水相達到pH為9且用二氯甲烷萃取兩次。合并二氯曱烷萃取液，用^L酸鈉干燥并濃縮。將所得油狀物溶解于5mLTHF中且在室溫用5mL10%碳酸鈉溶液隨后用480mg(1.86mmo1，1.3當量)9-藥基曱基氧基碳酰氯加以處理。6h后，用二氯曱烷萃取反應混合物兩次，用硫酸鈉干燥，過濾，濃縮并通過硅膠色譜(使用乙酸乙西旨/二氯曱烷(l:5)作為洗脫劑)(5xl5cm色譜柱)加以純化，得到507mg無色油狀物，產率65°/。。手性HPLC分析(4.6x250mmAD色譜柱，38:1:1庚烷:曱醇乙醇作為洗脫劑，流速為lmL/min)指示40%對映異構體過量。(2S)-2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基氨基)-3-(6-(2-乙基苯基)噠溱-3-基)丙酸叔丁酯向經攪拌的507mg(0.967mmol)(S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-溴噠。秦-3-基)丙酸叔丁酯及290mg(1.9Smmo1，2當量)乙基苯基硼酸于16mL1:1異丙醇/曱苯中的漿液中添加8.0rnL2M》友酸鈉水溶液。用氬氣凈化反應混合物2次并抽真空，隨后添加35.7mg(0.048mmo1，0.05當量)二(三環(huán)己基膦)二氯化鈀(II)且再次用氬氣凈化混合物并抽真空。在90。C及氬氣下加熱經快速攪拌的混合物。8h后，將反應混合物冷卻至室溫，且部分濃縮，除去異丙醇。使殘余物在乙酸乙酯與水之間分配，且再用乙酸乙酯萃取水相1次。合并有機萃取液，濃縮并將殘余物再溶解于2mLTHF中。向此溶液中添加300mg(1.17mmol)氯曱酸9-芴基曱酯及l(fā)OO(iL三乙胺。21h后，用乙酸乙酯稀釋反應混合物且用鹽水洗滌一次。用硫酸4美干^有機相，過濾并濃縮。通過硅膠色譜(使用乙酸乙酯/二氯曱烷(l:2)作為洗脫劑)(2.5xl5cm色譜柱)來純化，得到428mg呈無色油狀物的所需化合物，產率81%。實施例18合成(2S)-2-(叔丁氧羰基絲)-3-(5-鄰甲苯基他咬-2-基)丙酸Boc-(S)-4-(2，-甲基苯基)-2-吡咬基丙氨酸)95以下流程20描述了(2S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(5-鄰曱苯基吡啶-2-基)丙酸的合成。流程20ol一一O義Zri"CuNHBocBr(Ph3P)2PdCl2,苯，DMA'70。C,14hNa2C03，Pd(Cy3P)2CI2HzO-DME2.NaOH/H20BocHN'C02H(S):(叔丁氧羰基氨基)-3-(5-溴吡咬-2-基)丙酸甲酯將經氬氣凈化并抽真空的210mg鋅-銅偶聯(lián)物(zinc-coppercouple)(根據(jù)OrganicSynthesisCollectiveVolume5，page855來制備)及580mg(1.76mmol)3-碘丙氨酸的漿液溶解于7mL苯中，向所述苯中添加0.5mLN,N-二曱基乙酰胺。在密封燒瓶中以超聲波處理漿液40min，隨后添加500mg(1.76mmo1，1.0當量)5-溴-2-碘吡啶及82mg(0.11mmo1，0.06當量)二(三苯基膦)二氯化鈀。用氬氣將反應混合物再凈化2次并抽真空，隨后使其在7(TC及氬氣下加熱15h。冷卻反應混合物，且j吏其在水與EtOAc之間分配。分離各層，并再用EtOAc萃取水層1次。合并有機萃取液，用硫酸鎂干燥，過濾，濃縮并真空干燥，得到呈黃色色油狀物的粗產物。通過硅膠色譜(使用CH2C12/己烷(3:l)作為洗脫劑)(2.5xl5cm色語柱)來純化，得到288mg呈黃色油狀物的預期化合物，產率46%。(2S)-2-(叔丁氧MJU")-3-(5-鄰曱苯基吡咬-2-基)-丙酸向經攪拌的285mg(0.79mmol)(S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-(5-溴吡啶-2-基)丙酸曱酯及162mg(1.19mmo1，1.5當量)2-曱基苯基硼酸于7mL1,2-二甲氧基乙烷中的漿液中添加168mg(1.59mmo1，2.0當量)碳酸鈉及0.5mL水。用氬氣將反應混合物凈化2次并抽真空，隨后添加29mg(0.040mmo1，0.05當量)二(三環(huán)己基膦)二氯化鈀(II)且再次用氬氣凈化混合物并抽真空。在80。C及氬氣下加熱經快速攪拌的混合物。14h后，將反應混合物冷卻至室溫，且添加4mL1N氫氧化鈉溶液。將反應混合物加熱至70°C,保持lh。冷卻至室溫后，用乙醚萃取混合物1次。用10。/。硫酸氪鈉溶液將水相酸化至pH為3,接著用DCM萃取兩次。合并DCM萃取液，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到黃色半固體。通過制備性反相HPLC(YMCODSS530x100mm色謙柱，10%至90。/。AcCN/水梯度(0.1%TFA)，10min),濃縮后得到46.5mg呈白色無定形固體的所需產物，產率17%。實施例19以下流程21描述了(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-苯基吡啶-3-基)丙酸酯類似物的通用合成方法。流程21FmocNH，力r2.當量R-B(OH)2Br4.當量2M碟酸鈉0.1當量PdCl2(PCy)3)21:1=甲苯:異丙醇80°C，4h,氬氣通過硅膠色譜純化7065%得率FmocNH，TFA/CH2CI2室溫T3hrs>90%得率R~B(OH)2=芳基賴酸或雜芳基硼酸-R,FmocNH(2S)-2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)絲#1^)-3-(6-[(3-氯-4-氟)苯基1吡咬-3-基)丙酸叔丁酯向圓底燒瓶中添加300mgFmoc-L-(渙-3-吡啶基)丙氨酸(0.573mmo1)、200mg3-氯-4-氟苯基硼酸(1.145mmo1，2當量)、L145mL2M碳酸鈉溶液(2.29mmo1,4當量)、5mL曱苯、5mL異丙醇及42mgPdCl2(PCy)3)2(0.0573mmol,0.1當量)。用氬氣凈化反應溶液，隨后使其達到80°C,保持5h。將反應混合物冷卻至室溫，且用50mLEtOAc加以稀釋。用水(30mL)及鹽水(20mL)洗滌溶液，用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。使粗油狀物經歷硅膠色語(12g硅膠，0-40。/。EtOAc/己烷梯度)，得到245mg呈油狀物的所需化合物(產率75%)。(2S)-2-(((9H-藥-9-基)曱氧基)絲絲)-3-(6-[(3-氯-4-氟)苯基吡咬-3-基)丙酸向(2S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-[(3-氯-4-氟)苯基]吡啶-S-基)丙酸叔丁酯(240mg，0.429mmol)及3mL二氯'曱烷的溶液中添加TFA(3mL)。在室溫攪拌反應混合物5h。蒸發(fā)溶劑至干且使殘余物經歷制備性HPLC(曱醇-水梯度(0.1。/。TFA))。濃縮含有產物的餾分，得到200mg(產率93°/0)呈TFA鹽形式的所需化合物。實施例20以含有處于第IO位及第ll位的非天然非市售氨基酸的二肽基樹脂為起始合成肽的通用方法含有處于第IO位及第11位的非天然非市售氨基酸的二肽基樹脂，隨后利用自動同時合成方案于MPS-396肽合成儀上繼續(xù)肽鏈延長。通過用DMF(2xl0mL/g，lmin)洗滌來使量足以合成若干種肽類似物的9-Fmoc-氨基站噸-3-基氧基-Merrifield樹脂(Sieber酰胺樹脂；載量為0.5mmol/g;Novabiochem)溶脹。隨后，通過用DMF中的20。/。哌啶(10mL/g)進行兩次處理(各自分別5min及15min)來除去Fmoc基團。用DMF(2xl0mL/g)及NMP(4xl0mL/g)洗滌樹脂。將Fmoc-(S)-4-(2，-甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-()H(HCl鹽)(1.2當量)或其類似物、PyBOP(1.07當量)、HOBt(1.07當量)及DIEA(3.6當量)在NMP中的溶液添加至樹脂中。隨后，振蕩或渦漩樹脂18小時。使用定性茚三酮測試來監(jiān)測偶聯(lián)完成。抽干樹脂，用NMP(3xl0mL/g)及DCM(3x1OmL/g)洗滌，且用DCM中的2.6%乙酸酐和2.4。/。DIEA(v/v)歷時30min對任何未經反應的胺進行封端。DMF洗滌(3xl0mL/g)后，用DCM中的10%乙酸酐和2。/。D正A(v/v)重復進行封端方案歷時30min。定量Fmoc確定測試指示0.39mmol/g取(0.39mmol/gramsubstitution)。接著如上文所述，以用DMF中的20%哌，定除去Fmoc基團為起始，且在若干次DMF洗滌后，向脫保護的樹脂中添加Fmoc-L-(2，-乙基-4，-曱氧基)聯(lián)苯基丙氨酸-OH(1.27當量)或其類似物及HOBt(1.29當量)在NMP(4mL)中的溶液，對其進行渦漩5min，由此進行第二次手動偶聯(lián)循環(huán)。接著，將DIC(1.27當量)添加至樹脂漿液中且振蕩或渦漩樹脂15小時。抽干樹脂，用NMP(3x1.OmL/g)及DCM(3x1OmL/g)洗滌并隨后用DCM(1OmL)中的5.0%乙酸酐和1.00/oDIEA進行封端30min。最后用DCM(3xl0mL/g)洗滌樹脂。此合成流程產生所需經Fmoc保護的二肽基-Sieber酰胺樹脂。98如前文所述除去Fmoc基團。將Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH(3當量)及HOBt(3當量)在NMP(2mL)中的溶液渦漩5min，隨后添加DIC(3當量)。將所得溶液添加至樹脂中。隨后，振蕩或渦漩樹脂2小時。抽干樹脂，且用NMP(3x10mL/g)及DCM(3x10mL/g)加以洗滌。使用定性茚三酮測試來監(jiān)測偶聯(lián)完成。使上述樹脂再經歷2次如本申請所述的脫保護/偶聯(lián)循環(huán)，從而將Xw至Xaall的所需序列組裝到樹脂上。依次使用的Fmoc-氨基酸如下Fmoc-L-Ser(tBu)-OH及Fmoc-L-Thr(tBu)-OH。使用以下方案來偶聯(lián)Fmoc-[(S)-2-氟-a-Me-Phe]-OH。將Fmoc-[(S)-2-氟-a-Me-Phe]-OH(1.5當量)、PyBOP(1.5當量)、HOBt(1.5當量)及DIEA(3.0當量)在NMP(2mL)中的溶液添加至樹脂中。隨后，振蕩或渦旋樹脂2小時。抽干樹脂，且用NMP(3x10mL/g)及DCM(3x10mL/g)力。以洗滌。為了偶聯(lián)殘基Xaa5，如前文所述除去FmOC基團。短暫渦漩Fmoc-The(tBu)-OH(5當量)及2-Cl-HOBt(5當量)及DIC(5當量)在NMP(4mL)中的溶液，隨后將其添加至樹脂中。隨后，振蕩或渦漩樹脂18小時。抽干樹脂，且用NMP(3xl0mL/g)及DCM(3xl0mL/g)力。以洗滌。用DCM中的10.0%乙酸酐(10mL/g)歷時30min對樹脂進行封端。DCM洗滌(3x10mL/g)后，如前文所述除去Fmoc基團，且如關于Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH所述那樣，對Fmoc-Gly-OH即殘基Xaa4進行偶聯(lián)/脫保護。使用所得Xaa4-Xaall肽基-樹脂來合成如下不同的肽類似物。合成SEQIDNO:118的化合物使本申請所述的Xaa4-Xaall肽基-樹脂(0.067mmol)樣品與經預先渦漩5min的Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH(5當量)即殘基Xaa3及0.5MHOAt(5當量)在DMF中的溶液及DIC(5當量)一起渦漩18小時。抽干樹脂，用DMF(4x3mL)洗滌。使結合樹脂的肽(0.034mmol)脫保護，且使其如前文關于殘基Xaa3所述那樣與Fmoc-[(S)-a-Me-Pro]-OH(5當量)偶聯(lián)，得到結合樹脂的Fmoc—[Xaa2—Xaall]—雙。使樹脂(0.017mmol)脫保護且使其如關于殘基X^所述那樣與Boc-L-His(Trt)-OH(5當量)偶聯(lián)。通過用TFA/7jc/三異丙基甲硅烷(94:3:3)(5.0mL)處理3hr，使所需肽從其各自的肽基-樹脂裂解/脫保護。濾除樹脂，用TFA(1.0mL)漂洗，且蒸發(fā)合并的TFA濾液，得到39mg呈油狀固99體的粗肽產物。通過制備性HPLC(使用的梯度為經20min從0.1。/。TFA/水中的5。/0(0.1。/。TFA/AcCN)變?yōu)?.1。/。TFA/水中的65。/。(0.1。/oTFA/AcCN》來純化上述粗肽產物。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到5.4mg(18.9。/?；厥章?SEQIDNO:118的化合物。合成SEQIDNO:119的化合物使上文合成方法中所述的Fmoc-[Xaa3-Xa^]-肽基-Sieber樹脂(0.015mmol)樣品與經預先渦旋5min的Fmoc-[N-曱基-D-Ala]-OH(5當量)及0.5MHOAt(5當量)在DMF中的溶液及DIC(5當量)一起渦漩4小時。抽干樹脂且用DMF(4x3mL)加以洗滌。通過用DMF(3mL)中的20%哌咬處理5min及15min來除去Fmoc基團。用DMF(8x3mL)洗滌樹脂，隨后使其如前文合成中所述那樣與Boc-L-His(Trt)-OH(5當量)偶聯(lián)。通過用TFA/水/三異丙基曱硅烷(94:3:3)(5.0mL)溶液處理3hr，使所需肽從其各自的肽基-樹脂裂解/脫保護。濾除樹脂，用TFA(1.0mL)漂洗，且蒸發(fā)合并的TFA濾液。將所得油狀固體溶解于AcCN/水(l:l)(2mL)中，且通過制備性HPLC(所使用的梯度65。/。(0.1。/。TFA/MeCN)加以純化。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到5.2mg(18.5。/?；厥章?SEQIDNO:119的化合物。合成SEQIDNO:133的化合物使先前合成中所述的經Fmoc脫保護的[Xaa2-Xaal,]-肽基-Sieber樹脂(0.017mmol)樣品與脫氨基-His(Trt)-OH(5當量)及HATU(5當量)在含0,5MHOAt的DMF(5當量)中的溶液及2MDIEA于NMP(5當量)中的溶液一起渦漩18小時。抽干樹脂，且用DMF(6x2mL)及DCM(3x2mL)力口以洗滌。通過用TFA/水/三異丙基曱硅烷(94:3:3)(5.0mL)溶液處理3hr,使所需肽從其各自的肽基-樹脂裂解/脫保護。濾除樹脂，用TFA(1.0mL)漂洗，且蒸發(fā)合并的TFA濾液。將所得油狀固體(32mg)溶解于AcCN/水(l:l)(2mL)中，且通過制5。/0(0.1。/。TFA/MeCN)變?yōu)?.1。/。TFA/水中的65。/。(0.1。/。TFA/MeCN)加以純化。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到7.4mg(24.6。/?；厥章?SEQIDNO:133的化合物。合成SEQIDNO:120的化合物如實施例3中所述那樣，使用AppliedBiosystems433a肽合成儀的0.P/。TFA/水中的FastMocTM方案，使如前文所述那樣制備的經Fmoc脫保護的[XaaK)-Xaan]-:肽基-Sieber樹脂(0.05mmol)樣品再經歷9次偶聯(lián)循環(huán)。將經Fmoc保護的二肽基-樹脂(0.05mmol)置于儀器上的適當尺寸的容器中，用NMP洗滌6次，并通過用20。/。哌咬/NMP進行兩次處理(分別為2min及8min)來脫保護。又進行一次經監(jiān)測的脫保護步驟，直至監(jiān)測選項的狀態(tài)令人滿意?？偟拿摫Ｗo時間為10-12min。用NMP將經脫保護的二肽基-樹脂洗滌6次，隨后使其與下一個氨基酸發(fā)生偶聯(lián)。通過下一步驟中所使用的實施例來說明所述程序。接下來使用以下方法來偶聯(lián)Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH:將Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH(lmmo1，20當量)溶解于2mLNMP中，并通過隨后添加DMF(2.2mL)中的0.45MHBTU/HOBt及2MD正A/NMP(lmL)來進行活化。接著，將經活化的經Fmoc保護的氨基酸的溶液轉移至反應容器中，且使偶聯(lián)進行30-60min，這取決于來自脫保護步驟的反饋。接著，用NMP洗滌樹脂6次且重復偶聯(lián)方案。使其再經歷5次如本申請所述的脫保護/偶聯(lián)循環(huán)，從而完成所需Xaa4至X函序列的組裝。依次偶聯(lián)的FmOC-氨基酸為Fmoc-L-His(Trt)-OH、Fmoc-L畫Thr(tBu)-OH、Fmoc-(S)-2-氟-a-Me-Phe-OH、Fmoc-L-Thr(tBu)-OH及Fmoc-Gly-OH。最后，用NMP及DCM洗滌肽基-樹脂6次。將經Fmoc保護的二肽基-樹脂(0.025mmol)以在N,N-二曱基曱酰胺/二氯曱烷(55:45)中的漿液的形式添加至ACT396多肽合成儀中。用DMF洗滌樹脂2次且如實施例1中所述那樣通過用1.5M哌咬/DMF進行2次處理來使其脫保護。通過隨后添加DMF中的0.5MHOAt(4.0當量)及DIC(4.0當量)來活化Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH(4.0當量)，手動將其轉移至反應容器中且使其偶聯(lián)2hr。在渦漩下用NMP(4x0.5mL)漂洗樹脂lmin。如關于前文偶聯(lián)所述那樣使Fmoc基團脫保護后，如下偶聯(lián)Fmoc-[(S)-a-Me-Pro]-OH:通過隨后添加經NMP(0.12mL)稀釋的DMF中的0.5MHOAt(2.4當量)及DIC(2.4當量)來使Fmoc-[(S)-a-Me-Pro]-OH(2.4當量)活化。將溶液手動轉移至反應容器中且使其偶聯(lián)18hr。用NMP漂洗樹脂。Fmoc基團脫保護后，通過將Fmoc-L-His(Trt)-OH(4當量)在經NMP(0.2mL)稀釋的含0.5MHOAt的DMF(4當量)中的溶液及DIC(4當量)添加至反應容器中來偶聯(lián)Fmoc-L-His(Trt)-OH。使偶聯(lián)反應進行18hr。用NMP漂洗樹脂。如關于前文偶聯(lián)所述那樣除去Fmoc基團。如實施例1中所述那樣進行肽的TFA裂101解/脫保護。通過制備性HPLC(所使用的梯度為經20min從0.1。/。TFA/水中的10%(0.1%TFA/MeCN)變?yōu)?.1。/。TFA/水中的60%(0.1。/。TFA/MeCN))來使其純化。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到21.7mg(42。/?；厥章?SEQIDNO:120的化合物。實施例21合成SEQIDNO:151的化合物在AdvancedChemTechModel90合成儀上在50ml反應器中以2.67g(0.56mmol/g,1.5mmol)Sieber酰胺樹脂為起始開始所述合成。用于逐步組裝的通用脫保護/偶聯(lián)重復循環(huán)如下1.DMF洗滌lx20mlxlmin;2.DMF中的20%哌咬lx20mlx5min;3.DMF中的20%哌咬lx20mlxl5min;4.DMF洗滌3x20mlxlmin;5.NMP洗滌4x20mlxlmin;6.偶聯(lián)步驟(參見下文)；7.DMF洗滌4xl5mlxlmin;8.Kaiser茚三酮測試或裂解/脫保護伴有HPLC及質譜分析。使用上述步驟1至5，將Fmoc基團自Sieber酰胺樹脂除去。將N-a-Fmoc-4-(2，-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸(0.73g,1.50mmo1)、PyBOP(0.78g，1.50mmol)及HOBt(0.39g,1.50mmol)溶解于NMP(5ml)中，隨后將所述溶液添加至樹脂中，隨后添加DIEA(0.39g,3.05mmo1)。渦旋偶聯(lián)混合物16小時。用DCM中的10。/。乙酸酐(lx50mLx60min)處理樹月旨，用DCM(4x50mLxlmin)洗滌且真空干燥過夜。Fmoc確定測試表明取代程度為0.456mmol/g。用3.11g(1.42mmol)樹脂繼續(xù)合成。樹脂脫保護后，將N-a-Fmoc-L-Bip(2，-Et-4，-OMe)-OH(0.98g，1.9mmol)和HCTU(0.78g，1.9mmo1)在NMP(5ml)中的溶液添加至樹脂中，隨后添加D正A(0.48g，3.80mmol)且渦旋混合物16hr。用NMP洗滌后，Kaiser茚三酮測試呈陰性。樹脂脫保護后，使用NMP(10ml)中的HCTU(1.03g，2.49mmol)及D正A(0.65g,5,03mmo1),對N-oc-Fmoc-L-天冬氨酸(3-叔丁S旨(0.6487g,1.24mmol)進行偶聯(lián)，歷時48hr。樹脂脫保護后，使用DMF(l1.5mL，6.3mmol)中的0.546MHOAt及DIC(0.96mL,6.3mmo1)，對N-a-Fmoc-N-im-三苯曱基-L-組氨酸(3.85g,6.25mmol)進行偶聯(lián)，歷時16小時。重復所述方案，使N-a-Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸(2.5g,6.30mmol)與樹脂偶聯(lián)。樹脂脫保護后，將含0.546MHOAt的DMF(3.4mL,1.87mmol)中的N-a-Fmoc-a-曱基-2-氟-L-苯基丙氨酸(0.78g,1.86mmol)添加至樹脂中，隨后添加DMF(3.5ml)中的DlC(0.24g,1.87mmo1),且使偶聯(lián)進行4小時。樹脂脫保護后，使用0.546MHOAt于DMF(25mL,12.50mmol)中的溶液及DIC(1.58mL,12.52mmo1)，對N-a-Fmoc-0-叔丁基-L畫蘇氨酸(4.97g，12.50mmol)進行偶聯(lián)16小時。用DMF(20mL)中的10%乙酸酐歷時1小時對樹脂進行封端且用DMF(4x20mL)加以洗滌。除去Fmoc基團，且如關于先前N-a-Fmoc-L-天冬氨酸(3-叔丁酯偶聯(lián)步驟所述那樣，歷時90min對N-Fmoc-甘氨酸(l.1lg,3.75mmol)進行偶聯(lián)，隨后以相同方式偶聯(lián)N-a-Fmoc-L-谷氨酸y-叔丁酯(1.60g,3.75mmo1)。