專利名稱：：制備非晶的、無水結(jié)晶的或水合結(jié)晶的多西紫杉醇的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及制備高純度，非晶的、無水結(jié)晶的或水合結(jié)晶的多西紫杉醇(docetaxel)的方法，該方法使用幾種溶劑，通過溶劑沉淀、膠體形成等手段實現(xiàn)，具有高轉(zhuǎn)化率和高收率。(b)相關(guān)領(lǐng)域描述同紫杉醇(paclitaxel)—樣，多西紫杉醇用作重要的抗癌藥劑之一。多西紫杉醇是通過從紫杉的葉和干中得到多西紫杉醇的前體如10-去乙?；鶟{果赤霉素III、漿果赤霉素III等，然后將所得前體通過化學反應經(jīng)半合成而得多西紫杉醇。與紫杉醇類似，多西紫杉醇在大多數(shù)藥學溶劑(包括水)中表現(xiàn)出很弱的溶解性，因此在其配制和處方方面受到很多的限制。物質(zhì)的溶解性受到該物質(zhì)的固態(tài)屬性的影響，有文獻表明非晶結(jié)構(gòu)的溶解度比其最穩(wěn)定的結(jié)晶結(jié)構(gòu)的溶解度高出10倍至1600倍(BrunoC.Hancock和MichaelParks,Whatisthetruesolubilityadvantageforamorphouspharmaceuticals.PharmaceuticalRes.2000,17,397-404)。這表明盡管物質(zhì)對特定溶劑的溶解性很大程度上決定于該物質(zhì)本身的屬性，但可通過改變該物質(zhì)的構(gòu)型來改善其溶解性。除改變物質(zhì)的構(gòu)型外，物質(zhì)的溶解度和溶解速率還可以通過減小物質(zhì)顆粒的尺寸，從而增大它們的表面積來改善。另一方面，如果顆粒的構(gòu)型是非晶的，與結(jié)晶構(gòu)型相比，它們的穩(wěn)定性通常會隨儲存時間的增長而降低。JacquesDoveze等的韓國專利No.10-0391753公開了多西紫杉醇水合物比其無水物更穩(wěn)定。相應地，因多西紫杉醇的屬性隨其最終形態(tài)(包括非晶、結(jié)晶形態(tài)、水合物形態(tài)及無水物形態(tài))變化時，有必要根據(jù)其最終用途選擇性地制備具有合適形態(tài)的多西紫杉醇。然而，至今為止，幾乎沒有公開過任何能選擇性地制備具有特定形態(tài)的多西紫杉醇的方法。最近，由于水合物的穩(wěn)定性，人們越來越關(guān)注多西紫杉醇水合物的制備方法。JacquesDoveze等在韓國專利No.10-0391753中描述了通過水和具有1至3個碳原子的脂肪族醇的混合物中結(jié)晶多西紫杉醇來，并在大約40°C、減壓到4至7kPa、相對濕度控制在大約80%的潮濕氣氛下干燥所得產(chǎn)物來獲取多西紫杉醇三水合物。該專利中提出的方法包含結(jié)晶和水合兩個過程。在結(jié)晶過程中，在優(yōu)選溫度為40至6(TC將多西紫杉醇溶解于具有1至3個碳原子的脂肪醇中，然后在相同溫度向其中加入純凈水(purifiedwater),冷卻得晶體。在該實施方案中描述了將303g多西紫杉醇加熱至50。C直至其完全溶解于0.983L乙醇中，保持在50。C的溫度，將4.39L純凈水在1小時內(nèi)加入到混合物中。然而，該結(jié)晶過程需要在溶劑下直至高溫下加熱至少1小時，這可能會導致多西紫杉醇因其不穩(wěn)定性而降解。盡管已表明在該實施方案中所使用樣品的滴定度在結(jié)晶過程中從最初的92.4%提高至98.7%,但結(jié)晶過程中產(chǎn)生的降解物質(zhì)可能包含在所含雜質(zhì)中。因此，就需要對所描述的實施方案進行評估并將采用了多西紫杉醇的結(jié)晶過程中出現(xiàn)的雜質(zhì)與純度高達99.5%的多西紫杉醇比較，因為該過程是制備過程的最后一步，其決定了最終產(chǎn)物的形態(tài)。據(jù)此，該方法的局限之處在于其沒有對采用了低滴定度樣品的結(jié)晶過程產(chǎn)生的降解產(chǎn)物進行評估。ArunPrakashSharma等在美國專利No.6,838,569中公開了紫杉醇和多西紫杉醇三水合物的純化方法。在上述方法中，部分純化的多西紫杉醇在烷烴-氯代烷烴、丙酮-己烷條件下純化至99.53%的色譜純度，進而用乙腈和水結(jié)晶。在50至7(TC溫度將純化的多西紫杉醇溶解于乙腈后，向其中緩慢加入純凈水，在15至20。C溫度另外進行攪拌得沉淀。