專利名稱：吸附樹脂法從苦蕎植物全株提取高純度黃酮化合物的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及高選擇性吸附樹脂的合成及其在天然產(chǎn)物有效成分提取純化中的應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
苦蕎即苦蕎麥，國外稱韃靼蕎麥(tartary buckwheat)，是我國特有的一種蕎麥，主要分布于我國西南地區(qū)的高寒地帶。蕎麥屬于雙子葉蓼科作物，蕎麥富含高生物價的蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)等，且莖、葉、花、果實(shí)等均含有豐富的蘆丁等黃酮類化合物，尤其是苦蕎中黃酮含量極為豐富(徐寶才，丁霄霖，苦蕎黃酮的測定方法[J]，無錫輕工大學(xué)學(xué)報，2003，22(2)98-101)。研究表明，苦蕎黃酮具有較強(qiáng)的生物活性，毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)證明其為無毒、無副作用的物質(zhì)，因此苦蕎是傳統(tǒng)的藥食同源的天然植物。隨著分子生物學(xué)研究手段的不斷深入，對于苦蕎黃酮藥效學(xué)的研究取得了顯著的成果，實(shí)驗(yàn)證明對于實(shí)驗(yàn)性高血脂血癥大鼠的血脂和肝指數(shù)有明顯的降低作用，可大大提高血液的抗氧化能力，減輕高脂飲食導(dǎo)致的氧化損傷(童紅莉，田亞平，汪德清等，苦蕎殼提取物對大鼠血脂的調(diào)節(jié)作用[J]，第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2006，27(2)120-122)，對于實(shí)驗(yàn)性高血糖小鼠血糖有明顯降低作用，對其耐糖量也有明顯改善作用(祁學(xué)忠，吉鎖興，王曉燕等，苦蕎黃酮及其降血糖作用的研究[J]，科技情報開發(fā)與經(jīng)濟(jì)，2003，13(8)111-112)。正是由于苦蕎黃酮顯著的降血糖、降血脂、抗疲勞、增強(qiáng)免疫功能，使得在醫(yī)藥、化妝品、保健品方面具有廣闊的應(yīng)用前景。
目前關(guān)于苦蕎黃酮的提取方法大致分為傳統(tǒng)方法和現(xiàn)代方法，傳統(tǒng)方法仍以簡單的溶劑浸提為主，黃酮提取效率和提取純度均較低，這就極大的浪費(fèi)了原料，只能制備低純度的粗提物，無法在藥用研究中發(fā)揮更大的作用，同時由于提取時消耗大量有機(jī)溶劑，生產(chǎn)成本較高，對環(huán)境的污染較大([1]李裕，劉有智，霍紅，苦蕎麥中提取蘆丁的工藝研究[J]，華北工學(xué)院學(xué)報，2002，23(2)130-132。[2]劉本國，朱永義，苦蕎中生物類黃酮提取工藝的研究[J]，糧食與飼料工業(yè)，2004，423-25)。為了減少有機(jī)溶劑的消耗，也有用水作為浸提劑提取苦蕎黃酮的研究報道(肖詩明，張忠，李勇等，苦蕎麥麩皮中黃酮的提取工藝條件研究[J]，食品科學(xué)，2006，27(1)156-158)，但是水作為浸提劑，常常將苦蕎中水溶性物質(zhì)也提取出來，如纖維素、多糖等，造成提取物易吸濕，且黃酮含量較低，只有10％左右(周瑞雪，閻志惠，劉恩荔等，苦蕎黃酮類化合物的提取工藝[J]，中藥材，2006，29(8)849-850)?？嗍w黃酮現(xiàn)代提取方法主要有微波提取(王軍，王敏，李小艷，微波提取苦蕎麥麩皮總黃酮工藝研究[J]，天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2006，18655-658)和超聲提取(季春燕，周樂，王欣等，正交設(shè)計優(yōu)選苦蕎黃酮成分的超聲提取工藝[J]，西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2005，33(5)105-107)，與傳統(tǒng)提取方法相比，這些方法大大提高了提取效率，但是仍然存在著設(shè)備投資昂貴、噪聲污染較大、難于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的缺陷，同時提取物中黃酮的純度仍然較低。