使部分肽基-樹脂(0.030mmo1)脫保護，且使用DMF(0.110ml，0.83mmol)中的0.546MHOAt及DMF(0.1ml)中的DlC(7.6mg，0.06mmol)來偶聯(lián)N-a-Fmoc-a-曱基-L-脯氨酸(21.2mg，0.06mmo1)16小時。最后，將NMP(0.9mL)中的L-卩-(N-l-三苯曱基)咪唑乳酸(39.8mg，0.10mmol)及HATU(38mg，O.lOmmol)添加至部分肽基-樹脂(O.Olmmol)中，隨后添加DIEA(17.4mL,O.lOmmol)。渦漩1小時且用NMP洗滌后，如上所述重復進行偶聯(lián)且使其進行48小時。用TFA/TIS/水(94:3:3)(2mL)處理結合樹脂的肽，隨后以TFA/TIS/水(94:3:3)漂洗兩次(2xlmL)。真空濃縮合并的濾液，得到18.1mg(92。/。)粗肽。將其溶解于2mLAcCN/水(l:l)中，并將溶液加載于Luna[C18(2)，5nm]Phenomenex色譜柱(250x21.2mml.D.)上。用溶劑A中15%至55%溶劑B的梯度以15ml/min的流速經50min洗脫色語柱。溶劑A為水中的0.1%TFA。溶劑B為AcCN中的0.1。/。TFA。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到4.2mgSEQIDNO:151的化合物。實施例22合成(S)-3-(N-l-三苯曱基-咪唑-4-基)-2-羥基丙酸(L-p-(N-l-三苯甲基)咪唑乳酸)以下流程22描述了(S)-3-(N-1-三苯曱基-咪唑-4-基)-2-羥基丙酸的合成。流程22》H+6吡力乙腈~"N=/^0將(S)-3-(lH-咪唑-4-基)-2-羥基丙酸(0.5265g,3.0mmol)及三苯曱基氯(L2991g，4.7mmol)裝入lOOmL燒瓶中。在攪拌下添加吡啶/AcCNl:l(20mL)。在油浴中在50。C至55。C加熱燒瓶4小時。在旋轉蒸發(fā)器上除去溶劑至接近干燥。向殘余物中添加等體積的水及乙酸乙酯(各30mL)。攪拌混合物約20min。過濾收集所得固體，用水(2xl0mL)隨后用乙酸乙酯(2xl0mL)洗滌，并在真空中進行干燥。產量0.6953g(58%)。實施例23合成(S)-3-(N-l-(2，4-二硝基苯基)咪唑-4-基)-2-羥基丙酸(L-p-(N-l-(2，4-二硝基苯基)咪唑乳酸)以下流程23描述了(S)-3-(N-l-(2,4-二硝基苯基)咪唑-4-基)-2-羥基丙酸的合成。流程23HO人H八AcCNH0X^H02N阻。2N將(S)-3-(1H-咪唑-4-基)-2-羥基丙酸一水合物(0.8971g,5.2mmol)、AcCN(60mL)、D正A(1.3438g,10.4醒ol)及l(fā)-氟-2，4畫二硝基苯(0.9564g,5.1mmol)裝入圓底燒瓶中，用鋁箔覆蓋并攪拌過夜。過濾反應混合物并在減壓下除去溶劑。油狀殘余物用二異丙基醚(2x20mL)研磨，隨后將其溶解于氯仿(20mL)中并自氯仿及AcCN再蒸發(fā)。添加DCM(60mL)，產生沉淀物，添加更多DCM(30mL)后在室溫進行攪拌。收集固體產物，用DCM(2xl0mL)洗滌并在真空中干燥過夜。產量1.37g(83%)。實施例24合成SEQIDNO:158的化合物方法A.片段偶聯(lián)(流程10A及10B)在8ml反應器中，以0.1896g(0.56mmol/g,O.llmmol)Sieber酰胺樹脂為起始，手動進行所述合成。使用以下循環(huán)將Fmoc基團自樹脂除去1.DMF洗滌lx2mlx5min;1042.DMF中的20。/。派p定lx2mlx5min;3.DMF中的20°/。派咬lx2mlxl5min;4.DMF洗滌8x2mlxlmin。將N-a-Fmoc-4-(2，-曱基苯基)-3-吡咬基丙氨酸HC1鹽(0.0549g,0.1lmmol)及PyBOP(0.0667g，0.13mmol)溶解于DMF(lml)中。將此溶液添加至經脫保護的樹脂中，隨后添加DMF(lmL)中的DIEA(0.0423g,0.33mmo1)。渦旋樹脂3.5小時，用DMF及DCM(4x2mLxlmin)洗滌。用DCM(2mL)中的10%乙酸酐將樹脂處理過夜，用DCM(6x2mLxlmin)洗滌且真空干燥1小時。產量0.2508g。Fmoc確定測試表明取代程度為0.35mmol/g。將0.083g(0.029mmol)樹脂用于下一步驟中。使用上述循環(huán)1至4對樹脂進行脫保護后，將N-a-Fmoc-L-Bip(2，-Et-4，-OH)扁OH(0.0251g，0.049匪o1)、HOBt(0.0084g,0.055mmol)及DlC(0.0067g，0.053mmol)在DMF(lml)中的溶液添加至樹脂中。渦旋16小時后，用DMF接著DCM(4xlmLxlmin)洗滌肽基-樹脂。使用上述步驟1至3除去Fmoc基團，隨后以DMF接著DCM(4xlmLxlmin)加以洗滌。用TFA/三異丙基甲硅烷/水96:2:2(2xlmLxl0min)處理肽基-樹脂。收集濾液并在真空中濃縮成殘余物，用二異丙基醚研磨所述殘余物并離心，得到固體產物。用二異丙基醚洗滌所述產物并在真空中干，燥得到0.0244g二肽。將二肽溶解于THF(lmL)中的0.2%DIEA中，并用大孔三乙銨甲基聚苯乙丈希碳酉吏酉旨才對月旨(macroporoustriethylammoniummethylpolystyrenecarbonatercsin)(0.0682g,0.21lmmol,ArgonautTechnologies)處理2小時。除去樹脂珠粒并用THF中的0.2。/。D正A(2xlmL)洗滌。真空干燥合并的濾液及洗滌液。向所得殘余物中添加側鏈經保護的N-曱氧羰基XaarXw9聚體肽(55.8mg，0.035mmo1)、HOBt(5.47mg，0.036mmol)及DIC(6pL,0.035mmol)在CHCl3/DMF9:l(lmL)中的溶液。渦漩所得溶液過夜。真空除去溶劑后，所得殘余物用TFA(lmL)中的2。/。三異丙基曱硅烷處理卯min，此后添加二異丙基醚(20mL)。干燥沉淀的固體并將其溶解于2mL1.5%氫氧化銨中。用乙酸將pH值調至約9.5。將此溶液加載于Luna[C18(2),5nm]Phenomenex色譜柱(250x21.2mml.D.)上。用梯度為20%至50%的溶劑B以15ml/min的流速經60min洗脫色譜柱。溶劑A為水中的0.1%TFA。溶劑B為AcCN中的1050.1%TFA。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到5.5mgSEQIDNO:158的化合物。遵循流程10B中所述的方法以不同的片段偶聯(lián)程序來合成SEQIDNO:158的化合物。如此實施例中先前所述，在8ml反應器中以0.1182g(0,47mmol/g,0.056mmol)N_a-Fmoc-4-(2，-曱基苯基)-3-吡咬基丙氨?；?Sieber酰胺樹脂為起始，手動進行所述合成。用于將Fmoc基團自樹脂除去的循環(huán)與上述循環(huán)相同。如上文所述，使N-a-Fmoc-L-Bip(2，-Et-4，-OH)-OH(0.0419g,0.083腿ol)與樹脂偶聯(lián)。用DCM(2mL)中的10%乙酸酐處理樹脂30min,用DCM洗滌(6x2mlxlmin)及除去Fmoc基團，此后將側鏈經保護的N-甲氧羰基XaarXaa99聚體肽(O.i347g:0.084mmol)、HOBt(0.0130g，0.085薩ol)及DIC(0.0118g,0.94mmol)在DCM(0.1mL)及DMF(0.45mL)中的溶液添加至經脫保護的二肽基-樹脂中并渦旋混合物4.5小時。用DMF及DCM(4x2mLxlmin)洗滌樹脂，隨后用TFA中的2%三異丙基曱硅烷和2。/。水處理(5xlmLx3min),收集濾液并使其靜置75min。在真空中除去溶劑并用二異丙基醚(20mL)研磨所得殘余物，得到呈固體的粗肽(0.0818g)。如上文所述純化此粗肽，但所使用的梯度為溶劑A中25%至35%的溶劑B(歷時120min),流速為15ml/min。溶劑A為水中的0.1%TFA。溶劑B為AcCN中的0.1%TFA。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到19mgSEQIDNO:158的化合物。方法B.逐步延長(流程1)在AdvancedChemTechModel90合成儀上50ml反應器中以1.46g(0.72mmol/g，1.05mmol)Sieber酰胺樹脂為起始進行所述合成。用于逐步組裝的通用脫保護/偶聯(lián)重復循環(huán)如下1.DMF洗滌1x15mlxlmin;2.DMF中的20%哌啶lxl5mlx5min;3.DMF中的20%哌啶lxl5mlxl5min;4.DMF洗滌4xl5mlxlmin;5.NMP洗滌4xl5mlxlmin;6.偶聯(lián)步驟(參見下文)；7.DMF洗滌4xl5mlxlmin;8.DCM洗滌4xl5mlxlmin;1069.Kaiser茚三酮測試或裂解/脫保護伴有HPLC及質譜分析。使用上述步驟1至5將Fmoc基團自Sieber酰胺樹脂除去。將N-a-Fmoc-4-(2-甲基苯基)-3-吡咬基丙氨酸HC1鹽(1.0977g，2.13mmo1)、PyBOP(1.0972g,2.11mmol)及HOBt—水合物(0.3228g,2.11mmol)溶解于DMF(8ml)中。將DIEA(0.8052g，6.23mmol)添加至溶液中，隨后將其添加至樹脂中。渦漩偶聯(lián)混合物16小時。用DCM中的10。/。乙酸酐(lxl5mLx60min)處理樹脂，用DCM(6xl5mLxlmin)洗滌且真空干燥6小時。產量1.6816g。Fmoc確定測試表明取代程度為0.48mmol/g。用0.8602g(0.41mmol)樹脂繼續(xù)合成。使樹脂脫保護后，將N-a-Fmoc-L-Bip(2，-Et-4，-OH)-OH(0.2660g，0.524mmo1)、HOBt(0.0796g,0.520mmol)及DlC(0.0647g，0.513mmoI)在DMF(8ml)中的溶液添加至樹脂中且渦漩混合物16hr。用DMF及DCM洗滌后，Kaiser茚三酮測試呈陰性。樹脂脫保護后，使用DMF/DCM(l:l)(6ml)中的HOBt(0.1893g,1.24mmol)及DlC(0.1566g,1.24謹ol)來偶聯(lián)N-a-Fmoc-L-天冬氨酸卩-叔丁酯(0.6487g，1.24醒ol)45min。以N-a-Fmoc畫O-叔丁基-L-絲氨酸(0.4750g，1.24mmol)及N-a-Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸(0.4924g,1.24mmol)重復相同的偶聯(lián)循環(huán)。樹脂脫保護后，使用DMF/DCM(l:l)(6ml)中的HOBt(0.1271g，0.830mmol)及DlC(0.1044g，0.827mmol)來偶聯(lián)N-a-Fmoc-a-曱基-2-氟-L-苯基丙氨酸(0.3497g，0.834mmo1),歷時1小時。樹脂脫保護后，使用0.5MHOAt于DMF(8.3mL,4.15mmol)中的溶液及DIC(0.5240mL，4.15mmol)來偶聯(lián)N-a-Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸(1.6413g,4.14mmo1)，歷時16小時。DMF及DCM洗滌后，用lml丁FA/TIS/水(96:2:2)處理3mg濕樹脂，歷時1.5小時。濾除樹脂，且在旋轉蒸發(fā)器中除去溶劑。將殘余物溶解于2ml水/AcCN(l:l)中。HPLC及MS分析表明無未偶聯(lián)的肽。除去Fmoc基團，且如先前關于N-a-Fmoc-L-天冬氨酸卩-叔丁酯偶聯(lián)步驟所述那樣，偶聯(lián)N-Fmoc-甘氨酸(0.3691g，1.24mmol)，歷時lhr，隨后以相同方式偶聯(lián)N-a-Fmoc-L-谷氨酸y-叔丁酯(0.5297g，1.24mmo1)。隨后，使用DMF/DCM(l:l)(6ml)中的HOBt(0.1271g,0.83mmo1)及DlC(0.1042g,0.83mmol)來偶聯(lián)N-a-Fmoc-a-曱基-L-脯氨酸(0.2902g，0.83mmo1),歷時3.5小時。最后，如關于偶聯(lián)N-a-Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸與N-a-Fmoc-a-曱基-2-氟-L-苯基丙氨酸所述那樣，使N-a-Fmoc-N-im-三苯曱基-L-組氨酸(2.5564g,4.13mmol)偶聯(lián)12小時。如上文所述自肽基-樹脂釋放的經脫保護的肽樣品經MS證實具有部分未偶聯(lián)的肽。手動除去Fmoc基團，且用DMF及DCM洗滌，此后添加N-(曱氧羰基氧基)琥珀酰亞胺(0.2163g,1.25mmol)在DCM(6mL)中的溶液并渦旋混合物16小時。用DCM(4xl0mlxlmin)洗滌肽基-樹脂。Kaiser茚三酮測試呈陰性。用TFA/TIS/水(96:2:2)(10mL)處理N-曱氧羰基衍生化的肽基-樹脂10min,隨后又用每次5mL進行兩次處理。使合并的濾液在室溫再靜置2小時。真空濃縮至約4mL后，在攪拌下將溶液逐滴添加至乙醚(50ml)中。過濾收集所得固體，用乙醚(2x5ml)洗滌且真空干燥，得到0.691g(92。/。)粗肽。此粗肽通過制備性HPLC(使用本實施例方法A中所述的程序)來純化。實施例25合成N-(甲氧羰基氧基)琥珀酰亞胺[碳酸2，5-二氧代吡咯烷-1-酯.曱酯以下流程24描述了N-(曱氧羰基氧基)琥珀酰亞胺[碳酸2，5-二氧代吡咯烷-l-酯.曱酯]的合成。流程24o在-5。C及氬氣下以使溫度保持在+3。C以下的速率向經攪拌的64.61g(0.561mol)N-羥基琥珀酰亞胺及58.95g(0.624mol)氯曱酸曱酯于THF(900mL)中的溶液中添加82.6mL(0.593mol)三乙胺。攪拌反應混合物，且使其溫熱至室溫。15h后，過濾所得漿液且用THF(100mL)洗滌固體。減壓蒸發(fā)濾液，得到白色固體。由EtOAc/己烷(2:l，150mL)重結晶，得到79.4g呈白色結晶的所需產物，產率82%，熔點84-86。C。實施例26合成(R,S)-3-(l-(2，4-二硝基苯基)-咪唑-4-基)-2-曱基丙酸[a-曱基-卩-1-(2，4-二硝基苯基)-咪唑-4-基丙酸，Imp(DNP)I1-甲苯磺?；?4(5)-羥基曱基咪唑以下程序自Agr.Biol.Chem.,38(5)，1097-1099，1974修改。向Na2C03(8.4g，0.08摩爾)在水(40mL)中的溶液中添加4-(羥基曱基)咪唑鹽酸鹽(2.7g，0.02摩爾)。溶解完成后，經5分鐘逐滴添加對曱苯磺酰氯(4.58g，0.024摩爾)在乙酸乙酯(30mL)中的溶液。攪拌反應混合物5小時。分離各層并添加更多乙酸乙酯(20mL)。用0.1MNa2CO3(2x20mL)、水(lx20mL)及飽和NaCl(lx20mL)洗滌有機相。用2gMgS04及l(fā)g活性炭處理乙酸乙酯層10min。通過用硅藻土墊過濾來除去固體并在旋轉蒸發(fā)器上除去溶劑。殘余物開始結晶。添加新鮮乙酸乙酯(10mL)并用熱風槍使溶液溫熱，使固體再溶解。使產物在室溫結晶過夜。收集結晶物質，用乙酸乙酯(5mL)隨后乙醚(10mL)洗滌，且真空干燥至恒重3.59g。1-曱苯磺?；?4(5)-乙酰氧基曱基咪唑將l-曱苯磺?；?4(5)-羥基曱基咪唑(2.52g,10mmol)溶解于氯仿(10ml)中。在室溫向其中逐滴添加三乙胺(2.02g,20mmo1)，隨后歷經15min逐滴添加乙酸酐(1.33g,13mmo1)。在室溫攪拌混合物4天，且以LC/MS監(jiān)測。減壓除去氯仿且將殘余物溶解于乙酸乙酯(60mL)中。有機層依次用O.IM碳酸氫鈉、水及飽和氯化鈉(各為lx40ml)洗滌。有機層同時用活性炭及硫酸鎂處理，隨后用硅藻土墊過濾。減壓除去溶劑且將^得殘余物溶解于溫乙酸乙酯(10mL)中。向此溶液中緩慢添加20ml乙醚。在室溫使溶液結晶過夜。收集結晶，用乙醚(2xl0ml)洗滌且真空干燥過夜，得到1.55g。a-曱氧羰基-a-曱基+4-(1-曱M?；溥?-丙酸甲酯以下程序自SyntheticCommunications,19(7&8)，1157-1165,1989修改。將l-曱苯磺酰基-4(5)-乙酰氧基曱基咪唑(0.3516g,1.2mmol)及曱基丙二酸二甲酯(0.1485g,l.Ommol)在AcCN(2ml)中的溶液添加至經攪拌的粉末狀KOH(0.1694g，3.0mmol)及溴化四丁基銨(0.0496g，0.15mmol)在AcCN(lml)中的懸浮液中。通過HPLC分析確定反應在40min后完成。將反應混合物傾入乙醚(100ml)中，用硅藻土墊過濾且通過減壓蒸發(fā)來除去溶劑。將殘余油狀物溶解于30ml乙酸乙酯中并用0.1MNaHC03(lxl5ml)及飽和NaCl(lxl5ml)洗滌且以MgS04干燥。減壓除去溶劑且將所得油狀物置于干燥器中真空干燥3天，得到0.207g。a-曱基—p-4-。米哇丙酸將a_曱氧羰基-a-曱基-p-4-(1-甲苯磺酰基咪唑)-丙酸曱酯(0.186g，0.5mmol)溶解于2ml曱醇中。向其中添加1.5ml1.ONNaOH且攪拌反應混合物過夜。通過制備性HPLC進行純化后，將凍干得到的產物(0.1366g)溶解于5mll.ONNaOH中并在用襯有PTFE的蓋密封的16x100mm螺旋蓋管中在100。C加熱2小時，隨后添加2ml濃HCl且在145。C加熱6小時。形成所需脫羧基的產物。過濾所有溶液并將其加載于YMCG-340-10PODS50x20mm制備性HPLC色譜柱上。用以下梯度即0.P/。TFA/水中0%至60%的0.1。/。丁FA/MeCN經60min洗脫產物。匯集梯度中與llmin至13min相應的餾分，冷凍并凍干，得到32mg產物。a-曱基-p-l-(2，4-二硝基苯基)-咪唑-4-基丙酸向a-曱基-卩-4-咪唑丙酸(0.0305g,0.114mmol)及碳酸氬鈉(0.0617g,0.734mmol)在水(lmL)中的溶液(pH為8.04)中添加2，4-二硝基氟苯(0.0323g,0.1Mmmol)在MeCN(1.OmL)中的溶液。渦旋反應混合物過夜。減壓除去MeCN，且將殘余物再溶解于2mL水中，過濾并將其以兩份試樣(各自為1.5mL和0.5mL)加載于PhenomenexLimaC18(2)5pm100x21.2mm制備性HPLC色譜柱上。用以下梯度即0.P/。TFA/水中0%至80%的0.1%TFA/MeCN經40min洗脫產物。匯集梯度中與12.5min至14.5min相應的餾分并于SavantSpeedVacTM中干燥過夜。通過將水不溶性粗產物溶解于DMSO中來回收額外產物，隨后如上文所述進行制備性HPLC。凍千后合并餾分，得到31mg純產物。實施例27合成SEQIDNO:137及138的化合物如下文所述使(R,S)-3-(l-(2,4-二硝基苯基)-咪唑-4-基)-2-曱基丙酸與相關Xaa2-Xaa『肽基-Sieber樹脂偶聯(lián)。向(R，S)-3-(l-(2,4-二硝基苯基)-咪唑-4-基)-2-曱基丙酸(0.0267g，0.083mmo1)、6-Cl-HOBt(0.0151g，0.089mmol)及HCTU(0.0360g,0.087mmo1)在1mLNMP/DCM(3:1)中的溶液中添加DIEA(0.0315g，0.244mmo1),短暫渦漩溶液，隨后將其添加至如實施例19中所述那樣制備的相關經Fmoc脫保護的Xaa2-Xaau-肽基-Sieber樹脂中。使偶聯(lián)進行16小時。用NMP隨后用DCM(3xl.5mLxlmin)洗滌肽基-樹脂，隨后用DCM中的10%乙酸酐(lx2mLx90min)處理，隨后用DCM接著用DMF洗滌(3xl.5mLxlmin)。用DMF(1.5mL)中的10%噻吩處理肽基-樹脂lhr，且用DMF及DCM(4xl.5mLxlmin)洗滌。隨后，用TFA/DCM/TIS(3:1.9:0.l)(lmL)處理肽基-樹脂10min并過濾。收集濾液且再輕柔渦漩1小時。在旋轉蒸發(fā)器中將TFA混合物濃縮至約0.5mL并將其添加至4mLMTBE中。lhr后，離心收集沉淀的產物，洗滌隨后干燥，得到0.0841g粗產物。此粗產物通過如下的110制備性HPLC來純化溶解粗肽且將其注入PhenomenexLunaCI8(2)(5|im，250x30mm)色譜柱中，并使用以下線性梯度即0.P/。TFA/水中20%至50%的0.10/0TFA/MeCN以15mL/min的流速經40min力口以洗脫，且在217nm以UV檢測洗脫液。匯集含有所需產物的餾分并凍干，得到26.7mg純度為97.5%的肽。對所述肽進行制備性手性HPLC純化將非對映異構肽混合物(10mg)溶解于MeCN/MeOH中。將溶液加載到ChirobioticV2.2x50cm，5nm色"i普柱上并用MeCN/MeOH/N(CH2CH3)3/CH3COOH65/35/0.5/0.5以20mL/min的流速進4亍洗脫。在29min與35min之間收集異構體A。在36min與44min之間收集異構體B。如上文所述進行第二輪純化。合并含有異構體A的餾分，將其濃縮至約5mL，用水/MeCN(4:l)稀釋并使溶液凍干。以相同方式處理異構體B。通過制備性HPLC將所得殘余物轉化成TFA鹽。將各肽注入PhenomenexLunaC18(2)5|im，100x2L2mm色譜柱中，并使用以下線性梯度即0.1。/。TFA/水中20%至50%的0.1%TFA/MeCN以10mL/min的流速經40min加以洗脫，且在217nm以UV檢測洗脫液。匯集含有所需產物的餾分，冷凍并凍干，得到6.0mg經純化的肽異構體A及4.9mg經純化的肽異構體B。實施例28合成(+)-及(-)-3-(l-三苯甲基-lH-咪唑-4-基)-2-曱基丙酸[a-曱基-P-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸，Imp(Trt)(l-三苯曱基-lH-咪唑4-基)曱醇將4-羥基曱基咪唑(4.53g，34mmol)及三苯曱基氯(10.54g,38mmol)溶解于DMF(50mL)中。在攪拌下向其中添加D正A(13.46g，104mmol)且攪拌反應混合物14hr。將反應混合物傾入水(750mL)中并攪拌約30min。收集所得固體，用水(3x25mL)及二異丙基醚(3x25mL)洗滌，且真空干燥，得到11.55g(99。/o)(l-三苯曱基"H-咪唑-4-基)曱醇。純度(HPLC):93%;保留時間流程25m6.37min;色譜柱PhenomenexLunaC18(2)(5pm,50x4.6mm);梯度以1,25mL/min的流速歷時10min從A中的10%B變?yōu)锳中的100°/。B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1%TFA。ES畫MS:(M+H)+=341.1。4-(氯曱基)-l-三苯甲基-lH-咪唑經6min向經冰/水冷卻的4-羥基曱基-l-三苯曱基咪唑(6.13g，18mmol)在二氯曱烷(75mL)中的懸浮液中逐滴添加亞硫酰氯(5.0g,42mmol)。