專利名稱：(5z)-5-(6-喹喔啉基亞甲基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-1,3-噻唑-4(5h)-酮的制作方法
(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞甲基)-2-[(2，6-二氯苯基) ^J^-l，3-蓬唑-4(5H)-酮
本發(fā)明涉及可用于抑制hYAK3蛋白的新的化合物，具體地說(shuō)是 (5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-l，3-噻唑-4(5H)-酮和其藥 學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前體藥物。該化合物由結(jié)構(gòu)I表示
<formula>formula see original document page 5</formula>
本發(fā)明還涉及(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞甲基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-1，3-噻 唑-4(5H)-酮的葡曱胺鹽和其藥學(xué)上可接受的水合物和溶劑化物。該化合物由
結(jié)構(gòu)n表示
<formula>formula see original document page 5</formula>本發(fā)明化合物和其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前體藥物，
包括葡曱胺鹽，其用作hYAK3蛋白的抑制劑，并用于治療或預(yù)防紅細(xì)胞和 造血系統(tǒng)的疾病，特別是貧血。
相關(guān)技術(shù)的描述
國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/US2003/037658 (國(guó)際申請(qǐng)日為2003年11月18日，
其國(guó)際公開號(hào)為WO 2004/047760,國(guó)際^>開日為2004年6月10日)，描 述了一組逸唑烷酮化合物，指出其具有hYAK3抑制活性，并指出其可用于 治療造血細(xì)胞缺乏，特別是治療紅細(xì)胞缺乏。
國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT / US2003 / 037658沒(méi)有具體公開(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞 曱基)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-1 ，3-噻唑-4(5H)-酮或它的葡曱胺鹽。
附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明


圖1是實(shí)施例2中制備的(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2，6 氨基]-1 ，3-噻唑-4(5H)-酮葡曱胺水合物的紅外光譜。
圖2是實(shí)施例3中制備的(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2，6 氨基]-l,3-噻唑-4(5H)-酮葡曱胺水合物的紅外光譜。
本發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明
本發(fā)明涉及新的化合物(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨 基]-l,3-。塞唑-4(5H)-酮和其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前體藥物 (下文的"化合物A")，其制備方法，包括該化合物作為活性組分的藥學(xué)制劑， 和用化合物A或其藥學(xué)制劑治療或預(yù)防紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病的方法。
本發(fā)明涉及新的化合物(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨 基]-l,3-p塞唑-4(5H)-酮葡曱胺和其藥學(xué)上可接受的水合物和溶劑化物(下文的 "化合物D"),其制備方法，包括該化合物作為活性組分的藥學(xué)制劑，和用化 合物D或其藥學(xué)制劑治療或預(yù)防紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病的方法。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，化合物A比國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT / US2003 / 037658中非常相關(guān) 的化合物更具有優(yōu)點(diǎn)。與國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/US2003 /037658中的最密切相關(guān) 的化合物相比，本發(fā)明化合物A具有顯著高的水溶性，并且具有顯著提高的 體內(nèi)生物利用率。
盡管國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT / US2003 / 037658中公開的嚷唑烷酮化合物用作 hYAK3蛋白的抑制劑，特別用于治療造血細(xì)胞缺乏，特別是治療紅細(xì)胞缺 乏，但化合物A具有溶解能力增加和生物利用率提高的額外優(yōu)點(diǎn)。