對于上述專利中公開的方法，盡管未提及溶解時間，但即使在結(jié)晶前后的純度只有很小的改變，也不可避免在加熱至50至70。C時多西紫杉醇會發(fā)生降解。另外，因為所采用的過程為最終的純化步驟，回收率可能是非常重要的因素。本發(fā)明所述的實施方案表明在結(jié)晶之前由460g無水多西紫杉醇能獲取415g多西紫杉醇三水合物(含水量6.8%)，但是考慮到含水量，實際的收率為大約84%,這樣一個收率是非常低的。這是常用的重結(jié)晶方法的弊端之一。LiJinliang等在國際專利公開WO2004/099167中公開了通過結(jié)晶無水多西紫杉醇的純凈水和丙酮混合溶液來制備三水合物的方法。在實施方案中，將87g無水物溶解于丙酮中，然后向其中加入1.5倍的純凈水，在0。C結(jié)晶兩天，制得85g三水合物(含水量6.43%)。然而，該方法也是一種常見的重結(jié)晶方法，在考慮含水量的情況下，實際的回收率低至91%。Lee等提出了使用幾種溶劑來制備非晶的、無水結(jié)晶或水合結(jié)晶紫杉醇的方法(JeongHoonLee，Un-SookGi，Jin-HyunKim,YongaeKim,Seon-HoKim,HunseungOh,和BumchanMin,Preparationandcharacterizationofsolventinduceddihydrated,anhydrous,andamorphouspaclitaxel，Bull.KoreanChem.Soc.，2001,22,925-928)。在本方法中，紫杉醇的結(jié)晶結(jié)構(gòu)可由幾種所采用的溶劑來選擇，但減壓干燥和重結(jié)晶帶來了如下眾多問題。首先，在Lee等提出的簡單減壓干燥情況下，當紫杉醇在千燥時，其同時會凝膠而涂覆于干燥過程所用的容器上，因此回收是非常困難的。而且，由于所形成顆粒的尺寸非常大，即使在回收和粉碎后仍然是超過100,。如此大的顆粒尺寸可能會導致溶解性的降低，并且使得當剩余溶劑的量無限小時的干燥變得困難。根據(jù)ICH指南(人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會議(InternationalConferenceonHarmonisationofTechnicalRequirementsforRegistrationofPharmaceuticalsforHumanUse))，在醫(yī)學用途的藥品中每種溶劑應該低于某一特定水平，并且在使用例如減壓蒸干的干燥方法時，往往會因顆粒的尺寸和屬性而花費相當長的時間以降低殘留溶劑的水平。另外，現(xiàn)有的重結(jié)晶方法因結(jié)晶過程自身的特點而具有低的收率，因而需要在低溫條件下較長時間完成重結(jié)晶過程，而且形成的晶體尺寸很大。
發(fā)明內(nèi)容為了解決前述的問題，本發(fā)明的目的是提供通過使用幾種溶劑有效地、選擇性地制備非晶的、無水結(jié)晶或水合結(jié)晶形式的多西紫杉醇的方法。圖1A和圖1B顯示了使用HPLC分析在實施例l所述制備過程前后多西紫杉醇的純度的HPLC分析結(jié)果，其中圖1A顯示了制備過程前樣品的HPLC分析結(jié)果，圖IB顯示了制備過程后樣品的HPLC分析結(jié)果。圖2A顯示了實施例1中通過溶劑沉淀制備所得非晶多西紫杉醇的SEM(掃描電子顯微鏡)分析結(jié)果，圖2B顯示了上述所得的非晶多西紫杉醇XRPD(X-射線粉末衍射儀)分析結(jié)果。圖3A顯示了實施例4中通過膠體形成制備所得無水結(jié)晶多西紫杉醇的SEM分析結(jié)果，而圖3B顯示了上述所得的無水結(jié)晶多西紫杉醇的XRPD分析結(jié)果。圖4顯示了實施例5低溫條件下通過溶劑沉淀制備所得水合結(jié)晶多西紫杉醇的XRPD分析結(jié)果。圖5顯示了實施例6中通過在有機溶劑和純凈水的混合溶液中溶解后降壓條件下蒸干制備所得的水合結(jié)晶多西紫杉醇的XRPD分析結(jié)果。圖6顯示了實施例7中通過在有機溶劑和純凈水的混合溶液中溶解后向其中加入純凈水形成沉淀而制備所得的水合結(jié)晶多西紫杉醇的XRPD分析結(jié)果。圖7A至圖7C顯示了說明對比例1中在高溫下溶劑沉淀后在室溫下攪拌制備多西紫杉醇過程前后純度改變的HPLC和XRPD分析結(jié)果，其中圖7A顯示了沉淀前樣品的HPLC分析結(jié)果，圖7B顯示了沉淀后樣品的HPLC分析結(jié)果，圖7C顯示了XRPD分析結(jié)果。