移開冰/水浴且再攪拌反應混合物30min。減壓除去DCM及SOCl2。用二異丙基醚(200mL)研磨所得固體，通過過濾進行收集并真空干燥，得到7.37g(>100%)純度為83%的4-(氯曱基)-l-三苯曱基-lH-咪唑；保留時間7.33min;色譜柱YMCODS-A(3pm，50x4.6mm);梯度以1.25mL/mm的流速歷時10min從A中的10%B變?yōu)锳中的100%B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1%TFA。LC/MS:ESI(M+H)+=359.2。2-甲基-2-((l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)甲基)丙二酸二曱酯將4-(氯曱基)-l-三苯曱基-lH-咪唑(2.73g,7.6mmol)及2-甲基丙二酸二曱酯(2.22g，15.2mmol)溶解于AcCN(30ml)中。經6min將此溶液添加至在AcCN(2mL)中攪拌的新粉碎的KOH(0.89g,15.9mmol)及溴化四丁基銨(0.25g:0.8mmol)中。攪拌3小時后，添加更多經粉碎的KOH(0.89g,15.9mmol)并攪拌混合物過夜。通過過濾除去固體并減壓除去溶劑。將殘余物溶解于EtOAc(40mL)中并用水(2x20mL)隨后用飽和NaCl(lx20mL)洗滌。減壓除去EtOAc，得到3.46g油狀殘余物。此殘余物通過在硅膠60(250g,粒度為0.040至0.063mm)流程26流程27色譜柱(5.0x30cm)上進行的快速色語(使用CHCl3/EtOAc(9:l)作為洗脫劑)來純化。以25mL為單位收集餾分且在餾分53至72中發(fā)現(xiàn)純產物。匯集這些餾分并減壓除去溶劑。將所得殘余物自CHCb(約15mL)再蒸發(fā)兩次，隨后干燥，得到1.72g純度為98%的2-曱基-2-((l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)曱基)丙二酸二曱酯；保留時間13.02min;色語柱YMCODS-A(3|im,50x4.6mm);梯度以1.25mL/min的流速歷時20min從A中的10%B變?yōu)锳中的100%B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1%TFA。LC/MS:ESI(M+H)+=469.3。'H-NMR(CDC13，400MHz):51.42(s，3H),3.15(s,2H),3.63(s,6H),6.48(s，1H),7.05-7.15(m，6H)，7.26(s,1H)7.28畫7.37(m,9H)。2-曱基-3-(l-三苯甲基-lH-咪唑-4-基)丙酸曱酯流程28向含2-曱基-2-((1-三苯曱基-1H-咪唑4-基)曱基)丙二酸二曱酯(0.7M化，1.57mmol)的NMP(5mL)中添加NaCl(0.212g)及水(0,3mL)且將混合物加熱至回流(202。C),保持4.5hr。在分液漏斗中使反應混合物在水(20mL)與EtOAc(20mL)之間分配。用EtOAc(2x20mL)萃取水相并用水(2x20mL)及飽和NaCl(lx20mL)洗滌合并的有機層并用MgS04干燥。減壓除去EtOAc,得到0.8g油狀殘余物。此殘余物通過以下方法來純化使用CHCl3(5x20mL)隨后使用CHC13中的20。/。EtOAc(8x20mL)經由硅膠墊(13.5g硅膠60，粒度為0.040至0.063mm)進行洗脫。干燥含有產物的餾分，得到0.45g純度為79%的2-曱基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸曱酯；保留時間7.35min;色譜柱YMCODS-A(3pm,50x4.6mm);梯度以1.25mL/min的流速歷時10min從A中的10%B變?yōu)锳中的100%B。溶劑A為水中的0.1°/。TFA;溶劑B為AcCN中的0.1%TFA。LC/MS:ESI(M+H)+=411.3。對2-甲基-3-(l-三苯甲基-lH-咪唑-4-基)丙酸曱酯的對映異構體進行手性分離以每次l-2.5mL將外消旋的2-曱基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸曱酯(0.45g)在異丙醇(2mL)及正庚烷(16mL)中的溶液加載到ChiralcdOD色113譜柱(20mmLD.x500mm,ChiralTechnologiesInc.)上并用庚烷中的3%異丙醇以10mL/min的流速洗脫。在58至70min的餾分中收集較快洗脫的對映異構體；在75至100min的餾分中收集較晚洗脫的對映異構體。通過減壓除去溶劑并真空干燥，得到每種對映異構體。這種方法得到0.205g較快洗脫的對映異構體即純度為98。/。的產物；保留時間9.28min;色譜柱PhenomenexLunaC18(2)(5nm,50x4.6醒)；梯度以1.25mL/min的流速歷時15min乂人A中的10%B變?yōu)锳中的100%B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1o/oTFA。LC/MS:ESI(M+H)+=411.3;旋光性[a]D=+12.9。(c=1.05,在CHC13中)。較晚洗脫的對映異構體的產量為0.203g(純度為98%);RT為9.27min。使用與關于較快洗脫的異構體所述相同的色譜柱及梯度。LC/MS:ESI(M+H)+=411.3;旋光性[a]D=-13.5°(c=1.16，在CHCb中)。(+)-及(-)-2-甲基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸流程29通過在THF(2mL)及INLiOH(0.45mL)中攪拌2小時，-使2-曱基-3-(1-三苯曱基-1H-咪唑-4-基)丙酸曱酯的較快洗脫的對映異構體(0,186g，0.453mmol)發(fā)生皂化。HPLC分析表明50。/。轉化成產物。接近完全轉化(97.5。/0)需要再添加兩次1NLiOH(各0.1mL)及攪拌總共36hr。減壓濃縮并添加水(20mL)后，用DCM(3x20mL)萃取水相并用水及飽和氯化鈉(各lx20mL)洗滌合并的DCM萃取液，且以MgS04干燥。除去DCM且真空干燥所得固體，得到0.1728g純度為97。/。的(+)-2-甲基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸；保留時間9.36min;色譜柱YMCODS-A(3nm,50x4.6mm);梯度以1.25mL/min的流速歷時15min從A中的10%B變?yōu)锳中的100%B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1%TFA。LC/MS:ESI(M+H)+=397,30,(M-H)-=395.30。旋光性[a]D=+12.8。(c=1.03，在CHC13中)。'H-NMR(CD30D,500MHz):5L13(d,3H),2.57-2.65(m,1H),2.67-2.80(m,IH)，2.82-2.92(m,1H),6.75(s，1H),7.10-7.17(m，6H)，7.34-7.41(m,9H),7.58(s,IH)。114如上文關于較快洗脫的對映異構體所述那樣，使2-曱基-3-(l-三苯曱基-舊-咪唑-4-基)丙酸曱酯的較晚洗脫的對映異構體(0.181&0.442mmol)發(fā)生皂化，得到0.163g純度為97Q/。的(-)-2-曱基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸；保留時間9.32min;色譜柱及梯度與關于(+)-異構體所述相同。LC/MS:ESI(M+H)+=397.24，(M-H)陽-395.26。旋光性[a]D=-12.2。(c=1.03,在CHC13中)。'H-NMR(CD3OD,500MHz):51.12(d,3H),2.56-2.64(m,IH)，2.68-2.78(m,1H)，2.82-2.90(m,1H),6.69(s,IH)，7.10-7.16(m,6H),7.34-7.39(m,9H),7.45(s，IH)。實施例29合成SEQIDNO:167、168、169及170的化合物以Sieber酰胺樹脂(9.56g,0.72mmol/g，6.88mmol)為起始，在AdvancedChemTechModel90合成儀上組裝SEQIDNO:167、168、169及170的經保護的Xaa2-Xaall肽序列，使用以下洗滌及脫保護方案1.DMF洗滌lx85mlxlmin;2.DMF中的20%哌咬lx85mlx5min;3.DMF中的20%。底咬lx85mlxl5min;4.DMF洗滌3x85mlxlmin;5.NMP洗滌3x85mlxlmin。將(S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-(6-鄰曱苯基吡啶-3-基)丙酸HC1鹽(6.70g,13.0mmo1)、PyBOP(7.29g，14.0mmol)及HOBt—水合物(2.14g，14.0mmol)在NMP(70ml)中的溶液添加至經脫保護的樹脂中，隨后添加DIEA(7.28g,56.3mmol)并渦漩混合物，直至對樹脂樣品進行的Kaiser茚三酮測試呈陰性(4.5hr)。樹脂用DMF(3x85mLxlmin)隨后用DCM(7x85mLxlmin)洗滌，且在真空中干燥，得到11.344g。Fmoc測定表明取代程度為0.53mmol/g。通過上述步驟1至4使樹脂脫保護及用DMF洗滌6次后，將(S)-2-(((9H-芴-9-基)曱氧基)羰基氨基)-3-((2，-乙基-4，-羥基)聯(lián)苯-4-基)丙酸[Fmoc-(S)-(2,-乙基-4，-羥基)-Bip-OH](3.79g，7.47mmol)及HOBt—水合物(U4g,7.44mmol)在DMF(50ml)中的溶液及DlC(0.94g,7.45mmol)添加至樹脂中且渦旋混合物20hr。樹脂樣品在Kaiser茚三酮測試中略呈陽性后，用DMF及DCM(均為4x85mLxlmin)洗滌肽基-樹脂，隨后用DCM中的10%乙酸酐(lxl00mLx30min)加以處理。用DCM(4x85mLxlmin)洗滌肽基-樹脂115并取出約lmmol且在真空中干燥。將二肽基-樹脂(2.50g，l.Ommol)加載到ChemTechModel90合成儀的50mL反應器中。使用以下循環(huán)來除去Fmoc基團1.DMF洗滌lx25mlxlmin;2.DMF中的20%艱咬lx25mlx5min;3.DMF中的20%派咬lx25mlxl5min;4.DMF洗滌8x25mlxlmin。將N-a-Fmoc-L-天冬氨酸P-叔丁酯(1.2345g,3.00mmol)及HOBt—水合物(0.4599g,3.00mmol)在DMF(5ml)中的溶液及DlC(0.3829g，3.03mmol)添加至經脫保護的肽基-樹脂中且渦旋混合物2小時，得到呈陰性的Kaiser茚三酮測試結果。用DMF隨后用DCM(均為4x25mLxlmin)洗滌肽基-樹脂并將其等分到Model卯合成儀的2個反應器中。隨后如下文所述繼續(xù)進行合成。使用以下循環(huán)來除去Fmoc基團1.DMF洗滌lxl2mlxlmin;2.DMF中的20%哌啶lxl2mlx5min;3.DMF中的20%哌啶lxl2mlxl5min;4.DMF洗滌8xl2mlxlmin。將N-a-Fmoc-N-im-三苯曱基-L-組氨酸或N-a-Fmoc-O-叔丁基-L-絲氨酸(0.9282g,1.50mmol)及HOBt—水合物(0.2296g,1.50mmol)在DMF/DCM(l:l)(10ml)中的溶液及DlC(0.1995g,1.58mmol)添加至經脫保護的樹脂中。90min后，用DMF及DCM(均為4xl2mLxlmin)洗滌肽基-樹脂，并得到呈陰性的Kaiser茚三酮測試結果。如所述那樣除去Fmoc基團后，如先前步驟中所述那樣對N-a-Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸(0.6006g，1.51mmol)進行偶聯(lián)，隨后除去Fmoc基團。通過將N-a-Fmoc-a-曱基-2-氟-L-苯基丙氨酸(0.4167g,0.993mmol)及HOBt—水合物(0.1529g,0.998mmol)在DMF/DCM(l:l)(10ml)中的溶液及DlC(0.1260g,0.998mmol)與經脫保護的肽基-樹脂混合4小時來偶聯(lián)N-a-Fmoc-a-曱基-2-氟-L-苯基丙氨酸。用DMF及DCM(均為4xl2mLxlmin)洗滌后，肽基-樹脂的樣品給出呈陰性的Kaiser茚三酮測試結果。進行上述步驟l至4來除去Fmoc基團。除去Fmoc基團后，通過將N-a-Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸(1.9880g,5.00mmol)在含0.5MHOAt的DMF(10.0mL,5.00mmo1)中的溶液及DlC(0.6360g,5.04mmol)與經脫保護的肽基-樹脂混合16小時來偶聯(lián)N-a-Fmoc-0-叔丁基-L-蘇氨酸。用DMF及DCM(均為4xl2mLxlmin)洗滌后，使用lmlTFA/三異丙基曱硅烷/水(96:2:2)來裂解濕的肽基-樹脂樣品1.5小時，且HPLC及MS分析表明僅存在極少量未偶聯(lián)的肽。用DCM中的10%乙酸酐(lxl2mLxlhr)處理肽基-樹脂，隨后用DCM(6xl2mLxlmin)洗滌。除去Fmoc基團后，以在DMF/DCM(1:1)(20ml)中的帶有HOBt—水合物(0.4604g,3.01mmol)及DlC(0.3885g，3.08mmol)的溶液的形式，依次對N-Fmoc-甘氨酸(0.8941g,3.01mmol)及N-a-Fmoc-L-谷氨酸(3-叔丁酯(1.2765g,3.00mmol)進行偶聯(lián)2hr。每個偶聯(lián)步驟后均得到呈陰性的Kaiser茚三酮測試結果。將由此得到的兩種肽基-樹脂各自轉移至配有玻璃加料器(frit)的不同35mL注射器中并在真空中干燥。接著用0.28mmol各肽基-樹脂繼續(xù)合成。除去Fmoc基團后，將N-a-Fmoc-a-曱基-L-脯氨酸(0.3943g，1.12mmol)在含0.5MHOAt的DMF(2.24mL，1.12mmo1)中的溶液及經額外8mLDMF稀釋的DlC(0.1413g,1.12mmol)分成相等體積的兩份，將它們添加至各自經脫保護的肽基-樹脂中。渦漩12hr且用DMF及DCM(均為3x8mLxlmin)洗滌后，將肽基-樹脂的0.02mmo1等分試樣置于AdvancedChemTechQ396合成儀的3-4個反應孔中。如下除去Fmoc基團1.DMF中的20%哌啶lxlmlx5min;2.DMF中的20%哌啶lxlmlxl5min;3.NMP洗滌8xlmlxlmin。將分成等體積2份的(+)-2-曱基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸(79.9mg,0.202mmo1)、TFFH(0.0538g,0.204mmol)及DIEA(0.0532g,0.412mmo)在DMF(2mL)中的溶液添加至相關經脫保護的肽基-樹脂中，混合12hr后，用NMP(2xlmLxlmin)隨后用DCM(3xlmLxlmin)加以洗滌。使用TFA/TIS/水(96:2:2)來裂解少量樹脂樣品，隨后對產物進行的HPLC及MS分析表明幾乎完全偶聯(lián)。用DCM中的10。/o乙酸酐(IximLxihr)處理肽基-樹脂，隨后用DCM(6xl.5mLxlmin)洗滌。用TFA/TIS/水96:2:2(3xlmLx30min)處理肽基-樹脂且收集濾液并在旋轉蒸發(fā)器中濃縮至接近干燥。通過添加二異丙基醚(5mL)來使粗肽沉淀，用二異丙基醚洗滌并干燥。粗肽通過如本申請所述的制備性HPLC(使用YMCODS-A(10^m,250x20mm)色譜柱)來純化。所使用的梯度為歷時60min從A中的25%B變?yōu)锳中的55%B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1。/。TFA;流速為15mL/min。匯集含有純產物的餾分并凍干。得到純度為95%的產物即SEQIDNO:169(或170)的化合物；保留時間22.0min;(色譜柱YMCODS-AQ3pm(4.6x150mm);梯度.以lmL/min的流速歷時60min從A中的15%B變?yōu)锳中的45%B)。ES-MS分析(M+H)+=l590.0，(M+2H)+/2=795.9。回收率)；保留時間22.7min(色譜柱YMCODS-AQ3nm(4.6xl50醒)；梯度以lmL/min的流速歷時60min從A中的15%B變?yōu)锳中的450/。B)。ES-MS分析(M+H)+=l539.8，(M+2H)+/2=770.9。實施例30合成SEQIDNO:157的化合物將Fmoc-His(Trt)-OH(0.1278g,0.206mmol)、TFFH(0.0542g，0.205mmol)及DIEA(0.0533g，0.412mmol)在DMF(lmL)中的溶液添加至如實施例29中所述那樣制備的相關經脫保護的肽基-樹脂中。使用Fmoc-His(Trt)-OH(0.1257g,0.20mmol)及DlC(0.0262g，0.21mmol)在含0.5MHOAt的DMF(0.40mL)中的溶液及DMF(0.40mL)來重復進行偶聯(lián)。如下使肽基-樹脂脫保護1.DMF中的20%哌啶lxlmlx5min;2.DMF中的20%哌啶lxlmlxl5min;3.DMF洗滌8xlmlxlmin;4.DCM洗滌3xlmlxlmin。將碳酸2，5-二氧代吡咯烷-l-酯'曱酯(0.0241g，0.14mmol)溶解于DCM(0.5mL)中，將其添加至經脫保護的樹脂中并渦漩混合物14hr。用DCM(4xlmlxlmin)洗滌后，樹脂樣品給出呈陰性的Kaiser茚三酮測試結果。如實施例29中所述那樣，使粗產物自樹脂裂解并沉淀，得到40mg產物。通過如實施例29中所述的制備性HPLC來純化此產物，但所使用的梯度為歷時60min從A中的20%B變?yōu)锳中的55%B。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到12.0mg(30。/o回收率)純度為97%的產物；保留時間33.3min(色譜柱YMCODS-AQ3[im(4.6xl50mm);梯度以lmL/min的流速歷時60min從A中的15%B變?yōu)锳中的55°/oB)。ES-MS分析118(M+H)M648.8,(M+2H)+/2=824.9。實施例31合成SEQIDNO:175及176的化合物將2-曱氧基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸(0.0417g,O.lOlmmol)、HATU(0.0390g,0.103mmol)及D正A(0.0284g,0.220mmol)在含0.5MHOAt的DMF(0.202mL,O.lOlmmol)中的溶液及DMF(0.2mL)添加至如實施例29中所述那樣制備的經Fmoc脫保護的Xw-Xaan肽基-樹脂(O.01Ommol)中，其中Xaa8=His。渦旋14hr后，用DMF及DCM(均為3xlmLxlmin)洗滌肽基-樹月旨，隨后用DCM中的100/()乙酸酐(lxlmLx30min)處理，.隨后用DCM(6xlmLxlmin)洗滌。如實施例29中所述，使用TFA/TIS/水(96:2:2)將肽產物自樹脂釋放并使其脫保護。通過如本申請所述的制備性HPLC(使用以下梯度即歷時60min從A中30%的B變?yōu)锳中40%的B)來純化粗肽。溶劑A為水/AcCN(95:5)中的10mM磷酸鈉(pH為7);溶劑B為水/AcCN(20:80)中的lmM磷酸鈉(pH為7);色譜柱PhenomenexL麗C18(2)，(5|im，250x21.2mm);流速15mL/min。匯集含有早期洗脫的非對映異構體(異構體A)的餾分，并將其濃縮至約5mL。此溶液通過以下方法來脫鹽在PhenomenexLunaC18(2)色譜柱(5jim，100x21.2mm)中進行洗脫(使用以下梯度即歷時20min從A中的0%B變?yōu)锳中的100%B)。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1%TFA;流速為15mL/min。匯集含有產物的餾分并將其凍干，得到1.2mg純度為93%的SEQIDNO:175(或176)的化合物；保留時間40.4min;色譜柱YMCODS-AQ3|am(4.6x150mm);梯度以lmL/min的流速歷時60min從A中的15%B變?yōu)锳中的45%B。ES-MS分析(M+H)+=1605.6,(M+2H)+/2=803,5。如上文所述，通過第一個制備性HPLC步驟，從含有較晚洗脫的非對映異構體的餾分得到SEQIDNo:176(或175)的化合物。產量3.0mg純度為96%的產物；在與上述相同的分析性HPLC條件下，保留時間為40.7min。ES-MS分析(M+H)+=1605.7，(M+2H)+/2=803.7。實施例32合成2-曱氧基-3-(l-三苯甲基-lH-咪唑-4-基)丙酸2-甲氧基-2-((l-三苯甲基-lH-咪唑-4-基)甲基)丙二酸二甲酯流程30119將4-(氯曱基)-l-三苯曱基-lH-咪唑(0.3655g,1.02薩ol)及2-曱氧基丙二酸二曱酯(0.1822g，1.25mmol)在AcCN(10mL)中的溶液迅速添加至經攪拌的新粉碎的氫氧化鉀(0,1760g,3.14mmol)及溴化四丁基銨(0.0521g，0.16mmo1)在AcCN(2mL)中的漿液中。16hr后，用乙酸乙酯(20mL)稀釋反應混合物并用硅藻土墊過濾，用EtOAc(2x5mL)加以洗滌。用水(2x1OmL)及飽和NaCl(lxlOmL)洗滌合并的有機層且用MgS04干燥。除去溶劑后得到的油狀殘余物(0.41g)通過在硅膠60(42g，粒度為0.040至0.063mm)2.5x30cm色譜柱上進行的色譜(使用CHCl3/EtOAc(9:l)作為洗脫劑)來純化并收集72x25mL餾分。匯集餾分28至72并干燥，得到0.1628g(33。/。)純度為89.5%的2-曱氧基-1((l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)曱基)丙二酸二曱酯；保留時間7.Wmin;色語柱YMCODS-A(3nm，50x4.6mm);梯度以1.25mL/min的流速歷時10min從A中的10%B變?yōu)锳中的100%B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1%TFA。LC/MS:ESI(M+H)+=485.3。'H-NMR(CDC13，500MHz):53.39(s,3H),3.49(s，2H)，3.69(s，6H)，6.70(s，IH)，6.99-7.03(m，6H)，7.30-7.35(m，9H)，7.92(s，IH)。