另外，化合物D由于其可以形成物理和化學(xué)上穩(wěn)定的結(jié)晶化合物，其是 有益的。因?yàn)榛衔顳是物理和化學(xué)上穩(wěn)定的，認(rèn)為其是不吸濕的。當(dāng)如實(shí) 施例5所述進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，預(yù)期化合物D顯示出與化合物A(鈉鹽形式)相似的
6
-二氯苯基) -二氯苯基)
溶解能力。在Beagle狗中證明了化合物D的生物利用率。合適地，化合物 D是水合物形式。合適地，化合物D是一水合物形式。合適地，化合物D 是一水合物加或減O.l當(dāng)量水的形式?；衔镞€可以形成非水合物。
本發(fā)明化合物，化合物A,包括化合物D，用作hYAK3蛋白的抑制齊'J， 特別用于治療或預(yù)防紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)的疾病?；衔顰,包括化合物D， 可以以常規(guī)劑型給藥，常規(guī)劑型是按照本領(lǐng)域技術(shù)人員容易了解的技術(shù)，例 如描述在國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/US2003 /037658中的那些技術(shù)，將化合物A、合 適地化合物D與常規(guī)藥學(xué)上可接受載體或稀釋劑混合來(lái)制備的。給藥途徑 可以是口服、腸胃外或局部給藥。本文中使用的術(shù)語(yǔ)腸胃外給藥包括靜脈內(nèi)、 肌肉內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)、直腸內(nèi)、陰道內(nèi)或腹膜內(nèi)給藥。通常優(yōu)選口服給藥。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)"有效量"是指例如由研究人員或臨床醫(yī)師探尋的、可 以引起組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人類的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)響應(yīng)的化合物A、合適地化 合物D的數(shù)量。此外，術(shù)語(yǔ)"治療有效量"是指與沒(méi)有接受這種數(shù)量的相應(yīng)患 者相比較，可以導(dǎo)致疾病、病癥或副作用的改進(jìn)治療、醫(yī)治、預(yù)防或改善的 任何數(shù)量，或降低疾病或病癥的發(fā)展速度的任何數(shù)量。該術(shù)語(yǔ)在其范圍之內(nèi) 還包括有效提高正常生理機(jī)能的數(shù)量。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)"治療，，和其衍生術(shù)語(yǔ)，是指預(yù)防和治療。
本文中使用的、由符號(hào)\"表示的十字形雙鍵表示圍繞該雙鍵的Z和
/或E立體化學(xué)結(jié)構(gòu)。換句話說(shuō)，化合物A,包括化合物D，圍繞該雙鍵既 可以是Z、也可以是E立體化學(xué)結(jié)構(gòu)，或化合物A，包括化合物D，圍繞該 雙鍵還可以是Z和E立體化學(xué)結(jié)構(gòu)的混合物。另外，化合物A，包括化合物 D，可以以一種互變異構(gòu)體或互變異構(gòu)體的混合物形式存在。 一個(gè)可供選擇 的互變異構(gòu)體的例子如下所示
<formula>formula see original document page 7</formula>
本發(fā)明包括所有可能的互變異構(gòu)體。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)"共同給藥，，和其派生詞，是指同時(shí)給藥或以任何方式 的分開的順序給藥化合物A、和已知可用于治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病特別
是貧血的其它一種或多種活性組分，包括EPO或其衍生物。本文中使用的 術(shù)語(yǔ)"共同給藥"和其派生詞，合適地是指同時(shí)給藥或以任何方式的分開的順 序給藥化合物D,和已知可用于治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病，特別是貧血的 其它一種或多種活性組分，包括EPO或其衍生物。本文中使用的術(shù)語(yǔ)其它 一種或多種活性組分包括任何已知的、或當(dāng)給藥需要治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng) 疾病特別是貧血的患者時(shí)顯示有利性能的化合物或治療劑。優(yōu)選，如果不同 時(shí)給藥，在相互接近的時(shí)間范圍內(nèi)給藥化合物。此外，即使在相同劑型中給 藥化合物也不要緊，例如可以局部給藥一種化合物，另一種化合物可以口服 給藥。
因?yàn)楸景l(fā)明的新化合物作為hYAK3抑制劑是活性的，它們?cè)诩t細(xì)胞和 造血系統(tǒng)疾病的治療中顯示了治療性用途，紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病包括但不 局限于由于腎機(jī)能不全或慢性病例如自身免疫、HIV或肺瘤造成的貧血，以 及藥物引起的貧血，骨髓增生異常綜合征，再生障礙性貧血，骨髓抑制和細(xì) 胞減少癥。