優(yōu)選實施方案的詳細描述通過參考如下詳細敘述，本發(fā)明的更為完整的意義以及其它多種優(yōu)點將變得更為清楚并且更容易理解。本發(fā)明涉及制備多西紫杉醇的方法，包括通過溶劑沉淀、膠體形成等制備非晶的、無水結(jié)晶或水合結(jié)晶的多西紫杉醇的方法，該方法具有高轉(zhuǎn)化率和高收率。本發(fā)明所述的制備多西紫杉醇的方法具有能有效地產(chǎn)生多西紫杉醇的細顆粒的優(yōu)點，且收率高。另外，該方法在保持純度的情況下能夠通過簡單的方法從高純度多西紫杉醇來制備具有所需要的形態(tài)的多西紫杉醇，且具有高的轉(zhuǎn)化率和高收率。本發(fā)明下面所述多西紫杉醇的制備方法可以用于制備含多西紫杉醇物質(zhì)，該物質(zhì)除含有多西紫杉醇外還含有紫杉烷(taxane),還用于制備含有多西紫杉醇作為單獨成分的物質(zhì)。本發(fā)明中"含多西紫杉醇物質(zhì)"的意思是含有紫杉烷類物質(zhì)包括紫杉醇和多西紫杉醇的物質(zhì)，其中多西紫杉醇的量(純度)為50%或更高，優(yōu)選70%或更高，更為優(yōu)選90%或更高，最優(yōu)選98.5%或更高。首先，本發(fā)明涉及通過使用極性-非極性溶劑的溶劑沉淀方法來制備非晶的多西紫杉醇的方法。盡管如前所述，多西紫杉醇為微溶物，然而已知其非晶結(jié)構(gòu)的溶解性是其穩(wěn)定結(jié)晶結(jié)構(gòu)溶解性的10倍至1600倍。在現(xiàn)有技術(shù)中，為獲得非晶的多西紫杉醇不得不使用復雜麻煩的方法，然而本發(fā)明使用特定的極性-非極性溶劑經(jīng)溶劑沉淀的方法使得非晶多西紫杉醇的制備過程變得簡單且容易，而且具有高轉(zhuǎn)化率和高收率。本發(fā)明所述的非晶多西紫杉醇的制備方法包含如下步驟將含多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇溶解在極性溶劑中；將上步所得的溶液加入到非極性溶劑中以產(chǎn)生沉淀；和過濾并干燥制得的沉淀以獲得非晶的多西紫杉醇。在上述制備非晶多西紫杉醇的方法中，極性溶劑優(yōu)選選自卣代烷烴、酮及其混合溶劑。作為卣代烷烴，可以使用二氯曱烷、氯仿等，而所述的酮可以是丙酮。建議將多西紫杉醇以濃度1至30%(w/v)、優(yōu)選5至20。/o(w/v)溶解于極性溶劑中，以保持初始純度和實現(xiàn)高純度非晶多西紫杉醇的高收率。對于上述非極性溶劑，優(yōu)選使用至少一種選自下列的溶劑烷烴、環(huán)烷烴，以及所具有的極性值不高于二異丙基醚的極性值的非極性溶劑，因為高于這個值時可能發(fā)生即時沉淀(instantprecipitation)。所述烷經(jīng)為己烷或戊烷，環(huán)烷烴為環(huán)己烷或環(huán)戊烷，而且所具有的極性值不超過二異丙基醚的非極性溶劑可以是二烷基酯。在將溶有含多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇的極性溶劑溶液加入到非極性溶劑中的步驟中，非極性溶劑的體積優(yōu)選為所加入溶液的體積的5倍或更高，更為優(yōu)選地，所述溶劑和非極性溶劑的體積比率為1:8至1:20。如果所用非極性溶劑的量偏離上述范圍，將很難產(chǎn)生有效的沉淀。將如此獲得的沉淀在減壓條件下過濾并干燥，這樣就以容易和簡單的方式制得非晶的多西紫杉醇。另外，本發(fā)明涉及通過使在可形成膠體的溶劑中處于懸浮狀態(tài)的含多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇膠化來制備無水結(jié)晶多西紫杉醇的方法。盡管無水結(jié)晶多西紫杉醇具有優(yōu)異的存儲穩(wěn)定性，但其溶解性低。然而，根據(jù)本發(fā)明所述的制備方法，因要制備的多西紫杉醇的顆粒非常細小，其溶解度可以得到很大的提高。因此，本發(fā)明涉及制備具有改善的溶解性和極好的存儲穩(wěn)定性的無水結(jié)晶多西紫杉醇的方法。本發(fā)明所述的制備無水結(jié)晶多西紫杉醇的方法包含如下步驟使在可形成膠體的溶劑中處于懸浮狀態(tài)的、并未完全溶解的含多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇膠化；并且，蒸掉所得膠體溶液中的溶劑，在減壓條件下干燥以得到無水結(jié)晶多西紫杉醇的細粉末。