2-曱氧基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸曱酯流程31將2-曱氧基-2-((1-三苯曱基-1H-咪唑-4-基)曱基)丙二酸二曱酯(0.1520g,0.31mmol)及氯化鈉(0.0398g，0.68mmol)在NMP(2mL)及水(0.3mL)中的溶液加熱至201°C,保持1hr。冷卻至室溫后，添加乙酸乙酯(15mL)且用水(2x1OmL)及飽和氯化鈉(lxlOmL)洗滌有機層隨后以NaS04干燥。除去溶劑，得到0.1030g粗產物。此粗產物通過在硅膠60(llg，粒度為0.040至0.063mm)色譜柱(2.5xl0cm)上進行的色譜(使用CHCVMeOH(98:2)作為洗脫劑)來純120化且以12mL為單位收集餾分。匯集餾分2至10并干燥，且如上所述再純化殘佘物，但使用5g硅膠且洗脫劑為CHCl3/MeOH(99:l)。匯集餾分10至16,干燥后得到0.0592g(45o/。)純度為94.5%的2-曱氧基-3-(1-三苯曱基-111-咪唑-4-基)丙酸曱酯；保留時間7.29min;色譜柱YMCODS-A(3pm，50x4.6mm);梯度以1.25mL/min的流速歷時10min從A中的10%B變?yōu)锳中的100%B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1%TFA。LC/MS:ESI(M+H)+=427.1。2-曱氧基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸流程32向2-曱氧基-3-(l-三苯曱基-lH-咪唑-4-基)丙酸曱酯(0.0592g,0.139mmol)在四氫呋喃(lmL)、曱醇(lmL)及水(O.SmL)中的溶液中添加2NNaOH(0.278mL)且攪拌反應混合物1.75hr。除去有機溶劑且添加1NKHS04(5mL)及乙酸乙酯(lOmL)。用水(2x5mL)隨后用飽和氯化鈉(lx5mL)洗滌有機相且用MgS04干燥。用DCM(2xl0mL)再萃取合并的水層且以MgS04干燥。除去溶劑并真空干燥，得到0.0552g(96。/。)純度為92.6%的2-甲氧基-3-(l-三苯甲基-lH-咪唑-4-基)丙酸；保留時間6.80min;色譜柱PhenomenexLunaCl8(2)(5pm，50x4.6mm);梯度以1.25mL/min的流速歷時10min從A中的10%B變?yōu)锳中的100%B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1%TFA。LC/MS:ESI(M+H)+=413.1。'H-NMR(CDC13,500MHz):53.10-3.18(m,1H),3.31-3.38(m，IH)，3.45(s，3H)，4.26-4.3l(m(lH),6.86(s，1H),7.04-7.1l(m,6H),7.37-7.47(m,9H)，8.16(s,IH)。實施例33合成SEQIDNO:164的化合物流程33<formula>formulaseeoriginaldocumentpage122</formula>向SEQIDNO:158的化合物(0.021lg,0.0132摩爾)在AcCN(0.610mL)及硤化鈉水溶液(3.93mg/mL,0.610mL,0.016mmol)中的溶液中添加氯胺T(10.05mg/mL，0,540mL,0.016摩爾)在水/AcCN(l:l)中的溶液。渦旋所得溶液35min并過濾，且產物通過本申請所述的制備性HPLC來純化。色譜柱PhenomenexL腿C18(2)(5(im,250x21.2讓)；梯度歷時60min從A中的15%B變?yōu)锳中的75%B。溶劑A為水中的0.1%TFA;溶劑B為AcCN中的0.1。/。TFA;流速為15mL/min。匯集含有純產物的餾分并將其凍干，得到11.6mg純度為99%的碘化肽；保留時間30.41min;色譜柱YMCODS-AQ(3pm,4.6x150誦)；梯度以ImL/min的流速歷時60min從A中的15%B變?yōu)锳中的75%B。溶劑A為水/AcCN(95:5)中的10mM磷酸鈉(pH為7.5);溶劑B為水/AcCN(20:80)中的lmM磷酸鈉(pH為7.5);ES畫MS》析(M+H)+=1725.0，(M+2H)+/2=863.0。實施例34示范性的肽描述于表3C中。表3C<table>tableseeoriginaldocumentpage122</column></row><table>SEGIDNo.Xaa2Xaa5XM6Xaa7Xaa8XM9Xaa,,-NH25HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Cl)4-(4'-吡°定基)笨基丙氨酸-NH26HAibEGTL-a-Mc-Phe(2-氟)TBip(2'-曱氧基-5'-異丙基)4-(4'-吡啶基)笨基丙氨酸-NH27HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsD4-(2'-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸Bip(2'-Me)-NH28HAibEGTL-a-Me隱Phe(2陽氟)TsD4-[(2'-乙基-4'-曱氧基)笨基]-3-吡啶基丙氨酸Bip(2'-Me)-NH29HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH210HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH211脫氨基-HisAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe>4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸掘212脫氨基-HisAibEGTL-a-Me陽Ph"2,6-二氟)TsDBip(2'-Et陽4'-OMe)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH213HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsD4-(2'-乙基笨基)-3-吡啶基丙氨酸4-(2'-甲基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH214HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-(2'-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH215HAibEGTL-a陽Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-[3-(4-曱基)吡°定基)]苯基丙氨酸-NH216HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-[3-(4-甲基)吡°定基)]笨基丙氨酸-NH217HAibEGTL-a-Me-Phe(2誦氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3-噠°秦基)苯基丙氨酸-,18HAibEGTL-a-Me-PheC2,6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3-噠。秦基)苯基丙氨酸-NFb19HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-[3-(4-Me-6-OMe)吡啶基)]笨基丙氨酸-NH220HAibEG丁L-a陽Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3-(4'-曱基)吡。定基)]笨基丙氨酸Bip(2'-Me)->JH221HAibEGTL-a-Me-Phe(2隱氟)TsD4-[(4'-Me-6'-OMe)-3-吡梵基]笨基丙氨酸Bip(2'-Me)-NH222HAibEGTL-a-Me-Phe(2，6-二氟)TsD4-[(4'陽Me-6'掘e)-3-'比淀基]苯基丙氨酸Bip(2'-Me)-NH223HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'陽OMe)4-[2(lH)。比咬酮基)苯基丙氨酸-NH224HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)Bip(8-喹啉)-NH225HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)Bip(3-喹啉)-NH226HAibEGTL-a-Me-Phe(2國氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)Bip(6-喹啉)-NH227HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)Bip(5-喹啉)-NH2123<table>tableseeoriginaldocumentpage124</column></row><table>SEqIDNo.Xaa2Xaa5Xaa6Xaa7Xaa9.XaaioXaal|-NH249HAibEG丁L-a-Me-Phe(2,6-二氟)TSDBip(2'-Me-3'-F)4-(2'-曱基笨基)-3-吡臾基丙氨酸-NH,50HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-F)4-(2'-甲基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH251HAibEGTL-a陽Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(2'-Cl-6'-CF3)吡啶基]笨基丙氨酸4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH252HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-(2'-乙基笨基)-3-吡啶基丙氨酸Bip(2'-CI)-NH253HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-(2'-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸Bip(3'-Cl-4，-F)-NH254HAibEGNvaL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基苯基)-3-吡咬基丙氨酸-NH255HAibEG丁L-a-Me-Phe(2，6-二氟)TsD4-(2'-乙基苯基)-3-吡咬基丙氨酸Bip(3',5'-二曱基)掘256HAibEGTL-a-Me-Phe(;2,6-二氟)TsD4-(2'-乙基笨基)-3-吡啶基丙氨酸4-(2',3'-噠嗪基)苯基丙氨酸-NH257HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-乙基笨基)-3-吡啶基內氨酸-NH258HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6陽二氟)TsD4-(2'-乙基笨基)-3-吡啶基丙氨酸4-[3'-(2'-CI-6'-CF3)吡啶基]苯基丙氨酸-朋259HAibEG丁L-a-Me-Phe(2，6-二氟)TsD4-(2'-乙基苯基)-3-吡呔基丙氨酸4-[3'-(2'-CN陽6'-Me)吡夂基]笨基丙氨酸-NH260HAibEGTL-a-Me-Phe(;2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡啶基]笨基丙氨酸Bip(2'-Cl)-NH261HAibEGTL-a-Me-Phe(2，6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡梵基]苯基丙氨酸Bip(3'-Cl-4'-F)-NH262HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡啶基]苯基丙氨酸Bip(3'，5'-二甲基)->263HAibEGTL-a-Me-Phe(2，6陽二氟)TsD4陽[3'-(4'-Me)吡啶基]苯基丙氨酸Bip(2'-Me-4'-OMe)-NH264HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3'-(4'-Me)吡啶基l苯基丙氨酸Bip(2'-Me隱3'-F)-NH265HAibEGTL陽a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[3，-(4'-Me)吡。定基]苯基丙氨酸Bip(2'-F)-NH266HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6陽二氟)TsD4陽[(4'-Me-6'-OMe)-3-他啶基笨基丙氨酸Bip(2'-CI)-NH267HAibEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[(4'-Me陽6'-OMe)-3-吡。定基]苯基丙氨酸Bip(3',4'-二曱氧基)-,268HAibEGTL-a陽Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[(4'-Me-6'-OMe)-3-吡啶基]苯基丙氨酸4-(2'-吡啶基)苯基丙氨酸-NH269HAibEGTL隱a-Me-Phe(2，6-二氟)TsD4-[(4'-Me-6'-OMe)-3-吡啶基]苯基丙氨酸Bip(2'-Me-4'-OMe)-NH270HAibEGTL-a陽Me-Phe(2,6-二氟)TsD4-[(4'-Me-6'-OMe)陽3-吡咬基]笨基丙氨酸4-(2'-甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH271HAibEGTL-a-Me-Phe(2，6-二氟)TsDBip(2'-Et)4-(2'-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2125SEgIDNo.XaalXM2XM6XM8Xaa9Xaa|-NH272HAibEGL陽a-Me-Phe(2'6-二氟)TSD4隱[3'-(4'-曱基)。比啶基]笨基丙氨酸4-(2'-曱基苯基)-3-吡。定基丙氨酸-NH273HAibEG丁L-a-Me-Phe(2,6-二氟)TSDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(4'--比。定基)陽笨基丙氨酸-NH274HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3'-喹啉)苯基丙氨酸-NHj75HAibEGTL-ot-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3'-(2'-甲氧基)吡°定基)苯基丙氨酸掘276HAibEGTL陽a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-笨基-3-吡。定基丙氨酸-NH277HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3'，5'-二曱基苯基)-3-吡。定基丙氨酸-叫78HAibEG丁L層a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et陽4'-OMe)4-[(3'-氯-4'-氟)苯基-3-吡啶基丙氨酸福279HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3',4'-二曱氣基)笨基]-3-吡。定基丙氨酸-NHz80HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et陽4'-OMe)4-[(2'-乙基-4'陽曱氧基)苯基)]-3-比啶基丙氨酸-NH281L-P-咪唑-孔酰基AibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-甲基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH282HAibEGTL隱a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)2-(5-鄰曱笨基)'塞吩基丙氨酸-NH283HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)2-[(5-(3'-曱氣基)笨基I噻吩基丙氨酸-叫84HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)2-[(5-(3',5'-二-甲基)苯基]逸吟基丙氨酸-NH285HAibEGTL-a-Me-Phe(2陽氟)TsDBip(2'-Et陽4'-OMe)2-[(5-(3'-CI-5'-F)笨基]噱吩基丙氨酸-,86HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et陽4'-OMe)4-(3'-異丙氣基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-叫87HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基-5'-氟)笨基)-3-吡。定基丙氨酸掘288HAibEGTL-a隱Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'陽OMe)4-(2'-異丙氧基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-叫89HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)3-(4-Br)。比咬基丙氨酸-NH290HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(4'-曱氧基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-叫91HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基-4'-氟)笨基)-3-吡啶基丙92HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2126<table>tableseeoriginaldocumentpage127</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage128</column></row><table>SEQIDNo.Xaa2Xaa3Xaa5&6Xaa7Xaa9Xaaio135脫氨基-His(S)隱a-Me-ProEGTL陽a-Me-Phe(2陽氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-氟笨基)-3-'比啶基丙氨酸-NH2136脫氨基-His(S)陽a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3'-曱氧基苯基)-3-吡啶基丙氨酸德2137(R)-lmpAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基苯基)-3-吡咬基丙氨酸-NH2138(S)-ImpAibEGTL-a陽Me-Ph《2-氟)TsDBip(2，-Et-4，-OMe)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2139CH30-CO陽His(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2陽氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2140CH30-CO-His(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2141CH30-CO-HisN-Me-D-AlaEGTL-a-Me-Phe(2陽氟)TsDBip(2'-Et-4，-OMe)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2142CH30-CO-HisN-Me-D陽AlaEG丁L-a-Me-Phe(2,6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'隱OMe)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2'43CH3S02-His(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'掘e)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2144CH3S02-His(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2，6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基苯基)-3-吡梵基丙氨酸-NH2145L-乳酰基-His(S)-ct-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'陽甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2146L-乳?；?His(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2，6-二氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-甲基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2147HAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(3',5'-二甲基)笨基-3--比咬基丙氨148HAibEGTL-a-Me陽Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2149HD-Al3EGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'陽Et-4,-OMe)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2150HAibHGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2151L-P-咪。