近年來，在天然產(chǎn)物有效成分的現(xiàn)代提取分離方法中，吸附樹脂法收到了人們越來越多的關(guān)注，吸附分離技術(shù)是70年代發(fā)展起來的一項(xiàng)新技術(shù)，應(yīng)用于中草藥有效成分的提取分離已有近20年，實(shí)踐證明，它具有吸附選擇性高、再生簡便、能循環(huán)使用、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)，在黃酮類化合物的提取純化中得到了廣泛的應(yīng)用，例如用弱極性AB-8樹脂對苦參黃酮、銀杏黃酮進(jìn)行吸附分離取得了良好的效果([1]高紅寧，金萬勤，郭立偉等，AB-8樹脂對苦參總黃酮的吸附性能研究[J]，中草藥，2001，32(10)588-590；[2]麻秀萍，蔣朝暉，楊玉琴等，大孔吸附樹脂對銀杏葉黃酮的吸附研究[J]，中國中藥雜志，1997，22(9)539-554)。但是到目前為止還未見吸附樹脂法提取苦蕎黃酮，特別是高純度苦蕎黃酮的報道，這主要是因?yàn)楝F(xiàn)有的商品化樹脂主要以聚苯乙烯為骨架，吸附作用力仍為廣譜性的疏水作用力，因此樹脂的吸附選擇性較差，難以用于制備高純度提取物。另外雖然苦蕎植物全株的不同部位均含有豐富的黃酮類化合物，但是目前多集中于從苦蕎種子(苦蕎麥粒)或其種皮中提取苦蕎黃酮，對于生物量更大的苦蕎莖葉只作為廢物丟棄，未見提取的研究報道，這必然造成資源的極大浪費(fèi)，制約了無廢物苦蕎的開發(fā)研究。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目地是解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，提供一種高選擇性氫鍵吸附樹脂的制備方法，根據(jù)苦蕎黃酮分子結(jié)構(gòu)的特征，在樹脂上引入特殊功能基團(tuán)，將疏水、氫鍵等多種弱相互作用的協(xié)同效應(yīng)引入樹脂吸附過程，并首次將其用于從苦蕎種子、莖葉中提取高純度黃酮類化合物。
通過對苦蕎黃酮分子結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)研究，發(fā)現(xiàn)它含有酚羥基結(jié)構(gòu)，是形成氫鍵的典型基團(tuán)(其分子結(jié)構(gòu)如式1所示)，所以我們設(shè)計合成了一類高選擇性吸附樹脂，在其骨架結(jié)構(gòu)上有目的的引入能與酚羥基形成氫鍵的特殊功能基團(tuán)，大大提高了樹脂對黃酮的吸附選擇性，將其用于從苦蕎植物全株的不同部位，如種子和莖葉中提取苦蕎黃酮，建立了樹脂法提取工藝。
R＝C12H21O9式1苦蕎黃酮分子結(jié)構(gòu)本發(fā)明提供的吸附樹脂法從苦蕎植物全株提取高純度黃酮化合物的工藝方法，通過以下步驟實(shí)現(xiàn)1)將市售的苦蕎種子、莖葉或二者的原料粉碎，用70％乙醇水溶液60℃回流提取2小時，共提取三次，合并提取液，減壓蒸餾回收乙醇后，加水稀釋(溶液體積(ml)與原料質(zhì)量(g)比為10/1-30/1)，過濾，得澄清水溶液，為吸附上柱液；其中，苦蕎種子的黃酮含量高于4％，莖葉的黃酮含量高于1％；2)將吸附上柱液通入裝有氫鍵吸附樹脂的樹脂柱中吸附，吸附柱的徑長比為1/5-1/20，吸附流速為1.0-3.0BV/小時；3)吸附完成后，用水將樹脂清洗干凈，60-80％乙醇水溶液作解吸劑，解吸速度為0.5-1.0BV/小時，收集解吸液；4)解吸液經(jīng)減壓蒸餾回收乙醇、濃縮、真空干燥，得到淡黃綠色苦蕎黃酮提取物。