上述針對多西紫杉醇的可形成膠體的溶劑并未將多西紫杉醇完全溶解而是使得多西紫杉醇保持處于懸浮狀態(tài)，可以使用丙酮。當將多西紫杉醇溶解于丙酮時，多西紫杉醇以1至30%(w/v)的濃度、優(yōu)選5至10%(w/v)的濃度加入。溶劑蒸發(fā)可以使用常見的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進行，溫度優(yōu)選在35。C至40°C。在本發(fā)明中，"膠體，，的意思是指多西紫杉醇懸浮于溶劑、未被溶解的狀態(tài)。通過上述方法制備無水結(jié)晶多西紫杉醇的優(yōu)點在于該方法可使得殘留溶劑保持在較低水平，這是因為在膠體中引入了細微顆粒的形成而使得干燥過程變得很容易，而不會出現(xiàn)在Lee等提出的方法中呈現(xiàn)的常見減壓干燥方法帶來的弊端，即該方法中當顆粒附著在容器上時微粒的尺寸會增加。此外，由于所獲得的顆粒的尺寸為5至30Am,因此溶解性得到了顯著改善。此外，本發(fā)明涉及制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，該方法通過將含多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇溶解于有機溶劑中，并通過加入純凈水或緩沖溶液使之沉淀。從溶解性角度來講，水合結(jié)晶形式是一種有利的形態(tài)，然而現(xiàn)有技術(shù)中的水合結(jié)晶多西紫杉醇的制備方法因在相對高溫的條件下進行而降低了多西紫杉醇的穩(wěn)定性，這些方法不能保證最終產(chǎn)物的純度。然而，本發(fā)明所述的制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法是在相對較低的溫度下進行，因此有利于多西紫杉醇的穩(wěn)定性而且能保持初始的純度。本發(fā)明所述制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法包括如下步驟將含多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇在室溫下溶解于有機溶劑中；向所得溶液中加入純凈水或緩沖溶液；在-20。C至2(TC、優(yōu)選O"C至l(TC下靜置1小時至48小時，優(yōu)選5至24小時，產(chǎn)生沉淀；和過濾產(chǎn)生的沉淀以獲得水合結(jié)晶多西紫杉醇。在上述制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法中，作為有機溶劑，可以-使用選自具有1至3個碳原子的醇，如甲醇、乙醇或丙醇，以及酮如丙酮，和乙腈的至少一種。將多西紫杉醇以1至30%(w/v)、優(yōu)選5至20%(w/v)的濃度溶解于有機溶劑。通過上述方法獲得的水合結(jié)晶多西紫杉醇并不局限于某一特定的水合形式，可以為單水合物、二水合物或三水合物形式。純凈水或緩沖溶液優(yōu)選以體積比為10:4至10:15(溶液體積純凈水或緩沖溶液的體積)、優(yōu)選為10:10至10:12(溶液體積:純凈水或緩沖溶液的體積)加入。當純凈水的體積比率小于上述范圍時，沉淀可能會很慢或者根本不出現(xiàn)沉淀。當純凈水的體積比率高于上述范圍時，反應過程中的溶液的體積會過度增大，也可以使用緩沖溶液，磷酸鹽緩沖溶液或氨水緩沖溶液。上述通過將含多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇在室溫下溶解于有機溶劑中并通過加入純凈水使之沉淀而獲得水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法使用了與在JacquesDoveze等人在韓國專利No.10-0391753中公開的方法中采用的相似的溶劑，然而本發(fā)明所述方法的優(yōu)點在于其能以非常簡單的方式應用于工業(yè)領(lǐng)域。換言之，JacquesDoveze提出的方法是在40至60。C的溫度溶解具有1至3個碳原子的脂肪族醇，該過程可能導致多西紫杉醇穩(wěn)定性方面的嚴峻問題。盡管JacquesDoveze描述了通過將多西紫杉醇在50°C溶解于乙醇中l(wèi)小時，然后通過加入純凈水而產(chǎn)生晶體的方法所獲得的多西紫杉醇的純度由92.4%增加至98.7%,然而本發(fā)明的發(fā)明者發(fā)現(xiàn)按照其公開的相同方法(與本發(fā)明所述實施過程并列)，當將純度為99.7%的多西紫杉醇在50。