坐-乳酰基(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-0-Me)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2152L-p-咪基(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'陽Et-4'-0-Me)4-(2'-甲基苯基)-3-吡咬基丙氨酸-NH2153L陽P-咪唑-乳?；?S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'陽Et-4'-OH)4-(2'-甲基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2154L-(3-咪-坐-乳?；?S)-a佳-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)丁sDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-甲基笨基)-3-吡梵基丙氨酸-NH2129SEQIDNo.xaalXaa2Xaa3Xaa6^aa7XMl,-NH21155L-卩-咪唑-乳酰基N-Me-D-A!aEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-0懇Me)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2156唑-乳?；鵑-Me-D-AlaEGL-a-Me陽Phe(2-氟)TSDBip(2'-Et-4'-0-Me)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2157CH30-CO-His(S)-a-Me-ProEGTL陽a-Me隱Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2158CH30-CO-His(S)-ct-Me-ProEGTL-a陽Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸掘2159CH30-CO-HisN-Me-D-AlaEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸掘2160CH30-CO-HisN-Me-D-AlaEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2161CH]O-CO-HisAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸掘2162CH30-CO-HisAibEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2163L-(3-咪唑-孔?；鵑-Me-D-AlaEG丁L-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸掘2164CH30-CO-His(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-Et-4'-OH-5'-1)4-(2'-曱基笨基)-3-吡"定基丙氨酸-NH2165脫氨基-His(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基笨基)-3-吡。定基丙氨酸-NH2166脫氨基-His(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2167(R)-Imp(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基苯基)陽3-吡啶基丙氨酸-NH2168(S)-Imp(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TsDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2169(R)-lmp(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2陽氟)THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2170(S)-Imp(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2171(R)掘eOp(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-甲基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2172(S)-IMeOp(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OMe)4-(2'-曱基笨基)-3-吡夂基丙氨酸-NH2173(R)掘eOp(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-甲基笨基)-3-吡咬基丙氨酸掘2174(S)-IMeOp(S)陽a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)TSDBip(2'-Et-4'陽OH)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2130SEQIDNo.Xaa2XM3Xaa4Xaa5X幼6XM7XM8Xaa975(R)掘eOp(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2176(S)-IMeOp(S)-a-Me-ProEGTL-a-Me-Phe(2-氟)THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸掘2177TSDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-甲基笨基)-3-吡夂基丙氨酸-NH2178(S)-a-Me-ProTSDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基笨基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2179THDBip(2'-Et-4'-OH)4-(2'-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸-NH2A—:L-Ala:ala=D-AlaAib-tt-氨基異丁酸Bip-L-4.4'-聯(lián)笨基丙氨酸1):，L-AspE=L-GluG-GlvHL-liisNle-L-正亮氨酸Nva-L-正錄氨酸F=L-PheS=L-Ser，T=L-Thr.氨基酸縮寫及結構CH3oa-甲基苯基丙氨酸(d-M&Phe)J;碳原子的編號聯(lián)苯基丙氨酸:EM1原子的編號雜聯(lián)苯基丙JC酸H^疾原子的編號CH3o(L)-tt-Me匿Phe(2-氟)Bip(2，-Et匿4'-OMe)Bip(2，-Et匿4,匿OH)Bip(2,-Me^4'扁OMe)Bip(3,，S'-二甲基)Bip(2，匿C國)Bip(3，-Cl-4，-F)4<2，-甲基笨基》3-吡啶基丙氨酸4~<2，-乙基笨基)~3-吡啶基丙氨酸131Bip(2'-Me~3，-F)4_苯基>3-吡啶基丙氨酸4-l(2，-乙基-4'-甲氣基)笨基)J-3-吡^^基丙氨酸4《2，-異丙基苯基)-3-他啶&丙氨酸4<2，-氣苯基>34^丙氛酸4<3'-甲基笨基》杜咬基丙氛酸r<formula>formulaseeoriginaldocumentpage133</formula>(S)-fOM印(R)-JOMep氨基酸及肽化學領域的技術人員應該理解的是，在4位或對位具有苯基取代基的苯基丙氨酸氨基酸可另外定義為4-(苯基)苯基丙氨酸或4,4，-聯(lián)苯基丙氨酸，因此可縮寫為"Bip"。對于在"氨基酸縮寫及結構，，章節(jié)及本申請的表格中所示的縮寫而言，聯(lián)苯基丙氨酸氨基酸例如可縮寫為"Bip(2，-Me)",其意在表示在其4位經2，-曱基苯基取代的苯基丙氨酸，其中2'-曱基相對于苯基環(huán)的連接點處于鄰位。實施例35cAMP測定GLP-1受體為G蛋白偶聯(lián)受體。GLP-l(7-36)-酰胺即生物活性形式與GLP-1受體結合且經由信號轉導引起腺普?；h(huán)化酶的活化且使細胞內cAMP濃度增加。為了監(jiān)測肽在刺激GLP-1受體方面的激動作用，通過測定細胞內cAMP含量來監(jiān)測腺芬?；h(huán)化酶的活性。全長人胰高血糖素樣肽-1受體在CH0-K1細胞中穩(wěn)定表達且建立無性繁殖系。對響應于飽和劑量GLP-1而cAMP含量增加最大的克隆進行篩選，且所選擇的克隆為克隆CH0-GLP1R-19。在Ham，sF12營養(yǎng)培養(yǎng)基(Gibco#11765-054)、10%FBS、lxL-谷氨酰胺、1xpen/Strep及0.4mg/mlG418中培養(yǎng)所述細胞。將CHO-GLP-1R-19細胞(100^1培養(yǎng)基中有20,000個細胞)置于96孔組織培養(yǎng)微量滴定板的每個孔中且在37。C及5。/。C02氣氛下孵育過夜。在測定當天用10(Vl經磷酸鹽緩沖的鹽水(PBS)洗滌細胞一次。在開始測定前，^使用Biomek2000來連續(xù)稀釋所有肽。連續(xù)稀釋在100%DMSO中進行。得到肽培養(yǎng)板，隨后使用PlatematePlus來啟動測定；將1.5^L化合物轉移至V形底的培養(yǎng)板中，且將補充有100jnM3-異丁基-l-曱基黃噤呤(非選擇性磷酸二酯酶抑制劑)的150pL測定緩沖液添加至培養(yǎng)板中，得到1:100的稀釋度及最終濃度為P/。的DMSO。為了得到cAMP標準曲線，在溶胞試劑l(AmershamcAMPSPA試劑盒)中形成一系列稀釋度的cAMP,其范圍為0.2-25.6皮摩爾/孔。手動添加50^1各cAMP標準品，并使用多頭移液器(multidrop)添加70]li1混合試劑(AmershamcAMPSPA試劑盒)。隨后，密封培養(yǎng)板且在15小時后在Trilux計數(shù)器上計數(shù)。使用此標準曲線，將CPM轉化成cAMP的皮摩爾數(shù)。在PlatematePlus上進行的cAMP測定方案將細胞培養(yǎng)板及肽培養(yǎng)板加載到Platemate上。自孔中抽出培養(yǎng)基并丟棄。接著，以每孔lOO(iL添加來自肽培養(yǎng)板的肽/緩沖液混合物，啟動測定。孵育30min后，除去肽/緩沖液且每孔添加50pL溶胞試劑1溶液。將培養(yǎng)板在室溫保持1小時，若冷凍且密封，則保持過夜。使用多頭移液器添加70pLcAMP檢測試劑(對與SPA珠粒接合的125I-cAMP類似物、抗cAMP抗體及抗兔抗體(均來自AmershamcAMPSPA試劑盒)進行預混合)并密封培養(yǎng)板。15小時后，在Trilux計數(shù)器上對培養(yǎng)板進行計數(shù)。一式兩份地測定化合物在半對數(shù)濃度下的劑量依賴性。在各96孔板中，在七種半對數(shù)劑量下測定GLP-1(對照)及五種化合物(一式兩份)。將10nMGLP-1置于另外IO個孔中，用作測定最大活性的參考標準。使用已知量的cAMP來確定標準曲線。由cAMP標準曲線確定經處理的細胞所合成的cAMP的量，且計算相對于GLP-1所刺激的最大活性的百分比并依據(jù)對數(shù)化合物濃度進行標繪。通過非線性回歸曲線擬合(4參數(shù)S形劑量-應答曲線)來分析數(shù)據(jù)，確定化合物的EC5Q。例如，本申請所述的肽的ECso值在0.0005nM至10nM的范圍內，更優(yōu)選地在0.0005nM至0.200nM的范圍內?？蛇x擇地，以每孔IO，OOO個細胞將表達GLP-1受體的CHO細胞置于384孔板中，并如上文所述在37。C及5。/。C02中培養(yǎng)過夜。用肽基GLP-1受體激動劑進行處理后，遵循制造商的方案用HithunterXScAMP試劑盒(DiscoveRx^)測量cAMP的細胞內水平。實施例36活體內研究將肽以與給藥劑量(nmol/kg)等同的濃度(nmol/ml)溶于合適的載體135(vehicle)中，從而使每只小鼠都可接受相同體積/重量的給藥溶液?；谶M食血漿葡萄糖和體重，對雄性C57BL/6J-ob/ob小鼠(IO周齡)進行隨機化分組，每組有六只小鼠。禁食過夜后，對小鼠進行稱重，然后置于實驗室中。在實驗室環(huán)境中放置30鐘后，在-30min經由尾梢對小鼠進行取血，然后立即皮下(sc)注射載體或溶于載體中的所述肽(0.1ml溶液/100g體重)。在時間0對小鼠進行取血，然后腹膜內注射50。/。葡萄糖(2g/kg)，啟動腹膜內葡萄糖耐量試驗(ipGTT)。注射葡萄糖后，在30、60、120和180min對小鼠進行取血。將血液樣品置于EDTA鉀中，在研究過程中置于水上，隨后在4。C以3000rpm離心10min。將血漿樣品稀釋11倍，用于在Cobas系統(tǒng)中進行葡萄糖分析。另一份血漿樣品(5pl)用20|il樣品稀釋劑(胰島素ELISA測定試劑盒，CrystalChemInc.)稀釋5倍，并且貯存在-20°C，用于隨后利用超靈敏度小鼠胰島素ELISA試劑盒(CrystalChemInc.)來進行分析?；衔颕及SEQIDNO:9、118、151及158的化合物在ob/ob小鼠(胰島素抵抗的小鼠模型)中的體內降糖特性描述如下。在腹膜內葡萄糖耐量試驗(ipGTT)中，皮下給藥化合物I使餐后葡萄糖偏移曲線變弱，且血糖曲線下面積(AUC)在0與180min之間以劑量依賴的方式降j氐(圖1)。確定化合物I的EDso為50納摩爾/千克。在這些動物中，餐后血漿胰島素水平出現(xiàn)伴隨且統(tǒng)計學顯著的劑量依賴性增加(圖2)。在經化合物I治療的動物中，血糖的改變與胰島素的改變之間的相關性(圖l及圖2)表明，降糖作用由所述化合物刺激胰島素釋放所介導。更明顯且出人意料的是，在向ob/ob小鼠皮下給藥SEQIDNO:9、118、151及158的化合物后，這些化合物對于餐后血糖產生時間依賴(O與180min或210min之間)且統(tǒng)計學顯著的降低(圖3、5、6及7)。SEQIDNO:9的化合物對餐后葡萄糖的作用在l-100nmol/kg之間為劑量依賴性且血糖AUC在100nmol/kg劑量時降低85.8。/。(圖3)。SEQIDNO:9的化合物的EDso經測定為5納摩爾/千克。SEQIDNO:9的化合物對血糖的作用亦通過在這些動物體中顯著增加餐后胰島素來實現(xiàn)(圖4)。對胰島素的作用似乎具有劑量依賴性，且在30nmo歐g劑量時AUC具有187.7%的最大增加(圖4)。SEQIDNO:118的化合物對餐后葡萄糖的作用在1-30nmol/kg之間為劑量依賴性且血糖AUC在30nmol/kg劑量時降低Sl。/。(圖5)。SEQIDNO:118的化合物的EDw經測定為2.5納摩爾/千克。136SEQIDNO:151的化合物對餐后葡萄糖的作用在0.03與3nmol/kg之間為劑量依賴性且血糖AUC在3nmol/kg劑量時降低67°/。(圖6)。SEQIDNO:151的化合物的ED5o經測定為1納摩爾/千克。SEQIDNO:158的化合物對餐后葡萄糖的作用在0.1與10nmol/kg之間為劑量依賴性且血糖AUC在10nmol/kg劑量時降低66%(圖7)。SEQIDNO:151的化合物的ED5o經測定為2納摩爾/千克。實施例37犬藥物動力學研究在雄性比格犬(beagledog)(n-3-4，14土lkg)中確定了SEQIDNO:9、118、151及158的化合物的藥物動力學參數(shù)。禁食過夜后，每只動物通過經由股靜脈進行靜脈內推注(67嗎/kg)或通過在肩胛骨附近進行皮下注射來接受SEQIDNO:9、118、151及158的化合物(67jig/kg)。遵循交叉設計，每只動物接受靜脈內或皮下給藥，而在兩次給藥之間有一周的清除時間。用于兩種給藥途徑的給藥載體為丙二醇:pH為7.4的磷酸鹽緩沖液(50:50)或0.2MTris(pH為8.0)。在以下時間點將系列血液樣品收集在含有EDTA的微量離心管中給藥前、靜脈內給藥后0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、24和30小時；給藥前、皮下給藥后0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、24和30小時。在每個時間點都收集約0.3mL血液。立即在4。C對血液樣品進行離心。所得到的血漿用干冰冷凍，并且貯存在-20。C。利用以下所描述的LC-MS/MS測定來確定血漿藥物水平。通過LC-MS/MS對SEQIDNO:158的化合物進行定量通過以下方法對來自體內犬研究的血漿樣品進行處理以供分析用兩體積的乙腈(含有內標)使血漿蛋白沉淀。對樣品進行渦旋混合，然后離心除去沉淀的蛋白質。將所得到的上清液轉移到96-孔板中，然后注射10nL用于TFC-LC/MS/MS分析。TFC-HPLC系統(tǒng)(CohesiveTX-1Flux,Aria2300System)由加載泵、洗脫泵及CTCPAL自動取樣器(CohesiveTechnologies,Franklin,MA)組成。在線樣品處理所使用的色i普柱為作為分析色i普柱的PhenomenexSynergiFusion-RP(C18,2.0x50mm,4p)(Phenomenex，Torrance,CA)及作為提取色譜柱的Turbo-Flow(TF)HTLCCyclone色語柱(0.5x50mm)(CohesiveTechnologies,Franklin,MA)。流動相A由10mM曱酸銨及0.1%曱酸的水溶液組成且流動相B由AcCN中的0.1%曱酸組成。使用Turbo-Flow色i普得到較為清潔的樣品。使用快速梯度洗脫用于分離分析物。將樣品注入Turbo-FlowHTLCCyclone色語柱中且使用100%H2O"1.5mL/min將分析物與生物流體組份分離。反沖TF色譜柱且通過經2min快速上升至60%B且以0.3mL/min保持30秒，將來自TF的分析物洗脫回HPLC分析性色譜柱，使分析物分離且將分析物從HPLC色譜柱洗脫到質譜儀中。再洗滌兩根色譜柱1分鐘，隨后在初始條件下重新平衡兩根色譜柱。使HPLC與SciexAPI4000質鐠儀(AppliedBiosystems，F(xiàn)osterCity,CA)接界，且裝備有TurboIonspray電離源。將超高純度的氮氣用作噴霧及渦流氣體。渦流氣體的溫度設定為30(TC且界面加熱器設定為60°C。使用選擇反應監(jiān)測(SRM)用于數(shù)據(jù)采集。在Q1中選擇SEQIDNO:158的化合物的多電荷離子物質即(M+2H,，且在Q2中以3.5xl(^托(torr)壓力的高純度氮氣碰撞解離這些物質，形成特定的產物離子，隨后在'Q3中進行監(jiān)測。離子轉換及電壓概述如下(表4)。表4用于LC-MS/MS樣品分析的監(jiān)測轉換及質"i昏儀設定SRM轉換(mz)800.0—152.0去簇電壓(V)100碰撞能量(V)91一式兩份地對在1至1000nM范圍內的標準曲線濃度進行分析。以通過濃度倒數(shù)加權的線性回歸(l/f)對曲線進行擬合。亦在各分析設定中對在空白基質中制備的與標準品具相同濃度的質量控制(QC)樣品進行分析。對于分析SEQIDNO:158的化合物而言，大于80%的經計算QC濃度與標稱濃度相差不超過20%，這表明測定效能是可接受的。數(shù)據(jù)分析通過非隔室方法(noncompartmentalmethod)使用KINETICAtm軟件程序來分析SEQIDNO:158的化合物的血漿濃度對時間的數(shù)據(jù)。直接記錄實驗觀察得到的Cmax及Tmax值。使用線性求和及對數(shù)梯形求和的組合來計算AUCo-n及AUC欣值。在靜脈內給藥后計算總血漿清除率(CLP)、末端半衰期(tm)、平均保留時間(MRT)及穩(wěn)態(tài)分布體積(Vss)。使用總血漿清除率及血液與血漿濃度的比值來計算總血液清除率(CLB)。將CLB及Vss值分別與文獻中所報導的標準肝血流及身體水份總量值進行比較。得到皮下給藥SEQIDNO:158的化合物后的劑量歸一化AUC值與靜脈內給藥SEQIDNO:158的138化合物后的劑量歸一化AUC值的比值，由此估計皮下給藥的絕對生物利用度(以％表示)。犬藥物動力學結果在雄性比格犬中SEQIDNO:9、151及158的化合物在靜脈內(IV)及皮下(SC)給藥后的藥物動力學參數(shù)分別概述于表5A、5B及5C中。SEQIDNO:158的化合物展現(xiàn)出低的全身清除率(0.51±0.08mL/min/kg)。穩(wěn)態(tài)分布體積(Vss)為0.15±0.02L/kg，這表明血管外分布是有限的。據(jù)估計清除半衰期為4.4士0.4h，且平均保留時間為4.9士0.7h。皮下給藥67嗎/kg后達到峰濃度的時間(T,)為1.4士0.7h。皮下給藥后的最大血漿濃度(C,)為279士82nM。SEQIDNO:158的化合物在犬中的皮下給藥生物利用度為110±49%。表5A.SEQIDNO:9的化合物在犬中的藥物動力學參數(shù)(給藥媒劑為0.2MTris(pH為8.0))參數(shù)靜脈內(11=3,平均值土SD)皮下(11=3,平均值士SD)劑量(Hg/kg)6767C隨(nM)-116±34T謹(h)-1.1±0.6AUCt。,(nMxh)529±125452±153CLP(mL/min/kg)1.4±0.4-Vss(L/kg)0.21±0.07-t"2(h)7.1±2.12.6±1.2MRT(h)2.4±0.53.6±1.0生物利用度(％)-93±22表5B.SEQIDNO:151的化合物在犬中的藥物動力學參數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage139</column></row><table>表5C.SEQIDNO:158的化合物在犬中的藥物動力學參數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage139</column></row><table>200780028160.51參數(shù)靜脈內(n-3，平均值士SD)皮下。