化合物A，包括化合物D，可用于治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)的疾病，特別 是貧血。這種貧血包括選自下列的貧血再生障礙性貧血和骨髓增生異常綜 合征。這種貧血還包括其中貧血是選自腫瘤、白血病和淋巴瘤的原發(fā)性病導(dǎo) 致的那些貧血。這種貧血還包括其中貧血是選自腎病、衰竭或傷害的原發(fā)性 病導(dǎo)致的那些貧血。這種貧血包括其中貧血是化療或放射治療所導(dǎo)致的那些 貧血，特別是其中化療是用于癌癥治療或HIV感染的AZT治療的化療。這 種貧血還包括其中貧血是骨髓移植或干細(xì)胞移植導(dǎo)致的那些貧血。這種貧血 還包括新生兒的貧血。這種貧血還包括病毒、真菌、微生物或寄生蟲感染導(dǎo) 致的那些貧血。
化合物A,包括化合物D,還可用于提高正常紅細(xì)胞數(shù)量。對(duì)于許多目 的、特別是醫(yī)學(xué)目的來(lái)說(shuō)，這種提高是理想的，例如作為輸血患者的制劑和 手術(shù)患者的制劑。
化合物A,包括化合物D,利用已知的方法例如描述在國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT /US2003 / 037658中的那些方法來(lái)測(cè)試其抑制hYAK3激酶的能力。
當(dāng)在hYAK3激酶抑制作用的體外試驗(yàn)中測(cè)試時(shí)，游離酸形式和葡曱胺
鹽形式的化合物A顯示了與化合物B(本文中描述的)和化合物C(本文中描述 的)相似的活性。
本發(fā)明的藥學(xué)活性化合物適合在需要的人類中用作hYAK3抑制劑。
本發(fā)明因此提供了治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病特別是貧血及其它需要 hYAK3抑制的病癥的方法，該方法包括給藥有效量的化合物A?；衔顰 還提供了治療上述疾病狀態(tài)的方法，這是因?yàn)槠渥鳛閔YAK3抑制劑的能力。 可以將藥物通過(guò)常規(guī)給藥途徑給藥需要的患者，給藥途徑包括但不限于靜脈 內(nèi)、肌肉內(nèi)、口服、皮下、皮內(nèi)和腸胃外給藥。
本發(fā)明因此提供了治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病特別是貧血及其它需要 hYAK3抑制的病癥的方法，該方法包括給藥有效量的化合物D。化合物D 還提供了治療上述疾病狀態(tài)的方法，這是因?yàn)槠渥鳛閔YAK3抑制劑的能力。 可以將藥物通過(guò)常規(guī)給藥途徑給藥需要的患者，給藥途徑包括但不限于靜脈 內(nèi)、肌肉內(nèi)、口服、皮下、皮內(nèi)和腸胃外給藥。
本發(fā)明的藥學(xué)活性化合物可以加到合適的劑型中，例如膠嚢、片劑或可 注射的制劑。使用固體或液體藥學(xué)載體。固體載體包括淀粉，乳糖，硫酸鈣 二水合物，石膏粉，蔗糖，滑石，凝膠，瓊脂，果膠，阿拉伯膠，硬脂酸鎂， 和硬脂酸。液體載體包括糖漿，花生油，橄欖油，生理鹽水，和水。類似地， 載體或稀釋劑可以包括任何延期釋放物質(zhì)，例如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸 甘油酯，單獨(dú)或與石蠟混合。固體載體的量會(huì)在很大程度上改變，但每劑量 單位合適地從約25毫克至大約1克。當(dāng)使用液體載體時(shí)，制劑可以是糖漿 劑、酏劑、乳劑、軟膠嚢、無(wú)菌可注射液體例如安瓿劑或水或非水液體懸浮 液的形式。
按照藥物化學(xué)的通用方法來(lái)制備藥物制劑，包括混合、造粒和擠壓，必 要時(shí)，制成片劑形式，或視情況，將組分混合、填充和溶解，得到所需要的 口服或腸胃外產(chǎn)品。
本發(fā)明化合物A、包括化合物D在如上所述藥學(xué)劑量單位中的劑量，是 有效的、無(wú)毒的數(shù)量，合適地選自0.001-100毫克/千克總體重的范圍，合適 地是0.001-50毫克/千克。當(dāng)治療需要hYAK3抑制作用的人患者時(shí)，所選擇 的劑量每天合適地給藥l-6次，口服或胃腸外給藥。優(yōu)選的腸胃外給藥形式 包括局部、直腸、透皮、注射和連續(xù)輸液的給藥形式。對(duì)于人類給藥的口服 劑量單位，合適地含有從0.05至3500毫克化合物A或化合物D，合適地從
0.5至l，OOO毫克化合物A或化合物D。優(yōu)選使用較低劑量的口服給藥。然
而，當(dāng)患者安全和方便時(shí)，還可以使用高劑量的腸胃外給藥。上述劑量涉及
游離酸形式的化合物A和化合物D的優(yōu)選數(shù)量。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以判明，化合物A或化合物D的單獨(dú)劑量的最佳數(shù)
量和時(shí)間間隔，可以由所治療病癥的性質(zhì)和程度、纟會(huì)藥的形式、途徑和位點(diǎn)、
和所治療的具體患者來(lái)確定，并且這種最佳可以通過(guò)常規(guī)方法確定。本領(lǐng)域
技術(shù)人員還會(huì)理解，最佳療程(即每天給藥一定劑量的化合物A或化合物D，
給藥指定的天數(shù))可以使用常規(guī)的療程測(cè)定試驗(yàn)由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。 合適地在人中引起hYAK3抑制活性的本發(fā)明方法，包括給藥需要這種
活性的患者有效hYAK3抑制數(shù)量的化合物A。
合適地在人中引起hYAK3抑制活性的本發(fā)明方法，包括給藥需要這種
活性的患者有效hYAK3抑制數(shù)量的化合物D。
本發(fā)明還提供了化合物A在制備用作hYAK3抑制劑的藥物中的用途。 本發(fā)明還提供了化合物D在制備用作hYAK3抑制劑的藥物中的用途。 本發(fā)明還提供了化合物A在制備用于治療的藥物中的用途。 本發(fā)明還提供了化合物D在制備用于治療的藥物中的用途。 本發(fā)明還提供了化合物A在制備用于治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病特別