C溶解于曱醇中，然后靜置0至24小時時，在O小時、l小時、5小時、10小時和24小時的純度分析顯示出純度驟然下降，這與韓國專利No.10-0391753不同(參見如下對比例2)。當按照JacquesDoveze所述，將多西紫杉醇溶解于曱醇中并在50°C溫度保持至少1小時至反應完成時，經(jīng)驗證多西紫杉醇的純度降低至95.7%,而且多西紫杉醇有降解。該結(jié)果證實了這樣的事實當在多西紫杉醇溶解于溶劑如醇后溫熱時，多西紫杉醇會發(fā)生降解。這樣，盡管JacquesDoveze的方法能夠成功制備水合結(jié)晶形式的多西紫杉醇，然而該方法很難在高純度的同時保證多西紫杉醇的穩(wěn)定性。在該方面，與前述方法不同的是，本發(fā)明所述的室溫下溶解后在低溫下進行溶劑沉淀的方法是大有用處的，并且可用于工業(yè)領(lǐng)域。這也就是說JacquesDoveze的方法試圖通過增加多西紫杉醇在溶液中的濃度來提高收率，而本發(fā)明的制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法的特點在于確定保持多西紫杉醇的高純度和穩(wěn)定性的最合適的溫度范圍，該方法的理論基礎(chǔ)是對于保持多西紫杉醇的高純度和穩(wěn)定性，保持溫度是一個非常重要的因素。此外，本發(fā)明涉及制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的另外一種方法，該方法通過將含有多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇溶解于有機溶劑和純凈水的混合溶劑或有機溶劑與緩沖溶液的混合溶劑中，然后在減壓下濃縮所得溶液產(chǎn)生沉淀而獲得水合結(jié)晶多西紫杉醇。上述使用混合溶劑制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法包括如下步驟將含有多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇溶解于有機溶劑和純凈水的混合溶劑中或有機溶劑與緩沖溶液的混合溶劑中；蒸發(fā)所得溶液，從而除去混合溶劑中的有機溶劑而產(chǎn)生沉淀；和在減壓下過濾所得沉淀并干燥，以產(chǎn)生水合結(jié)晶多西紫杉醇。使用上述方法制得的多西紫杉醇水合物并不局限于某一特定的水合物形式，優(yōu)選地可以為單水合物、二水合物或三水合物形式。對于有機溶劑，可以使用選自具有1至3個碳原子的醇如曱醇、丙酮和乙腈的至少一種，并且其作為與純凈水充分混合的溶劑。該有機溶劑作為與純凈水或緩沖溶液混合的混合溶劑使用，且適當?shù)氖?，有機溶劑和純凈水或緩沖溶液的混合比率為7:0.5至7:5,優(yōu)選7:1至7:4體積比。當純凈水的比率小于上述范圍時，沉淀的形成情況可能不會很好；而如果純凈水的比率高于上述比率，反應溶液的體積變得太大。作為緩沖溶液，可以使用磷酸鹽緩沖溶液、氨水緩沖溶液及其它類似緩沖溶液。多西紫杉醇在混合溶劑中的濃度為0.1至5%(w/v)、優(yōu)選1至2%(w/v)。蒸發(fā)優(yōu)選使用普通旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，在35。C至40。C水浴中進行。上述的制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法通過將含有多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇溶解在機溶劑和純凈水或和緩沖溶液的混合溶劑中，使用普通旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)溶劑，過濾并干燥所形成的沉淀，使得能夠在短時間內(nèi)以高收率制備得到多西紫杉醇。也就是說，在將多西紫杉醇溶解到有機溶劑和純凈水的混合溶劑中后進行減壓濃縮，殘留的純凈水或緩沖溶液的比率增加，原因是有機溶劑比純凈水或緩沖溶液蒸發(fā)得更快。因此，由于多西紫杉醇的溶解性變低，沉淀開始形成。當有機溶劑經(jīng)完全蒸發(fā)后，因為多西紫杉醇對純凈水的溶解性很低，因此大部分多西紫杉醇形成沉淀。