=3，平均值士SD)J生物利用度(％)-H0士49實施例38腸胃外給藥途徑如下所述制備具有以下組成的用于肺部給藥/吸入給藥或經鼻給藥的液體制劑。成分量肽藥物IOmgHCI或NaOH用于將pH值調至5-8之間SBE-環(huán)糊:rttCaptisol)50mg純化水加量至lml將經稱重的肽在最佳pH值下溶解于部分水中。將Captisol添加至藥物溶液中且攪拌約5min。添加NaOH及HC1，將pH值調至所需值(介于5-8之間)。添加純化水，使最終體積達到lml?？稍谡{節(jié)pH值前視需要添加其它無活性成分，諸如防腐劑、抗氧化劑、緩沖鹽及共溶劑。添加水至所需的目標體積。可用注射器微型噴射器或噴氣或超聲噴霧器將上述溶液制劑以細微噴霧的形式給藥至肺部?？捎糜嬃拷洷菄娚浔没蜃⑸淦魑⑿蛧娚淦鲗⑸鲜鋈芤航o藥至鼻腔。如下所述制備具有以下組成的用于肺部給藥/吸入給藥或經鼻給藥的干粉制劑?！吵煞蛛乃幬锶樘橇?0mg卯mg在Turbula⑧混合器中將質量平均空氣動力學直徑(MMAD)優(yōu)選小于5微米的經稱重的肽與吸入級的乳糖(30-100nm)(Respitose，DMVInternational)共混5min?？赏ㄟ^粉末吹入器或干粉吸入器將上述千粉共混物給藥至肺部。如下所述制備具有以下組成的用于肺部給藥/吸入給藥或經鼻給藥的混懸液制劑。1成分量肽藥物IOmg印磷脂0.1%推進劑氣體lml將微米化的肽均勻混懸在卵磷脂與推進劑氣體(諸如氫氟碳化合物(HFA))的混合物中。將混懸液轉移至加壓計量吸入器中。在大鼠中自溶液制劑的肽吸^1藥物動力學參數(shù)氣管內給藥1鼻內給藥1劑量(mg/kg)110.6140藥物動力學參數(shù)氣管內給藥|鼻內.給藥1AUC(nM.h)918.9±103177±77Cmax(nM)359±50.9236±125Tmax(h)0.030.17將溶液形式(上文所述)的肽給藥至經腹膜內注射戊巴比妥(pentobarbital)而麻醉的雄性Sprague-Dawley大鼠。用注射器微型噴射器將藥物引入到氣管中來評估肺部給藥，或用移液管將藥物滴至各鼻孔內來鼻內給藥。將來自經插管的頸動脈的血液樣品收集到經肝素化的真空容器中，歷時4hr。離心血液樣品，將所分離的血漿貯存在-80。C,直至LC/MS分析。由血漿-時間濃度曲線計算藥物動力學參數(shù)并將其報導于表中。每種給藥途徑使用三只大鼠。以平均值士標準偏差的形式提供數(shù)據(jù)。所報導的Tn^為平均值。用途和組合A.用途本申請所描述的主題提供具有卓越性質并且作為GLP-1受體調節(jié)劑的新穎的肽，這些肽例如對于GLP-1受體具有激動劑活性。此外，與GLP-1天然序列相比，本申請所描述的肽對溶蛋白性裂解表現(xiàn)出提高的穩(wěn)定性。因此，可將本申請所描述的化合物給藥于哺乳動物，優(yōu)選為人類，用于治療多種病癥和疾病，包括但不限于治療或延緩以下疾病的進展或發(fā)作糖尿病(優(yōu)選為II型糖尿病、葡萄糖耐量降低、胰島素抵抗以及糖尿病并發(fā)癥例如腎病、視網膜病、神經病和白內障)、高血糖癥、高胰島素血癥、高膽固醇血癥、游離脂肪酸或甘油血液水平提高、高脂血癥、高甘油三酯血癥、肥胖癥、創(chuàng)傷愈合、組織缺血、動脈粥樣硬化、高血壓、AIDS、腸病(例如壞死性腸炎、微絨毛包含病或腹部疾病)、炎性腸綜合征、化學療法誘發(fā)的腸粘膜萎縮或損傷、神經性厭食癥、骨質疏松癥、代謝障礙綜合征以及炎性腸病(例如克羅恩病(Crohn，sdisease)和潰瘍性結腸炎)。本申請所描述的化合物也可用于提高高密度脂蛋白(HDL)的血液水平。此外，可利用本申請所描述的化合物來治療在JohannssonJ.Clin.Endocrinol.Metab.,82,727-34(1997)中所詳述的統(tǒng)稱為"X綜合征，，或代謝綜合4正的病癥、疾病禾口病患。B.組合本申請所描述和要求保護的主題包括藥物組合物，所述藥物組合物含有單獨或與可藥用載體或稀釋劑組合的作為活性成分的治療有效量的至少一種式I化合物。任選地，本申請所描述的化合物可單獨使用，與本申請所141描述的其它化合物聯(lián)用，或與一種或多種其它治療藥物(例如抗糖尿病藥物)或其它藥學活性物質聯(lián)用。本申請所描述的化合物可與其它GLP-1受體調節(jié)劑(例如激動劑或部分激動劑諸如肽激動劑)或用于治療上述疾病的其它合適治療藥物聯(lián)用，所述其它合適治療藥物包括抗糖尿病藥、抗高血糖藥、降血脂藥/降脂藥、抗肥胖癥藥(包括食欲抑制劑/調節(jié)劑)和抗高血壓藥。此外，本申請所描述的化合物可與一種或多種以下治療藥物聯(lián)用不育癥藥物、治療多嚢性卵巢綜合4正的藥物、治療生長疾病(growthdisorder)的藥物、治療虛弱(frailty)的藥物、治療關節(jié)炎的藥物、預防移植中同種異體移植物排斥的藥物、治療自身免疫性疾病的藥物、抗AIDS藥物、抗骨質疏松藥物、治療免疫調節(jié)疾病的藥物、抗凝血藥物、治療心血管疾病的藥物、抗菌藥物、抗^[青神病藥物、治療慢性炎性腸病或綜合征的藥物和/或治療神經性厭食癥的藥物。與本申請所述化合物聯(lián)用的合適抗糖尿病藥物的實例包括雙胍類(例如二曱雙胍或苯乙雙胍)、葡萄糖苦酶抑制劑(例如阿卡波糖或米格列醇(miglitol))、胰島素類(包括促胰島素分泌劑或胰島素敏化劑)、氯茴苯酸類(例如瑞格列奈(repaglinide))、磺脲類(例如格列美脲(glimepiride)、格列本脲、格列齊特、氯磺丙脲和格列吡嗪)、雙胍/格列本脲組合(例如Glucovance)、p塞唑烷二酮類(例如曲格列酮(troglitazone)、羅格列酮(rosiglitazone)和吡格列酮(pioglitazone))、PPAR-a激動劑、PPAR-丫激動齊'J、PPAR-a雙重激動劑、糖原磷酸化酶抑制劑、脂肪酸結合蛋白(aP2)抑制劑、DPP-IV抑制劑、GPR119調節(jié)劑以及SGLT2抑制劑。其它合適的噻唑烷二酮類包括Mitsubishi'sMCC-555(公開于美國專利5,594,016)、Glaxo-Wellcome,sGL-262570、恩格列酮(CP-68722，Pfizer)或達格列酮(CP-86325,Pfizer)、伊格列酮(isaglitazone)(MIT/J&J)、JTT-501(JPNT/P&U)、L-895645(Merck)、R-119702(Sankyo/WL)、NN-2344(Dr.Reddy/NN)或YM-440(Yamanouchi)。合適的PPAR-aAy雙重激動劑包括莫才各他唑(muraglitazar)(Bristol-MyersSquibb)、AR-H039242(Astra/Zeneca)、GW-409544(Glaxo隱Wellcome)、KRP297(KyorinMerck)以及在以下文獻中公開的物質Murakamietal，"ANovelInsulinSensitizerActsAsaColigandforPeroxisomeProliferation-ActivatedReceptorAlpha(PPARalpha)andPPARgamma.EffectonPPARalphaActivationonAbnormalLipidMetabolisminLiverofZuckerFattyRats",Diabetes47,1841-1847(1998)和2000年9月18日提交的美國專利申請09/644,598，在此將其所公開的內容引入作為參考，使用其中所列出的劑量，本申請優(yōu)選使用其中的優(yōu)選化合物。合適的aP2抑制劑包括在以下文獻中公開的物質1999年9月7日提交的美國專利申請09/391,053和2000年3月6日提交的美國專利申請09/519,079，使用其中所列出的劑量?？膳c本申請所述化合物聯(lián)用的合適DPP4抑制劑包括在WO99/38501、W099/46272、W099/67279(PROBIODRUG)、W099/67278(PROBIODRUG)和W099/61431(PROBIODRUG)中公開的物質、Hughesetal,Biochemistry,38(36),11597-11603，1999所公開的NVP-DPP728A(l-[[[2-[(5-氰基吡啶-2-基)氨基]乙基]氨基]乙?；鵠-2-氰基-(S)-吡咯烷)(Novartis)、LAF237、saxagliptin、MK0431、Yamadaetal，Bioorg.&Med.Chem.Lett.8(1998)1537-1540所公開的TSL-225(色氨酰基-l，2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸)、Ashworthetal,Bioorg.&Med.Chem.Lett,Vol.6，No.22,pp1163-1166and2745-2748(1996)所/>開的2-氰基pyrrolidide類和4-氰基pyrrolidide類，使用以上文獻中所列出的劑量。合適的氯茴苯酸類包括那格列奈(nateglinide)(Novartis)或KAD1229(PF/Kissei)?？膳c本申請所述GLP-1受體調節(jié)劑(例如激動劑或部分激動劑)聯(lián)用的其它合適胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)化合物的實例包括GLP-1(1-36)酰胺、GLP-l(7-36)酰胺、GLP-l(7-37)(公開于授權給Habener的美國專利5,614,492)以及C2993(Amylin)、LY-315902(Lilly)和麗221l(NovoNordisk)。與本申請所述化合物聯(lián)用的合適降血脂藥物/降脂藥物的實例包括一種或多種MTP抑制劑、HMGCoA還原酶抑制劑、角鯊烯合成酶抑制劑、苯乙酸(fibricacid)衍生物、ACAT抑制劑、脂氧化酶(lipoxygenase)抑制劑、膽固醇吸收抑制劑、回腸Na+Z膽汁酸協(xié)同轉運蛋白抑制劑、LDL受體活性上調劑、膽汁酸螯合劑、膽固醇酯轉移蛋白(例如CP-529414(Pfizer))和/或煙酸及其衍生物。利5,595,872、美國專利5,739,135、美國專利5,712,279、美國專利5,760,246、美國專利5,827,875、美國專利5,885,983以及美國專利5，962，440,在此將143其全部引入作為參考?？膳c一種或多種式I化合物聯(lián)用的HMGCoA還原酶抑制劑包括在美國專利3,983,140中公開的美伐他汀及相關化合物、在美國專利4,231,938中公開的洛伐他汀(美維諾林(mevinolin))及相關化合物、在美國專利4,346,227中公開的普伐他汀及相關化合物以及在美國專利4,448,784和4,450,171中公開的辛伐他汀及相關化合物。本申請可使用的其它HMGCoA還原酶抑制劑包括但不限于在美國專利5,354,772中公開的氟伐他汀、在美國專利5,006,530和5,177,080中公開的西立伐他汀(cerivastatin)、在美國專利4,681,893、5,273,995、5,385,929和5，686，104中公開的阿托伐他汀、在美國專利5,011,930中7厶開的阿伐他汀(atavastatin)(Nissan/Sankyo的尼伐他汀Qligvastatin)(NK-104))、在美國專利5,260,440中公開的維沙他汀(Wsastatin)(Shionogi-Astra/Zeneca(ZD-4522》以及在美國專利5,753,675中公開的相關抑制素化合物、在美國專利4,613,610中公開的曱羥戊酸內酯衍生物的吡唑類似物、在PCT申請WO86/03488中公開的曱羥戊酸內酯衍生物的茚類似物、在美國專利4,647,576中公開的6-[2-(取代的吡咯-l-基)-烷基)吡喃-2-酮及其衍生物、Searle的SC-45355(3-取代的戊二酸衍生物)二氯乙酸乙酯、在PCT申請WO86/07054中公開的曱羥戊酸內酯的咪唑類似物、在法國專利2,596,393中公開的3-羧基-2-羥基-丙烷-膦酸衍生物、在歐洲專利申請0221025中公開的2,3-二取代的吡咯、呋喃和噻吩衍生物、在美國專利4,686,237中公開的曱羥戊酸內酯的萘基類似物、在美國專利4,499,289中公開的八氫萘、在歐洲專利申請0142146A2中公開的美維諾林(洛伐他汀)的I同類似物以及在美國專利5,506,219和5，691，322中公開的喹啉和吡啶衍生物。期望的降血脂藥物為普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、氟伐他汀、西立伐他汀、阿伐他汀和ZD-4522。此外，抑制HMGCoA還原酶的膦酸化合物(例如在GB2205837中公開的物質)適于與本申請所描述的化合物聯(lián)用。適于在本申請中使用的角豊烯合成酶抑制劑包括但不限于在美國專利5,712,396中公開的a-膦?；?磺酸酯、Billeretal，J.Med.Chem.，1988,Vol.31,No.10,pp1869-1871所公開的物質(包括類異戊二烯(膦基-曱基)膦酸S旨)以及其它已知的角鯊烯合成酶抑制劑(例如在美國專利4,871,721和4,924,024以及Biller,S.A.,Neuenschwander,K.，Ponpipom,M.M.,andPoulter，C.D.，CurrentPharmaceuticalDesign,2,1-40(1996)中公開的物質)。此外，適于在本申請中使用的其它角豈烯合成酶抑制劑包括P.OrtizdeMontellanoetal，J.Med.Chem.,1977，20，243-249所7>開的碎類焦石舞酸酯、CoreyandVolante,J.Am.Chem.Soc.，1976,98,1291-1293所公開的法尼基二磷酸酯類似物A和前角鯊烯焦磷酸酯(PSQ-PP)類似物、McClard，R.W.etal,J.A.C.S.，1987，109,5544所報道的膦基磷酸酯和Capson,T丄.，PhDdissertation,June,1987,Dept.Med.Chem.UofUtah,Abstract,TableofContents,pp16，7，40-43,48-51，Summary所報道的環(huán)丙烷類?？膳c一種或多種式I化合物聯(lián)用的苯乙酸衍生物包括非諾貝特、吉非貝齊、氯貝丁酯、苯扎貝特、環(huán)丙貝特、克利貝特等、在美國專利3,674,836中公開的普羅布考及相關化合物(優(yōu)選為普羅布考和吉非貝齊)、膽汁酸螯合劑(例如考來烯胺、考來替泊和DEAE-葡聚糖凝膠(Secholex氣Policexide))以及保脂妥(Rhone-Poulenc)、EisaiE-5050(N-取代的乙醇胺衍生物)、伊馬昔爾(HOE-402)、四氫抑脂素(tetrahydrolipstatin)(THL)、istigmastanylphos-phorylcholine(SPC,Roche)、氛基環(huán)糊精(TanabeSeiyoku)、AjinomotoAJ-814(奧衍生物)、甲亞油酰胺(Sumitomo)、Sandoz58-035、AmericanCyanamidCL-277，082和CL-283，546(二取代的脲衍生物)、煙酸、阿昔莫司、阿昔呋喃、新霉素、對氨基水楊酸、阿司匹林、在美國專利4,759,923中公開的聚(二烯丙基曱胺)衍生物、在美國專利4,027,009中公開的季胺聚(氯化二烯丙基二曱銨)和紫羅烯類以及其它已知的降血清膽固醇藥物。開的物質或TS-962(TaishoPharmaceuticalCo.Ltd):DrugsoftheFuture24,9-15(1999),(Avasimibe(阿伐麥布))；"TheACATinhibitor,Cl-1011iseffectiveinthepreventionandregressionofaorticfattystreakareainhamsters",Nicolosietal，Atherosclerosis(Shannon，Irel).(1998)，137(1)，77-85;"ThepharmacologicalprofileofFCE27677:anovelACATinhibitorwithpotenthypolipidemicactivitymediatedbyselectivesuppressionofthehepaticsecretionofApoB100-containinglipoprotein",GhiseIIi，Giancarlo,Cardiovasc.DrugRev.(1998),16(1),16-30;"RP73163:abioavailable145alkylsulfinyl-diphenylimidazoleACATinhibitor",Smith,C.,etal,Bioorg.Med.Chem.Lett.(1996),6(1)，47-50;"ACATinhibitors:physiologicmechanismsforhypolipidemicandanti-atheroscleroticactivitiesinexperimentalanimals",Krauseetal,Editor(s):Ruffolo,RobertR,,Jr.;Hollinger,MannfredA.,Inflammation:MediatorsPathways(1995),173-98,Publisher:CRC,BocaRaton,Fla.;"ACATinhibitors:potentialanti-atheroscleroticagents",Sliskovicetal,CumMed.Chem.(1994)，1(3)，204-25;和"Inhibitorsofacyl-CoA:cholesterolO-acyltransferase(ACAT)ashypocholesterolemicagents.6.Thefirstwater-solubleACATinhibitorwithlipid-regulatingactivity.Inhibitorsofacyl-CoA:cholesterolacyltransferase(ACAT).7.DevelopmentofaseriesofsubstitutedN-phenyl-N，-[(l-phenylcyclopentyl)methyl]ureaswithenhancedhypocholesterolemicactivity",Stoutetal,Chemtracts:Org.Chem.(1995)，8(6),359-62。降血脂藥物可以是LD2受體活性的上調劑例如MD-700(TaishoPharmaceuticalCo.Ltd)和LY295427(EliLilly)。與本申請所述化合物聯(lián)用的合適膽固醇吸收抑制劑的實例包括SCH48461(Schering-Plough)以及在Atherosclerosis115,45-63(1995)和J.Med.Chem.41，973(1998)中公開的物質。與本申請所述化合物聯(lián)用的合適回腸NaV膽汁酸協(xié)同轉運蛋白抑制劑的實例包括在DrugsoftheFuture,24,425-430(1999)中公開的化合物。可與一種或多種式I化合物聯(lián)用的脂氧化酶抑制劑包括15-脂氧化酶(15-LO)抑制劑，例如在WO97/12615中公開的苯并咪峻衍生物、在WO97/12613中公開的15-LO抑制劑、在WO96/38144中公開的異瘞唑酮類以及Sendobryetal,"Attenuationofdiet-inducedatherosclerosisinrabbitswithahighlyselective15-lipoxygenaseinhibitorlackingsignificantantioxidantproperties",Brit.J.Pha薩cology(1997)120,1199-1206和Cornicellietal,"15-LipoxygenaseanditsInhibition:ANovelTherapeuticTargetforVascularDisease",CurrentPharmaceuticalDesign,1999,5,11-20所乂>開的15-LO抑制劑。與本申請所述化合物聯(lián)用的合適抗高血壓藥物的實例包括p腎上腺素能阻斷劑、鈣通道阻斷劑(L-型和T-型，例如地爾硫萆、維拉帕米、硝苯地146平、氨氯地平和mybefradil)、利尿劑(例如氯瘞。秦、氫氯噻溱、氟曱漆。秦、氫氟噻嗪、千氟噻嗪、曱基氯噻溱、三氯噻。秦、泊利噻。秦、千p塞。秦、依他尼酉交替尼酉臾(ethacrynicacidtricrynafen)、氯漆S同、p夫塞米、musolimine、布美他尼、triamtrenene、阿米洛利和螺內酯)、腎素抑制劑、ACE抑制劑(例如卡托普利、佐芬普利、福辛普利、依那普利、ceranopril、西拉普利(cilazopril)、地拉普利、噴托普利、壹那普利、雷米普利和賴諾普利)、AT-1受體拮抗劑(例如氯沙坦、厄貝沙坦和纈沙坦)、ET受體拮抗劑(例如西他生坦(sitaxsentan)、阿曲生坦(atrsentan)和在美國專利5,612,359和6，043，265中公開的化合物)、雙重ET/AII拮抗劑(例如在WO00/01389中公開的化合物)、中性肽鏈內切酶(NEP)抑制劑、血管肽酶(vasopepsidase)抑制劑(雙重NEP-ACE抑制劑)(例如奧馬曲拉和gemopatrilat)以及硝酸脂類。與本申請所述化合物聯(lián)用的合適抗肥胖癥藥物的實例包括NPY受體拮抗劑、NPY-Y2或NPY-Y4受體激動劑、胃泌酸調節(jié)素(Oxyntomodulin)、MCH拮抗劑、GHSR拮抗劑、CRH拮抗劑、卩-3腎上素能激動劑、脂酶(lipase)抑制劑、5-羥色胺(和多巴胺)再攝取抑制劑(reuptakeinhibitor)、曱狀腺受體卩藥物(thyroidreceptorbetadrug)、CB-1拮抗劑和/或厭食藥物(anorecticagent)?？扇芜x與本申請所述化合物聯(lián)用的(3-3腎上素能激動劑包括AJ9677(Takeda/Dainippon)、L750355(Merck)或CP331648(Pfizer)或在美國專利5,541,204、5,770,615、5,491,134、5,776,983和5,488,064中公開的其它已知卩-3激動劑，優(yōu)選為AJ9677、L750，355和CP331648?？扇芜x與本申請所述化合物聯(lián)用的脂酶抑制劑的實例包括奧利司他(orlistat)或ATL-962(Alizyme)，優(yōu)選為奧利司他?？扇芜x與式I化合物聯(lián)用的5-羥色胺(和多巴胺)再4聶取抑制劑可以是西布曲明(sibutramine)、托吡酯(topiramate)(Johnson&Johnson)或睫狀體神經營養(yǎng)因子(axokine)(Regeneron),優(yōu)選為西布曲明和托吡酯?？扇芜x與本申請所述化合物聯(lián)用的曱狀腺受體p化合物的實例包括曱狀腺受體的配體，例如在W097/21993(U.CalSF)、WO99/00353(KaroBio)和WO00/03卯77(KaroBio)中公開的化合物，優(yōu)選為KaroBio申請的化合物?？