上述方法2)步中使用的氫鍵吸附樹脂通過以下步驟制備而成1)初始聚苯乙烯共聚物白球的制備在常溫下，將明膠或聚乙烯醇溶解于水中，配成濃度0.5-1.0％的水溶液，為反應(yīng)的水相，于三口瓶中水浴加熱至30～50℃；以二乙烯苯和苯乙烯為聚和反應(yīng)的混合單體(其中二乙烯苯占混合單體總質(zhì)量的6-20％)、以混合單體總質(zhì)量80-150％的長鏈烷烴作致孔劑、以混合單體總量0.5-1.0％的偶氮二異丁腈或過氧化苯甲酰為引發(fā)劑，將上述混合單體、致孔劑、引發(fā)劑充分混勻，配成反應(yīng)的油相，將油相加入水相中，其中油相與水相體積比為1∶3；經(jīng)懸浮聚合，升溫至60～80℃反應(yīng)2～6小時以上，再升溫至90℃反應(yīng)3小時以上，經(jīng)過濾、洗滌處理后，制備出聚苯乙烯型大孔吸附樹脂，簡稱白球；2)白球的氯甲基化常溫下在三口瓶中加入白球，以氯甲醚和二氯乙烷的混合溶液充分溶脹，混合溶液用量為白球質(zhì)量的5-8倍，氯甲醚和二氯乙烷的體積比為1∶2；加入ZnCl2作催化劑，用量為白球質(zhì)量的40-60％，充分混勻，然后升溫到30-40℃，反應(yīng)8-12小時，取樣測定氯含量高于18-20％后停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后，制備出氯甲基化的聚苯乙烯樹脂，簡稱氯球；3)氯球的胺化常溫下在三口瓶中加入氯球，以N，N-二甲基甲酰胺或二氯乙烷為溶劑充分溶脹，用量為氯球質(zhì)量的2-4倍，加入氯球質(zhì)量50％的脂肪胺(甲胺、二甲胺、乙胺、或二乙胺)，以5％氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)體系pH值為9-10，加熱至50-60℃，反應(yīng)6-8小時，取樣測定殘余的氯含量，低于0.3mmol/g干樹脂，同時測定胺交換量高于4mmol/g干樹脂時停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后制備出胺化的聚苯乙烯樹脂，簡稱胺球；4)胺球的酰胺化常溫下在三口瓶中加入胺球，以乙酸酐或酰氯為溶劑和反應(yīng)試劑充分溶脹，用量為胺球質(zhì)量的2-4倍，升溫至40-60℃，反應(yīng)6-8小時，取樣測定胺交換量低于0.2mmol/g干樹脂時停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后制備出所需的氫鍵吸附樹脂。
氫鍵吸附樹脂外觀特征和結(jié)構(gòu)參數(shù)為外觀為球形，淺黃色，粒徑0.3-1.0mm，比表面積為120-600m2/g干樹脂，含水量為60-80％，平均孔徑為10-30nm，孔隙率50-65％。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果本發(fā)明合成了一種高選擇性氫鍵吸附樹脂，利用氫鍵作用和疏水作用的協(xié)同效應(yīng)，可高選擇性的提取苦蕎中的黃酮類有效成分，僅通過“吸附—洗脫”一步簡單工藝，即可得到高純度苦蕎黃酮提取物，避免現(xiàn)有提取工藝中使用大量易揮發(fā)、易燃的有機(jī)溶劑、分離工藝煩瑣、生產(chǎn)成本高、提取效率低、制備的提取物純度低的缺點(diǎn)，本發(fā)明僅經(jīng)“吸附—脫附”一個工藝流程，操作簡單、環(huán)境友好、樹脂可再生使用、生產(chǎn)成本低，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，制備的苦蕎黃酮提取物質(zhì)量穩(wěn)定、色澤好、純度高于90％。