如果將所形成的沉淀在減壓下過濾，則可以相對容易地得到水合結(jié)晶物形式，而所得的沉淀的特征在于其顆粒很小，而且與結(jié)晶方法相比回收率非常高。此外，與結(jié)晶方法相比，可通過穩(wěn)定的方法在非常短的時間內(nèi)得到水合結(jié)晶形式。此外，本發(fā)明提供另一種制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，該方法通過將含有多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇溶解于有機溶劑中，并通過加入大量純凈水產(chǎn)生沉淀而制備水合結(jié)晶多西紫杉醇。上述通過將多西紫杉醇溶解于有機溶劑，并加入大量純凈水產(chǎn)生沉淀制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法包括如下步驟將含有多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇在室溫下溶解于有機溶劑或有機溶劑與純凈水的混合溶劑中；通過向所得溶液中緩慢加入一定量的純凈水或緩沖溶液而使所得溶液懸浮并產(chǎn)生沉淀；和在減壓下過濾所得沉淀，干燥得水合結(jié)晶多西紫杉醇。通過上述方法獲得的水合結(jié)晶多西紫杉醇并不局限于某一特定的水合物形式，可以是單水合物、二水合物或三水合物形式。對于有機溶劑，可以使用至少一種有機溶劑，該有才幾溶劑選自具有1至3個碳原子的醇，如與純凈水充分混合的甲醇、丙酮、乙腈和四氫呋喃。有機溶劑可以單獨使用，也可以作為與純凈水混合的混合溶劑使用。在有機溶劑作為與純凈水混合的混合溶劑使用的情況下，建議混合溶劑的濃度為0.5%至50%(v/v)、優(yōu)選10%至30%(v/v)。將上述溶液緩慢加入1至20倍的體積的純凈水或緩沖溶液中得到沉淀，優(yōu)選為5至IO倍體積。與現(xiàn)有結(jié)晶方法相比，上述制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法能在非常短的時間內(nèi)獲得水合結(jié)晶形式的穩(wěn)定產(chǎn)物，該方法通過將多西紫杉醇溶解于有機溶劑，并通過加入一定量的純凈水產(chǎn)生沉淀。這樣，如果將多西紫杉醇溶解在有機溶劑或有機溶劑與純凈水的混合溶劑后緩慢加入到一定量純凈水中，由于多西紫杉醇在純凈水中的溶解度降低，因此其就懸浮并形成沉淀。由于多西紫杉醇的溶解是在室溫下進行，且所形成的沉淀可以簡單地通過減壓過濾方法獲得，因此多西紫杉醇的穩(wěn)定性得以保證且回收率較高，而且該過程進行的時間較短，回收簡單可行。本發(fā)明可以通過如下的實施例進一步說明。然而，這些實施例不應以任何的方式理解為是對本發(fā)明范圍的限制。通過下述實施例中描述的方法制得的多西紫杉醇經(jīng)真空干燥后，其排列和顆粒尺寸通過純度、收率、X射線分析(XRPD)和SEM(JSM-6635F,Jeol)X射線分析(XRPD)來驗證，純度分析的條件見下面表1和表2.表1<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>本說明書中多西紫杉醇的純度和回收率在表2所述條件下使用HPLC通過數(shù)量分析計算得出。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>實施例1:制備非晶的多西紫杉醇1所有使用的樣品為純度不低于99.7%的多西紫杉醇(圖1A),而且在制備過程之后純度未降低(圖IB)。室溫下在將2g純度為99.7%的多西紫杉醇溶解于20ml丙酮后，在攪拌下將所得溶液加入到200ml正戊烷中，從而形成沉淀。將所得沉淀過濾后，40。C真空干燥15小時，真空度為650mmHg，得純度為99.7%的非晶的多西紫杉醇1.94g。實施例2:制備非晶的多西紫杉醇2將2g純度為99.70/o的多西紫杉醇溶解于20ml二氯曱烷后，在攪拌下將所得溶液加入到200ml正戊烷中，立即形成沉淀，然后將所得沉淀過濾，并在40。C真空干燥15小時，真空度為650mmHg,得純度為99.7%的非晶的多西紫杉醇1.95g。實施例3:制備非晶的多西紫杉醇3將2g純度為99.7%的多西紫杉醇溶解于20ml二氯曱烷后，在攪拌下將所得溶液加入到200ml正己烷中，立即形成沉淀，然后將所得沉淀過濾，并在40。C真空干燥15小時，真空度為650mmHg,得純度為99.7%的非晶的多西紫杉醇1.92g。