扇芜x與本申請所述化合物聯(lián)用的CB-1拮抗劑的實例包括CB-1拮抗劑和利莫那班(rimonabant)(SR141716A)。NPY-Y2和NPY-Y4受體激動劑的實例分別包括PYY(3-36)和胰多肽(PP)?？扇芜x與本申請所述化合物聯(lián)用的厭食藥物包括右旋苯丙胺(dexamphetamine)、芬4爭明(phentermine)、苯丙醇胺(phenylpropanolamine)或馬吲哚(mazindol)，優(yōu)選為右旋苯丙胺。合適的抗精神病藥物的實例包括氯氮平、氟哌啶醇、奧氮平(2乂^乂3@)、Prozac⑧和阿立哌唑(Abilify6)。在此將上述專利和專利申請引入作為參考。以上其它治療藥物，當與本申請所描述的化合物聯(lián)用時，可例如以在Physician'sDeskReference中說明的量、以在上述專利中列出的量或以本領域普通技術人員所另外確定的量來^f吏用。劑量及制劑合適的式I肽或更具體為含有SEQIDNO:l-179中任何一種的肽可按單獨化合物的形式和/或^可用載體混合的形式以藥物制劑的形式來向患者給藥以治療糖尿病和其它相關疾病。糖尿病治療領域的技術人員可容易地確定向需要這種治療的哺乳動物(包括人類)施用所述化合物的劑量和給藥途徑。給藥途徑可包括但不限于口服給藥、口內(intraoral)給藥、直腸給藥、經皮給藥、含服(buccal)給藥、鼻內給藥、肺部給藥、皮下給藥、肌內給藥、皮內給藥、舌下給藥、結腸內給藥、眼內給藥、靜脈內給藥或腸內給藥。根據(jù)給藥途徑基于可接受的藥學實踐(Fingletal.,in"ThePharmacologicalBasisofTherapeutics",Ch.1,p.l,1975;"Remington'sPharmaceuticalSciences",18thed.,MackPublishingCo,Easton，PA,1990)來配制化合物。本申請所描述的可藥用的肽組合物可按多種劑型來給藥，例如片劑、膠嚢劑(片劑和膠嚢劑各自.包括持續(xù)釋放制劑或定時釋放制劑)、丸劑、粉末劑、顆粒劑、酏劑、原位凝膠劑(insitugel)、微球劑、結晶復合物(crystallinecomplexe)、脂質體、微乳劑、酊劑、混懸劑、糖漿劑、噴霧劑和乳劑。本申請所描述的組合物也可按口服形式、靜脈內(推注或輸注)形式、腹膜內形式、皮下形式、經皮形式或肌內形式來給藥，所有形式都使用藥學領域普通技術人員所熟知的劑型。組合物可單獨給藥，但通常與藥物載體一起給藥，所述藥物載體根據(jù)所選擇的給藥途徑和標準藥學實踐來選擇。本申請所述組合物的給藥方案當然隨已知的因素而變化，例如具體藥148物的藥效學特征及其給藥模式和途徑；受試者的物種、年齡、性別、健康、醫(yī)療條件和體重；癥狀的性質和程度；當前治療的種類；治療的頻率；給藥途徑，患者的腎功能和肝功能；以及期望的效應。醫(yī)生或獸醫(yī)可確定所需藥物的有效量并且開具處方，以預防、對抗或阻止疾病狀態(tài)的進程。通過一般指導，活性成分當用于適應作用時的每日口服劑量的范圍為約0.001至1000mg/kg體重，優(yōu)選為約0.01至100mg/kg體重/日，最優(yōu)選為約0.6至20mg/kg/日。對于靜脈內給藥，在恒定速率輸注過程中，活性成分當用于適應作用時的每日劑量為O.OOlng至100.0ng/分鐘/千克體重。所述恒定靜脈內輸注可優(yōu)選以O.Olng至50ng/分鐘/千克體重的速率來給藥，最優(yōu)選以0.01ng至10.0mg/分鐘/千克體重的速率來給藥。本申請所描述的組合物可按單一每日劑量來給藥，或可按每日二次、三次或四次的分份劑量來給藥總每日劑量。本申請所描述的組合物也可通過儲庫制劑(depotformulation)來給藥，所述儲庫制劑允許藥物如期望的那樣在日/周/月時段內持續(xù)釋放。本申請所描述的組合物可按鼻內形式通過局部使用合適的鼻內載體來給藥，或通過經皮途徑使用經皮皮膚貼劑來給藥。當以經皮給藥系統(tǒng)的形式進行給藥時，藥物給予在整個給藥方案中當然是連續(xù)的，而不是間斷的。組合物通常以與合適藥物稀釋劑、賦形劑或載體(在本申請中統(tǒng)稱為藥物載體)混合的形式來給藥，所述藥物載體鑒于期望的給藥形式來合適地選擇，并且與常規(guī)藥學實踐相符，給藥形式有口服片劑、膠嚢劑、酏劑，噴霧劑(含有或不含有拋射劑)和糖漿劑。例如，對于以片劑或膠嚢劑的形式進行口服給藥，活性藥物組分可與口服無毒性可藥用惰性載體組合，所述口服無毒性可藥用惰性載體例如但不限于乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、曱基纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸4丐、甘露醇和山梨醇；對于以液體形式進行口服給藥，口服藥物組分可與任何口服無毒性可藥用惰性載體組合，所述口服無毒性可藥用惰性載體例如但不限于乙醇、甘油和水。此外，當期望或需要時，也可將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑引入到混合物中。合適的粘合劑包括但不限于淀粉、凝膠、天然糖類(例如但不限于葡萄糖或p-乳糖)、玉米甜味劑、天然膠類和合成膠類(例如阿拉伯膠、西黃耆膠或海藻酸鈉)、羧曱基纖維素、聚乙二醇和蠟類。在這些劑型中使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬149脂酸鎂、笨曱酸鈉、乙酸鈉和氯化鈉。崩解劑包括但不限于淀粉、曱基纖維素、瓊脂、膨潤土和黃原膠(xanthangum)。本申請所描述的組合物也可按混合膠束給藥系統(tǒng)或脂質體給藥系統(tǒng)的形式來給藥，所述給藥系統(tǒng)例如為小單層脂質體、大單層脂質體和多層脂質體。脂質體可從多種磷脂(例如膽固醇、硬脂酰胺或磷酸卵磷脂)來制備?？杉尤霛B透促進劑，以提高藥物吸收。因為已知前藥可提高藥物的多種期望的性質(即溶解度、生物利用度、制造等)，所以本申請所描述的化合物可按前藥的形式來給藥。因而，本申請所描述的主題意在涵蓋本申請所要求保護的化合物的前藥、給藥這些前藥的方法以及含有這些前藥的組合物。本申請所描述的組合物還可與作為靶向藥物載體的可溶性聚合物結合。所述聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥基丙基-異丁烯酰胺—笨酚、聚羥基乙基天冬酰胺苯酚或被棕櫚?；〈木垩趸蚁?聚賴氨酸。此外，本申請所描述的組合物可與一類生物可降解的聚合物組合，用于實現(xiàn)藥物的控制釋放，所述生物可降解的聚合物例如為聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚e己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯(polyorthoester)、聚縮醛、聚二氫晚喃、聚氰基?；?polycyanoacylate)以及水凝膠的交聯(lián)或兩親性嵌段共聚物。適于給藥的劑型(藥物組合物)可含有約0.01毫克至約500毫克活性成分/劑量單位。在這些藥物組合物中，按組合物的總重量計，活性成分通常以約0.5-95%重量的量存在。明膠膠嚢劑可含有活性成分和粉末狀載體(例如乳糖、淀粉、纖維素衍生物、硬脂酸鎂和硬脂酸)。類似的稀釋劑可用于制備壓制片劑。片劑和膠嚢劑都可制造成持續(xù)釋放的產品，以在數(shù)小時內提供持續(xù)釋放的藥物。壓制片劑可以是糖包衣或膜包衣的，以掩蓋任何不良的味道及保護片劑免于受空氣影響，或可以是腸溶衣包衣的，以在胃腸道中選擇性地崩解?？诜o藥的液體制劑可含有著色劑和調味劑，以提高患者接受性。水、合適的油、鹽水、右旋糖(葡萄糖)水溶液以及相關糖溶液和二醇(例如丙二醇或聚乙二醇)通常是用于腸胃外溶液劑(parenteralsolution)的合適載體。用于腸胃外給藥的溶液優(yōu)選含有活性成分的水溶性鹽、合適的穩(wěn)定劑以及緩沖物質(如果需要)?？寡趸瘎?例如單用或聯(lián)用的亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉或抗壞血酸)為合適的穩(wěn)定劑。也使用枸櫞酸及其鹽和EDTA鈉。此外，腸胃外溶液劑可含有防腐劑(例如苯扎氯銨，對羥基苯曱酸曱酯或對羥基苯曱酸丙酯和氯丁醇)。合適的藥物載體參見Remington:"TheScienceandPracticeofPharmacy":NineteenthEdition,MackPublishingCompany,1995即本領域的標準參考書。以下舉例說明了用于給藥本申請所述化合物的代表性的藥物劑型。膠嚢劑可通過用100毫克粉末狀活性成分、150毫克乳糖、50毫克纖維素和6毫克硬脂酸鎂填充標準的兩段式硬明膠膠嚢來制備很多種單位膠嚢劑。軟明膠膠嚢劑可制備活性成分在可消化油(例如大豆油、棉籽油或橄欖油)中的混合物，然后通過容積泵(positivedisplacementpump)將其注射到明膠中，以形成含有IOO毫克活性成分的軟明膠膠嚢?？蓪δz嚢進行洗滌和干燥。片劑片劑可通過常規(guī)操作來制備，從而使劑量單位例如含有IOO毫克活性成分、0.2毫克膠狀二氧化硅、5毫克硬脂酸鎂、275毫克微晶纖維素、11毫克淀粉和98.8毫克乳糖。可使用合適的包衣，以提高適口性或延緩吸收。注射劑本申請所述肽組合物的注射劑可能需要或不需要使用賦形劑(例如管理單位所批準的賦形劑)。這些賦形劑包括但不限于溶劑和共溶劑、增溶劑、乳化劑或增稠劑、螯合劑、抗氧化劑和還原劑、抗菌性防腐劑、緩沖劑和pH調節(jié)劑、填充劑、保護劑和張力調節(jié)劑及特別的添加劑。注射劑必須是無菌和無熱原的，以及就溶液形式而言必須是不含顆粒物的。適于注射給藥的腸胃外組合物(parenteralcomposition)可通過以下方法來制備對例如1.5重量％活性成分的可藥用緩沖溶液進行攪拌，所述可藥用緩沖溶液可含有或不含共溶劑或其它賦形劑?？捎寐然c來使溶液等滲，然后滅菌?；鞈覄┛芍苽溆糜诳诜o藥和/或腸胃外給藥的水性混懸劑，從而使例如每5mL含有100mg細微分散的活性成分、20mg羧曱基纖維素鈉、5mg苯曱酸鈉、1.0g山梨醇溶液(U.S.R)和0.025mL香草醛或其它適口調味劑。151生物可降解的微粒劑適于注射給藥的持續(xù)釋放的腸胃外組合物可例如通過以下方法來制備將合適的生物可降解聚合物溶于溶劑中，向聚合物溶液中加入待引入的活性成分，以及從基質除去溶劑，由此形成聚合物基質，而活性成分遍及在基質中?？稍诒景l(fā)明的教導下對本申請所描述和要求保護的主題進行多種改動和變化。因此應該理解的是，在所附權利要求書的范圍內，除本申請所具體描述的內容外，還可實施權利要求書所描述的其它主題。權利要求書所描述的主題不應該局限在上述具體實施方案的范圍內，這些具體實施方案意在作為要求保護的主題的單個實施方案。除本申請所顯示和描述的內容外，本領域技術人員還可通過上述描述和附圖來理解功能上等同的方法和組成。這些改動在所附權利要求書的范圍內。在此將本申請所引用的全部文獻完整引入作為參考。權利要求1.經分離的多肽，其包含式I的序列Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11式I其中Xaa1為包含咪唑環(huán)基團或噻唑環(huán)基團的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如組氨酸或噻唑基丙氨酸；其中所述氨基酸的任何碳原子任選經氫或一個或多個烷基或一個或多個鹵素取代；其中所述氨基酸的游離氨基任選經羥基或烷氧基代替，或任選經烷基、?；?、苯甲酰基、烷基氧基羰基、甲氧羰基、芳基氧基羰基、芳烷基氧基羰基、雜環(huán)基氧基羰基、雜芳基烷基氧基羰基、烷基氨甲?；⒎蓟奔柞；?、芳烷基氨甲?；㈦s環(huán)基磺?；⑼榛酋；⒎蓟酋；⒎蓟榛酋；㈦s芳基烷基磺?；螂s芳基磺?；〈磺移渲蠿aa1的氨基任選不存在，使得Xaa1為組氨酸的脫氨基酸或噻唑基丙氨酸的脫氨基酸，其中任何碳原子任選經烷基、鹵素或羥基取代；Xaa2為選自以下的天然存在或非天然存在的氨基酸α-氨基-異丁酸(Aib)、L-丙氨酸、D-丙氨酸、N-甲基-L-丙氨酸、N-甲基-D-丙氨酸、L-脯氨酸、(S)-α-甲基-脯氨酸(α-Me-Pro)、L-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(Azt)、(S)-α-甲基-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(α-Me-Azt)、L-纈氨酸及(R)-或(S)-異纈氨酸，且其中所述氨基酸的碳原子任選經烷基或鹵素中的一個或多個取代；Xaa3為含有包含羧酸基團的氨基酸側鏈的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如天冬氨酸或谷氨酸；且其中所述氨基酸的任何碳原子任選經烷基或鹵素中的一個或多個取代；Xaa4為甘氨酸；Xaa5為選自以下的天然存在或非天然存在的氨基酸L-蘇氨酸、L-別蘇氨酸、L-絲氨酸、L-正纈氨酸及L-正亮氨酸；且其中所述氨基酸的任何碳原子任選經烷基或鹵素中的一個或多個取代；Xaa6為包含經二取代的α碳的天然存在或非天然存在的氨基酸；其中所述氨基酸的側鏈之一含有芳環(huán)或雜芳環(huán)，例如α-甲基-苯基丙氨酸、α-甲基-2-氟苯基丙氨酸及α-甲基-2，6-二氟苯基丙氨酸；其中所述氨基酸的任何碳原子任選經一個或多個烷基取代；且其中所述氨基酸的任何碳原子任選經一個或多個鹵素取代；Xaa7為包含經羥基取代的氨基酸側鏈的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如L-蘇氨酸或L-別蘇氨酸；其中所述氨基酸的任何碳原子任選經烷基或鹵素中的一個或多個取代；Xaa8為選自以下的天然存在或非天然存在的氨基酸L-絲氨酸、L-組氨酸及L-天冬酰胺；其中所述氨基酸的一個或多個碳原子任選經烷基或鹵素中的一個或多個取代；Xaa9為含有包含羧酸基團的氨基酸側鏈的天然存在或非天然存在的氨基酸，諸如L-天冬氨酸或L-谷氨酸；其中所述氨基酸的一個或多個碳原子任選經烷基或鹵素中的一個或多個取代；Xaa10為式II、III或IV的天然存在或非天然存在的氨基酸式II式III式IV其中R3、R4及R6各自選自氫、烷基、甲基、乙基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、鹵素、羥基、羥基烷基、氰基、氨基、氨基烷基、羧基、羧基烷基、烷氧基、甲氧基、芳基氧基、羧酰胺基團、經取代的羧酰胺基團、烷基酯基團、芳基酯基團、烷基磺?；胺蓟酋；磺移渲蠿1、X2、X3、X4及X5各自為C或N，其限制條件為X1、X2、X3、X4及X5中的至少一個為N；Xaa11為式IIa、IIIa或IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸式IIa式IIIa式IVa其中所述氨基酸的C末端羰基碳與氮連接形成羧酰胺(NH2)、烷基羧酰胺(NHR1)或二烷基羧酰胺(NR1R2)；其中R1及R2各自為烷基或芳基烷基；其中R3a、R4a及R6a各自選自氫、烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、鹵素、羥基、羥基烷基、氰基、氨基、氨基烷基、羧基、羧基烷基、烷氧基、甲氧基、芳基氧基、羧酰胺基團、經取代的羧酰胺基團、烷基酯基團、芳基酯基團、烷基磺酰基及芳基磺?；?；其中R7選自氫、甲基及乙基；其中X1、X2、X3、X4及X5各自為C或N，其限制條件為X1、X2、X3、X4及X5中的至少一個為N；且其中當Xaa10為式II的氨基酸時，Xaa11不是式IIa的氨基酸。2.權利要求1的經分離的多肽，其中X^o為式II的天然存在或非天然存在的氨基酸。3.權利要求i的經分離的多肽，其中x禱為式m的天然存在或非天然存在的氨基酸。4.權利要求1的經分離的多肽，其中X,為式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸。5.權利要求1的經分離的多肽，其中所述X^選自L-His、D-His、L-N-曱基-His、D-N-曱基-His、L-4-。塞唑基-Ala、D-4-噻唑基-Ala、脫氨基-His、脫氨基-噻唑基-Ala、3-(lH-咪唑-4-基)-2-曱基丙?；?S)-3-(lH-咪唑-4-基)-2-羥基丙?；?L-P-咪唑乳?；?；且其中若存在末端氨基，則所述末端氨基任選經氫、烷基、二烷基、?；?、苯曱?；?、烷基氧基羰基、曱氧羰基、芳基氧基羰基、芳烷基氧基羰基、雜環(huán)基氧基羰基、雜芳基烷基氧基羰基、烷基氨甲?；?、芳基氨曱酰基、芳烷基氨曱酰基、雜環(huán)基磺酰基、烷基磺酰基、芳基磺?；⒎蓟榛酋；㈦s芳基烷基磺?；螂s芳基磺?；〈?.權利要求1的經分離的多肽，其中所述Xaa2選自L-Ala、D-Ala、N-曱基-L-Ala、N-曱基-D-Ala、L-Pro、(S)-a-曱基-L-Pro(a-Me-Pro)、L-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(Azt)、(S)-a-曱基-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(a-Me-Azt)及a-氨基異丁酸(Aib)。7.權利要求1的經分離的多肽，其中所述Xaa3選自L-Glu、L-Asp和L-Gla。8.權利要求1的經分離的多肽，其中所述Xaa4為Gy。9.權利要求l的經分離的多肽，其中所述Xaa5選自L-Thr、L-Nle、L-Nva、L-Aoc和L-別蘇氨酸。10.權利要求1的經分離的多肽，其中所述Xaa6選自L-a-Me-Phe、L-a-Et-Phe、L-a-Me-2-氟-Phe、L-a-Me畫3-氟-Phe、L畫a-Me-2,3-二氟-Phe、L-a-Me-2,6-二氟-Phe和L-a-Me-Phe(五氟)。11.權利要求l的經分離的多肽，其中所述Xaa7為L-Thr或L-別蘇氨酸。12.權利要求1的經分離的多肽，其中所述Xaas選自L-Ser、L-His和13.權利要求1的經分離的多肽，其中所述Xw為L-Asp。14.權利要求1的經分離的多肽，其中Xaa,o為式II的天然存在或非天然存在的氨基酸，其進一步經式VI定義式VI其中R3選自烷基及囟素；且5R6選自羥基及曱氧基。15.權利要求2的經分離的多肽，其中所述式II的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-[(4，-曱氧基-2，-乙基)-苯基]笨基丙氨酸、4-[(4，-乙氧基-2，-乙基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(4，-曱氧基-2，-曱基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(4，-乙氧基-2，-曱基)苯基]苯基丙氨酸、4-(2，-乙基苯基)苯基丙氨酸、4-(2，-曱基苯基)苯基丙氨酸、4-[(3，,5，-二甲基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(3，,4，-二曱氧基)苯基]苯基丙氨酸及4-[(2，-乙基-4，-羥基)苯基]苯基丙氨酸。16.權利要求1的經分離的多肽，其中Xa^為式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸，其進一步經式VIa定義<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式Via其中R3a選自曱基、乙基及氟；且其中R選自氫及曱基。17.權利要求1的經分離的多肽，其中X』為式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸，其進一步經式VIIa定義<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R^為曱氧基；且R7選自氫及曱基。18.權利要求3的經分離的多肽，其中所述式III的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-[2，-(4，-曱氣基-6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(4，-甲氧基-6，-曱基)吡啶基]-4-苯基丙氨酸、4-[2，-(6，-乙基)吡啶基]笨基丙氨酸、4-[2，-(6，-曱基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(3，，5，-二曱基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-p，-(4，-曱氧基-6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[3，-(4，-曱氧基-6，-曱基)吡啶基.l苯基丙氨酸、4-[3，-(2，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸及4-[3，-(6'-曱基)p比啶基)笨基丙氨酸。19.權利要求1的經分離的多肽，其中所述X^o為式IV的天然存在或非天然存在的氨基酸。20.權利要求19的經分離的多肽，其中所述式IV的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-[(4，-曱氧基-2，-乙基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-[(4，-曱氧基-2，-曱基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-[(3，，5，-二曱基)苯基]-3-吡n定基丙氨酸及4-[(2，_乙基-4，-羥基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸。21.權利要求1的經分離的多肽，其中所述X^,為式IIa的天然存在或非天然存在的氨基酸。22.權利要求21的經分離的多肽，其中所述式IIa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-(2，-曱基苯基)苯基丙氨酸、4-(2，-氟苯基)苯基丙氨酸、4-(2，-氯苯基)苯基丙氨酸、4-[(3，，4，-二曱氧基)苯基]苯基丙氨酸及4-[(3，，5，-二曱基)苯基]苯基丙氨酸；其中所述氨基酸的C末端羰基碳與氮連接形成羧酰胺(NH2)、烷基羧酰胺(NHR,)或二烷基羧酰胺(NR,R2),其中R,及R2各自為烷基或芳基烷基；其中R7選自氫及曱基。23.權利要求1的經分離的多肽，其中所述Xaan為式IIIa的天然存在或非天然存在的氨基酸。24.