以苦蕎種子為原料計，總產(chǎn)率高于4％，以苦蕎莖葉為原料計，總產(chǎn)率高于1％。本發(fā)明的工業(yè)化應(yīng)用可為苦蕎進(jìn)一步的藥用開發(fā)提供大量高純度的試驗(yàn)樣品。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1在常溫下，將聚乙烯醇溶解于水中，配成濃度1.0％的水溶液450ml，于1000ml三口瓶中水浴加熱至45℃；以58g苯乙烯、12g二乙烯苯的混合物為反應(yīng)單體、以56g甲苯和28g液蠟混合物作致孔劑、以0.7g偶氮二異丁腈為引發(fā)劑混合均勻后加入三口瓶中，開動攪拌，調(diào)節(jié)油珠大小適宜，經(jīng)懸浮聚合，緩慢升溫至80℃反應(yīng)6小時，再緩慢升溫至90℃反應(yīng)3小時后停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后，制備出聚苯乙烯型大孔吸附樹脂，簡稱白球。
常溫下在1000ml三口瓶中加入100g白球，以200ml氯甲醚和400ml二氯乙烷的混合溶液充分溶脹后，加入60g無水ZnCl2作催化劑，充分混勻，然后升溫到30-40℃，反應(yīng)10小時，取樣測定氯含量為5.49mmol/g干樹脂，停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后，制備出氯甲基化的聚苯乙烯樹脂，簡稱氯球。
常溫下在500ml三口瓶中加入100g氯球，以250ml N，N-二甲基甲酰胺為溶劑，充分溶脹，加入50g甲胺，以5％氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)體系pH值為9.5，加熱至50℃，反應(yīng)6小時，取樣測定殘余的氯含量為0.25mmol/g干樹脂，同時測定胺交換量為4.13mmol/g干樹脂，停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后制備出胺化的聚苯乙烯樹脂，簡稱胺球。
常溫下在500ml三口瓶中加入100g胺球，以200ml乙酸酐為溶劑和反應(yīng)試劑，充分溶脹后，升溫至60℃，反應(yīng)6小時，取樣測定胺交換量為0.16mmol/g干樹脂，停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后制備出所需的氫鍵吸附樹脂。氫鍵吸附樹脂外觀特征和結(jié)構(gòu)參數(shù)為外觀為球形，淺黃色，粒徑0.5-0.8mm，比表面積為528m2/g干樹脂，含水量為64.7％，平均孔徑為21.6nm，孔隙率55.4％。
實(shí)施例2
在常溫下，將聚乙烯醇溶解于水中，配成濃度0.8％的水溶液4.5升，于10升三口瓶中水浴加熱至40℃；以600g苯乙烯、150g二乙烯苯的混合物為反應(yīng)單體、以750g 200#汽油作致孔劑、以7.0g過氧化苯甲酰為引發(fā)劑，混合均勻后加入三口瓶中，開動攪拌，調(diào)節(jié)油珠大小適宜，經(jīng)懸浮聚合，緩慢升溫至78℃反應(yīng)6小時以上，再緩慢升溫至90℃反應(yīng)3小時以上，經(jīng)過濾、洗滌處理后，制備出聚苯乙烯型大孔吸附樹脂，簡稱白球。
常溫下在10升三口瓶中加入1Kg白球，以2升氯甲醚和4升二氯乙烷的混合溶液充分溶脹后，加入500g無水ZnCl2作催化劑，充分混勻，然后升溫到35℃，反應(yīng)12小時，取樣測定氯含量為5.52mmol/g干樹脂，停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后，制備出氯甲基化的聚苯乙烯樹脂，簡稱氯球。