是貧血的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了化合物D在制備用于治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病特別
是貧血的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了用作hYAK3抑制劑的藥物組合物，其包括化合物A和
藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明還提供了用作hYAK3抑制劑的藥物組合物，其包括化合物D和
藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明還提供了用于治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病特別是貧血的藥物組
合物，其包括化合物A和藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明還提供了用于治療紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病特別是貧血的藥物組
合物，其包括化合物D和藥學(xué)上可接受的載體。
按照本發(fā)明，當(dāng)給藥本發(fā)明化合物時(shí)，希望沒(méi)有不能接受的毒理學(xué)效果。 此外，本發(fā)明的藥學(xué)活性化合物可以與其它活性組分，例如已知治療紅
細(xì)胞和造血系統(tǒng)疾病特別是貧血的其它化合物，或與已知在與hYAK3抑制 劑組合使用時(shí)具有實(shí)用性的化合物共同給藥。
不用進(jìn)一步鉆研，人們相信，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以利用前面的描述，將 本發(fā)明應(yīng)用至最完善的程度。因此，應(yīng)該僅僅將下列實(shí)施例理解為說(shuō)明性的， 其無(wú)論如何不能限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1
(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-l,3-噻唑-4(5H)-酮鈉
鹽的制備
a) 6-曱基喹喔啉。將3，4-二氨基曱苯(50.0克；0.409摩爾)和乙二醛(40% 水溶液；52.0毫升；0.450摩爾)的水(150毫升)和CH3CN(20.0毫升)懸浮液加 熱至60°C,保持1小時(shí)。然后中止加熱，加入鹽水(IOO毫升)。將溶液用 EtOAc(3xl50毫升)萃取，并將合并的有機(jī)層用MgS04干燥，過(guò)濾，真空濃 縮。通過(guò)減壓蒸餾純化(120。C, 10 torr)，得到6-曱基喹喔啉(48.0克，81%) 清澈的無(wú)色油。1H畫R(400 MHz, CDC13) $ ppm 2.61(s， 3 H)7.61(dd, /=8.59, 1.77 Hz, 1 H)7.88(s， 1 H)8.00(d， _/=8.59 Hz， 1 H)8.79(dd， J:9.85, 1.77 Hz, 2 H)MS(ES+)m/e 145[M+H]+。
b) 會(huì)喔啉-6-曱醛.將6-曱基喹喔啉(8.0克；0.055摩爾)和二氧化硒(6.77 克；0.0W摩爾)的1,4-二哺烷(5.0毫升)懸浮液在Biotage Initiator微波合成器 中，在20(TC照射30分鐘。進(jìn)一步重復(fù)上述過(guò)程5次，并合并，將冷卻的反 應(yīng)混合物溶于CH2Cl2t,通過(guò)塞力特硅藻土填料(plug ofcelite)過(guò)濾，真空 濃縮。通過(guò)快速柱色i普(硅膠，20-50%乙酸乙酯/己烷)純化，而后用CH2C12 結(jié)晶，得到喹喔啉-6-曱醛(40.0克，91%)白色固體。 NMR(400 MHz, CDC13) $ ppm 10.25(s， 1 H)8.95(s， 2 H)8.57(d,聲1.3 Hz, 1 H)8.24(dd， /=8.6, 1.5
Hz, 1 H)8.20(d,聲8.6 Hz, 1 H)。 MS(ES+)m/e 159[M+H]+。
c) 2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-l,3-噻唑-4(5H)-酮。將N-(2,6-二氯苯基)硫脲 (103.7克;0.469摩爾)和氯乙酸(48.8克；0.516摩爾)的冰醋酸(600毫升)懸浮 液攪拌并加熱回流2小時(shí)。將攪拌的混合物冷卻至40。C,然后用水(l L)逐滴 處理，在此期間，形成淺黃色沉淀。然后將懸浮液過(guò)濾，用水(l升)洗滌沉 淀，得到標(biāo)題化合物(94.0克；79%)黃色固體。& NMR (400 MHz， DMSO-d6)5 ppm 4.10(s, 2 H)7.14(t, /=8.08 Hz， 1 H)7.49(d，風(fēng)08 Hz, 2 H)12.23(s, 1 H)。
d) (5Z)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-l,3-噻唑-4(5H)-酮。將2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-l，3-噻唑-4(5H)-酮(4.95克；0.019摩爾)、喹喔 啉-6-曱醛(3.00克；0.019摩爾)和哌啶(1.88毫升；0.019摩爾)的乙醇(IO.O毫 升)懸浮液攪拌，并在Biotage Initiator微波合成器中、在15(TC照射30分鐘。 將上述步驟進(jìn)一步重復(fù)七次，合并，將冷卻的反應(yīng)混合物傾倒入水(500毫升) 中，用1MHC1水溶液(100毫升)酸化。將得到的懸浮液過(guò)濾，用水和MeOH 洗滌，真空干燥，得到(52)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-1,3-p塞唑-4(5H)-酮(47.0克，88%)暗褐色粉末。1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)S ppm 13.11(s, 1 H)8.97(s, 2 H)8.20(s, 1 H)8.17(d,盧8.6 Hz， 1 H)謹(jǐn)(s， 1 H)7.96(dd, 7=8.7, 1.6 Hz, 1 H)7.58(d,聲8.1 Hz, 2 H)7.25(t，風(fēng)l Hz, 1 H)。 MS(ES+)m/e 401[M+H]+。