權利要求23的經分離的多肽，其中所述式IIIa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-[(6，-甲基)-2，-吡啶基]苯基丙氨酸、4-[(6，-甲基)-3，-吡啶基]笨基丙氨酸、4-[(6，-乙基)-2，-吡啶基)]苯基丙氨酸及4-[(6，-乙基)-3，-吡啶基"苯基丙氨酸；其中所迷氨基酸的C末端羰基碳與氮連接形成羧酰胺(NH2)、烷基羧酰胺(NHR,)或二烷基羧酰胺(NR,R2),其中R,及R2各自為烷基或芳基烷基；其中R7選自氫及甲基。25.權利要求4的經分離的多肽，其中所述式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自4-(2，-甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-氟苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-[(3，,5，-二曱基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-(4，-三氟曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸及4-(2，-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸。26.權利要求1的經分離的多肽，其中X^為選自L-His、D-His、L-N-曱基-His、D-N-甲基-His、L-a-甲基-His、D-a-曱基-His、L-4-噻唑基丙氨酸、D-4-遙唑基丙氨酸、脫氨基-His、脫氨基-噻唑基丙氨酸、3-(lH-咪唑-4-基)-2-曱基丙?；?S)d-(lH-咪唑4-基)-2-羥基丙?；?L-(3-咪唑乳?；?、(R)-及(S)-3-(m-咪唑-4-基)-2-曱氧基丙?；陌被?；其中若存在末端氨基，則所述末端氨基任選經氫、烷基、酰基、苯曱酰基、烷基氧基羰基(例如曱氧羰基)、芳基氧基羰基、芳烷基氧基羰基、雜環(huán)基氧基羰基、雜芳基烷基氧基羰基、烷基氨曱?；?、芳基氨曱?；?、芳烷基氨曱?；?、雜環(huán)基磺?；?、烷基磺?；?、芳基磺酰基、芳基烷基磺?；?、雜芳基烷基磺?；螂s芳基磺酰基取代；Xaa2為選自L-Ala、D-Ala、N-曱基-L-Ala、N-甲基-D-Ala、L-Pro、(S)-a-曱基-脯氨酸(a-Me-Pro)、L-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(Azt)、(S)-a-曱基-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸(a-Me-Azt)及a-氨基異丁酸(Aib)的氨基酸；Xaa3為選自L-Glu、L-Asp及L-Gla的氨基酸；Xaa4為Gy;Xw為選自L-Thr、L-Nle、L-Nva、L-Aoc及L-別蘇氨酸的氨基酸；Xaa6為選自L-a-Me-Phe、L-a陽Et-Phe、L-a-Me-2-氟-Phe、L-a-Me-3-氟-Phe、L-a-Me-2，3-二氟-Phe、L-a-Me-2，6-二氟-Phe及L-a-Me-Phe(五氟)的氨基酸；X^為選自L-Thr及L-別蘇氨酸的氨基酸；Xaa8為選自L-Ser、L-His及L-Asn的氨基酸；Xaa9為L-Asp;Xaal。為選自式II、III及IV的氨基酸的天然存在或非天然存在的氨基酸；其中式II為選自以下的氨基酸4-[(4，-曱氧基-2，-乙基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(2，-乙基-4，-羥基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(4，-乙氧基-2，-乙基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(4，-曱氧基-2，-甲基)苯基]苯基丙氨酸、4-[(4，-乙氧基-2，_曱基)苯基]笨基丙氨酸、4-(2，-乙基苯基)苯基丙氨酸、4-(2，-曱基苯基)苯基丙氨酸、4—[(3，,5，-二曱基)苯基]苯基丙氨酸及4-[(3，,4，-二曱氧基)苯基]苯基丙氨酸；其中式III為選自以下的氨基酸4-[2，-(4，-曱氧基-6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(4，-甲氧基-6，-甲基)吡啶基]-4-苯基丙氨酸、4-[2，-(6，-乙基)p比啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(6，-曱基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(3，,5，-二曱基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[2，-(4，-曱氧基-6，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[3，-(4，-甲氧基_6，-甲基)吡啶基]苯基丙氨酸、4-[3，-(2，-乙基)吡啶基]苯基丙氨酸及4-[3，-(6，-曱基)吡啶基]苯基丙氨酸；其中式IV為選自以下的氨基酸4-[(4，-曱氧基-2，-乙基)苯基]-3-吡咬基丙氨酸、4-[(4，-曱氧基-2，-甲基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-(2，-曱基苯基)-3-吡啶基丙氨酸及4-[(3，，5，-二曱基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸；且Xaall為選自式IIa、IIIa及IVa的氨基酸的天然存在或非天然存在的氨基酸；其中式IIa為選自以下的氨基酸4-(2，-曱基苯基)苯基丙氨酸、4-(2，-氟苯基)苯基丙氨酸及4-[(3，，5'-二曱基)苯基]苯基丙氨酸；其中式IIIa為選自以下的氨基酸4-(6，-甲基-2，-吡啶基)苯基丙氨酸、4-(6'-曱基-2'-吡啶基)苯基丙氨酸、4-(6，-乙基-2，-吡啶基)苯基丙氨酸及4-(6，-乙基-3，-吡啶基)苯基丙氨酸；其中式lVa為選自以下的氨基酸4-(2，-甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-(2'-氟苯基)-3-吡啶基丙氨酸、4-[(3，,5，-二甲基)苯基]-3-吡啶基丙氨酸、4一(4'-三氟甲基苯基)-3-吡啶基丙氨酸及4-(2，-乙基苯基)-3-吡啶基丙氨酸；其中C末端羰基碳與氮連接形成羧酰胺(NH2)、烷基羧酰胺(NHR!)或二烷基羧酰胺(NR,R2)，其中R,及112各自為烷基或芳基烷基；其中R7選自氫及曱基；且其中當Xaa,。為式II的氨基酸時，Xaan不是式IIa的氨基酸。27.權利要求1的經分離的多肽，其選自_28.<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>29.經分離的多肽，其中所述經分離的多肽包含<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>SEQIDNO:158q30.—種藥物組合物，其包含式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:l-157及159-179的肽中任何一種的多肽及其可藥用載體。31.—種藥物組合，其包舍式I的經分離的多肽或含有SEQIDNO:1-157及159-179的肽中任何一種的多肽及至少一種選自以下的治療劑抗糖尿病劑、抗肥胖劑、抗高血壓劑、抗動脈粥樣硬化劑及降脂質劑。32.權利要求31的組合，其中所述抗糖尿病劑為至少一種選自以下的藥物雙胍類、磺酰脲類、葡糖苷酶抑制劑、PPARy激動劑、PPARa々雙重激動劑、aP2抑制劑、DPP4抑制劑、胰島素增敏劑、人胰高血糖素樣肽-l(GLP-l)、胰島素、SGLT-2抑制劑、GPR119調節(jié)劑及美格列奈。33.權利要求32的組合，其中所述抗糖尿病劑為至少一種選自以下的藥物二曱雙胍、格列本脲、格列美脲、格列吡脲、格列吡嗪、氯磺丙脲、格列齊特、阿卡波糖、米格列醇、吡格列酮、曲格列酮、羅格列酮、胰島素、法格他扎(farglitizar)、伊格列酮、瑞格列扎(reglitizar)、巴格列酮(balaglitazone)、CASRN:335149-08-1、(Z)-l，4-二(4-[(3,5-二氧代-l，2,4-。惡二唑烷-2-基)曱基]苯氧基}丁-2-烯、利格列酮(rivoglitazone)、rafaegron、瑞格列奈、那格列奈、(S)-2-芐基-4-氧代-4-(順-全氫異吲哚-2-基)丁酸鈣、tesaglitizar、N-[(lZ)-l-曱基-3-氧代-3-苯基-l-丙烯基]-4-[3-(5-曱基-2-苯基-4-碌、唑基)丙基]L-苯基丙氨酸、5-[(2，4-二氧代-5-噻唑烷基)曱基]-2-曱氧基—N-[[4-(三氟曱基)苯基]曱基]苯曱酰胺、艾塞那肽(exenatide)、8-37-胰高血糖素樣肽I(人類)、N-[3-(lH-咪唑-4-基)-l-氧代丙基]-26-L-精氨酸-34-[N6-(l-氧代辛基)-L-賴氨酸]、8-36-胰高血糖素相關肽l(八齒鼠(octodondegus))、N-[3-(1&咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-26-L-精氨酸-34-[N6-(1-氧代辛基)-L-賴氨酸]-36a及維達列汀(vildagliptin)。34.權利要求31的組合，其中所述抗肥胖劑為至少一種選自以下的藥物CB-1拮抗劑或反向激動劑、Y2受體激動劑、Y4受體激動劑、P-3腎上腺素能激動劑、脂肪酶抑制劑、5-羥色胺再攝取抑制劑、多巴胺再攝取抑制劑、5-羥色胺及多巴胺再攝取抑制劑、甲狀腺受體(3化合物及厭食劑。35.權利要求34的組合，其中所述抗肥胖劑為至少一種選自以下的藥物利莫納班、MK-0364、SLV-319、奧利司他、賽利司他(cetilistat)、rafabregon、^[4-[2-[[(28)-3-[(6-氨基-3-處啶基)氧基]-2-羥基丙基]氨基]乙基]苯基]-4-(1-曱基乙基)苯磺酰胺、西布曲明、托吡酯、axokine、右旋苯丙胺、芬特明、笨丙醇胺及馬p引咮。36.權利要求31的組合，其中所述降脂質劑為至少一種選自以下的藥物MTP抑制劑、膽固醇酯轉移蛋白、HMGCoA還原酶抑制劑、角鯊烯合成酶抑制劑、苯乙酸衍生物、LDL受體活性上調劑、脂氧化酶抑制劑及八CAT抑制劑。37.權利要求36的組合，其中所述降脂質劑為至少一種選自以下的藥物普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、尼伐他汀、維沙他汀、非諾貝特、吉非貝齊、氯貝丁酯、阿伐麥布、N-[2,6-二(l-曱基乙基)苯基]-2-(十四烷基硫基)-乙酰胺、3-(13-羥基-10-氧代十四烷基)-5,7-二甲氧基-1(3H)-異苯并呋喃酮、torcetrapib及(3a,4a，5a)-4-(2-丙烯基膽甾烷-3-醇)。38.治療或延遲以下疾病的進展或發(fā)作的方法糖尿病、糖尿病視網膜病、糖尿病神經病、糖尿病腎病、創(chuàng)傷愈合、胰島素4氐抗、高血糖癥、高胰島素血癥、X綜合征、糖尿病并發(fā)癥、游離脂肪酸或甘油血液水平提高、高脂血癥、肥胖癥、高甘油三酯血癥、動脈粥樣硬化或高血壓，所述方法包括向需要治療的哺乳動物物種給藥治療有效量的式I的經分離的多肽或包含SEQIDNO:l-179中4壬何一種的肽。39.權利要求38的方法，其還包括同時或先后給藥治療有效量的一種或多種選自以下的治療劑抗糖尿病劑、抗肥胖劑、抗高血壓劑、抗動脈粥樣硬化劑及降脂質劑。40.權利要求39的方法，其中所述抗糖尿病劑為至少一種選自以下的藥物雙胍類、磺酰脲類、葡糖苷酶抑制劑、PPAR"T激動劑、PPARa/Y雙重激動劑、aP2抑制劑、DPP4抑制劑、胰島素增敏劑、人胰高血糖素樣肽-l(GLP-l)、胰島素、SGLT-2抑制劑、GPR119調節(jié)劑及美格列奈；其中所述抗糖尿病劑進一步定義為至少一種選自以下的藥物二曱雙胍、格列本脲、格列美脲、格列吡脲、格列吡嗪、氯磺丙脲、格列齊特、阿卡波糖、米格列醇、吡格列酮、曲格列酮、羅格列酮、胰島素、法格他扎、伊格列酮、瑞格列扎、巴格列酮、CASRN:335149-08-1、(Z)畫l,4-二(4-[(3,5畫二氧代-1,2,4-喊'二唑烷_2-基)甲基]苯氧基}丁-2-烯、利格列酮、rafaegron、瑞格列奈、那格列奈、(S)-2-千基-4-氧代-4-(順-全氫異。引哚-2-基)丁酸4丐、tesaglitizar、N-[(1Z)-1-曱基-3-氧代-3-苯基-l-丙烯基]-4-[3-(5-曱基-2-苯基-4-。惡唑基)丙基]L-苯基丙氨酸、5-[(2，4-二氧代-5-噻唑烷基)曱基]-2-曱氧基-N-[[4-(三氟曱基)苯基]曱基]苯甲酰胺、艾塞那肽、8-37-胰高血糖素樣肽I(人類)、N-[3-(lH-咪唑-4-基)-1-氧代丙基]-26-L-精氨酸-34-[N6-(1-氧代辛基)-L-賴氨酸]、8-36-胰高血糖素相關肽l(八齒鼠)、N-[3-(lH-咪唑-4-基)-l-氧代丙基]-26-L-精氨酸-34-[N6-(l-氧代辛基)-L-賴氨酸]-36a及維達列??；其中所述抗肥胖劑為至少一種選自以下的藥物CB-1拮抗劑或反向激動劑、Y2受體激動劑、Y4受體激動劑、p-3腎上腺素能激動劑、脂肪酶抑制劑、5-羥色胺再攝取抑制劑、多巴胺再攝取抑制劑、5-羥色胺及多巴胺再攝取抑制劑、曱狀腺受體p化合物及厭食劑；其中所述抗肥胖劑進一步定義為至少一種選自以下的藥物利莫納班、MK-0364、SLV-319、奧利司他、賽利司他、rafabregon、N-[4-[2-[[(2S)-3-[(6-氨基-3-吡啶基)氧基]-2-羥基丙基]氨基]乙基]苯基]-4-(l-曱基乙基)苯磺酰胺、西布曲明、托吡酯、axokine、右旋苯丙胺、芬特明、苯丙醇胺及馬吲哚；其中所述降脂質劑為至少一種選自以下的藥物MTP抑制劑、膽固醇酯轉移蛋白、HMGCoA還原酶抑制劑、角鯊烯合成酶抑制劑、苯乙酸衍生物、LDL受體活性上調劑、脂氧化酶抑制劑或ACAT抑制劑；且其中所述降脂質劑進一步定義為至少一種選自以下的藥物普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、尼伐他汀、維沙他汀、非諾貝特、吉非貝齊、氯貝丁酯、阿伐麥布、N-[2,6-二0曱基乙基)苯基]-2-(十四烷基硫基)-乙酰胺、3-(13-羥基-10-氧代十四烷基)-5，7-二曱氧基-1(3H)-異苯并呋喃酮、torcetrapib及(!3(Ma，Sa)"4-(2-丙烯基膽甾烷-弘醇)。41.包含以下結構的化合物其中P為氫或芴基曱氧羰基(Fmoc)或叔丁氧基羰基(t-Boc);且其中R:選自曱基、乙基及氟；且其中R7選自氫及曱基。42.包含以下結構的化合物其中P為氮或芴基曱氧羰基(Fmoc)或叔丁氧基羰基(t-Boc);且其中R:為曱氧基；且其中R7選自氫及曱基。43.權利要求1的經分離的多肽，其中Xaal為L-組氨酸，且其中Xaal的氨基未經取代；Xaa2選自Xaa3為L-谷氨酸或L-組氨酸;X^為甘氨酸；X^為L-蘇氨酸；Xaa6選自X^為L-蘇氨酸;Xaa8選自Xaa9為L-天冬氨酸;Xaa,o為式II的天然存在或非天然存在的氨基酸，其中所述式II的天然存在或非天然存在的氨基酸選自其中Xaall為式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸，其中所述式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自R,及R7選自氫及曱基。44.權利要求1的經分離的多肽，其中Xaal選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>Xaa3為L-谷氨酸或L-組氨酸;X^為甘氨酸；X^為L-蘇氨酸；Xaa6選自X^為L-蘇氨酸;Xaa8選自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>Xaa9為L-天冬氨酸；XaaiQ為式II的天然存在或非天然存在的氨基酸，其中所述式II的天然存在或非天然存在的氨基酸選自其中Xaau為式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸，其中所述式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自^tr,1Air,1a4y,:a4v隨，、-、"a和，、其中R,及R7選自氫及甲基。45.權利要求1的經分離的多肽，其中X^為;且<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>、Xaa3為L-谷氨酸或L-組氨酸；X^為甘氨酸；X^為L-蘇氨酸；Xaa6選自X^為L-蘇氨酸Xaa8選自Xaa9為L-天冬氨酸；Xaa,。為式II的天然存在或非天然存在的氨基酸，其中所述式II的天然存在或非天然存在的氨基酸選自Xaall為式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸，其中所述式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自其中R,及R7選自氫及曱基。46.權利要求1的經分離的多肽，其中Xaai為R9選自氫及甲基;Xaa3為L-谷氨酸或L-組氨酸;X^為甘氨酸；X膽5為L-蘇氨酸；Xaa6選自X^為L-天冬氨酸；Xaa,。為式II的天然存在或非天然存在的氨基酸，其中所述式II的天然存在或非天然存在的氨基酸選自Xaall為式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸，其中所述式IVa的天然存在或非天然存在的氨基酸選自其中R,及R7選自氫及甲基。47.—種多肽，其包含序列Thr-Ser-Asp-Bip(2，-Et-4，-OH)-吡。定基丙氨酸(SEQIDNO:177),其中所述多肽結合并活化GLP-1受體。48.權利要求47的多肽，其中所述多肽還包含脯氨酸。49.權利要求48的多肽，其中所述脯氨酸為從氨基末端殘基起的第二個殘基，且為a-曱基脯氨酸。50.權利要求47的多肽，其中所述吡啶基丙氨酸為4-(2，-曱基苯基)-3-吡咬基丙氨酸。51.權利要求47的多肽，其中所述多肽還包含氨基末端的氨基曱酸酯。52.權利要求47的多肽，其中所述Thr-Ser-Asp-Bip(2，-Et-4，-OH)-吡咬基丙氨酸殘基分別處于所述多肽的第七位、第八位、第九位及第十位，且其中第二位包含a-甲基脯氨酸。53.權利要求47的多肽，其中所述多肽為包含SEQIDNO:158的肽。54.—種多肽，其包含SEQIDNO:158。55.—種藥物組合物，其包含SEQIDNO:158的經分離的多肽及其可藥用載體。56.—種藥物組合，其包含SEQIDNO:158的經分離的多肽及至少一種選自以下的治療劑抗糖尿病劑、抗肥胖劑、抗高血壓劑、抗動脈粥樣硬化劑及降脂質劑。57.權利要求56的組合，其中所述抗糖尿病劑為至少一種選自以下的藥物雙胍類、磺酰脲類、葡糖苷酶抑制劑、PPAR丫激動劑、PPARaAy雙重激動劑、aP2抑制劑、DPP4抑制劑、胰島素增敏劑、人胰高血糖素樣肽-l(GLP-l)、胰島素、SGLT-2抑制劑、GPR119調節(jié)劑及美格列奈。58.權利要求57的組合，其中所述抗糖尿病劑為至少一種選自以下的藥物二甲雙胍、格列本脲、格列美脲、格列p比脲、格列吡。秦、氯磺丙脲、格列齊特、阿卡波糖、米格列醇、吡格列酮、曲格列酮、羅格列酮、胰島素、法格他扎、伊格列酮、瑞格列扎、巴格列酮、CASRN:335149-08-1、(Z)-l，4-二H-[(3,5-二氧代-l,2,4-碌-二唑烷-2-基)曱基]苯氧基〉丁-2-烯、利格列酮、rafaegron、瑞格列奈、那格列奈、(S)-2-芐基-4-氧代-4-(順-全氫異吲哚-2-基)丁酸鈣、tesaglitizar、^[(12)-1-曱基-3-氧代-3-苯基-1-丙烯基]-4-[3-(5-曱基-2-苯基-4-噁唑基)丙基]L-苯基丙氨酸、5-[(2,4-二氧代-5-噻唑烷基)曱基]-2-曱氧基-N-[[4-(三氟甲基)苯基]曱基]苯曱酰胺、艾塞那肽、8-37-胰高血糖素樣肽I(人類)、N-[3-(lH-咪唑-4-基)-l-氧代丙基]-26-L-精氨酸-34-[N6-(l-氧代辛基)-L-賴氨酸]、8-36-胰高血糖素相關肽l(八齒鼠)、N-[3-(lH-咪唑-4-基)-l-氧代丙基]-26-L-精氨酸-34-[N6-(l-氧代辛基)-L-賴氨酸]-36a及維達列汀。59.權利要求56的組合，其中所述抗肥胖劑為至少一種選自以下的藥物CB-1拮抗劑或反向激動劑、Y2受體激動劑、Y4受體激動劑、P-3腎上腺素能激動劑、脂肪酶抑制劑、5-羥色胺再攝取抑制劑、多巴胺再攝取抑制劑、5-羥色胺及多巴胺再攝取抑制劑、甲狀腺受體{3化合物及厭食劑。60.權利要求59的組合，其中所述抗肥胖劑為至少一種選自以下的藥物利莫納班、MK-0364、SLV-319、奧利司他、賽利司他、rafabregon、N-[4-[2-[[(2S)-3-[(6-氨基-3-吡啶基)氧基]-2-羥基丙基]氨基]乙基]苯基]-4-(l-曱基乙基)苯磺酰胺、西布曲明、托吡酯、axokine、右旋苯丙胺、芬特明、笨丙醇胺及馬吲哚。61.權利要求56的組合，其中所述降脂質劑為至少一種選自以下的藥物MTP抑制劑、膽固醇酯轉移蛋白、HMGCoA還原酶抑制劑、角鯊烯合成酶抑制劑、苯乙酸衍生物、LDL受體活性上調劑、脂氧化酶抑制劑及ACAT抑制劑。62，權利要求61的組合，其中所述降脂質劑為至少一種選自以下的藥物普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、尼伐他汀、維沙他汀、非諾貝特、吉非貝齊、氯貝丁酯、阿伐麥布、N-[2,6-二(l-甲基乙基)苯基]-2-(十四烷基硫基)-乙酰胺、3-(D-羥基-10-氧代十四烷基)-5,7-二曱氧基-l(3H)-異苯并呋喃酮、torcetmpib及(3a,4(1,501)-4-0丙烯基膽甾烷-3-醇)。全文摘要本發(fā)明提供新的人胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)受體調節(jié)劑，其具有類似于或優(yōu)于天然GLP-1肽的生物活性，因而可用于治療或預防與GLP活性相關的疾病或病癥。所述化合物包括經化學修飾的肽，其不但可在II型糖尿病中刺激胰島素的分泌，而且還產生其它有益的促胰島素響應。這些合成的肽GLP-1受體調節(jié)劑對溶蛋白性裂解表現(xiàn)出提高的穩(wěn)定性，這使它們成為理想的用于口服或腸胃外給藥的治療候選物。本發(fā)明的肽在糖尿病的功效模型中顯示出期望的藥物動力學性質和期望的效能。文檔編號C07K7/06GK101495502SQ200780028160公開日2009年7月29日申請日期2007年5月25日優(yōu)先權日2006年5月26日發(fā)明者克勞迪奧·馬佩利,威廉·R·尤因,文格·G·李,朱曄恒,理查德·B·薩爾斯基,道格拉斯·J·里辛格申請人:百時美施貴寶公司