實施例4:制備無水結(jié)晶多西紫杉醇將2g純度為99.7%的多西紫杉醇溶解于10ml丙酮后，在減壓下濃縮。再向所得溶液中加入2ml丙酮，從而形成膠體，其中多西紫杉醇懸浮而并未完全溶解。使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在35。C至40。C將溶劑從所得膠體中蒸發(fā)出去，并在40。C真空干燥15小時，真空度為650mmHg,得純度為99.7%的無水結(jié)晶多西紫杉醇1.96g。實施例5:制備水合結(jié)晶多西紫杉醇l在室溫將250mg純度為99.7%的多西紫杉醇溶解于3ml甲醇后，向其中緩慢加入3ml蒸鎦水，將其在4。C靜置24小時以便結(jié)晶。將所得晶體過濾，在35。C以650mmHg的真空度干燥15小時，得254mg純度為99.7%的水合結(jié)晶多西紫杉醇(含水量4.5%)。實施例6:制備水合結(jié)晶多西紫杉醇2將300mg純度為99.7%的多西紫杉醇溶解于60ml、混合體積比為7:3的丙酮和蒸餾水的混合溶劑中。使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在35。C至40。C將溶劑從所得溶液中蒸發(fā)。隨著溶劑的蒸出，沉淀產(chǎn)生。將產(chǎn)生的沉淀過濾，在35。C的溫度以650mmHg的真空度干燥15小時，得303mg純度為99.7%的水合結(jié)晶多西紫杉醇(含水量4.3%)。實施例7:通過溶解于有才幾溶劑和純凈水的混合溶劑中，并加入純凈水形成沉淀來制備水合結(jié)晶多西紫杉醇室溫將300mg純度為99.7%的多西紫杉醇溶解于60ml、體積比為8:2的曱醇和蒸餾水的混合溶劑中。將所得溶液緩慢加入到300ml的純凈水中，形成沉淀。將所得沉淀過濾，在35。C以650mmHg的真空度干燥15小時，得311mg純度為99.7%的水合結(jié)晶多西紫杉醇(含水量4.6%)。乂于比例1根據(jù)ArunPrakashSharma等人在美國專利No.6,838,569中描述的方法，在68。C將203mg純度為99.5%的多西紫杉醇溶解于6.11ml乙腈后，向其中逐滴緩慢加入18.34ml純凈水并攪拌，然后在20。C的溫度繼續(xù)攪拌3小時形成沉淀。將所得沉淀過濾，在36。C的溫度真空干燥36小時，真空度為650mmHg,得162mg純度為78.8%的水合結(jié)晶多西紫杉醇。經(jīng)驗證，在對比例中所采用的條件是非常不穩(wěn)定的條件，該條件下多西紫杉醇可能會降解，盡管這種降解的程度可能會因所采用的溫度和時間而變化。乂十比例2為了評估高溫下通過溶解于醇的方法制備的水合結(jié)晶多西紫杉醇中多西紫杉醇的穩(wěn)定性，分別使用了曱醇和乙醇作為有機溶劑，溶解溫度和靜置溫度為50°C,在靜置0、1、5、10和24小時后測定多西紫杉醇的純度和降解度變化。下面表3為測定結(jié)果。測定在如表2所示的HPLC條件下進行。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>從表3可以看出，在50°C溶解和靜置的情況下，大部分多西紫杉醇轉(zhuǎn)化成其代謝物7-表-多西紫杉醇，且隨時間的延長，多西紫杉醇的純度大幅度降低。本次測試表明溫度條件對保持多西紫杉醇的純度和穩(wěn)定性至關(guān)重要。如上所述，本發(fā)明涉及使用多種溶劑選擇性地制備非晶的、無水結(jié)晶或水合結(jié)晶的多西紫杉醇的方法。根據(jù)本發(fā)明，可以在保持初始純度情況下，針對所需用途高收率地選擇性制備非晶的、無水結(jié)晶和水合結(jié)晶多西紫杉醇。權(quán)利要求1.一種制備非晶多西紫杉醇的方法，該方法包括以1至30％(w/v)的濃度將含有多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇溶解于極性溶劑中；將如上所得的溶液加入到5倍體積或更高體積的非極性溶劑中，產(chǎn)生沉淀；并且過濾并干燥產(chǎn)生的沉淀，得非晶多西紫杉醇，其中，所述極性溶劑為選自鹵代烷烴和酮的至少一種，和所述非極性溶劑為選自烷烴、環(huán)烷烴、和極性值不超過二異丙基醚的極性值的非極性溶劑的至少一種。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備非晶多西紫杉醇的方法，其中，所述卣代烷烴為二氯曱垸或氯仿，所述酮為丙酮，所述烷烴為己烷或戊烷，所述環(huán)烷烴為環(huán)己烷或環(huán)戊烷，所述極性值不超過二異丙基醚的極性值的非極性溶劑為二烷基醚。