e) (5Z)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-l,3-噻唑-4(5H)-酮， 鈉鹽，1.75 H20。將(5Z)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-5-(6-喹喔啉基亞甲基)-1，3-p塞唑-4(5H)-酮(30.7克；0.076摩爾)的水(500毫升)懸浮液攪拌，并用1MNaOH 水溶液(82.0毫升；1.08當(dāng)量)逐滴處理。然后攪拌混合物，回流加熱，隨后 加入乙醇(IOO毫升)，直到完全溶解為止。將溶液慢慢地冷卻至室溫( 4小 時(shí))，過(guò)濾，得到(5Z)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-l，3-噻唑 -4(5H)-酮，鈉鹽，1.75水合物(27.1克)，黃色針狀物。Mp. 250-255 。C(寬)。 實(shí)測(cè)值％C， 47.19; %H， 2.62; %N, 12.05; %Na, 5.06。 C18H9Cl2N4OSNa 1.75 H20理論值％C, 47.52; %H, 2.75; %N, 12.32; %Na， 5.07。
實(shí)施例2
(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-l,3-噻唑-4(5H)-酮葡 曱胺一水合物的制備
將(5Z)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-l,3-噻唑-4(5H)-酮 (10.5毫克；0.0262 mmol)的乙腈(225微升)懸浮液加熱至50°C,并用1M葡 曱胺水溶液(28.8微升；1.1當(dāng)量)處理。將混合物在50。C保持大約兩小時(shí)， 然后冷卻至室溫，再攪拌兩小時(shí)。過(guò)濾并在5(TC真空干燥，得到(5Z)-2-[(2,6-二氯笨基)氨基]-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-l，3-噻唑-4(5H)-S同，葡曱胺鹽，大約 1.0當(dāng)量的水(7.9毫克)。
化合物D的差示掃描量熱(DSC)數(shù)據(jù)顯示兩個(gè)吸熱現(xiàn)象； 一個(gè)在大約 54°C，第二個(gè)在158°C。
紅外光語(yǔ)提供于本文所附的圖1中。
實(shí)施例3
(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-l，3-噻唑-4(5H)-酮葡 甲胺一水合物的制備
將(5Z)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-l，3-噻唑-4(5H)-酮 (5.07克；12.64毫摩爾)的乙腈(IOI毫升)懸浮液加熱至50°C。加入晶種(可 以如實(shí)施例2所述制備晶種)，并將混合物慢慢地用1M葡曱胺水溶液(13.3 毫升；1.05當(dāng)量)處理。將混合物在5(TC保持大約兩小時(shí)，然后冷卻至室溫， 再攪拌兩個(gè)小時(shí)。過(guò)濾，在5(TC真空干燥,得到(5Z)-2-[(2，6-二氯苯基)氨 基]-5-(6-喹喔啉基亞甲基)-l,3-噻唑-4(5H)-S同，葡曱胺鹽，大約1.0當(dāng)量的水 (6.78克)。
實(shí)測(cè)值％C, 48.72; %H， 4.61; %N, 11.30. C18H10Cl2N4OS.C7H17NO5.H2O 理論值％C, 48.86; %H, 4.76; %N, 11.40。
化合物D的差示掃描量熱(DSC)數(shù)據(jù)顯示三個(gè)吸熱現(xiàn)象； 一個(gè)在大約 54°C，第二個(gè)在大約10rC,第三個(gè)在大約160。C。
紅外光鐠提供于本文所附的圖2中。
實(shí)施例4
制備本發(fā)明化合物的另 一種方法 方法圖解
<formula>formula see original document page 14</formula>化合物d
方法描述 步驟1A
在大約95°C ，將化合物(i)在醋酸與氯乙酸中加熱。將混合物冷卻至70°C ， 用水稀釋，并進(jìn)一步冷卻至25。C。濾出產(chǎn)品化合物(ii)，用水洗滌，在40。C 真空干燥。
步驟1
在 75。C，將化合物(iii)在乙醇和醋酸中與乙二醛一起加熱。將得到的
懸浮液冷卻到5。C,過(guò)濾。將得到的化合物(iv)濕濾餅用冷乙醇洗滌，在5(TC 真空干燥。
步驟2
在THF中，在0。C,將化合物(iv)以懸浮液形式攪拌，并用氯曱酸異丁 酯而后用N-乙基嗎啉處理。向得到的懸浮液中加入N，O-二曱基羥基胺鹽酸 化物。將懸浮液進(jìn)行部分濃縮，用乙酸乙酯稀釋。將得到的有機(jī)溶液用碳酸 氬鈉水溶液和氯化鈉水溶液洗滌，部分濃縮，用庚烷稀釋，再次部分濃縮。 將得到的懸浮液冷卻至0。C,過(guò)濾，用冷庚烷洗滌，在5(TC真空干燥。
步驟3