常溫下在5升三口瓶中加入1Kg氯球，以2.5升N，N-二甲基甲酰胺為溶劑，充分溶脹，加入500g乙胺，以5％氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)體系pH值為10.0，加熱至60℃，反應(yīng)8小時，取樣測定殘余的氯含量為0.21mmol/g干樹脂，同時測定胺交換量為4.08mmol/g干樹脂，停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后制備出胺化的聚苯乙烯樹脂，簡稱胺球。
常溫下在5升三口瓶中加入1Kg胺球，以2升乙酸酐為溶劑和反應(yīng)試劑，充分溶脹后，升溫至60℃，反應(yīng)8小時，取樣測定胺交換量為0.18mmol/g干樹脂，停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后制備出所需的氫鍵吸附樹脂。氫鍵吸附樹脂外觀特征和結(jié)構(gòu)參數(shù)為外觀為球形，淺黃色，粒徑0.3-1.0mm，比表面積為538m2/g干樹脂，含水量為75.4％，平均孔徑為23.6nm，孔隙率59.2％。
實(shí)施例2將20克苦蕎種子(即苦蕎麥粒，黃酮含量為4.7％)研磨成粉，120ml 70％乙醇水溶液60℃提取，共三次，過濾后合并三次提取液，減壓蒸餾回收乙醇后，加水稀釋至250ml，過濾，得澄清水溶液，為吸附上柱液，將上柱液通過裝有上述實(shí)施例中制備的氫鍵吸附樹脂的樹脂柱(柱內(nèi)徑15mm，柱長250mm，裝有30ml濕樹脂)，吸附速度為1.0Bv/hr，吸附完成后，用去離子水清洗樹脂柱，用30ml 75％的乙醇解吸，解吸速度為0.5Bv/hr。解吸液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，至回收乙醇體積為25ml時停止減壓蒸餾，靜置至室溫，過濾，濾渣干燥即得淺黃綠色提取物0.83g，產(chǎn)率為4.1％，經(jīng)過waters484型高效液相色譜儀色譜分析，產(chǎn)品純度為黃酮含量95.5％。
實(shí)施例3將300g苦蕎種子(即苦蕎麥粒，黃酮含量為4.7％)研磨成粉，1.8L 75％乙醇水溶液60℃提取，共三次，過濾后合并三次提取液，減壓蒸餾回收乙醇后，加水稀釋至3L，過濾，得澄清水溶液，為吸附上柱液，將上柱液通過裝有氫鍵吸附樹脂的樹脂柱(柱內(nèi)徑5cm，柱長60cm，裝有400ml濕樹脂)，吸附速度為1.0Bv/hr，吸附完成后，用去離子水清洗樹脂柱，用400ml 75％的乙醇解吸，解吸速度為0.5Bv/hr。解吸液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，至回收乙醇體積為350ml時停止減壓蒸餾，靜置至室溫，過濾，濾渣干燥即得淺黃綠色提取物13.5g，產(chǎn)率為4.5％，經(jīng)過waters484型高效液相色譜儀色譜分析，產(chǎn)品純度為黃酮含量92.1％。
實(shí)施例4將500g苦蕎種子(即苦蕎麥粒，黃酮含量為4.7％)研磨成粉，2.0L 75％乙醇水溶液60℃提取，共三次，過濾后合并三次提取液，減壓蒸餾回收乙醇后，加水稀釋至5L，過濾，得澄清水溶液，為吸附上柱液，將上柱液通入裝有氫鍵吸附樹脂的樹脂柱(柱直徑5cm，柱長60cm，裝有400ml濕樹脂)，吸附速度為2.5Bv/hr，吸附完成后，用去離子水清洗樹脂柱，用600ml 75％的乙醇解吸，解吸速度為1.0Bv/hr。解吸液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，至回收乙醇體積為550ml時停止減壓蒸餾，靜置至室溫，過濾，濾渣干燥即得淺黃綠色提取物21.3g，產(chǎn)率為4.3％，經(jīng)過waters484型高效液相色譜儀色譜分析，產(chǎn)品純度為黃酮含量94.3％。