3.—種制備無水結(jié)晶多西紫杉醇的方法，該方法包括將1至30%(w/v)的含多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇與可形成膠體的溶劑混合，并使之以懸浮狀態(tài)膠化；和在35。C至40。C將所得膠體溶液中的溶劑蒸出，并在減壓下干燥以獲得細粉末狀的無水結(jié)晶多西紫杉醇。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備無水結(jié)晶多西紫杉醇的方法，其中所述可形成膠體的溶劑為丙酮。5.—種制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，該方法包括在室溫將含有多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇以1至30%(w/v)的濃度溶解于有機溶劑中；向所得溶液中以體積比為10:4至10:15(所得溶液的體積:純凈水或緩沖溶液的體積)加入純凈水或^爰沖溶液；在-20。C至20。C靜置1至48小時，產(chǎn)生沉淀；并且過濾所產(chǎn)生的沉淀，得水合結(jié)晶多西紫杉醇。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，其中所述有機溶劑為選自如下的至少一種曱醇、乙醇、丙醇、丙酮和乙腈。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，其中所述水合結(jié)晶多西紫杉醇選自單水合物、二水合物和三水合物。8.—種制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，該方法包括以0.1至5%(w/v)的濃度，將含有多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇溶解于有機溶劑和純凈水的混合溶劑或有機溶劑和緩沖溶液的混合溶劑中，其中有機溶劑和純凈水的混合體積比為7:0.5至7:5,有機溶劑和緩沖溶液的混合體積比為7:0.5至7:5;通過在35。C至40。C蒸發(fā)所得溶液從而除去混合溶劑中的有機溶劑，產(chǎn)生沉淀；和在減壓下過濾所得沉淀并干燥，產(chǎn)生水合結(jié)晶多西紫杉醇。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，其中所述有機溶劑為選自如下的至少一種曱醇、乙醇、丙醇、丙酮和乙腈。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，其中所述水合結(jié)晶多西紫杉醇選自單水合物、二水合物和三水合物。11.一種制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，該方法包含在室溫下將含有多西紫杉醇的物質(zhì)或多西紫杉醇溶解于有機溶劑或有機溶劑與純凈水的混合溶劑中；通過將所得溶液緩慢加入至1至20倍的純凈水或緩沖溶液中而使之懸浮并沉淀；和在減壓下過濾所得沉淀并干燥，得水合結(jié)晶多西紫杉醇。12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，其中所述的有機溶劑為選自如下的至少一種甲醇、乙醇、丙醇、丙酮和乙腈。13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的制備水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法，其中所述水合結(jié)晶多西紫杉醇選自單水合物、二水合物和三水合物。全文摘要本發(fā)明涉及制備非晶的、無水結(jié)晶的或水合結(jié)晶多西紫杉醇的方法。根據(jù)本發(fā)明，可以使用溶劑沉淀、形成膠體等方法高收率地制備非晶的、無水結(jié)晶的和水合結(jié)晶多西紫杉醇。文檔編號C07D305/14GK101415697SQ200680051703公開日2009年4月22日申請日期2006年11月2日優(yōu)先權(quán)日2006年1月2日發(fā)明者宋鳳圭,崔豪埈,表相鉉,趙鎮(zhèn)淑,金文宿申請人:株式會社三養(yǎng)吉尼克斯