在大約-l(TC ,將化合物(vi)的THF溶液用DIBAL-H的曱苯溶液處理。 將混合物在鹽酸水溶液中猝滅，并升溫至2(TC。將混合物用鹽水稀釋。除去 水相，并用乙酸乙酯反萃取。將合并的有機(jī)物用鹽水洗滌，部分濃縮，用庚 烷稀釋，再次部分蒸餾，用庚烷稀釋，冷卻，過(guò)濾。將得到的化合物(vii)濕 濾餅用庚烷洗滌，在5(TC真空干燥。
步驟4 /歩驟5
將化合物(ii)、化合物(vii)和哌啶回流 48小時(shí)，并將得到的混合物冷卻 至1(TC。將得到的固體過(guò)濾，用乙醇洗滌固體化合物(viii)。使中間體產(chǎn)物在 乙醇中成漿，并在20。C用鹽酸水溶液處理。將得到的懸浮液過(guò)濾，用乙醇、 水洗滌，并再次用乙醇洗滌。將化合物A(游離酸形式)濕濾餅在5(TC、在真
空條件下干燥。
步驟6
將化合物A(l.O當(dāng)量)(游離酸形式)在室溫下懸浮在20體積的乙腈中。 將反應(yīng)混合物在45分鐘之內(nèi)加熱至Ti=50°C 。在50°C ，加入0.005當(dāng)量的晶 種(可以如實(shí)施例2所述制備晶種)。加入溶于2.6體積水中的1.05當(dāng)量N-甲基-D-葡糖胺(葡甲胺)。加入之后，在50。C繼續(xù)攪拌額外的兩個(gè)小時(shí)。將 反應(yīng)混合物在60分鐘之內(nèi)冷卻至5°C,并在5。C繼續(xù)攪拌額外的30分鐘。 過(guò)濾懸浮液，用5體積5%水/異丙醇洗滌兩次。然后將固體在35。C減壓
(￡100-50 mbar)干燥，定時(shí)地監(jiān)測(cè)水含量，直到水含量<4% KF為止(注釋~ 2.9%是理論水合物)。得到化合物D。
在烘箱中，在5(TC,通過(guò)將化合物D的水合形式干燥，制備化合物D 的無(wú)水形式。
實(shí)施例6 相對(duì)溶解性
將化合物A的鈉鹽(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨 基]-l,3-嗜唑-4(5H)-酮鈉鹽的溶解性與被認(rèn)為是在國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT / US2003 / 037658中制備的兩個(gè)最緊密相關(guān)化合物相比。第一個(gè)是國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT / US2003 / 037658中的實(shí)施例23化合物的鈉鹽2-(2，6-二氯-苯基亞氨基)-5-(喹 啉-6-基亞甲基)-瘞唑烷-4-酮鈉鹽，在下文(化合物B)。
第二個(gè)是國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/US2003 / 037658中的實(shí)施例26化合物的鈉 鹽2-(2-氯-苯基亞氨基)-5-(喹喔啉-6-基亞曱基)-噻唑烷-4-酮鈉鹽，在下文(化 合物C)。
如國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT / US2003 / 037658所述，可以制備化合物B和C。 通 過(guò)本領(lǐng)域眾所周知的方法例如上述實(shí)施例le)描述的方法，制備這些化合物 的鈉鹽。
如下測(cè)定每個(gè)化合物的溶解性每個(gè)化合物制備兩個(gè)樣品。 一個(gè)(標(biāo)準(zhǔn) 樣品)在水/有機(jī)混合溶劑混合物中含有20 uM固定濃度的化合物。另一個(gè)(試
實(shí)施例
驗(yàn)樣品)在pH值7.4的0.05M磷酸鹽緩沖液中含有200 uM最大總濃度的化 合物。將試驗(yàn)樣品旋轉(zhuǎn)15分鐘，除去任何未溶解的固體。對(duì)這些樣品進(jìn)行 HPLC分析。相對(duì)峰面積用于計(jì)算溶解度。使用每個(gè)化合物的鈉鹽進(jìn)行對(duì)比。 數(shù)據(jù)概括在下面的表1中。
__
溶劑 化合物A，Na化合物B'Na 化合物C *Na
在25'C的溶解度 mg/ml_mg/ml_mg/ml
水pH7.4(uM) 31 6 0
實(shí)施例7 生物利用率
通過(guò)經(jīng)口灌服(oralgavage)法，將在含有50% PEG-400、 10%乙醇、40% / 40%(w/v)Encapsin水溶液的制劑中的化合物A的鈉鹽喂食到雄性 Sprague-Dawley大鼠中，劑量是1和4毫克/千克(每千克16毫升劑量溶液) 之間。在下列時(shí)間間隔處將血液(120微升)取樣0， 20, 40, 60, 120， 180， 240， 360， 480和1440分鐘。通過(guò)這些樣品的等分試樣(25微升血液+ 25微 升水)的LC/MS/Ms分析，確定化合物A的濃度，用濃度對(duì)時(shí)間曲線圖的 曲線下的劑量歸一化面積(DNAUC)報(bào)道總的血液接觸量(blood exposure),并 用單位微克小時(shí)每毫升每分鐘每千克(ug.h / mL / mg / kg)表示。通過(guò)相同方 法確定化合物B的鈉鹽和化合物C的鈉鹽的口接觸量(oral exposure)。
數(shù)據(jù)概括在下面的表2中。 _^_
劑量(~ l_4mg/kg)化合物A'Na化合物B *Na 化合物C Na 口服的DNAUC大鼠 mg/ml mg/ml mg/ml
(Sprague-Dawley)_
(ug,h/mL/min/kg) 1.02 0.49 0.34
本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括藥物組合物，該藥物組合物包括作為活性組分的 (5Z)-5-(6-喹喔啉基亞甲基)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基H，3-噻唑-4(5H)-酮和/或其 藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前體藥物以及藥學(xué)上可接受的載體