實(shí)施例5將50克苦蕎莖葉粉碎(黃酮含量為1.5％)，300ml 75％的乙醇水溶液60℃提取，共三次，過濾后合并三次提取液，減壓蒸餾回收乙醇后，加水稀釋至200ml，過濾，得澄清水溶液，為吸附上柱液，將上柱液通入裝有氫鍵吸附樹脂的樹脂柱(柱直徑15mm，柱長250m，裝有30ml濕樹脂)，吸附速度為1.5Bv/hr，吸附完成后，用去離子水清洗樹脂柱，用30ml 75％的乙醇解吸，解吸速度為0.5Bv/hr。解吸液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，至回收乙醇體積為25ml時停止減壓蒸餾，靜置至室溫，過濾，濾渣干燥即得淺黃綠色提取物0.74g，產(chǎn)率為1.48％，經(jīng)過waters484型高效液相色譜儀色譜分析，產(chǎn)品純度為黃酮含量91.5％。
實(shí)施例6將1.2kg苦蕎莖葉粉碎(黃酮含量為1.5％)，6L 75％乙醇水溶液60℃提取，共三次，過濾后合并三次提取液，減壓蒸餾回收乙醇后，加水稀釋至5L，過濾，得澄清水溶液，為吸附上柱液，將上柱液通入裝有氫鍵吸附樹脂的樹脂柱(柱直徑5cm，柱長60cm，裝有400ml濕樹脂)，吸附速度為3.0Bv/hr，吸附完成后，用去離子水清洗樹脂柱，用500ml 75％的乙醇解吸，解吸速度為1.0Bv/hr。解吸液經(jīng)減壓濃縮回收乙醇，至回收乙醇體積為450ml時停止減壓蒸餾，靜置至室溫，過濾，濾渣干燥即得淺黃綠色提取物18.1g，產(chǎn)率為1.51％，經(jīng)過waters484型高效液相色譜儀色譜分析，產(chǎn)品純度為黃酮含量90.6％。
權(quán)利要求
1.一種吸附樹脂法從苦蕎植物全株提取高純度黃酮化合物的工藝方法，其特征是通過以下步驟實(shí)現(xiàn)1)將市售的苦蕎種子、莖葉或二者的原料粉碎，用70％乙醇水溶液60℃回流提取2小時，共提取三次，合并提取液，減壓蒸餾回收乙醇后，加水稀釋，其中溶液體積(ml)與原料質(zhì)量(g)比為10/1-30/1，過濾，得澄清水溶液，為吸附上柱液；2)將吸附上柱液通過裝有氫鍵吸附樹脂的樹脂柱中吸附，吸附柱的徑長比為1/5-1/20，吸附流速為1.0-3.0BV/小時；3)吸附完成后，用純水將樹脂清洗干凈，60-80％乙醇水溶液作解吸劑，解吸速度為0.5-1.0BV/小時，收集解吸液；4)解吸液經(jīng)減壓蒸餾回收乙醇、濃縮、真空干燥，得到淡黃綠色苦蕎黃酮提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吸附樹脂法從苦蕎植物全株提取高純度黃酮化合物的工藝方法，其特征是以苦蕎種子為原料，苦蕎黃酮提取物產(chǎn)率高于4％，以莖葉為原料，苦蕎黃酮提取物產(chǎn)率高于1％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吸附樹脂法從苦蕎植物全株提取高純度黃酮化合物的工藝方法，其特征是制備的苦蕎黃酮提取物中黃酮類混合物純度高于90％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吸附樹脂法從苦蕎植物全株提取高純度黃酮化合物的工藝方法，其特征是2)步中使用的氫鍵吸附樹脂通過以下步驟制備而成1)初始聚苯乙烯共聚物白球的制備在常溫下，將明膠或聚乙烯醇溶解于水中，配成濃度0.5-1.0％的水溶液，為反應(yīng)的水相，于三口瓶中水浴加熱至30～50℃；以二乙烯苯和苯乙烯為聚和反應(yīng)的混合單體、其中二乙烯苯占混合單體總質(zhì)量的6-20％，以混合單體總量80-150％的長鏈烷烴作致孔劑，以混合單體總量0.5-1.0％的偶氮二異丁腈或過氧化苯甲酰為引發(fā)劑，將上述混合單體、致孔劑、引發(fā)劑充分混勻，配成反應(yīng)的油相，將油相加入水相中，其中油相與水相體積比為1∶3；經(jīng)懸浮聚合，升溫至60～80℃反應(yīng)2～6小時以上，再升溫至90℃反應(yīng)3小時以上，經(jīng)過濾、洗滌處理后，制備出聚苯乙烯型大孔吸附樹脂，簡稱白球；2)白球的氯甲基化常溫下在三口瓶中加入白球，以氯甲醚和二氯乙烷的混合溶液充分溶脹，混合溶液用量為白球質(zhì)量的5-8倍，氯甲醚和二氯乙烷的體積比為1∶2；加入ZnCl2作催化劑，用量為白球質(zhì)量的40-60％，充分混勻，然后升溫到30-40℃，反應(yīng)8-12小時，取樣測定氯含量高于18-20％后停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后，制備出氯甲基化的聚苯乙烯樹脂，簡稱氯球；3)氯球的胺化常溫下在三口瓶中加入氯球，以N，N-二甲基甲酰胺或二氯乙烷為溶劑充分溶脹，用量為氯球質(zhì)量的2-4倍，加入氯球質(zhì)量50％的脂肪胺，以5％氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)體系pH值為9-10，加熱至50-60℃，反應(yīng)6-8小時，取樣測定殘余的氯含量，低于0.3mmol/g干樹脂，同時測定胺交換量高于4mmol/g干樹脂時停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后制備出胺化的聚苯乙烯樹脂，簡稱胺球；4)胺球的酰胺化常溫下在三口瓶中加入胺球，以乙酸酐或酰氯為溶劑和反應(yīng)試劑充分溶脹，用量為胺球質(zhì)量的2-4倍，升溫至40-60℃，反應(yīng)6-8小時，取樣測定胺交換量低于0.2mmol/g干樹脂時停止反應(yīng)，經(jīng)過濾、洗滌處理后制備出所需的氫鍵吸附樹脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的吸附樹脂法從苦蕎植物全株提取高純度黃酮化合物的工藝方法，其特征是氯球的胺化中加入的脂肪胺為甲胺、二甲胺、乙胺、或二乙胺。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的吸附樹脂法從苦蕎植物全株提取高純度黃酮化合物的工藝方法，其特征是氫鍵吸附樹脂外觀特征和結(jié)構(gòu)參數(shù)為外觀為球形，淺黃色，粒徑0.3-1.0mm，比表面積為120-600m2/g干樹脂，含水量為60-80％，平均孔徑為10-30nm，孔隙率50-65％。
全文摘要
吸附樹脂法從苦蕎植物全株提取高純度黃酮化合物的工藝。本發(fā)明合成了新型氫鍵吸附樹脂，利用氫鍵和疏水作用的協(xié)同效應(yīng)，僅通過“吸附—洗脫”一步工藝，即可制備高純度苦蕎黃酮提取物。步驟為分別以苦蕎種子、莖葉為原料，粉碎后乙醇回流提取，提取液濃縮回收乙醇后，用水稀釋，過濾，得澄清溶液為吸附上柱液，將其通過裝有氫鍵吸附樹脂的樹脂柱，吸附完成后用乙醇解吸，收集解吸液，經(jīng)減壓蒸餾回收乙醇、濃縮、真空干燥，得淡黃綠色苦蕎黃酮提取物。本發(fā)明操作簡單、環(huán)境友好、樹脂可再生使用、生產(chǎn)成本低，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，制備的提取物中黃酮純度高于90％。本發(fā)明的工業(yè)化應(yīng)用可為苦蕎深入的藥用開發(fā)提供大量高純度試驗(yàn)樣品。
文檔編號C07D311/00GK101050227SQ20071005675
公開日2007年10月10日 申請日期2007年2月9日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月9日
發(fā)明者王春紅, 施榮富, 劉睿, 史作清 申請人:南開大學(xué)