或稀釋劑。本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括藥物組合物，該藥物組合物包括作為活性 組分的化合物D和/或其藥學(xué)上可接受的水合物和溶劑化物以及藥學(xué)上可接 受的載體或稀釋劑。本發(fā)明的化合物可以通過(guò)口服或腸胃外的給藥途徑進(jìn)行 給藥，并且可以適合于每個(gè)給藥途徑的劑型配制，包括膠嚢、片劑、丸劑、 散劑和顆粒劑。在這種固體劑型中，將活性組分與至少一種惰性稀釋劑混合。 按照正常實(shí)踐，口服劑型還可以包括除惰性稀釋劑外的其它物質(zhì)，例如潤(rùn)滑 劑、助流劑和抗氧化劑。就膠嚢、片劑和丸劑而言，劑型也可以包括緩沖劑。 可以將片劑和丸劑另外制備為持續(xù)釋放劑型。
按照本發(fā)明的腸胃外給藥制劑包括無(wú)菌水溶液，但可以使用乳劑的非水 懸浮液。這種劑型還可以含有助劑，例如防腐劑、濕潤(rùn)劑、滲透劑、緩沖劑、
乳化劑和分散劑。可以將它們消毒，例如，通過(guò)保留細(xì)菌的過(guò)濾器(bacteria retaining filter)進(jìn)行過(guò)濾，或?qū)缇鷦┮虢M合物中，照射組合物或?qū)⒔M合物 力口熱。
下列實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明特征的藥物組合物。
實(shí)施例8 片劑組合物
將乳糖、微晶纖維素、淀粉羥基乙酸鈉、硬脂酸鎂和(5Z)-5-(6-喹喔啉基 亞曱基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-l，3-噻唑-4(5H)-酮按照示于下面表3中的比
例進(jìn)行混合。然后將混合物壓制成片劑。
表3
_成分_mg.
(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2，6-二氯苯基) 8 氨基]-l，3-噻唑-4(5H)-酉同
微晶纖維素 112
乳糖 70
淀粉羥基乙酸鈉 8
硬脂酸鎂 2
實(shí)施例9
腸胃外可注射組合物
(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-l,3-噻唑-4(5H)-酮葡 曱胺的可注射給藥形式是通過(guò)將5.0毫克化合物在1.0毫升生理鹽水中攪拌 來(lái)制備的。
實(shí)施例10 膠嚢組合物
的兩部分石更月交囊(two piece hard gelatin capsule)來(lái)制備的。
盡管通過(guò)上述說(shuō)明了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，但應(yīng)該理解，本發(fā)明不 局限于本文公開的精確說(shuō)明，還保留下列權(quán)利要求范圍內(nèi)的所有改進(jìn)的權(quán)利。
數(shù)量
(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨 基]-l,3-噻唑-4(5H)-酮葡曱胺
乳糖
滑石粉
硬脂酸鎂
"mg
55 mg 16 mg 4mg
權(quán)利要求
1.化合物(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞甲基)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-1，3-噻唑-4(5H)-酮。
2. 權(quán)利要求1化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前體藥物。
3. 化合物(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞曱基)-2-[(2,6-二氯苯基)氨基]-l,3-噻唑 -4(5H)-酮葡曱胺。
4. 權(quán)利要求3化合物的藥學(xué)上可接受的水合物和溶劑化物。
5. 權(quán)利要求1化合物的一鈉鹽。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5的一鈉鹽的水合物形式。
7. 權(quán)利要求6的化合物，其中水合物含有小于5.25溶劑化的水。
8. 藥物組合物，包括權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
9. 藥物組合物，包括權(quán)利要求1化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、 溶劑化物或前體藥物以及藥學(xué)上可接受的載體。
10. 根據(jù)權(quán)利要求3的化合物的水合物形式。
11. 權(quán)利要求IO的化合物，其中水合物是一水合物。
12. 權(quán)利要求11的化合物，其中水合物含有1加或減10%的溶劑化的水。
13. 權(quán)利要求11的化合物，其中水合物含有小于1的溶劑化的水。
14. 權(quán)利要求3化合物的非7K合物形式。
15. 藥物組合物，包括權(quán)利要求3的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
16. 藥物組合物，包括權(quán)利要求3化合物的藥學(xué)上可接受的水合物和溶劑 化物以及藥學(xué)上可接受的載體。
17. 藥物組合物，包括權(quán)利要求4的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
18. 制備包含藥學(xué)上可接受載體或稀釋劑和有效量的權(quán)利要求1化合物 的藥物組合物的方法，該方法包括將權(quán)利要求1的化合物與藥學(xué)上可接受的 載體或稀釋劑混合。
19. 制備包含藥學(xué)上可接受載體或稀釋劑和有效量的權(quán)利要求1化合物 的藥學(xué)上可接受鹽、水合物、溶劑化物和/或前體藥物的藥物組合物的方法， 該方法包括將權(quán)利要求1化合物的藥學(xué)上可接受鹽、水合物、溶劑化物和/ 或前體藥物與藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑混合。
20. 制備包含藥學(xué)上可接受載體或稀釋劑和有效量的權(quán)利要求3化合物的藥物組合物的方法，該方法包括將權(quán)利要求3的化合物與藥學(xué)上可接受的 載體或稀釋劑混合。
21. 制備包含藥學(xué)上可接受載體或稀釋劑和有效量的權(quán)利要求3化合物 的藥學(xué)上可接受水合物、溶劑化物和/或前體藥物的藥物組合物的方法，該方 法包括將權(quán)利要求3化合物的藥學(xué)上可接受水合物、溶劑化物和/或前體藥物 與藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑混合。
22. 抑制患者中hYAK3的方法；包括給藥患者治療有效量的權(quán)利要求1 的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前體藥物。
23. 權(quán)利要求22的方法，其中患者是人。
24. 抑制患者中hYAK3的方法；包括給藥患者治療有效量的權(quán)利要求3 的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的水合物和溶劑化物。
25. 權(quán)利要求24的方法，其中患者是人。
26. 治療或預(yù)防造血細(xì)胞缺乏，特別是治療紅細(xì)胞缺乏的方法，該方法包 括給藥患者治療有效量的權(quán)利要求1化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合 物、溶劑化物和前體藥物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑和賦 形劑。
27. 權(quán)利要求26的方法，其中紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)的缺乏選自貧血、再生 障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征、骨髓抑制和細(xì)胞減少癥。
28. 治療或預(yù)防造血細(xì)胞缺乏，特別是治療紅細(xì)胞缺乏的方法，該方法包 括給藥患者治療有效量的權(quán)利要求3化合物和/或其藥學(xué)上可接受的水合物、 溶劑化物和前體藥物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑和賦形 劑。
29. 權(quán)利要求28的方法，其中紅細(xì)胞和造血系統(tǒng)的缺乏選自貧血、再生 障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征、骨髓抑制和細(xì)胞減少癥。
30. 治療或預(yù)防選自貧血、再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征、骨髓 抑制和細(xì)胞減少癥的疾病的方法，該方法包括給藥患者治療有效量的權(quán)利要 求1的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前體藥物以及 一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑和賦形劑。
31. 治療或預(yù)防選自貧血、再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合征、骨髓 抑制和細(xì)胞減少癥的疾病的方法，該方法包括給藥患者治療有效量的權(quán)利要求3的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的水合物和溶劑化物以及一種或多種藥 學(xué)上可接受的載體、稀釋劑和賦形劑。
32. 權(quán)利要求27的方法，其中患者是人。
33. 權(quán)利要求29的方法，其中患者是人。
34. 治療在需要的患者中造血系統(tǒng)缺乏的方法，該方法包括給藥該患者治 療有效量的a) 權(quán)利要求1化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前 體藥物；和b) EPO或其衍生物。
35. 治療在需要的患者中造血系統(tǒng)缺乏的方法，該方法包括給藥該患者治 療有效量的a) 權(quán)利要求3化合物和/或其藥學(xué)上可接受的水合物和溶劑化物；和b) EPO或其衍生物。
36. 結(jié)晶形式的權(quán)利要求3的化合物。
37. 權(quán)利要求36的化合物，其具有圖3的IR光譜。
全文摘要
本發(fā)明是化合物(5Z)-5-(6-喹喔啉基亞甲基)-2-[(2，6-二氯苯基)氨基]-1，3-噻唑-4(5H)-酮，和/或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前體藥物。本發(fā)明還是含有該化合物的藥物組合物，制備該化合物和其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和前體藥物的方法。本發(fā)明還是該化合物作為hYAK3蛋白質(zhì)抑制劑的使用方法。
文檔編號(hào)C07D217/00GK101193863SQ200680020617
公開日2008年6月4日 申請(qǐng)日期2006年6月8日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月8日
發(fā)明者凱文·J·達(dá)菲, 杜克·M·菲奇, 貝絲·A·諾頓 申請(qǐng)人:史密絲克萊恩比徹姆公司